一种治疗肺心病的药物组合物及其制备方法和用途

摘要

本发明提供了一种治疗肺心病的药物组合物，由如下重量份数的原料药制成：黄芪20～30份、葶苈子12～18份、补骨脂5～10份、川芎12～18份、泽泻5～10份、桔梗5～10份、大枣1～5份。本发明组合物配伍合理，诸药共奏益气温肾，泻肺平喘之功，对慢性肺心病缓解期肺肾气虚证具有优异疗效，可有效改善慢性肺心病缓解期右心衰，提高血氧分压，降低血浆纤维蛋白原含量，降低血液粘稠度，改善心肌肥厚，强心、利尿并改善肺水肿，改善血管舒缩功能，具有很好的临床应用前景。

权利要求

1.一种治疗肺心病的药物组合物，其特征在于，它由如下重量份数的原料药制成：黄芪

24份、葶苈子15份、补骨脂9份、川芎15份、泽泻9份、桔梗6份、大枣3份。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述葶苈子是北葶苈子，所述补骨脂为盐补骨脂，所述川芎为酒川芎，所述泽泻为盐泽泻。

3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，它是以所述原料药的原生药粉、水和/或有机溶剂提取物为活性成分，加上或不加药学上可接受的辅料制备而成的制剂。

4.如权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述制剂为口服制剂。

5.如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述口服制剂为浸膏剂、酒剂、煎膏剂、汤剂、散剂、丸剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂或合剂。

6.权利要求1～5任一项所述药物组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)原料药加水煎煮，滤过得煎煮液；

(2)煎煮液直接浓缩，或煎煮液浓缩后加乙醇沉淀，再浓缩上清液；

或，(a)黄芪、川芎用乙醇回流提取滤过得提取液，其余原料药加水煎煮滤过得煎煮液；

(b)提取液直接浓缩得浓缩膏A；煎煮液直接浓缩，或煎煮液浓缩后加乙醇沉淀，再浓缩上清液得浓缩膏B，合并浓缩膏A和浓缩膏B。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)和/或步骤(a)所述加水煎煮是：加水煎煮3次，每次1小时；

步骤(a)所述乙醇回流提取是：加40％～60％乙醇回流提取2次，每次2小时；

步骤(2)和/或步骤(b)所述煎煮液浓缩后加乙醇沉淀的方法为：浓缩后的煎煮液加乙醇使乙醇含量达40％～60％，静置沉淀。

8.权利要求1～5任一项所述药物组合物在制备治疗肺心病的药物中的用途。

9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述药物是用于慢性肺心病缓解期治疗的药物。

10.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述药物是改善慢性肺心病缓解期右心衰的药物。

11.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述药物是治疗肺肾气虚证肺心病的药物。

说明书

一种治疗肺心病的药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

[0001] 本发明属于中医药领域，具体涉及一种治疗肺心病的药物组合物及其制 备方法和用途。

背景技术

[0002] 慢性肺源性心脏病(Chronic pulmonary heart disease，CPHD，简称慢性 肺心病)是指由肺组织、胸廓或肺动脉系统病变引起的肺动脉高压，伴或不 伴有右心衰竭的一类疾病。临床表现为胸闷、气促、咳嗽痰多、烦躁、心悸、 面色晦暗或口唇紫绀、脘腹胀满、肢体浮肿等，严重者可出现神昏、惊厥、 出血、喘脱等危重证候。CPHD是一种多发的临床工作中比较常见且与呼吸 系统疾病密切相关的心脏疾病，同时亦是一种较为严重的可危及患者生命的 疾病，它好发于中老年人群，且随年龄增长而患病率增高。

[0003] 肺心病在临床治疗过程中分为急性加重期和慢性缓解期。在目前的西医 治疗中，主要针对肺心病急性发作期的治疗，其临床治疗进展缓慢，新靶点 药物多处在动物实验研究或临床试验阶段，国内临床运用药物靶点治疗的报 道较为少见。针对患者出现的感染、咳喘以及并发呼吸、心力衰竭、心律失 常等症状，西医采取常规的抗感染、止咳、化痰、解痉、平喘、改善循环等 治疗，尚无特殊治疗方式。

[0004] 中医古代文献中无肺心病这一概念，但早已有类似的记载。如《灵枢·胀 论》曰：“肺胀者，虚满而喘咳。”《金匮要略·痰饮咳嗽病脉证并治》篇中提 到：“咳逆倚息，短气不得卧，其形如肿。”《灵枢·水胀》有云：“其颈脉动， 时咳，阴股间寒，足胫肿。腹乃大，其水已成矣。”因此，肺心病属于中医学 “肺胀”“痰饮”“水肿”等范畴。中医学认为肺心病临床多属虚实夹杂，故 治疗需标本兼顾。而肺心病缓解期的中医证候以本虚为主，其次为本虚标实 和标实证候；肺心病缓解期主要分为肺脾气虚、肺肾气虚、心肺气虚三个证 型，表现、治法不甚相同。其中，肺脾气虚：症见气短声低，自汗怕风，常 易感冒，倦怠乏力，食少便溏，舌淡苔白，脉细弱。治宜健脾益气，培土生 金。

