具有抗疲劳和免疫调节作用的口服液及其制备方法

摘要

本发明公开了一种具有抗疲劳和免疫调节作用的口服液及其制备方法。所述具有抗疲劳和免疫调节作用的口服液中有效成分的原料包括羊胎盘、刺五加和大枣。所述具有抗疲劳和免疫调节作用的口服液的制备方法包括：先将大枣和刺五加混合采用乙醇浸泡并加热提取得到混合提取液；水解羊胎盘得到羊胎盘水解液；将混合提取液和羊胎盘水解液混合，加水，精滤，灌封得到口服液。本发明的口服液质量稳定，功效成分含量高，抗疲劳和免疫调节作用大幅提升，且制备方法简单便捷，有效成分更容易溶解吸收。

权利要求

1.一种具有抗疲劳和免疫调节作用的口服液，其特征在于，所述口服液每1000ml中有效成分的原料以及辅料，按重量份数计，组成为：羊胎盘       160～250重量份；

刺五加       10～150重量份；

大枣         6～100重量份；

蔗糖         150～230重量份；

苯甲酸钠     0.5～2.0重量份；

柠檬酸       1.5～4.0重量份

所述口服液的制备方法包括：按配比称取各组分；

将大枣和刺五加混合，加浓度为55～70%乙醇浸泡10～30小时，提取3～5小时，过滤，回收乙醇后冷沉20小时以上，提取上清液得到混合提取液；

清洗羊胎盘并绞碎，加入2～4倍量的水搅匀，在45℃～55℃下，加入胰蛋白酶，将羊胎盘水解2～4小时，过滤，冷沉20～30小时，提取上清液，得到羊胎盘水解液；

取蔗糖加水并加热溶解，制备得到蔗糖溶液；加入所述混合提取液和羊胎盘水解液，加入苯甲酸钠和柠檬酸，混合，加水，调节溶液pH为4.0～5.2，精滤，灌封得到所述口服液；

所述口服液的功效成分中，蛋白质≥2.4g/100ml，总皂甙≥4.2mg/100ml。

2.根据权利要求1所述的具有抗疲劳和免疫调节作用的口服液，其特征在于，口服液每

1000ml中有效成分的原料以及辅料，按重量计，组成为：羊胎盘200g，刺五加100g，大枣60 g，以及蔗糖180 g，苯甲酸钠1.0 g，柠檬酸2.0 g。

3.一种根据权利要求1所述的具有抗疲劳和免疫调节作用的口服液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：步骤S1，按配比称取各组分；

步骤S2，将大枣和刺五加混合，加浓度为55～70%乙醇浸泡10～30小时，提取3～5小时，过滤，回收乙醇后冷沉20小时以上，提取上清液，得到混合提取液；

步骤S3，清洗羊胎盘并绞碎，加入2～4倍量的水搅匀；在45℃～55℃下，加入胰蛋白酶将羊胎盘水解2～4小时，经过滤，冷沉20～30小时，提取上清液，得到羊胎盘水解液；

步骤S4，取蔗糖加水并加热溶解，制备得到蔗糖溶液，加入所述混合提取液和羊胎盘水解液，加入苯甲酸钠和柠檬酸，混合，加水，调节溶液pH为4.0～5.2，精滤，灌封。

说明书

具有抗疲劳和免疫调节作用的口服液及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及中药技术领域，特别是涉及一种具有抗疲劳和免疫调节作用的口服液及其制备方法。

背景技术

[0002] 随着当代社会竞争意识的增强，社会生活节奏的加快，长期工作劳累过度加之精神压力过重所致以精神紧张、慢性疲劳为主诉的患者日趋增多。

[0003] 但是，目前对增强免疫力的产品的研究较多，而对于缓解体力疲劳的产品报道较少。其中，部分产品虽然可以达到缓解体力疲劳的作用，但是产品原料复杂，制备过程繁琐，效果不明显。

