一类抑制β-淀粉样蛋白聚集的单线态氧载体及其制备方法和应用

摘要

一类抑制β‑淀粉样蛋白聚集的单线态氧载体及其制备方法和应用，属于生物医药技术领域。这类抑制β‑淀粉样蛋白聚集的单线态氧载体含有苯并噻唑基团和单线态氧载体两个功能性基团。苯并噻唑基团可选择性结合β‑淀粉样蛋白，提高体系靶向性的同时对β‑淀粉样蛋白的聚集进行抑制，降低其带来的神经毒性。体系中的内过氧化物可在一定条件下释放单线态氧，单线态氧可氧化β‑淀粉样蛋白，进一步限制β‑淀粉样蛋白的聚集，降低毒性。该类载体对β‑淀粉样蛋白具有双重抑制效果，具有治疗β‑淀粉样蛋白聚集引起的相关疾病，缓解阿尔海默病等疾病的应用潜力。

权利要求

1.一类抑制β‑淀粉样蛋白聚集的单线态氧载体，其特征在于，该载体具有如下结构通式：

1 4

其中，R ‑R各自独立的为氢、碳原子数为1‑30的烷基、苯基、氨基、羟基、碳原子数为1‑

30的烷氧基、甲磺酰基、碳原子数为1‑30的烷氨基、卤素或者 ，x为1‑200的整数；

5 8

R‑R各自独立的为氢、碳原子数1‑6的烷基、羟基、三氟甲氧基、甲磺酰基、氨基、碳原子数为1‑6的烷氨基、卤素。

2.根据权利要求1所述的一类抑制β‑淀粉样蛋白聚集的单线态氧载体，其特征在于，所

1 4

述的R‑R各自独立的为氢、碳原子数为1‑6的烷基、苯基、氨基、羟基、碳原子数为1‑6的烷氨基、卤素或者 ，x为5‑200的整数；

5 8

R‑R各自独立的为氢、碳原子数1‑6的烷基、羟基、三氟甲氧基、甲磺酰基、氨基、碳原子数为1‑6的烷氨基、卤素。

3.根据权利要求1所述的一类抑制β‑淀粉样蛋白聚集的单线态氧载体的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：步骤1，将化合物G与甲氧基(环辛二烯)铱(I)二聚体，4,4'‑二叔丁基‑2,2'‑联吡啶和联硼酸嚬哪醇酯混合，加入溶剂环己烷，加热搅拌至反应结束，分离提纯得到化合物A；

步骤2，将化合物A与高碘酸钠混合，加入体积比为4:1的THF和H2O的混合溶剂，搅拌30分钟后，加入1N HCl，室温搅拌至反应结束，分离提纯得到化合物B；

步骤3，将化合物B与乙醛酸和吲哚啉混合，加入无水乙腈，在空气氛围下，室温搅拌至反应结束，分离提纯得到化合物C；

步骤4，将化合物C与化合物H，硫氰酸铵和单质碘混合，加入二甲基亚砜，在空气氛围下，加热搅拌至反应结束，分离提纯得到化合物D；

步骤5，将化合物D与催化量的亚甲基蓝混合，加入溶剂，在氧气氛围下，使用激光照射反应，分离提纯得到终产物E；

1 8

其中，R‑R的定义同结构通式中的定义。

4.根据权利要求3所述的一类抑制β‑淀粉样蛋白聚集的单线态氧载体的制备方法，其特征在于：步骤5中，所述溶剂为氘代氯仿、二氯甲烷、氘水中的至少一种，反应温度为4 ℃ — ‑

30 ℃，反应时间为5‑8 h；

所述激光的波长为400‑700 nm，功率为300 mW、4 W、10 W、18 W或40 W。

5.根据权利要求3所述的一类抑制β‑淀粉样蛋白聚集的单线态氧载体的制备方法，其特征在于：步骤5中，所述溶剂为二氯甲烷，反应温度为0 ℃，反应时间为6h；

所述激光的波长为630 nm，功率为18 W。

6.根据权利要求1所述的一类抑制β‑淀粉样蛋白聚集的单线态氧载体的应用，其特征在于，所述载体用于制备抑制β‑淀粉样蛋白的聚集，降低β‑淀粉样蛋白的神经毒性的药物。

7.根据权利要求1所述的一类靶向β‑淀粉样蛋白的单线态氧载体的应用，其特征在于，所述载体用于制备治疗β‑淀粉样蛋白聚集引起的疾病的药物。

8.根据权利要求1所述的一类靶向β‑淀粉样蛋白的单线态氧载体的应用，其特征在于，所述载体用于制备治疗或缓解阿尔海默病的药物。

9.根据权利要求1所述的一类靶向β‑淀粉样蛋白的单线态氧载体的应用，其特征在于，所述载体可加入制剂领域常规辅料制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、口服液或者注射剂形式的药物。

