一种印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法

摘要

本发明涉及害虫生物防治领域，提供一种印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法。方法主要内容为：实蝇成虫饲养笼与印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐、橘小实蝇幼虫的获取、印度实蝇姬小蜂寄生橘小实蝇幼虫、被印度实蝇姬小蜂寄生后的橘小实蝇幼虫的饲养与化蛹、印度实蝇姬小蜂成虫的饲养及寄生效益评估。本发明的印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法省时、省力、省空间，能够短时间内大量繁殖印度实蝇姬小蜂，满足生物学特性研究试验或者田间防治实蝇的应用需求。

权利要求

1.一种印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）实蝇成虫饲养笼与印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐

实蝇成虫饲养采用多功能实蝇成虫饲养笼；印度实蝇姬小蜂饲养采用印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐，养虫前将其清洗晾干；

（2）橘小实蝇幼虫的获取

将橘小实蝇蛹置于多功能实蝇成虫饲养笼中，提供饲料和水，待橘小实蝇羽化12天后，取橘小实蝇采卵瓶，每瓶中加入5ml的凉开水，晃动采卵瓶，使凉开水分布于瓶内壁，插入多功能成虫饲养笼中，采卵3h；然后将采卵瓶中的卵使用凉开水冲洗出来，均匀铺在实蝇幼虫人工饲料表面上，卵孵化后幼虫将钻入饲料取食，得橘小实蝇幼虫；

（3）印度实蝇姬小蜂寄生橘小实蝇幼虫

在印度实蝇姬小蜂羽化的次日开始提供橘小实蝇幼虫，每次选取4日龄的橘小实蝇幼虫1200头，提供给印度实蝇姬小蜂寄生10h；每个印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐中饲养7500头印度实蝇姬小蜂，每天相同时段提供一次幼虫，持续3天；每天作为1个批次，一共3批；

（4）被寄生后的橘小实蝇幼虫的饲养与化蛹

将每批次被印度实蝇姬小蜂寄生后的橘小实蝇幼虫转移至橘小实蝇幼虫饲料中，按照饲养橘小实蝇的方法继续饲养，直至橘小实蝇羽化；

印度实蝇姬小蜂成虫的饲养

自橘小实蝇开始羽化后的第3天，将剩下未羽化的蛹取出分装至印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐中，每罐放入300‑700粒蛹，提供10wt%的新鲜蜂蜜水，自印度实蝇姬小蜂羽化后，每3天补充10wt%的新鲜蜂蜜水；

然后重复上述（1）到（5）的步骤，在短期内可获得大量的印度实蝇姬小蜂供田间应用；

步骤（1）中印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐包括一端敞口的透明罐体，所述透明罐体的敞口处连接有黑色布袖筒，透明罐体上开设有若干透气开口，透明罐体内部设置有载物板，所述载物板上设置有成虫蜜水供给皿与盛蜂蛹皿，所述透明罐体外部设置有胶条底座；所述透气开口呈矩形且覆盖有一层纱网，所述纱网经热熔胶与透明罐体黏贴；所述透明罐体卧式设置，所述透气开口开设于透明罐体的上半部，防滚底座设置于透明罐体的底部。

2.根据权利要求1所述的印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法，其特征在于，所述透气开口的数目为四个，所述纱网为120目；相邻两透气开口之间的间距大于或等于10cm。

3.根据权利要求1所述的印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法，其特征在于，所述防滚底座包括两条平行放置且截面为半圆形的橡胶管，所述橡胶管固定在透明罐体的外表面。

4.根据权利要求3所述的印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法，其特征在于，所述橡胶管经双面胶固定在透明罐体的外表面。

5.根据权利要求1所述的印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法，其特征在于，所述黑色布袖筒为黑色薄款棉布围合而成，并经弹性胶圈与透明罐体的敞口处相连接。

6.根据权利要求1所述的印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法，其特征在于，所述载物板为长方形塑料薄板，所述成虫蜜水供给皿是将脱脂棉片铺入一次性塑料培养皿中制成，所述盛蜂蛹皿为一次性塑料培养皿。

7.根据权利要求1所述的印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法，其特征在于，步骤（5）中的新鲜蜂蜜水配方为：50g蜂蜜加入450ml凉开水中，搅拌均匀。

8.根据权利要求1所述的印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法，其特征在于，步骤（5）中的补充新鲜蜂蜜水步骤为：将配置好的新鲜蜂蜜水加入容量500ml的洗气瓶中，进行印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐中新鲜蜂蜜水的补充。

说明书

一种印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法

技术领域

[0001] 本发明属于害虫生物防治领域，具体涉及一种印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法。

