药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法

摘要

本发明涉及一种药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，它包括：组装过滤系统和滤膜、滤膜的润湿、样品过滤、淋洗、耐热试管的消毒与转移、滤膜转移至耐热试管中、耐热试管的热处理、热处理后的耐热试管消毒与转移、FTM培养基的消毒与转移、FTM培养基浇制、浇制完成后耐热试管中滤膜要求、耐热试管包裹封口膜与培养步骤。按本发明的方法实施后，所有产品微生物耐热性检查中染菌率均为0，证明该改进方法在日常检验操作中大大降低了人员操作风险，提高了药品灭菌前药液微生物耐热性检查结果的准确性及可靠性。

权利要求

1.一种药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，其特征在于：该检查方法包括以下步骤：

步骤a、在无菌环境中，将滤膜过滤器与带进样针的乳胶管连接后固定在蠕动泵上，打开滤膜过滤器，将开启的滤膜过滤器盖子开口朝上放置于蠕动泵旁的专用过滤器支架上，使用无菌镊子将滤膜过滤器内的垫圈取出，放置于支架上的过滤器盖子内，再从取膜器上夹取滤膜，将滤膜格放置于滤膜过滤器内，将滤膜过滤器盖子内的垫圈加入过滤器内，盖上滤膜过滤器盖子，拧紧滤膜过滤器；

步骤b、将进样针插入淋洗液瓶中，启动蠕动泵，将蠕动泵调速，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液润湿滤膜后翻转淋洗液瓶，待乳胶管中淋洗液完全过滤结束后停泵；

步骤c、从淋洗液瓶上拔下进样针，插入样品瓶中，将样品瓶倒置于蠕动泵支架上，开启蠕动泵，调节泵速，待瓶内药液全部过滤完成后停泵；

步骤d、将进样针头插入淋洗液瓶内，开启蠕动泵，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液淋洗滤膜，淋洗过程中应边淋洗边转动过滤器，使淋洗液能完全淋洗到过滤器内部所有内壁，待淋洗液液面到达预定的刻度线时翻转淋洗液瓶，待乳胶管内淋洗液完全滤空后，停泵；

步骤e、将预先装有相应产品药液的耐热试管移入检查室，先使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒，喷洒后，再将耐热试管转移入层流台内，转移时需使用75%酒精对耐热试管进行逐支喷洒，待喷洒的酒精完全挥发后，去除耐热试管管口所包裹的封口膜，并对封口膜包裹部位进行过火消毒；

步骤f、拧开滤膜过滤器，用无菌镊子将滤膜在滤膜过滤器内对折3次，并将折叠后的滤膜呈尖头朝下转移至耐热试管内的相应产品药液中；

步骤g、将装有滤膜的耐热试管置于沸水浴中热处理，热处理时沸水浴液面要确保高于耐热试管内的产品药液液面；

步骤h、热处理完成后，将耐热试管取出冷却至室温，使用75%酒精对整架耐热试管喷洒后，将整架耐热试管移入层流台内；

步骤i、将FTM培养基移入检查室，先使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒，再将FTM培养基瓶使用75%酒精喷洒消毒后移入层流台内，待喷洒的酒精完全挥发后，使用无菌开瓶器开启FTM培养基瓶铝盖，开启后，将FTM培养基瓶口胶塞部分经本生灯外焰灼烧消毒，将无菌剪刀顶端戳入FTM培养基瓶的胶塞中挑起胶塞；

步骤j、取一支待浇制FTM培养基的耐热试管，开启耐热试管的管盖，将耐热试管的管盖开口处朝下放置于层流台内侧灭过菌的不锈钢平皿内，将开启的耐热试管管口通过火焰，将FTM培养基倒入耐热试管中，倾倒培养基时，FTM培养基瓶口不得触碰耐热试管管口；

步骤K、浇注完FTM培养基后，取放置于层流台内侧的耐热试管管盖，将管盖和耐热试管管口再次通过火焰，盖紧管盖，浇制完成后的耐热试管内的滤膜，应全部浸没在FTM培养基中，并且沉于耐热试管底部；

步骤l、将所有完成FTM培养基浇注的耐热试管，在层流台内将管口部位用封口膜缠绕包裹；

步骤m、将用封口膜封好的耐热试管移入培养室进行培养，培养后观察FTM培养基是否浑浊。

2.如权利要求1所述的药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，其特征在于：步骤b中，淋洗液的使用量为40‑60ml。

3.如权利要求1所述的药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，其特征在于：步骤d中，待淋洗液液面到达100ml刻度线时翻转淋洗液瓶。

4. 如权利要求1所述的药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，其特征在于：步骤e中，所述耐热试管内预先装有5‑15 ml相应产品药液，使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒的时间控制在10‑12分钟，且每次移入的耐热试管数量不得大于3支。

5.如权利要求1所述的药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，其特征在于：步骤g中，热处理时间控制在10‑20分钟。

6.如权利要求1所述的药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，其特征在于：步骤i中，使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒的时间控制在10‑12分钟，无菌剪刀戳入FTM培养基瓶的胶塞中的长度应小于3cm。

7.如权利要求1所述的药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，其特征在于：步骤j中，倒入耐热试管中的FTM培养基为60‑80ml。

8.如权利要求1所述的药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，其特征在于：步骤m中，将用封口膜封好的耐热试管移入30‑35℃培养室进行培养。

说明书

药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种医药行业中检验方法，具体地说是一种药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法。

背景技术

[0002] 在现有技术中，关于药品灭菌前药液微生物耐热性检查的操作方法中没有对灭菌前耐热性检验操作的细致要求，仅标明在药液过滤完成后用无菌镊子将滤膜转移至相应的耐热试管中，其中未明确滤膜的折叠方式和放置方向，故容易导致滤膜卡在耐热试管内上层，不能完全浸没在耐热试管底部的溶液中；耐热试管在FTM培养基浇制完成后，还存在耐热试管中的滤膜漂浮于耐热试管上层，未完全浸没于培养基内的情况，容易产生染菌风险。

发明内容

[0003] 本发明的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种可以降低检验过程可能引入污染菌的风险、提高检查实验准确性及可靠性的药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法。

[0004] 按照本发明提供的技术方案，所述药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，该检查方法包括以下步骤：

[0005] 步骤a、在无菌环境中，将滤膜过滤器与带进样针的乳胶管连接后固定在蠕动泵上，打开滤膜过滤器，将开启的滤膜过滤器盖子开口朝上放置于蠕动泵旁的专用过滤器支架上，使用无菌镊子将滤膜过滤器内的垫圈取出，放置于支架上的过滤器盖子内，再从取膜器上夹取滤膜，将滤膜格放置于滤膜过滤器内，将滤膜过滤器盖子内的垫圈加入过滤器内，盖上滤膜过滤器盖子，拧紧滤膜过滤器；

[0006] 步骤b、将进样针插入淋洗液瓶中，启动蠕动泵，将蠕动泵调速，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液润湿滤膜后翻转淋洗液瓶，待乳胶管中淋洗液完全过滤结束后停泵；

