(±)-Marinopyrrole A衍生物及其制备方法和用途转让专利
申请号 : CN202111087070.1
文献号 : CN113717201B
文献日 : 2022-12-16
发明人 : 秦勇 , 宋灏 , 肖玉梅 , 何艳 , 廖瑜琳 , 王文静
申请人 : 植恩生物技术股份有限公司
摘要 :
权利要求 :
1.通式3所示的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,
其中,
1)X是S原子或‑S(O)2‑,R1不存在,R2为C1‑6烷基、被R3取代的C1‑6烷基、吡啶并[3,2‑D][1,
3]噻唑‑2‑基、噻唑‑2‑基、噻吩‑2‑基、苯并噻唑‑2‑基或噻唑并[4,5‑b]吡啶‑2‑基,R3为羟基、卤素、羧基或氨基;或者
2)X是N原子,R1和R2各自独立地为C1‑6烷基,或者R1和R2与它们所连接的N原子形成吗啉基、四氢吡咯基、硫代吗啉基、哌嗪基、1,2,4‑三氮唑基、4‑氧代‑1,5‑二氢‑吡唑并[3,4‑d]嘧啶‑4‑基或哌啶基,所述吗啉基、四氢吡咯基、硫代吗啉基、哌嗪基、1,2,4‑三氮唑基、4‑氧代‑1,5‑二氢‑吡唑并[3,4‑d]嘧啶‑4‑基或哌啶基任选地被R4取代,R4为羟基、卤素、C1‑6烷基、羧基、羧基取代的C1‑6烷基、氨基、氨基取代的C1‑6烷基、羟基取代的C1‑6烷基、苄基、苯基或吡啶‑4‑基。
2.权利要求1所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:
R4为羟基、卤素、C1‑4烷基、羧基、羧基取代的C1‑4烷基、氨基、氨基取代的C1‑4烷基、羟基取代的C1‑4烷基、苄基、苯基或吡啶‑4‑基。
3.权利要求1所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:R3为羧基、氨基或羟基。
4.权利要求1所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:R3为羧基或氨基。
5.权利要求1所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:R4为C1‑4烷基、羧基取代的C1‑4烷基、苄基或吡啶‑4‑基。
6.权利要求1所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:R4为苄基、羟基、氨基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、羧甲基、羧乙基、羧丙基、羟甲基、羟乙基、羟丙基、苯基或吡啶‑4‑基。
7.权利要求1所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:R4为苄基、异丁基、甲基、羧甲基或吡啶‑4‑基。
8.权利要求1、3或4所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:
X是S原子或‑S(O)2‑,R1不存在,R2为C1‑4烷基、被R3取代的C1‑4烷基、吡啶并[3,2‑D][1,3]噻唑‑2‑基、噻唑‑2‑基、噻吩‑2‑基、苯并噻唑‑2‑基或噻唑并[4,5‑b]吡啶‑2‑基,R3定义如权利要求1、3或4所述。
9.权利要求1、3或4所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:X是S原子或‑S(O)2‑,R1不存在,R2为吡啶并[3,2‑D][1,3]噻唑‑2‑基、噻唑‑2‑基、噻吩‑2‑基、苯并噻唑‑2‑基、噻唑并[4,5‑b]吡啶‑2‑基或被R3取代的C1‑6烷基,R3定义如权利要求1、3或4所述。
10.权利要求1、3或4所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:X是S原子或‑S(O)2‑,R1不存在,R2为吡啶并[3,2‑D][1,3]噻唑‑2‑基、噻唑‑2‑基、噻吩‑2‑基、苯并噻唑‑2‑基、噻唑并[4,5‑b]吡啶‑2‑基或被R3取代的C1‑4烷基,R3定义如权利要求1、3或4所述。
11.权利要求1、3或4所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:X是S原子或‑S(O)2‑,R1不存在,R2为甲基、乙基、正丙基、正丁基、吡啶并[3,2‑D][1,3]噻唑‑2‑基、噻唑‑2‑基、噻吩‑2‑基、苯并噻唑‑2‑基、噻唑并[4,5‑b]吡啶‑2‑基、被R3取代的甲基、被R3取代的乙基、被R3取代的正丙基或被R3取代的正丁基,R3定义如权利要求1、3或4所述。
12.权利要求1、3或4所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:X是S原子或‑S(O)2‑,R1不存在,R2为吡啶并[3,2‑D][1,3]噻唑‑2‑基、噻唑‑2‑基、噻吩‑2‑基、苯并噻唑‑2‑基、噻唑并[4,5‑b]吡啶‑2‑基、被R3取代的甲基、被R3取代的乙基、被R3取代的正丙基或被R3取代的正丁基,R3定义如权利要求1、3或4所述。
13.权利要求1所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:X是S原子或‑S(O)2‑,R1不存在,R2为吡啶并[3,2‑D][1,3]噻唑‑2‑基、噻唑‑2‑基、噻吩‑2‑基、苯并噻唑‑2‑基、噻唑并[4,5‑b]吡啶‑2‑基、3‑氨基丙基、2‑羟基乙基、3‑羟基丙基、羧甲基或羧乙基。
14.权利要求1、2、5、6或7所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:
X是N原子,R1和R2各自独立地为C1‑4烷基,或者R1和R2与它们所连接的N原子形成吗啉基、四氢吡咯基、硫代吗啉基、哌嗪基、1,2,4‑三氮唑基、4‑氧代‑1,5‑二氢‑吡唑并[3,4‑d]嘧啶‑4‑基或哌啶基,所述吗啉基、四氢吡咯基、硫代吗啉基、哌嗪基、1,2,4‑三氮唑基、4‑氧代‑1,5‑二氢‑吡唑并[3,4‑d]嘧啶‑4‑基或哌啶基任选地被R4取代,R4定义如权利要求1、2、
5、6或7所述。
15.权利要求1、2、5、6或7所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:X是N原子,R1和R2各自独立地为甲基、乙基、正丙基、正丁基,或者R1和R2与它们所连接的N原子形成吗啉基、四氢吡咯基、硫代吗啉基、哌嗪基、1,2,4‑三氮唑基、4‑氧代‑1,5‑二氢‑吡唑并[3,4‑d]嘧啶‑4‑基或哌啶基,所述吗啉基、四氢吡咯基、硫代吗啉基、哌嗪基、1,2,4‑三氮唑基、4‑氧代‑1,5‑二氢‑吡唑并[3,4‑d]嘧啶‑4‑基或哌啶基任选地被R4取代,R4定义如权利要求1、2、5、6或7所述。
16.权利要求1所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中:X是N原子,R1和R2各自独立地为甲基,或者R1和R2与它们所连接的N原子形成吗啉基、四氢吡咯基、硫代吗啉基、1‑苄基哌嗪基、1,2,4‑三氮唑‑1‑基、哌啶基、N‑异丁基哌嗪基、N‑甲基哌嗪基、哌嗪基、
1‑(4‑吡啶基)哌嗪基、4‑氧代‑1,5‑二氢‑吡唑并[3,4‑d]嘧啶‑4‑基或N‑(羧甲基)哌啶基。
17.权利要求1所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐,其中所述化合物选自:
18.药物组合物,包含至少一种权利要求1‑17任一项所述的化合物、外消旋体或药学上可接受的盐,以及一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。
19.制备权利要求1‑17任一项所述的式3所示化合物、外消旋体或药学上可接受的盐的方法,包括:使化合物2与式4所示的亲核试剂在非质子溶剂中反应,
其中R1和R2的定义如权利要求1‑17任一项所述。
20.权利要求19所述的方法,其中化合物2与式4所示的亲核试剂在非质子溶剂中,并且在碱的存在下反应。
21.权利要求20所述的方法,其中所述非质子溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈、二甲亚砜、N,N‑二甲基甲酰胺、N,N‑二乙基甲酰胺、N‑甲基吡咯烷酮、四氢呋喃、2‑甲基四氢呋喃或其任意组合。
22.权利要求20所述的方法,其中所述的碱为碳酸钾、碳酸铯、碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠、三乙胺或吡啶。
23.权利要求22所述的方法,其中所述的碱为碳酸钾。
24.权利要求1至17任一项所述的化合物、其外消旋体或其药学上可接受的盐在制备药物中的用途,其中所述的药物用于抗菌或用于治疗细菌感染或细菌感染引起的疾病。
25.权利要求24所述的用途,其中所述的细菌感染为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染,所述的细菌感染引起的疾病为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染引起的疾病。