说明书

一类抑制β‑淀粉样蛋白聚集的单线态氧载体及其制备方法和

应用

技术领域

[0001] 本发明属于生物医药技术领域，特别涉及一类抑制β‑淀粉样蛋白聚集的单线态氧载体及其制备方法和应用。

背景技术

[0002] 阿尔兹海默症(AD)是一种不可逆的神经性疾病，主要临床表现为认知、学习能力减弱，以至丧失行动能力。我国AD患者呈现逐年增长的趋势，给患者、家庭、社会和医疗带来了极大的负担。目前导致阿尔兹海默症的病因尚未完全清楚，其中，β淀粉样蛋白(Aβ)的聚集被认为是导致AD的主要原因。β‑淀粉样蛋白是由β淀粉样前体蛋白水解而来的分子量约为4kD的蛋白，人体最常见的亚型为Aβ1‑42和Aβ1‑40。其中Aβ1‑42具有更强的毒性，更容易聚集形成沉淀的核心，进而引发神经毒性。抑制β淀粉样蛋白的聚集是AD药物研发的重要策略，目前已经开放了多种类型抑制剂如多肽，小分子，抗体等。此外，通过光促进的氧化反应将β淀粉样蛋白氧化可限制其进一步聚集，降低神经毒性。以此为基础，已经有多个光敏剂体系被用于β淀粉样蛋白的氧化研究，如核黄素、玫瑰红、亚甲基蓝等。此外，基于纳米材料的β淀粉样蛋白氧化策略也已经被报道。但是，上述光氧化体系一般需要一定波长的光活化光敏剂或纳米材料，进而释放单线态氧等活性物种，氧化β淀粉样蛋白。但是，光源有限的穿透能力严重限制了上述策略的临床应用。因此，开发不依赖于光源的、可氧化β淀粉样蛋白的体系具有重要的理论和现实意义。

发明内容

[0003] 本发明的目的是为了克服传统光依赖的氧化β‑淀粉样蛋白策略中的限制因素，提供一种更为高效的、具有临床应用价值的抑制β‑淀粉样蛋白聚集的策略，为治疗β‑淀粉样蛋白聚集引起的相关疾病，缓解阿尔海默病等疾病提供可靠的手段。

[0004] 一类抑制β‑淀粉样蛋白聚集的单线态氧载体，具有如下结构通式：

[0005]

[0006] 其中，R1‑R4为各自独立的氢、甲基、碳原子数为2‑30的烷基、苯基、氨基、羟基、碳原子数为1‑30的烷基醚基、甲磺酰基、氨基、碳原子数为1‑30的烷氨基、卤素、不同分子量的PEG，所述不同分子量的PEG为 x为1‑2000的整数。

[0007] R5‑R8为各自独立的氢、甲基、碳原子数为2‑30的烷基、羟基、三氟甲基醚基甲磺酰基 氨基、碳原子数为1‑30的烷氨基、卤素或者苯基。

[0008] 优选地，R1‑R4为各自独立的氢、碳原子数为1‑6的烷基、苯基、氨基、羟基、碳原子数为1‑6的烷基醚基、甲磺酰基、氨基、碳原子数为1‑6的烷氨基、卤素或者
x为5‑200的整数。对于取代基 更优选的，x为5‑50的整数。
5 8

[0009] R‑R为各自独立的氢、碳原子数为1‑6的烷基、羟基、三氟甲基醚基 甲磺酰基 氨基、碳原子数为1‑6的烷氨基、卤素或者苯基。

[0010] 本发明的化合物均可采用常规化学合成方法得到，合成通式如下，但不局限于此通式，具体可根据化合物的结构不同进行设计。

[0011]

[0012] 步骤1，将萘与甲氧基(环辛二烯)铱(I)二聚体，4,4'‑二叔丁基‑2,2'‑联吡啶和联硼酸嚬哪醇酯混合，加入溶剂环己烷，加热搅拌至反应结束，分离提纯得到化合物A；

[0013] 步骤2，将化合物A与高碘酸钠混合，加入体积比为4:1的THF和H2O的混合溶剂，搅拌30分钟后，加入1N HCl，室温搅拌至反应结束，分离提纯得到化合物B；

[0014] 步骤3，将化合物B与乙醛酸和吲哚啉混合，加入无水乙腈，在空气氛围下，室温搅拌至反应结束，分离提纯得到化合物C；

[0015] 步骤4，将化合物C与苯胺，硫氰酸铵和单质碘混合，加入二甲基亚砜，在空气氛围下，加热搅拌至反应结束，分离提纯得到化合物D；步骤5，将化合物D与催化量的亚甲基蓝混合，加入溶剂，在氧气氛围下，使用激光照射反应，分离提纯得到终产物E；