[0007] 步骤c、从淋洗液瓶上拔下进样针，插入样品瓶中，将样品瓶倒置于蠕动泵支架上，开启蠕动泵，调节泵速，待瓶内药液全部过滤完成后停泵；

[0008] 步骤d、将进样针头插入淋洗液瓶内，开启蠕动泵，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液淋洗滤膜，淋洗过程中应边淋洗边转动过滤器，使淋洗液能完全淋洗到过滤器内部所有内壁，待淋洗液液面到达预定的刻度线时翻转淋洗液瓶，待乳胶管内淋洗液完全滤空后，停泵；

[0009] 步骤e、将预先装有相应产品药液的耐热试管移入检查室，先使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒，喷洒后，再将耐热试管转移入层流台内，转移时需使用75%酒精对耐热试管进行逐支喷洒，待喷洒的酒精完全挥发后，去除耐热试管管口所包裹的封口膜，并对封口膜包裹部位进行过火消毒；

[0010] 步骤f、拧开滤膜过滤器，用无菌镊子将滤膜在滤膜过滤器内对折3次，并将折叠后的滤膜呈尖头朝下转移至耐热试管内的相应产品药液中；

[0011] 步骤g、将装有滤膜的耐热试管置于沸水浴中热处理，热处理时沸水浴液面要确保高于耐热试管内的产品药液液面；

[0012] 步骤h、热处理完成后，将耐热试管取出冷却至室温，使用75%酒精对整架耐热试管喷洒后，将整架耐热试管移入层流台内；

[0013] 步骤i、将FTM培养基移入检查室，先使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒，再将FTM培养基瓶使用75%酒精喷洒消毒后移入层流台内，待喷洒的酒精完全挥发后，使用无菌开瓶器开启FTM培养基瓶铝盖，开启后，将FTM培养基瓶口胶塞部分经本生灯外焰灼烧消毒，将无菌剪刀顶端戳入FTM培养基瓶的胶塞中挑起胶塞；

[0014] 步骤j、取一支待浇制FTM培养基的耐热试管，开启耐热试管的管盖，将耐热试管的管盖开口处朝下放置于层流台内侧灭过菌的不锈钢平皿内，将开启的耐热试管管口通过火焰，将FTM培养基倒入耐热试管中，倾倒培养基时，FTM培养基瓶口不得触碰耐热试管管口；

[0015] 步骤K、浇注完FTM培养基后，取放置于层流台内侧的耐热试管管盖，将管盖和耐热试管管口再次通过火焰，盖紧管盖，浇制完成后的耐热试管内的滤膜，应全部浸没在FTM培养基中，并且沉于耐热试管底部；

[0016] 步骤l、将所有完成FTM培养基浇注的耐热试管，在层流台内将管口部位用封口膜缠绕包裹；

[0017] 步骤m、将用封口膜封好的耐热试管移入培养室进行培养，培养后观察FTM培养基是否浑浊。

[0018] 作为优选，步骤b中，淋洗液的使用量为40‑60ml。

[0019] 作为优选，步骤d中，待淋洗液液面到达100ml刻度线时翻转淋洗液瓶。

[0020] 作为优选，步骤e中，所述耐热试管内预先装有5‑15 ml相应产品药液，使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒的时间控制在10‑12分钟，且每次移入的耐热试管数量不得大于3支。

[0021] 作为优选，步骤g中，热处理时间控制在10‑20分钟。

[0022] 作为优选，步骤i中，使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒的时间控制在10‑12分钟，无菌剪刀戳入FTM培养基瓶的胶塞中的长度应小于3cm。

[0023] 作为优选，步骤j中，倒入耐热试管中的FTM培养基为60‑80ml。

[0024] 作为优选，步骤m中，将用封口膜封好的耐热试管移入30‑35℃培养室进行培养。

[0025] 本发明具有以下优点：

[0026] 1、本发明明确标明滤膜的折叠方式和放置方向，折叠后的滤膜放入耐热试管后，不需要使用震荡试管的方式，就能将滤膜很顺利的放入耐热试管底部溶液中，降低了操作中染菌的风险；

[0027] 2、本发明明确无菌剪刀戳入长度小于 3cm是为了避免剪刀戳入后，触碰瓶子内壁或接触到瓶内的培养基，从而产生人员操作偏差；

[0028] 3、本发明明确用封口膜包裹后的耐热试管，使管口部位呈密封状态，即使管帽松动，也可以隔绝外来因素影响，避免管内染菌情况的发生；

[0029] 4、本发明中，浇制完成的耐热试管，可以确保证管内滤膜完全浸没在FTM培养基中，可以确保产品灭菌前药液微生物耐热性检验结果的可靠性。

[0030] 5、按本发明的方法实施后，所有产品微生物耐热性检查中染菌率均为0，证明该改进方法在日常检验操作中大大降低了人员操作风险，提高了药品灭菌前药液微生物耐热性检查结果的准确性及可靠性。

具体实施方式

[0031] 下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。

[0032] 实施例1

[0033] 一种药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，待检查的药液为50%葡萄糖注射液，具体检查方法包括以下步骤：

[0034] 步骤a、在无菌环境中，将滤膜过滤器与带进样针的乳胶管连接后固定在蠕动泵上，打开滤膜过滤器，将开启的滤膜过滤器盖子开口朝上放置于蠕动泵旁的专用过滤器支架上，使用无菌镊子将滤膜过滤器内的垫圈取出，放置于支架上的过滤器盖子内，再从取膜器上夹取滤膜，将滤膜格放置于滤膜过滤器内，将滤膜过滤器盖子内的垫圈加入过滤器内，盖上滤膜过滤器盖子，拧紧滤膜过滤器；

[0035] 步骤b、将进样针插入装有pH7.0的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶中，启动蠕动泵，将蠕动泵调速，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用50ml淋洗液润湿滤膜后翻转淋洗液瓶，待乳胶管中淋洗液完全过滤结束后停泵；

[0036] 步骤c、从淋洗液瓶上拔下进样针，插入装有50%葡萄糖注射液的样品瓶中，将样品瓶倒置于蠕动泵支架上，开启蠕动泵，调节泵速，待瓶内药液全部过滤完成后停泵；

[0037] 步骤d、将进样针头插入装有pH7.0的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶内，开启蠕动泵，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液淋洗滤膜，淋洗过程中应边淋洗边转动过滤器，使淋洗液能完全淋洗到过滤器内部所有内壁，待淋洗液液面到达预定的100ml刻度线时翻转淋洗液瓶，待乳胶管内淋洗液完全滤空后，停泵；

[0038] 步骤e、将预先装有10ml的50%葡萄糖注射液的耐热试管移入检查室，先使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，喷洒后，再将耐热试管转移入层流台内，且每次移入的耐热试管数量不得大于3支，转移时需使用75%酒精对耐热试管进行逐支喷洒，待喷洒的酒精完全挥发后，去除耐热试管管口所包裹的封口膜，并对封口膜包裹部位进行过火消毒；

