一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备方法和应用。所述的组蛋白去乙酰化酶抑制剂是以六元骈环为母核，以酰肼为锌离子螯合基团的化合物，其具有如下通式（I）所示的结构，本发明还提供了该类化合物的制备方法。本发明的化合物对组蛋白去乙酰化酶（HDAC）及急性髓性白血病（AML）具有明显抑制作用。因此，本发明的化合物可用于制备治疗AML等与HDAC表达异常相关疾病的药物。

权利要求

1.一种如通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐：其中，L连接于苯环酰胺基团的对位或间位；

A、B和E独立地选自CR2或N；其中R2选自H、卤素、C1‑C2烷烃、C1‑C2卤代烷、氨基、羟基或氰基；

D环选自：

其中

R3取代基是一个或多个且在环上的位置不定，选自H、卤素、C1‑C2烷烃、C1‑C2卤代烷、氨基、羟基或氰基；所述的氨基任选得被1‑2个C1‑C2烷基、C2‑C3炔基取代；所述的羟基任选得被1个C1‑C2烷基、C2‑C3炔基取代；

L选自

其中R4选自H；

R1选自C1‑C6烷基，C3‑C6环烷基。

2.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于包括以下步骤：以化合物1为原料，在1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺和1‑羟基苯并三唑的作用下与4‑氨甲基苯甲酸甲酯盐酸盐于二氯甲烷中反应得到中间体2；所述中间体2再与水合肼在甲醇中反应得到中间体3；所述中间体3在甲醇中进一步与丙醛反应并且经过氰基硼氢化钠还原得到最终的目标化合物。

3.一种药物组合物，其特征在于包含如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的稀释剂或载体。

4.如权利要求3所述的药物组合物，其特征在于所述的化合物或其药学上可接受的盐的含量为0.1‑99.9wt％。

5.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备组蛋白去乙酰化酶抑制剂中的用途。

6.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗与组蛋白去乙酰化酶活性异常表达相关疾病的药物中的用途。

7.如权利要求6所述的用途，其特征在于所述与组蛋白去乙酰化酶活性异常表达相关疾病包括肿瘤、神经退行性疾病、代谢性疾病、炎症反应或心脏病。

8.如权利要求7所述的用途，其特征在于所述肿瘤包括各类白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、肺癌、黑色素瘤、肝癌、食道癌、肾癌、口腔癌、舌癌、前列腺癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、胃癌、胰腺癌、膀胱癌、结肠直肠癌、鼻咽癌、脑肿瘤、胶质瘤、成人胶质母细胞红斑、骨癌或软组织肉瘤。

说明书

一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备方法和应用

技术领域

[0001] 本发明涉及化学合成药物技术领域，具体涉及一种含有酰肼类组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备方法和应用。

背景技术

[0002] 组蛋白去乙酰化酶(HDAC)通过组蛋白去乙酰化和非组蛋白赖氨酸翻译后修饰参与多种生理反应。靶向HDAC已表现出明显的临床作用，尤其是用于癌症治疗，美国和中国食品药品管理局已批准五种HDAC抑制剂(HDACI)用于治疗皮肤T细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤及多发性骨髓瘤(Journal of medicinal chemistry,2020,63,12460‑12484)。Class I HDAC抑制剂在治疗髓系和淋巴系恶性肿瘤中起着至关重要的作用。HDAC1和HDAC2的基因和药理学联合缺失可在白血病中介导促凋亡反应(Blood,2015,126,2392‑2403)。HDAC3的表达异常与白血病的发生密切相关，并通过调节急性白血病中的DNA损伤修复来介导对化疗药物的耐药性(Leukemia,2017,31,2761‑2770)。之前的研究表明class I HDAC抑制能够通过间接抑制FLT3/STAT5信号通路和下调主要抗凋亡蛋白如c‑Flip和XIAP，从而诱导AML细胞凋亡(Journal of medicinal chemistry,2020,63,5501‑5525)。

[0003] 急性髓系白血病(AML)是一种异质性血液病，其特征是未成熟的恶性髓系细胞不受控制地扩张。AML是成人中最常见的白血病形式，是所有白血病类型中死亡率最高的。自1973年以来，治疗AML主要使用抗代谢药物阿糖胞苷和蒽环类抗生素进行化疗。60岁以上AML的患者占四分之三，因此他们对大剂量化疗药物不耐受。近年来，靶向药物如FLT3抑制剂米多沙林，IDH2抑制剂依那西地尼和Bcl‑2抑制剂venetoclax已被批准用于AML的治疗；
然而，它们的使用受到特定患者群体和高度耐药的限制(Genes Chromosomes Cancer,
2019,58,903‑914)。在目前的治疗情况下，老年AML患者的预后极差，5年相对生存率低于
10％(CA Cancer J Clin,2019,69,363‑385)。因此，迫切需要更有效、耐受性更好的AML治疗药物。以上这些研究表明HDAC1、2和3是治疗AML的潜在分子靶点。

[0004] 目前已上市的HDAC抑制剂大多缺乏亚型选择性，并且都以异羟肟酸为锌离子螯合基团，该类HDAC抑制剂具有口服生物利用度低、易致突变等不足，因此新型锌离子螯合基团的研究是本领域的研究热点(Recent Patents on Anti‑Cancer Drug Discovery,2017,12)。在之前的研究中发现，以酰肼为锌离子螯合基团的HDAC抑制剂不仅具有较强的亚型选择性、而且药代动力学性质良好，是一类具有发展潜力的抑制剂(Journal of medicinal chemistry,2020,63,5501‑5525)。但是现已报道的酰肼类HDAC抑制剂的结构中具有
Michael受体，在体内易脱靶产生副作用。因此开发新型酰肼类HDAC抑制剂具有重要意义。

发明内容

[0005] 针对上述问题，本发明的第一目的在于提供一种具有良好的抗AML的活性，并表现出优异的class I HDACs抑制作用的组蛋白去乙酰化酶抑制剂。

[0006] 本发明的第二目的在于提供一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂化合物的制备方法，该方法以价格低廉、易得的原料、较高的产率合成所需化合物，并且化合物的性质稳定。

[0007] 本发明的第三目的在于提供上述化合物用于制备class I HDACs抑制剂及抗AML药物的用途。

[0008] 为了研发潜在的Class I HDACs抑制剂，并用于治疗AML等疾病。本发明在深入研究当前HDACs抑制剂的不足之处的基础上，设计合成了一类以萘环、喹啉、异喹啉、喹唑啉等结构为母核的酰肼类化合物，并在体外实验中验证了其具有显著的治疗作用。