[0016] 其中，R1‑R8的定义通结构通式中的定义。

[0017] 步骤5中，所述溶剂选用氘代氯仿、二氯甲烷、氘水中的至少一种，优选为二氯甲烷。反应温度为4℃—‑30℃，反应时间为5‑8h，优选在0℃反应6h。

[0018] 步骤5中，所述的激光波长为400‑700nm，优选为630nm，功率为300mW、4W、10W、18W和40W，优选为18W。

[0019] 例如，化合物E1可采用如下路线合成：

[0020]

[0021] 化合物E1的合成包括以下步骤：

[0022] 步骤1，以1,4‑二甲基萘为起始原料，与甲氧基(环辛二烯)铱(I)二聚体，4,4'‑二叔丁基‑2,2'‑联吡啶和联硼酸嚬哪醇酯混合，加入溶剂环己烷，在60℃下搅拌18小时，使反应完成后，经柱层析分离得到化合物A1；

[0023] 步骤2，将化合物A1与高碘酸钠混合，加入溶剂THF∶H2O(v/v,4/1)，搅拌30分钟后，加入1N HCl，室温搅拌24小时，使反应完成后，经柱层析分离得到化合物B1；

[0024] 步骤3，将化合物B1与乙醛酸和吲哚啉混合，加入溶剂无水乙腈，在空气氛围下，室温搅拌24小时，使反应完成后，经柱层析分离得到化合物C1；

[0025] 步骤4，将化合物C1与对甲苯胺，硫氰酸铵和单质碘混合，加入溶剂二甲亚砜，在110℃空气氛围下，搅拌12小时。反应完成，经柱层析分离得到化合物D1；

[0026] 步骤5，将化合物D1与催化量亚甲基蓝混合，加入适量溶剂，在低温，氧气氛围下，使用630nm光照射反应5‑8h，反应完毕后，经柱层析分离得到最终产物E1。

[0027] 步骤1中，1,4‑二甲基萘，甲氧基(环辛二烯)铱(I)二聚体，4,4'‑二叔丁基‑2,2'‑联吡啶与联硼酸嚬哪醇酯的摩尔比为10:0.5:1:11，经柱层析纯化，展开剂为乙酸乙酯和正己烷，体积比为1:9。

[0028] 步骤2中，化合物A1与高碘酸钠的摩尔比为1:3，柱层析分离时，展开剂为二氯甲烷和甲醇，体积比为98:2。

[0029] 步骤3中，化合物B1，乙醛酸与吲哚啉的摩尔比为10:11:3，经柱层析纯化，展开剂为乙酸乙酯与正己烷，体积比为1:99

[0030] 步骤4中，化合物C1，对甲苯胺，硫氰酸铵与单质碘的摩尔比为1:1:2:1，经柱层析纯化，展开剂为乙酸乙酯与石油醚，体积比为1:9。步骤5中，化合物D1与亚甲基蓝的摩尔比为15:1，溶剂选用二氯甲烷，激光波长为630nm，功率为18W，在0℃下激光照射反应6h。经柱层析纯化，展开剂为二氯甲烷。

[0031] 本发明的有益效果在于：这类抑制β‑淀粉样蛋白聚集的单线态氧载体含有苯并噻唑基团和单线态氧载体两个功能性基团。苯并噻唑基团可选择性结合β‑淀粉样蛋白，提高体系靶向性的同时对β‑淀粉样蛋白的聚集进行抑制，降低其带来的神经毒性。体系中的单线态氧载体(内过氧化物)可在一定条件下释放单线态氧，单线态氧可氧化β‑淀粉样蛋白，进一步限制β‑淀粉样蛋白的聚集，降低毒性。该类载体在37℃下可以相对快速的释放出“储存的”单线态氧，从而抑制β‑淀粉样蛋白的聚集。对β‑淀粉样蛋白具有双重抑制效果，具有治疗β‑淀粉样蛋白聚集引起的相关疾病，缓解阿尔海默病等疾病的应用潜力。此外，该类载体的合成步骤较简单，且产率较高，适合大规模生产。

附图说明

[0032] 图1为目标化合物E1单线态氧释放的紫外吸收光谱图。

[0033] 图2为目标化合物E1与ThT的荧光光谱图。

[0034] 图3为目标化合物E1与β‑淀粉样蛋白和DNPH共存的紫外吸收光谱图。

[0035] 图4为Aβ诱导聚集和目标化合物E1以及对照品诱导Aβ解聚的TEM图像。

具体实施方式

[0036] 下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述，这些实施例仅是出于解释说明的目的，而不限制本发明的范围和实质。

[0037] 实施例1

[0038] 化合物A1的合成

[0039] 具体步骤如下：

[0040]

[0041] 甲氧基(环辛二烯)铱(I)二聚体(33.1mg,0.05mmol)，4,4'‑二叔丁基‑2,2'‑联吡啶(26.8mg,0.1mmol)，联硼酸嚬哪醇酯(279mg,1.1mmol)，和1,4‑二甲基萘(154μL,1.0mmol)加入到装有环己烷(3.8mL)溶液的圆底烧瓶中，在60℃下反应18小时。反应完毕，冷却至室温并在真空下浓缩，得到粗产物通过柱层析色谱纯化，使用Hexane∶EtOAc(1:9,v/
1
v)作为洗脱剂，分离纯化得到白色针状晶体化合物A1(272mg,96％)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.52(s,1H),7.96(d,J＝8.4Hz,1H),7.89(d,J＝8.4Hz,1H),7.21(d,J＝
8.4Hz,1H),7.17(d,J＝8.4Hz,1H),2.71(s,3H),2.63(s,3H),1.37(s,12H).