发明内容

[0004] 基于此，本发明的目的在于提供一种功效成分含量高、具有抗疲劳和免疫调节作用的口服液及其制备方法。

[0005] 本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：

[0006] 根据本发明的一个方面，本发明提供的一种具有抗疲劳和免疫调节作用的口服液，所述口服液每1000ml中有效成分的原料，按重量份数计，包括：

[0007] 羊胎盘      160～250重量份；

[0008] 刺五加      10～150重量份；

[0009] 大枣        6～100重量份。

[0010] 本发明中，所述口服液中有效成分的原料，还可以包括蔗糖、异麦芽酮糖醇、苯甲酸钠、以及柠檬酸中的一种或多种。其中，蔗糖150～230重量份或异麦芽酮糖醇320～450重量份。苯甲酸钠0.5～2.0重量份。柠檬酸1.5～4.0重量份。

[0011] 可选地，所述口服液每1000ml中有效成分的原料，按重量计，包括：羊胎盘200g，刺五加100g，大枣60g，以及蔗糖180g，苯甲酸钠1.0g，柠檬酸2.0g。

[0012] 根据本发明另一个方面，本发明提供一种具有抗疲劳和免疫调节作用的口服液的制备方法，包括：

[0013] 步骤S1，按配比称取原料中各组分；

[0014] 步骤S2，将大枣和刺五加混合，加乙醇浸泡，提取，过滤，回收乙醇后冷沉，提取上清液，得到混合提取液；

[0015] 步骤S3，在45℃～55℃下将羊胎盘水解，过滤，冷沉，提取上清液，得到羊胎盘水解液；

[0016] 步骤S4，将所述混合提取液和羊胎盘水解液混合，加水，调节溶液pH为4.0～6.0，例如调节溶液pH为4.0、4.2、4.5、5.0、5.2、5.5、5.8、6.0等，精滤，灌封。

[0017] 可选地，步骤S2中，所述乙醇的浓度为55～70％。浸泡时间为10～30小时。提取时间为3～5小时。冷沉时间为20小时以上。

[0018] 可选地，步骤S3中，羊胎盘水解的步骤，包括：清洗羊胎盘，绞碎，加入2～4倍量的水，搅匀；加热至45℃～55℃，例如加热至45℃、47℃、50℃、52℃、55℃等，加入胰蛋白酶，水解，水解2～4小时。

[0019] 可选地，步骤S3中，滤液冷沉20～30小时。

[0020] 可选地，步骤S4中，在加水步骤之前，包括：取蔗糖加水并加热溶解，制备得到蔗糖溶液；向所述蔗糖溶液中，加入混合提取液与羊胎盘水解液的混合液；加入苯甲酸钠和柠檬酸，搅拌，混合均匀。

[0021] 本发明的口服液中羊胎盘味甘咸、性温，具有补气、养血、益精的功效。羊胎盘含有激素、细胞因子等多种生物活性物质，因而具有抗氧化、抗衰老和免疫调节等功能。

[0022] 本发明的口服液中刺五加性味温辛微苦，归脾肾心三经，功能益气健脾，安神补肾，多用于脾阳虚、体虚乏力、食欲不振、腰膝酸痛、失眠多梦等症。刺五加中可以分离出硬脂酸、b‑谷甾醇、胡萝卜苷、芝麻素、丁香以及一些三萜皂苷类化合物等，具有抗肿瘤、抗衰老、抗疲劳、调节免疫改善心血管系统各种病症。

[0023] 本发明的口服液中大枣性味甘，性温，归脾胃经。主补中益气，养血安神。用于脾虚食少，乏力便溏、妇人脏躁。大枣除含有丰富的营养成分如大枣胡萝卜素、核黄素、抗坏血酸、维生素E及多种矿物质外，还含有大枣皂碱、酸枣仁皂碱B、环磷腺苷等多种药用成分，参与体内多种生理生化过程的调节，具有增加血清总蛋白和白蛋白的作用，并对肿瘤、冠心病、心肌梗塞以及肝炎、营养不良性水肿、高血压等慢性疾病患者有辅助治疗作用。

