一种通微消痔中药组合物及其制备方法

摘要

本发明公开了一种通微消痔中药组合物及其制备方法，属于中药组合物技术领域，具体公开了以下重量份数的原料：地桃花7‑12份、倒扣草4‑9份、地锦草1‑6份、地榆1‑6份。同时其制备方法包括以下步骤：称取原料，加水浸泡后煎煮提取2次，然后合并滤液，并浓缩至60℃下相对密度为1.24～1.26的稠膏，然后加入辅料，混匀制粒，干燥，分装，即得所述通微消痔中药组合物。本发明提供的中药组合物具有抗菌、消炎、镇痛、止血、改善小肠运动功能，能够有效治疗痔疮肿痛、出血。同时，本发明将产品制成通微消痔颗粒，达到药物安全高效、质量可控、临床用药方便、便于携带、贮藏等技术效果。

权利要求

1.一种消痔中药组合物，其特征在于，由以下重量份数的原料制成：地桃花7‑12份、倒扣草4‑9份、地锦草1‑6份、地榆1‑6份。

2.根据权利要求1所述的一种消痔中药组合物，其特征在于，由以下重量份数的原料制成：地桃花9份、倒扣草6份、地锦草3份、地榆3份。

3.根据权利要求1‑2任一项所述的一种消痔中药组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：称取原料，加水浸泡后煎煮提取2次，然后合并滤液，并浓缩至60℃下相对密度为1.24～1.26的稠膏，然后加入辅料，混匀制粒，干燥，分装，即得。

4.根据权利要求3所述的一种消痔中药组合物的制备方法，其特征在于，所述水与原料质量比为6:1。

5.根据权利要求3所述的一种消痔中药组合物的制备方法，其特征在于，所述浸泡温度为常温，浸泡时间为30min。

6.根据权利要求3所述的一种消痔中药组合物的制备方法，其特征在于，所述煎煮时间为1h。

7.根据权利要求3所述的一种消痔中药组合物的制备方法，其特征在于，所述辅料包括糊精和羧甲淀粉钠，所述糊精和羧甲淀粉钠的质量比为9:1。

8.根据权利要求7所述的一种消痔中药组合物的制备方法，其特征在于，所述稠膏与所述辅料质量比为1:1.15。

9.根据权利要求3所述的一种消痔中药组合物的制备方法，其特征在于，所述干燥包括以下步骤：将制粒后的物料放置于70‑75℃条件下干燥2小时，然后过14目筛整粒，再次在70‑75℃条件下干燥至含水量在6%以下。

说明书

一种通微消痔中药组合物及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及中药组合物技术领域，更具体的说是涉及一种通微消痔中药组合物及其制备方法。

背景技术

[0002] 痔疮是一种位于肛门部位的常见疾病，任何年龄阶段都有可能发病，但随着年纪的增长，发病率会越来越高，俗话说“十人九痔”可见痔疮的发病率很高。痔疮按发生部位的不同可分为内痔、外痔、混合痔三种。主要表现为肿痛、便血，便血的性质可分为无痛、间歇性、便后便血，便时滴血或卫生纸上边带血，便秘、饮酒或吃刺激性食物均会使得痔疮症状加重。

[0003] 因此，如何提供一种消痔产品是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

[0004] 有鉴于此，本发明提供了一种通微消痔中药组合物及其制备方法。

[0005] 为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

[0006] 一种通微消痔中药组合物，包括以下重量份数的原料：

[0007] 地桃花7‑12份、倒扣草4‑9份、地锦草1‑6份、地榆1‑6份。

[0008] 优选的，包括以下重量份数的原料：

[0009] 地桃花9份、倒扣草6份、地锦草3份、地榆3份。

[0010] 有益效果：上述地桃花为锦葵科植物地桃花或粗叶地桃花的根或全草。味甘、辛，性凉。归脾、肺经。化学成分主要包括山奈酚(1)，芦丁(2)，槲皮素(3)，阿福豆苷(4)，紫云英苷(5)，银椴苷(6)，过山蕨素(山奈酚‑3‑O‑B‑D‑毗喃葡萄糖基‑7‑0‑a‑L‑鼠李糖苷，7)，山奈酚‑7‑O‑α‑L‑鼠李糖苷(8)，山奈酚‑7‑O‑α‑L‑鼠李糖‑4‑O‑β‑D‑叱喃葡萄糖苷(9)，大花红景天苷(10)。具有祛风利湿，活血消肿，清热解毒之功效。主治感冒，风湿痹痛，痢疾，泄泻，淋证，带下，月经不调，跌打肿痛，喉痹，乳痈，疮疖，毒蛇咬伤。

[0011] 倒扣草为苋科植物粗毛牛膝的全草。味苦、酸，性微寒。归肝、肺、膀胱经。主要成分为蜕皮甾酮(ecdysterone)、倒扣草皂甙(achyranthes saponin)A和倒扣草皂甙B。及生物碱、三十三烷醇(tritriacontanol)等。具有活血化瘀，利尿通淋，清热解表之功效。常用于经闭，痛经，月经不调，跌打损伤，风湿关节痛，淋病，水肿，湿热带下，外感发热，疟疾，咽痛，疔疮痈肿。

[0012] 地锦草为大戟科植物地锦或斑地锦的干燥全草，其性味辛平，归肝、大肠经。地榆中含有多种黄酮类化合物，如山奈酚，槲皮素及葡萄糖苷，另含有多元酚酸类成分，如没食子酸，鞣花酸等。有清热解毒，凉血止血，利湿退黄之功效。用于痢疾，泄泻，咯血，尿血，便血，崩漏，疮疖痈肿，湿热黄疸。