[0005] 肺肾气虚：症见呼吸短促难续，动则喘甚，腰酸耳鸣，下肢足跗浮肿。 或兼见五心烦热，口干，舌红少苔，脉细数；或兼见畏寒肢冷，面色苍白， 舌质淡，脉细弱。治以补肺益肾。

[0006] 心肺气虚：咳喘多年，平日里胸闷气短，咳逆倚息，胸呈桶状，指端粗 大，或兼心痛，舌质淡或紫黯，脉弱。由于病久及心，心气虚无力推动血脉 运行，故出现一系列瘀血症候。治以补益心肺，活血化瘀。

[0007] 目前中医药对肺心病的防治主要采用传统汤剂、散剂、穴位治疗、中药 注射制剂等方式。然而，现有的中药方剂或为大复方，组成复杂，成本高昂  (例如专利申请CN104189840A公开的治疗慢性肺源性心脏病的药物，由高 达15味原料药复配而成)；或疗效不确切，难以衡量其实际应用价值(例如 专利申请CN100496530C公开了治疗肺心病的组合物，通过复杂的工艺对葶 苈子和川芎进行了提取，但并未公开实际治疗效果)。更重要的是，以上两个 专利均没有明确所治疗肺心病的中医证型。

[0008] 因此，基于中医基础理论，研发一种配伍合理，中医证型明确，效果优 异的治疗肺心病的新的中药组方，具有非常重要的意义。

发明内容

[0009] 本发明的目的在于提供一种配伍合理，疗效确切的治疗肺心病的中药组 方。

[0010] 本发明提供了一种治疗肺心病的药物组合物，它由如下重量份数的原料 药制成：

[0011] 黄芪20～30份、葶苈子12～18份、补骨脂5～10份、川芎12～18份、泽 泻5～10份、桔梗5～10份、大枣1～5份。

[0012] 进一步地，上述药物组合物由如下重量份数的原料药制成：

[0013] 黄芪24份、葶苈子15份、补骨脂9份、川芎15份、泽泻9份、桔梗6 份、大枣3份。

[0014] 更进一步地，上述葶苈子是北葶苈子，所述补骨脂为盐补骨脂，所述川 芎为酒川芎，所述泽泻为盐泽泻。

[0015] 进一步地，上述药物组合物是以所述原料药的原生药粉、水和/或有机溶 剂提取物为活性成分，加上或不加药学上可接受的辅料制备而成的制剂。

[0016] 更进一步地，上述制剂为口服制剂。

[0017] 更进一步地，上述口服制剂为浸膏剂、煎膏剂、汤剂、散剂、丸剂、片 剂、颗粒剂、胶囊剂或口服液。

[0018] 本发明还提供了上述药物组合物的制备方法，包括如下步骤：

[0019] (1)原料药加水煎煮，滤过得煎煮液；

[0020] (2)煎煮液直接浓缩，或煎煮液浓缩后加乙醇沉淀，再浓缩上清液；

[0021] 或，(a)黄芪、川芎用乙醇回流提取滤过得提取液，其余原料药加水煎 煮滤过得煎煮液；

[0022] (b)提取液直接浓缩得浓缩膏A；煎煮液直接浓缩，或煎煮液浓缩后加 乙醇沉淀，再浓缩上清液得浓缩膏B，合并浓缩膏A和浓缩膏B

[0023] 进一步地，步骤(1)和/或步骤(a)所述加水煎煮是：加水煎煮3次， 每次1小时；

[0024] 步骤(a)所述乙醇回流提取是：加40％～60％乙醇回流提取2次，每次 2小时；

[0025] 步骤(2)和/或步骤(b)所述煎煮液浓缩后加乙醇沉淀的方法为：浓缩 后的煎煮液加乙醇使乙醇含量达40％～60％，静置沉淀。

[0026] 本发明还提供了上述药物组合物在治疗肺心病的药物中的用途，优选的， 所述药物是用于慢性肺心病缓解期治疗的药物。

[0027] 更进一步地，上述药物是改善慢性肺心病缓解期右心衰的药物。

[0028] 更进一步地，上述药物是治疗肺肾气虚证肺心病的药物。

[0029] 本发明的有益效果：本发明具有改善肺心病的效果，尤其是对于慢性肺 心病缓解期右心衰有改善作用，可提高血氧分压，降低血浆纤维蛋白原含量， 降低血液粘稠度，改善心肌肥厚，强心、利尿并改善肺水肿，改善血管舒缩 功能；本发明组合物配伍合理，诸药共奏益气温肾，泻肺平喘之功，对慢性 肺心病缓解期肺肾气虚证具有优异疗效，具有很好的临床应用前景。