26.权利要求25所述的用途,其中所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染引起的疾病为皮肤感染或软组织感染。
说明书 :
(±)‑Marinopyrrole A衍生物及其制备方法和用途
技术领域
背景技术
界范围内蔓延,每年至少有十万人因感染MRSA而住院治疗,由于其极广的传播途径,常见院内及社区内流行性爆发感染。由于其具有不均一耐药、广谱耐药、生长特殊、固有耐药及获得性耐药的特性,MRSA感染已经与乙型肝炎、获得性免疫缺陷综合征并列成为世界范围内
三大最难解决的感染性疾患,近年来还出现了社区型MRSA(Community‑associated MRSA,CA‑MRSA)和耐万古霉素(VRE)的相关报道,严重威胁公共卫生安全。因此,寻找开发对其具有高抗菌活性的药物成为了医疗卫生及药物开发领域的研究热点之一。
(Malina,S.I.;Andres,R.;Hartmut,L.Curr.Opin.Crit.Care 2005,11,481):(一)、糖肽类抗生素。糖肽类抗生素是目前治疗MRSA感染的主要药物,其代表药物有万古霉素
(vancomycin)、去甲万古霉素(norvancomycin)、替考拉宁(teicoplanin)、telavancin、
oritavancin和dalbavancin;(二)、噁唑烷酮类抗生素,该类抗生素的主要代表药物是利奈唑胺(linezolid)。该药物也是首个被批准用于临床的噁唑烷酮类抗生素(Prasad,J.V.N
.V.Curr.Opin.Microbiol.2007,10,454);(三)、β‑内酰胺类抗生素,该类抗生素是目前研究最多的一类抗MRSA感染药物,其代表药物包括ceftobiprole、ceftaroline等;(四)、脂肽类抗生素,其代表药物是达托霉素(daptomycin)。达托霉素独特的作用机制使得细菌对其
产生耐药性的可能性大大减低(Raja,A.;LaBonte,J.;Lebbos,J.;Kirkpatrick,P.,Nature Rev.Drug Discov.2003,2,943);(五)、甘氨酰四环素类,其代表药物是替加环素
(tigecycline);(六)、复方制剂。根据美国感染病学会(Infectious Diseases Society of America,IDSA)发布的成人与儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillinresistant
Staphylococus aureus,MRSA)感染治疗指南,针对不同类型、不同阶段的CA‑MRAS或皮肤及软组织感染(Skin and soft tissue infections,SSTI),指南都提出了建议的治疗方案,从给药种类上可以看出,建议使用的抗生素包括万古霉素、达托霉素、利奈唑胺、克林霉素、特万拉星等药物,根据临床症状,考虑联合用药或单剂用药(Clin Infect Dis.2011,52
(3):e18‑55)。
耐万古霉素MRSA个案的出现和各种药物毒副作用的逐渐显现,寻找具有新型骨架的抗MRSA
活性的药物候选物是近年来抗生素研究领域的重要方向之一。
洋放线菌CNQ‑418中提取分离得到,通过其在甲苯中高温消旋,得到(±)‑Marinopyrrole A,通过对其抗菌活性筛选,发现Marinopyrrole A有着非常丰富的生物活性,其抗耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)的活性十分突出,(‑)‑marinopyrrole A和(+)‑marinopyrrole A对MRSA的MIC90的分别为0.61μM和0.31μM(万古霉素的MIC90为0.14‑0.27μM),是具有良好药物开发前景的明星分子(William Fenical et al.Organic Lett.2008,10,629)。鉴于该
类天然产物具有如此重要的开发价值,自Marinopyrrole A被发现以来,它的合成以及生物活性备受关注,目前已经有许多课题组完成了对(±)‑Marinopyrrole A的全合成,其中一
些课题组还对其衍生物进行系列合成并完成了生物活性的进一步研究。
球菌(MRSE)、甲氧西林敏感菌(MSSA)和耐甲氧西林金葡菌(MRSA)等耐药菌株显示出低纳摩
尔抑制活性。
生素候选物(Mar.Drugs 2013,11,2927;CN101786979B)。
发明内容
疗细菌感染或细菌感染引起的疾病。
病。
某些实施方案中,本发明所述的细菌感染引起的疾病为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)
感染引起的疾病,例如皮肤感染,软组织感染等。
有机碱形成的盐。合适的酸加成盐的例子包括与盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、高氯酸、富马酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、羟基乙酸、甲酸、乳酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、扑酸、丙二酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、萘‑2‑磺酸、苯磺酸、羟基萘甲酸、氢碘酸、苹果酸、鞣酸等形成的盐。合适的碱加成盐的例子包括与钠、锂、钾、镁、铝、钙、锌、N,N'‑二苄基乙二胺、氯代普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、N‑甲基葡糖胺和普鲁卡因等形成的盐。用于制备本发明化合物的药学上可接受的盐的方法为本领域技术
人员已知的。本文中涉及到本发明化合物时,包括通式3所示化合物及其药学上可接受的
盐。
常规方法制备成各种剂型,包括但不限于片剂、胶囊、溶液、悬浮液、颗粒剂或注射剂等,经例如口服或非肠道等途径给药。
例如,本申请所述的“4‑10元杂芳基”含有1‑2个杂原子,例如至少具有一个氮原子,例如含有1个氮原子、氧原子或硫原子,或含有1个氮原子和1个氧原子。所述“4‑10元杂芳基”包括“5‑8元杂芳基”、“5‑7元杂芳基”、“5‑6元杂芳基”、“5‑10元含氮杂芳基”、“5‑7元含氮杂芳基”、“5‑8元含氮杂芳基”、“5‑6元含氮杂芳基”等,其中有些含氮杂芳基中的氮原子能够被氧化形成N‑氧化物。本领域技术人员能够识别这些能够形成N‑氧化物的含氮杂芳环基团。
所述“4‑10元杂芳基”例如具有5‑6个环成员。“4‑10元杂芳基”的典型实例包括但不限于咪唑基,三氮唑基、四氮唑基、吡啶基,嘧啶基,吡嗪基,苯并噻唑基,嘧啶基,苯并噁唑基,噻二唑基,苯并咪唑基,咪唑并吡啶基,噻唑基,1,5‑二氢‑吡唑并[3,4‑d]嘧啶基,4‑氧代‑1,5‑二氢‑吡唑并[3,4‑d]嘧啶‑4‑基等。
Pharmaceutical Sciences.Edited by Gennaro AR,19th ed.Pennsylvania:Mack
Publishing Company,1995),包括但不限于粘合剂、稀释剂、填充剂、崩解剂、润湿剂、润滑剂、着色剂、调味剂、增溶剂、渗透压调节剂或其它常规添加剂。典型的药学上可接受的载体和/或赋形剂包括例如微晶纤维素、淀粉、交连聚维酮、聚维酮、聚乙烯吡咯烷酮、麦芽糖醇、柠檬酸、十二烷基磺酸钠或硬脂酸镁等。
具体实施方式
度数据的样品经制备型HPLC( Prep Silica OBD 30×100mm)或重结晶纯化得
到。
(石油醚:乙酸乙酯(v:v)=8:1)纯化得淡黄色粉末化合物3‑4(26.4mg,82%),取其中部分
TM
样品进一步由正相制备型HPLC(Prep Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/
min,温度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=95:5-93:7-90:10)纯化用于采集图谱及测定纯
度数据。纯度=99.7791%;IR:(neat):νmax=3097,2971,2860,1636,1594,1481,1410,
–1 1
1332,1310,1170,1129,1066,948,864,737cm ;H NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ12.57(s,
1H),11.03(s,1H),10.89(s,1H),8.10(d,J=8.0Hz,1H),7.83(d,J=8.0Hz,1H),7.34(d,J
=8.4Hz,1H),7.31(s,1H),7.22(s,1H),6.99(d,J=8.4Hz,1H),6.95(s,1H),3.49–3.38(m,
13
4H),2.96–2.92(m,2H),2.59–2.56(m,2H);C NMR(150MHz,Acetone‑d6)δ186.0,185.9,
161.6,160.9,143.7,136.2(q,J=39.45Hz),135.9(q,J=39.6Hz),133.7,133.0,131.2,
