一种利用D相乳化法制备的具有抗皱功效的纳米乳及其应用

摘要

本发明公开了一种利用D相乳化法制备的具有抗皱功效的纳米乳及其应用。所述的D相乳化法制备的纳米乳，包括如下质量百分含量的组分：PEG‑55丙二醇油酸酯0.5‑1.5%、C12‑16烷基葡糖苷0.5‑1.5%、油脂5‑15%、多元醇20‑30%、水55‑70%。本发明还提供了一种抗衰老组合物及其应用，精选柚籽提取物、麦冬根提取物、水飞蓟果提取物、覆盆子果提取物，采用现代提取工艺制得，具有抑制基质金属蛋白酶活性，增强皮肤弹性，预防甚至减少皮肤小细纹的产生。

权利要求

1.一种D相乳化法制备的纳米乳，其特征在于，包括如下质量百分含量的组分：PEG‑55 丙二醇油酸酯0.5‑1.5%、C12‑16 烷基葡糖苷0.5‑1.5%、油脂5‑15%、多元醇20‑30%、水 55‑

70%；

其中所述的多元醇为甘油、丁二醇的混合物；

所述的纳米乳还包括抗皱组合物，所述的抗皱组合物由柚籽提取物、麦冬根提取物、水飞蓟果提取物、覆盆子果提取物组成；

所述抗皱组合物的制备方法包括如下步骤：（1）称取以下重量份的原材料：柚籽1‑10份、麦冬根1‑5份、水飞蓟果1‑10份、覆盆子果10‑30份，粉碎，获得原材料粉末；（2）取蜂蜜置于炒锅内，用文火炼至起鱼泡眼，再将原材料粉末投入，迅速翻动，搅拌均匀，炒至不粘手，取出摊凉；（3）取蜂蜜处理过的原材料粉末投入提取罐中，加入乙醇水溶液，加热到55‑65度，搅拌1‑2小时，过滤，取得第一次滤液；再加入乙醇水溶液重复提取一遍，获得第二次滤液，将两次滤液合并；（4）将滤液用离心机离心，取上清液，加入羟丙基β‑环糊精，然后旋转去除乙醇，加入丁二醇，搅匀，即得；

所述纳米乳制备工艺包括如下步骤：（1）将PEG‑55 丙二醇油酸酯、C12‑16 烷基葡糖苷、油脂混合，加热到80度，搅拌下溶解透明，制得油相；（2）在搅拌条件下将油相滴加到多元醇中；（3）加入水、抗皱组合物，搅拌均匀，然后使用300bar高压均质机处理2遍，即得。

2.根据权利要求1所述的D相乳化法制备的纳米乳，其特征在于，所述的油脂为星果棕仁油、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯的混合物。

3.根据权利要求1所述的D相乳化法制备的纳米乳，其特征在于，步骤（2）中蜂蜜的添加量为原材料粉末重量的10‑20%。

4.根据权利要求1所述的D相乳化法制备的纳米乳，其特征在于，步骤（3）中乙醇水溶液的浓度为70‑80%V/V，总添加重量为蜂蜜处理过的原材料粉末的10‑15倍。

5.根据权利要求1所述的D相乳化法制备的纳米乳，其特征在于，步骤（4）中羟丙基β‑环糊精的添加量为上清液重量的1‑10%。

6.根据权利要求1所述的D相乳化法制备的纳米乳，其特征在于，步骤（4）中丁二醇的添加量为上清液重量的30‑50%。

说明书

一种利用D相乳化法制备的具有抗皱功效的纳米乳及其应用

技术领域

[0001] 本发明涉及化妆品领域，特别涉及一种利用D相乳化法制备的具有抗皱功效的纳米乳及其应用。

背景技术

[0002] D相乳化法是Sagitani等在1983年基于PIC 乳化法提出的一种新型乳化方法。在他们的实验中，通过稀释表面活性剂相（D相）包围油滴组成的表面活性剂凝胶（O/D相）即可制得精细的纳米乳液。文献中指出，O/D凝胶相的形成是通过D相乳化方法制备纳米乳液的关键点。研究推测O/D相与表面活性剂、油脂及多元醇溶液的特殊排列有关，配方组分在制备过程中的动态运动过程决定了纳米乳液的形成。但是在部分配方结构中，即使是O/D相凝[1]胶的外观未被观察到，组分也会自发地经历特殊排列最终形成均匀的纳米乳液 。

