复配杀螺剂的植物提取物配方及制备方法转让专利
申请号 : CN202110499422.8
文献号 : CN113519560B
文献日 : 2022-09-06
发明人 : 杨绪勤 , 孙亚萍 , 张又文 , 高玉忠 , 杨香璿 , 宛雯 , 周霞 , 师静静 , 蒋继宏
申请人 : 江苏师范大学
摘要 :
一种复配的植物提取物生物杀螺农药的配方：麻牛膝提取物40%、80%茶皂素10%、石膏粉8%、引诱剂1%、面粉41%，本发明将茶皂素和植物提取物麻牛膝复配，可以取代传统农药中的四聚乙醛，降低田间化学农药用药量；人们避免了长时间的接触下可能会导致引起疾病甚至是癌症，严重者还可能损害生物体的遗传机制，引起基因突变；本发明能降低四聚乙醛对环境和人体的潜在危害；药效显著，降低了用药成本，保护了生态环境的同时复配的茶皂素和麻牛膝对于彼此杀螺具有加成效果。
权利要求 :
1.一种复配的植物提取物生物杀螺农药的配方，其特征在于：麻牛膝提取物40%、80%茶皂素10%、石膏粉8%、引诱剂1%、面粉41%；麻牛膝提取物制备：称取50g植物粉末倒入1L不锈钢锅中，加入500mL蒸馏水，放在电炉上大火煮沸，在小火保持沸腾2.5‑3.0h，再用纱布过滤该溶液，植物粉末残渣返回锅中，加蒸馏水500mL煮沸提取，反复3次，最终将3次煮沸提取获得的水溶液过滤混合后煮沸蒸干，将提取物冷却放入冰箱备用。
2.一种制备如权利要求1所述的复配的植物提取物生物杀螺农药的配方的方法，其特征在于：将茶皂素、麻牛膝提取物、石膏粉、引诱剂、面粉按照预设重量比例称取，按照先后顺序投入搅拌釜中充分搅拌混匀即可。
说明书 :
复配杀螺剂的植物提取物配方及制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及生物化学领域，涉及茶皂素和麻牛膝提取物复配形成的生物农药，作为防治福寿螺灾害发生的灭螺剂。本技术发明的复配生物农药药效比较强、价格低、能够降低对环境的污染，产业化前景巨大。
背景技术
[0002] 麻牛膝（Cyathula capitata Moq.）是苋科多年生草本杯苋属植物。根粗壮，灰褐色或棕红色，根条圆锥状，少扭曲。茎直立，近四棱形，具分枝，茎及枝皆疏生灰色长柔毛。生于海拔1700‑2300m山坡杂木林下。麻牛膝主产于四川金沙江流域一带，云南及西藏部分地区亦产。秋、冬两季采挖，除去泥土、地上茎叶及须根，晒干或烘干。根条短粗，长圆柱状锥形，两端粗细相差较大，头大尾小，常扭曲。表面棕黄色、深褐色，有皮孔及纵皱纹。体硬质脆，易折断，断面微带棕红色。气浓，味微甘，苦涩，略具麻味。
[0003] 福寿螺又名雪螺、苹果螺。1984年后，福寿螺已在广东广为养殖。由于过度养殖，加上味道不好，它被释放到野外。福寿螺适应环境的生存能力很强，又繁殖得快，在很多地区可自然越冬，年发生两个世代。1只雌螺经1年两代共繁殖幼螺32.5万余只，繁殖力极强，潜在危害巨大。因此迅速扩散于河湖与田野；其食量大且食物种类繁多能破坏粮食作物、蔬菜和水生农作物的生长，已成为广东、广西、福建、云南、浙江、上海、江苏等地的有害动物。在长江以南广大地区福寿螺可自然越冬，一年发生两个世代。在广西鹿寨县等地，福寿螺在稻田的发生密度高达16.95个/平方米；水稻受害株率一般为7%～15%，最高达64%。福寿螺不但危害水稻，而且危害蔬菜及其他水生作物，福寿螺还危害水仙花、兰花等各种水生植物，成为中国南方水域的一大患害。此外，福寿螺还是一种人畜共患的寄生虫病的中间宿主，极易给周围居民带来健康问题。估计中国南方各省市受其危害的水域（池、湖、水田等）不少于10万公顷。目前防治软体动物的危害以化学农药为主，主要有6%四聚乙醛、贝螺杀、6%密达颗粒剂、45%三苯醋锡、45%百螺敌等约50种左右，这些有机杀螺剂虽然对福寿螺有一定防效，但对人的皮肤有强烈的刺激作用，有的甚至会致畸致癌，对水生生物有剧毒，对自然界生态平衡有一定破坏，防治成本高，实际应用中有很大局限性。