126.0,124.8,124.5,124.5(q,J=270Hz),124.4,123.8,124.2(q,J=271.5Hz),120.8,
‑
116.4,116.2,115.3,114.9,110.6,106.6,67.2,67.2,51.1,51.1;HRMS(m/z):[M‑H]
‑
calcd.For C28H17Cl3F6N3O5 ,694.0143;found,694.0130。
(182mg,90%,纯度=99.3261%)。IR:(neat):νmax=3264,2924,1636,1591,1499,1410,
–1 1
1335,1169,1130,965,848,927,865cm ;H NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ12.52(s,1H),11.13(s,1H),10.73(s,1H),8.08(d,J=8.0Hz,1H),7.80(d,J=8.4Hz,1H),7.33(d,J=8.8Hz,
13
1H),7.30(s,1H),7.23(s,1H),6.99(d,J=8.0Hz,1H),6.91(s,1H),2.46(s,6H);C NMR
(150MHz,Acetone‑d6)δ185.6,185.3,161.7,160.8,145.9,136.0(q,J=29.25Hz),135.7
(q,J=29.25Hz),133.5,133.5,132.8,125.2,124.8,124.7,124.5(q,J=270Hz),124.3(q,
J=270Hz),124.1,124.1,120.5,116.3,116.1,115.3,114.8,110.5,105.8,41.9,41.9;
‑ ‑
HRMS(m/z):[M‑H]calcd.For C26H15Cl3F6N3O4 ,652.0038;found,652.0038。
乙酸乙酯(v:v)=10:1-3:1)纯化得淡黄色粉末化合物3‑6(41.6mg,69%),取其中部分样
TM
品进一步由正相制备型HPLC(Prep Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,
温度:25℃,流动相:正己烷:异丙醇(v:v)=90:10-85:15-80:20)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度:96.0824%;IR:(neat):νmax=2924,2857,1638,1605,1414,1333,1173,–1 1
1136,1068,946,929,868cm ;H NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ10.88(s,1H),8.19(d,J=
8.0Hz,1H),7.83(d,J=8.0Hz,1H),7.76(d,J=8.0Hz,1H),7.54(d,J=8.0Hz,1H),7.45–
13
7.40(m,2H),7.36–7.31(m,2H),7.25(s,1H),7.15(s,1H),6.93(d,J=8.0Hz,1H);C NMR
(100MHz,Acetone‑d6)δ187.2,184.2,165.1,161.7,159.2,154.5,136.6(q,J=33Hz),
136.5,135.4(q,J=32Hz),135.0,134.1,131.8,127.3,125.9,125.7,125.6,124.8,124.7,
124.4,124.3(q,J=270Hz),124.2(q,J=270Hz),122.9,122.9,122.2,121.1,120.5,
‑ ‑
116.6,116.3,115.6,114.6,111.2;HRMS(m/z):[M‑H] calcd.For C31H13Cl3F6N3O4S2 ,
773.9323;found,773.9315。
Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=
90:10-85:15-80:20)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度:99.3917%;IR:(neat):
νmax=3235,2962,1635,1590,1494,1478,1410,1337,1168,1127,1065,861,786,739,705,
–1 1
683cm ;H NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ12.45(s,1H),11.28(s,1H),10.38(s,1H),7.98(d,J=8.0Hz,1H),7.66(d,J=8.0Hz,1H),7.29(d,J=8.0Hz,1H),7.25(d,J=12.0Hz,2H),7.00
13
(d,J=8.0Hz 1H),6.88(s,1H),3.19–3.12(m,2H),2.88–2.84(m,2H),1.84–1.67(m,4H);C NMR(150MHz,Acetone‑d6)δ185.0,183.3,161.7,159.7,144.9,135.5(q,J=30Hz),135.3
(q,J=30Hz),133.1,132.1,126.2,126.1,125.2,125.0,125.0,124.5(q,J=270Hz),124.4
(q,J=270Hz),124.1,120.9,116.3,116.1,115.1,114.4,111.5,102.4,50.9,50.9,26.3,
‑ ‑
26.3;HRMS(m/z):[M‑H]calcd.For C29H19Cl3F6N3O4 ,692.0351;found,692.0345。
1-3:1)纯化得淡黄粉末化合物3‑8(40.6mg,72%),取其中部分样品进一步由正相制备型
TM
HPLC(Prep Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,流动相:正己烷:异丙醇(v:v)=90:10-85:15-80:20)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度:
99.6474%;IR:(neat):νmax=2960,1638,1603,1506,1406,1334,1173,11301,1055,1014,–1 1
946,791cm ;H NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ12.59(s,1H),10.88(s,1H),10.18(s,1H),8.09(d,J=8.0Hz,1H),7.63(d,J=8.0Hz,1H),7.61(d,J=4.0Hz,1H),7.53(d,J=4.0Hz,1H),
13
7.37(d,J=8.0Hz,1H),7.34(s,1H),7.19(s,1H),7.16(s,1H),7.02‑6.99(m,1H);C NMR
(150MHz,Acetone‑d6)δ187.1,184.0,161.7,161.5,159.0,144.4,136.7(q,J=33Hz),
135.4(q,J=33Hz),134.1,134.0,131.8,127.3,125.9,125.8,124.9,124.4(q,J=270Hz),
124.3,124.3(q,J=270Hz),123.8,122.9,121.5,120.7,116.3,116.3,115.5,114.6,
‑ ‑
111.0;HRMS(m/z):[M‑H]calcd.For C27H11Cl3F6N3O4S2 ,723.9166;found,723.9161。
得淡黄色粉末化合物3‑9(54.5mg,81%),取其中部分样品进一步由正相制备型HPLC(Prep TM
Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=
95:5-93:7-90:10)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度:98.6780%;IR:(neat):νmax–1 1
=3230,2972,1636,1596,1505,1406,1333,1170,1129,1066,944,866,737,701cm ;H NMR
(400MHz,Acetone‑d6)δ12.64(s,1H),10.92(s,1H),10.18(s,1H),8.02(d,J=8.4Hz,1H),
7.63(d,J=8.0Hz,1H),7.53(dd,J=5.2,2.0Hz,1H),7.32(t,J=2.8Hz,2H),7.18(s,1H),
13
7.03(s,1H),6.95(s,1H),6.94(d,J=2.8Hz,1H),6.93–6.91(m,1H);C NMR(100MHz,
Acetone‑d6)δ187.0,184.6,161.8,159.5,136.5(q,J=32.4Hz),135.5(q,J=32.1Hz),
135.1,134.0,132.5,132.2,131.9,131.1,130.0,128.9,128.5,125.6,125.5,124.4(q,J=