[0013] 地榆，中药名。为蔷薇科植物地榆或长叶地榆的干燥根。味苦、酸、涩，性微寒。归肝、大肠经。地榆含有的药用化学成分较多，主要为没食子酸、皂苷、多糖和黄酮类、儿茶素；4‑O‑β‑D‑叱喃葡萄‑1‑基‑5‑轻基‑3‑甲氧基苯甲酸甲酯；4‑三甲基花酸；(40‑8)‑非瑟酮醇儿茶素等。具有凉血止血，解毒敛疮的功效。用于便血，痔血，血痢，崩漏，水火烫伤，痈肿疮毒。

[0014] 本发明提供的通微消痔组合物不含有法定标准中标识有毒性及现代毒理学证明有毒性的药材，不含有十八反、十九畏配伍禁忌，各药味用量不超过标准规定。本方是为湿热下注、气滞血瘀证的痔疮而设，以清热解毒，活血消肿、通终止痛、润肠通便为法。用于肛门肿痛、瘙痒、麻木，便血，痔核脱出等症状。现代医学中一期、二期、三期、四期内痔及炎性外痔、血栓性外痔等痔疮疾病见上述症状者均适用之。

[0015] 一种通微消痔中药组合物的制备方法，包括以下步骤：

[0016] 称取原料，加水煎煮提取2次后，合并滤液，并浓缩至60℃下相对密度为1.24～1.26的稠膏，然后加入辅料，混匀制粒，干燥，分装，即得所述通微消痔中药组合物。

[0017] 优选的，所述水与原料质量比为6:1。

[0018] 优选的，所述浸泡温度为常温，浸泡时间为30min。

[0019] 优选的，所述煎煮时间为1h。

[0020] 优选的，所述辅料包括糊精和羧甲淀粉钠，所述糊精和羧甲淀粉钠的质量比为9:1。

[0021] 优选的，所述稠膏与所述辅料质量比为1:1.15。

[0022] 优选的，所述干燥包括以下步骤：

[0023] 将制粒后的物料放置于70‑75℃条件下干燥2小时，然后过14目筛整粒，再次在70‑75℃条件下干燥至含水量在6％以下。

[0024] 有益效果：本发明采用水煎煮提取，不影响原汤剂疗效，保证了且缩短了生产周期，降低了能耗等成本，更适合工业生产。

[0025] 经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明公开提供了一种通微消痔中药组合物及其制备方法，本发明提供的中药组合物具有抗菌、消炎、镇痛、止血、改善小肠运动功能，能够有效治疗痔疮出血。为保证临床的疗效，同时克服汤剂煎煮、携带的不便，本发明对该药验方开展制剂研究，将其制成通微消痔颗粒，达到药物安全高效、质量可控、临床用药方便、便于携带、贮藏等技术效果。

附图说明

[0026] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。

[0027] 图1附图为槲皮素薄层色谱鉴别图，其中，A为样品A，B为样品B，C为样品C，D为槲皮素对照品，E为缺地锦草、地桃花的阴性对照品；

[0028] 图2附图为没食子酸薄层色谱鉴别图，其中，A为样品A，B为样品B，C为样品C，D为没食子酸对照品，E为缺地锦草、地桃花的阴性对照品；

[0029] 图3附图为各组大鼠结直肠组织形态学影响，其中A为空白对照组，B模型对照组，C槐角丸组，D通微消痔高剂组，E通微消痔中剂组，F通微消痔低剂组；

[0030] 图4附图为大鼠的心脏染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0031] 图5附图为大鼠的肝脏染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0032] 图6附图为大鼠的脾染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0033] 图7附图为大鼠的肺染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0034] 图8附图为大鼠的气管染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0035] 图9附图为大鼠的肾脏染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0036] 图10附图为大鼠的胃染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0037] 图11附图为大鼠的食管染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0038] 图12附图为大鼠的小肠染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0039] 图13附图为大鼠的结肠染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0040] 图14附图为大鼠的胸腺染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0041] 图15附图为大鼠的卵巢染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0042] 图16附图为大鼠的子宫染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0043] 图17附图为大鼠的睾丸染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0044] 图18附图为大鼠的附睾染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0045] 图19附图为大鼠的肾上腺染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0046] 图20附图为大鼠的颌下腺染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天；

[0047] 图21附图为大鼠的动脉血管染色切片的光镜照片，其中，a部分为空白对照组停药24小时，b部分为空白对照组停药14天，c部分为高剂组停药24小时，d部分为停药14天。

具体实施方式

[0048] 下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

[0049] 实施例1

[0050] 一种通微消痔中药组合物的制备方法，包括以下重量份数的原料：

[0051] 地桃花900g倒扣草600g地锦草300g地榆300g

[0052] 一种通微消痔中药组合物的制备方法，包括以下步骤：

[0053] 加水提取2次，第一次加6倍量水浸泡0.5小时，煎煮1小时，过滤，取滤液；第2次加6倍量水，煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度1.24～1.26(60℃)的稠膏，加入适量糊精及羧甲淀粉钠，混匀制粒，干燥，分装，即得。