[0039] 步骤f、拧开滤膜过滤器，用无菌镊子将滤膜在滤膜过滤器内对折3次，并将折叠后的滤膜呈尖头朝下转移至耐热试管内的相应产品药液中；

[0040] 步骤g、将装有滤膜的耐热试管置于沸水浴中热处理15分钟，热处理时沸水浴液面要确保高于耐热试管内的产品药液液面；

[0041] 步骤h、热处理完成后，将耐热试管取出冷却至室温，使用75%酒精对整架耐热试管喷洒后，将整架耐热试管移入层流台内；

[0042] 步骤i、将FTM培养基移入检查室，先使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，再将FTM培养基瓶使用75%酒精喷洒消毒后移入层流台内，待喷洒的酒精完全挥发后，使用无菌开瓶器开启FTM培养基瓶铝盖，开启后，将FTM培养基瓶口胶塞部分经本生灯外焰灼烧消毒，将无菌剪刀顶端戳入FTM培养基瓶的胶塞中挑起胶塞，无菌剪刀戳入FTM培养基瓶的胶塞中的长度应小于3cm；

[0043] 步骤j、取一支待浇制FTM培养基的耐热试管，开启耐热试管的管盖，将耐热试管的管盖开口处朝下放置于层流台内侧灭过菌的不锈钢平皿内，将开启的耐热试管管口通过火焰，将70ml的FTM培养基倒入耐热试管中，倾倒培养基时，FTM培养基瓶口不得触碰耐热试管管口；

[0044] 步骤K、浇注完FTM培养基后，取放置于层流台内侧的耐热试管管盖，将管盖和耐热试管管口再次通过火焰，盖紧管盖，浇制完成后的耐热试管内的滤膜，应全部浸没在FTM培养基中，并且沉于耐热试管底部；

[0045] 步骤l、将所有完成FTM培养基浇注的耐热试管，在层流台内将管口部位用封口膜缠绕包裹；

[0046] 步骤m、将用封口膜封好的耐热试管移入30‑35℃的培养室培养7天，培养结束后观察带有滤膜的耐热试管里的培养基是否浑浊。如果浑浊则说明检验过程或药液有菌生长，需要进一步进行鉴定；如果没有浑浊则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0047] 按实施例1的检查方法检查75批50%葡萄糖注射液，均未发现培养结束后的FTM培养基出现浑浊，75批50%葡萄糖注射液的微生物耐热性检查中染菌率为0，则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0048] 实施例2

[0049] 一种药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，待检查的药液为20%丙氨酰谷氨酰胺注射液，具体检查方法包括以下步骤：

[0050] 步骤a、在无菌环境中，将滤膜过滤器与带进样针的乳胶管连接后固定在蠕动泵上，打开滤膜过滤器，将开启的滤膜过滤器盖子开口朝上放置于蠕动泵旁的专用过滤器支架上，使用无菌镊子将滤膜过滤器内的垫圈取出，放置于支架上的过滤器盖子内，再从取膜器上夹取滤膜，将滤膜格放置于滤膜过滤器内，将滤膜过滤器盖子内的垫圈加入过滤器内，盖上滤膜过滤器盖子，拧紧滤膜过滤器；

[0051] 步骤b、将进样针插入装有pH7.0的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶中，启动蠕动泵，将蠕动泵调速，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用50ml淋洗液润湿滤膜后翻转淋洗液瓶，待乳胶管中淋洗液完全过滤结束后停泵；

[0052] 步骤c、从淋洗液瓶上拔下进样针，插入装有20%丙氨酰谷氨酰胺注射液的样品瓶中，将样品瓶倒置于蠕动泵支架上，开启蠕动泵，调节泵速，待瓶内药液全部过滤完成后停泵；

[0053] 步骤d、将进样针头插入装有pH7.0的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶内，开启蠕动泵，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液淋洗滤膜，淋洗过程中应边淋洗边转动过滤器，使淋洗液能完全淋洗到过滤器内部所有内壁，待淋洗液液面到达预定的100ml刻度线时翻转淋洗液瓶，待乳胶管内淋洗液完全滤空后，停泵；

[0054] 步骤e、将预先装有10ml的20%丙氨酰谷氨酰胺注射液的耐热试管移入检查室，先使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，喷洒后，再将耐热试管转移入层流台内，且每次移入的耐热试管数量不得大于3支，转移时需使用75%酒精对耐热试管进行逐支喷洒，待喷洒的酒精完全挥发后，去除耐热试管管口所包裹的封口膜，并对封口膜包裹部位进行过火消毒；

[0055] 步骤f、拧开滤膜过滤器，用无菌镊子将滤膜在滤膜过滤器内对折3次，并将折叠后的滤膜呈尖头朝下转移至耐热试管内的相应产品药液中；

[0056] 步骤g、将装有滤膜的耐热试管置于沸水浴中热处理15分钟，热处理时沸水浴液面要确保高于耐热试管内的产品药液液面；

[0057] 步骤h、热处理完成后，将耐热试管取出冷却至室温，使用75%酒精对整架耐热试管喷洒后，将整架耐热试管移入层流台内；

[0058] 步骤i、将FTM培养基移入检查室，先使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，再将FTM培养基瓶使用75%酒精喷洒消毒后移入层流台内，待喷洒的酒精完全挥发后，使用无菌开瓶器开启FTM培养基瓶铝盖，开启后，将FTM培养基瓶口胶塞部分经本生灯外焰灼烧消毒，将无菌剪刀顶端戳入FTM培养基瓶的胶塞中挑起胶塞，无菌剪刀戳入FTM培养基瓶的胶塞中的长度应小于3cm；

[0059] 步骤j、取一支待浇制FTM培养基的耐热试管，开启耐热试管的管盖，将耐热试管的管盖开口处朝下放置于层流台内侧灭过菌的不锈钢平皿内，将开启的耐热试管管口通过火焰，将70ml的FTM培养基倒入耐热试管中，倾倒培养基时，FTM培养基瓶口不得触碰耐热试管管口；

[0060] 步骤K、浇注完FTM培养基后，取放置于层流台内侧的耐热试管管盖，将管盖和耐热试管管口再次通过火焰，盖紧管盖，浇制完成后的耐热试管内的滤膜，应全部浸没在FTM培养基中，并且沉于耐热试管底部；

[0061] 步骤l、将所有完成FTM培养基浇注的耐热试管，在层流台内将管口部位用封口膜缠绕包裹；

[0062] 步骤m、将用封口膜封好的耐热试管移入30‑35℃的培养室培养7天，培养结束后观察带有滤膜的耐热试管里的培养基是否浑浊。如果浑浊则说明检验过程或药液有菌生长，需要进一步进行鉴定；如果没有浑浊则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0063] 按实施例2的检查方法检查10批20%丙氨酰谷氨酰胺注射液，均未发现培养结束后的FTM培养基出现浑浊，10批20%丙氨酰谷氨酰胺注射液的微生物耐热性检查中染菌率为0，则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0064] 实施例3

[0065] 一种药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，待检查的药液为5%复方氨基酸注射液，具体检查方法包括以下步骤：

[0066] 步骤a、在无菌环境中，将滤膜过滤器与带进样针的乳胶管连接后固定在蠕动泵上，打开滤膜过滤器，将开启的滤膜过滤器盖子开口朝上放置于蠕动泵旁的专用过滤器支架上，使用无菌镊子将滤膜过滤器内的垫圈取出，放置于支架上的过滤器盖子内，再从取膜器上夹取滤膜，将滤膜格放置于滤膜过滤器内，将滤膜过滤器盖子内的垫圈加入过滤器内，盖上滤膜过滤器盖子，拧紧滤膜过滤器；

