Brusatol在制备抗辐射损伤药物中的应用

摘要

本发明公开了Brusatol在制备抗辐射损伤药物中的应用，本发明首次发现并证实了Brusatol具有抗辐射损伤的新用途，能够显著提高辐射后小鼠的生存期和生存率，含有Brusatol的药物组合物可用于预防或治疗急性放射病、核与辐射损伤，以及肿瘤放射治疗引起的辐射损伤，还可作为用于研究抗辐射损伤的工具药，本发明为抗辐射损伤药物的研究和开发，提供了一种全新的思路和策略，应用前景广阔。

权利要求

1.鸦胆子苦醇作为活性成分在制备抗辐射损伤药物中的应用，其特征在于，所述鸦胆子苦醇的结构式如式(I)所示：

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗辐射损伤药物具有的功能如(a1)和/或(a2)和/或(a3)和/或(a4)和/或(a5)和/或(a6)和/或(a7)所示：(a1)预防和/或治疗急性放射病；

(a2)预防和/或治疗射线照射引起的骨髓抑制和/或胃肠道损伤；

(a3)预防和/或治疗肿瘤放射治疗引起的骨髓抑制和/或胃肠道损伤；

(a4)预防和/或治疗与化学治疗或外科手术结合进行的放射治疗引起的骨髓抑制和/或胃肠道损伤；

(a5)预防和/或治疗核与辐射损伤；

(a6)预防和/或治疗肿瘤放射治疗引起的正常组织细胞的辐射损伤；

(a7)作为研究抗辐射损伤的工具药。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述急性放射病包括轻度骨髓型急性放射病、中度骨髓型急性放射病、重度骨髓型急性放射病、极重度骨髓型急性放射病、和/或肠型急性放射病。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述射线照射包括α射线照射、β射线照射、γ射线照射、和/或X射线照射。

说明书

Brusatol在制备抗辐射损伤药物中的应用

技术领域

[0001] 本发明属于生物医药技术领域，具体地，本发明涉及鸦胆子苦醇（Brusatol）在抗辐射损伤中的应用，更具体地，本发明涉及Brusatol在制备抗辐射损伤药物中的应用。

背景技术

[0002] 随着核能与核技术的快速发展，其在工农业生产、医疗卫生、科学研究和国防事业等各个领域均得到了广泛的应用，人们暴露于电离辐射下的机会也日益增多，它们在给人
类带来巨大便利和利益的同时，也带来了不可忽略的辐射危害。核泄漏事故、以及民用放射
源、医疗照射等工作中由于管理不善或操作失误等都可导致人员受到射线照射。当机体在
短时间内受到大剂量（>1 Gy）电离辐射照射时会发生急性放射病（Acute Radiation 
Sickness，ARS），或统称为急性放射损伤综合症（Acute Radiation Syndrome disease，
ARS）。急性放射病是一种全身性疾病，根据受损器官的不同，分为骨髓型、肠型和脑型三型；
根据受照时间的长短不同，放射病可分为急性、亚急性和慢性。急性放射病死亡率高，治愈
困难，目前受照射剂量大于8 Gy的患者尚无救活的先例。此外，肿瘤患者接受放射治疗过程
中，射线杀灭肿瘤细胞的同时对正常细胞也造成了严重的损伤，常常因此而限制了放射治
疗的实际应用。因此，为了对抗辐射损伤，给核能与核技术的高效应用提供安全保障，需要
大力发展抗辐射损伤医药技术。

[0003] 辐射分为电离辐射与非电离辐射，电离辐射是指能量大，波长短，能够引起物质发生电离的辐射，如X射线、γ射线、β射线等；非电离辐射是指能量比较低，不能引起物质产生
电离的辐射，如红外线、紫外线、微波等。辐射几乎对机体的所有组织器官都有损伤，对机体
造成损伤的主要途径有两种，第一种途径是直接作用于生物大分子，造成DNA和RNA的断裂、
蛋白质的失活、甚至破坏细胞膜的结构，导致细胞破裂。第二种途径是间接作用，电离辐射
作用于生物体内的水分子，从而激发出大量的活性氧分子（Reactive Oxygen Species，
ROS），ROS易与其它物质相互作用引起细胞凋亡，从而造成机体的一系列损伤。辐射产生的
自由基能够引起多种疾病，例如：癌症、动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）、老年痴呆症
（Alzheimer disease，AD）、帕金森综合症（Parkinson’s Disease，PD）、以及消化道疾病等。
在辐射剂量较低时，人体本身对辐射损伤有一定的修复能力，从而不表现出严重的危害效
应或症状；但如果剂量过高，超出了人体内各器官或组织具有的修复能力，就会引起局部或
全身的病变。