[0054] 实施例2

[0055] 一种通微消痔中药组合物，包括以下重量份数的原料：

[0056] 地桃花54Kg、倒扣草36Kg、地锦草18Kg、地榆18Kg。

[0057] 一种通微消痔中药组合物的制备方法，包括以下步骤：

[0058] 将上述各种药材置TQ3000多功能提取罐内，加6倍量水，浸泡30分钟，煎煮提取2次，每次1小时，滤过，滤液浓缩浓缩至相对密度为1.24‑1.26(60℃)的稠膏，加糊精37.8kg，羧甲淀粉钠4.2kg置CHE‑400槽型混合机内混合均匀，制成软材，用YK160EC摇摆式颗粒机制粒，湿颗粒，放置往复式颗粒自动干燥线在70‑75℃下干燥2小时，过14目筛整粒，再干燥至含水量在6％以下，用EYH‑2000混合机整粒后用DXDK40VI自动颗粒包装机分装，包装，即得。

[0059] 按上述制备工艺连续生产A、B、C三批，其成品率为96.8‑97.7％，可见，本发明提供的制备工艺条件合理可行，适合放大生产。

[0060] 技术效果：

[0061] 一、槲皮素检测

[0062] 取实施例2所得产品10g，研细，加70％乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水15ml使溶解，加乙醚20ml振摇提取，弃去乙醚液，水溶液加盐酸5ml，置水浴中水解1小时，取出，迅速冷却，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，用水20ml洗涤，弃去水溶液，乙醚液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

[0063] 另取缺地锦草、地桃花的阴性对照样品10g，同法制成阴性对照溶液。再另取槲皮素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

[0064] 照薄层色谱法(中国药典2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯—乙酸乙酯—甲酸(5:4.5:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。结果见图1所示，分离度、重现性均良好。

[0065] 二、没食子酸检测

[0066] 取上述供试品溶液。另取缺地榆、地锦草的阴性对照样品10g，同法制成阴性对照溶液。再另取没食子酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

[0067] 照薄层色谱法(中国药典2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯—乙酸乙酯—甲酸(6:3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果如图2所示，分离度、重现性均良好，阴性对照无干扰。

[0068] 三、稳定性试验

[0069] 试验方法：(1)长期稳定性试验：将实施例2所得A、B、C三种样品在临床用药品包装条件下，置于室温贮藏，除当月(0月)考核一次外，一月、三月、六月各考核一次，按通微消痔颗粒质量标准(草案)及《中国药典》2020年版一部微生物限度检查法，对通微消痣中药组合物的性状、成分以及微生物限度进行检验。结果见表1、2、3。

[0070] 表1样品A实验日期：2021.06～2021.12温度：常温相对湿度：45‑90％

[0071]

[0072]

[0073] 表2样品B实验日期：2021.06～2021.12温度：常温相对湿度：45‑90％

[0074]

[0075]

[0076] 表3样品C实验日期：2021.06～2021.12温度：常温相对湿度：45‑90％

[0077]

[0078]

[0079] (2)加速稳定性试验：将实施例2所得A、B、C三种样品在临床用药品包装条件下，将样品置于稳定性试验箱中，调节恒温箱温度，使样品在40±2℃和相对湿度75％±5％的条件下，除当月(0月)考核一次外，一月、三月、六月各考核一次，按通微消痔颗粒质量标准(草案)及《中国药典》2020年版一部微生物限度检查法检验。结果见表4、5、6。

[0080] 表4样品A实验日期：2021.06～2021.12温度：常温相对湿度：45‑90％

[0081]

[0082]

[0083] 表5样品B实验日期：2021.06～2021.12温度：40±2℃相对湿度：75±5％

[0084]

[0085] 表6样品C实验日期：2021.06～2021.12温度：40±2℃相对湿度：75±5％

[0086]

[0087] 结论：

[0088] 通过对实施例1所得通微消痔颗粒长期稳定性试验和加速稳定性连续考核6个月，并观察了直接与药品接触的包装材料对药品稳定性的影响，三批样品的性状、鉴别、检查、含量测定均符合规定，微生物限度检查符合规定，即试验结果符合规定。表明本品在临床用药品包装条件下，长期稳定性试验和加速稳定性试验提示本品在两年内稳定。

[0089] 四、药效学研究

[0090] 1材料与方法

[0091] 1.1实验动物KM小鼠，体重18～22g，SD大鼠(6～7周龄)，SPF级，许可证号：SCXK桂2014‑0002，由广西医科大学医学实验动物中心提供。小鼠、大鼠分性别饲养，实验室温度：
23±3℃；相对湿度：40～70％；喂标准颗粒饲料，自由饮水。

[0092] 1.2试验菌株：金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、大肠杆菌[CMCC(B)44102]、铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]、白色念珠菌[CMCC(F)98001]，试验菌株购自广西南宁生化用品仪器公司。

[0093] 1.3药物与试剂

[0094] 实施例1所得通微消痔组合物；

[0095] 阿司匹林肠溶片，德国拜耳产品，生产批号：BJ50920；

[0096] 槐角丸，李时珍医药集团有限公司产品，生产批号：201812002；

[0097] 痔速宁片，江西药都仁和制药有限公司产品，生产批号：210403；

[0098] 新复方芦荟胶囊，河北万邦复临药业有限公司产品，生产批号：1808107；

[0099] 伊文思蓝，上海化学试剂采购供应站分装厂，生产批号：20111006；

[0100] 冰醋酸，西陇化工股份有限公司产品，生产批号：190921；

[0101] 活性炭，广东光华科技股份有限公司产品，生产批号：20161115；

[0102] 复方地芬诺酯片，常州康普药业有限公司产品，生产批号：202005；

[0103] 大鼠IL‑6ELISA试剂盒，上海泛柯实业有限公司产品，生产批号：F3066‑A；

[0104] 大鼠TNF ELISA试剂盒，上海泛柯实业有限公司产品，生产批号：F3056‑A；

[0105] H&E染液，北京雷根生物技术有限公司产品，批号：0603A20。

[0106] 1.4主要仪器：Thermo Multiskan go多功能酶标仪，美国赛默飞产品；EG1150 H石蜡包埋机、RM2255切片机、DM2500显微镜均为德国徕卡公司产品；RB‑200智能热板仪,成都泰盟科技有限公司产品；BS224S型电子分析天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司产品。