[0067] 步骤b、将进样针插入装有pH7.0的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶中，启动蠕动泵，将蠕动泵调速，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用50ml淋洗液润湿滤膜后翻转淋洗液瓶，待乳胶管中淋洗液完全过滤结束后停泵；

[0068] 步骤c、从淋洗液瓶上拔下进样针，插入装有5%复方氨基酸注射液的样品瓶中，将样品瓶倒置于蠕动泵支架上，开启蠕动泵，调节泵速，待瓶内药液全部过滤完成后停泵；

[0069] 步骤d、将进样针头插入装有pH7.0的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶内，开启蠕动泵，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液淋洗滤膜，淋洗过程中应边淋洗边转动过滤器，使淋洗液能完全淋洗到过滤器内部所有内壁，待淋洗液液面到达预定的100ml刻度线时翻转淋洗液瓶，待乳胶管内淋洗液完全滤空后，停泵；

[0070] 步骤e、将预先装有10ml的5%复方氨基酸注射液的耐热试管移入检查室，先使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，喷洒后，再将耐热试管转移入层流台内，且每次移入的耐热试管数量不得大于3支，转移时需使用75%酒精对耐热试管进行逐支喷洒，待喷洒的酒精完全挥发后，去除耐热试管管口所包裹的封口膜，并对封口膜包裹部位进行过火消毒；

[0071] 步骤f、拧开滤膜过滤器，用无菌镊子将滤膜在滤膜过滤器内对折3次，并将折叠后的滤膜呈尖头朝下转移至耐热试管内的相应产品药液中；

[0072] 步骤g、将装有滤膜的耐热试管置于沸水浴中热处理15分钟，热处理时沸水浴液面要确保高于耐热试管内的产品药液液面；

[0073] 步骤h、热处理完成后，将耐热试管取出冷却至室温，使用75%酒精对整架耐热试管喷洒后，将整架耐热试管移入层流台内；

[0074] 步骤i、将FTM培养基移入检查室，先使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，再将FTM培养基瓶使用75%酒精喷洒消毒后移入层流台内，待喷洒的酒精完全挥发后，使用无菌开瓶器开启FTM培养基瓶铝盖，开启后，将FTM培养基瓶口胶塞部分经本生灯外焰灼烧消毒，将无菌剪刀顶端戳入FTM培养基瓶的胶塞中挑起胶塞，无菌剪刀戳入FTM培养基瓶的胶塞中的长度应小于3cm；

[0075] 步骤j、取一支待浇制FTM培养基的耐热试管，开启耐热试管的管盖，将耐热试管的管盖开口处朝下放置于层流台内侧灭过菌的不锈钢平皿内，将开启的耐热试管管口通过火焰，将70ml的FTM培养基倒入耐热试管中，倾倒培养基时，FTM培养基瓶口不得触碰耐热试管管口；

[0076] 步骤K、浇注完FTM培养基后，取放置于层流台内侧的耐热试管管盖，将管盖和耐热试管管口再次通过火焰，盖紧管盖，浇制完成后的耐热试管内的滤膜，应全部浸没在FTM培养基中，并且沉于耐热试管底部；

[0077] 步骤l、将所有完成FTM培养基浇注的耐热试管，在层流台内将管口部位用封口膜缠绕包裹；

[0078] 步骤m、将用封口膜封好的耐热试管移入30‑35℃的培养室培养7天，培养结束后观察带有滤膜的耐热试管里的培养基是否浑浊。如果浑浊则说明检验过程或药液有菌生长，需要进一步进行鉴定；如果没有浑浊则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0079] 按实施例3的检查方法检查11批5%复方氨基酸注射液，均未发现培养结束后的FTM培养基出现浑浊，11批5%复方氨基酸注射液的微生物耐热性检查中染菌率为0，则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0080] 实施例4

[0081] 一种药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，待检查的药液为7%复方氨基酸注射液，具体检查方法包括以下步骤：

[0082] 步骤a、在无菌环境中，将滤膜过滤器与带进样针的乳胶管连接后固定在蠕动泵上，打开滤膜过滤器，将开启的滤膜过滤器盖子开口朝上放置于蠕动泵旁的专用过滤器支架上，使用无菌镊子将滤膜过滤器内的垫圈取出，放置于支架上的过滤器盖子内，再从取膜器上夹取滤膜，将滤膜格放置于滤膜过滤器内，将滤膜过滤器盖子内的垫圈加入过滤器内，盖上滤膜过滤器盖子，拧紧滤膜过滤器；

[0083] 步骤b、将进样针插入装有pH7.0的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶中，启动蠕动泵，将蠕动泵调速，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用50ml淋洗液润湿滤膜后翻转淋洗液瓶，待乳胶管中淋洗液完全过滤结束后停泵；

[0084] 步骤c、从淋洗液瓶上拔下进样针，插入装有7%复方氨基酸注射液的样品瓶中，将样品瓶倒置于蠕动泵支架上，开启蠕动泵，调节泵速，待瓶内药液全部过滤完成后停泵；

[0085] 步骤d、将进样针头插入装有pH7.0的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶内，开启蠕动泵，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液淋洗滤膜，淋洗过程中应边淋洗边转动过滤器，使淋洗液能完全淋洗到过滤器内部所有内壁，待淋洗液液面到达预定的100ml刻度线时翻转淋洗液瓶，待乳胶管内淋洗液完全滤空后，停泵；

[0086] 步骤e、将预先装有10ml的7%复方氨基酸注射液的耐热试管移入检查室，先使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，喷洒后，再将耐热试管转移入层流台内，且每次移入的耐热试管数量不得大于3支，转移时需使用75%酒精对耐热试管进行逐支喷洒，待喷洒的酒精完全挥发后，去除耐热试管管口所包裹的封口膜，并对封口膜包裹部位进行过火消毒；

[0087] 步骤f、拧开滤膜过滤器，用无菌镊子将滤膜在滤膜过滤器内对折3次，并将折叠后的滤膜呈尖头朝下转移至耐热试管内的相应产品药液中；

[0088] 步骤g、将装有滤膜的耐热试管置于沸水浴中热处理15分钟，热处理时沸水浴液面要确保高于耐热试管内的产品药液液面；

[0089] 步骤h、热处理完成后，将耐热试管取出冷却至室温，使用75%酒精对整架耐热试管喷洒后，将整架耐热试管移入层流台内；

[0090] 步骤i、将FTM培养基移入检查室，先使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，再将FTM培养基瓶使用75%酒精喷洒消毒后移入层流台内，待喷洒的酒精完全挥发后，使用无菌开瓶器开启FTM培养基瓶铝盖，开启后，将FTM培养基瓶口胶塞部分经本生灯外焰灼烧消毒，将无菌剪刀顶端戳入FTM培养基瓶的胶塞中挑起胶塞，无菌剪刀戳入FTM培养基瓶的胶塞中的长度应小于3cm；