[0004] 目前的抗辐射药物主要有氨巯基类化合物、氮氧自由基类化合物、SOD类、细胞因子、天然抗氧化剂、免疫调节剂、激素类药物等，但是大多毒性大，副作用多，作用靶点单一，
因此，目前仍缺乏较理想的辐射防护剂。仅有氨磷汀（WR2721）是唯一经过美国FDA批准上市
的抗辐射损伤防护药物，用于病人因放射治疗引起的口腔干燥症，并且能够明显降低放疗
后正常细胞大量死亡的现象，但是氨磷汀仅能作为注射剂使用，口服无效，代谢半衰期很
短，而且其治疗安全窗窄，易产生毒副作用，毒性大，副作用多，存在明显的不良反应，例如，
头颈放疗的病人使用氨磷汀发生恶心和呕吐的概率是57%。其它不良反应，例如，低血压，恶
心，呕吐等也使该抗辐射损伤防护药物使用受限。因此，国内外仍然亟需开发出新的低毒高
效的抗辐射损伤防护药物。天然药物毒性低、作用广泛，能对多个器官、靶点产生作用，符合
辐射损伤的特点。因此从天然药物中寻找高效低毒的辐射防护药物已成为研究热点。

[0005] 鸦胆子苦醇（Brusatol）是一种从中草药苦木科植物鸦胆子中分离出的苦木内酯类化合物，研究发现Brusatol可以抑制肿瘤细胞的增殖和转移，对乳腺癌、肝癌、肺癌、前列
腺癌、胰腺癌和结直肠癌等多种癌细胞具有增殖抑制作用。至今未见Brusatol用于辐射损
伤预防和/或治疗方面的相关报道。

发明内容

[0006] 鉴于此，本发明的目的在于提供Brusatol在制备抗辐射损伤药物中的应用，为本领域提供一种新型低毒高效的抗辐射损伤防护药物，以克服目前本领域存在的上述技术问
题。

[0007] 本发明的上述目的通过以下技术方案得以实现：

[0008] 本发明的第一方面提供了鸦胆子苦醇作为活性成分在制备抗辐射损伤药物中的应用。

[0009] 进一步，所述鸦胆子苦醇的结构式如式（I）所示：

[0010] 式（I）。

[0011] 进一步，所述抗辐射损伤药物具有的功能如（a1）和/或（a2）和/或（a3）和/或（a4）和/或（a5）和/或（a6）和/或（a7）所示：

[0012] （a1）预防和/或治疗急性放射病；

[0013] （a2）预防和/或治疗射线照射引起的骨髓抑制和/或胃肠道损伤；

[0014] （a3）预防和/或治疗肿瘤放射治疗引起的骨髓抑制和/或胃肠道损伤；

[0015] （a4）预防和/或治疗与化学治疗或外科手术结合进行的放射治疗引起的骨髓抑制和/或胃肠道损伤；

[0016] （a5）预防和/或治疗核与辐射损伤；

[0017] （a6）预防和/或治疗肿瘤放射治疗引起的正常组织细胞的辐射损伤；

[0018] （a7）作为研究抗辐射损伤的工具药。

[0019] 进一步，所述急性放射病包括轻度骨髓型急性放射病、中度骨髓型急性放射病、重度骨髓型急性放射病、极重度骨髓型急性放射病、和/或肠型急性放射病。

[0020] 进一步，所述射线照射包括α射线照射、β射线照射、γ射线照射、和/或X射线照射。

[0021] 进一步，在本发明的具体实施方式中，所述射线照射为γ射线照射、X射线照射。

[0022] 进一步，在本发明的具体实施方式中，所述活性成分鸦胆子苦醇的使用剂量为0.5‑1.5 mg/kg。

[0023] 本发明通过细胞实验和动物实验验证发现，Brusatol预防给药能够显著提高急性放射损伤小鼠的存活率，Brusatol预防给药能够显著促进照射小鼠外周血多系造血细胞的
恢复，Brusatol预防给药能够增加照射小鼠骨髓中造血干祖细胞的数量，Brusatol体外孵
育能够明显减轻射线照射引起的小鼠骨髓有核细胞的凋亡，Brusatol预防给药能够明显延
长射线全身照射小鼠的平均存活时间，Brusatol预防给药能够明显增加射线照射小鼠的
+
BrdU隐窝数量，减轻放射引起的肠道损伤，Brusatol预防给药能够明显提高射线全身照射
或腹部局部照射小鼠的存活率，Brusatol表现出了对辐射损伤具有较好的防治作用。

[0024] 本发明的第二方面提供了一种抗辐射损伤的药物组合物。

[0025] 进一步，所述药物组合物中包含有效量的鸦胆子苦醇。

[0026] 进一步，所述药物组合物中还包含药学上可接受的载体和/或辅料。

[0027] 进一步，所述药学上可接受的载体和/或辅料在Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed.,1995)中有详细的记载，这些物质根据需要用于帮助配方的稳定性或
有助于提高活性或它的生物有效性或在口服的情况下产生可接受的口感或气味，在这种药
物组合物中可以使用的制剂可以是其原始化合物本身的形式，或任选地使用其药物学可接
受的盐的形式，如此配制的药物组合物根据需要可选择本领域技术人员已知的任何适当的
方式将药物进行给药。