[0030] 肺心病为本虚标实之症，缓解期以肺肾气虚为主。肺心病缓解期(肺肾 气虚证)，症见咳嗽气喘，活动后加重，心悸乏力，痰白质稀释，腰酸腿软， 怕冷，或尿少浮肿，舌淡苔白或白腻，脉沉细或沉滑。本发明方中黄芪补气 升阳，利水消肿，重在补肺脾气虚，为君药；葶苈子泻肺平喘，行水消肿， 盐补骨脂其温肾助阳，纳气定喘之力更强，两药共为臣药，共助黄芪利水消 肿，补气升阳；酒川芎活血祛瘀、行气开郁、通络止痛作用更强，盐泽泻更 能入肾，利水消肿，共为佐药，一则助君药补气而不滞，二则助臣药泻肺平 喘；桔梗引药上行，宣肺祛痰兼能活血，大枣补中益气，甘缓和中共为使药。 诸药配合，共奏益气温肾，泻肺平喘之功。

[0031] 显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段， 在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、 替换或变更。

[0032] 以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步 的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。 凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

[0033] 图1为各组大鼠体质量随时间的变化图及生存曲线图。

[0034] 图2为各组大鼠尿量情况。

[0035] 图3为各组大鼠的RVHI和LI。

[0036] 图4为各组大鼠的动脉血气分析指标。

[0037] 图5为各组大鼠的血流变化指标。

[0038] 图6为各组大鼠的心肌能量水平。

[0039] 图7为各组大鼠的血清ET‑1、ANP和NO含量。

[0040] 图8为各组大鼠的肺动脉主干组织切片结果。

[0041] 图9为各组大鼠的肺脏组织切片结果。

[0042] 图10为各组大鼠的心肌组织切片结果。

具体实施方式

[0043] 本发明所用原料与设备除另有说明外均为已知产品，通过购买市售产品 所得。

[0044] 野百合碱(monocrotaline，MCT)，批号：HR5215W5，购自宝鸡市辰光 生物有限公司；ATP标准品，批号：1001665443，美国Sigma公司；ADP标 准品，批号：101606467，美国Sigma公司；AMP标准品，批号：WXBB0607V， 美国Sigma公司；大鼠内皮素(ET‑1)ELISA试剂盒，批号：E‑EL‑R1458c， 规格96T，伊莱瑞特生物科技有限公司公司生产；一氧化氮(NO)比色法测 试盒，批号：E‑BC‑K035‑M，规格96T，伊莱瑞特生物科技有限公司公司生 产；大鼠心钠素(ANP)ELISA试剂盒，批号：E‑EL‑R0017c，规格96T， 伊莱瑞特生物科技有限公司公司生产。

[0045] 实施例1、本发明组合物的制备

[0046] 原料药：黄芪24g、葶苈子15g、补骨脂9g、川芎15g、泽泻9g、桔 梗6g、大枣3g。

[0047] 制备方法：以上七味药，第一次加8倍量水，煎煮1.0小时，第二次加8 倍量水煎煮1.0小时，第三次加6倍量水煎煮1.0小时，滤过，滤液合并，浓 缩，即得煎膏剂，1g煎膏含生药2.6g。

[0048] 实施例2、本发明组合物的制备

[0049] 原料药：黄芪24g、葶苈子15g、补骨脂9g、川芎15g、泽泻9g、桔 梗6g、大枣3g。

[0050] 制备方法：以上七味药，加水煎煮三次，每次1小时(第一次加8倍量 水，煎煮1.0小时，第二次加8倍量水煎煮1.0小时，第三次加6倍量水煎煮 1.0小时)，滤过，浓缩至相对密度为1.10～1.20(60℃)，加乙醇使含醇量达 50％，静置，取上清液，减压浓缩，即得煎膏剂，1g煎膏含生药2.6g。

[0051] 实施例3、本发明组合物的制备

[0052] 原料药：黄芪24g、葶苈子15g、补骨脂9g、川芎15g、泽泻9g、桔 梗6g、大枣3g。

[0053] 制备方法：以上七味药，取黄芪、川芎用50％乙醇回流提取二次，每次 2小时，滤过，滤液合并，减压浓缩，备用。剩余药材加水煎煮三次，每次1 小时(第一次加8倍量水，煎煮1.0小时，第二次加8倍量水煎煮1.0小时， 第三次加6倍量水煎煮1.0小时)，滤过，滤液合并，浓缩，备用。将上述浓 缩膏合并，即得煎膏剂，1g煎膏含生药2.6g。

