一种高浓缩液相生长因子在诱导牙龈乳头再生中的应用

摘要

本发明公开了一种高浓缩液相生长因子在诱导牙龈乳头再生中的应用，属于医学生物技术领域，通过在患处对应的前庭沟处注射阿替卡因进行局部浸润麻醉，接着将高浓缩液相生长因子注射至经浸润麻醉的牙龈乳头基底的结缔组织层，从而有效减小和消除了牙龈“黑三角”，促进了牙龈软组织再生并诱导了牙龈乳头的再生，具有广阔的临床应用前景。

权利要求

1.一种高浓缩液相生长因子在制备诱导牙龈乳头再生产品中的应用，其特征在于，所述高浓缩液相生长因子的制备方法包括以下步骤：步骤1，血样离心

人体静脉血经离心处理后形成三层血液组分层:贫血小板层(PPP层)，高浓缩生长因子层(CGF层)，红细胞层(RBC层)；

步骤2，血液组分预处理

取S1的PPP层液体置于纤维蛋白凝胶制造仪中，并于75℃下加热处理9min，得到淡黄色凝胶，冷却至室温；

提取S1的CGF层与RBC层交界处的液体，得到临界血液组分；

步骤3，高浓缩液相生长因子的制备

将S2得到的淡黄色凝胶与临界血液组分按照4:1的体积比充分混合均匀后，得到高浓缩液相生长因子；

所述牙龈为厚龈型。

2.根据权利要求1所述的高浓缩液相生长因子在制备诱导牙龈乳头再生产品中的应用，其特征在于，步骤1中，所述离心步骤为：2700rpm，离心2min后，降至2400rpm，离心4min，再加速到2700rpm离心4min，3300rpm离心3min。

3.根据权利要求1所述的高浓缩液相生长因子在制备诱导牙龈乳头再生产品中的应用，其特征在于，步骤2中，所述淡黄色凝胶为三维联结立体纤维蛋白支架。

4.根据权利要求1所述的高浓缩液相生长因子在制备诱导牙龈乳头再生产品中的应用，其特征在于，步骤2中，所述临界血液组分富含血管新生与胶原生成所需的多种生长因子与CD34+干细胞。

说明书

一种高浓缩液相生长因子在诱导牙龈乳头再生中的应用

技术领域

[0001] 本发明涉及医学生物技术领域，具体涉及一种高浓缩液相生长因子在诱导牙龈乳头再生中的应用。

背景技术

[0002] 龈乳头退缩引起的“黑三角”在临床非常常见，可由邻面牙槽嵴吸收，牙齿位置异常导致，也是正畸治疗与种植术后的常见并发症。龈乳头退缩可导致邻间隙暴露，影响邻面菌斑控制，加重牙齿邻面食物嵌塞，引发邻面龋坏，加重邻面牙槽嵴吸收，并造成牙齿不美观和发音功能损害等问题。因此，完整的龈乳头对于牙龈组织和牙齿均有重要意义。

[0003] 现有的龈乳头重建方法主要包括牙周膜龈手术，如隧道术、游离龈瓣移植术等、邻面去釉法、正畸牙移动法、玻尿酸/透明质酸注射法和激光修整+临时冠诱导法等。尽管已有多种重建龈乳头的手术与非手术方法，但这些方法均未达到真正意义上的龈乳头组织再生。而借助组织工程学原理重建长期稳定的龈乳头组织也是目前的难点。因此，本发明提供一种高浓缩液相生长因子在诱导牙龈乳头再生中的应用。