[0004] 随着社会科技不断发展，生物农药也不断发展，这与生物防治的研究以及化学农药的使用泛滥现状是分不开的。新技术生物农药使得国家农业发展和绿色有机产品得到了有效地保护，在不断增强防治病虫害能力的同时，也降低了对环境的破坏和污染程度，在一定程度上减少了农药污染环境的问题，保护了生态环境。为了保证粮食产量稳定和防治病虫害的发生，农民们会向田地里喷洒大量的化学农药。既破坏了生态环境，也影响了土地的肥沃性，增加了作物的生产成本，造成了农民的负担。我国是一个幅员辽阔的农业大国，全国耕地面积14.3亿亩，水稻种植面积稳定在4.5亿亩。这为我国生物农药的研制提供了坚实的基础。在欧洲国家，以植物源活性物质作为先导结构进行合成或修饰方面取得成功取决于两大优势，即化合物合成全自动化与高通量筛选技术自动化。而在我国，目前尚未真正形成一个自主创制新农药的体系。市场前景广阔。
[0005] 人们已经意识到保护生态环境的重要性，可持续发展战略成为全世界人们的共识。化肥农药减量已成为发展中国必须实行的有效措施。虽然生物农药在发展过程中仍存在一定的问题，但也取得了很多成功的成果，未来发展形势一片大好。
发明内容
[0006] 目前市场上流通的化学农药杀螺剂为6%四聚乙醛制剂，虽然其杀灭效果显著，然而长期使用会造成严重环境污染和生态破坏，极大危害人类健康。本发明以植物源生物农药为主，辅以石膏粉、引诱剂和面粉，通过复配组合得到灭杀福寿螺的最适合配比，混合制备成杀螺剂，原料均容易获取且成本较低。本发明使农作物无化学农药残留，保障了绿色农业的发展。
[0007] 本发明是以植物源生物农药为主的能够有效灭杀福寿螺的复配生物农药，可以替代市场流通的6%四聚乙醛化学农药防治福寿螺的危害，且皆可在较短的时间内起到杀伤福寿螺的效果，又可以促进绿色农药的发展。下面将提供本发明的组合配比：
[0008] 发明一：将各组分按其重量百分比：80%茶皂素20%、石膏粉8%、引诱剂1%、面粉71%补足至100%充分搅拌混合制得80%茶皂素可湿性制剂。
[0009] 发明二：将各组分按其重量百分比：麻牛膝提取物60%、石膏粉8%、引诱剂1%、面粉31%补足至100%充分搅拌混合制得麻牛膝提取物可湿性制剂。
[0010] 发明三：各组分的重量百分比：80%茶皂素10%、麻牛膝提取物40%、石膏粉8%、引诱剂1%、面粉41%补足至100%充分搅拌混合制得茶皂素·麻牛膝提取物可湿性制剂。
[0011] 本发明将茶皂素和植物提取物麻牛膝复配，可以取代传统农药中的四聚乙醛，降低田间化学农药用药量；人们避免了长时间的接触下可能会导致引起疾病甚至是癌症，严重者还可能损害生物体的遗传机制，引起基因突变；本发明能降低四聚乙醛对环境和人体的潜在危害；药效显著，降低了用药成本，保护了生态环境的同时复配的茶皂素和麻牛膝对于彼此杀螺具有加成效果，发明一中茶皂素配比为20%，发明二中麻牛膝的配比为60%，发明三中两种植物提取物进行复配，杀螺效果更加高效的，在节省原材料的基础上，有着和化学农药四聚乙醛相同的杀螺效果。
附图说明
[0012] 图1为处在不同浓度茶皂素下的福寿螺在168h内的死亡率折线图，CK为清水对照组。由图可知，茶皂素在40mg/L、60mg/L、80mg/L、100mg/L的浓度下，具有良好的杀螺效果。
[0013] 图2为处在不同浓度麻牛膝提取物下的福寿螺在168h内的死亡率折线图，CK为清水对照组。由图可知，麻牛膝提取物在100mg/L、200mg/L、300mg/L的浓度下，具有良好的杀螺效果。
[0014] 图3为茶皂素和麻牛膝提取物可湿性制剂农药分别与6%四聚乙醛GR在21天内杀螺效果的对照。CK：为大田不施药效果；80%茶皂素可湿性制剂和麻牛膝提取物可湿性制剂在0‑3天内效果略低于四聚乙醛，80%茶皂素可湿性制剂与麻牛膝提取物可湿性制剂效果相当且80%茶皂素可湿性制剂效果略优于麻牛膝提取物可湿性制剂；80%茶皂素可湿性制剂与麻牛膝提取物可湿性制剂在3‑7天内效果显著，且与四聚乙醛GR效果相当；7天之后效果趋于稳定，效果良好。
[0015] 实验方法：
[0016] 本发明采用的为实验室毒性测试的方法：
[0017] 计算所需实验材料的计量，称量后溶于2L脱氯水中。以脱氯水为对照组，每个处理设置3次重复试验。选取20‑30头5‑7旋的成年福寿螺，个体置于实验容器中，加空心菜，白菜等蔬菜作为福寿螺的食物，每隔两天换一次食物，保持福寿螺食物的新鲜性，同时加盖一层纱布或者网，为防止福寿螺的逃脱。严格维持实验区域温度稳定，以防止早晚气温的大幅度变动对福寿螺产生影响。按时观察福寿螺的情况，记录福寿螺的死亡数量。