[0009] 一方面，本发明提供了一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂，其特征在于其为以萘环、喹啉、异喹啉、喹唑啉等结构为母核，以酰肼为锌离子螯合基团的酰肼类化合物。所述抑制剂为具有如通式(I)所示结构的化合物或其药学上可接受的盐：

[0010]

[0011] 其中：

[0012] A、B和C独立地选自CR2或N；其中R2选自H、卤素、C1‑C2烷烃、C1‑C2卤代烷、氨基、硝基、羟基或氰基；所述的氨基或羟基任选得被1‑2个C1‑C2烷氧基、C2‑C3炔氧基取代。

[0013] D环选自：

[0014]

[0015] 其中R3取代基可以是一个或多个且在环上的位置不定，选自H、卤素、C1‑C2烷烃、C1‑C2卤代烷、氨基、硝基、羟基或氰基；所述的氨基或羟基任选得被1‑2个C1‑C2烷基、C2‑C3炔基取代。

[0016] L选自其中R4选自H、任选被取代的(C1‑C12)烷基。

[0017] R1选自C1‑C6烷烃，C3‑C6环烷烃。

[0018] 所述通式I化合物进一步具有如通式(Ⅱ)或通式(Ⅲ)所示结构。

[0019]

[0020] 所述通式(II)和(III)中，L可连接于苯环的对位或间位；通式(III)中E为碳原子。

[0021] 另一方面，本发明还提供了如上所述的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，包括以下步骤：

[0022]

[0023] 以化合物1为原料，在1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDCI)和1‑羟基苯并三唑(HOBt)的作用下与取代或未取代的4‑氨甲基苯甲酸甲酯或4‑氨基苯甲酸甲酯反应得到中间体2；中间体2再与水合肼反应得到中间体3；中间体3进一步与取代醛反应得到最终的目标化合物。

[0024] 此外，本发明还提供了一种药物组合物，其包含如上所述的通式(I)、(II)或(III)所示的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的稀释剂或载体；所述化合物或其药学上可接受的盐的含量为0.1‑99.9wt％。

[0025] 最后，本发明提供了如上所述的通式(I)、(II)或(III)的化合物或其药学上可接受的盐在制备HDAC抑制剂中的用途。

[0026] 另一方面，本发明还提供了如上所述的通式(I)、(II)或(III)的化合物或其药学上可接受的盐在制备与Class I HDACs活性异常表达相关的疾病的药物中的用途。

[0027] 所述与HDACs活性异常表达相关疾病包括肿瘤、神经退行性疾病、代谢性疾病、炎症反应或心脏病等。

[0028] 所述肿瘤包括各类白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、三阴性乳腺癌、肺癌、黑色素瘤、肝癌、食道癌、肾癌、口腔癌、舌癌、前列腺癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、胃癌、胰腺癌、膀胱癌、结肠直肠癌、鼻咽癌、脑肿瘤、胶质瘤、间变少突胶质瘤、成人胶质母细胞红斑、成人间变星状胶质细胞瘤、骨癌、及软组织肉瘤。

[0029] 特别的，本发明所述的通式(I)、(II)或(III)的化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗急性髓性白血病(AML)的药物中的用途。

[0030] 本发明的优点：

[0031] 1、本发明在现有技术的基础上，针对现有HDAC抑制剂的不足，运用计算机辅助药物设计的方法对酰肼类HDAC抑制剂进行优化，提供了一种以萘环、喹啉、异喹啉、喹唑啉等结构为母核，以酰肼为锌离子螯合基团的HDAC抑制剂，该类化合物具有高度的亚型选择性、HDAC靶向性、及优良的药代动力学性质，是一类具有发展潜力的抑制剂。

[0032] 2、本发明所提供的合成方法具有以下优点：以廉价易得的原料通过三步简单绿色的合成方法即可以高收率得到所描述的化合物，为该类化合物的合成提供了新的方法。

具体实施方式

[0033] 下面通过具体实施例来进一步详细说明本发明，其目的在于帮助更好地理解本发明内容而非限制本发明的保护范围。

[0034] I.本发明化合物

[0035] 一种如通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐：

[0036]

[0037] A、B和E独立地选自CR2或N；其中R2选自一个或多个H、卤素、C1‑C2烷烃、C1‑C2卤代烷、氨基、硝基、羟基或氰基；所述的氨基或羟基无取代或任选得被1‑2个C1‑C2烷氧基、C2‑C3炔氧基取代。

[0038] 在一些实施例中，A、B和E中的0‑2个选自N。

[0039] D环选自其中R3取代基可以是一
个或多个且在环上的位置不定，选自H、卤素、C1‑C2烷烃、C1‑C2卤代烷、氨基、硝基、羟基或氰基；所述的氨基或羟基任选得被1‑2个C1‑C2烷基、C2‑C3炔基取代。

[0040] L选自其中R4选自H、任选被取代的(C1‑C12)烷基。

[0041] 在一些实施例中，R4为H。在一些实施例中，R4为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基。

[0042] R1选自C1‑C6烷烃，C3‑C6环烷烃。

[0043] 在一些实施例中，R1为甲基、乙基、丙基或丁基。

[0044] 在一些实施例中，R2或R3独立的选自一个或多个卤素、卤代烷基、(C1‑C2)烷氧基、酚羟基、氰基。在一些实施例中，R2或R3选自一个或多个卤素、卤代烷基、(C1‑C2)烷氧基、酚羟基。在一些实施例中，R2或R3选自一个或多个卤素、卤代烷基、(C1‑C2)烷氧基。在一些实施例中，R2或R3选自一个或多个卤素、卤代烷基。在一些实施例中，R2或R3基选自一个或多个卤素。在一些实施例中，R2或R3选自F、Cl、Br或I中一个或多个。在一些实施例中，R2或R3选自卤代烷基。在一些实施例中，R2或R3为卤代烷基，其中卤原子选自F、Cl、Br或I。在一些实施例中，R2或R3为卤代烷基，其中卤原子为F。在一些实施例中，R2或R3为卤代烷基，其中卤原子为Cl。在一些实施例中，R2或R3为卤代烷基，其中卤原子为Br。在一些实施例中，R2或R3为卤代烷基，其中卤原子为I。在一些实施例中，R2或R3为‑CH2Cl、CH2F、‑CH2Br、CHF2、CF3、‑CFClBr、CH2CH2F、‑CH2CH2Cl、CH2CHF2、CH2CF3、‑CH2CCl3、CH2CH2CH2F、CH2CH2CHF2或CH2CH2CF3等。