[0028] 进一步，所述药学上可接受的载体和/或辅料是指本领域认可的并且包括例如参与从身体的一个器官或部分携带或运输任何主题组合物至身体的另一个器官或部分的药
学上可接受的材料、组合物或赋形剂，如液体或固体填充剂、稀释剂、溶剂或包囊材料。每种
载体必须在与主题组合物的其他成分相容的意义上是“可接受的”并且对患者无害。在某些
实施方案中，药学上可接受的载体和/或辅料是无热原的。可以用作药学上可接受的载体
和/或辅料的材料的一些例子包括：(1) 糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2) 淀粉，如玉米淀粉
和马铃薯淀粉；(3) 纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；(4) 
粉末状黄蓍胶；(5) 麦芽；(6) 明胶；(7) 滑石粉；(8) 可可脂和栓剂蜡；(9) 油，如花生油、
棉籽油、葵花籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；(10) 二醇，如丙二醇；(11) 多元醇，
如甘油、山梨醇、甘露糖醇和聚乙二醇；(12) 酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13) 琼脂；
(14) 缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；(15) 海藻酸；(16) 无热原的水；(17) 等渗盐水；
(18) 林格氏溶液；(19) 乙醇；(20) 磷酸盐缓冲液；(21) 药物制剂中使用的其他无毒的相
容物质。

[0029] 进一步，所述药物组合物可根据本领域已知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可将Brusatol与一种或多种固体或液体载体和/或辅料结合，制成可作为人用的适当的
施用形式或剂量形式。

[0030] 进一步，本发明的Brusatol或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径包括但不限于肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠
等。给药剂型包括但不限于片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗
粒剂、脂质体、透皮剂、口含片、栓剂、冻干粉针剂等。可以是普通制剂、缓释制剂、控释制剂
及各种微粒给药系统。

[0031] 为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子包括但不限于：稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、
葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合剂，如水、甘油、聚乙二
醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素
钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，例如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂
粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、
甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油等；吸
收促进剂，例如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂
酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜
包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。

[0032] 为了将给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子包括但不限于：稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯
烷酮、Gelucire、高岭土、滑石粉等；粘合剂如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米
糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤
维素等。

[0033] 为了将给药单元制成栓剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子包括但不限于：聚乙二醇、卵磷脂、可可脂、高级醇、高级醇的酯、明胶、半合成甘油酯等。
为了将给药单元制成胶囊，将有效成分式（I）化合物或其立体异构体与上述的各种载体混
合，并将由此得到的混合物置于硬的明胶囊或软胶囊中。也可将有效成分式（I）化合物或其
立体异构体制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂
应用。

[0034] 为了将给药单元制成注射用制剂，如溶液剂、乳剂、冻干粉针剂和混悬剂，可以使用本领域常用的所有稀释剂包括但不限于：水、乙醇、聚乙二醇、1,3－丙二醇、乙氧基化的
异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，为了制备等渗注射液，可
以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓
冲剂、pH调节剂等。

[0035] 此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。

[0036] 本发明所述包含Brusatol的药物组合物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防和/或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的性别、年龄、体重及个体反应，所用的具
体化合物，给药途径及给药次数等。上述剂量可以单一剂量形式或分成几个，例如二、三或
四个剂量形式给药。

[0037] 进一步，根据制剂化方法、给药方式、患者的年龄、体重、性别、病态、饮食、给药时间、给药途径、排泄速度及反应灵敏性之类的因素而可以进行多种处方，熟练的医生通常能
够容易地决定处方及处方对所希望的治疗和/或预防有效的给药剂量。