[0018] 本发明中福寿螺死亡的判断标准：
[0019] （1）用铁丝或者毛笔触碰刺激福寿螺壳口处的软体部分，仍然存活的福寿螺会因为受到外界刺激而迅速闭上螺壳，若露出软体的福寿螺遇刺激无反应则可认定为死亡；
[0020] （2）紧闭螺壳的福寿螺，可以选择用铁丝或其他硬物，轻微挑起或者拨开福寿螺壳，仍然存活的福寿螺会因为外界刺激关闭螺壳，死亡个体在无明显反应。
具体实施方式
[0021] 实验室条件：本研究所有实验均在江苏省药用植物生物技术重点实验室。该实验部门拥有工程技术中心，有一大批先进的反应仪器和检测设备，为科研提供了较好的硬件基础，具备展开灭杀福寿螺室内实验的条件。
[0022] 一、实验材料
[0023] 生物材料：福寿螺由徐州诺特公司养殖提供，室内选择具有较高活力的5 7旋福寿~螺个体，每轮实验700 1000只备用，3次实验重复。
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[0024] 实验药剂：实验用药剂为通过使用提取纯化技术的获得的麻牛膝提取物和市场购置的80%茶皂素。
[0025] 麻牛膝提取物制备：称取50g植物粉末倒入1L不锈钢锅中，加入500mL蒸馏水，放在电炉上大火煮沸，在小火保持沸腾2.5‑3.0h，再用纱布过滤该溶液，植物粉末残渣返回锅中，加蒸馏水500mL煮沸提取，反复3次，最终将3次煮沸提取获得的水溶液过滤混合后煮沸蒸干，将提取物冷却放入冰箱备用。
[0026] 二、实验步骤
[0027] 发明一： 步骤一： 茶皂素和各组分按比例制备为可湿性制剂，本发明中均为重量百分比，涉及的发明范围不止于此。 配方： 80%茶皂素可湿性制剂 各组分的重量百分比：80%茶皂素20%、石膏粉8%、引诱剂1%、面粉71%补足至100%充分搅拌混合制得80%茶皂素可湿性制剂。 步骤二： 准备实验用具－透明塑料盆，分为7组，依次编号为80%茶皂素稀释试剂
12%、14%、16%、18%、20%、22%、24%。不加药品的空白作为对照组。每组倒入2L脱氯水并加入福寿螺20‑30只，同时加空心菜，白菜等蔬菜作为福寿螺的食物，同时放置上网，防止福寿螺爬出，每隔2天换一次食物，3次实验重复。 施药：用移液枪准确吸取1ml各不同梯度80%茶皂素稀释试剂，对应编号依次加入不同梯度的80%茶皂素稀释试剂。不同梯度80%茶皂素稀释试剂性的茶皂素含量分别为：12%、14%、16%、18%、20%、22%、24%。另取一组以2L脱氯水为空白对照。在更换试剂浓度时，要做到避免实验是因为药物残留等原因而造成的交叉污染或者误差。
12%、14%、16%、18%、20%、22%、24%。不加药品的空白作为对照组。每组倒入2L脱氯水并加入福寿螺20‑30只，同时加空心菜，白菜等蔬菜作为福寿螺的食物，同时放置上网，防止福寿螺爬出，每隔2天换一次食物，3次实验重复。 施药：用移液枪准确吸取1ml各不同梯度80%茶皂素稀释试剂，对应编号依次加入不同梯度的80%茶皂素稀释试剂。不同梯度80%茶皂素稀释试剂性的茶皂素含量分别为：12%、14%、16%、18%、20%、22%、24%。另取一组以2L脱氯水为空白对照。在更换试剂浓度时，要做到避免实验是因为药物残留等原因而造成的交叉污染或者误差。
[0028] 实验结果显示，80%茶皂素稀释试剂浓度在20%、22%、24%时，48‑96小时内都具有良好的致死效果，福寿螺的死亡率均达到92%以上，72‑96小时效果稳定，浓度越高效果越明显，与6%四聚乙醛制剂效果基本相同。考虑到杀螺效果以及原材料成本，本发明选用茶皂素和其他组分重量占比为2:8的情况来制作可湿性制剂。 步骤三： 分组：准备实验用具－透明塑料盆，分为5组，依次编号为80%茶皂素可湿性制剂20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L、100mg/L；不加药品的空白作为对照组。每组倒入2L脱氯水并加入福寿螺20‑30只，同时加空心菜，白菜等蔬菜作为福寿螺的食物，同时放置上网，防止福寿螺爬出，每隔2天换一次食物，3次实验重复。 施药：用天平准确称取80%茶皂素可湿性制剂，对应编号施加药液，另取一组以2L脱氯水为空白对照。在更换药物种类和浓度时，要做到用去离子水反复清洗，本方法能够有效的避免实验是因为药物残留等原因而造成的交叉污染或者误差。 观察与记录：