[0003] 皮肤是人体最大的器官，随着年龄的增长而衰老。一般而言，人们30岁左右开始长皱纹。事实上，很多人为长在自己脸部肌肤上的皱纹而感到非常苦恼，一方面皱纹在脸上的话整体非常影响人们在视觉上的感受，看起来显得老态而没有活力；而在另外一方面，容易[2]出现化妆不贴妆的现象以及卡粉不均匀的情况 。

[0004] 基质金属蛋白酶 （MMPs） 是一类生物活性依赖于锌离子、有降解细胞外基质能力的内肽酶家族。 MMPs 分泌增加会加速胶原蛋白的降解，造成皮肤胶原蛋白流失，皮肤松弛，弹性下降，细纹增多且不断加深。因此可以通过抑制金属蛋白酶的能力大小评价化妆品的抗皱功效。抑制基质金属蛋白酶的实验方法包括荧光底物法、酶联免疫测定法、明胶酶谱法、高效液相色谱法和毛细管电泳法等，目前用于化妆品功效研究主要是荧光底物法。

[0005] 参考文献：

[0006] [1]秦钰波.D相乳化法制备纳米乳液的影响因素及乳化机理研究[D].上海应用技术大学,2020.

[0007] [2]吕凤.皱纹的产生及有效抗皱成分[N].中国医药报,2021‑09‑07(007)。

发明内容

[0008] 本发明的目的在于提供一种利用D相乳化法制备的具有抗皱功效的纳米乳及其应用。

[0009] 为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

[0010] 一种D相乳化法制备的纳米乳，包括如下质量百分含量的组分：PEG‑55 丙二醇油酸酯0.5‑1.5%、C12‑16 烷基葡糖苷0.5‑1.5%、油脂5‑15%、多元醇20‑30%、水 55‑70%。

[0011] 本发明所述的油脂可以是烃油、合成脂肪酸酯、动植物油、油溶性活性成分的一种或两种以上的混合。

[0012] 在其中一些实施例中，所述的油脂为星果棕仁油、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯的混合物。

[0013] 本发明所述的多元醇可以是为甘油、丙二醇、丁二醇、甲基丙二醇、戊二醇、己二醇、山梨醇、乙醇、聚乙二醇‑8、聚乙二醇‑32、双丙甘醇、双甘油、甘油聚醚‑26、聚甘油‑10、聚甘油‑8的一种或一种以上的混合。

[0014] 在其中一些实施例中，所述的多元醇为甘油、丁二醇的混合物。

[0015] 本发明实施例还提供了所述D相乳化法制备的纳米乳的制备工艺，包括如下步骤：（1）将PEG‑55 丙二醇油酸酯、C12‑16 烷基葡糖苷、油脂混合，加热到80度，搅拌下溶解透明，制得油相；（2）在搅拌条件下将油相滴加到多元醇中；（3）加入水，搅拌均匀，然后使用
300bar高压均质机处理2遍，即得。

[0016] 在其中一些实施例中，所述的纳米乳还包括抗皱组合物。所述的抗皱组合物由柚籽提取物、麦冬根提取物、水飞蓟果提取物、覆盆子果提取物组成。所述的抗皱组合物作为一种活性添加剂应用在配方中，其添加量可以为1‑10wt%，在其中一个实施例中，其添加量为5wt%。

[0017] 本发明实施例还提供了所述抗皱组合物的制备方法，包括如下步骤：（1）称取以下重量份的原材料：柚籽1‑10份、麦冬根1‑5份、水飞蓟果1‑10份、覆盆子果10‑30份，粉碎，获得原材料粉末；（2）取蜂蜜置于炒锅内，用文火炼至起鱼泡眼，再将原材料粉末投入，迅速翻动，搅拌均匀，炒至不粘手，取出摊凉；（3）取蜂蜜处理过的原材料粉末投入提取罐中，加入乙醇水溶液，加热到55‑65度，搅拌1‑2小时，过滤，取得第一次滤液；再加入乙醇水溶液重复提取一遍，获得第二次滤液，将两次滤液合并；（4）将滤液用离心机离心，取上清液，加入羟丙基β‑环糊精，然后旋转去除乙醇，加入丁二醇，搅匀，即得。