[0054] 实施例4、本发明组合物的制备

[0055] 原料药：黄芪24g、葶苈子15g、补骨脂9g、川芎15g、泽泻9g、桔 梗6g、大枣3g。

[0056] 制备方法：以上七味药，取黄芪、川芎用50％乙醇回流提取二次，每次 2小时，滤过，滤液合并，减压浓缩，备用。剩余药材加水煎煮三次，每次1 小时(第一次加8倍量水，煎煮1.0小时，第二次加8倍量水煎煮1.0小时， 第三次加6倍量水煎煮1.0小时)，滤过，滤液合并，浓缩至相对密度为1.10～ 1.20(60℃)，加乙醇使含醇量达50％，静置，取上清液，减压浓缩，备用。 将上述浓缩膏合并，即得煎膏剂，1g煎膏含生药2.6g。

[0057] 以下通过实验例证明本发明的有益效果。

[0058] 实验例1、本发明组合物对肺心病的药理实验

[0059] 1、实验方法

[0060] 1.1、实验药物

[0061] 实施例4制备的煎膏剂，成人每日服用剂量含生药81g，则实验使用剂 量以人与大鼠体表换算系数比值(即大鼠给药剂量为人的7倍)进行换算， 成人1d服用煎膏的剂量浓度为：(81/2.6)g/60kg＝0.52g/kg，则大鼠等效剂量 1d服用煎膏剂量浓度为0.52×7＝3.64g/kg，以此为中剂量，另设1.82g/kg与 7.28g/kg分别为低剂量和高剂量。

[0062] 补肺活血胶囊，批号：012017，由广东雷允上药业有限公司生产，具有 益气活血，补肺固肾的功效，适用于肺心病(缓解期)属气虚血瘀证；用法 用量：口服，一次4粒，一日3次；药品规格：每粒装0.35g，成人1d的服 用剂量为0.35×4×3＝4.2g，成人1d服用剂量浓度为：4.2g/60kg＝0.07g/kg， 同样按照大鼠与人的体表换算系数进行换算，则大鼠的给药剂量浓度为：0.07 ⅹ7＝0.49g/kg。

[0063] 1.2、实验动物

[0064] 健康SD大鼠，全♂，SPF级，体重(180‑220g)，70只，购买于湖南 斯莱克景达实验动物有限公司，生产许可证号：SCXK(湘)2019‑0004，动物  质量合格证号：No.430727200101380874。所有动物均饲养于国家中医药管理 局成都中医药大学药理三级实验室(成都中医药大学药理三级实验室，编号： TCM2032043)，温度控制在23±1℃，湿度控制为50±5，12小时光暗周期 (8：00‑19：00光周期，19：00‑8：00暗周期)。根据美国国家卫生研究院 (National Institutes of Health，USA)指南，经成都中医药大学中医脑病药物 整合转化研究所动物保护与使用委员会批准(动物伦理批准编号： IBD2020004)，所有动物均受到人道保护。

[0065] 1.3、实验分组及给药

[0066] 大鼠适应性饲养5d后，按照体重分层后随机分为6组，即空白对照组 (Cont，n＝10只)、模型对照组(MCT，n＝12只，MCT溶于2∶8无水乙醇 生理盐水，配置成2％溶液)、补肺活血胶囊对照组(BF，n＝12只)、本发明 组合物低剂量组(HT L，n＝12只)、本发明组合物中剂量组(HT M，n＝12 只)、本发明组合物高剂量组(HT H，n＝12只)。除Cont组腹腔注射10ml/kg 生理盐水外，其余5组大鼠腹腔一次注射60mg/kg 2％MCT造模，给药体积 为10ml/kg。造模24h后，除Cont组和MCT组给予20ml/kg的生理盐水， 其余各组灌胃给予相应的药物，给药体积为20ml/kg，每天2次(早上9：00 给药一次，下午17：00给药一次)，连续给药21d。

[0067] 1.4、大鼠形态及体质量测定

[0068] 每日观察并记录大鼠的一般状况，包括活动能力，饮水进食状况，皮毛 颜色、亮度及柔顺度，呼吸频率，定期称量体重，记录各组死亡数，死亡大 鼠及时解剖分析死亡原因。

[0069] 1.5、大鼠尿量的测定

[0070] 给药19d后的大鼠预先置于代谢笼中适应2d，观察饮水、尿量是否稳定。 实验前禁食不禁水15h，称重，灌胃，给药体积均为20ml/kg，然后将大鼠分 别置于代谢笼中，收集5h累积排尿量。