背景技术

[0002] 实蝇属双翅目实蝇科，全世界已知约500个属5000多种，其中对水果、蔬类有害的种类有15属150多种。严重危害水果、蔬菜、或作物的有50多种，主要集中在果实蝇属、寡鬃实蝇属、小条实蝇属、按实蝇属和绕实蝇属。

[0003] 在我国南方严重危害水果、蔬菜的实蝇害虫为橘小实蝇、瓜实蝇、南亚实蝇。

[0004] 橘小实蝇[Bactrocera dorsalis (Hendel)]，又名东方果实蝇，俗称果蛆，原产于东南亚，现广泛分布于中国、东南亚各国、美国、澳大利亚、瑙鲁、新西兰、帕劳、智利、苏里南、巴基斯坦、巴布亚新几内亚等75个124个地区。橘小实蝇寄主范围广泛，可为害芒果、番石榴、柑橘、杨桃、桃、柚子等46科250余种果实。

[0005] 瓜实蝇[Zeugodaucs cucurbitae (Coquillett)]，广泛分布于亚热带地区的30多个国家和地区；国内主要分布于台湾、福建、海南、广东、广西、贵州、云南、四川、重庆、湖南、江西等地，以西南地区为主；寄主包括黄瓜、苦瓜、丝瓜、番茄等16个科的 80 余种植物，尤其偏好危害葫芦科、茄科等主要蔬菜。

[0006] 南亚实蝇[Zeugodacus tau (Walker)]，国外主要分布在日本(琉球群岛)、越南、老挝、柬埔寨、泰国、马来西亚、菲律宾、印度尼西亚、不丹、印度、斯里兰卡；国内主要分布于浙江、湖北、江西、湖南、福建、广东、海南、广西、四川、贵州、云南、西藏等14个省区及台湾地区；其主要为害丝瓜、南瓜、苦瓜等葫芦科以及柑橘类、茄类、芒果等100多种水果和蔬菜。

[0007] 实蝇以雌虫产卵与幼虫取食的方式进行危害，造成果实脱落、畸形、腐烂，严重影响果蔬果实的品质。实蝇繁殖能力强，田间世代重叠、化学防治困难，故能够造成农业生产上的重大经济损失。

[0008] 利用天敌寄生蜂防治实蝇，具有绿色安全可循环的特点。当前国内应用较多的实蝇天敌寄生蜂主要是茧蜂，包括阿里山潜蝇茧蜂（Fopius arisanus）、长尾潜蝇茧蜂（Diachasmimorpha longicaudata）、切割潜蝇茧蜂（Psytallia incise）、布氏潜蝇茧蜂（Fopius vandenboschi）等。

[0009] 被茧蜂寄生过的实蝇1粒蛹中仅能羽化出1头茧蜂，而1头实蝇雌虫平均产卵1500粒；因此，生产上使用茧蜂防治实蝇需要多次、大量释放茧蜂，因而需要投入大量的人力、物力对寄生蜂进行人工饲养；否则，难以满足生产需求。

[0010] 目前，尚未发现针对于印度实蝇姬小蜂的简易快速扩繁的方法。因此，亟需开发一种简易、便捷、能够大量繁殖印度实蝇姬小蜂的方法，为后续研究其生物学特性以及大规模扩繁应用于田间防治实蝇提供必要的基础条件。

发明内容

[0011] 本发明针对目前的技术问题提供了一种印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法，具体以橘小实蝇作寄主提供印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法，包括实蝇成虫饲养笼与印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐、橘小实蝇幼虫的获取、印度实蝇姬小蜂寄生橘小实蝇幼虫、被寄生后的橘小实蝇幼虫的饲养与化蛹、印度实蝇姬小蜂成虫的饲养及寄生效益评估。

[0012] 为实现上述目的，本发明的技术方案为：

[0013] 一种印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法包括以下步骤：

[0014] （1）实蝇成虫饲养笼与寄生蜂成虫饲养罐的准备

[0015] 实蝇成虫饲养采用多功能实蝇成虫饲养笼（ZL201220177838.4）；印度实蝇姬小蜂成虫饲养采用20 L容量的印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐，养虫前将其清洗晾干。

[0016] （2）橘小实蝇幼虫的获取

[0017] 将4L橘小实蝇蛹置于多功能实蝇成虫饲养笼中，提供人工饲料和水，待橘小实蝇羽化12天后，取3个橘小实蝇采卵瓶，每瓶中加入5ml的凉开水，晃动采卵瓶，使凉开水分布于瓶内壁，插入多功能实蝇成虫饲养笼中的采卵瓶孔中，采卵3小时；然后将采卵瓶中的卵使用凉开水冲洗出来，均匀铺在橘小实蝇幼虫人工饲料表面上，卵孵化后幼虫将钻入饲料取食，得橘小实蝇幼虫；