[0091] 步骤j、取一支待浇制FTM培养基的耐热试管，开启耐热试管的管盖，将耐热试管的管盖开口处朝下放置于层流台内侧灭过菌的不锈钢平皿内，将开启的耐热试管管口通过火焰，将70ml的FTM培养基倒入耐热试管中，倾倒培养基时，FTM培养基瓶口不得触碰耐热试管管口；

[0092] 步骤K、浇注完FTM培养基后，取放置于层流台内侧的耐热试管管盖，将管盖和耐热试管管口再次通过火焰，盖紧管盖，浇制完成后的耐热试管内的滤膜，应全部浸没在FTM培养基中，并且沉于耐热试管底部；

[0093] 步骤l、将所有完成FTM培养基浇注的耐热试管，在层流台内将管口部位用封口膜缠绕包裹；

[0094] 步骤m、将用封口膜封好的耐热试管移入30‑35℃的培养室培养7天，培养结束后观察带有滤膜的耐热试管里的培养基是否浑浊。如果浑浊则说明检验过程或药液有菌生长，需要进一步进行鉴定；如果没有浑浊则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0095] 按实施例4的检查方法检查6批7%复方氨基酸注射液，均未发现培养结束后的FTM培养基出现浑浊，6批7%复方氨基酸注射液的微生物耐热性检查中染菌率为0，则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0096] 实施例5

[0097] 一种药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，待检查的药液为8.5%复方氨基酸注射液，具体检查方法包括以下步骤：

[0098] 步骤a、在无菌环境中，将滤膜过滤器与带进样针的乳胶管连接后固定在蠕动泵上，打开滤膜过滤器，将开启的滤膜过滤器盖子开口朝上放置于蠕动泵旁的专用过滤器支架上，使用无菌镊子将滤膜过滤器内的垫圈取出，放置于支架上的过滤器盖子内，再从取膜器上夹取滤膜，将滤膜格放置于滤膜过滤器内，将滤膜过滤器盖子内的垫圈加入过滤器内，盖上滤膜过滤器盖子，拧紧滤膜过滤器；

[0099] 步骤b、将进样针插入装有pH7.0的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶中，启动蠕动泵，将蠕动泵调速，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用50ml淋洗液润湿滤膜后翻转淋洗液瓶，待乳胶管中淋洗液完全过滤结束后停泵；

[0100] 步骤c、从淋洗液瓶上拔下进样针，插入装有8.5%复方氨基酸注射液的样品瓶中，将样品瓶倒置于蠕动泵支架上，开启蠕动泵，调节泵速，待瓶内药液全部过滤完成后停泵；

[0101] 步骤d、将进样针头插入装有pH7.0的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶内，开启蠕动泵，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液淋洗滤膜，淋洗过程中应边淋洗边转动过滤器，使淋洗液能完全淋洗到过滤器内部所有内壁，待淋洗液液面到达预定的100ml刻度线时翻转淋洗液瓶，待乳胶管内淋洗液完全滤空后，停泵；

[0102] 步骤e、将预先装有10ml的8.5%复方氨基酸注射液的耐热试管移入检查室，先使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，喷洒后，再将耐热试管转移入层流台内，且每次移入的耐热试管数量不得大于3支，转移时需使用75%酒精对耐热试管进行逐支喷洒，待喷洒的酒精完全挥发后，去除耐热试管管口所包裹的封口膜，并对封口膜包裹部位进行过火消毒；

[0103] 步骤f、拧开滤膜过滤器，用无菌镊子将滤膜在滤膜过滤器内对折3次，并将折叠后的滤膜呈尖头朝下转移至耐热试管内的相应产品药液中；

[0104] 步骤g、将装有滤膜的耐热试管置于沸水浴中热处理15分钟，热处理时沸水浴液面要确保高于耐热试管内的产品药液液面；

[0105] 步骤h、热处理完成后，将耐热试管取出冷却至室温，使用75%酒精对整架耐热试管喷洒后，将整架耐热试管移入层流台内；

[0106] 步骤i、将FTM培养基移入检查室，先使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，再将FTM培养基瓶使用75%酒精喷洒消毒后移入层流台内，待喷洒的酒精完全挥发后，使用无菌开瓶器开启FTM培养基瓶铝盖，开启后，将FTM培养基瓶口胶塞部分经本生灯外焰灼烧消毒，将无菌剪刀顶端戳入FTM培养基瓶的胶塞中挑起胶塞，无菌剪刀戳入FTM培养基瓶的胶塞中的长度应小于3cm；

[0107] 步骤j、取一支待浇制FTM培养基的耐热试管，开启耐热试管的管盖，将耐热试管的管盖开口处朝下放置于层流台内侧灭过菌的不锈钢平皿内，将开启的耐热试管管口通过火焰，将70ml的FTM培养基倒入耐热试管中，倾倒培养基时，FTM培养基瓶口不得触碰耐热试管管口；

[0108] 步骤K、浇注完FTM培养基后，取放置于层流台内侧的耐热试管管盖，将管盖和耐热试管管口再次通过火焰，盖紧管盖，浇制完成后的耐热试管内的滤膜，应全部浸没在FTM培养基中，并且沉于耐热试管底部；

[0109] 步骤l、将所有完成FTM培养基浇注的耐热试管，在层流台内将管口部位用封口膜缠绕包裹；

[0110] 步骤m、将用封口膜封好的耐热试管移入30‑35℃的培养室培养7天，培养结束后观察带有滤膜的耐热试管里的培养基是否浑浊。如果浑浊则说明检验过程或药液有菌生长，需要进一步进行鉴定；如果没有浑浊则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0111] 按实施例5的检查方法检查144批8.5%复方氨基酸注射液，均未发现培养结束后的FTM培养基出现浑浊，144批8.5%复方氨基酸注射液的微生物耐热性检查中染菌率为0，则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0112] 实施例6

[0113] 一种药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，待检查的药液为11.4%复方氨基酸注射液，具体检查方法包括以下步骤：

[0114] 步骤a、在无菌环境中，将滤膜过滤器与带进样针的乳胶管连接后固定在蠕动泵上，打开滤膜过滤器，将开启的滤膜过滤器盖子开口朝上放置于蠕动泵旁的专用过滤器支架上，使用无菌镊子将滤膜过滤器内的垫圈取出，放置于支架上的过滤器盖子内，再从取膜器上夹取滤膜，将滤膜格放置于滤膜过滤器内，将滤膜过滤器盖子内的垫圈加入过滤器内，盖上滤膜过滤器盖子，拧紧滤膜过滤器；

[0115] 步骤b、将进样针插入装有pH7.0的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶中，启动蠕动泵，将蠕动泵调速，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用50ml淋洗液润湿滤膜后翻转淋洗液瓶，待乳胶管中淋洗液完全过滤结束后停泵；

[0116] 步骤c、从淋洗液瓶上拔下进样针，插入装有11.4%复方氨基酸注射液的样品瓶中，将样品瓶倒置于蠕动泵支架上，开启蠕动泵，调节泵速，待瓶内药液全部过滤完成后停泵；

[0117] 步骤d、将进样针头插入装有pH7.0的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶内，开启蠕动泵，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液淋洗滤膜，淋洗过程中应边淋洗边转动过滤器，使淋洗液能完全淋洗到过滤器内部所有内壁，待淋洗液液面到达预定的100ml刻度线时翻转淋洗液瓶，待乳胶管内淋洗液完全滤空后，停泵；