施药后即每隔12小时，观察一次实验个体，持续一周时间。实验观察是首先挑拣出已明显开口死亡的福寿螺个体，对于始终紧闭螺壳的福寿螺个体，可选择洗去表面药物后放置于清水中，数日后观察看是否死亡或者选择用敲击法来确定福寿螺死活。观察后及时记录死亡螺个数，录入表格。
施药后即每隔12小时，观察一次实验个体，持续一周时间。实验观察是首先挑拣出已明显开口死亡的福寿螺个体，对于始终紧闭螺壳的福寿螺个体，可选择洗去表面药物后放置于清水中，数日后观察看是否死亡或者选择用敲击法来确定福寿螺死活。观察后及时记录死亡螺个数，录入表格。
[0029] 实验结果显示（如图一），配方为80%茶皂素可湿性制剂浓度在40mg/L、60mg/L、80mg/L、100mg/L时，48‑96小时内都具有良好的致死效果，福寿螺的死亡率均达到92%以上，
72‑96小时内效果稳定，浓度越高效果越明显，与6%四聚乙醛制剂效果基本相同,并在144h后都达到了100%杀螺的效果。因此，80%茶皂素可湿性制剂，可以替代市场流行的6%四聚乙醛化学农药防治福寿螺的危害，这种比例的生物农药皆可在较短的时间内起到杀伤福寿螺的效果，可以降低四聚乙醛对环境的毒害作用，同时保证对福寿螺的灭杀效果。使用安全便捷，生产该生物农药的原料易得，生产成本低于常见的化学药剂，推向市场易于被广大农民群众认可，是真正做到防治福寿螺灾害发生，兼顾对人畜保护和环境友好的特效杀螺剂。 发明二： 步骤一： 将麻牛膝提取物和各组分按比例制备为可湿性制剂，本发明中均为重量百分比，涉及的发明范围不止于此。 配方： 麻牛膝提取物可湿性制剂 各组分的重量百分比：麻牛膝提取物60%、石膏粉8%、引诱剂1%、面粉26%补足至100%充分搅拌混合制得麻牛膝提取物可湿性制剂。 步骤二： 准备实验用具－透明塑料盆，分为7组，依次编号为麻牛膝提取物稀释试剂20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%。不加药品的空白作为对照组。每组倒入2L脱氯水并加入福寿螺20‑30只，同时加空心菜，白菜等蔬菜作为福寿螺的食物，同时放置上网，防止福寿螺爬出，每隔2天换一次食物，3次实验重复。 施药：用移液枪准确吸取1ml 各不同梯度麻牛膝提取物稀释试剂，对应编号依次加入不同梯度的麻牛膝提取物稀释试剂。不同梯度麻牛膝提取物稀释试剂性的麻牛膝提取物含量分别为：20%、30%、40%、50%、60%、70%、
80%。另取一组以2L脱氯水为空白对照。在更换试剂浓度时，要做到避免实验是因为药物残留等原因而造成的交叉污染或者误差。 实验结果显示，麻牛膝提取物稀释试剂浓度在60%、
70%、80%时，48‑96小时内都表现出良好的致死效果，福寿螺的死亡率均达到90%以上，72‑96小时内效果稳定，浓度越高效果越明显，与6%四聚乙醛制剂效果基本相同。考虑到杀螺效果以及原材料成本，我们选用麻牛膝提取物和其他组分占比为6：4的情况来制作可湿性制剂。 步骤三： 分组：准备实验用具－透明塑料盆，分为4组，依次编号为48%麻牛膝提取物可湿性制剂200mg/L、300mg/L、400mg/L、500mg/L；不加药品的空白作为对照组。每组倒入2L脱氯水并加入福寿螺20‑30只，同时加空心菜，白菜等蔬菜作为福寿螺的食物，同时放置上网，防止福寿螺爬出，每隔2天换一次食物，3次实验重复。 施药：用天平准确称取麻牛膝提取物可湿性制剂，对应编号施加药液，另取一组以2L脱氯水为空白对照。在更换药物种类和浓度时，要做到用去离子水反复清洗，本方法能够有效的避免实验是因为药物残留等原因而造成的交叉污染或者误差。 观察与记录：施药后即每隔12小时，观察一次实验个体，持续一周时间。实验观察是首先挑拣出已明显开口死亡的福寿螺个体，对于始终紧闭螺壳的福寿螺个体，可选择洗去表面药物后放置于清水中，数日后观察看是否死亡或者选择用敲击法来确定福寿螺死活。观察后及时记录死亡螺个数，录入表格。