[0071] 1.6、右心肥厚指数(RVHI)和肺指数(LI)测定

[0072] 末次给药后1h，腹主动脉采血结束后，处死大鼠，取出心脏，沿房室沟 剪去心房及大血管根部，沿后室壁间沟将其分离成右心室和左心室加室间隔， 滤纸吸干多余的血，用电子天平称量右心室(right ventricular，RV)及左心室 加心室间隔(left ventricular pus septal，LV+S)的重量，计算右心肥厚指数(right ventricular hypertrophy index，RVHI)。RVHI＝[RV/(LV+S)]×100％。

[0073] 同时，无菌条件下取肺，用0.9％生理盐水溶液洗净，吸水纸吸干并称肺 湿重(wW)，计算肺指数。按照肺指数值＝肺重(g)/体重(g)×100％。

[0074] 1.7、大鼠动脉血气分析检测

[0075] 灌胃给药21d后，大鼠4％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，仰卧固定在操作 台上，无菌条件下游离腹主动脉，采用肝素锂抗凝的一次性动脉血气采血针 采血1.5ml，轻轻上下颠倒摇晃混匀，4℃冰水保存，并在2h内送成都市第 五人民医院采用动脉血气分析仪测定‑PaO2、PaCO2、HCO3、TCO2、SatO2等血气相关指标。

[0076] 1.8、大鼠血流变相关指标检测

[0077] 同3.5游离腹主动脉并采集动脉血气分析血样后，取血于含肝素钠抗凝 剂的真空采血管中，轻轻摇晃混匀，为避免凝血，采用双管抗凝，混匀后于 3000r/min离心10min，3h内送成都中医药大学附属医院检验科采用血液流 变仪和凝血仪测定全血粘度、血浆黏度、血浆纤维蛋白原、红细胞聚集指数、 红细胞刚性指数、红细胞变形指数等血液流变学指标。

[0078] 1.9、大鼠右心功能测定

[0079] 1.9.1、大鼠右心肌能量水平测定

[0080] 将分离的新鲜的右心肌组织置于研钵中，加入液氮快速冷后，再按照1： 10比例加入生理盐水研磨，将充分研碎的组织溶液完全转移至无菌EP管后， 加入等体积的0.5Mol/ml的高氯酸，涡旋混匀后，4℃低温高速离心机 12000rpm，离心10min，取上清液，加入适量5mol/ml的NaOH溶液，调节 PH值为7后，静置30min再次12000rpm，离心10min，取上清液用于HPLC 法检测右心肌中ATP、AMP和ADP含量。并按照公式计算能荷(Energy charge，EC)值：EC＝([ATP]+1/2[ADP])/([ATP]+[ADP]+[AMP])

[0081] HPLC法检测右心肌组织ATP、ADP和AMP含量

[0082] A对照品配制：称取AMP标准品8.6805mg，溶解并定容于5ml纯水中， 终浓度为5×‑3 ‑410 mol/l；称取ADP标准品8.544mg，溶解并定容于50ml纯水 中，终浓度为4×10 mol/l；称‑3
取ATP标准品2.7557mg，溶解并定容于50ml 纯水中，终浓度为1×10 mol/l。分别取上述溶液50μl(AMP)、5μl(ADP) 和5μl(ATP)，充分溶解并定容于445μl纯水中，充分混溶配置成混‑4 ‑6 ‑
合标 准品溶液，使各自浓度为：AMP＝5×10 mol/l，ADP＝4×10 mol/l ATP＝1 ×10
5
mol/l。

[0083] B流动相配制：流动相A：0.05mol/L磷酸缓冲盐溶液(pH＝6.5)：称取 K2HPO4·3H2O11.4g和KH2PO4 6.8g，分别用超纯水充分溶解并定容为 1000mL；分别取315mL的K2HPO4溶液和685mL的KH2PO4溶液，置于溶 剂瓶中充分混匀后抽滤，超声10min。流动相B：色谱甲醇
500ml。

[0084] C色谱条件：流速：1.0mL/min；柱温：30℃；进样体积：20μL；检测 波长：250nmUV；色谱柱：AQ‑C18色谱柱；梯度洗脱程序见表1。

[0085] 表1梯度洗脱程序

[0086]

[0087] 1.9.2、大鼠血清内皮素(ET‑1)、一氧化氮(NO)、心钠素(ANP)含量测定[0088] 大鼠血清中内皮素(ET‑1)、心钠素(ANP)含量的测定：腹主动脉采血 2ml，室温静置2小时后，1000x g离心20min，取上清，‑80℃保存待测；待 全部标本制备完毕后，严格按照试剂盒说明书，应用ELISA法测定血清中 ET‑1、ANP含量，具体操作严格按照试剂盒说明书进行。