[0045] 在一些实施例中，D环选自如下环系

[0046] 在一些实施例中，D环为 A、B、C为CH，R1为丙基，L为 所述通式(I)具有下述结构：

[0047]

[0048] 在一些实施例中，D环为 A和C为CH，B为N，R1为丙基，L为 所述通式(I)具有下述结构：

[0049]

[0050] 在一些实施例中，D环为 A、B、C为CH，R1为丙基，L为 所述通式(I)具有下述结构：

[0051]

[0052] 在一些实施例中，D环为 A和B为CH，C为N，R1为丙基，L为 所述通式(I)具有下述结构：

[0053]

[0054] 在一些实施例中，D环为 A、B和C为CH，R1为丙基，L为 所述通式(I)具有下述结构：

[0055]

[0056] D环为 A、B和C为CH，R1为丙基，L为 所述通式(I)具有下述结构：

[0057]

[0058] 本发明还提供了如上所述的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其用作药物。

[0059] II.制备方法

[0060] 通式(II)化合物的制备方法，包括以下步骤：

[0061]

[0062] 在反应I中，起始原料羧酸1在EDCI和HOBt的作用下与取代或未取代的4‑氨甲基苯甲酸甲酯盐酸盐缩合得到中间体2，反应条件为：EDCI,HOBt,DCM,r.t.,6h。

[0063] 在反应II中，中间体2与水合肼反应得到酰肼关键中间体3，反应条件为：水合肼，MeOH，80℃，24h。

[0064] 在反应III中，中间体3先与醛生成席夫碱，再经过NaBH3CN还原得到式(I)的化合物，反应条件为：醛，MeOH，NaBH3CN，r.t.,4h。

[0065] III.定义

[0066] 前缀“Cx‑Cy”表示后续基团具有x(例如1)至y(例如12)个碳原子，在某些基团中，其中一个或多个可由一个或多个杂原子或杂原子基团置换。例如，“(C1‑C12)烷基”表示所述烷基具有1至12个碳原子。类似地，术语“x‑y元”环，其中x和y为数值范围，例如“5至6元杂环”，是指含有x‑y个原子(例如5‑6)的环，诸如N、O、S，且其余原子为碳。

[0067] “烷基”是指衍生自直链或支链饱和烃的任何基团。烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基诸如丙‑1‑基、丙‑2‑基(异丙基)、丁基诸如丁‑1‑基(正丁基)、丁‑2‑基(仲丁基)、2‑甲基‑丙‑1‑基(异丁基)、2‑甲基‑丙‑2‑基(叔丁基)、戊基、己基、辛基、癸基等。除非另有说明，否则烷基具有1至12个碳原子，例如1至8个碳原子，例如1至6个碳原子，例如1至4个碳原子、例如1至2个碳原子。

[0068] “烯基”指由至少两个碳原子和至少一个碳‑碳双键组成的如上述所定义的烷基，“C1‑C12烯基”指含有1‑12个碳的直链或支链烯基，包括但不限于乙烯基、1‑丙5烯基、2‑丙烯基、1‑、2‑或3丁烯基等，除非另有说明，否则烯基具有1至12个碳原子，例如1至8个碳原子，例如1至6个碳原子，例如1至4个碳原子、例如1至2个碳原子。所述烯基可以是取代的或未取代的。

[0069] “卤代烷基”是指其中一个或多个氢原子各自被卤素取代的烷基。实例包括但不限于‑CH2Cl、CH2F、‑CH2Br、CHF2、CF3、‑CFClBr、CH2CH2F、‑CH2CH2Cl、CH2CHF2、CH2CF3、‑CH2CCl3、CH2CH2CH2F、CH2CH2CHF2、CH2CH2CF3等，以及烷基诸如全氟烷基，其中所有氢原子都被氟原子取代。

[0070] “烷氧基”是指式‑O‑烷基的部分，其中烷基部分如上所定义。例如，C1‑C2烷氧基是指具有与氧连接的1‑2个碳原子的烷基部分。“卤代烷氧基”是指式‑O‑卤代烷基的部分，其中卤代烷基部分如上所定义。例如，(C1‑C2)烷氧基是指具有与氧连接的1‑2个碳卤代烷基的部分。

[0071] “多个”独立地指1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。

[0072] “任选”意味着随后所描述地事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合。例如，“任选的被一个或多个取代基取代”意味着取代基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被取代基取代的情形和杂环基团不被取代基取代的情形。

[0073] “取代的”指基团中的一个或多个氢原子、优选为最多5个、更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻、取代基仅处在它们的可能的化学位置、本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如：具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。

[0074] 本领域技术人员应当理解，可以制备通式(I)的化合物的盐，包括药学上可接受的盐。这些盐类可以在所述化合物最终分离和纯化过程中原位制备，或者通过独立地分别将以其游离酸或游离碱形式的纯化的化合物与适合的碱或酸反应制备。

[0075] 可以与无机酸和有机酸形成药学上可接受的酸加成盐，例如，乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、溴化物/氢溴酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、樟脑磺酸盐、氯化物/盐酸盐、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、马尿酸盐、氢碘化物/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘甲酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、硬脂酸盐、油酸盐、草酸盐、软脂酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、磺基水杨酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐或三氟乙酸盐。

[0076] 可以生成盐的无机酸包括，例如，盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。

[0077] 可以生成盐的有机酸包括，例如，乙酸、丙酸、羟乙酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、磺基水杨酸等。药学上可接受的碱加成盐可以与无机或有机碱形成。

[0078] 可以生成盐的无机碱包括，例如，铵盐和元素周期表的I至XII族的金属。在某些实施方案中，所述盐是衍生自钠、钾、铵、钙、镁、铁、银、锌或铜；特别适合的盐包括铵盐、钾盐、钠盐、钙盐或镁盐。

[0079] 可以生成盐的有机碱包括，例如，伯胺、仲胺和叔胺，取代的胺包括天然产生的取代胺类，环胺、碱离子交换树脂等。某些有机胺类包括异丙胺、二乙醇胺、二乙胺、赖氨酸、葡甲胺、哌嗪及氨基丁三醇。

[0080] 本发明的药学上可接受的盐能够通过常规的化学方法由碱性或酸性部分合成而来。通常，这些盐能够通过将这些化合物的游离酸形式与化学量的合适的碱(Na、Ca、Mg或K的氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等)反应、或者通过将这些化合物的游离碱形式与化学量的合适的酸反应而进行制备。这些反应通常在水中或在有机溶剂中、或在两者的混合物中进行。通常，在适宜时，需要使用非水介质，例如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。其它合适的盐的列表可在“Remington's Pharmaceutical Sciences”，第20版，Mack Publishing Company，Easton，Pa.，(1985)；以及Stahl和Wermuth的“Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use”(Wiley‑VCH，Weinheim，德国，2002)中找到。