270.6Hz),124.3(q,J=270.5Hz),124.3,122.0,121.6,121.0,116.5,116.1,115.5,114.7,
‑ ‑
111.2;HRMS(m/z):[M‑H]calcd.For C28H12Cl3F6N2O4S2 ,722.9214;found,722.9203。
–1 1
IR:(neat):νmax=2924,1333,2173,1134,749cm ;H NMR(400MHz,Methanol‑d4)δ7.67(d,J=8.0Hz,1H),7.62(d,J=8.0Hz,1H),7.25–5.23(m,2H),7.13(s,1H),6.93(d,J=8.0Hz,
1H),6.62(s,1H),3.19‑3.14(m,2H),2.95–1.90(m,2H),2.48–2.43(m,2H),2.32–2.29(m,
13
2H);C NMR(100MHz,Methanol‑d4)δ185.5,185.4,160.0,159.2,146.2,136.2(q,J=
30Hz),135.4(q,J=30Hz),132.8,132.1,128.5,127.5,126.4,125.9,125.6,125.6,125.0
(q,J=270Hz),124.7(q,J=270Hz),124.2,121.2,116.5,114.7,114.6,111.6,107.8,
‑ ‑
53.7,53.7,28.7,28.7;HRMS(m/z):[M‑H] calcd.For C28H17Cl3F6N3O4S ,709.9915;found,
709.9909。
–1 1
(neat):νmax=2904,1674,1594,11332,1310,962,740cm ;H NMR(400MHz,Methanol‑d4)δ
7.67(d,J=8.0Hz,1H),7.63(d,J=8.0Hz,1H),7.32–7.27(m,5H),7.23(d,J=8.0Hz,2H),
7.11(s,1H),6.91(d,J=8.0Hz,1H),6.61(s,1H),3.52(s,2H),3.03–3.00(m,2H),2.76–
13
2.72(m,2H),2.36–2.30(m,4H);C NMR(150MHz,Methanol‑d4)δ185.5,185.3,160.1,
159.3,145.2,137.7,136.2(q,J=30Hz),135.4(q,J=30Hz),132.9,132.2,130.7,129.4,
128.7,128.4,127.3,126.1,126.1,125.8,125.6,125.0(q,J=270Hz),124.8(q,J=
270Hz),124.3,121.6,121.4,116.5,116.3,114.7,114.7,111.4,107.3,63.8,54.0,54.0,
‑ ‑
50.6,50.6;HRMS(m/z):[M‑H]calcd.For C35H24Cll3F6N4O4 ,783.0773;found,783.0775。
纯化得黄色粉末化合物3‑12(33.8mg,81%)。取其中部分样品进一步由正相制备型HPLC
TM
(Prep Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,正己烷:异丙醇=90:10-85:15-80:20)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度:99.1410%;IR:
–1 1
(neat):νmax=3255,1638,1605,1504,1400,1330,1127,1066,946,869,725cm ;H NMR
(400MHz,Acetone‑d6)δ12.50(s,1H),10.74(s,1H),10.08(s,1H),8.04(dd,J=5.2,1.6Hz,
1H),7.94(d,J=8.8Hz,1H),7.78(d,J=8.0Hz,1H),7.58(dd,J=4.0,1.6Hz,1H),7.32(s,
13
1H),7.30(s,1H),7.22–7.17(m,2H),7.10(s,1H),7.08(d,J=8.0Hz,1H);C NMR(100MHz,
Acetone‑d6)δ188.0,184.6,161.4,159.5,142.4,137.0,136.8(q,J=31.6Hz),135.4(q,J
=32.2Hz),135.4,134.3,134.2,132.0,131.9,129.0,126.8,126.0,124.8,124.4(q,J=
271Hz),124.3(q,J=270Hz),123.8,121.7,120.9,119.6,116.6,116.3,115.6,114.8,
‑ ‑
112.5;HRMS(m/z):[M‑H]calcd.For C28H12Cl3F6N2O6S2 ,754.9112;found,754.9102。
0.2eq)溶于25mL干燥的DMSO中,于100℃反应,得到粗品。粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯(v:v)=4:1-1:1)纯化得淡黄色粉末化合物3‑13(16.0mg,25%),取其中部分样品进
TM
一步由正相制备型HPLC(Prep Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温
度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=90:10-85:15-80:20)纯化用于采集图谱及测定纯度数
据。纯度:99.3317%;IR:(neat):νmax=3128,1735,1637,1603,1505,1331,1170,1126,
–1 1
1066,1003,946,866,781cm ;H NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ12.44(s,1H),10.76(s,1H),
10.11(s,1H),8.62(s,1H),8.13(s,1H),7.94(d,J=8.0Hz,1H),7.90(d,J=8.4Hz,1H),
13
7.33(s,1H),7.31(s,1H),7.20(s,1H),7.16(s,1H),7.10(d,J=8.0Hz,1H);C NMR
(100MHz,Acetone‑d6)δ186.9,184.3,161.3,159.7,154.2,148.0,136.5(q,J=32.0Hz),
135.7(q,J=33.0Hz),133.7,134.2,132.1,129.9,129.7,128.5,125.9,125.7,124.8,
‑
123.1,120.1,120.3,116.5,116.3,115.3,114.9,111.6,111.4;HRMS(m/z):[M‑H]
‑
calcd.For C26H11Cl3F6N5O4 ,675.9786;found,675.9780。
得红色粉末化合物3‑14(43.1mg,80%),取其中部分样品进一步由正相制备型HPLC(Prep
TM
Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=
90:10-85:15-80:20)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度:99.4094%;IR:(neat):
–1 1
νmax=2929 1637,1593,1483,1412,1337,1177,1135.79,1068,1028,949,864,797cm ;H
NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ12.52(s,1H),11.07(s,1H),8.09(d,J=8.0Hz,1H),7.82(d,J=
8.0Hz,1H),7.34(d,J=8.0Hz,1H),7.31(s,1H),7.23(s,1H),6.96(d,J=8.0Hz,1H),6.96
13
(s,1H),2.91–2.86(m,1H),2.57–2.52(m,2H),1.39–1.29(m,7H);C NMR(150MHz,Acetone‑d6)δ186.1,185.6,161.6,161.3,145.6,136.1(q,J=30Hz),135.8(q,J=30Hz),133.6,
133.0,125.6,124.9,124.8,124.5(q,J=270Hz),124.4,124.3(q,J=270Hz),124.1,
123.5,120.7,116.4,116.0,115.3,114.8,110.7,106.3,52.0,52.0,26.6,26.6,24.4;HRMS
‑ ‑
(m/z):[M‑H]calcd.For C28H17Cl3F6N3O4 ,678.0194;found,678.0181。
得淡黄色粉末化合物3‑15(113mg,49%),取其中部分样品进一步由正相制备型HPLC(Prep TM
Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=