72‑96小时内效果稳定，浓度越高效果越明显，与6%四聚乙醛制剂效果基本相同,并在144h后都达到了100%杀螺的效果。因此，80%茶皂素可湿性制剂，可以替代市场流行的6%四聚乙醛化学农药防治福寿螺的危害，这种比例的生物农药皆可在较短的时间内起到杀伤福寿螺的效果，可以降低四聚乙醛对环境的毒害作用，同时保证对福寿螺的灭杀效果。使用安全便捷，生产该生物农药的原料易得，生产成本低于常见的化学药剂，推向市场易于被广大农民群众认可，是真正做到防治福寿螺灾害发生，兼顾对人畜保护和环境友好的特效杀螺剂。 发明二： 步骤一： 将麻牛膝提取物和各组分按比例制备为可湿性制剂，本发明中均为重量百分比，涉及的发明范围不止于此。 配方： 麻牛膝提取物可湿性制剂 各组分的重量百分比：麻牛膝提取物60%、石膏粉8%、引诱剂1%、面粉26%补足至100%充分搅拌混合制得麻牛膝提取物可湿性制剂。 步骤二： 准备实验用具－透明塑料盆，分为7组，依次编号为麻牛膝提取物稀释试剂20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%。不加药品的空白作为对照组。每组倒入2L脱氯水并加入福寿螺20‑30只，同时加空心菜，白菜等蔬菜作为福寿螺的食物，同时放置上网，防止福寿螺爬出，每隔2天换一次食物，3次实验重复。 施药：用移液枪准确吸取1ml 各不同梯度麻牛膝提取物稀释试剂，对应编号依次加入不同梯度的麻牛膝提取物稀释试剂。不同梯度麻牛膝提取物稀释试剂性的麻牛膝提取物含量分别为：20%、30%、40%、50%、60%、70%、
80%。另取一组以2L脱氯水为空白对照。在更换试剂浓度时，要做到避免实验是因为药物残留等原因而造成的交叉污染或者误差。 实验结果显示，麻牛膝提取物稀释试剂浓度在60%、
70%、80%时，48‑96小时内都表现出良好的致死效果，福寿螺的死亡率均达到90%以上，72‑96小时内效果稳定，浓度越高效果越明显，与6%四聚乙醛制剂效果基本相同。考虑到杀螺效果以及原材料成本，我们选用麻牛膝提取物和其他组分占比为6：4的情况来制作可湿性制剂。 步骤三： 分组：准备实验用具－透明塑料盆，分为4组，依次编号为48%麻牛膝提取物可湿性制剂200mg/L、300mg/L、400mg/L、500mg/L；不加药品的空白作为对照组。每组倒入2L脱氯水并加入福寿螺20‑30只，同时加空心菜，白菜等蔬菜作为福寿螺的食物，同时放置上网，防止福寿螺爬出，每隔2天换一次食物，3次实验重复。 施药：用天平准确称取麻牛膝提取物可湿性制剂，对应编号施加药液，另取一组以2L脱氯水为空白对照。在更换药物种类和浓度时，要做到用去离子水反复清洗，本方法能够有效的避免实验是因为药物残留等原因而造成的交叉污染或者误差。 观察与记录：施药后即每隔12小时，观察一次实验个体，持续一周时间。实验观察是首先挑拣出已明显开口死亡的福寿螺个体，对于始终紧闭螺壳的福寿螺个体，可选择洗去表面药物后放置于清水中，数日后观察看是否死亡或者选择用敲击法来确定福寿螺死活。观察后及时记录死亡螺个数，录入表格。
[0030] 实验结果显示（如图二），麻牛膝提取物可湿性制剂时，施药400mg/L、500mg/L；后每隔12小时就有死亡现象，48—96小时内就呈现良好的致死效果，福寿螺的死亡率也都达到了90%以上，效果稳定，浓度越高杀螺效果越好，与6%四聚乙醛制剂效果基本相同而且在96h后都达到100的杀螺率，因此，麻牛膝提取物可湿性制剂，可以替代市场流行的6%四聚乙醛化学农药防治福寿螺的危害，该生物农药可在较短的时间内起到杀伤福寿螺的效果，可以降低四聚乙醛对环境的毒害作用，同时保证对福寿螺的灭杀效果。本发明使用安全便捷，生产该生物农药的麻牛膝材料易得，生产成本低于常见的化学药剂，推向市场易于被广大农民群众认可，是真正做到防治福寿螺灾害发生兼顾对人畜保护和环境友好的特效杀螺剂。 发明三： 步骤一： 提取好茶皂素和麻牛膝提取物后，进行复配实验：将茶皂素、麻牛膝提取物和各组分按比例制备为可湿性制剂，本发明中均为重量百分比，涉及的发明范围不止于此。 配方： 80%茶皂素·麻牛膝提取物可湿性制剂 各组分的重量百分比：80%茶皂素