[0081] 还可以制备通式(I)的化合物的溶剂化物，包括药学上可接受的溶剂化物。“溶剂化物”是指由溶质和溶剂形成的可变化学量的复合物。为了本发明目的的此类溶剂不影响所述溶质的生物活性。适合溶剂的实例包括但不限于水、MeOH、EtOH或AcOH。其中水是溶剂分子的溶剂化物通常是指水合物。水合物包括包含化学计量的量的水的组分，以及包含可变量的水的组分。

[0082] 如本文所用，术语“药学上可接受的”的含义是适用于药物用途的化合物。适用于药物的本发明化合物的盐和溶剂化物(例如水合物和盐的水合物)是其中平衡离子或结合溶剂是药学上可接受的那些。但是，具有非药学上可接受的平衡离子或结合溶剂的盐和溶剂化物也包含在本发明范围内，例如，用作制备其它本发明化合物和其药学上可接受的盐和溶剂化物的中间体。

[0083] 通式(I)的化合物(包括其盐和溶剂化物)可以以结晶形式、非结晶形式或其混合物存在。所述化合物或其盐或溶剂化物还可以表现出多晶现象，即以不同结晶形式出现的能力。这些不同的结晶形式通常已知为“多晶型”。多晶型具有相同的化学组成，但是结晶固体状态的堆积、几何排列和其它描述特性不同。因此，多晶型可以具有不同的物理性质，例如形状、密度、硬度、变形性、稳定性和溶解度性质。多晶型通常表现出不同的熔点、IR光谱和X‑射线粉末衍射图谱，其全部都可以用于鉴别。本领域技术人员能够了解，例如，通过改变或调整在通式(I)的化合物的结晶/重结晶中所使用的条件而可能产生不同的多晶型。

[0084] 本发明还包含通式(I)的化合物的不同异构体。“异构体”是指具有相同构成和分子量，但是物理和/或化学性质不同的化合物。结构的区别可以是在结构中(几何异构体)或者在旋转平面偏振光的能力上(立体异构体)。关于立体异构体，通式(I)的化合物可以具有一个或多个不对称碳原子，并可以以外消旋体、外消旋混合物以及以单个对映异构体或非对映异构体出现。全部此类异构体形式都包含在本发明范围内，包括其混合物。如果所述化合物含有双键，取代基可以是E或Z构型。如果所述化合物包含二取代的环烷基，该环烷基的取代基可以具有顺式‑或反式‑构型。也期望包含全部的互变异构体形式。

[0085] 通式(I)的化合物的任意不对称原子(例如碳等)都能够以外消旋或对映异构体富集存在，例如(R)‑、(S)‑或(R,S)‑构型。在某些实施方案中，每一个不对称原子在(R)‑或(S)‑构型中有至少50％对映异构体过量、至少60％对映异构体过量、至少70％对映异构体过量、至少80％对映异构体过量、至少90％对映异构体过量、至少95％对映异构体过量、或至少99％对映异构体过量。如有可能，在具有不饱和双键的原子上的取代基以顺式‑(Z)‑或反式‑(E)‑形式存在。

[0086] 因此，如本文所用，通式(I)的化合物能够是可能的异构体、旋转异构体、阻转异构体、互变异构体或其混合物之一的形式，例如作为基本上纯的几何异构体(顺式或反式)、非对映异构体、旋光异构体(对映异构体)、外消旋体或其混合物。

[0087] 任何所得的异构体的混合物都能够基于组分的物理化学差异被分离成纯的或基本上纯的几何或旋光异构体、非对映异构体、外消旋体，例如通过色谱法和/或分步结晶。

[0088] 任何所得的终产物或中间体的外消旋体能够通过已知的方法(例如通过其非对映体盐的分离)被拆分成旋光对映异构体，其用有光学活性的酸或碱获得，并且释放出有光学活性的酸性或碱性化合物。特别地，碱性部分因此可以用于将本发明的化合物拆分成其旋光对映异构体，例如通过与有光学活性的酸(例如酒石酸、二苯甲酰酒石酸、二乙酰酒石酸、二‑O,O'‑对甲苯酰酒石酸、扁桃酸、苹果酸或樟脑‑10‑磺酸)形成的盐的分步结晶。外消旋产物也能够通过手性色谱法进行拆分，例如使用手性吸附剂的高效液相色谱法(HPLC)。

[0089] 本发明包括通式(I)的化合物的未标记的形式以及同位素标记的形式。同位素标记的化合物具有由本文所给出的化学式描述的结构，除了一个或多个原子被具有所选择的原子量或质量数的原子替换。能够被掺入本发明化合物的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、2 3 11 13 14 15 18 31 32 35 36 125
磷、氟和氯的同位素，分别例如H、H、C、C、C、N、F、P、P、S、Cl、 I。本发明包括
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如本文所定义的各种同位素标记的化合物，例如其中出现放射性同位素(例如H和 C)的那
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些或其中出现非放射性同位素(例如H和 C)的那些。这些同位素标记的化合物可用于代谢
14 2 3
研究(例如使用 C)、反应动力学研究(例如用H或 H)、检测或成像技术，例如正电子发射断层扫描术(PET)或单光子发射计算体层摄影术(SPECT)，包括药物底物组织分布分析，或者
18
用于患者的放射治疗。特别地，对于PET或SPECT研究可能特别需要 F或标记的化合物。同位素标记的通式(I)的化合物通常能够通过本领域的技术人员已知的常规技术或者通过与所附实施例和制备例中所述方法类似的方法、使用合适的同位素标记的试剂代替以前所用的未标记的试剂进行制备。

[0090] 此外，用较重的同位素、特别是氘(即2H或D))的取代可能带来由更强的代谢稳定性导致的某些治疗优势，例如增加的体内半衰期或减少的剂量需求或治疗指数的改善。可以理解，在本文中氘被视为通式(I)的化合物的取代基。该较重同位素、特别是氘的浓度可能由同位素富集因子决定。如本文所用的术语“同位素富集因子”是指特定同位素的同位素丰度和天然丰度之间的比例。如果本发明化合物中的取代基被标为氘，那么对于每一个标出的氘原子，该化合物具有至少3500(在每一个标出的氘原子处52.5％氘掺入)、至少4000(60％氘掺入)、至少4500(67.5％氘掺入)、至少5000(75％氘掺入)、至少5500(82.5％氘掺入)、至少6000(90％氘掺入)、至少6333.3(95％氘掺入)、至少6466.7(97％氘掺入)、至少6600(99％氘掺入)、或至少6633.3(99.5％氘掺入)的同位素富集因子。