[0024] 本发明口服液中还可以加入蔗糖或异麦芽酮糖醇、苯甲酸钠、以及柠檬酸中的一种或多种。其中，蔗糖为甜味剂，可以改善产品的口味；苯甲酸钠作为防腐剂，可以防止微生物污染；柠檬酸为酸碱度调节剂，可以将口服液的酸碱度控制在合适的范围，既可以改善产品的口味，又可以提高产品的稳定性。

[0025] 本发明的有益效果：本发明口服液的功效成分含量高，产品质量稳定，且抗疲劳和免疫调节作用显著提升。

[0026] 本发明制备方法在上述口服液改进配方基础上，对工艺进行改进，使得羊胎盘、刺五加以及大枣共同作用下，功效成分含量增加，且通过本发明工艺控制，提升了口服液产品质量的稳定性，三个月加速试验(温度37～40℃、相对湿度75％条件下)后产品功效成分含量稳定，例如蛋白质降低率也仅为3.5％左右，总皂甙降低率仅为6％左右。

[0027] 本发明口服液中原料少，制备方法简单快捷，有效成分更容易溶解，更容易被吸收。

具体实施方式

[0028] 下面将结合本发明实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。以下对至少一个示例性实施例的描述实际上仅仅是说明性的，决不作为对本发明及其应用或使用的任何限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

[0029] 实施例1‑5

[0030] 实施例1‑5的配方和工艺详见表1。各实施例具体制备步骤如下：

[0031] 1)按照表1配方称取原料。

[0032] 2)将大枣和刺五加混合，加浓度为60％的乙醇浸泡过夜，煮沸提取4小时，过滤，滤液回收乙醇后冷沉24小时，提取上清液得到混合提取液。

[0033] 3)清洗干净羊胎盘，绞碎，加入3倍量的水，搅匀，调节pH为7.5，按照表1所示温度进行加热，加入适量胰蛋白酶，水解，维持溶液pH值为7.4～7.6，水解4小时，过滤，滤液冷沉24小时，提取上清液得到羊胎盘水解液；

[0034] 4)取蔗糖加水并加热使其溶解，加入混合提取液、羊胎盘水解液、苯甲酸钠和柠檬酸；搅匀，加水至足量(实施例5直接加水至足量)，按照表1所示调节溶液pH，精滤，用10mL瓶灌封，每支装量为10mL。上述操作均在洁净度为10万级净化车间中进行。

[0035] 表1各实施例配方和工艺

[0036]

[0037]

[0038] 由表1可知：实施例1‑5制备得到的口服液中，蛋白质和总皂甙均满足蛋白质≥2.4g/100mL，总皂甙≥4.2mg/100mL的标准，本发明制备的口服液蛋白质和总皂苷含量较高。

[0039] 对比例1‑3

[0040] 对比例1‑3的配方和工艺如表2所示。具体步骤为：乙醇提取刺五加或大枣，得到提取液；酶解羊胎盘得到羊胎盘水解液；将提取液和羊胎盘提取液混合，加入辅料和/或水，精滤，灌封。辅料为蔗糖、苯甲酸钠和柠檬酸。上述各步骤与本发明类似，区别在于，原料组成、酶解羊胎盘温度和pH值，具体如表2所示。对比例1‑3得到的产品，各取三支，按照本发明实施例的检测方法进行了功效成分鉴定，具体如表2所示。

[0041] 表2各对比例配方和工艺

[0042]

[0043] 由表2可知：对比例1‑3中，蛋白质均≤2.4g/100mL，总皂甙均≤4.2mg/100mL。通过将表1和表2进行对比，可以看出对比例1‑3功效成分含量明显低于本发明实施例1‑4功效成分含量。