10%、麻牛膝提取物40%、石膏粉8%、引诱剂1%、面粉41%补足至100%充分搅拌混合制得80%茶皂素·麻牛膝提取物可湿性制剂。 步骤二： 分组：准备实验用具－透明塑料盆，分为5组，为80%茶皂素20mg/L分别与麻牛膝40mg/L、60mg/L、80mg/L、100mg/L、120mg/L复配，做好标记。另外准备5组透明塑料盆，为茶皂素80%提取物可湿性制剂12mg/L分别与麻牛膝40mg/L、
60mg/L、80mg/L、100mg/L、120mg/L复配，做好标记；不加药品的空白作为对照组。每组倒入
2L脱氯水并加入福寿螺20‑30只，同时加空心菜，白菜等蔬菜作为福寿螺的食物，同时放置上网，防止福寿螺爬出，每隔2天换一次食物，3次实验重复。 施药：用天平准确称取80%茶皂素·麻牛膝提取物可湿性制剂，对应编号施加药液，另取一组以2L脱氯水为空白对照。在更换药物种类和浓度时，要做到用去离子水反复清洗，本方法能够有效地避免实验是因为药物残留等原因而造成的交叉污染或者误差。 观察与记录：施药后即每隔12小时，观察一次实验个体，持续一周时间。实验观察是首先挑拣出已明显开口死亡的福寿螺个体，对于始终紧闭螺壳的福寿螺个体，可选择洗去表面药物后放置于清水中，数日后观察看是否死亡或者选择用敲击法来确定福寿螺死活。观察后及时记录死亡螺个数，录入表格。 实验结果显示，配方为80%茶皂素12mg/L分别与麻牛膝提取物100mg/L、120mg/L复配可湿性制剂，48‑96小时内都具有一定的致死效果，福寿螺的死亡率均达到65%以上，配方为茶皂素80%提取物
20mg/L分别与麻牛膝提取物80mg/L、100mg/L、120mg/L复配可湿性制剂，48‑96小时内都具有良好的致死效果，福寿螺的死亡率均达到95%以上，72‑96小时内效果稳定，浓度越高效果越明显，与6%四聚乙醛制剂效果基本相同。因此，本发明选用80%茶皂素：麻牛膝提取物：其他组分=1：4：5的比例制成80%茶皂素·麻牛膝提取物可湿性制剂，且80%茶皂素·麻牛膝提取物可湿性制剂，可以替代市场流行的6%四聚乙醛化学农药防治福寿螺的危害。综上，80%茶皂素10%和麻牛膝提取物40%可湿性制剂，这种比例复配的生物农药既经济又可在较短的时间内起到杀伤福寿螺的效果，可以降低四聚乙醛对环境的毒害作用，同时保证对福寿螺的灭杀效果。使用安全便捷，生产该生物农药的原料易得，生产成本低于常见的化学药剂，推向市场易于被广大农民群众认可。
10%、麻牛膝提取物40%、石膏粉8%、引诱剂1%、面粉41%补足至100%充分搅拌混合制得80%茶皂素·麻牛膝提取物可湿性制剂。 步骤二： 分组：准备实验用具－透明塑料盆，分为5组，为80%茶皂素20mg/L分别与麻牛膝40mg/L、60mg/L、80mg/L、100mg/L、120mg/L复配，做好标记。另外准备5组透明塑料盆，为茶皂素80%提取物可湿性制剂12mg/L分别与麻牛膝40mg/L、
60mg/L、80mg/L、100mg/L、120mg/L复配，做好标记；不加药品的空白作为对照组。每组倒入
2L脱氯水并加入福寿螺20‑30只，同时加空心菜，白菜等蔬菜作为福寿螺的食物，同时放置上网，防止福寿螺爬出，每隔2天换一次食物，3次实验重复。 施药：用天平准确称取80%茶皂素·麻牛膝提取物可湿性制剂，对应编号施加药液，另取一组以2L脱氯水为空白对照。在更换药物种类和浓度时，要做到用去离子水反复清洗，本方法能够有效地避免实验是因为药物残留等原因而造成的交叉污染或者误差。 观察与记录：施药后即每隔12小时，观察一次实验个体，持续一周时间。实验观察是首先挑拣出已明显开口死亡的福寿螺个体，对于始终紧闭螺壳的福寿螺个体，可选择洗去表面药物后放置于清水中，数日后观察看是否死亡或者选择用敲击法来确定福寿螺死活。观察后及时记录死亡螺个数，录入表格。 实验结果显示，配方为80%茶皂素12mg/L分别与麻牛膝提取物100mg/L、120mg/L复配可湿性制剂，48‑96小时内都具有一定的致死效果，福寿螺的死亡率均达到65%以上，配方为茶皂素80%提取物