[0091] 本领域技术人员将能够识别在通式(I)的化合物中是否存在立体中心。因此，本发明包括可能的立体异构体，并且既包括外消旋化合物又包括单个对映异构体。当所需化合物是单个对映异构体时，其可以通过立体特异性合成或通过终产物或任何方便的中间体拆分获得。终产物、中间体或起始原料的拆分可以通过本领域已知的任何适合的方法实现。参见，例如E.L.Eliel，S.H.Wilen和L.N.Mander的“Stereochemistry of Organic Compounds”(Wiley‑interscience，1994)。

[0092] IV.药物组合物

[0093] 本发明提供了药物组合物，其包含如上所述的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的稀释剂或载体。

[0094] 药物组合物能够针对特定的给药途径进行配制，例如口服给药、肠胃外给药和直肠给药等。此外，本发明的药物组合物能够以固体形式(非限制性地包括胶囊、片剂、丸剂、颗粒剂、粉末剂或栓剂)或以液体形式(非限制性地包括溶液剂、混悬剂或乳剂)制成。药物组合物能够经历常规的制药操作(例如灭菌)和/或能够含有常规的惰性稀释剂、润滑剂或缓冲剂以及辅料，例如防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂和缓冲剂等。

[0095] 通常，药物组合物是片剂或胶囊，其包含活性成分以及：

[0096] a)稀释剂，例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素、甘氨酸等；

[0097] b)润滑剂，例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸、其镁或钙盐和/或聚乙二醇；

[0098] 对于片剂也包含：

[0099] c)粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮；如果需要，还有

[0100] d)崩解剂，例如淀粉、琼脂、海藻酸或其钠盐、或泡腾混合物；和/或

[0101] e)吸收剂、着色剂、调味剂和增甜剂。

[0102] 根据本领域中已知的方法，片剂可以是薄膜包衣或肠溶包衣的。

[0103] 用于口服给药的合适的组合物包括有效量的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其为片剂、锭剂、水或油混悬液、可分散的粉末或颗粒、乳剂、硬或软胶囊、或糖浆或酏剂的形式。根据本领域中已知的用于制备药物组合物的任意方法制备用于口服使用的组合物，并且为了提供精制和适口的制剂该组合物能够含有一种或多种选自增甜剂、调味剂、着色剂和防腐剂的试剂。片剂可以含有与适合于制备片剂的无毒的药学上可接受的赋形剂混合在一起的活性成分。这些赋形剂是例如惰性的稀释剂(例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠)；成粒剂和崩解剂(例如玉米淀粉、或海藻酸)；粘合剂(例如淀粉、明胶或阿拉伯胶)；和润滑剂(例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉)。片剂是未经包衣的或者通过已知的技术进行包衣从而延缓在胃肠道的崩解和吸收，从而在较长的时期内提供持久的作用。例如，能够使用延时材料，例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。用于口服的制剂能够以硬明胶胶囊呈递，其中活性成分与惰性的固体稀释剂(例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土)混合，或者以软明胶胶囊呈递，其中活性成分与水或油介质(例如花生油、液体石蜡或橄榄油)混合。

[0104] 某些可注射的组合物是等渗水溶液或混悬液，栓剂有利地由脂肪乳或混悬液制得。所述的组合物可以进行灭菌和/或含有辅料，例如防腐、稳定、润湿或乳化剂、溶解促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂。此外，其也可以含有其他的治疗上有价值的物质。所述的组合物分别根据常规的混合、制粒或包衣法进行制备，并且含有大约0.1‑75％或含有大约1‑50％的活性成分。

[0105] 由于水可能促进某些化合物的降解，本发明还提供无水的药物组合物和剂型，其包含作为活性成分的本发明化合物。

[0106] 使用无水或低水含量的成分和低水含量或低湿度的条件能够制备本发明的无水的药物组合物和剂型。可以制备和贮存无水的药物组合物以便保持其无水的性质。因此，使用已知防止与水接触的材料包装无水的组合物以便其能够包含于合适的配方药盒中。合适的包装的实例非限制性地包括气密的箔、塑料、单位剂量容器(例如管形瓶)、泡罩包装和条带包装。

[0107] 本发明进一步提供药物组合物和剂型，其包含1种或多种降低作为活性成分的本发明化合物的分解速率的试剂。该试剂(其在本文中称作“稳定剂”)非限制性地包括抗氧化剂(例如抗坏血酸)、pH缓冲剂或盐缓冲剂等。

[0108] 对于大约50‑70kg的个体，本发明的药物组合物或组合产品能够是大约1‑1000mg活性成分的单位剂量，或者大约1‑500mg或大约1‑250mg或大约1‑150mg或大约0.5‑100mg、或大约1‑50mg活性成分。化合物、药物组合物或其组合产品的治疗有效剂量取决于个体的物种、体重、年龄和个体情况、其正在接受治疗的病症或疾病或其严重程度。普通技术的内科医生、临床医师或兽医能够容易地确定为了预防、治疗或抑制病症或疾病的发展所需的每一种活性成分的有效量。

[0109] V.治疗用途

[0110] 在一些实施例中，提供了如上所述的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备HDACs抑制剂中的用途。

[0111] 在一些实施例中，提供了如上所述的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗HDAC活性异常表达相关疾病的药物中的用途。

[0112] 在一些实施例中，所述与HDAC活性异常表达相关疾病包括发育异常、肿瘤、神经退行性疾病、代谢性疾病、炎症反应或心脏病等，其中所述肿瘤包括各类白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、三阴性乳腺癌、肺癌、黑色素瘤、食道癌、前列腺癌、乳腺癌等。

[0113] 在一些实施例中，提供了一种治疗或预防与HDACs活性异常表达相关疾病的方法，其包括向有需要的受试者施用治疗有效量的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。

[0114] 在一些实施例中，所述方法包括与一种、两种、三种或四种其他治疗剂组合施用通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。

[0115] 本文中，如果术语“组合”是用来描述组合施用，则应理解这可以表示同时施用、独立施用或序贯施用。在本发明的一个方面，“组合施用”是指同时施用。在本发明的另一方面，“组合施用”是指独立施用。在本发明的另一方面，“组合施用”是指序贯施用。当序贯施用或独立施用时，施用第二组分的延迟不应例如失去使用组合产生的效果的利益。