[0044] 本发明还进行了口服液的理化指标和微生物指标检测、毒理学试验、稳定性试验、免疫调节检测、抗疲劳检测。

[0045] 理化指标和微生物指标检测

[0046] 本发明实施例1‑4均按GB/T5009进行理化指标检测，按GB 4789进行微生物指标检测，结果显示本发明口服液理化指标和微生物指标符合国标规定。

[0047] 毒理学试验

[0048] 本发明实施例1‑4(5倍浓缩液)按GB‑15193进行检测，结果如下：

[0049] 急性毒性：采用本发明口服液剂量为2.15g/kg、4.64g/kg、10.0g/kg、21.5g/kg，每剂量分别对雌性和雄性大小鼠进行试验。结果显示：试验期间，各组小鼠、大鼠均未见明显症状也无死亡。本发明口服液对大、小鼠经口LD50雌雄均大于21.5g/kg体重，属无毒性。

[0050] 微核试验：采用本发明口服液剂量为5g/kg、10g/kg、20g/kg，剂量为0g/kg作为阴性对照组，环磷酰胺0.04g/kg作为阳性对照组，分别对雌性和雄性小鼠进行试验。结果显示：对小鼠进行微核试验，雌雄各剂量与阴性对照组相比，微核千分率均无显著性差异，阳性对照组明显高于阴性对照组。本发明口服液对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验检测结果为阴性。

[0051] 小鼠精子畸形试验：采用本发明口服液剂量为5g/kg、10g/kg、20g/kg，剂量为0g/kg作为阴性对照组，MMC剂量0.002g/kg作为阳性对照组，分别进行试验，结果显示：各剂量组与阴性对照组比较小鼠精子畸形发生率无显著性差异，阳性对照组明显高于阴性对照组。本发明口服液对小鼠精子畸形试验检测结果为阴性。

[0052] Ames试验检测：采用本发明口服液剂量为160μg/皿、800μg/皿、4000μg/皿、20000g/皿、100000μg/皿五个剂量组，外加阴性对照和阳性对照，菌株为TA97a、TA98、TA100、TA102。采用标准平板掺入法，37℃培养箱孵育48小时，计算回变菌落数。结果显示：在100000μg/皿时出现抑菌现象，其余不同浓度受试物回变菌落与阴性对照组相近似，而阳性对照组均高于阴性对照回变菌落数2倍以上。本发明口服液Ames试验检测结果为阴性。

[0053] 大鼠30天喂养试验：本发明口服液大鼠30天喂养试验设1.7、5.0、7.0g/kg体重组，约相当于人体推荐量的25、75、100倍。试验结果未见动物出现中毒症状，大体解剖及组织学观察也未见异常病理改变，血常规及生化指标也未见损害性影响。

[0054] 稳定性试验

[0055] 本发明实施例1‑4分别进行了稳定性试验，结果显示，实施例1‑4产品质量稳定。

[0056] 下面以实施例2为例对四次检测结果进行说明。其中，四次检测分别为0个月、1个月、2个月、3个月，如表3‑表6所示。

[0057] 表3实施例2的3支口服液0个月检测结果

[0058]

[0059] 表4实施例2的3支口服液1个月检测结果

[0060]

[0061] 表5实施例2的3支口服液2个月检测结果

[0062]

[0063] 表6实施例2的3支口服液3个月检测结果

[0064]

[0065] 由上表3‑表6可以看出：本发明上述口服液在温度37～40℃和相对湿度75％条件下，存放三个月，每月检测一次，共四次，检验结果均符合Q/ZKD0022002标准，产品质量稳定，可保存24个月。具体地，存放三个月后，三支口服液pH、相对密度、以及砷、铅、汞含量基本不变；蛋白质平均含量仅降低3.95％，总皂甙平均含量仅降低6.23％；大肠菌群、霉菌、酵母均未增加，沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌也均未检出。