[0038] 本发明的第三方面提供了鸦胆子苦醇作为活性成分在制备抗辐射保健品中的应用。

[0039] 进一步，所述抗辐射保健品中包含有效量的鸦胆子苦醇。

[0040] 进一步，所述抗辐射保健品中还可包含其他具有抗辐射作用的物质，优选地，所述物质包括但不限于：螺旋藻、石榴籽、海带、海苔、番茄素。

[0041] 本发明的第四方面提供了鸦胆子苦醇作为活性成分在制备抗辐射食品中的应用。

[0042] 进一步，所述抗辐射食品中包含有效量的鸦胆子苦醇。

[0043] 进一步，所述抗辐射食品中还可包含其他具有抗辐射作用的物质，优选地，所述物质包括但不限于：螺旋藻、石榴籽、海带、海苔、番茄素。

[0044] 本发明的第五方面提供了鸦胆子苦醇作为活性成分在制备抗辐射食品添加剂中的应用。

[0045] 进一步，所述抗辐射食品添加剂中包含有效量的鸦胆子苦醇。

[0046] 本发明的第六方面提供了鸦胆子苦醇作为活性成分在制备抗辐射化妆品中的应用。

[0047] 进一步，所述抗辐射化妆品中包含有效量的鸦胆子苦醇。

[0048] 进一步，所述抗辐射化妆品中还可包含防腐剂、保湿剂、黏度控制剂、柔软剂、增稠剂、干燥剂、洗涤剂、润滑剂；

[0049] 优选地，所述防腐剂包括但不限于：苯氧乙醇、尼泊金甲酯、乙酯、丙酯、丁酯、异丙酯、异丁酯、1,3‑二羟甲基‑5,5二甲基海因（DMDMH）、咪唑烷基脲、重氮咪唑烷基脲、季铵盐‑
15（DOW ICILTM 200）、羟甲基甘氨酸钠、甲基氯异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮、碘丙炔醇丁
基氨甲酸酯；

[0050] 优选地，所述保湿剂包括但不限于：神经酰胺、透明质酸、乳酸、尿囊素、烟酰胺、甘油、丙二醇、1,3‑丁二醇、山梨醇、聚乙二醇、矿脂、聚二甲基硅氧烷（250‑5000cSt）、羊毛脂
及其衍生物、植物脂类/油类及其衍生物、高相对分子质量线性脂肪酸酯类、鲸蜡醇棕榈酸
酯、成膜聚合物。

[0051] 本发明还提供了抗辐射保健品、抗辐射食品、抗辐射食品添加剂、抗辐射化妆品。

[0052] 进一步，所述抗辐射保健品、抗辐射食品、抗辐射食品添加剂、抗辐射化妆品中包含有效量的鸦胆子苦醇。

[0053] 本发明还提供了预防电离辐射损伤的方法。

[0054] 进一步，所述方法包括给有此需要的受试者于（可能）辐射暴露前数天内或至少数小时内施用有效量的Brusatol。

[0055] 本发明还提供了治疗因放射疗法所引起的骨髓抑制和/或胃肠道损伤的方法。

[0056] 进一步，所述方法包括给有此需要的受试者施用有效量的Brusatol。

[0057] 相对于现有技术，本发明具有的优点和有益效果：

[0058] 本发明首次发现并证实了鸦胆子苦醇（Brusatol）具有抗辐射损伤的新用途，且在抗辐射导致的肠道组织损伤方面具有突出的治疗效果。经细胞实验和动物实验验证发现，
Brusatol可显著增加辐射损伤小鼠的存活率和存活时间，具有显著的抗辐射作用，可用于
抗辐射损伤药物的制备中，且具有毒副作用低、抗辐射损伤作用强等优点。此外，Brusatol
原料资源丰富，具有良好的社会和经济效益，本发明为抗辐射损伤药物的研究和开发，提供
了一种全新的思路和策略，应用前景广阔。

附图说明

[0059] 以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

[0060] 图1为鸦胆子的果实及Brusatol的结构式，Brusatol预防给药对8.5 Gy γ射线照射小鼠存活率影响的结果图，其中，A图：鸦胆子果实，B图：Brusatol的结构式，C图：
Brusatol预防给药对8.5 Gy γ射线照射小鼠存活率影响的结果图，**较IR组，P<0.01；

[0061] 图2为Brusatol预防给药对6.5 Gy γ射线照射小鼠外周血象影响的结果图，其中，A图：白细胞（WBC），B图：红细胞（RBC），C图：血小板（PLT），D图：中性粒细胞（NE），较IR
组，*P<0.05，**P<0.01；

[0062] 图3为Brusatol预防给药对6.5 Gy γ射线照射小鼠骨髓造血干祖细胞数量影响的结果图，其中，A图：流式细胞术检测结果图，B图：骨髓有核细胞计数，C图：造血祖细胞和
造血干细胞计数，D图：长期造血干细胞和短期造血干细胞计数，较IR组，*P<0.05，**P<
0.01；

[0063] 图4为Brusatol体外孵育对6.5 Gy γ射线照射小鼠骨髓有核细胞凋亡影响的结果图，其中，A图：流式细胞术检测结果图，B图：细胞凋亡率统计图，较IR组，**P<0.01；

[0064] 图5为Brusatol预防给药对12 Gy γ射线照射小鼠存活率影响的结果图，较IR组，**P<0.01；

[0065] 图6为Brusatol不同剂量预防给药对12 Gy γ射线全身照射小鼠肠道BrdU+隐窝数影响的结果图，其中，A图：检测结果图，B图：统计图；

[0066] 图7为Brusatol预防给药对15、16 Gy γ射线全身照射小鼠存活率影响的结果图，其中，A图：15 Gy，存活率，B图：15 Gy，体重，C图：16 Gy，存活率，D图：16 Gy，体重，较IR
组，**P<0.01；