90:10-85:15-75:25)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度:98.1727%;IR:(neat):
–1 1
νmax=2927,2853,1636,1593,1481,1411,1331,1171,1128,1067,863cm ;H NMR(600MHz,
Acetone‑d6)δ8.06(d,J=8.4Hz,1H),7.99(d,J=8.4Hz,1H),7.30(d,J=8.4Hz,1H),7.25
(s,1H),7.16(s,1H),6.97(d,J=7.8Hz,1H),6.91(m,1H),3.19(m,2H),3.00(m,2H),2.75
13
(m,4H),2.56(m,2H),1.98(m,1H),0.92(d,J=6.6Hz,6H);C NMR(100MHz,Acetone‑d6)δ
185.9,184.3,161.6,160.5,144.1,136.7,135.7(q,J=32Hz),135.3(q,J=32Hz),135.2,
133.8,133.6,126.5,124.9,124.7,124.6(q,J=270Hz),124.5(q,J=270Hz),122.7,
121.6,116.2,116.0,115.2,115.2,110.3,106.7,66.5,54.4,54.4,49.3,25.2,25.2,20.6,
‑ ‑
20.6;HRMS(m/z):[M‑H]calcd.For C32H26Cl3F6N4O4S ,749.0929;found,749.0933。
DMF作为溶剂,参考通用合成方法制备得到粗品。粗品用硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯(v:
v)=10:1-3:1)纯化得淡黄色粉末化合物3‑35(41.6mg,69%),取其中部分样品进一步由
TM
正相制备型HPLC(Prep Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,流动相:正己烷:异丙醇(v:v)=90:10-85:15-80:20)纯化用于采集图谱及测定纯度数
据。纯度:96.0824%;IR:(neat):νmax=2924,2857,1638,1605,1414,1333,1173,1136,
–1 1
1068,946,929,868cm ;H NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ10.88(s,1H),8.19(d,J=8.0Hz,
1H),7.83(d,J=8.0Hz,1H),7.76(d,J=8.0Hz,1H),7.54(d,J=8.0Hz,1H),7.45–7.40(m,
13
2H),7.36–7.31(m,2H),7.25(s,1H),7.15(s,1H),6.93(d,J=8.0Hz,1H);C NMR(100MHz,
Acetone‑d6)δ187.2,184.2,165.1,161.7,159.2,154.5,136.6(q,J=33Hz),136.5,135.4
(q,J=32Hz),135.0,134.1,131.8,127.3,125.9,125.7,125.6,124.8,124.7,124.4,124.3
(q,J=270Hz),124.2(q,J=270Hz),122.9,122.9,122.2,121.1,120.5,116.6,116.3,
‑ ‑
115.6,114.6,111.2;HRMS(m/z):[M‑H]calcd.For C31H13Cl3F6N3O4S2 ,773.9323;found,
773.9315。
全,向反应液中加入饱和Na2S2O3水溶液淬灭,二氯甲烷萃取(3×20mL),无水硫酸钠干燥,抽滤浓缩得到粗品,粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯(v:v)=8:1-4:1)纯化得黄色粉末
TM
化合物3‑16(28.1mg,30%),取其中部分样品进一步由正相制备型HPLC(Prep Silica OBD
5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=90:10-85:
15-80:20)纯化用于采集图谱及测定纯度数据,纯度:98.4919%。
8.0Hz,1H),7.93–7.90(m,1H),7.74(d,J=8.0Hz,1H),7.67–7.63(m,2H),7.32(m,2H),7.21
13
(s,1H),7.16(s,1H),7.10(d,J=12.0Hz,1H);C NMR(150MHz,Acetone‑d6)δ188.0,184.7,
166.8,161.5,160.0,153.4,137.8,136.9(q,J=30Hz),136.1,135.7(q,J=30Hz),134.4,
132.3,129.3,128.8,128.5,126.5,126.0,125.3,124.7,124.4(q,J=270Hz),124.3(q,J=
271Hz),123.9,123.8,123.4,121.3,119.5,116.7,116.3,115.6,114.9,113.1;HRMS(m/z):
‑ ‑
[M‑Na]calcd.For C31H13Cl3F6N3O6S2 ,805.9221;found,805.9214。
–1 1
(neat):νmax=2978,1484,1316,1130,1066,861,707cm ;H NMR(400MHz,Methanol‑d4)δ
7.70(t,J=8.0Hz,2H),7.22(d,J=8.0Hz,2H),7.12(s,1H),6.94(d,J=8.0Hz,1H),6.64
13
(s,1H),3.10‑3.07(m,2H),2.87‑2.86(m,2H),2.45–2.40(m,4H),2.34(s,3H);C NMR
(150MHz,Methanol‑d4)δ185.5,185.2,160.0,159.4,144.8,135.9(q,J=30Hz),134.2(q,J=30Hz),133.1,133.1,132.3,132.3,128.3,128.3,127.5,126.7,125.7,123.9,123.9,
‑
116.4,116.4,115.1,114.7,111.3,107.4,55.8,55.8,50.1,50.1,45.7;HRMS(m/z):[M‑H]
‑
calcd.For C29H20Cl3F6N4O4 ,707.0460;found,707.0486。
18(35mg,41%),取其中15mg经制备板纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度:
99.3992%;IR:(neat):νmax=2927,2856,1638,1605,1505,1414,1384,1329,1170,1129,
–1 1
1067,944,928,867,782cm ;H NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ10.9(s,1H),8.55(dd,J=4.4,
1.2Hz,1H),8.31(dd,J=8.0,1.2Hz,1H),8.18(d,J=8.4Hz,1H),7.58(d,J=8Hz,1H),7.39
(d,J=8.4Hz,1H),7.35(s,1H),7.33‑7.29(m,1H),7.26(s,1H),7.13(s,1H),6.95(d,J=
13
8.4Hz,1H);C NMR(100MHz,Acetone‑d6)δ187.3,184.0,170.9,165.0,161.7,159.2,
148.9,136.6(q,J=32Hz),135.6,135.2(q,J=32Hz),134.2,132.1,131.4,130.4,127.7
(q,J=196Hz),127.5(q,J=195Hz),126.4,125.7,125.0,124.7,124.6,124.4,123.0,
‑
120.7,120.6,116.5,116.2,115.6,115.0,111.0;HRMS(m/z):[M‑H] calcd.For
‑
C30H12Cl3F6N4O4S2 ,774.9275;found,774.9276。
为亲核试剂,DMF作为溶剂,参考通用合成方法制备得到粗品。粗品用硅胶柱层析(石油醚:
乙酸乙酯(v:v)=8:1)纯化得淡黄色粉末化合物3‑29(46.0mg,74%);IR:(neat):νmax=
3119.39,2979.28,2934.62,1681.17,1637.17,1595.35,1505.36,1405.48,1332.02,
–1 1
1305.32,1230.00,1128.56,1165,41,944.45,865.73,782.53,738.33,574.78cm ;H NMR
(400MHz,Acetone‑d6)δ12.6(s,1H),10.96(s,1H),10.1(s,1H),8.07(d,J=8.0Hz,1H),
7.64(d,J=8.0Hz,1H),7.35‑7.32(m,2H),7.16(s,1H),7.04(s,1H),6.94(d,J=8.0Hz,