[0116] 下面通过具体的制备实施例和应用实施例进一步说明本发明。

[0117] 实施例中化合物的编号、名称与结构如下表所示。

[0118]

[0119]

[0120] 实施例1：N‑(4‑(2‑丙基肼‑1‑羰基)苄基)‑2‑萘酰胺(I‑01)

[0121]

[0122] 具体合成步骤如下：

[0123] a.化合物1[4‑((2‑萘酰胺)甲基)苯甲酸甲酯]的合成

[0124] 室温条件下，将2‑萘甲酸(345mg,2mmol)置于100mL茄型瓶中，加入30mL二氯甲烷溶解。冰浴下加入1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)(460mg,2.4mmol)，1‑羟基苯并三唑(HOBt)(325mg,2.4mmol)和三乙胺(506mg,5mmol)，反应0.5小时。加入4‑氨甲基苯甲酸甲酯盐酸盐(483mg,2.4mmol)后室温反应过夜。TLC检测原料反应完全，随后将反应物用水(20mL×3)洗涤，有机相用无水Na2SO4干燥。经柱色谱分离，得到化+
合物1，(415mg，收率65％)，为白色固体，直接用于下一步合成。ESI‑MS m/z:319.92[M+H][0125] b.化合物2[N‑(4‑(肼羰基)苄基)‑2‑萘酰胺]的合成

[0126] 室温条件下，将4‑((2‑萘酰胺)甲基)苯甲酸甲酯(319mg,1mmol)置于100mL茄型瓶中，加入30mL甲醇溶解。加入水合肼(840mg,15mmol)后回流24h。TLC检测原料反应完全，蒸+除甲醇后得到粗品2(305mg，收率97％)，直接用于下一步反应。ESI‑MS m/z:319.94[M+H][0127] c.实施例1[N‑(4‑(2‑丙基肼‑1‑羰基)苄基)‑2‑萘酰胺]的合成

[0128] 室温条件下，将N‑(4‑(肼羰基)苄基)‑2‑萘酰胺(250mg,0.8mmol)置于100mL茄型瓶中，加入30mL甲醇溶解，然后加入丙醛(58mg,1mmol)。反应2小时后，加入NaBH3CN(250mg,4mmol)并用HCl甲醇溶液调至酸性，反应6小时。TLC检测原料反应完全，加入20mL饱和碳酸氢钠溶液，反应0.5小时后蒸除甲醇，用二氯甲烷(20mL×3)萃取，合并有机相用无水Na2SO4干燥。经柱色谱分离，得到化合物I‑01，(185mg，收率64％)。

[0129] 1H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.94(d,J＝5.4Hz,1H),9.24(t,J＝6.0Hz,1H),8.47(s,1H),8.02‑7.92(m,4H),7.76(d,J＝8.3Hz,2H),7.62‑7.53(m,2H),7.39(d,J＝8.3Hz,2H),
5.04(d,J＝6.4Hz,1H),4.54(d,J＝5.9Hz,2H),2.70(q,J＝6.9,6.4Hz,2H),1.48‑1.39(m,
13
2H),0.86(t,J＝7.4Hz,3H)；C NMR(101MHz,DMSO‑d6)δ167.74,167.01,142.51,134.92,
132.67,131.33,129.03,128.68,127.99,127.92,127.87,127.70,127.41,126.96,123.63,‑
54.21,43.76,21.29,11.64；HRMS(ESI):m/z calcd for C22H22N3O2:360.17175[M‑H] ；
found:360.17194。

[0130] 实施例2：N‑(4‑(2‑丙基肼‑1‑羰基)苄基)喹啉‑3‑甲酰胺(I‑02)

[0131]

[0132] 具体合成步骤如下：

[0133] 将实施例1中2‑萘酸替换为喹啉‑3‑羧酸，其余与实施例1相同。总收率37％。

[0134] 1H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.96(s,1H),9.43(t,J＝5.9Hz,1H),9.29(d,J＝2.3Hz,1H),8.85(d,J＝1.4Hz,1H),8.11‑8.02(m,2H),7.89‑7.79(m,1H),7.81‑7.72(m,2H),7.72‑
7.62(m,1H),7.41(d,J＝8.4Hz,2H),5.05(s,1H),4.56(d,J＝5.9Hz,2H),2.70(t,J＝
13
7.1Hz,2H),1.47‑1.41(m,2H),0.86(t,J＝7.4Hz,3H)；C NMR(101MHz,DMSO‑d6)δ165.65,
165.50,149.45,149.05,143.18,136.20,132.39,131.79,129.70,129.31,127.99,127.69,
127.38,127.08,53.61,43.04,21.38,12.21；HRMS(ESI):m/z calcd for C21H21N4O2:
‑
361.16700[M‑H]；found:361.16714。

[0135] 实施例3：N‑(4‑(2‑丙基肼‑1‑羰基)苄基)异喹啉‑3‑甲酰胺(I‑03)

[0136]

[0137] 具体合成步骤如下：

[0138] 将实施例1中2‑萘酸替换为3‑异喹啉甲酸，其余与实施例1相同。总收率35％。

[0139] 1H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.97(s,1H),9.56(t,J＝6.5Hz,1H),9.40(s,1H),8.58(s,1H),8.26(d,J＝8.1Hz,1H),8.20(d,J＝8.3Hz,1H),7.91‑7.85(m,1H),7.84‑7.79(m,1H),7.77(d,J＝8.3Hz,2H),7.44‑7.39(m,2H),5.11(s,1H),4.60(d,J＝6.4Hz,2H),2.73
13
(t,J＝7.1Hz,2H),1.49‑1.39(m,2H),0.89(t,J＝7.4Hz,3H)；C NMR(101MHz,DMSO‑d6)δ
165.70,164.89,152.16,144.25,143.57,135.94,132.27,131.93,129.81,129.70,128.55,
128.37,127.69,127.61,120.45,53.61,42.79,21.38,12.21；HRMS(ESI):m/z calcd for ‑
C21H21N4O2:361.16700[M‑H]；found:361.16696。

[0140] 实施例4：N‑(4‑(2‑丙基肼‑1‑羰基)苄基)喹啉‑2‑甲酰胺(I‑04)

[0141]