[0018] （3）印度实蝇姬小蜂寄生橘小实蝇幼虫

[0019] 在印度实蝇姬小蜂羽化的次日开始提供橘小实蝇幼虫，每次选取4日龄的橘小实蝇幼虫1200头，提供给印度实蝇姬小蜂寄生10小时；每个印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐中饲养7500头印度实蝇姬小蜂，每天相同时段提供一次橘小实蝇幼虫，持续3天；每天作为1个批次，一共3批；

[0020] （4）被寄生后的橘小实蝇幼虫的饲养与化蛹

[0021] 将每批次的被寄生后的实蝇幼虫转移至实蝇幼虫饲料中，按照饲养实蝇的方法继续饲养，直至橘小实蝇羽化；

[0022] （5）印度实蝇姬小蜂成虫的饲养

[0023] 自橘小实蝇开始羽化后的第3天，将剩下未羽化的蛹取出分装至印度实蝇姬小蜂饲养罐中，每罐放入300‑700粒蛹，提供10wt%的新鲜蜂蜜水，自印度实蝇姬小蜂羽化后，每3天补充适量的10wt%的新鲜蜂蜜水。

[0024] 然后重复上述（1）到（5）的步骤，在短期内可获得大量的印度实蝇姬小蜂供田间应用。

[0025] 印度实蝇小蜂寄生最佳饲养密度的确定：

[0026] 上述印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐中分别提供300粒、500粒和700粒的蛹，根据（1）到（5）的方法进行试验操作。通过获得的印度实蝇姬小蜂蛹总数、获得印度实蝇姬小蜂蛹数与投入印度实蝇姬小蜂蛹数的比值、每蛹平均羽化出的印度实蝇姬小蜂总数、每蛹平均羽化出的雌蜂与雄蜂数、以及雌雄蜂的比值等寄生参数进行不同处理饲养印度实蝇姬小蜂寄生效益的评估，最终获得印度实蝇姬小蜂的最佳饲养密度。

[0027] 本发明中，寄生橘小实蝇幼虫的印度实蝇姬小蜂所在养虫室内温度为23±2℃、相对湿度为50±10%、光周期为14L：10D。

[0028] 上述印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐，包括一端敞口的透明罐体，所述透明罐体的敞口处连接有黑色布袖筒，透明罐体上开设有若干透气开口，透明罐体内部设置有载物板，所述载物板上设置有成虫蜜水供给皿与盛蜂蛹皿，所述透明罐体外部设置有胶条底座。

[0029] 进一步地，所述透气开口呈矩形且覆盖有一层纱网，所述纱网经热熔胶与透明罐体黏贴。

[0030] 进一步地，所述透气开口的数目为四个，所述纱网为120目。

[0031] 进一步地，所述透明罐体卧式设置，所述透气开口开设于透明罐体的上半部，所述防滚底座设置于透明罐体的底部。

[0032] 进一步地，相邻两透气开口之间的间距大于或等于10cm。

[0033] 进一步地，所述防滚底座包括两条平行放置且截面为半圆形的橡胶管，所述橡胶管固定在透明罐体的外表面。

[0034] 进一步地，所述橡胶管经双面胶固定在透明罐体的外表面。

[0035] 进一步地，所述黑色布袖筒为黑色薄款棉布围合而成，并经弹性胶圈与透明罐体的敞口处相连接。

[0036] 进一步地，所述载物板为长方形塑料薄板，所述成虫蜜水供给皿是将脱脂棉片铺入一次性塑料培养皿中制成，所述盛蜂蛹皿为一次性塑料培养皿。

[0037] 进一步地，步骤（5）中的新鲜蜂蜜水配方为：50g蜂蜜加入450ml凉开水中，搅拌均匀；步骤（5）中的补充新鲜蜂蜜水步骤为：将配置好的新鲜蜂蜜水加入容量500ml的洗气瓶中，进行印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐中新鲜蜂蜜水的补充。

[0038] 本发明的有益效果：

[0039] （1）本发明驯化成功1种能寄生多种实蝇（包括橘小实蝇、瓜实蝇、南亚实蝇）幼虫的小蜂—印度实蝇姬小蜂Aceratoneuromyia indica（Silvestri），被寄生的实蝇1粒蛹能羽化出十几头至几十头不等的印度实蝇姬小蜂成虫（平均25头），具有很高的种群扩增速率，短期内能快速繁育出大量的寄生蜂，具备取得更高防治效率与大规模田间应用的价值。