1H),3.00(q,J=20Hz,2H),2.70–2.65(m,1H),2.55–2.50(m,1H),1.56–1.46(m,2H),1.40–
13
1.38(m,12H);C NMR(150MHz,Acetone‑d6)δ186.7,184.6,161.7,159.3,156.7,136.3(q,J=30Hz),135.3(q,J=30Hz),134.0,132.4,132.4,131.9,126.0,125.8,125.6,124.5,
124.4(q,J=270Hz),124.4(q,J=270Hz),122.4,122.0,120.7,116.4,116.0,115.4,
‑
114.5,110.8,78.6,39.5,33.7,30.9,28.6,28.6,28.6;HRMS(m/z):[M‑H] calcd.For
‑
C32H256Cl3F6N3O6S ,798.0439;found,798.0429。
TM
68%),取部分样品进一步用正相制备型HPLC(Prep Silica OBD 5μm,30×100mm column,
流速:25mL/min,温度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=80:20-75:25-70:30)纯化用于采集图谱及测定纯度。纯度:100.0000%;IR:(neat):νmax=2961,1958,1507,1407,1332,1258,–1 1
1068,1014,945,867,796cm ;H NMR(400MHz,Methanol‑d4)δ7.92(d,J=8.0Hz,1H),7.72
(d,J=8.0Hz,1H),7.12–7.10(m,2H),7.07(s,1H),6.95(d,J=8.0Hz,1H),6.85(s,1H),
13
2.81–2.78(m,2H),2.66–2.65(m,2H),1.75–1.71,(m,2H);C NMR(150MHz,Methanol‑d4)δ
187.0,184.3,160.4,160.0,135.8(q,J=30Hz),135.2(q,J=30Hz),134.5,133.9,133.1,
130.7,130.3,129.52,127.2,127.1,125.3,125.2(q,J=270Hz),124.9(q,J=270Hz),
‑
122.0,120.2,116.8,115.9,115.0,114.96,111.3,39.0,32.3,28.3;HRMS(m/z):[M‑H]
‑
calcd.For C27H17Cl3F6N3O4S ,697.9915;found,697.9910。
10:1-2:1)纯化得淡黄色粉末化合物3‑30(80.1mg,72%);IR:(neat):νmax=2977,1688,–1 1
1637,1600,1505,1406,1332,1168,1130,1066,944,866,738cm ;H NMR(600MHz,Acetone‑
d6)δ12.58(s,1H),10.96(s,1H),10.08(s,1H),8.05(d,J=7.8Hz,1H),7.62(d,J=7.8Hz,
1H),7.34(d,J=8.4Hz,1H),7.32(s,1H),7.16(s,1H),7.06(s,1H),6.96(d,J=7.8Hz,1H),
13
5.96(s,1H),3.09‑3.00(m,2H),2.81‑2.77(m,1H),2.64‑2.59(m,1H),1.37(s,9H);C NMR(150MHz,Acetone‑d6)δ186.6,184.5,161.7,159.2,156.3,136.3(q,J=32.4Hz),135.2(q,J=32.6Hz),133.9,132.5,131.9,131.8,127.1,126.0,125.7,124.4,124.4(q,J=270Hz),
124.3(q,J=271.5Hz),122.3,122.0,120.7,116.4,116.1,115.5,114.5,110.9,79.0,
‑ ‑
41.0,35.8,28.5,28.5,28.5;HRMS(m/z):[M‑H] calcd.For C31H22Cl3F6N3O6S ,784.0283;
found,784.0269。
(8.99mg,13%),取其中部分样品进一步由正相制备型HPLC(Prep Silica OBD 5μm,30×
100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=85:15-80:20-75:25)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度=99.8986%;IR:(neat):νmax=2936,1601,1506,–1 1
1408,1331,1170,1128,944,866,738cm ;H NMR(600MHz,Methanol‑d4)δ7.74(d,J=
8.4Hz,1H),7.67(d,J=8.4Hz,1H),7.15(s,1H),7.14(s,1H),7.05(s,1H),6.94(d,J=
13
7.8Hz,1H),6.84(s,1H),2.98–2.89(m,2H),2.87–2.76(m,2H);C NMR(150MHz,Methanol‑d4)δ186.8,184.4,160.0,159.3,135.9(q,J=32.55Hz),135.2(q,J=32.1Hz),134.7,
133.0,132.8,129.5,129.0,127.4,126.6,125.1(q,J=271.5Hz),124.9(q,J=271.5Hz),
124.0,122.5,121.9,120.7,116.2,115.9,115.5,114.9,111.3,40.5,33.7;HRMS(m/z):[M‑‑ ‑
H]calcd.For C26H15Cl3F6N3O4S ,683.9759;found,683.9748。
剂,参考通用合成方法制备得到粗品。粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇(v:v)=20:1)纯
化得黄色粉末化合物3‑21(31.2mg,58%),取其中30mg加入5mL甲醇重结晶,得到13mg淡黄色纯品以及17mg母液,采集图谱并测定纯度数据。纯品纯度:99.2190%;IR:(neat):νmax=–1 1
2849,1595,1578,1474,1377,1342,1006,860cm ;H NMR(400MHz,Methanol‑d4)δ7.99(d,J=8.0Hz,1H),7.73(d,J=8.0Hz,1H),7.17–7.15(m,2H),7.10(s,1H),6.98(d,J=8.4Hz,
13
1H),6.72(s,1H),3.29‑3.16(m,4H),2.93–2.85(m,4H);C NMR(150MHz,Methanol‑d4)δ
185.9,184.7,160.2,159.9,144.2,135.5(q,J=30Hz),135.4(q,J=30Hz),134.0,132.7,
132.7,129.9,128.7,127.9,126.3,125.2(q,J=270Hz),125.0(q,J=270Hz),124.9,
122.4,116.5,116.1,115.3,114.8,110.9,107.6,48.7,48.7,45.6,45.6;HRMS(m/z):[M‑
‑ ‑
H]calcd.For C28H18Cl3F6N4O4 ,693.0303;found,693.0301。
纯度=99.6606%;IR:(neat):νmax=2925,1645,1474,1331,1221,1121,941,926,873cm ;
1
H NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ8.29(d,J=8Hz,1H),8.05(d,J=7.6Hz,3H),7.29–7.24(m,
4H),7.16(s,1H),7.09(s,1H),6.99(d,J=8.8Hz,1H),3.79(d,J=4.8Hz,4H),2.96(d,J=
13
5.2Hz,4H);C NMR(100MHz,Acetone‑d6)δ187.8,183.0,161.5,160.0,156.8,144.01,
136.4(q,J=32Hz),134.8(q,J=32Hz),134.7,134.7,134.2,132.3,131.5,130.3,128.7,
125.0(q,J=270Hz),124.6,124.4(q,J=271Hz),124.2,121.4,118.4,117.1,116.2,
‑
115.3,114.3,109.8,109.67,108.4,108.4,49.5,49.5,46.3,46.3;HRMS(m/z):[M‑H]
‑
calcd.For C33H21Cl3F6N5O4S ,770.0569;found,770.0601。