[0107] 1.5统计学方法:所得实验数据以“均数±标准差”表示，采用Excel2007软件做t检验比较组间差异显著性。

[0108] 2方法

[0109] 2.1抗菌实验：最低抑菌浓度(MIC)测定：采用试管内稀释法用含吐温的胰酪大豆胨液体培养基(TSB)和含吐温沙氏培养基将1:2的实施例1所得通微消痔颗粒溶液进行倍比稀释，配成1：4、1：8、1：16、1：32、1：64…的稀释供试液，第9管作为TSB对照，第10管作为受试样品对照。分别于第1‑9管中加入制备好的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌(沙氏葡萄糖液体)菌液0.1ml，摇匀，33℃培养24h,白色念珠菌检查置28‑30℃培养24‑48h观察细菌的生长情况，以不出现混浊的质量浓度作为受试样品的最低抑菌浓度(MIC)。

[0110] 通微消痔颗粒对5种菌种的体外抗菌作用结果见表7，由表中可知:本发明提供的通微消痔颗粒具有体外抗菌作用，对白色念珠菌的抗菌效果最好。

[0111] 表7实施例1所得通微消痔颗粒对5种菌种的体外抗菌实验结果

[0112]

[0113] 2.2通微消痔颗粒对巴豆油致小鼠耳廓肿胀的影响

[0114] 取KM小鼠50只，雌雄各半，随机分为模型对照组，阿司匹林(0.2g.kg‑1)组，通微消‑1痔颗粒高、中、低剂量(7.0、3.5、1.75g·kg )组，每组10只。给药组小鼠每天按照20mL·kg‑1
体积灌胃给药1次，空白对照组给予等体积蒸馏水，连续5d。于末次给药1h后，用微量注射器取30ul 2％巴豆油均匀涂于小鼠右耳，待4h后处死小鼠。立即用口径为8mm的打孔器，沿小鼠左右耳廓相同部位打孔取材，然后分别称重，以两耳片重量(mg)的差值作为肿胀程度指标，并计算肿胀抑制率(％)。肿胀抑制率(％)＝(空白对照组耳肿胀度‑给药组耳肿胀度)/对照组耳肿胀度×100％。

[0115] 实验结果表明：与空白对照组比较，阿司匹林和实施例1所得通微消痔颗粒高、中‑1剂量(7.00、3.50g·kg )可以减轻巴豆油致小鼠耳廓肿胀度，差异具有统计学意义(P<
0.05)。结果见表8。

[0116] 表8通微消痔颗粒对巴豆油致小鼠耳廓肿胀的影响( n＝10)

[0117]

[0118] 与模型对照组比较：*P<0.05

[0119] 2.3实施例1所得通微消痔颗粒对鸡蛋清致大鼠足趾肿胀的影响取SD大鼠50只，雌‑1雄各半，随机分为模型对照组，痔速宁片组(0.30g·kg )组，实施例1所得通微消痔颗粒高、‑1 ‑1
中、低剂量(4.00、2.00、1.00g·kg )组，每组10只。给药组大鼠每天按照10mL·kg 体积灌胃给药1次，模型对照组给予等体积蒸馏水，连续5d。于末次给药1h后，在每只大鼠右后足趾皮下按0.1ml/足注射10％新鲜鸡蛋清溶液致炎，造成急性足趾肿胀模型。用软尺分别测量致炎前及致炎后0.5、1、2、3、4、5h的大鼠致炎足趾周径，计算足趾肿胀度及肿胀抑制率。肿胀度(mm)＝致炎后足趾周径(mm)‑致炎前足趾周径(mm)；肿胀抑制率(％)＝(模型对照组肿胀度‑给药组肿胀度)/模型对照组肿胀度×100％。

[0120] 实验结果表明：与模型对照组比较，痔速宁片和通微消痔颗粒高剂量(7.00g·kg‑1
)能抑制大鼠致炎后3h时的足趾肿胀，差异具有统计学意义(P<0.01)。结果见表9。

[0121] 表9实施例1所得通微消痔颗粒对鸡蛋清致大鼠足趾肿胀的影响(±s，n＝10)

[0122]

[0123]

[0124] 与模型对照组比较：*P<0.01

[0125] 2.4热板试验

[0126] 取KM小鼠60只，雌性，将小鼠放在(55±1)℃热板上，记录小鼠自置于热板上至其舔后足的时间(s)为痛阈值，选择痛阈值为5‑30s的小鼠为合格小鼠，剔除过敏(<5s)或反应迟钝(>30s)的个体。24h后选取合格小鼠50只，随机分为模型对照组，痔速宁片(0.62g·kg‑1 ‑1)组，实施例1所得通微消痔颗粒高、中、低剂量(7.00、3.50、1.75g·kg )组，每组10只。给‑1
药组小鼠每天按照20mL.kg 体积灌胃给药1次，模型对照组给予等体积蒸馏水，分别于给药前及末次给药30min、60min、120min、180min后测定各鼠痛阈值作为痛反应指标，痛阈值超过60s的按60s计。