[0042] 实施例2

[0043] 化合物B1的合成

[0044]

[0045] 将化合物A1(500mg,1.77mmol)与高碘酸钠(1.136g,5.31mmol)加入到装有12.5mL THF∶H2O(4:1,v/v)溶剂的圆底烧瓶中先搅拌30min，然后加入HCl溶液(1N,1.24mL)。在室温下搅拌过夜，加水使反应猝灭，使用乙酸乙酯(40mL×3)萃取，合并有机层依次由水(20mL×3)和饱和食盐水(20mL×3)洗涤，有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并通过减压蒸馏除去溶剂。
得到的粗产物通过柱层析色谱纯化，使用DCM∶MeOH(98:2,v/v)作为洗脱剂。得到白色固体
1
化合物B1(326mg,92％)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.54(s,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,
1H),7.91(d,J＝8.4Hz,1H),7.25(d,J＝7.3Hz,1H),7.22(d,J＝7.2Hz,1H),2.65(s,3H),
2.60(s,3H).

[0046] 实施例3

[0047] 化合物C1的合成

[0048]

[0049] 将化合物B1(200mg,1mmol)和乙醛酸(0.21mL,1.05mmol)溶于5mL乙腈中，然后再加入30mol％吲哚啉(30μL,0.3mmol)。在室温下搅拌24小时，反应完成，通过减压蒸馏除去溶剂，得到的粗产物通过柱层析色谱纯化，使用Hexane∶EtOAc(99:1,v/v)作为洗脱剂。得到1
白色固体化合物C1(144mg，78％)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ10.20(s,1H),8.52(d,J＝1.7Hz,1H),8.11(d,J＝8.7Hz,1H),8.00(d,J＝8.8Hz,1H),7.37(d,J＝7.1Hz,1H),7.31
13
(d,J＝7.1Hz,1H),2.76(s,3H),2.69(s,3H)；C NMR(100MHz,Chloroform‑d)δ192.6,
135.9,134.3,133.4,132.7,132.2,131.0,129.6,127.5,125.9,122.5,19.4,19.3；HRMS‑+
ESI m/z calcd for C13H13O[M+H]185.0888,found 185.0965.

[0050] 实施例4

[0051] 化合物D1的合成

[0052]

[0053] 将化合物C1(184mg,1mmol)、对甲苯胺(107mg,1mmol)、硫氰酸铵(152mg,2mmol)和单质碘(360mg,1mmol)溶于3mL DMSO中，在110℃下搅拌12小时。通过TLC监测反应进程。反应完成后，将反应混合液冷却至室温并加入饱和Na2S2O3溶液使反应淬灭。使用乙酸乙酯(40mL×3)萃取，有机相用无水Na2SO4干燥过滤并通过减压蒸馏除去溶剂，得到的粗产物通过柱层析色谱纯化，使用PET∶EtOAc(9:1,v/v)作为洗脱液，得到淡黄色产物化合物D11
(242mg,80％)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.75(s,1H),8.25(d,J＝10.7Hz,1H),8.13(d,J＝8.8Hz,1H),8.03(d,J＝8.3Hz,1H),7.75(s,1H),7.35(d,J＝8.4Hz,1H),7.30(m,
13
2H),2.81(s,3H),2.72(s,3H),2.55(s,3H)；C NMR(100MHz,Chloroform‑d)δ167.6,
152.33,135.5,135.3,134.0,133.5,132.7,132.5,130.4,128.0,127.9,127.3,125.7,+
124.3,123.9,122.7,121.4,21.6,19.4,19.3；HRMS‑ESI m/z calcd for C20H17NS[M+H]
304.1082,found 304.1161.