4:1‑3:1)纯化得黄色粉末化合物3‑31(40.3mg,72%),取其中部分样品进一步由正相制备型HPLC(Prep Silica OBDTM 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,流动相:
正己烷:异丙醇(v:v)=90:10-85:15-80:20)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度:
–1
99.8935%;IR:(neat):νmax=2924,1637,1598,1506,1407,1333,1171,1129,944,866cm ;
1H NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ12.6(s,1H),10.96(s,1H),10.14(s,1H),8.06(d,J=8.0Hz,
1H),7.63(d,J=8.0Hz,1H),7.35–7.32(m,2H),7.15(s,1H),7.04(s,1H),6.94(dd,J=0.8,
8.0Hz,1H),3.87(t,J=5.2Hz,1H),3.49–3.43(m,2H),2.80–2.74(m,1H),2.68–2.62(m,
13
1H);C NMR(150MHz,Acetone‑d6)δ186.6,184.5,161.7,159.3,136.3(q,J=30Hz),135.2
(q,J=30Hz),134.0,132.6,132.3,131.8,126.0,125.8,125.6,124.5,124.4(q,J=
270Hz),124.3(q,J=270Hz),122.0,122.0,120.7,116.5,116.0,115.5,114.5,110.8,
‑ ‑
61.7,38.7;HRMS(m/z):[M‑H]calcd.For C26H14Cl3F6N2O5S ,684.9599;found,684.9593。
TM
(41.9mg,50%),取其中部分样品进一步由正相制备型HPLC(Prep Silica OBD 5μm,30×
100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=85:15-80:20-75:25)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度:99.3794%;IR:(neat):νmax=2925,1606,1410,–1 1
1331,1169,1138,1068,947,750,626cm ;H NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ10.79(s,1H),7.95(d,J=8.0Hz,1H),7.70(d,J=8.0Hz,1H),7.33–7.20(m,2H),7.18(s,1H),7.12–7.10(m,
13
2H),4.00–3.99(m,1H),3.93(q,J=20Hz,2H),3.51–3.416(m,2H);C NMR(150MHz,
Acetone‑d6)δ188.2,184.5,161.6,159.0,136.8(q,J=33Hz),135.2(q,J=31.5Hz),
134.34,134.3,131.9,131.0,126.9,126.5,124.7,124.4(q,J=271.5Hz),124.3,124.3(q,
J=271.5Hz),121.2,121.0,119.5,116.6,116.4,115.5,114.7,112.6,59.9,56.0;HRMS(m/
‑ ‑
z):[M‑H]calcd.For C26H14Cl3F6N2O7S ,716.9597;found,716.9493。
–1 1
(neat):νmax=2925,1725,1605,1408,1333,1132cm ;H NMR(600MHz,Acetone‑d6)δ10.81(m,2H),8.52(s,1H),8.04–8.02(m,2H),7.89(d,J=6.0Hz,1H),7.33–7.31(m,2H),7.20(s,
13
1H),7.15(s,1H),7.08(d,J=6.0Hz,1H);C NMR(100MHz,Acetone‑d6)δ186.8,184.3,
161.2,161.1,159.7,158.6,149.0,136.4(q,J=33Hz),135.5(q,J=33Hz),134.0,133.7,
132.3,132.2,129.6,126.2,126.0,124.9,124.5(q,J=270Hz),124.4(q,J=271Hz);
‑
123.2,120.9,120.3,116.5,116.1,115.4,115.0,111.3,111.2,110.1;HRMS(m/z):[M‑H]
‑
calcd.For C29H12Cl3F6N6O5 ,742.9844;found,742.9844。
化得淡黄色粉末化合物3‑32(20.9mg,64%),取其中部分样品进一步由正相制备型HPLC
TM
(Prep Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,流动相:正己烷:
异丙醇(v:v)=90:10-85:15-80:20)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度:
99.4647%;IR:(neat):νmax=3132,2942,2885,1702,1636,1597,1505,1405,1332,1127,
–1 1
1066,944,866,738cm ;H NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ12.59(s,1H),10.98(s,1H),10.15
(s,1H),8.08(d,J=8.4Hz,1H),7.65(d,J=8.0Hz,1H),7.34(d,J=8.0Hz,1H),7.33(s,
1H),7.16(s,1H),7.05(s,1H),6.93(d,J=8.4Hz,1H),3.59(t,J=5.2Hz,1H),3.50‑3.39
13
(m,2H),2.78‑2.71(m,1H),2.61‑2.54(m,1H),1.61‑1.41(m,2H);C NMR(150MHz,Acetone‑d6)δ186.7,184.7,161.7,159.5,136.3(q,J=32.2Hz),135.3(q,J=32.2Hz),134.0,
132.5,132.3,131.9,125.9,125.8,125.4,124.4(q,J=270Hz),124.4,123.4(q,J=
270Hz),122.4,122.1,120.8,116.5,116.0,115.5,114.5,110.7,60.1,33.3,33.0;HRMS(m/
‑ ‑
z):[M‑H]calcd.For C27H16Cl3F6N2O5S ,698.9755;found,698.9742。
全,向反应液中加入饱和Na2S2O3水溶液淬灭,二氯甲烷萃取(4×8mL),无水硫酸钠干燥,抽滤浓缩得到粗品,粗品经硅胶柱层析(石油醚:丙酮(v:v)=3:1-1:1)纯化得黄色粉末化合
TM
物3‑25(21.3mg,51%),取其中部分样品进一步由正相制备型HPLC(Prep Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=90:10-85:15-
80:20)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度=98.6657%;IR:(neat):νmax=3457,
–1 1
3057,2971,2891,1638,1607,1505,1404,1327,1157,1117,1064,944,784,735cm ;H NMR
(400MHz,Acetone‑d6)δ12.42(s,1H),10.79(s,1H),9.97(s,1H),7.95(d,J=8.0Hz,1H),
7.69(d,J=8.0Hz,1H),7.33(s,1H),7.31(s,1H),7.18(s,1H),7.12(s,1H),7.11(d,J=
4.0Hz,1H),3.86(t,J=4.8Hz,1H),3.61(q,J=5.6Hz,2H),3.44–3.24(m,2H),1.94–1.83
13
(m,2H);C NMR(100MHz,Acetone‑d6)δ188.1,184.5,161.5,159.0,136.8(q,J=32.4Hz),
135.3(q,J=32.3Hz),134.5,134.2,131.8,130.6,126.8,126.5,124.8,124.4(q,J=
271Hz),124.4,124.3(q,J=271Hz),121.3,121.1,119.5,116.6,116.5,115.7,114.7,
‑ ‑
112.7,60.2,54.8,26.2;HRMS(m/z):[M‑H]calcd.For C27H16Cl3F6N2O7S ,730.9653;found,
730.9647。
全,在反应液中加入饱和NH4Cl水溶液淬灭。用乙酸乙酯萃取(3×15mL),无水硫酸钠干燥,过滤浓缩得到粗品,粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯(v:v)=5:1)纯化得黄色粉末化