[0089] 大鼠血清中一氧化氮(NO)测定：腹主动脉取血1ml，25℃条件下静置 30min使血液凝结，使用4℃低温离心机于2000x g离心15min，取上清，‑80℃ 保存待测，待全部标本制备完毕后，应用比色法法测定血清中NO含量，具 体操作严格按照试剂盒说明书进行。

[0090] 1.10、统计学分析

[0091] 使用SPSS 23.0统计学软件对数据进行统计分析，计量数据中符合正态 分布的资料以均数±标准误 表示，通过方差分析检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

[0092] 2、实验结果

[0093] 2.1、药物对大鼠一般情况、体质量及生存曲线的影响

[0094] 各种大鼠体质量均随时间逐渐增加。与Cont组相比，第5d开始，其余 5组大鼠饮水进食有所减少，且体质量增加较缓慢，其中MCT组、BF组、 HT L和HT M组体质量较Cont组明显减轻(P<0.05)，呼吸频率加快，毛发 灰暗，且活动量明显减少；与MCT组相比，BF组、HT L组、HT M组和 HT H组大鼠体质量无较明显减轻，毛发光泽及活动度较MCT组有所改善， 但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)；与BF组相比，HT H组体质量在第 5d、9d和13d有明显的增加(P<0.05)，且呼吸频减慢、毛色柔顺，活动量 有所增加，其余4组体质量无统计学意义(P>0.05)。提示：HT H组大鼠体质 量、呼吸频率、毛色光泽及活动量改善较BF组更显著。

[0095] 实验过程因操作失误，Cont组于第20d死亡1只大鼠，HTM组于第4d 死亡2只大鼠。因造模及个体化差异，MCT组于第8d和20d各死亡1只大 鼠，BF组于第20d死亡2只大鼠，HT H组于第7d和20d各死亡1只大鼠 (见表2，图1)。

[0096] 表2各组大鼠体质量随时间的变化( g)

[0097]

[0098] 注：与Cont组比较，#P<0.05，与MCT组比较，*P<0.05，与BF组比较， &P<0.05。

[0099] 2.2、药物对模型大鼠尿量的影响

[0100] 与Cont组相比，其余5组尿量明显减少(P<0.05)；与MCT组相比，HT L组和HT H组尿量显著增加(P<0.05)，BF组和HT M组的尿量有增加， 但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)；与BF组相比，HT L组、HT M组和 HT H组组间比较差异无统计学意义(P>0.05)，结果显示HT有显著的利尿作 用(见表3，图2)，能有效提升肺心病小鼠的尿量，利尿效果与市售的治疗 肺心病的补肺活血胶囊相当。

[0101] 表3药物对模型大鼠尿量的影响

[0102]

[0103] 注：与Cont组比较，#P<0.05，与MCT组比较，*P<0.05，与BF组比较， &P<0.05。

[0104] 2.3、药物对大鼠RVHI和LI的影响

[0105] 与Cont组相比，MCT组RVHI和LI均显著增加(P<0.05)；与MCT组 相比，HT H组RVHI和LI均显著减少(P<0.05)；与BF组相比，RVHI和 LI组间比较差异无统计学意义(P>0.05)，实验结果显示：HT H组能显著抑制 心肌肥厚和肺脏肿大(见表4，图3)。

[0106] 表4药物对大鼠RVHI和LI的影响

[0107]

[0108] 注：与Cont组比较，#P<0.05，与MCT组比较，*P<0.05，与BF组比较， &P<0.05。

[0109] 2.4、药物对模型大鼠动脉血气分析指标的影响

[0110] 与Cont组相比，MCT组PaO2显著减少(P<0.05)；与MCT组相比， BF组和HT H组PaO2显著增加(P<0.05)，其余组有增加趋势，但组间比较 差异无统计学意义(P>0.05)；与BF组相比，组间比较差异无统计学意义 (P>0.05)；其余指标与MCT组相比，各组有变化趋势，组间比较差异无统计 学意义(P>0.05)，结果显示：HT H组能显著提高血氧分压，减缓呼吸频率(见 表5，图4)。

[0111] 表5药物对模型大鼠动脉血气分析指标的影响

[0112]

[0113] 注：与Cont组比较，#P<0.05，与MCT组比较，*P<0.05，与BF组比 较，&P<0.05。

[0114] 2.5、药物对模型大鼠血流变指标的影响

[0115] 与Cont组相比，MCT组血浆纤维蛋白原显著增加(P<0.05)；与MCT 组相比，HT H组血浆纤维蛋白原显著减少(P<0.05)，其余指标与MCT组 相比，各组有趋势，但变化不明显，提示：HT H组能显著改善血液的粘稠 度(见表6，图5)。