[0142] 具体合成步骤如下：

[0143] 将实施例1中2‑萘酸替换为2‑喹啉羧酸，其余与实施例1相同。总收率41％。

[0144] 1H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.94(s,1H),9.53(t,J＝6.4Hz,1H),8.54(d,J＝8.6Hz,1H),8.13(d,J＝8.6Hz,1H),8.11(d,J＝8.4Hz,1H),8.06(d,J＝8.1Hz,1H),7.87‑7.82(m,
1H),7.74(d,J＝8.3Hz,2H),7.72‑7.66(m,1H),7.39(d,J＝8.3Hz,2H),5.04(s,1H),4.57
13
(d,J＝6.4Hz,2H),2.69(t,J＝7.1Hz,2H),1.46‑1.37(m,2H),0.86(t,J＝7.5Hz,3H)；C NMR(101MHz,DMSO‑d6)δ165.68,164.80,150.60,146.58,143.37,138.48,132.34,131.12,
129.72,129.40,128.68,127.76,127.64,119.29,53.61,42.87,21.38,12.20；HRMS(ESI):
‑
m/z calcd for C21H21N4O2:361.16700[M‑H]；found:361.16684。

[0145] 实施例5：N‑(4‑(2‑丙基肼‑1‑羰基)苄基)异喹啉‑6‑甲酰胺(I‑05)

[0146]

[0147] 具体合成步骤如下：

[0148] 将实施例1中2‑萘酸替换为6‑异喹啉羧酸，其余与实施例1相同。总收率37％。

[0149] 1H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ10.03‑9.92(m,1H),9.40(d,J＝5.1Hz,2H),8.59(d,J＝5.7Hz,1H),8.52(d,J＝1.6Hz,1H),8.23(d,J＝8.6Hz,1H),8.12(dd,J＝8.6,1.7Hz,1H),
7.95(d,J＝5.7Hz,1H),7.85‑7.76(m,2H),7.44(d,J＝8.2Hz,2H),5.08(s,1H),4.59(d,J＝
13
5.9Hz,2H),2.75(t,J＝7.3,2H),1.52‑1.44(m,2H),0.91(t,J＝7.4Hz,3H)；C NMR
(101MHz,DMSO‑d6)δ166.41,165.61,152.80,144.09,143.19,136.29,135.09,132.35,
129.41,128.41,127.61,126.55,126.20,121.61,53.58,43.10,21.32,12.13；HRMS(ESI):
‑
m/z calcd for C21H21N4O2:361.16700[M‑H]；found:361.16711。

[0150] 实施例6：N‑(4‑(2‑丙基肼‑1‑羰基)苄基)异喹啉‑7‑甲酰胺(I‑06)

[0151]

[0152] 具体合成步骤如下：

[0153] 将实施例1中2‑萘酸替换为7‑异喹啉羧酸，其余与实施例1相同。总收率38％。

[0154] 1H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.91(s,1H),9.35(s,1H),9.30(t,J＝6.0Hz,1H),8.66‑8.60(m,1H),8.52(d,J＝5.7Hz,1H),8.16(dd,J＝8.6,1.8Hz,1H),8.00(d,J＝8.6Hz,1H),
7.82(d,J＝5.7Hz,1H),7.77‑7.68(m,2H),7.42‑7.32(m,2H),5.01(s,1H),4.53(d,J＝
13
5.9Hz,2H),2.68(t,J＝7.1Hz,2H),1.44‑1.37(m,2H),0.83(t,J＝7.4Hz,3H)；C NMR
(101MHz,DMSO‑d6)δ166.23,165.62,153.85,144.77,143.27,136.88,133.53,132.34,
129.15,127.97,127.88,127.61,127.26,120.68,53.58,43.09,21.32,12.13；HRMS(ESI):
‑
m/z calcd for C21H21N4O2:361.16700[M‑H]；found:361.16705。

[0155] 实施例7：N‑(4‑(2‑丙基肼‑1‑羰基)苄基)‑1,6‑萘啶‑2‑甲酰胺(I‑07)[0156]

[0157] 具体合成步骤如下：

[0158] 将实施例1中2‑萘酸替换为1,6‑萘啶‑2‑羧酸，其余与实施例1相同。总收率35％。

[0159] 1H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.96(s,1H),9.67(t,J＝6.4Hz,1H),9.49(s,1H),8.78(dd,J＝19.2,7.2Hz,2H),8.27(d,J＝8.5Hz,1H),7.97(d,J＝6.0Hz,1H),7.74(d,J＝8.1Hz,2H),7.39(d,J＝8.1Hz,2H),4.57(d,J＝6.4Hz,2H),2.69(t,J＝7.1Hz,2H),1.48‑
13
1.37(m,2H),0.85(t,J＝7.4Hz,3H)；C NMR(101MHz,DMSO‑d6)δ165.68,164.23,154.64,
154.12,148.82,147.99,143.13,138.86,132.37,127.78,127.65,124.49,122.13,120.97,‑
53.60,42.97,21.36,12.20；HRMS(ESI):m/z calcd for C20H20N5O2:362.16225[M‑H] ；
found:362.16214。

[0160] 实施例8：6‑氯‑N‑(4‑(2‑丙基肼‑1‑羰基)苄基)‑2‑萘酰胺(I‑08)

[0161]

[0162] 具体合成步骤如下：

[0163] 将实施例1中2‑萘酸替换为6‑氯‑2‑萘酸，其余与实施例1相同。总收率41％。

[0164] 1H NMR(500MHz,DMSO‑d6)δ9.98(s,1H),9.31(t,J＝6.0Hz,1H),8.54(d,J＝1.6Hz,1H),8.12(d,J＝2.2Hz,1H),8.07(d,J＝8.8Hz,1H),8.06–7.97(m,2H),7.82‑7.77(m,2H),
7.60(dd,J＝8.7,2.2Hz,1H),7.42(d,J＝8.3Hz,2H),5.10(s,1H),4.57(d,J＝5.9Hz,2H),
13
2.74(t,J＝7.1Hz,2H),1.51‑1.40(m,2H),0.89(t,J＝7.4Hz,4H)；C NMR(126MHz,DMSO‑d6)δ166.53,165.59,143.36,135.29,132.66,132.55,132.26,131.97,131.52,131.03,
129.12,128.04,127.76,127.57,127.55,126.78,125.85,53.56,43.01,21.31,12.12；HRMS‑
(ESI):m/z calcd for C22H21N3O2Cl:394.12641[M‑H]；found:394.12633。

[0165] 实施例9：6‑溴‑N‑(4‑(2‑丙基肼‑1‑羰基)苄基)‑2‑萘酰胺(I‑09)

[0166]