[0054] 实施例5

[0055] 目标产物E1的合成

[0056]

[0057] 具体步骤如下：

[0058] 将化合物D1(300mg,1mmol)溶解在10mL DCM中。将反应混合物在冰浴中冷却至0℃。将催化量的亚甲基蓝加入溶液中，并将混合物在氧气氛围下搅拌6小时。反应期间，使用18W，630nm红光。通过旋转蒸发仪除去溶剂后，将粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，以DCM作为
1
洗脱剂。得到目标产物E1 330mg，产率99％。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.08(s,1H),
8.00‑7.93(m,2H),7.72(s,1H),7.43(d,J＝7.8Hz,1H),7.34(d,J＝8.1Hz,1H),6.76(d,J＝
13
8.0Hz,1H),6.73(d,J＝7.8Hz,1H),2.53(s,3H),2.02(s,3H),1.94(s,3H)；C NMR(100MHz,Chloroform‑d)δ165.5,151.3,142.5,141.1,138.4,138.0,134.6,131.5,127.0,125.3,
122.9,121.8,120.4,119.7,118.0,77.7,77.5,20.5,15.2,15.1.

[0059] 实施例6

[0060] 目标化合物E2的合成：

[0061]

[0062] 将化合物C1(184mg,1mmol)、对羟基苯胺(109mg,1mmol)、硫氰酸铵(152mg,2mmol)和单质碘(360mg,1mmol)溶于3mL DMSO中，在110℃下搅拌12小时。通过TLC监测反应进程。反应完成后，将反应混合液冷却至室温并加入饱和Na2S2O3溶液使反应淬灭。使用乙酸乙酯(40mL×3)萃取，有机相用无水Na2SO4干燥过滤并通过减压蒸馏除去溶剂，得到的粗产物通过柱层析色谱纯化，得到淡黄色产物化合物D2(259mg,85％)。HRMS‑ESI m/z calcd for +
C19H15NOS[M+H]305.0874,found 305.2938.

[0063] 将化合物D2(305mg,1mmol)溶解在10mL DCM中。将反应混合物在冰浴中冷却至0℃。将催化量的亚甲基蓝加入溶液中，并将混合物在氧气氛围下搅拌6.5小时。反应期间，使用10W，650nm红光。通过旋转蒸发仪除去溶剂后，将粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，得到目+标产物E2 320mg，产率95％。HRMS‑ESI m/z calcd for C19H15NO3S[M+H] 337.0773,found 
337.3901.

[0064] 实施例7

[0065] 目标化合物E3的合成：

[0066]

[0067] 将化合物C1(184mg,1mmol)、对三氟甲氧基苯胺(177mg,1mmol)、硫氰酸铵(152mg,2mmol)和单质碘(360mg,1mmol)溶于3mL DMSO中，在110℃下搅拌12小时。通过TLC监测反应进程。反应完成后，将反应混合液冷却至室温并加入饱和Na2S2O3溶液使反应淬灭。使用乙酸乙酯萃取，有机相用无水Na2SO4干燥过滤并通过减压蒸馏除去溶剂，得到的粗产物通过柱层析色谱纯化，得到淡黄色产物化合物D3(305mg,82％)。HRMS‑ESI m/z calcd for +
C20H14F3NOS[M+H]373.0748,found 373.4031.

[0068] 将化合物D3(373mg,1mmol)溶解在10mL DCM中。将反应混合物在冰浴中冷却至0℃。将催化量的亚甲基蓝加入溶液中，并将混合物在氧气氛围下搅拌6.5小时。反应期间，使用10W，650nm红光。通过旋转蒸发仪除去溶剂后，将粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，得到目+标产物E3 393mg，产率97％。HRMS‑ESI m/z calcd for C20H14F3NOS[M+H]405.0646,found 
405.1925.

[0069] 实施例8

[0070] 目标化合物E4的合成：

[0071]

[0072] 将化合物C1(184mg,1mmol)、对甲磺酰基苯胺(171mg,1mmol)、硫氰酸铵(152mg,2mmol)和单质碘(360mg,1mmol)溶于3mL DMSO中，在110℃下搅拌12小时。通过TLC监测反应进程。反应完成后，将反应混合液冷却至室温并加入饱和Na2S2O3溶液使反应淬灭。使用乙酸乙酯萃取，有机相用无水Na2SO4干燥过滤并通过减压蒸馏除去溶剂，得到的粗产物通过柱层析色谱纯化，得到淡黄色化合物D4(315mg,86％)。HRMS‑ESI m/z calcd for C20H17NO2S2[M++
H]367.0701,found 367.4501。

[0073] 将化合物D4(367mg,1mmol)溶解在10mL DCM中。将反应混合物在冰浴中冷却至0℃。将催化量的亚甲基蓝加入溶液中，并将混合物在氧气氛围下搅拌7小时。反应期间，使用4W，650nm红光。通过旋转蒸发仪除去溶剂后，将粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，得到目标产+
物E4 395mg，产率99％。HRMS‑ESI m/z calcd for C20H17NO4S2[M+H] 399.0599,found 
399.5908.