[0116] 表6药物对模型大鼠血流变指标的影响

[0117]

[0118]

[0119] 注：与Cont组比较，#P<0.05，与MCT组比较，*P<0.05，与BF组比较，&P<0.05。

[0120] 2.6、药物对模型大鼠右心功能的影响

[0121] 2.6.1、药物对模型大鼠心肌能量水平的影响

[0122] 与Cont组相比，MCT组ATP、ADP、AMP、腺苷酸总值含量及能荷有 所下降，且AMP/ATP有上升趋势，但差异无统计学意义(P>0.05)；与MCT 组相比，BF组、HT L组、HT M组和HT H组ATP、ADP含量及能荷均有 所增加，且AMP/ATP有下降趋势，但组间差异无统计学意义(P>0.05)；与 BF组相比，HT L组、HT M组和HT H组均有不显著的差异变化，但组间 差异无统计学意义(P>0.05)。(见表7，图6)。

[0123] 表7药物对模型大鼠心肌能量水平的影响

[0124]

[0125] 注：与Cont组比较，#P<0.05，与MCT组比较，*P<0.05，与BF组比 较，&P<0.05。

[0126] 2.6.2、药物对模型大鼠血清ET‑1、NO和ANP含量的影响

[0127] 与Cont组相比，MCT组ET‑1、ANP含量均显著增加(P<0.05)，NO含 量明显降低(P<0.05)；与MCT组相比，BF组、HT H组ET‑1、ANP含量 均显著下降(P<0.05)，NO含量明显增加(P<0.05)，且HT L组的NO含量 显著增加，HT M组ANP的含量明显减少(P<0.05)，实验结果提示：HT H 组对血管内皮有保护作用，能改善内皮舒缩功能(见表8，图7)。

[0128] 表8药物对模型大鼠血清ET‑1、ANP和NO含量的影响

[0129]

[0130] 注：与Cont组比较，#P<0.05，与MCT组比较，*P<0.05，与BF组比 较，&P<0.05。

[0131] 3、结论

[0132] 肺心病主要病理变化为肺动脉高压(PAH)和心脏病变(右心肥厚)两方 面，结合文献报道，本发明采用皮下注射野百合碱(MCT)的方式诱导肺心 病，这是目前最常用和比较成熟的方法。

[0133] 本研究结果显示，造模3周后，与Cont组相比，模型组大鼠饮水进食有 所减少，体质量增加缓慢且明显减轻，呼吸频率加快，毛发灰暗，活动明显 减少且尿量明显减少，另外RVHI、LI、血浆纤维蛋白原、ET‑1及ANP含量 均显著增加(P<0.05)，PaO2和NO含量明显降低(P<0.05)，这表明：随着 时间的进展，肺心病模型大鼠逐渐表现出右心衰竭的情况，其RV、wW明显 增大，本发明组合物高剂量组LI和RVHI均显著低于MCT组(P<0.05)；与 MCT组相比，HT H组大鼠虽体质量无较明显减轻，但毛发光泽、呼吸频率 及活动度均有所改善，且尿量显著增加，另外RVHI、LI、血浆纤维蛋白原、ET‑1及ANP含量均显著减少，PaO2、NO含量明显增加。以上实验结果显示 本发明组合物高剂量组可以一定程度抑制肺心病模型大鼠右心衰竭，保护内 皮细胞，改善内皮功能，对肺心病具有改善作用。

[0134] 实验例2、本发明组合物对肺心病的病理实验

[0135] 1、实验方法

[0136] 对实验例1中进行不同给药处理的各组小鼠的肺动脉猪肝、肺脏和心肌 组织进行病理切片，染色观察。

[0137] 2、实验结果

[0138] (1)肺动脉主干切片结果如图8所示，从图中可以看出，空白组大鼠肺 动脉血管腔较大、管壁厚薄均匀未见增厚。模型组大鼠肺动脉内皮细胞凋亡 脱落，血管壁明显增厚，平滑基层暴露，平滑肌细胞排列致密紧凑；经中剂 量本发明组合物干预治疗后，形态学上未见明显改善。经补肺活血颗粒和高、 低剂量本发明组合物治疗后，大鼠肺动脉血管壁增厚有一定的改善，其中高 剂量组改善较明显且周围炎性细胞浸润也有一定程度的降低。