发明内容

[0004] 本发明提供了一种高浓缩液相生长因子在诱导牙龈乳头再生中的应用，该高浓缩液相生长因子有效减小和消除了牙龈“黑三角”，诱导了牙龈乳头的再生。

[0005] 本发明提供了一种高浓缩液相生长因子在诱导牙龈乳头再生中的应用，其特征在于，包括以下步骤：

[0006] S1，术前准备

[0007] 在患处对应的前庭沟处注射4％阿替卡因进行局部浸润麻醉；

[0008] S2，注射

[0009] 将高浓缩液相生长因子注射至经S1浸润麻醉的牙龈乳头基底的结缔组织层；

[0010] S3，牙龈乳头再生

[0011] 经S2处理后的牙龈乳头出现明显再生。

[0012] 优选的，S1中，所述阿替卡因中含有1/100000肾上腺素。

[0013] 优选的，S2中，所述高浓缩液相生长因子的单次注射量为0.05～0.2ml。

[0014] 优选的，S2中，所述高浓缩液相生长因子的注射次数为4～8次，每次间隔时间为30天。

[0015] 优选的，所述高浓缩液相生长因子的制备方法包括以下步骤：

[0016] 步骤1，血样离心

[0017] 人体静脉血经离心处理后形成三层血液组分层:贫血小板层(PPP层)，高浓缩生长因子层(CGF层)，红细胞层(RBC层)；

[0018] 步骤2，血液组分预处理

[0019] 取S1的PPP层液体置于纤维蛋白凝胶制造仪中，并于75℃下加热处理9min，得到淡黄色凝胶，冷却至室温；

[0020] 提取S1的CGF层与RBC层交界处的液体，得到临界血液组分；

[0021] 步骤3，高浓缩液相生长因子的制备

[0022] 将S2得到的淡黄色凝胶与临界血液组分按照4:1的体积比充分混合均匀后，得到高浓缩液相生长因子。

[0023] 优选的，步骤1中，所述离心步骤为：2700rpm，离心2min后，降至2400rpm，离心4min，再加速到2700rpm离心4min，3300rpm离心3min。

[0024] 优选的，步骤2中，所述淡黄色凝胶为三维联结立体纤维蛋白支架。

[0025] 优选的，步骤2中，所述临界血液组分为富含血管新生与胶原生成所需的多种生长因子与CD34+干细胞。

[0026] 与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

[0027] (1)本发明高浓缩液相生长因子为自体第三代血小板制品，其可以提供牙龈软组织再生所必须三维联结纤维蛋白网络支架，活的离体干细胞(CD34+干细胞)以及高浓度生长因子，可大大缩小厚龈型患者龈乳头退缩位点的“黑三角”高度和面积，并有效诱导牙龈乳头的再生，疗效显著。

[0028] (2)本发明提供的高浓缩液相生长因子在诱导牙龈乳头再生中的应用，操作方法简单，具有广阔的临床应用前景和潜在的经济价值。

附图说明

[0029] 图1为高浓缩液相生长因子的制备过程图；

[0030] 图2为高浓缩液相生长因子在牙龈乳头基部的注射图；

[0031] 图3是治疗前后牙龈乳头的对比图；其中A图和C图为治疗前牙龈乳头图，B图和D图为治疗后牙龈乳头图。

具体实施方式

[0032] 为了使本领域技术人员更好地理解本发明的技术方案能予以实施，下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但所举实施例不作为对本发明的限定。下述试验方法和检测方法，如没有特殊说明，均为常规方法；所述试剂和原料，如没有特殊说明，均为市售。

[0033] 高浓缩液相生长因子的制备方法，如图1所示，包括以下步骤：

[0034] 步骤1，血样离心

[0035] 人体静脉血采用专用离心机经离心处理后形成三层血液组分层:贫血小板层(PPP层)，高浓缩生长因子层(CGF层)，红细胞层(RBC层)；

[0036] 所述离心步骤为：2700rpm，离心2min后，降至2400rpm，离心4min，再加速到2700rpm离心4min，3300rpm离心3min；

[0037] 步骤2，血液组分预处理

[0038] 采用一次性螺口注射器抽取S1的PPP层液体置于纤维蛋白凝胶制造仪中，并于75℃下加热处理9min，得到三维联结立体纤维蛋白支架的淡黄色凝胶，冷却至室温；

[0039] 采用另一只一次性螺口注射器抽取S1的CGF层与RBC层交界处的液体，得到临界血液组分，所述临界血液组分为富含血管新生与胶原生成所需的多种生长因子与CD34+干细胞；

[0040] 步骤3，高浓缩液相生长因子的制备

[0041] 采用一次性三通装置将S2中两只一次性螺口注射器中的淡黄色凝胶与临界血液组分按照4:1的体积比充分混合均匀后，得到高浓缩液相生长因子。

[0042] 实施例1

[0043] 一种高浓缩液相生长因子在诱导牙龈乳头再生中的应用，包括以下步骤：

[0044] S1，术前准备

[0045] 在患处对应的前庭沟处注射含有1/100000肾上腺素的4％阿替卡因进行局部浸润麻醉；

[0046] S2，注射

[0047] 将0.05ml的高浓缩液相生长因子注射至经S1浸润麻醉的牙龈乳头基底的结缔组织层，如图2所示，间隔30天后，再次于同一部位注射0.05ml的高浓缩液相生长因子，重复注射4次后停止；

[0048] S3，牙龈乳头再生

[0049] 如图3所示，经S2处理后的牙龈乳头出现明显再生。

[0050] 实施例2

[0051] 一种高浓缩液相生长因子在诱导牙龈乳头再生中的应用，包括以下步骤：

[0052] S1，术前准备

[0053] 在患处对应的前庭沟处注射含有1/100000肾上腺素的4％阿替卡因进行局部浸润麻醉；

[0054] S2，注射

[0055] 将0.2ml的高浓缩液相生长因子注射至经S1浸润麻醉的牙龈乳头基底的结缔组织层，如图2所示，间隔30天后，再次于同一部位注射0.2ml的高浓缩液相生长因子，重复注射8次后停止；