[0074] 实施例9

[0075] 目标化合物E5的合成：

[0076]

[0077] 甲氧基(环辛二烯)铱(I)二聚体(33.1mg,0.05mmol)，4,4'‑二叔丁基‑2,2'‑联吡啶(26.8mg,0.1mmol)，联硼酸嚬哪醇酯(279mg,1.1mmol)，和2‑苯基萘(204mg,1.0mmol)加入到装有环己烷(3.8mL)溶液的圆底烧瓶中，在60℃下反应18小时。反应完毕冷却浓缩，得到粗产物通过柱层析色谱纯化，分离纯化得到白色化合物A2(313mg,95％)。

[0078] 化合物B2的合成

[0079] 将化合物A2(584mg,1.77mmol)与高碘酸钠(1.136g,5.31mmol)加入到装有12.5mL THF∶H2O(4:1,v/v)溶剂的圆底烧瓶中先搅拌30min，然后加入HCl溶液(1N,1.24mL)。在室温下搅拌过夜，加水使反应猝灭，使用乙酸乙酯(40mL×3)萃取，合并有机层依次由水(20mL×3)和饱和食盐水(20mL×3)洗涤，有机相干燥过滤减压蒸除溶剂。得到的粗产物通过柱层析色谱纯化，得到白色固体化合物B2(417mg,95％)。

[0080] 化合物C2的合成

[0081] 将化合物B2(248mg,1mmol)和乙醛酸(0.21mL,1.05mmol)溶于5mL乙腈中，然后再加入30mol％吲哚啉(30μL,0.3mmol)。在室温下搅拌24小时，反应完成，减压蒸除溶剂，粗产物通过柱层析色谱纯化，得到白色固体化合物C2。

[0082] 将化合物C2(248mg,1mmol)、对甲基苯胺(107mg,1mmol)、硫氰酸铵(152mg,2mmol)和单质碘(360mg,1mmol)溶于3mL DMSO中，在110℃下搅拌12小时。反应完成后，将反应混合液冷却至室温并加入饱和Na2S2O3溶液使反应淬灭。使用乙酸乙酯萃取，有机相干燥过滤并减压蒸除溶剂，得到的粗产物通过柱层析色谱纯化，得到淡黄色化合物D5(309mg,88％)。+
HRMS‑ESI m/z calcd for C24H17NS[M+H]351.1082,found 351.5671。

[0083] 化合物E5的合成

[0084] 将化合物D5(351mg,1mmol)溶解在10mL DCM中。将反应混合物在冰浴中冷却至0℃。将催化量的亚甲基蓝加入溶液中，并将混合物在氧气氛围下搅拌7小时。反应期间，使用4W，650nm红光。通过旋转蒸发仪除去溶剂后，将粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，得到目标产+
物E5 375mg，产率98％。HRMS‑ESI m/z calcd for C24H17NO2S[M+H] 383.0980,found 
383.6651.

[0085] 实施例10

[0086] 目标化合物E6的合成：

[0087]

[0088] 合成方法参照实施例9，目标产物E6经质谱鉴定，HRMS‑ESI m/z calcd for +C21H19NO2S[M+H]349.1136,found 349.4023.

[0089] 实施例11

[0090] 目标化合物E7的合成：

[0091]

[0092] 合成方法参照实施例9，目标产物E7经质谱鉴定，HRMS‑ESI m/z calcd for +C17H10ClNO3S[M+H]343.0070,found 343.7230.

[0093] 实施例12

[0094] 目标化合物E8的合成：

[0095]

[0096] 合成方法参照实施例9，目标产物E8经质谱鉴定，HRMS‑ESI m/z calcd for +C19H16N2O4S[M+H]368.0831,found 368.6029.

[0097] 实施例13

[0098] 目标化合物E9的合成：

[0099]

[0100] 甲氧基(环辛二烯)铱(I)二聚体(33.1mg,0.05mmol)，4,4'‑二叔丁基‑2,2'‑联吡啶(26.8mg,0.1mmol)，联硼酸嚬哪醇酯(279mg,1.1mmol)，和2‑氨基萘(143mg,1.0mmol)加入到装有环己烷(3.8mL)溶液的圆底烧瓶中，在90℃下反应16小时。反应完毕冷却浓缩，得到粗产物通过柱层析色谱纯化，分离纯化得到白色化合物A6(263mg,98％)。

[0101] 化合物B6的合成

[0102] 将化合物A6(476mg,1.77mmol)与高碘酸钠(1.136g,5.31mmol)加入到装有12.5mL THF∶H2O(4:1,v/v)溶剂的圆底烧瓶中先搅拌30min，然后加入HCl溶液(1N,1.24mL)。在室温下搅拌过夜，加水猝灭反应，萃取洗涤，有机相干燥过滤减压蒸除溶剂。粗产物通过柱层析色谱纯化，得到白色固体化合物B6(317mg,96％)。

[0103] 化合物C6的合成

[0104] 将化合物B6(187mg,1mmol)和乙醛酸(0.21mL,1.05mmol)溶于5mL乙腈中，然后再加入30mol％吲哚啉(30μL,0.3mmol)。在室温下搅拌24小时，反应完成，减压蒸除溶剂，粗产物通过柱层析色谱纯化，得到白色固体化合物C6。