[0040] （2）该饲养罐结构简单，所需原材料种类少、易获取，制作过程简洁，功能齐全实用，易于操作，符合实际工作需求。此外，饲养罐可以重复使用，清理方便，饲养容量大，能够极大简化饲养流程、提高饲养效率、提升饲养效益，同时满足印度实蝇姬小蜂的生物学特性研究与大量扩繁的需要。

附图说明

[0041] 图1为本发明的印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐结构示意图；

[0042] 图中，1‑透明罐体、2‑透气开口、3‑纱网、4‑盛蜂蛹皿、5‑成虫蜜水供给皿、6‑载物板、7‑黑色布袖筒、8‑胶条底座。

具体实施方式

[0043] 以下结合具体实施例对本发明做进一步说明，但本发明不仅仅限于这些实施例。

[0044] 实施例1

[0045] 一种印度实蝇姬小蜂的人工快速扩繁方法包括以下步骤：

[0046] （1）实蝇成虫饲养笼与寄生蜂成虫饲养罐的准备

[0047] 实蝇成虫饲养采用多功能实蝇成虫饲养笼（采用ZL201220177838.4）；印度实蝇姬小蜂成虫饲养采用20 L容量的印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐，养虫前将其清洗晾干。

[0048] （2）橘小实蝇幼虫的获取

[0049] 将4L橘小实蝇蛹置于多功能实蝇成虫饲养笼中，提供人工饲料和水，待橘小实蝇羽化12天后，取3个橘小实蝇采卵瓶，每瓶中加入5ml的凉开水，晃动采卵瓶，使凉开水分布于瓶内壁，插入多功能实蝇成虫饲养笼中的采卵瓶孔中，采卵3小时；然后将采卵瓶中的卵使用凉开水冲洗出来，均匀铺在橘小实蝇幼虫人工饲料表面上，卵孵化后幼虫将钻入饲料取食，得橘小实蝇幼虫；

[0050] （3）印度实蝇姬小蜂寄生橘小实蝇幼虫

[0051] 在印度实蝇姬小蜂羽化的次日开始提供橘小实蝇幼虫，每次选取4日龄的橘小实蝇幼虫1200头，提供给印度实蝇姬小蜂寄生10小时；每个印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐中饲养7500头印度实蝇姬小蜂，每天相同时段提供一次橘小实蝇幼虫，持续3天；每天作为1个批次，一共3批；

[0052] （4）被寄生后的橘小实蝇幼虫的饲养与化蛹

[0053] 将每批次的被寄生后的实蝇幼虫转移至实蝇幼虫饲料中，按照饲养实蝇的方法继续饲养，直至橘小实蝇羽化；

[0054] （5）印度实蝇姬小蜂成虫的饲养

[0055] 自橘小实蝇开始羽化后的第3天，将剩下未羽化的蛹取出分装至印度实蝇姬小蜂饲养罐中，每罐放入300‑700粒蛹，提供10wt%的新鲜蜂蜜水，自印度实蝇姬小蜂羽化后，每3天补充适量的10wt%的新鲜蜂蜜水。

[0056] 然后重复上述（1）到（5）的步骤，在短期内可获得大量的印度实蝇姬小蜂供田间应用。

[0057] 本实施例中，寄生橘小实蝇幼虫的印度实蝇姬小蜂所在养虫室内温度为23±2℃、相对湿度为50±10%、光周期为14L：10D。

[0058] 参考图1，上述一种印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐，包括一端敞口的透明罐体1，所述透明罐体的敞口处连接有黑色布袖筒7，透明罐体上开设有若干透气开口2，透明罐体内部设置有载物板6，所述载物板上设置有成虫蜜水供给皿5与盛蜂蛹皿4，所述透明罐体外部设置有胶条底座8。

[0059] 本实施例中，所述透气开口呈矩形且覆盖有一层纱网，所述纱网经热熔胶与透明罐体黏贴。所述透气开口的数目为四个，所述纱网为120目。所述透明罐体卧式设置，所述透气开口开设于透明罐体的上半部，所述防滚底座设置于透明罐体的底部。相邻两透气开口之间的间距大于或等于10cm。所述防滚底座包括两条平行放置且截面为半圆形的橡胶管，所述橡胶管固定在透明罐体的外表面。所述橡胶管经双面胶固定在透明罐体的外表面。所述黑色布袖筒为黑色薄款棉布围合而成，并经弹性胶圈与透明罐体的敞口处相连接。所述载物板为长方形塑料薄板，所述成虫蜜水供给皿是将脱脂棉片铺入一次性塑料培养皿中制成，所述盛蜂蛹皿为一次性塑料培养皿。