[0167] 具体合成步骤如下：

[0168] 将实施例1中2‑萘酸替换为6‑溴‑2‑萘酸，其余与实施例1相同。总收率39％。

[0169] 1H NMR(500MHz,DMSO‑d6)δ9.98(s,1H),9.35(t,J＝6.0Hz,1H),8.54(d,J＝1.7Hz,1H),8.28(d,J＝2.0Hz,1H),8.03(dd,J＝8.7,1.7Hz,1H),8.02‑7.96(m,2H),7.79(d,J＝
8.4Hz,2H),7.74‑7.67(m,1H),7.42(d,J＝8.4Hz,2H),5.08(s,1H),4.56(d,J＝5.9Hz,2H),
13
2.73(t,J＝7.1Hz,2H),1.511.38(m,2H),0.89(t,J＝7.4Hz,4H)；C NMR(126MHz,DMSO‑d6)δ166.53,165.58,143.37,135.73,132.62,132.25,131.97,131.53,131.18,130.23,
130.05,129.12,128.12,127.67,127.57,127.55,125.82,121.44,53.56,43.01,21.30,
‑
12.12；HRMS(ESI):m/z calcd for C22H21N3O2Br:438.15674[M‑H]；found:438.15667。

[0170] 实施例10：6‑甲氧基‑N‑(4‑(2‑丙基肼‑1‑羰基)苄基)‑2‑萘酰胺(I‑10)[0171]

[0172] 具体合成步骤如下：

[0173] 将实施例1中2‑萘酸替换为6‑甲氧基‑2‑萘酸，其余与实施例1相同。总收率42％。

[0174] 1H NMR(500MHz,DMSO‑d6)δ9.97(s,1H),9.16(t,J＝6.0Hz,1H),8.43(d,J＝1.8Hz,1H),7.97‑7.90(m,2H),7.88(d,J＝8.6Hz,1H),7.79(d,J＝8.4Hz,2H),7.41(d,J＝8.2Hz,
2H),7.38(d,J＝2.6Hz,1H),7.23(dd,J＝9.0,2.6Hz,1H),5.08(s,1H),4.56(d,J＝5.9Hz,
13
2H),3.90(s,3H),2.74(t,J＝7.1Hz,2H),1.51‑1.40(m,2H),0.90(t,J＝7.4Hz,3H)；C NMR(126MHz,DMSO‑d6)δ166.86,165.61,159.02,143.58,136.28,132.21,130.90,129.75,
127.96,127.90,127.55,127.52,127.16,125.15,119.84,106.33,55.78,53.57,42.95,
‑
21.31,12.12；HRMS(ESI):m/z calcd for C23H24N3O3:390.16959[M‑H]；found:390.16952。

[0175] 实施例11：6‑羟基‑N‑(4‑(2‑丙基肼‑1‑羰基)苄基)‑2‑萘酰胺(I‑11)[0176]

[0177] 具体合成步骤如下：

[0178] 将实施例1中2‑萘酸替换为6‑羟基‑2‑萘酸，其余与实施例1相同。总收率34％。

[0179] 1H NMR(500MHz,DMSO‑d6)δ9.97(s,1H),9.12(t,J＝5.9Hz,1H),8.38(d,J＝1.8Hz,1H),7.90‑7.83(m,2H),7.78(d,J＝8.3Hz,2H),7.74(d,J＝8.7Hz,1H),7.41(d,J＝8.1Hz,
2H),7.19‑7.11(m,2H),4.55(d,J＝6.0Hz,2H),2.74(t,J＝7.1Hz,2H),1.50‑1.38(m,2H),
13
0.89(t,J＝7.4Hz,3H)；C NMR(126MHz,DMSO‑d6)δ166.93,157.39,143.66,136.55,
131.07,128.81,128.79,128.04,128.01,127.55,127.49,127.11,126.45,124.84,119.91,
109.07,53.56,42.91,21.31,12.12；HRMS(ESI):m/z calcd for C22H22N3O3:376.18652[M‑‑
H]；found:376.18643。

[0180] 实施例12：HDAC1,2,3,6体外抑制活性及细胞增殖抑制活性

[0181] 1、HDAC1,2,3,6体外抑制活性测定方法：

[0182] 将50μL含有药物的HDAC buffer与10μL酶液混合预先孵育5min，加入40μL底物后，在37℃下反应30min，然后加入100μL胰蛋白酶终止液终止上述反应，并在37℃下反应20min，于390nm/460nm测定荧光强度。

[0183]

[0184] 最后将化合物的抑制率(％)和其相应浓度进行S曲线拟合，计算出IC50值。

[0185] 2、细胞增殖抑制活性测定方法：

[0186] 目标化合物体外抑制细胞增殖活性试验采用刃天青法。取人白血病细胞MV4‑11细胞系，均采用常规培养。实验时均用对数生长期细胞。取上述细胞的细胞悬液于倒置显微镜下计数细胞数目，加入培养基调整细胞数目至1×105/mL。取96孔细胞培养板进行细胞接种和药物实验，周边孔不用(充填无菌PBS)，设立空白对照组、阴性对照组、阳性对照组和药物实验组，其中空白对照组只加入细胞培养液150μL/孔，阴性对照组接种细胞悬液100μL/孔并且加入细胞培养液50μL/孔，阳性对照组接种细胞悬液100μL/孔并且加入阳性对照药溶液50μL/孔，药物实验组接种细胞悬液100μL/孔并且加入待测化合物溶液50μL/孔，阳性对照组和药物实验组分别设立8个不同的药物终浓度:0.03、0.1、0.3、1、3、10、30、100μmol·‑1L ，每个药物浓度设3个平行复孔。药物加入完毕后，将96孔细胞培养板于37℃、5％CO2和饱和湿度条件下培养72h，每孔加入10μL刃天青(1mg/mL)，继续孵育3h后，随后用酶标仪在ex.560/em.590nm测定荧光值。

[0187] 3、实验结果：

[0188] 抑制活性结果见下面表1，实验结果表明所述化合物对HDAC1和2均具有低纳摩尔级的抑制IC50值，对HDAC3抑制效果显著，均为1nM左右，其中抑制活性最佳的化合物为I‑01，对HDAC1、2和3的IC50分别是7.98、30.51和0.89nM；并且所有化合物对HDAC6均无明显活性，说明该类化合物具有HDAC亚型选择性。

[0189] 在AML的细胞株MV4‑11中，抑制活性最佳的化合物I‑01的IC50为43.59nM，其余化合物均表现出低纳摩尔级的抑制IC50值(40‑75nM)。由此说明，本发明所提供的化合物具有显著的class I HDACs抑制活性及抗AML的活性。

[0190] 表1实施例1‑11对HDAC1、2、3、6和MV4‑11细胞的IC50值

[0191]

[0192]

[0193] 需要说明的是，以上所述的仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也不应排除在本发明的保护范围之外。