[0105] 将化合物C6(171mg,1mmol)、对丁基苯胺(149mg,1mmol)、硫氰酸铵(152mg,2mmol)和单质碘(360mg,1mmol)溶于3mL DMSO中，在110℃下搅拌14小时。反应完成后，却至室温并加入饱和Na2S2O3溶液淬灭反应。萃取有机相干燥过滤并减压蒸除溶剂，粗产物通过柱层析+色谱纯化，得到淡黄色化合物D9(295mg,89％)。HRMS‑ESI m/z calcd for C21H20N2S[M+H]
332.1347,found 332.9801。将化合物D9(332mg,1mmol)溶解在10mL DCM中。将反应混合物在冰浴中冷却至0℃。将催化量的亚甲基蓝加入溶液中，并将混合物在氧气氛围下搅拌8小时。反应期间，使用10W，700nm红光。通过旋转蒸发仪除去溶剂后，将粗产物通过硅胶柱色谱+
法纯化，得到目标产物E9 353mg，产率97％。HRMS‑ESI m/z calcd for C21H20N2O2S[M+H]
364.1245,found 364.7856.

[0106] 实施例14

[0107] 目标化合物E10的合成：

[0108]

[0109] 合成方法参照实施例13，目标产物E10经质谱鉴定，HRMS‑ESI m/z calcd for +C46H69NO16S[M+H]923.4337,found 923.8989.

[0110] 实施例15

[0111] 目标化合物E11的合成：

[0112]

[0113] 合成方法参照实施例13，目标产物E11经质谱鉴定，HRMS‑ESI m/z calcd for +C45H67NO17S[M+H]925.4130,found 925.4130.

[0114] 实施例16

[0115] 目标化合物E12的合成：

[0116]

[0117] 合成方法参照实施例13，目标产物E12经质谱鉴定，HRMS‑ESI m/z calcd for +C46H66F3NO17S[M+H]993.4004,found 993.5623.

[0118] 实施例17

[0119] 目标化合物E13的合成：

[0120]

[0121] 合成方法参照实施例13，目标产物E13经质谱鉴定，HRMS‑ESI m/z calcd for +C46H69NO18S2[M+H]987.3956,found 987.6059.

[0122] 实施例18

[0123] 目标化合物E14的合成：

[0124]

[0125] 甲氧基(环辛二烯)铱(I)二聚体(33.1mg,0.05mmol)，4,4'‑二叔丁基‑2,2'‑联吡啶(26.8mg,0.1mmol)，联硼酸嚬哪醇酯(279mg,1.1mmol)，和1,4‑二苯基萘(280mg,1.0mmol)加入到装有环己烷(5mL)溶液的圆底烧瓶中，在90℃下反应16小时。反应完毕冷却浓缩，得到粗产物通过柱层析色谱纯化，分离纯化得到白色化合物A8(402mg,99％)。

[0126] 化合物B8的合成

[0127] 将化合物A8(718mg,1.77mmol)与高碘酸钠(1.136g,5.31mmol)加入到装有12.5mL THF∶H2O(4:1,v/v)溶剂的圆底烧瓶中先搅拌30min，然后加入HCl溶液(1N,1.24mL)。在室温下搅拌过夜，加水猝灭反应，萃取洗涤，有机相干燥过滤减压蒸除溶剂。粗产物通过柱层析色谱纯化，得到白色固体化合物B8(544mg,95％)。

[0128] 化合物C8的合成

[0129] 将化合物B8(324mg,1mmol)和乙醛酸(0.21mL,1.05mmol)溶于5mL乙腈中，然后再加入30mol％吲哚啉(30μL,0.3mmol)。在室温下搅拌24小时，反应完成，减压蒸除溶剂，粗产物通过柱层析色谱纯化，得到白色固体化合物C8。

[0130] 将化合物C8(308mg,1mmol)、对甲磺酸基苯胺(171mg,1mmol)、硫氰酸铵(152mg,2mmol)和单质碘(360mg,1mmol)溶于3mL DMSO中，在110℃下搅拌14小时。反应完成后，却至室温并加入饱和Na2S2O3溶液淬灭反应。萃取有机相干燥过滤并减压蒸除溶剂，粗产物通过柱层析色谱纯化，得到淡黄色化合物D14(442mg,90％)。HRMS‑ESI m/z calcd for +
C30H21NO2S2[M+H]491.1014,found491.7563.

[0131] 将化合物D14(491mg，1mmol)溶解在10mL DCM中。将反应混合物在冰浴中冷却至0℃。将催化量的亚甲基蓝加入溶液中，并将混合物在氧气氛围下搅拌8小时。反应期间，使用10W，700nm红光。通过旋转蒸发仪除去溶剂后，将粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，得到目标+
产物E14 512mg，产率98％。HRMS‑ESI m/z calcd for C30H21NO4S2[M+H] 523.0912,found 
523.6502.