[0060] 本实施例中步骤（5）中的新鲜蜂蜜水配方为：50g蜂蜜加入450ml凉开水中，搅拌均匀；步骤（5）中的补充新鲜蜂蜜水步骤为：将配置好的新鲜蜂蜜水加入容量500ml的洗气瓶中，进行印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐中新鲜蜂蜜水的补充。

[0061] 印度实蝇小蜂寄生最佳饲养密度的确定：

[0062] A、取300粒印度实蝇姬小蜂蛹，置于印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐内载物板上的蛹盛放皿中；使用容量500ml的洗气瓶将浓度10wt%的蜂蜜水加入到蜂蜜水供给皿中。取4日龄的橘小实蝇幼虫，按照200头/皿的规格装入实蝇幼虫供给皿中，提供给印度实蝇姬小蜂寄生10小时，每个印度实蝇姬小蜂饲养罐中供6个装入橘小实蝇幼虫的供给皿；自印度实蝇姬小蜂开始羽化的次日开始提供橘小实蝇幼虫，每天相同时段提供一次幼虫，持续3天；每天作为1个批次，一共3批。取1/6份的实蝇幼虫饲料，铺于实蝇幼虫饲养盘中；将印度实蝇姬小蜂寄生后的橘小实蝇幼虫转移至实蝇幼虫饲料中，将实蝇幼虫饲养盘放入实蝇化蛹盒中，盒子中铺有2cm厚的湿润沙子供橘小实蝇幼虫化蛹，实蝇化蛹盒使用网罩罩住。5天后，清理掉废弃幼虫饲料，使用14目铁筛子筛出沙中的蛹，将蛹装入蛹饲养盒中继续饲养；3天后，计数被印度实蝇姬小蜂寄生成功的橘小实蝇蛹。随后每3天检查1次蛹的干燥情况，并使用容量1.5 L的市下牌喷水壶喷少量凉开水，避免蛹过度干燥，直至观察到橘小实蝇羽化。橘小实蝇开始羽化后的第3天，每处理分别随机选择50粒印度实蝇姬小蜂蛹，装入容量5ml的离心管中，直至印度实蝇姬小蜂完全羽化，计数每1粒蛹印度实蝇姬小蜂成虫的羽化情况。

[0063] B、分别取500、700粒蜂蛹，置于印度实蝇姬小蜂成虫饲养罐内其他操作同上。

[0064] 具体结果如下表1‑3所示。

[0065] 不同印度实蝇姬小蜂蛹投入量寄生参数统计情况：

[0066]

[0067] 在具体实施方式实验A中，每个养虫罐中可获得寄生蛹为3261‑3299粒，每蛹平均羽化成虫21.58‑30.00头，每蛹平均羽化雌蜂12.94‑15.54头，每罐可获得成虫70092.42‑97830.00头，每罐可获得雌蜂42495.96‑50675.94头。

[0068]

[0069] 在具体实施方式实验B中，每个养虫罐中可获得寄生蛹为3337‑3414粒，每蛹平均羽化成虫24.06‑27.96头，每蛹平均羽化雌蜂11.52‑12.98头，每罐可获得成虫80288.22‑95455.44头，每罐可获得雌蜂38442.24‑43508.96头。

[0070]

[0071] 在具体实施方式实验C中，每个养虫罐中可获得寄生蛹为3359‑3497粒，每蛹平均羽化成虫26.66‑27.04头，每蛹平均羽化雌蜂11.80‑12.84头，每罐可获得成虫90827.36‑93230.02头，每罐可获得雌蜂41264.60‑52225.36头。

[0072]

[0073] 在三种具体实施方式实验中，实验C方案可获得蛹总数最多，获得蛹与投入蛹比值最小；实验A方案获得蛹数最少，获得蛹与投入蛹比值最大；实验C方案可获得成虫总数最多，雌蜂与雄蜂比值低；实验A方案获可得成虫总数最少，可获得的雌蜂总数最多，雌蜂与雄蜂比值高。

[0074] 从结果中可知，实验A方案每蛹羽化雌蜂数量最多，获得蛹与投入蛹比值最高，能够获得更多的印度实蝇姬小蜂雌虫。所以最后可以得出结论，此发明方法能够达到人工快速繁殖印度实蝇姬小蜂的目的。

[0075] 最后，需要声明的是，以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。