[0127] 实验结果表明：与模型对照组比较，痔速宁片和实施例1所得通微消痔颗粒高、中‑1剂量、低剂组(7.00、3.50、1.75g·kg )能抑制小鼠末次给药90min时的痛阈值，差异具有统计学意义(P<0.05)；与模型对照组比较，实施例1所得通微消痔颗粒中剂量、低剂组(3.50、‑1
1.75g·kg )能抑制小鼠末次给药120min时的痛阈值，差异具有统计学意义(P<0.01)。结果见表4。

[0128] 表4实施例1所得通微消痔颗粒对热板反应小鼠痛阈值的影响(±s，n＝10)

[0129]

[0130] 与模型对照组比较：*P<0.05，**P<0.01

[0131] 2.5扭体试验

[0132] 取KM小鼠50只，雌雄各半，随机分为模型对照组，阿司匹林(0.2g·kg‑1)组，实施例‑11所得通微消痔颗粒高、中、低剂量(7.00、3.50、1.75g·kg )组，每组10只。给药组小鼠每天‑1
按照20mL.kg 体积灌胃给药1次，模型对照组给予等体积蒸馏水，连续2d。于末次给药1h后，‑1
每只小鼠按体重腹腔注射0.6％醋酸溶液10ml·kg ，立即观察并记录20分钟内小鼠的扭体次数,以扭体次数作为痛反应指标。

[0133] 实验结果表明：与模型对照组比较，阿司匹林和实施例1所得通微消痔颗粒高、中‑1剂量(7.00、3.50g·kg )均能减少醋酸导致的小鼠扭体次数，差异具有统计学意义(P<
0.05，P<0.01)。结果见表10。

[0134] 表10通微消痔颗粒对醋酸导致的小鼠扭体次数的影响( n＝10)

[0135]

[0136] 与模型对照组比较：*P<0.05；**P<0.01

[0137] 2.6通微消痔颗粒对小鼠小肠运动功能的影响

[0138] 取60只KM小鼠，雌雄各半，随机分成空白对照组，模型对照组，阳性对照药新复方‑1芦荟胶囊(0.20g·kg )组，实施例1所得通微消痔颗粒高、中、低剂量(7.00、3.50、1.75g·‑1 ‑1
kg )组，每组10只。给药组小鼠每天按照20mL·kg 体积灌胃给药1次，空白对照组给予等体积蒸馏水，连续2d。末次给药后，各组小鼠禁食不禁水16小时。模型对照组和给药各组灌‑1
胃给予复方地芬诺酯5mg·kg ,空白对照组给于等体积蒸馏水。给予复方地芬诺酯0.5h后，各组分别给予墨汁。25分钟后，立即脱颈椎处死小鼠，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管，置于托盘上，轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度为小肠总长度，从幽门至墨汁前沿为墨汁推进长度。按以下公式计算墨汁推进率。墨汁推进率(％)＝墨汁推进长度(cm)/小肠总长度(cm)×100％。

[0139] 实验结果表明：与空白对照组比较,模型对照组的墨汁推进率明显降低，差异具有统计学意义(P＜0.01)，说明小肠蠕动抑制模型制备成功；与模型对照组比较，新复方芦荟‑1胶囊和实施例1所得通微消痔颗粒高剂量(7.00g·kg )能明显提高墨汁推进率，差异具有
统计学意义(P＜0.01)，结果见表11。

[0140] 表11通微消痔颗粒对小鼠小肠运动功能的影响( n＝10)

[0141]

[0142] 与空白对照比较:*P<0.01；与模型组比较：**P<0.01

[0143] 2.7实施例1所得通微消痔颗粒对小鼠凝血时间的影响

[0144] 取50只KM小鼠，雌雄各半，随机分成空白对照组，阳性对照药槐角丸(2.00g·kg‑1)‑1组，实施例1所得通微消痔颗粒高、中、低剂量(7.00、3.50、1.75g·kg )组，每组10只。给药‑1
组小鼠每天按照20mL·kg 体积灌胃给药1次，正常对照组给予等体积蒸馏水，连续3d。末次给药1h后，用玻片法测定凝血时间：小鼠眼眶取血，用棉球擦去第1滴血，再于载玻片两端各滴1滴血，立即用秒表计时。每隔30s用清洁针头自血滴边缘向里轻轻挑动一次，并观察有无血丝挑起。从采血开始至挑起血丝止，所经历的时间即为凝血时间。

[0145] 实验结果表明：与空白对照组比较,槐角丸和实施例1所得通微消痔颗粒高量‑1
(7.00g·kg )能明显缩短小鼠凝血时间，差异具有统计学意义(P＜0.05)，结果见表12。

[0146] 表12实施例1所得通微消痔颗粒对小鼠出血时间的影响( n＝10)

[0147]

[0148]

[0149] 与空白对照组比较：*P<0.05

[0150] 2.8实施例1所得通微消痔颗粒对小鼠出血时间的影响

[0151] 取50只KM小鼠，雌雄各半，随机分成空白对照组，阳性对照药槐角丸(2.00g·kg‑1)‑1组，实施例1所得通微消痔颗粒高、中、低剂量(7.00、3.50、1.75g·kg )组，每组10只。给药‑1
组小鼠每天按照20mL·kg 体积灌胃给药1次，正常对照组给予等体积蒸馏水，连续3d。末次给药1h后，用断尾法测定出血时间：将小鼠固定尾巴，用剪刀剪去尾尖约1cm，使血液自行溢出。每隔30s用滤纸轻轻吸取血滴，以人工形成创面血液自行溢出到出血停止所经时间为出血时间。