[0067] 图8为Brusatol预防给药对15、16 Gy X射线腹部局部照射小鼠存活率影响的结果图，其中，A图15 Gy，存活率，B图：15 Gy，体重，C图：16 Gy，存活率，D图：16 Gy，体重，较IR
组，**P<0.01。

具体实施方式

[0068] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。本领域的普通技术人员可以理解为：在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下
可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由权利要求及其等同物
限定。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的
试剂、生物材料等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

[0069] 本发明提供了预防电离辐射损伤的方法；有此需要的群体，包括可能即将受到辐射暴露、或即将进入放射污染区域的人群，于（可能）辐射暴露前数天内或至少数小时内接
受有效量的Brusatol以进行预防。

[0070] 本发明还提供了治疗因放射疗法所引起的骨髓抑制和/或胃肠道损伤的方法；有此需要的群体，包括因放射疗法所引起的骨髓抑制和/或胃肠道损伤的人群，接受有效量的
Brusatol以进行治疗。

[0071] 本文所提供的方法，对有此需要的个体给药治疗有效量的Brusatol，以保护个体对抗放射所引起的全身性损伤也是有用的。例如，预防性的服用可在患者接受放射之前给
药。

[0072] 放射疗法（Radiation therapy）及放射治疗（Radiotherapy）于本文可交换使用，且包括外照射（External irradiation）和内照射（Internal irradiation），亦指称为近接
治疗（Brachytherapy）、腔内近接治疗（Intracavitary brachytherapy），或组织间近接治
疗（Interstitial brachytherapy）。可虑及的放射源包括纯伽马（Pure Gamma）、纯贝塔
（Pure Beta），及混合放射。

[0073] 在本文中使用，术语“Brusatol”，同“鸦胆子苦醇”，是指一种从中草药苦木科植物鸦胆子中分离出的苦木内酯类化合物，目前的研究发现Brusatol可以抑制肿瘤细胞的增殖
和转移，对乳腺癌、肝癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌和结直肠癌等多种癌细胞具有增殖抑制作
用。目前尚未见Brusatol用于辐射损伤预防和治疗方面的相关报道，本发明为首次报道。

[0074] 在本文中使用，术语“预防和/或治疗”，是指以治愈、改善、稳定或预防疾病、病理状态或病症为目的对患者进行的医学管理。该术语包括积极疗法，即专门以改善疾病、病理
状态或病症为目的的治疗，并且还包括病因治疗，即以除去相关疾病、病理状态或病症的病
因为目的的治疗。此外，该术语还包括姑息治疗，即设计用于缓解症状而非治愈疾病、病理
状态或病症的治疗；该术语还包括预防性治疗，即以最大程度降低或者部分或完全抑制相
关疾病、病理状态或病症的发展为目的的治疗；以及支持性治疗，即用于补充另一种以改善
相关疾病、病理状态或病症为目的的特定疗法的治疗。

[0075] 根据某些具体实例，Brusatol以及含有它的药物组合物可用于各种治疗方案，此等方案可根据个体及治疗类型而变化。

[0076] Brusatol以及含有它的药物组合物在治疗之前、期间给药。例如，可在个体的放射治疗首剂之前至少一天内给药。

[0077] 较佳地在骨髓抑制或胃肠道损伤治疗之前给Brusatol以及含有它的药物组合物。例如，从放射治疗、化学治疗的首剂及结合治疗之前的至少一天开始给药。

[0078] 根据特定具体实例，Brusatol可结合其它化合物一起给药，例如，化学治疗剂、抗发炎剂、解热剂、放射增敏剂、放射防护剂、泌尿道用剂、抗吐剂、和/或止泻剂。例如，顺铂
（Cisplatin）、卡铂（Carboplatin）、多西紫杉醇（Docetaxel）、太平洋紫杉醇（Paclitaxel）、
氟尿嘧啶（Flurouracil）、卡培他滨（Capecitabine）、吉西他滨（Gelncitabine）、伊立替康
（Irinotecan）、托泊替康（Topotecan）、依托泊苷（Etoposide）、丝裂霉素（Mitomycin）、吉非
替尼（Geftinib）、长春新碱（Vincristine）、长春碱（Vinblastine）、阿霉素（Doxorubicin）、
环磷酰胺（Cyclophosphamide）、塞来昔布（Celecoxib）、罗非昔布（Rofecoxib）、伐地考昔
（Valdecoxib）、布洛芬（Ibuprofen）、萘普生（Naproxen）、酮洛芬（Ketoprofen）、地塞米松
（Dexamethasone）、泼尼松（Prednisone）、泼尼松龙（Prednisolone）、氢化可的松
（Hydrocortisone）、醋氨酚（Acetaminophen）、米索石肖唑（Misonidazole）、氨磷汀
（Amifostine）、坦索罗辛（Tamsulosin）、非那吡啶（Phenazopyridine）、昂丹司琼
（Ondansetron）、格拉司琼（Granisetron）、阿洛司琼（Alosetron）、帕洛诺司琼
（Palonosetron）、异丙嗪（Promethazine）、丙氯拉嗪（Prochlorperazine）、三甲氧苯醯胺
（Trimethobenzamide）、阿瑞吡坦（Aprepitant）、地芬诺酯加阿托品（Diphenoxylate with 
atropine），巴柳氮（Balsalizide），和/或洛哌丁胺（Loperamide）。