[0018] 在其中一些实施例中，步骤（2）中蜂蜜的添加量为原材料粉末重量的10‑20%。

[0019] 在其中一些实施例中，步骤（3）中乙醇水溶液的浓度为70‑80%V/V，总添加量为蜂蜜处理过的原材料粉末的10‑15倍。

[0020] 在其中一些实施例中，步骤（4）中羟丙基β‑环糊精的添加量为上清液重量的1‑10%。

[0021] 在其中一些实施例中，步骤（4）中丁二醇的添加量为上清液重量的30‑50%。

[0022] 本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：本发明提供了一种D相乳化法制备的纳米乳，具有粘度低，使用感好，稳定性佳的特点。本发明实施例还提供了一种抗衰老组合物及其应用，精选柚籽提取物、麦冬根提取物、水飞蓟果提取物、覆盆子果提取物，采用现代提取工艺制得，具有抑制基质金属蛋白酶活性，增强皮肤弹性，预防和减少皮肤小细纹的产生。

附图说明

[0023] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。

[0024] 图1 各测试组水稀释液的MMP‑1抑制率；

[0025] 图2 志愿者试用测试结果。

具体实施方式

[0026] 本发明公开了一种D相乳化法制备的纳米乳。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都本视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更和组合，来实施和应用本发明技术。

[0027] 本发明提供的D相乳化法制备的纳米乳中所用原料及试剂可由市场购得。

[0028] 下面结合实施例，进一步阐述本发明：

[0029] 实施例1

[0030] 一种D相乳化法制备的纳米乳，包括如下质量百分含量的组分：PEG‑55 丙二醇油酸酯0.5%、C12‑16 烷基葡糖苷1.5%、星果棕仁油2%、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯3%、甘油5%、丁二醇15%、水 余量。

[0031] 所述D相乳化法制备的纳米乳的制备工艺，包括如下步骤：（1）将PEG‑55 丙二醇油酸酯、C12‑16 烷基葡糖苷、星果棕仁油、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯混合，加热到80度，搅拌下溶解透明，制得油相；（2）在搅拌条件下将油相滴加到甘油和丁二醇组成的多元醇中；（3）加入水，搅拌均匀，然后使用300bar高压均质机处理2遍，即得。

[0032] 实施例2

[0033] 一种D相乳化法制备的纳米乳，包括如下质量百分含量的组分：PEG‑55 丙二醇油酸酯1.5%、C12‑16 烷基葡糖苷0.5%、星果棕仁油5%、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯10%、甘油15%、丁二醇15%、水 余量。

[0034] 所述D相乳化法制备的纳米乳的制备工艺，包括如下步骤：（1）将PEG‑55 丙二醇油酸酯、C12‑16 烷基葡糖苷、星果棕仁油、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯混合，加热到80度，搅拌下溶解透明，制得油相；（2）在搅拌条件下将油相滴加到甘油和丁二醇组成的多元醇中；（3）加入水，搅拌均匀，然后使用300bar高压均质机处理2遍，即得。

[0035] 实施例3

[0036] 一种D相乳化法制备的纳米乳，包括如下质量百分含量的组分：PEG‑55 丙二醇油酸酯1%、C12‑16 烷基葡糖苷1%、星果棕仁油4%、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯6%、甘油8%、丁二醇18%、水 余量。

[0037] 所述D相乳化法制备的纳米乳的制备工艺，包括如下步骤：（1）将PEG‑55 丙二醇油酸酯、C12‑16 烷基葡糖苷、星果棕仁油、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯混合，加热到80度，搅拌下溶解透明，制得油相；（2）在搅拌条件下将油相滴加到甘油和丁二醇组成的多元醇中；（3）加入水，搅拌均匀，然后使用300bar高压均质机处理2遍，即得。

[0038] 对比例1

[0039] 一种D相乳化法制备的纳米乳，包括如下质量百分含量的组分：PEG‑55 丙二醇油酸酯2%、星果棕仁油4%、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯6%、甘油8%、丁二醇18%、水 余量。

[0040] 所述D相乳化法制备的纳米乳的制备工艺，包括如下步骤：（1）将PEG‑55 丙二醇油酸酯、星果棕仁油、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯混合，加热到80度，搅拌下溶解透明，制得油相；（2）在搅拌条件下将油相滴加到甘油和丁二醇组成的多元醇中；（3）加入水，搅拌均匀，然后使用300bar高压均质机处理2遍，即得。