[0118] 步骤e、将预先装有10ml的11.4%复方氨基酸注射液的耐热试管移入检查室，先使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，喷洒后，再将耐热试管转移入层流台内，且每次移入的耐热试管数量不得大于3支，转移时需使用75%酒精对耐热试管进行逐支喷洒，待喷洒的酒精完全挥发后，去除耐热试管管口所包裹的封口膜，并对封口膜包裹部位进行过火消毒；

[0119] 步骤f、拧开滤膜过滤器，用无菌镊子将滤膜在滤膜过滤器内对折3次，并将折叠后的滤膜呈尖头朝下转移至耐热试管内的相应产品药液中；

[0120] 步骤g、将装有滤膜的耐热试管置于沸水浴中热处理15分钟，热处理时沸水浴液面要确保高于耐热试管内的产品药液液面；

[0121] 步骤h、热处理完成后，将耐热试管取出冷却至室温，使用75%酒精对整架耐热试管喷洒后，将整架耐热试管移入层流台内；

[0122] 步骤i、将FTM培养基移入检查室，先使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，再将FTM培养基瓶使用75%酒精喷洒消毒后移入层流台内，待喷洒的酒精完全挥发后，使用无菌开瓶器开启FTM培养基瓶铝盖，开启后，将FTM培养基瓶口胶塞部分经本生灯外焰灼烧消毒，将无菌剪刀顶端戳入FTM培养基瓶的胶塞中挑起胶塞，无菌剪刀戳入FTM培养基瓶的胶塞中的长度应小于3cm；

[0123] 步骤j、取一支待浇制FTM培养基的耐热试管，开启耐热试管的管盖，将耐热试管的管盖开口处朝下放置于层流台内侧灭过菌的不锈钢平皿内，将开启的耐热试管管口通过火焰，将70ml的FTM培养基倒入耐热试管中，倾倒培养基时，FTM培养基瓶口不得触碰耐热试管管口；

[0124] 步骤K、浇注完FTM培养基后，取放置于层流台内侧的耐热试管管盖，将管盖和耐热试管管口再次通过火焰，盖紧管盖，浇制完成后的耐热试管内的滤膜，应全部浸没在FTM培养基中，并且沉于耐热试管底部；

[0125] 步骤l、将所有完成FTM培养基浇注的耐热试管，在层流台内将管口部位用封口膜缠绕包裹；

[0126] 步骤m、将用封口膜封好的耐热试管移入30‑35℃的培养室培养7天，培养结束后观察带有滤膜的耐热试管里的培养基是否浑浊。如果浑浊则说明检验过程或药液有菌生长，需要进一步进行鉴定；如果没有浑浊则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0127] 按实施例6的检查方法检查50批11.4%复方氨基酸注射液，均未发现培养结束后的FTM培养基出现浑浊，50批11.4%复方氨基酸注射液的微生物耐热性检查中染菌率为0，则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0128] 实施例7

[0129] 一种药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，待检查的药液为10%脂肪乳注射液，具体检查方法包括以下步骤：

[0130] 步骤a、在无菌环境中，将滤膜过滤器与带进样针的乳胶管连接后固定在蠕动泵上，打开滤膜过滤器，将开启的滤膜过滤器盖子开口朝上放置于蠕动泵旁的专用过滤器支架上，使用无菌镊子将滤膜过滤器内的垫圈取出，放置于支架上的过滤器盖子内，再从取膜器上夹取滤膜，将滤膜格放置于滤膜过滤器内，将滤膜过滤器盖子内的垫圈加入过滤器内，盖上滤膜过滤器盖子，拧紧滤膜过滤器；

[0131] 步骤b、将进样针插入装有pH7.0且含聚山梨酯80的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶中，启动蠕动泵，将蠕动泵调速，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用50ml淋洗液润湿滤膜后翻转淋洗液瓶，待乳胶管中淋洗液完全过滤结束后停泵；

[0132] 步骤c、从淋洗液瓶上拔下进样针，插入装有10%脂肪乳注射液的样品瓶中，将样品瓶倒置于蠕动泵支架上，开启蠕动泵，调节泵速，待瓶内药液全部过滤完成后停泵；

[0133] 步骤d、将进样针头插入装有pH7.0且含聚山梨酯80的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶内，开启蠕动泵，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液淋洗滤膜，淋洗过程中应边淋洗边转动过滤器，使淋洗液能完全淋洗到过滤器内部所有内壁，待淋洗液液面到达预定的100ml刻度线时翻转淋洗液瓶，待乳胶管内淋洗液完全滤空后，停泵；

[0134] 步骤e、将预先装有10ml的10%脂肪乳注射液的耐热试管移入检查室，先使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，喷洒后，再将耐热试管转移入层流台内，且每次移入的耐热试管数量不得大于3支，转移时需使用75%酒精对耐热试管进行逐支喷洒，待喷洒的酒精完全挥发后，去除耐热试管管口所包裹的封口膜，并对封口膜包裹部位进行过火消毒；

[0135] 步骤f、拧开滤膜过滤器，用无菌镊子将滤膜在滤膜过滤器内对折3次，并将折叠后的滤膜呈尖头朝下转移至耐热试管内的相应产品药液中；

[0136] 步骤g、将装有滤膜的耐热试管置于沸水浴中热处理15分钟，热处理时沸水浴液面要确保高于耐热试管内的产品药液液面；

[0137] 步骤h、热处理完成后，将耐热试管取出冷却至室温，使用75%酒精对整架耐热试管喷洒后，将整架耐热试管移入层流台内；

[0138] 步骤i、将FTM培养基移入检查室，先使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，再将FTM培养基瓶使用75%酒精喷洒消毒后移入层流台内，待喷洒的酒精完全挥发后，使用无菌开瓶器开启FTM培养基瓶铝盖，开启后，将FTM培养基瓶口胶塞部分经本生灯外焰灼烧消毒，将无菌剪刀顶端戳入FTM培养基瓶的胶塞中挑起胶塞，无菌剪刀戳入FTM培养基瓶的胶塞中的长度应小于3cm；

[0139] 步骤j、取一支待浇制FTM培养基的耐热试管，开启耐热试管的管盖，将耐热试管的管盖开口处朝下放置于层流台内侧灭过菌的不锈钢平皿内，将开启的耐热试管管口通过火焰，将70ml的FTM培养基倒入耐热试管中，倾倒培养基时，FTM培养基瓶口不得触碰耐热试管管口；

[0140] 步骤K、浇注完FTM培养基后，取放置于层流台内侧的耐热试管管盖，将管盖和耐热试管管口再次通过火焰，盖紧管盖，浇制完成后的耐热试管内的滤膜，应全部浸没在FTM培养基中，并且沉于耐热试管底部；

[0141] 步骤l、将所有完成FTM培养基浇注的耐热试管，在层流台内将管口部位用封口膜缠绕包裹；

[0142] 步骤m、将用封口膜封好的耐热试管移入30‑35℃的培养室培养8天，培养结束后观察带有滤膜的耐热试管里的培养基是否浑浊。如果浑浊则说明检验过程或药液有菌生长，需要进一步进行鉴定；如果没有浑浊则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0143] 按实施例7的检查方法检查23批10%脂肪乳注射液，均未发现培养结束后的FTM培养基出现浑浊，23批10%脂肪乳注射液的微生物耐热性检查中染菌率为0，则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0144] 实施例8