[0079] 在本文中使用，术语“有效量”，是指具有治疗效果的量或在治疗对象中产生治疗效果所需要的量。例如，药物治疗上或药学上有效量是指产生需要的治疗效果所需要的药
物的量，治疗效果可以通过临床试验结果、模型动物研究和/或体外研究的结果来反映。药
学上有效量取决于几个因素，包括但不限于治疗对象的特征因素(如身高、体重、性别、年龄
和用药史)、罹患疾病的严重程度。

[0080] 在本文中使用，术语“受试者”，是指任何动物，还指人类和非人类的动物。术语“非人类的动物”包括所有脊椎动物，例如，哺乳动物，如非人灵长类动物（特别是高等灵长类动
物）、绵羊、狗、啮齿类动物（如小鼠或大鼠）、豚鼠、山羊、猪、猫、兔、牛、和任何家畜或宠物；
以及非哺乳动物，如鸡，两栖类，爬行动物等。

[0081] 在本文中使用，术语“化学治疗”及“化学治疗剂”可交换使用，以及意指显现抗癌效果且用在恶性肿瘤的治疗中的化学治疗剂或药。

[0082] 在本文中使用，术语“放射所引起的骨髓抑制和/或胃肠道损伤”包括全身照射或胸肺部、腹部、骨盆、躯干部等局部照射所引起的放射损伤。照射常造成急性放射病或骨髓
造血抑制、或胃肠道损伤。症状可包括呕吐、造血细胞减少、贫血、血小板减少症、白细胞减
少症、造血细胞增殖障碍、血小板减少性出血、放射性肠炎、胃肠道出血、绞痛等。

[0083] 本发明提供的关于以Brusatol以及含有它的药物组合物预防有此需要的个体（例如，哺乳类、人类、马、狗、猫）的方法。确认个体是否有此等治疗的需求，可依个体本身或健
康照射防护专业人员的评判，且可为主观的（例如，看法）或客观的（例如，藉由试验或诊断
方法而可量测）。

[0084] 有此需要的个体包括将要接受放射治疗的个体，不论是单独接受放射治疗或组合其它可导致骨髓抑制或胃肠道损伤的化学药物治疗。此需要可能显现于个体接受放射治
疗、化学治疗、或（数种）治疗的结合之前；个体正在接受放射治疗、化学治疗或（数种）治疗
的结合；个体正在接受放射治疗、化学治疗、或（数种）治疗的结合之后。例如，个体可能正
要、可能正在，或已经接受，放射治疗组合化学治疗。

[0085] 实施例1 Brusatol预防给药对急性放射损伤小鼠存活的影响

[0086] 1、实验方法

[0087] 为了研究Brusatol有无抗辐射损伤作用，以60Co γ射线全身照射C57BL/6J小鼠为模型进行实验。小鼠分为照射对照组、Brusatol低、中和高剂量给药组，每组10只小鼠，小鼠
一次全身照射8.5 Gy。3个给药组于照射前1天（‑1 d）和照射前3 h（‑3 h）各一次腹腔注射
Brusatol，给药剂量分别为Brusatol 0.5 mg/kg、1.0 mg/kg和1.5 mg/kg，给药体积均为
0.1 mL；照射对照组同期注射溶剂0.1 mL，观察小鼠照射后30天存活率，比较Brusatol给药
组与照射对照组小鼠存活率的差异。

[0088] 2、实验结果

[0089] 结果见图1，结果显示，Brusatol 1.0 mg/kg组可使8.5 Gy γ射线全身照射小鼠30天存活率提高40%（50% vs 10%），即Brusatol预防给药能够显著提高急性放射损伤小鼠
存活率，这一结果表明了Brusatol对急性放射病小鼠有显著的辐射防护作用。

[0090] 实施例2 Brusatol预防给药对急性放射损伤小鼠外周血象的影响

[0091] 1、实验方法

[0092] 为了研究Brusatol对急性放射损伤小鼠造血功能的影响，将12只C57BL/6J小鼠分为照射对照（IR）组和Brusatol给药组，每组6只，小鼠均全身照射6.5 Gy γ射线。Brusatol
给药组小鼠于照射前1天开始每天一次连续给药2次（‑1 d，‑3 h），每次腹腔注射Brusatol
剂量为1.0 mg/kg，给药体积为0.1 mL；照射对照组同期注射溶剂0.1 mL。分别于照前2 d以
及照射后7 d、10 d以及14 d检测外周血象。