[0041] 对比例2

[0042] 一种D相乳化法制备的纳米乳，包括如下质量百分含量的组分：C12‑16 烷基葡糖苷2%、星果棕仁油4%、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯6%、甘油8%、丁二醇18%、水 余量。

[0043] 所述D相乳化法制备的纳米乳的制备工艺，包括如下步骤：（1）将C12‑16 烷基葡糖苷、星果棕仁油、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯混合，加热到80度，搅拌下溶解透明，制得油相；（2）在搅拌条件下将油相滴加到甘油和丁二醇组成的多元醇中；（3）加入水，搅拌均匀，然后使用300bar高压均质机处理2遍，即得。

[0044] 测试1 乳化组合物的乳化状态评价

[0045] 对实施例1‑3和对比例1‑2所制得的纳米乳通过如下标准进行评价：

[0046] 乳化粒径通过激光粒径分析仪测量，以水为分散介质，测量温度25度。根据参考文献（刘卫,冯年平.经皮给药纳米技术[M].北京:中国医药科技出版社,2020:11.），PDI（分散指数）低于0.3表明纳米载体分散良好，黏附和聚集情况较少。

[0047] Ο：40℃下保存3个月以上不产生乳状液分层；

[0048] △：40℃下保存1个月以后到第3个月前产生乳状液分层；

[0049] ×：40℃下保存不到1个月产生乳状液分层。

[0050] 表1 乳化状态评价表

[0051]

[0052] 由表1可见，本发明实施例制得的纳米乳相比对比例而言，其粒径更小，稳定性更佳。

[0053] 实施例4

[0054] 一种抗皱组合物，通过如下方法制得：（1）称取以下重量份的原材料：柚籽10份、麦冬根1份、水飞蓟果10份、覆盆子果10份，粉碎，获得原材料粉末；（2）取重量为原材料粉末10%的蜂蜜置于炒锅内，用文火炼至起鱼泡眼，再将原材料粉末投入，迅速翻动，搅拌均匀，炒至不粘手，取出摊凉；（3）将蜂蜜处理过的原材料粉末投入提取罐中；配制重量为蜂蜜处理过的原材料粉末10倍的80%V/V乙醇水溶液，先投一半到提取罐中，加热到65度，搅拌1小时，过滤，取得第一次滤液；再加入剩余的乙醇水溶液重复提取一遍，获得第二次滤液，将两次滤液合并；（4）将滤液用离心机离心，取上清液，加入重量为上清液重量10%的羟丙基β‑环糊精，然后旋转去除乙醇；加入重量为上清液30%的丁二醇，搅匀，即得。

[0055] 实施例5

[0056] 一种抗皱组合物，通过如下方法制得：（1）称取以下重量份的原材料：柚籽1份、麦冬根5份、水飞蓟果1份、覆盆子果30份，粉碎，获得原材料粉末；（2）取重量为原材料粉末20%的蜂蜜置于炒锅内，用文火炼至起鱼泡眼，再将原材料粉末投入，迅速翻动，搅拌均匀，炒至不粘手，取出摊凉；（3）将蜂蜜处理过的原材料粉末投入提取罐中；配制重量为蜂蜜处理过的原材料粉末15倍的70%V/V乙醇水溶液，先投一半到提取罐中，加热到55度，搅拌1小时，过滤，取得第一次滤液；再加入剩余的乙醇水溶液重复提取一遍，获得第二次滤液，将两次滤液合并；（4）将滤液用离心机离心，取上清液，加入重量为上清液重量1%的羟丙基β‑环糊精，然后旋转去除乙醇；加入重量为上清液50%的丁二醇，搅匀，即得。