20mg/L分别与麻牛膝提取物80mg/L、100mg/L、120mg/L复配可湿性制剂，48‑96小时内都具有良好的致死效果，福寿螺的死亡率均达到95%以上，72‑96小时内效果稳定，浓度越高效果越明显，与6%四聚乙醛制剂效果基本相同。因此，本发明选用80%茶皂素：麻牛膝提取物：其他组分=1：4：5的比例制成80%茶皂素·麻牛膝提取物可湿性制剂，且80%茶皂素·麻牛膝提取物可湿性制剂，可以替代市场流行的6%四聚乙醛化学农药防治福寿螺的危害。综上，80%茶皂素10%和麻牛膝提取物40%可湿性制剂，这种比例复配的生物农药既经济又可在较短的时间内起到杀伤福寿螺的效果，可以降低四聚乙醛对环境的毒害作用，同时保证对福寿螺的灭杀效果。使用安全便捷，生产该生物农药的原料易得，生产成本低于常见的化学药剂，推向市场易于被广大农民群众认可。
[0031] 三、大田实验检测
[0032] 1 试验目的
[0033] 明确江苏省药用植物生物技术重点实验室提供的3种杀螺试剂用于大田防治水稻福寿螺的防治效果和安全性。试验按农药田间药效试验准则（二） 第81部分：“杀螺剂防治水稻福寿螺”的国家标准“GB/T 17980.81‑2004”执行。
[0034] 2 试验条件
[0035] 2.1 试验对象、作物和品种的选择
[0036] 试验对象：福寿螺Pomacea canaliculata
[0037] 试验作物：水稻
[0038] 2.2 环境条件
[0039] 试验选在广西农业科学院里建试验基地进行，作物品种为水稻，试验时处于拔节长穗期，是指从拔节、幼穗开始分化到抽穗前的一段时期。实验地栽培条件（土壤类型、肥力、耕作）均匀一致，符合科学的农业实践（GAP）。所种作物为水稻，水稻长势良好。试验前未用过农药。
[0040] 3 试验设计和安排
[0041] 3.1 药剂
[0042] 3.1.1 试验药剂
[0043] 80%茶皂素可湿性制剂农药、麻牛膝提取物可湿性制剂农药均由江苏省药用植物生物技术重点实验室提供。
[0044] 3.1.2 对照药剂：
[0045] 6%四聚乙醛GR（魂斗罗），由徐州诺特化工有限公司提供。
[0046] 3.1.3 药剂用量与编号：
[0047] 表1 供试药剂试验设计
[0048] 。
[0049] 3.2 小区安排：
[0050] 3.2.1 小区排列
[0051] 。
[0052] 3.2.2 小区面积和重复：
[0053] 小区面积：约15㎡（3m×5m）。
[0054] 重复次数：3次重复。
[0055] 3.3 施药方法：
[0056] 3.3.1 使用方法
[0057] 撒施。
[0058] 3.3.2 施药器械
[0059] 无。
[0060] 3.3.3 施药时间和次数
[0061] 本试验只施一次药，施药时间为2019年9月6日傍晚。
[0062] 3.3.4 防治其他病虫害的药剂资料
[0063] 该试验地为本试验专用，不使用任何其他防虫防病的药剂。
[0064] 4 调查、记录和测量方法
[0065] 4.1 气象及土壤资料
[0066] 4.1.1 气象资料
[0067] 2019年9月6日（施药当日）：气温25～35℃，多云，东南风1～2级。
[0068] 2019年9月6日～9月26日，整个试验期间，以多云到阵雨天气为主；最低气温20℃，最高气温35℃，降雨天气较多（详见表5）。
[0069] 4.1.2 土壤资料
[0070] 该试验地沙壤土，排灌条件良好，肥力条件中等，有极少量杂草。
[0071] 4.2 调查方法、时间和次数
[0072] 4.2.1 调查时间和次数
[0073] 分别于药前调查虫口基数，药后3、7、14、21天调查死虫数。
[0074] 4.2.2 调查方法
[0075] 施药前调查各小区自然发生的福寿螺数量，每小区随机抽查3～4m2，若每平方米不足8头，则在野外采集同龄期大小的福寿螺补充至每平方米8头左右。药后前3次调查只观察土表及植株基部和上部死亡个体，不宜翻动土表，以防药粒埋入土下。调查中死亡的福寿螺个体在记录数量后移出田外，以防下次调查时重复记录，最后一次调查时同时翻动土表下1cm～3cm处，注意较大土块下面有无存活或死亡个体。