[0152] 实验结果表明：与空白对照组比较,槐角丸和实施例1所得通微消痔颗粒高剂量、‑1中剂量、低剂量(7.00、3.50、1.75g·kg )能明显缩短小鼠出血时间，差异具有统计学意义(P＜0.01)，结果见表13。

[0153] 表13通微消痔颗粒对小鼠出血时间的影响

[0154]

[0155] 注：与空白对照组比较*P<0.01

[0156] 2.9对巴豆油致大鼠肛门肿胀的影响

[0157] 取SD大鼠60只，雌雄各半，用巴豆油混合剂(巴豆油混合液的配置：1份蒸馏水、4份吡啶、5份乙醚和10份6％巴豆油乙醚溶液配制。)制作大鼠肛门肿胀模型。制备模型时把浸吸16uL巴豆油混合液的棉球插入用乙醚浅麻醉的大鼠肛门10s。将造模成功的大鼠随机分‑1为空白对照组，模型对照组，阳性药痔速宁片(0.31g·kg )组，实施例1所得通微消痔颗粒‑1 ‑1
高、中、低剂量(4.00、2.00、1.00g·kg )组，每组10只。各组大鼠每天按照10ml·kg 灌胃给药1次，正常对照组给予等体积蒸馏水，连续5d。末次给药1h后，大鼠麻醉取血，测定血清炎性因子；取从肛门到直肠约2cm组织称湿重称重，计算脏器系数；剥离大鼠结直肠,流水冲洗肠内容物后福尔马林液固定,石蜡包埋切片HE染色，光镜检查。

[0158] 实验结果表明：与空白对照组比较,模型对照组的大鼠肛门肿胀度、炎性因子IL‑6及TNF水平明显增高，差异具有统计学意义(P＜0.01)，说明大鼠肛门肿胀模型制备成功；与‑1模型对照组比较，痔速宁片和实施例1所得通微消痔颗粒高、中剂量(4.00、2.00g·kg )能‑1
明显降低大鼠肛门肿胀度(P＜0.05、P＜0.01)，实施例1高剂量(4.00g·kg )能明显降低炎性因子IL‑6及TNF水平，差异具有统计学意义(P＜0.01)，结果见表14。

[0159] 各组大鼠结直肠组织形态学结果HE(×100倍)详见图3。由图3可见，空白对照组大鼠结直肠区结构正常，肛管直肠区上皮细胞、内分泌细胞分布排列整齐，黏膜下层微血管无充血现象；模型组大鼠结直肠区黏膜增厚、鳞状上皮化生、周围组织可见出血；阳性对照组大鼠结直肠区黏膜增厚现象减轻，黏膜下层微血管无充血；通微消痔高剂组大鼠结直肠区结构正常，肛管直肠区上皮细胞、内分泌细胞分布排列整齐，黏膜下层微血管无充血；通微消痔中、低剂组大鼠结直肠区黏膜增厚、鳞状上皮化生、黏膜下层微血管充血。本发明提供的通微消痔颗粒对大鼠痔疮模型有很好的治疗作用。

[0160] 表14对大鼠肛门肿胀度和炎性因子的影响( n＝10)

[0161] 组别 剂量(g·kg‑1) 肿胀度(mg) IL‑6(pg·ml‑1) TNF(ng·ml‑1)空白对照组 ‑ 0.13±0.03 273.26±16.4 600.63±24.62
模型对照组 ‑ 0.44±0.12* 302.19±19.80* 646.59±26.23*
痔速宁片 0.31 0.33±0.07** 274.85±21.75** 595.65±28.52**
实施例1 4.00 0.32±0.08** 279.32±21.11** 619.97±30.88**
实施例1 2.00 0.27±0.05*** 296.55±14.34 649.40±51.44
实施例1 1.00 0.36±0.18 309.55±24.96 683.88±68.36

[0162] 与空白对照组比较：*P<0.01；与模型组比较：**P<0.05，***P<0.01

[0163] 3结论

[0164] 由以上数据可以看出，本发明提供的通微消痔中药组合物具有抗菌、消炎、镇痛、止血、改善小肠运动功能、对大鼠痔疮模型有很好的治疗作用。为其临床用于痔疮的治疗提供了理论依椐。

[0165] 五、重复给药毒性试验

[0166] 试验目的：观察长期实施例1所得通微消痔颗粒灌胃给药对SD大鼠所产生的毒性反应和反应的可逆性，为临床安全用药提供依据。

[0167] 受试药物：实施例1所得通微消痔颗粒，3.89药材/g浓缩液，试验时用蒸馏水配制成所需浓度。

[0168] 动物及饲养条件：SD大鼠(6～7周龄)，80只，雌雄(♀♂)各半，SPF级，长沙市天勤生物技术有限公司，许可证号：SCXK(湘)2019‑0014。实验室温度23±3℃，相对湿度40‑70％，提供清洁自来水供大鼠自由饮用。每3～4天清洁笼子、更换垫料1次。动物适应性饲养一周后开始给药。

[0169] 给药方法：按照《药物重复给药毒性研究技术指导原则》[3]有关要求，采用灌胃给药途径，与临床给药途径一致。按10ml/kg体积给药，每天给药1次，连续30天。同时设空白对照组。