[0066] 免疫调节检测

[0067] 本发明实施例1‑4进行了免疫调节作用检测，结果显示实施例1‑4口服液均具有免疫调节作用。

[0068] 下面以实施例2为例进行详细说明。按照《保健食品功能学评价程序和检验方法》中免疫调节检验方法进行。即用迟发性变态反应、血清溶血素测定、碳廓清试验及脏/体比值评价本发明口服液对小鼠免疫功能的影响。其中，试验前后动物体重变化情况如表7所示。本发明口服液对淋巴器官的影响如表8所示。二硝基氟苯(DNFB)诱导小鼠DTH(耳肿胀法)，血清溶血素测定，小鼠碳廓清试验的检测结果分别如表9‑11所示。

[0069] 表7试验前后动物体重变化情况

[0070]

[0071] 由上表可知：小鼠试验30d后，各组初始、中期及终体重无统计学差异(P＞0.05)。

[0072] 表8服液对淋巴器官的影响

[0073]

[0074] 由上表可知：口服液，各剂量组间胸/体比、脾/体比值经统计学检验无显著差异(p＞0.05)。

[0075] 表9口服液对DNFB诱导小鼠DTH的影响

[0076]

[0077] 由上表可知：口服液高、中、低剂量组THD明显高于对照组(p＜0.01)。

[0078] 表10口服液对小鼠血清溶血素形成的影响

[0079]

[0080] 由上表可知：口服液高剂量组血清溶血素值明显高于对照组(p＜0.05)。

[0081] 表11口服液对小鼠碳廓清作用的影响

[0082]

[0083] 由上表可知：口服液高、中、低剂量组吞噬指数高于对照组(p＜0.01)。

[0084] 上述免疫检测结果：本发明口服液以1.7ml/kg、3.3ml/kg、10ml/kg连续给养30d，结果显示本发明口服液具有促进小鼠溶血素的形成，增强小鼠DTH及碳廓清的能力，因此，本发明口服液具有免疫调节作用。

[0085] 抗疲劳检测

[0086] 本发明实施例1‑4进行了抗疲劳检测，结果显示实施例1‑4口服液均具有抗疲劳作用。

[0087] 下面以实施例2为例进行详细说明。按照《保健食品功能学评价程序和检验方法》中免疫调节检验方法进行。包括：负重游泳试验，血乳酸测定，血清尿素氮测定，肝糖原测定。饲养条件为温度：20～22℃，相对湿度为50～70％的环境中。其中，试验前后动物体重无明显差异。本发明口服液对小鼠游泳时间的影响，对小鼠血乳酸的影响，对血清尿素氮和肝糖原的影响分别如表12、表13、表14所示。

[0088] 表12口服液对小鼠负重游泳时间的影响

[0089]

[0090] 由上表可以看出：高剂量组小鼠负重游泳时间明显长于对照组。

[0091] 表13口服液对小鼠血乳酸的影响

[0092]

[0093] 由上表可以看出：游泳后0min，高、中、低剂量组及游泳30min高、中剂量组小鼠血乳酸明显低于对照组(p＜0.05或p＜0.01)。

[0094] 表14口服液对小鼠血清尿素氮、肝糖原的影响

[0095]

[0096] 由上表可以看出：高中低剂量组肝糖原含量均高于对照组，且高剂量组小鼠肝糖原含量明显高于对照组。

[0097] 上述抗疲劳检测结果：采用负重游泳试验和生化指标检测对本发明口服液的抗疲劳作用进行检测，高中低剂量连续给小鼠灌胃30d，结果显示：高剂量组小鼠负重游泳时间明显长于对照组；游泳后0min高中低剂量组及30min高中剂量组小鼠血乳酸明显低于对照组；高剂量组小鼠肝糖原含量明显高于对照组，本发明口服液具有抗疲劳作用。

[0098] 本发明的描述是为了示例和描述起见而给出的，而并不是无遗漏的或者将本发明限于所公开的形式。很多修改和变化对于本领域的普通技术人员而言是显然的。选择和描述实施例是为了更好说明本发明的原理和实际应用，并且使本领域的普通技术人员能够理解本发明从而设计适于特定用途的带有各种修改的各种实施例。