[0139] (2)肺脏切片结果如图9所示，从图中可以看出，空白对照组大鼠肺泡 结构正常，肺泡完整，肺动脉管腔较大、管壁厚薄均匀未见增厚。模型组大 鼠肺部结构有不同程度的破坏，肺泡结构紊乱，肺泡壁变薄或断裂，肺动脉 管壁平滑肌增生肥厚，管腔狭窄，周围可见炎性细胞浸润，经补肺活血颗粒 和低、中剂量本发明组合物干预治疗后，形态学上未见明显改善。经高剂量 本发明组合物治疗后，大鼠肺动脉管壁增厚显著改善，周围炎性细胞浸润也 有一定程度的降低。

[0140] (3)心肌切片结果如图10所示，从图中可以看出，正常对照组大鼠心 肌纤维排列整齐，心肌细胞大小、形态基本一致，结构整齐。与正常对照组 相比，MCT组大鼠右心室心肌细胞肥大，结构紊乱，部分胞核宽大畸形。经 补肺活血颗粒干预治疗后，心肌细胞肥大、核畸形有轻微改善。经不同剂量 本发明组合物干预治疗后，心肌细胞肥大、核畸形均出现不同程度的改善， 其中以高剂量本发明组合物治疗效果最佳。

[0141] 结果提示高剂量本发明组合物对MCT所致肺心病大鼠具有一定的治疗 作用，尤其是高剂量的治疗效果最佳。

[0142] 3、结论

[0143] 上述结果表明本发明组合物对MCT所致肺心病大鼠具有治疗作用，尤 其是在高剂量使用时，疗效显著。

[0144] 实验例3、本发明组合物对肺心病的临床试验

[0145] 1、病例数：30例

[0146] 2、入选标准

[0147] (1)符合因慢性肺心脏病所致右心衰的诊断标准；

[0148] (2)符合肺肾气虚证辨证标准；

[0149] (3)18岁≤年龄≤80岁；

[0150] (4)入选前1月内病情稳定，无急性加重者；

[0151] (5)NYHA心功能分级为Ⅱ、Ⅲ级者；

[0152] (6)无6分钟步行试验相关禁忌症，基线6分钟步行距离为≥150米且 ≤450米者；

[0153] 3、排除标准

[0154] (1)处于慢性肺源性心脏病的急性加重期者，并出现严重并发症者(如 肺性脑病、酸碱失衡及电解质紊乱、心衰重症、急性心肌梗死、Ⅱ型呼衰和 消化道出血等)；

[0155] (2)由矽肺、结核、胸廓畸形、肿瘤、冠心病心衰等其他因素引起的长 期喘咳者；

[0156] (3)合并严重气流受限者，即第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百 分比＜50％；

[0157] (4)合并有严重的心、脑、肝、肾、内分泌、血液等系统性疾病，以及 精神疾病者；

[0158] (5)需长期氧疗(每天氧疗时间＞15h)或机械通气者；

[0159] (6)入组前3个月准备生育、妊娠或哺乳期妇女；

[0160] (7)入组前1个月内发生严重创伤或重大手术；

[0161] (8)入组前3个月内参加过其他药物的临床研究；

[0162] (9)对试验用药物已知成分过敏者；

[0163] (10)研究者认为不宜入组者。

[0164] 4、观察周期：服药60天

[0165] 5、疗效指标

[0166] 中医证候疗效：基线及治疗终点积分记录、评价。

[0167] 中医证候积分表如下：

[0168]

[0169] 6、治疗方案

[0170] (一)试验药：本发明实施例4药物

[0171] (二)用法用量及疗程

[0172] 1.常规治疗：

[0173] (1)平喘药：B‑R激动剂(特布他林、沙丁胺醇、沙美特罗等)、抗胆 碱能药物(异丙托溴铵等)、茶碱类药物(氨茶碱等)、白三烯受体(孟鲁司 特等)、抗过敏(酮替芬等)、糖皮质激素(布地奈德等)。

[0174] (2)祛痰药：乙酰半胱氨酸、羧甲司坦、氨溴索等。

[0175] 2.用量用法

[0176] 试验组：中药组30例，根据患者的基础情况，符合中医诊断标准，除 给予常规药物治疗。另加服本发明实施例4药物，1次1剂，一日3次，温 水送服。

[0177] 于2020年1月至2021年6月收集30例人用经验研究数据表明，治疗后 中医症候积分下降80％(30例病人的平均值)，临床症状改善明显优于常规治 疗组患者，提高患者生活质量及疾病控制起到了积极作用。

[0178] 综上，本发明提供了一种益气温肾，泻肺平喘的组合物，对慢性肺心病 缓解期肺肾气虚证具有优异疗效，可有效改善慢性肺心病缓解期右心衰，提 高血氧分压，降低血浆纤维蛋白原含量，降低血液粘稠度，改善心肌肥厚， 强心、利尿并改善肺水肿，改善血管舒缩功能，具有很好的临床应用前景。