[0093] 2、实验结果

[0094] 结果见图2，结果显示，6.5 Gy γ射线全身照射后照射对照组的小鼠外周血细胞数及血红蛋白含量均显著下降，于照射后10‑14天才开始逐渐恢复；在照射后10天，
Brusatol给药组血小板、白细胞、红细胞数和中性粒细胞含量的最低值较照射对照组明显
增加，开始恢复时间提前，恢复进程加快，这一结果表明了Brusatol预防给药能够显著促进
照射小鼠外周血多系造血细胞恢复。

[0095] 实施例3 Brusatol预防给药增加照射小鼠骨髓中造血干祖细胞的数量

[0096] 1、实验方法

[0097] 为了研究Brusatol对受照射小鼠造血干祖细胞数量的影响，将12只C57BL/6J 小鼠分为照射对照（IR）组和Brusatol给药组，每组6只，小鼠均全身照射6.5 Gy γ射线。
Brusatol给药组小鼠于照射前1天开始每天一次连续给药2次（‑1 d，‑3 h），每次腹腔注射
Brusatol剂量为1.0 mg/kg，给药体积为0.1 mL；照射对照组同期注射溶剂0.1 mL。照射后
14天颈椎脱臼处死小鼠，取股骨骨髓有核细胞，经抗体标记后流式细胞术检测造血干祖细
胞的数量。

[0098] 2、实验结果

[0099] 结果见图3，结果显示，照射后14天，Brusatol给药组小鼠骨髓有核细胞计数、造血‑ + ‑ ‑ + +
祖细胞（HPC，Lin‑ckitSca‑1）和造血干细胞（HSC，Lin‑ckit Sca‑1）占骨髓有核细胞的
‑
比例较照射对照组显著增加（P<0.05），造血干细胞中的长期造血干细胞（LT‑HSC，Lin‑c
+ + ‑ ‑ + + +
kitSca‑1 Flt3 CD34）和短期造血干细胞（ST‑HSC，Lin‑ckit Sca‑1 Flt3 CD34）的比
例较对照组亦明显增加（P<0.05），这一结果表明了Brusatol预防给药能够显著增加照射后
小鼠骨髓中造血干祖细胞的数量。

[0100] 实施例4 Brusatol体外孵育明显减轻γ射线照射引起的小鼠骨髓有核细胞凋亡

[0101] 1、实验方法

[0102] 为了研究Brusatol对辐射引起的小鼠骨髓造血细胞凋亡的影响，将C57BL/6J小鼠颈椎脱臼处死后取股骨骨髓细胞，分离出骨髓有核细胞（BMNCs）用于实验。BMNCs分为正常
对照组（Control）、正常+给药组（Brusatol）、照射对照组（IR）和照射对照+给药组（IR+
Brusatol）。其中IR组和IR+Brusatol组细胞经6.5 Gy γ射线照射，Control组和Brusatol
组细胞进行假照射，Brusatol和IR+Brusatol组细胞于照射前1 h加入药物Brusatol并在37
℃培养箱中培养1 h。照射（假照射）后将细胞放回37℃培养箱中培养，9 h后收集细胞，经
Annexin V、PI标记后流式细胞术检测细胞凋亡率。实验重复三次。

[0103] 2、实验结果

[0104] 结果见图4，结果显示，6.5 Gy γ射线照射后9 h BMNCs凋亡率显著增加，而预先加入Brusatol 20 nM孵育小鼠BMNCs 1 h能显著减少6.5 Gy γ射线照射引起的细胞凋亡，
这一结果表明了Brusatol体外孵育能够显著减轻γ射线照射引起的小鼠骨髓有核细胞的
凋亡。

[0105] 实施例5 Brusatol预防给药明显延长12 Gy γ射线全身照射小鼠平均存活时间

[0106] 1、实验方法

[0107] 为了研究Brusatol对大剂量辐射引起的小鼠存活率及存活时间的影响，将12只C57BL/6J小鼠分成照射对照组（IR）和Brusatol给药组，每组6只，小鼠均全身照射12 Gy γ
射线。Brusatol给药组小鼠于照射前1天开始每天一次连续给药2次（‑1 d，‑3 h），每次腹腔
注射Brusatol剂量为1.0 mg/kg，给药体积为0.1 mL；照射对照组同期注射溶剂0.1 mL。

[0108] 2、实验结果

[0109] 结果见图5，结果显示，在存活率方面，照射对照组和Brusatol给药组两组小鼠之间并无差别，均全部死亡，但Brusatol组明显延长了照射小鼠的平均存活时间，这一结果表
明了Brusatol预防给药能够明显延长大剂量辐射小鼠的平均存活时间。