[0132] 实施例19

[0133] 目标化合物E15的合成：

[0134]

[0135] 合成方法参照实施例18，目标产物E15经质谱鉴定，HRMS‑ESI m/z calcd for +C30H21NO2S[M+H]459.1293,found 459.3659.

[0136] 实施例20

[0137] 目标化合物E16的合成：

[0138]

[0139] 合成方法参照实施例18，目标产物E16经质谱鉴定，HRMS‑ESI m/z calcd for +C29H19NO3S[M+H]461.1086,found 461.4368.

[0140] 实施例21

[0141] 目标化合物E17的合成：

[0142]

[0143] 合成方法参照实施例18，目标产物E17经质谱鉴定，HRMS‑ESI m/z calcd for +C30H18F3NO3S[M+H]529.0959,found 529.1905.

[0144] 实施例22

[0145] 单线态氧释放实验

[0146] 在37℃条件下，将目标化合物E1和DPBF(单线态氧捕获剂)溶于DMSO中，配制成500μM的目标化合物E1和50μM的DPBF的混合溶液。在黑暗条件下，以20分钟为间隔进行监测单线态氧被DPBF捕获的情况。如图1所示，不同时间的吸收光谱监测到在417nm处的吸光度随着时间的延长逐渐下降，揭示了目标化合物E1单线态氧的释放。

[0147] 实施例23

[0148] 将Aβ1‑42蛋白重新溶解在新鲜制备的氢氧化铵(20μL)中，并在使用前用50mM磷酸盐缓冲液(pH 7.4)将溶液进一步稀释至50μM。将Aβ1‑42蛋白(20μL，50μM，终浓度)与或不与化合物E1或D1(100μM)的混合物在37℃下孵育48小时。孵育后，用含有硫代黄素T(5μM)的50mM甘氨酸‑NaOH缓冲液(pH 8.0)将样品稀释至200mL，测定荧光光谱。如图2所示，荧光光谱监测到在483nm处荧光减弱，E1和Aβ1‑42蛋白的混合溶液在483nm处减弱的程度最大，揭示了目标化合物E1对β‑淀粉样蛋白的聚集抑制效果更佳。

[0149] 实施例24

[0150] 在冰浴中用三氯乙酸(TCA，终浓度为20％)溶液将化合物E1或D1预处理后的Aβ1‑42溶液(500μL，50μM)沉淀15分钟，然后通过离心(14 000rpm下5分钟)进行收集。之后，将400μL 10mM DNPH(2NHCl)的溶液添加到每个离心管中，并在室温下孵育1小时。然后，每个样品用20％TCA溶液再次沉淀，并用600μL的乙醇‑乙酸乙酯(1:1,v/v)溶液洗涤一次。然后将样品重新悬浮在盐酸胍溶液(600μL，6M，pH 2.3)中，在37℃下保持20分钟，然后通过紫外‑可见光谱(300–600nm)测量混合物。如图3所示，只有目标化合物E1和Aβ1‑42的混合溶液在370nm处有强吸收，揭示了目标化合物E1对β‑淀粉样蛋白的聚集有明细的抑制效果。

[0151] 实施例25

[0152] Aβ1–42蛋白储备液在使用前用10mM磷酸盐缓冲液(pH 7.4)稀释至100μM。为了测试抑制Aβ1–42的聚集实验，将Aβ1–42在存在和不存在化合物E1、化合物D1和姜黄素的情况下在37℃下孵育48小时。Aβ1–42和化合物的终浓度为25μM。将样品的等分试样(10μL)置于碳涂层铜/铑网格上，在室温下放置2分钟。每个网格用0.5％磷钨酸(PTA)溶液染色2分钟。去除多余的染色液，转移标本用透射电子显微镜成像。如图4所示，为Aβ诱导聚集和化合物诱导Aβ解聚的TEM图像：(a)25μM Aβ不孵育；(b)25μM Aβ在37℃下孵育48h；(c)25μM Aβ+25μM姜黄素在37℃下孵育48h；(d)25μM Aβ+25μM产物D1在37℃下孵育48h；(e)25μM Aβ+25μM目标产物E1在37℃下孵育48h。从图4可以看出：化合物D1和E1对β‑淀粉样蛋白的聚集都有抑制效果，化合物E1的抑制效果更佳，这与ThT测试结果相对应；此外，与标样姜黄素对比，化合物E1具有更优的抑制效果。

[0153] 实施例26

[0154] 其他化合物的性质以如下表格的形式给出，测试条件同实施例22和实施例23。

[0155]

[0156] 通过上述实验数据可以看出，目标化合物E3、E7、E9、E12和E17均能够产生活性氧，同时对Aβ1‑42蛋白具有明显抑制作用。