合物3‑33(76.5mg,68%)。IR:(neat):νmax=2927,2854.,1747,1636,1595,1481,1334,
–1 1
1201,1170,1131,1067.,863,709cm ;H NMR(400MHz,Acetone‑d6)δ11.01(s,1H),8.09(d,J=8.0Hz,1H),7.83(d,J=12.0Hz,1H),7.33(d,J=8.0Hz,1H),7.30(s,1H),7.22(s,1H),
6.99–6.97(m,1H),6.94(s,1H),4.13(q,J=8Hz,2H),3.19(s,2H),2.98‑2.97(m,2H),2.65–
13
2.62(m,2H),2.46–2.41(m,4H),1.23(t,J=12Hz,3H);C NMR(150MHz,Acetone‑d6)δ
185.8,185.8,170.4,161.6,160.9,144.4,136.0(q,J=30Hz),135.8(q,J=30Hz),133.6,
132.9,125.9,124.8,124.6,124.5(q,J=270Hz),124.3(q,J=270Hz),123.9,123.9,
120.8,116.4,116.3,116.0,115.2,114.9,110.6,106.6,60.7,59.5,53.1,53.1,50.8,
‑ ‑
50.8,14.6;HRMS(m/z):[M‑H]calcd.For C32H24Cl3F6N4O6 ,779.0671;found,779.0657。
入5mL丙酮重结晶,得到7mg淡黄色纯品化合物3‑26以及22mg母液,采集图谱并测定纯度数据。纯品纯度:99.2646%;IR:(neat):νmax=2923,2854,1600,1333,1259,1173,1020,
–1 1
798cm ;H NMR(600MHz,Methanol‑d4)δ7.67(d,J=12.0Hz,1H),7.58(d,J=12.0Hz,1H),
7.24‑7.23(m,2H),7.14(s,1H),6.99(d,J=12.0Hz,1H),6.65(s,1H),3.56(s,2H),3.31‑
13
3.28(m,2H),3.13–3.07(m,6H);C NMR(150MHz,Methanol‑d4)δ185.6,184.8,169.7,
159.2,158.8,143.2,135.8(q,J=30Hz),135.4(q,J=30Hz),132.5,132.2,128.4,128.1,
127.3,125.8,125.2,125.0(q,J=270Hz),124.8(q,J=270Hz),123.7,121.3,116.8,
‑
116.5,114.7,114.4,111.5,108.0,59.8,53.9,53.9,48.6,48.6;HRMS(m/z):[M‑H]
‑
calcd.For C30H20Cl3F6N4O6 ,751.0358;found,751.0349。
黄色粉末化合物3‑34 20.6mg,61%),取其中部分样品进一步由以正相制备型HPLC(Prep TM
Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=
95:5-93:7-90:10)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度:98.6505%;IR:(neat):νmax–1
=3210,2981,1732,1710,1637,1598,1505,1407,1333,1170,1127,1066,945,866,789cm ;
13
8.4Hz,1H),4.02(q,J=6.8Hz,2H),3.33(q,J=16.0Hz,2H),1.16(t,J=7.2Hz,3H);C NMR
(100MHz,Acetone‑d6)δ186.8,184.5,168.6,161.8,159.3,136.4(q,J=48.45Hz),135.3
(q,J=48.45Hz),134.0,132.8,131.9,130.7,125.8,125.6,122.5,124.4(q,J=270.6Hz),
124.3(q,J=270.5Hz),124.3,122.8,121.7,120.8,116.5,116.1,115.5,114.6,110.9,
‑ ‑
62.1,37.3,14.3;HRMS(m/z):[M‑H] calcd.For C28H16Cl3F6N2O6S ,726.9704;found,
726.9692。
化得淡黄色粉末化合物3‑27(13.2mg,34%),取其中部分样品进一步由正相制备型HPLC
TM
(Prep Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=85:15-80:20-75:25)纯化用于采集图谱及测定纯度数据。纯度:99.2190%;IR:
–1 1
(neat):νmax=3164,2974,1709,1638,1595,1505,1407,1333,1129,1066,988,866cm ;H
NMR(600MHz,Acetone‑d6)δ12.54(s,1H),10.97(s,1H),10.11(s,1H),8.03(d,J=7.8Hz,
1H),7.63(d,J=8.4Hz,1H),7.34(d,J=8.4Hz,1H),7.32(s,1H),7.17(s,1H),7.03(s,1H),
13
6.96(d,J=8.4Hz,1H),3.42(dd,J=44.4,15.0Hz,2H);C NMR(150MHz,Acetone‑d6)δ
186.8,184.4,169.5,161.8,159.2,136.4(q,J=32.25Hz),135.2(q,J=32.25Hz),134.0,
132.7,131.8,131.2,127.1,125.9,125.7,124.4(q,J=271.5Hz),124.4(q,J=270Hz),
‑
124.3,122.5,121.8,120.7,116.4,116.1,115.5,114.5,111.1,37.3;HRMS(m/z):[M‑H]
‑
calcd.For C26H12Cl3F6N2O6S ,698.9391;found,698.9344。
得淡黄色粉末3‑28(15.5mg,70%),取其中部分样品进一步由正相制备型HPLC(Prep
TM
Silica OBD 5μm,30×100mm column,流速:25mL/min,温度:25℃,正己烷:异丙醇(v:v)=
90:10-85:15-80:20)纯化用于采集图谱及测定纯度数据,纯度:96.3462%;IR:(neat):
–1 1
νmax=3245,2922,2854,1637,1599,1408,1335,1172,1133,1067,946,866,784cm ;H NMR
(600MHz,Acetone‑d6)δ10.94(s,1H),8.07(d,J=8.4Hz,1H),7.66(d,J=7.8Hz,1H),7.34
(d,J=8.4Hz,1H),7.31(s,1H),7.14(s,1H),7.04(s,1H),6.94(d,J=7.8Hz,1H),2.86‑
13
2.70(m,2H),2.46‑2.34(m,2H);C NMR(100MHz,Acetone‑d6)δ186.7,184.3,172.4,161.6,
159.2,136.2(q,J=32.2Hz),135.1(q,J=32.2Hz),134.1,132.0,131.9,128.5,126.3,
126.0,125.7,124.6,123.1,122.4,121.8,120.9,120.4,116.5,115.9,115.4,114.7,
‑ ‑
110.8,34.6,31.5;HRMS(m/z):[M‑H] calcd.For C27H14Cl3F6N2O6S ,712.9548;found,
712.9549。
24h,每株细菌在实验前经琼脂平板划法进行单菌落分离纯化,37℃培养后挑取单菌落,用
8
麦氏比浊法配制0.5麦氏单位左右(约10 CFU/ml)的混悬菌液,再将此混悬菌液进行100倍
6
稀释,使菌悬液最终浓度约为10CFU/ml。。
本发明实施例1‑25制备的化合物和化合物2在临用前用DMSO助溶配制成1.92mg/ml浓度备
用。万古霉素为注射用盐酸万古霉素(购自大连美仑生物技术有限公司,M0208A),临用前用无菌蒸馏水配制成1.92mg/ml浓度备用。
0.25、0.125、0.06、0.03、0.015、0.008μg/ml,冷却。用多点接种仪接种稀释后的菌液于上述
4
制备好的MH琼脂平皿上,每点接种量约10CFU,盖上皿盖,按7.3项下的培养条件,放在培养箱中培养,培养结束后,进行肉眼观察,平皿内未见细菌生长的最低样品浓度即为其最低抑菌浓度(MIC)。每次实验均用标准菌株作为质控菌,同时设立不加任何样品的空白菌对照和加DMSO的溶媒菌对照。结果见表1。
可以对本发明的具体实施方式进行修改或者对部分技术特征进行等同替换;而不脱离本发
明技术方案的精神,其均应涵盖在本发明请求保护的技术方案范围当中。