[0056] S3，牙龈乳头再生

[0057] 如图3所示，经S2处理后的牙龈乳头出现明显再生。

[0058] 实施例3

[0059] 一种高浓缩液相生长因子在诱导牙龈乳头再生中的应用，包括以下步骤：

[0060] S1，术前准备

[0061] 在患处对应的前庭沟处注射含有1/100000肾上腺素的4％阿替卡因进行局部浸润麻醉；

[0062] S2，注射

[0063] 将0.1ml的高浓缩液相生长因子注射至经S1浸润麻醉的牙龈乳头基底的结缔组织层，如图2所示，间隔30天后，再次于同一部位注射0.1ml的高浓缩液相生长因子，重复注射5次后停止；

[0064] S3，牙龈乳头再生

[0065] 如图3所示，经S2处理后的牙龈乳头出现明显再生。

[0066] 实施例4

[0067] S1，术前准备

[0068] 在患处对应的前庭沟处注射含有1/100000肾上腺素的4％阿替卡因进行局部浸润麻醉；

[0069] S2，注射

[0070] 将0.15ml的高浓缩液相生长因子注射至经S1浸润麻醉的牙龈乳头基底的结缔组织层，如图2所示，间隔30天后，再次于同一部位注射0.15ml的高浓缩液相生长因子，重复注射6次后停止；

[0071] S3，牙龈乳头再生

[0072] 如图3所示，经S2处理后的牙龈乳头出现明显再生。

[0073] 实施例5

[0074] S1，术前准备

[0075] 在患处对应的前庭沟处注射含有1/100000肾上腺素的4％阿替卡因进行局部浸润麻醉；

[0076] S2，注射

[0077] 将0.1ml的高浓缩液相生长因子注射至经S1浸润麻醉的牙龈乳头基底的结缔组织层，如图2所示，间隔30天后，再次于同一部位注射0.1ml的高浓缩液相生长因子，重复注射7次后停止；

[0078] S3，牙龈乳头再生

[0079] 如图3所示，经S2处理后的牙龈乳头出现明显再生。

[0080] 上述实施例1～5中高浓缩液相生长因子对于诱导牙龈乳头再生的疗效近似，下面仅以实施例3为例，检测由于牙龈“黑三角”导致龈乳头退缩的治疗效果。

[0081] 1、临床试验方法

[0082] 选取10名2020年7月至2021年7月就诊于西安交通大学口腔医院牙周科的龈乳头退缩患者的67个“黑三角”位点使用标准化设备术前拍照，采用阿替卡因局麻，每位志愿者注射5次。每次注射间隔30天。自第一次注射后开始为期12个月的随访。所有位点进行临床和影像学指标测量并分组，结果使用SPSS25.0进行统计学分析。

[0083] 2、试验结果

[0084] 术后12月的牙龈“黑三角”高度(BTH)、面积(BTA)较基线水平均有统计学差异(P＜0.05)，它们之间的差值分别为△BTH，△BTA。薄龈型位点△BTH，△BTA在基线与12月后不存在统计学差异，而厚龈型存在统计学差异(P＜0.05)。牙冠宽长比(CW/CL)、邻面接触区长度(IPC)、骨嵴顶至邻面接触点距离(CP‑BC)、根尖距离(RD)及颊舌侧骨板厚度(BCW)与△BTH，△BTA不存在线性关系(P＞0.05)。Norland&TarnowⅠ‑Ⅲ类龈乳头退缩位点的组间比较显示：Ⅰ类与Ⅱ类龈乳头退缩以及Ⅰ类与Ⅲ类龈乳头退缩的△BTH、△BTA均存在统计学差异(P＜0.05)，而Ⅱ、Ⅲ类之间不存在差异；Ⅱ、Ⅲ类较Ⅰ类的△BTH，△BTA变化更显著。各位点的△BTH，△BTA比较无统计学差异(P＞0.05)。

[0085] 3、结论

[0086] 注射高浓缩液相生长因子对于厚龈型牙龈“黑三角”位点面积缩小和龈乳头高度改善较薄龈型牙龈“黑三角”更为有效。相较于Ⅰ类龈乳头退缩，高浓缩液相生长因子注射法对于Norland&TarnowⅡ、Ⅲ类龈乳头退缩位点的“黑三角”面积缩小及龈乳头高度改善更为显著。

[0087] 综上所述，本发明将高浓缩液相生长因子注射于牙龈乳头基底的结缔组织处，对于治疗牙龈“黑三角”导致的牙龈乳头退缩疗效显著，能有效缓解患者的临床症状和体征，具有广阔的临床应用前景。

[0088] 显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。