[0110] 实施例6 Brusatol预防给药明显增加12 Gy γ射线照射小鼠BrdU+隐窝数量

[0111] 1、实验方法

[0112] 为了进一步证明Brusatol预防给药对肠道辐射损伤的防治作用，我们通过BrdU掺入实验，在12 Gy γ射线照射的肠型急性放射病小鼠模型上进行研究。BrdU是一种胸腺嘧
啶核苷的类似物，同胸腺嘧啶核苷一样可掺入到细胞合成的DNA中，通过检测接受BrdU输注
的小鼠体内BrdU表达水平，可反映细胞的增殖状态。分别选取Brusatol 0.5 mg/kg、1.0 
mg/kg以及1.5 mg/kg三个剂量组以及照射对照组（IR），每组3只，Brusatol给药组小鼠于照
射前1天开始每天一次连续给药2次（‑1 d，‑3 h），每次腹腔注射Brusatol体积为0.1 mL；照
射对照组同期注射溶剂0.1 mL。并在小鼠处死前2小时腹腔注射BrdU 120 mg/kg，体积为
+
0.2 mL，在照后3.5 d处死小鼠取材，镜下观察，计数每个肠环内所有BrdU隐窝数量，每只
小鼠计数5‑7个肠环。

[0113] 2、实验结果

[0114] 结果见图6，结果显示，Brusatol给药组能够明显提高BrdU+隐窝数量，减轻放射引起的肠道损伤，其中Brusatol 1.0 mg/kg组药效最佳，这一结果进一步证明了Brusatol预
防给药对肠道辐射损伤的防治作用。

[0115] 实施例7 Brusatol预防给药明显提高15 Gy γ射线全身照射小鼠存活率

[0116] 1、实验方法

[0117] 15 Gy γ射线全身照射小鼠同时遭受致死剂量的肠道和造血系统损伤，在照后对小鼠进行骨髓移植能够使小鼠重建造血，以排除造血系统损伤对实验结果的影响，该模型
是经典的小鼠肠型急性放射病损伤模型。

[0118] 为了研究Brusatol对大剂量全身照射联合骨髓移植的小鼠肠型急性放射病模型存活率的影响，将40只C57BL/6J小鼠分成15 Gy IR组、15 Gy+Brusatol给药组、16 Gy IR组
和16 Gy+Brusatol给药组，每组10只，Brusatol给药组小鼠于照射前1天开始每天一次连续
给药2次（‑1 d，‑3 h），每次腹腔注射Brusatol剂量为1.0 mg/kg，给药体积为0.1 mL；照射
对照组同期注射溶剂0.1 mL。选取15 Gy IR组和15 Gy+Brusatol组进行15 Gy γ射线全身
6
照射，另外两组进行16 Gy γ射线全身照射，并在照射后6 h给每只小鼠尾静脉注射1×10
个C57BL/6J小鼠的骨髓细胞。

[0119] 2、实验结果

[0120] 结果见图7，结果显示，在15 Gy照射后，Brusatol组能够将小鼠存活率提高70%（80% vs 10%）（P<0.01），而在16 Gy照射后，两组小鼠均在照后5天内全部死亡，这一结果表
明在15 Gy γ射线照射条件下，Brusatol给药能够明显提高肠型急性放射病小鼠的存活
率，而在照射剂量更大的情况下，Brusatol的这种保护作用近乎消失。

[0121] 实施例8 Brusatol预防给药明显提高15、16 Gy X射线腹部局部照射小鼠存活率

[0122] 1、实验方法

[0123] 本实施例以15 Gy和16 Gy X射线腹部局部照射C57BL/6J小鼠模拟放疗所致的肠损伤模型观察Brusatol预防给药的防护作用，为了研究Brusatol对大剂量腹部局部照射引
起的小鼠存活率的影响，将32只C57BL/6J小鼠分成15 Gy IR组、15 Gy+Brusatol给药组、16 
Gy IR组和16 Gy+Brusatol给药组，每组8只，Brusatol给药组小鼠于照射前1天开始每天一
次连续给药2次（‑1 d，‑3 h），每次腹腔注射Brusatol剂量为1.0 mg/kg，给药体积为0.1 
mL；照射对照组同期注射溶剂0.1 mL。选取15 Gy IR组和15 Gy+Brusatol给药组进行15 Gy 
X射线腹部局部照射，另外两组进行16 Gy X射线腹部局部照射。

[0124] 2、实验结果

[0125] 结果见图8，结果显示，在15 Gy照射后，Brusatol组能够将小鼠存活率提高50%（87.5% vs 37.5%）（P<0.01）；在16 Gy照射后，Brusatol组能够将小鼠存活率提高62.5%
（62.5% vs 0%）（P<0.01），这一结果表明了Brusatol预防给药对于肠型急性放射病具有很
好的防护效应。

[0126] 上述实施例的说明只是用于理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进
和修饰，这些改进和修饰也将落入本发明权利要求的保护范围内。