[0170] 试验方法：选取上述SD大鼠随机分成4组，每组20只(♀♂各半)。第一组大鼠为空白对照组(灌胃给等体积水)，第二组大鼠为实施例1所得通微消痔颗粒高剂组(42.0g/kg)，第三组大鼠为实施例1所得通微消痔颗粒中剂组(21.0g/kg)，第四组为实施例1所得通微消痔颗粒低剂组(10.5g/kg)。每日给药一次，连续1个月，每天记录摄食量，每周称体重1次。试验期间，观察大鼠的一般状况，包括外观体征、行为活动、进食、二便、死亡等情况。给药1个月，于末次给药后24小时，每组取10只大鼠(♀♂各半)，腹腔注射10％水合氯醛(0.3mL/100g)麻醉，于腹主动脉采血作血液学检查和血液生化学检查，并对主要脏器进行全面尸检，取脑、心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、子宫、卵巢、睾丸、附睾等脏器称重，计算脏器系数(g/100g体重)，并对上述脏器和胃、肠、骨等进行组织学检查。余下大鼠停药观察14天后，同法检测上述指标。

[0171] 统计方法：试验结果用Excel 2007软件做t检验比较组间差异显著性。

[0172] 试验结果：

[0173] 1.一般情况：各给药组大鼠在试验期间均未见出现死亡，各组动物在给药期间和停药后行为活动、呼吸、排便等一般表现无异常，实施例1所得通微消痔颗粒高、中、低剂给药液组体重增长，与空白对照组比较，均无显著性差异。结果见表1。实施例1所得通微消痔颗粒高剂给药后第二 三 四周 中剂组给药后第二三周 低剂组第二 三(♀)周摄食量与空白对照组比较有显著性差异。
结果见表15。

[0174] 表15：灌胃给药后，大鼠各周平均摄食量表( g)

[0175]

[0176] t检验，与空白对照组比较*P<0.05,**P<0.01，***P<0.001

[0177] 2.血液学指标的检查：检测白细胞计数WBC、中性粒细胞计数Neu、淋巴细胞计数Lym、中间细胞计数Mon、

[0178] 3.嗜酸性细胞计数Eos、嗜碱性粒细胞计数Bas、中性粒细胞比率Neu％、淋巴细胞比率Lym％、中间细胞比率Mon％、嗜酸性细胞比率Eos％、嗜碱性粒细胞比率Bas％、红细胞计数RBC、血红蛋白HGB、红细胞比积HCT％、平均红细胞体积MCV、平均RBC血红蛋白含量MCH、平均RBC血红蛋白浓度MCHC、红细胞分布宽度RDW－CV、红细胞分布宽度变异系数RDW－SD、血小板计数PLT、平均血小板体积MPV、血小板体积分布宽度PDW、血小板比容PCT、凝血酶原时间PT、活化部分凝血活酶时间APTT25个血液学指标。停药24小时后，与空白对照组比较，高剂组的MCH、Eos％，中剂组的Eos％呈显著性差异(P<0.05)。停药14天后，与空白对照组比较，高剂组RBC、HGB、PLT、PCT，中剂组Neu、Eos、Neu％、PCT、APTT，低剂组Neu％、Lym％、MCHC、APTT呈显著性差异(P<0.05，P<0.01)。上述测定值均在正常值范围内，无实际意义，结果见表16。

[0179] 表16长期毒性试验停药24小时、14天对血液学指标的影响( n＝10)

[0180]

[0181]

[0182]

[0183] t检验，与空白对照组比较*P<0.05,**P<0.01

[0184] 3.血液生化学指标：检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(UREA)、肌酐(CREA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(Glu)、总胆红素+ + ‑(T‑BIL)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、钾(K)、钠(Na)、氯(Cl)14个血液生化学指标。停药24小时后，与空白对照组比较，高剂组的TG，低剂组的T‑BIL呈显著性差异(P<0.05)。停药‑ ‑
14天后，与空白对照组比较，中剂组的AST、CREA、Cl ，低剂组的Cl呈显著性差异(P<0.01、P<
0.05)。除高剂组的TG外，上述测定值均在正常值范围内。结果见表17。

[0185] 表17长期毒性试验停药24小时、14天对生化指标的影响( n＝10)

[0186]

[0187]

[0188] t检验，与空白对照组比较*P<0.05，**P<0.01。

[0189] 4.主要脏器系数检查：称重并计算各剂量组大鼠的脑、心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、子宫、卵巢、睾丸、附睾等脏器系数(g/100g体重)。停药24小时后，与空白对照组比较，高剂组的卵巢、附睾，中剂组的附睾呈显著性差异(P<0.05，P<0.01)，高、中、低剂组其它脏器系数无显著性差异(P>0.05)。停药14天，与空白对照组比较，高、中、低剂组上述脏器系数均无著性差异(P>0.05)。结果见表18。

[0190] 表18停药24小时、14天对主要脏器系数的影响( g/100g体重，n＝10)

[0191]

[0192]

[0193] t检验，与空白对照组比较*P<0.05,**P<0.01

[0194] 5.肉眼尸检和组织学检查：取通微消痔颗粒高剂组(42.0g/kg)、和空白对照组各20只(停药24小时10只，停药14天10只，雌雄各半)大鼠的心、肝、脾、肺、肾、胃、小肠、大肠、肾上腺、胸腺、食管、主动脉、子宫、卵巢、睾丸、附睾等，进行大体检查后经常规固定制片及HE染色，然后光镜检查。

[0195] 由图4‑21可以看出，停药24小时后，所有动物全部心脏外观无异常，心包膜、心内膜及间质未见其他物质出现，心肌细胞核呈卵圆形，胞浆细腻，间质清晰，心肌纤维束呈分枝状排列，形态无异常。停药14天，所有动物亦无异常。