[0145] 一种药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，待检查的药液为20%脂肪乳注射液，具体检查方法包括以下步骤：

[0146] 步骤a、在无菌环境中，将滤膜过滤器与带进样针的乳胶管连接后固定在蠕动泵上，打开滤膜过滤器，将开启的滤膜过滤器盖子开口朝上放置于蠕动泵旁的专用过滤器支架上，使用无菌镊子将滤膜过滤器内的垫圈取出，放置于支架上的过滤器盖子内，再从取膜器上夹取滤膜，将滤膜格放置于滤膜过滤器内，将滤膜过滤器盖子内的垫圈加入过滤器内，盖上滤膜过滤器盖子，拧紧滤膜过滤器；

[0147] 步骤b、将进样针插入装有pH7.0且含聚山梨酯80的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶中，启动蠕动泵，将蠕动泵调速，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用50ml淋洗液润湿滤膜后翻转淋洗液瓶，待乳胶管中淋洗液完全过滤结束后停泵；

[0148] 步骤c、从淋洗液瓶上拔下进样针，插入装有20%脂肪乳注射液的样品瓶中，将样品瓶倒置于蠕动泵支架上，开启蠕动泵，调节泵速，待瓶内药液全部过滤完成后停泵；

[0149] 步骤d、将进样针头插入装有pH7.0且含聚山梨酯80的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶内，开启蠕动泵，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液淋洗滤膜，淋洗过程中应边淋洗边转动过滤器，使淋洗液能完全淋洗到过滤器内部所有内壁，待淋洗液液面到达预定的100ml刻度线时翻转淋洗液瓶，待乳胶管内淋洗液完全滤空后，停泵；

[0150] 步骤e、将预先装有10ml的20%脂肪乳注射液的耐热试管移入检查室，先使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，喷洒后，再将耐热试管转移入层流台内，且每次移入的耐热试管数量不得大于3支，转移时需使用75%酒精对耐热试管进行逐支喷洒，待喷洒的酒精完全挥发后，去除耐热试管管口所包裹的封口膜，并对封口膜包裹部位进行过火消毒；

[0151] 步骤f、拧开滤膜过滤器，用无菌镊子将滤膜在滤膜过滤器内对折3次，并将折叠后的滤膜呈尖头朝下转移至耐热试管内的相应产品药液中；

[0152] 步骤g、将装有滤膜的耐热试管置于沸水浴中热处理15分钟，热处理时沸水浴液面要确保高于耐热试管内的产品药液液面；

[0153] 步骤h、热处理完成后，将耐热试管取出冷却至室温，使用75%酒精对整架耐热试管喷洒后，将整架耐热试管移入层流台内；

[0154] 步骤i、将FTM培养基移入检查室，先使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，再将FTM培养基瓶使用75%酒精喷洒消毒后移入层流台内，待喷洒的酒精完全挥发后，使用无菌开瓶器开启FTM培养基瓶铝盖，开启后，将FTM培养基瓶口胶塞部分经本生灯外焰灼烧消毒，将无菌剪刀顶端戳入FTM培养基瓶的胶塞中挑起胶塞，无菌剪刀戳入FTM培养基瓶的胶塞中的长度应小于3cm；

[0155] 步骤j、取一支待浇制FTM培养基的耐热试管，开启耐热试管的管盖，将耐热试管的管盖开口处朝下放置于层流台内侧灭过菌的不锈钢平皿内，将开启的耐热试管管口通过火焰，将70ml的FTM培养基倒入耐热试管中，倾倒培养基时，FTM培养基瓶口不得触碰耐热试管管口；

[0156] 步骤K、浇注完FTM培养基后，取放置于层流台内侧的耐热试管管盖，将管盖和耐热试管管口再次通过火焰，盖紧管盖，浇制完成后的耐热试管内的滤膜，应全部浸没在FTM培养基中，并且沉于耐热试管底部；

[0157] 步骤l、将所有完成FTM培养基浇注的耐热试管，在层流台内将管口部位用封口膜缠绕包裹；

[0158] 步骤m、将用封口膜封好的耐热试管移入30‑35℃的培养室培养8天，培养结束后观察带有滤膜的耐热试管里的培养基是否浑浊。如果浑浊则说明检验过程或药液有菌生长，需要进一步进行鉴定；如果没有浑浊则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0159] 按实施例8的检查方法检查141批20%脂肪乳注射液，均未发现培养结束后的FTM培养基出现浑浊，141批20%脂肪乳注射液的微生物耐热性检查中染菌率为0，则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0160] 实施例9

[0161] 一种药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，待检查的药液为30%脂肪乳注射液，具体检查方法包括以下步骤：

[0162] 步骤a、在无菌环境中，将滤膜过滤器与带进样针的乳胶管连接后固定在蠕动泵上，打开滤膜过滤器，将开启的滤膜过滤器盖子开口朝上放置于蠕动泵旁的专用过滤器支架上，使用无菌镊子将滤膜过滤器内的垫圈取出，放置于支架上的过滤器盖子内，再从取膜器上夹取滤膜，将滤膜格放置于滤膜过滤器内，将滤膜过滤器盖子内的垫圈加入过滤器内，盖上滤膜过滤器盖子，拧紧滤膜过滤器；

[0163] 步骤b、将进样针插入装有pH7.0且含聚山梨酯80的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶中，启动蠕动泵，将蠕动泵调速，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用50ml淋洗液润湿滤膜后翻转淋洗液瓶，待乳胶管中淋洗液完全过滤结束后停泵；

[0164] 步骤c、从淋洗液瓶上拔下进样针，插入装有30%脂肪乳注射液的样品瓶中，将样品瓶倒置于蠕动泵支架上，开启蠕动泵，调节泵速，待瓶内药液全部过滤完成后停泵；

[0165] 步骤d、将进样针头插入装有pH7.0且含聚山梨酯80的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶内，开启蠕动泵，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液淋洗滤膜，淋洗过程中应边淋洗边转动过滤器，使淋洗液能完全淋洗到过滤器内部所有内壁，待淋洗液液面到达预定的100ml刻度线时翻转淋洗液瓶，待乳胶管内淋洗液完全滤空后，停泵；

[0166] 步骤e、将预先装有10ml的30%脂肪乳注射液的耐热试管移入检查室，先使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，喷洒后，再将耐热试管转移入层流台内，且每次移入的耐热试管数量不得大于3支，转移时需使用75%酒精对耐热试管进行逐支喷洒，待喷洒的酒精完全挥发后，去除耐热试管管口所包裹的封口膜，并对封口膜包裹部位进行过火消毒；