[0057] 实施例6

[0058] 一种抗皱组合物，通过如下方法制得：（1）称取以下重量份的原材料：柚籽5份、麦冬根3份、水飞蓟果6份、覆盆子果20份，粉碎，获得原材料粉末；（2）取重量为原材料粉末15%的蜂蜜置于炒锅内，用文火炼至起鱼泡眼，再将原材料粉末投入，迅速翻动，搅拌均匀，炒至不粘手，取出摊凉；（3）将蜂蜜处理过的原材料粉末投入提取罐中；配制重量为蜂蜜处理过的原材料粉末13倍的75%V/V乙醇水溶液，先投一半到提取罐中，加热到60度，搅拌1.5小时，过滤，取得第一次滤液；再加入剩余的乙醇水溶液重复提取一遍，获得第二次滤液，将两次滤液合并；（4）将滤液用离心机离心，取上清液，加入重量为上清液重量5%的羟丙基β‑环糊精，然后旋转去除乙醇；加入重量为上清液40%的丁二醇，搅匀，即得。

[0059] 对比例3

[0060] 一种抗皱组合物，通过如下方法制得：（1）称取以下重量份的原材料：柚籽5份，粉碎，获得原材料粉末；（2）取重量为原材料粉末15%的蜂蜜置于炒锅内，用文火炼至起鱼泡眼，再将原材料粉末投入，迅速翻动，搅拌均匀，炒至不粘手，取出摊凉；（3）将蜂蜜处理过的原材料粉末投入提取罐中；配制重量为蜂蜜处理过的原材料粉末13倍的75%V/V乙醇水溶液，先投一半到提取罐中，加热到60度，搅拌1.5小时，过滤，取得第一次滤液；再加入剩余的乙醇水溶液重复提取一遍，获得第二次滤液，将两次滤液合并；（4）将滤液用离心机离心，取上清液，加入重量为上清液重量5%的羟丙基β‑环糊精，然后旋转去除乙醇；加入重量为上清液40%的丁二醇，搅匀，即得。

[0061] 对比例4

[0062] 一种抗皱组合物，通过如下方法制得：（1）称取以下重量份的原材料：麦冬根3份，粉碎，获得原材料粉末；（2）取重量为原材料粉末15%的蜂蜜置于炒锅内，用文火炼至起鱼泡眼，再将原材料粉末投入，迅速翻动，搅拌均匀，炒至不粘手，取出摊凉；（3）将蜂蜜处理过的原材料粉末投入提取罐中；配制重量为蜂蜜处理过的原材料粉末13倍的75%V/V乙醇水溶液，先投一半到提取罐中，加热到60度，搅拌1.5小时，过滤，取得第一次滤液；再加入剩余的乙醇水溶液重复提取一遍，获得第二次滤液，将两次滤液合并；（4）将滤液用离心机离心，取上清液，加入重量为上清液重量5%的羟丙基β‑环糊精，然后旋转去除乙醇；加入重量为上清液40%的丁二醇，搅匀，即得。

[0063] 对比例5

[0064] 一种抗皱组合物，通过如下方法制得：（1）称取以下重量份的原材料：水飞蓟果6份，粉碎，获得原材料粉末；（2）取重量为原材料粉末15%的蜂蜜置于炒锅内，用文火炼至起鱼泡眼，再将原材料粉末投入，迅速翻动，搅拌均匀，炒至不粘手，取出摊凉；（3）将蜂蜜处理过的原材料粉末投入提取罐中；配制重量为蜂蜜处理过的原材料粉末13倍的75%V/V乙醇水溶液，先投一半到提取罐中，加热到60度，搅拌1.5小时，过滤，取得第一次滤液；再加入剩余的乙醇水溶液重复提取一遍，获得第二次滤液，将两次滤液合并；（4）将滤液用离心机离心，取上清液，加入重量为上清液重量5%的羟丙基β‑环糊精，然后旋转去除乙醇；加入重量为上清液40%的丁二醇，搅匀，即得。

[0065] 对比例6

[0066] 一种抗皱组合物，通过如下方法制得：（1）称取以下重量份的原材料：覆盆子果20份，粉碎，获得原材料粉末；（2）取重量为原材料粉末15%的蜂蜜置于炒锅内，用文火炼至起鱼泡眼，再将原材料粉末投入，迅速翻动，搅拌均匀，炒至不粘手，取出摊凉；（3）将蜂蜜处理过的原材料粉末投入提取罐中；配制重量为蜂蜜处理过的原材料粉末13倍的75%V/V乙醇水溶液，先投一半到提取罐中，加热到60度，搅拌1.5小时，过滤，取得第一次滤液；再加入剩余的乙醇水溶液重复提取一遍，获得第二次滤液，将两次滤液合并；（4）将滤液用离心机离心，取上清液，加入重量为上清液重量5%的羟丙基β‑环糊精，然后旋转去除乙醇；加入重量为上清液40%的丁二醇，搅匀，即得。