[0196] 停药24小时，所有动物的肝外观无异常，细胞呈多边形，核圆大，可见核仁，肝索和肝窦呈放射状排列，星状细胞散在性分布，中央静脉和汇管区各级血管及胆管结构正常，也未见其他物质出现。停药14天，所有动物的肝外观无异常，细胞呈多边形，核圆大，可见核仁，肝索和肝窦呈放射状排列，星状细胞散在性分布，中央静脉和汇管区各级血管及胆管结构正常，也未见其他物质出现。

[0197] 停药24小时，所有动物全部动物脾包膜、红髓与白髓比例、淋巴滤泡及生发中心各种淋巴细胞、脾窦等均未见异常，也未见其他物质出现。停药14天，所有动物亦无异常。

[0198] 停药24小时，所有动物的肺外观呈灰白色，各级支气管粘膜上皮无变性脱落，管腔无其他物质出现，肺泡上皮呈扁平状未见改变，间质未见异常。停药14天，所有动物亦无异常。

[0199] 停药24小时，所有动物全部气管粘膜完整，纤毛上皮、粘膜下层、软骨形态和结构均未见异常。停药14天，所有动物亦无异常。

[0200] 停药24小时，所有动物全部肾脏的形态大小、色泽和切面正常，肾包膜光滑、肾小球、肾小囊、各级肾小管、肾盂和间质、上皮细胞形态无异常，也未见其他物质沉积于管腔内。停药14天，所有动物亦无异常。

[0201] 停药24小时，所有动物全部动物胃粘膜完整，上皮细胞形态正常，粘液细胞、主细胞和壁细胞形态无异常，肌层及被膜完整，间质无其他物质沉积。停药14天，所有动物亦无异常。

[0202] 停药24小时，所有动物全部食管粘膜完整，复层扁平上皮细胞、固有膜及肌层其形态和结构未见异常。停药14天，所有动物亦无异常。

[0203] 停药24小时，所有动物全部小肠粘膜上皮完整，肠腺细胞及各种上皮细胞形态未见改变，间质、肌层及浆膜未见其他物质出现。停药14天，所有动物亦无异常。

[0204] 停药24小时，所有动物全部结肠粘膜上皮完整，上皮细胞、粘膜下及间质未见异常。停药14天，所有动物亦无异常。

[0205] 停药24小时，所有动物全部胸腺大小、形态正常，淋巴细胞密度、排列及形态未见异常，间质未见其它物质出现。停药14天，所有动物亦无异常。

[0206] 停药24小时，所有动物全部卵巢外观无异常，各种卵泡、黄体、白体以及间质无明显改变。停药14天，所有动物亦无异常。

[0207] 停药24小时，所有动物全部子宫形态正常，子宫粘膜层、肌层、浆膜以及间质未见改变。停药14天，所有动物亦无异常。

[0208] 停药24小时，所有动物全部睾丸大小适中，精原细胞、精母细胞、次级精母细胞和精子细胞的形态和比例未见异常，间质未见明显改变。停药14天，所有动物亦无异常。

[0209] 停药24小时，所有动物全部附睾管上皮、平滑肌、管腔內精子及间质未见异常。停药14天，所有动物亦无异常。停药14天，所有动物亦无异常。

[0210] 停药24小时，所有动物全部肾上腺外观无异常，皮质部球状带、束状带、网状带和髓质部嗜酪细胞，间质未见明显改变。停药14天，所有动物亦无异常。

[0211] 停药24小时，所有动物全部颌下腺粘液性腺泡上皮及导管未见异常。停药14天，所有动物亦无异常。

[0212] 停药24小时，所有动物全部动脉血管内膜光滑，内皮细胞、各层弹力膜和平滑肌均未见异常，粘膜下未见其它物质沉积。停药14天，所有动物亦无异常。

[0213] 综上所述，停药24小时和停药14天，对大鼠心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、胃、肠等脏器进行全面肉眼尸检，给药组和空白对照组均无充血、肿胀和坏死等异常表现；胃、肠粘膜亦未发现红肿、溃烂等现象。病理检查结果未发现因药物毒性引起的主要器官病理形态学改变。

[0214] 6.结论

[0215] 由以上试验可以看出，使用本发明提供的通微消痔颗粒高、中、低剂组(相当临床用药60、30、15倍)按每天灌胃给药(42.0g、21.0、10.5药材g/kg)1次，空白对照组灌胃给等体积水(10ml/kg)，连续1个月，各给药组大鼠在试验期间均未见出现死亡，各组动物在给药期间行为活动、呼吸、排便等一般表现无异常，实施例1所得通微消痔颗粒高、中、低剂给药组大鼠体重增长良好，与空白对照组比较，均无显著差异。各给药组每周摄食量在给药后2、3、4周均有不同程度的影响，但对大鼠体重增长未造成实质性影响。停药后摄食量恢复正常。对停药后24小时所作的血液学指标、血液生化学指标和主要脏器系数检查，除高剂组的TG、卵巢、附睾，中剂组的附睾外，给药组绝大多数检测项目与空白对照组比未见显著性差异，其它个别检测项目有显著性差异，但其测定值均在正常范围内，故其差异无实际意义；
停药后14天，所作的血液学指标、血液生化学指标和主要脏器系数检查，各给药组绝大多数检测项目与空白对照组比未见显著性差异，个别检测项目虽有显著性差异，但其测定值均在正常范围内，故其差异无实际意义；各给药组在停药24小时、停药14天组织学检查亦未发现明显与药物有关的病理组织学改变损害。因此可认为，按拟定的剂量、用法与疗程使用实施例1所得通微消痔颗粒应是安全的。

[0216] 本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。对于实施例公开的装置而言，由于其与实施例公开的方法相对应，所以描述的比较简单，相关之处参见方法部分说明即可。

[0217] 对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。