[0076] 福寿螺死亡的判断标准：用铁丝或者毛笔触碰刺激福寿螺壳口处的软体部分，仍然存活的福寿螺会因为受到外界刺激而迅速闭上螺壳，若露出软体的福寿螺遇刺激无反应则可认定为死亡；紧闭螺壳的福寿螺，可以选择用铁丝或其他硬物，轻微挑起或者拨开福寿螺壳，仍然存活的福寿螺会因为外界刺激关闭螺壳，死亡个体在无明显反应。
[0077] 4.2.3 药效计算方法：
[0078] 。
[0079] 4.3 对作物的直接影响
[0080] 试验期间，作物未出现药害现象。
[0081] 4.4 产品的质量和产量
[0082] 本试验不进行质量和产量评估。
[0083] 4.5 对其他生物影响
[0084] 试验期间，未见药剂对其他病虫害和天敌有影响。
[0085] •结果与分析
[0086] 表2 3种四聚乙醛GR防治水稻福寿螺试验结果
[0087] 。
[0088] 注：上表中的防效（%）为各重复平均值。试验结果采用邓肯氏新复极差（DMRT）法进行分析，表中数据后相同大小写字母表示在1%和5%水平上差异不显著。
[0089] 5.1药剂评价
[0090] 3种四聚乙醛GR防治水稻福寿螺试验结果见表2:
[0091] 药后3天，供试药剂及对照药剂对水稻田的防治效果大小依次为：6%四聚乙醛GR>80%茶皂素农药>麻牛膝提取物农药。试验结果经DMRT法检验分析，结果表明，80%茶皂素农药防治效果优于麻牛膝提取物农药，两者与6%四聚乙醛GR杀螺效果差异明显，与空白对照显著差异。
[0092] 药后7天，供试药剂及对照药剂对水稻福寿螺的防治效果大小依次为：6%四聚乙醛GR>80%茶皂素农药>麻牛膝提取物农药。试验结果经DMRT法检验分析，80%茶皂素农药和麻牛膝提取物农药结果表明防效相当，差异不显著。80%茶皂素农药和麻牛膝提取物农药防效与对照药剂魂斗罗防效相当，差异不显著。
[0093] 药后14天，供试药剂及对照药剂对水稻福寿螺的防治效果大小依次为：6%四聚乙醛GR>80%茶皂素农药>麻牛膝提取物农药。试验结果经DMRT法检验分析，80%茶皂素农药和麻牛膝提取物农药结果表明防效相当，差异不显著。80%茶皂素农药和麻牛膝提取物农药防效与对照药剂魂斗罗防效相当，差异不显著。
[0094] 药后21天，供试药剂及对照药剂对水稻福寿螺的防治效果大小依次为：6%四聚乙醛GR>80%茶皂素农药>麻牛膝提取物农药。试验结果经DMRT法检验分析，80%茶皂素农药和麻牛膝提取物农药结果表明防效相当，差异不显著。80%茶皂素农药和麻牛膝提取物农药防效与对照药剂魂斗罗防效相当，差异不显著。
[0095] 总之，2种生物农药从第七天开始杀虫率均达到80%以上，效果稍微低于6%四聚乙醛GR杀螺效果，差异性不大，如果不计算成本的话，可以替代传统的6%四聚乙醛（阳性对照）。
[0096] 5.2安全性
[0097] 供试杀螺颗粒剂对水稻无药害症状，施药人员施药后亦无不适感觉。
[0098] 6 小结
[0099] 由2019年下半年的田间试验结果看，2个供试药剂对水稻福寿螺均有良好的防治效果，药后21天的防治效果均在85%以上，防效大小依次为：2种生物农药从第七天开始杀虫率均达到80%以上，效果稍微低于6%四聚乙醛GR杀螺效果，差异性不大，2种生物可以替代传统的6%四聚乙醛（阳性对照）。
[0100] 相比较上半年的试验结果来看，下半年的防效十分明显，认为主要有以下2个方面因素影响防效：
[0101] 1、温度：根据天气情况记录，上半年持续高温。而在下半年试验期间，日平均温度在22.5～35.5℃，气温适宜，表现较为活跃。
[0102] 2、湿度：由表5的天气情况表可以看出，在整个试验期间以阵雨和多云天气为主，雨水较多，地表湿润，有利于药剂铺开在地表上，同时不需要喷灌作物，避免了药剂被土壤覆盖。
[0103] 因此，综合田间试验结果，认为徐州诺特化工提供的2种杀螺剂对水稻福寿螺均有良好的防治效果，在同等剂量条件下，防效大小依次为：6%四聚乙醛GR80%茶皂素农药>麻牛膝提取物农药，差异性不大， 2种生物可以替代传统的6%四聚乙醛。施药时应注意：1）选择在福寿螺活跃的气候条件下施药；2）尽量在雨后、露水大的傍晚或者湿度大的气候下施药，这样有利于提高药剂的防治效果。同时应注意与其他有效药剂轮换使用，减缓害虫抗药性的产生。