[0067] 测试2 基质金属蛋白酶抑制试验

[0068] 参照参考文献（来吉祥. 两种化妆品延缓衰老功效添加剂体外筛选方法的建立及应用研究[D]. 北京工商大学, 2010.）第二章第2.5小节记载的方法：取活化后的MMP‑1溶液（0.20μg/100μL）40μL加入96孔酶标板中，再加入某种待测功效成分溶液8μL，荧光底物DQ‑gelatin溶液（0.20μg/100μL）52μL，37℃恒温孵育600s，在激发波长460nm，发射波长520nm条件下检测反应体系的荧光强度，扣除待测功效成分自身荧光强度后，与使用缓冲液代替功效成分的空白组对比，可得该功效成分对MMP‑1的抑制率。

[0069] 分别将实施例4‑6，对比例3‑6所制得的抗皱组合物用水稀释十倍，然后按照上述方法测定稀释液的MMP‑1抑制率，具体测试结果见图1。由图1可知，本发明实施例所制得的抗皱组合物对MMP‑1有良好的抑制作用。

[0070] 实施例7

[0071] 一种D相乳化法制备的纳米乳，包括如下质量百分含量的组分：PEG‑55 丙二醇油酸酯1%、C12‑16 烷基葡糖苷1%、星果棕仁油4%、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯6%、甘油8%、丁二醇18%、实施例6所制得的抗皱组合物5%、水 余量。

[0072] 所述D相乳化法制备的纳米乳的制备工艺，包括如下步骤：（1）将PEG‑55 丙二醇油酸酯、C12‑16 烷基葡糖苷、星果棕仁油、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯混合，加热到80度，搅拌下溶解透明，制得油相；（2）在搅拌条件下将油相滴加到甘油和丁二醇组成的多元醇中；（3）加入水，搅拌均匀，然后使用300bar高压均质机处理2遍，即得。

[0073] 测试3 志愿者试用测试

[0074] （1）测试仪器

[0075] VISIA 7皮肤检测仪，美国canfield公司。

[0076] （2）测试原理

[0077] 皮肤衰老是机体衰老的一部分，随着年龄增长，皮肤会出现如下外在表现：皮肤松弛、变薄，皮肤的含水量下降，往往显得干燥，有鳞屑，失去光泽；弹性和坚实度也随之下降，皱纹形成，并逐渐增多，加深。

[0078] （3）测试样品

[0079] 实施例7所制得的纳米乳。

[0080] （4）测试环境

[0081] 测试环境温度：21±1℃，湿度：50±10%，并且进行实时动态监测。

[0082] （5）志愿者

[0083] 志愿者人数：有效志愿者30人。

[0084] 入选条件：

[0085] （a）年龄在 18～65 岁之间；

[0086] （b）无严重系统疾病、无免疫缺陷或自身免疫性疾病者；

[0087] （c）无活动性过敏性疾病者；

[0088] （d）既往对护肤类化妆品无过敏史者；

[0089] （e）近一月内未曾使用激素类药物及免疫抑制剂者；

[0090] （f）未参加其它临床试验者；

[0091] （g）志愿参加并能按试验要求完成规定内容者。

[0092] 排除条件

[0093] （a）妊娠或哺乳期妇女；

[0094] （b）试验期间全身应用激素类、免疫制剂类药物者；

[0095] （c）未按规定使用受试物或资料不全者。

[0096] 测试前所有志愿者应填写知情同意书。

[0097] （6）测前准备

[0098] 组织志愿者每天取适量样品，涂抹于脸部，轻轻拍打吸收，早晚各1次。涂抹后分别在第0天、第28天、第56天、第84天用VISIA 7拍摄，记录皱纹特征计数值，然后计算得到平均值和标准偏差。每周按时测定，同一个志愿者的测试由同一个测量人员完成，以减小误差。

[0099] （7）数据分析

[0100] 具体测试结果见图2。由图2可见，志愿者使用产品后，皱纹特征计数值处于下降的趋势，说明本发明实施例所制得的纳米乳显示了良好的去皱效果。

[0101] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。