[0167] 步骤f、拧开滤膜过滤器，用无菌镊子将滤膜在滤膜过滤器内对折3次，并将折叠后的滤膜呈尖头朝下转移至耐热试管内的相应产品药液中；

[0168] 步骤g、将装有滤膜的耐热试管置于沸水浴中热处理15分钟，热处理时沸水浴液面要确保高于耐热试管内的产品药液液面；

[0169] 步骤h、热处理完成后，将耐热试管取出冷却至室温，使用75%酒精对整架耐热试管喷洒后，将整架耐热试管移入层流台内；

[0170] 步骤i、将FTM培养基移入检查室，先使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，再将FTM培养基瓶使用75%酒精喷洒消毒后移入层流台内，待喷洒的酒精完全挥发后，使用无菌开瓶器开启FTM培养基瓶铝盖，开启后，将FTM培养基瓶口胶塞部分经本生灯外焰灼烧消毒，将无菌剪刀顶端戳入FTM培养基瓶的胶塞中挑起胶塞，无菌剪刀戳入FTM培养基瓶的胶塞中的长度应小于3cm；

[0171] 步骤j、取一支待浇制FTM培养基的耐热试管，开启耐热试管的管盖，将耐热试管的管盖开口处朝下放置于层流台内侧灭过菌的不锈钢平皿内，将开启的耐热试管管口通过火焰，将70ml的FTM培养基倒入耐热试管中，倾倒培养基时，FTM培养基瓶口不得触碰耐热试管管口；

[0172] 步骤K、浇注完FTM培养基后，取放置于层流台内侧的耐热试管管盖，将管盖和耐热试管管口再次通过火焰，盖紧管盖，浇制完成后的耐热试管内的滤膜，应全部浸没在FTM培养基中，并且沉于耐热试管底部；

[0173] 步骤l、将所有完成FTM培养基浇注的耐热试管，在层流台内将管口部位用封口膜缠绕包裹；

[0174] 步骤m、将用封口膜封好的耐热试管移入30‑35℃的培养室培养8天，培养结束后观察带有滤膜的耐热试管里的培养基是否浑浊。如果浑浊则说明检验过程或药液有菌生长，需要进一步进行鉴定；如果没有浑浊则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0175] 按实施例9的检查方法检查22批30%脂肪乳注射液，均未发现培养结束后的FTM培养基出现浑浊，30%脂肪乳注射液的微生物耐热性检查中染菌率为0，则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0176] 实施例10

[0177] 一种药品灭菌前药液微生物耐热性检查方法，待检查的药液为脂溶性维生素注射液，具体检查方法包括以下步骤：

[0178] 步骤a、在无菌环境中，将滤膜过滤器与带进样针的乳胶管连接后固定在蠕动泵上，打开滤膜过滤器，将开启的滤膜过滤器盖子开口朝上放置于蠕动泵旁的专用过滤器支架上，使用无菌镊子将滤膜过滤器内的垫圈取出，放置于支架上的过滤器盖子内，再从取膜器上夹取滤膜，将滤膜格放置于滤膜过滤器内，将滤膜过滤器盖子内的垫圈加入过滤器内，盖上滤膜过滤器盖子，拧紧滤膜过滤器；

[0179] 步骤b、将进样针插入装有pH7.0且含聚山梨酯80的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶中，启动蠕动泵，将蠕动泵调速，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用50ml淋洗液润湿滤膜后翻转淋洗液瓶，待乳胶管中淋洗液完全过滤结束后停泵；

[0180] 步骤c、从淋洗液瓶上拔下进样针，插入装有脂溶性维生素注射液的样品瓶中，将样品瓶倒置于蠕动泵支架上，开启蠕动泵，调节泵速，待瓶内药液全部过滤完成后停泵；

[0181] 步骤d、将进样针头插入装有pH7.0且含聚山梨酯80的氯化钠蛋白胨溶液的淋洗液瓶内，开启蠕动泵，倒置淋洗液瓶，将淋洗液瓶放置于蠕动泵支架上，用淋洗液淋洗滤膜，淋洗过程中应边淋洗边转动过滤器，使淋洗液能完全淋洗到过滤器内部所有内壁，待淋洗液液面到达预定的100ml刻度线时翻转淋洗液瓶，待乳胶管内淋洗液完全滤空后，停泵；

[0182] 步骤e、将预先装有10ml的脂溶性维生素注射液的耐热试管移入检查室，先使用杀孢子剂对每架耐热试管进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，喷洒后，再将耐热试管转移入层流台内，且每次移入的耐热试管数量不得大于3支，转移时需使用75%酒精对耐热试管进行逐支喷洒，待喷洒的酒精完全挥发后，去除耐热试管管口所包裹的封口膜，并对封口膜包裹部位进行过火消毒；

[0183] 步骤f、拧开滤膜过滤器，用无菌镊子将滤膜在滤膜过滤器内对折3次，并将折叠后的滤膜呈尖头朝下转移至耐热试管内的相应产品药液中；

[0184] 步骤g、将装有滤膜的耐热试管置于沸水浴中热处理15分钟，热处理时沸水浴液面要确保高于耐热试管内的产品药液液面；

[0185] 步骤h、热处理完成后，将耐热试管取出冷却至室温，使用75%酒精对整架耐热试管喷洒后，将整架耐热试管移入层流台内；

[0186] 步骤i、将FTM培养基移入检查室，先使用杀孢子剂对FTM培养基瓶表面进行全面喷洒，喷洒的时间控制在10‑12分钟，再将FTM培养基瓶使用75%酒精喷洒消毒后移入层流台内，待喷洒的酒精完全挥发后，使用无菌开瓶器开启FTM培养基瓶铝盖，开启后，将FTM培养基瓶口胶塞部分经本生灯外焰灼烧消毒，将无菌剪刀顶端戳入FTM培养基瓶的胶塞中挑起胶塞，无菌剪刀戳入FTM培养基瓶的胶塞中的长度应小于3cm；

[0187] 步骤j、取一支待浇制FTM培养基的耐热试管，开启耐热试管的管盖，将耐热试管的管盖开口处朝下放置于层流台内侧灭过菌的不锈钢平皿内，将开启的耐热试管管口通过火焰，将70ml的FTM培养基倒入耐热试管中，倾倒培养基时，FTM培养基瓶口不得触碰耐热试管管口；

[0188] 步骤K、浇注完FTM培养基后，取放置于层流台内侧的耐热试管管盖，将管盖和耐热试管管口再次通过火焰，盖紧管盖，浇制完成后的耐热试管内的滤膜，应全部浸没在FTM培养基中，并且沉于耐热试管底部；

[0189] 步骤l、将所有完成FTM培养基浇注的耐热试管，在层流台内将管口部位用封口膜缠绕包裹；

[0190] 步骤m、将用封口膜封好的耐热试管移入30‑35℃的培养室培养8天，培养结束后观察带有滤膜的耐热试管里的FTM培养基是否浑浊。如果浑浊则说明检验过程或药液有菌生长，需要进一步进行鉴定；如果没有浑浊则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0191] 按实施例10的检查方法检查12批脂溶性维生素注射液，均未发现培养结束后的培养基出现浑浊，12批脂溶性维生素注射液的微生物耐热性检查中染菌率为0，则说明上述药液的耐热性检查方法合格。

[0192] 从以上实施例可以看出，所有产品微生物耐热性检查中染菌率均为0，证明该改进方法在日常检验操作中大大降低了人员操作风险，提高了药品灭菌前药液微生物耐热性检查结果的准确性及可靠性。