一种2＇-O-(2-甲氧乙基)鸟苷的合成工艺

摘要

本发明公开了2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺，该合成工艺包括步骤(i)：将鸟苷与烷基化试剂，在反应溶剂中，在碱存在下，反应生成2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷。本发明的合成方法避免了碱基上O6烷基化，提高了产物收率，制备步骤短，合成效率高，操作简便，原料易得、对设备要求低，适合工业化生产。

权利要求

1.式II所示2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺，其特征在于，所述合成工艺包括步骤(i)：将式I所示鸟苷与烷基化试剂，在反应溶剂中，在碱存在下，反应生成II所示2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷，其反应方程式如下：，

所述烷基化试剂选自2‑氯乙基甲基醚、2‑溴乙基甲基醚、2‑碘乙基甲基醚、甲磺酸‑2‑甲氧基乙酯、对甲苯磺酸‑2‑甲氧基乙酯或对氯苯磺酸‑2‑甲氧基乙酯，所述碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、氢化钠、丁基锂、叔丁醇钠、叔丁醇钾和双（三甲基硅基）氨基钠中的一种或多种，当所述烷基化试剂选自2‑氯乙基甲基醚或2‑溴乙基甲基醚时，步骤(i)的反应体系还包括碘催化剂，所述碘催化剂选自碘化钾、碘化钠和四丁基碘化铵中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的合成工艺，其特征在于，步骤(i)具有一个或多个选自下列的特征：式I所示鸟苷与所述烷基化试剂的摩尔比为1：1 1：10，和/或~

式I所示鸟苷与所述碱的摩尔比为1：1 1：10，和/或~

所述反应溶剂与式I所示鸟苷的体积摩尔比为5 50L/mol。

~

3.根据权利要求1所述的合成工艺，其特征在于，所述反应溶剂选自二甲亚砜，N，N‑二甲基甲酰胺，N，N‑二甲基乙酰胺和N‑甲基吡咯烷酮中的一种或多种的组合。

4.根据权利要求1所述的合成工艺，其特征在于，步骤(i)的反应体系包括：所述烷基化试剂，其选自2‑溴乙基甲基醚，所述碱，其选自双（三甲基硅基）氨基钠，和碘催化剂，其选自四丁基碘化铵，或所述烷基化试剂，其选自2‑溴乙基甲基醚，所述碱，其选自氢氧化钾，和碘催化剂，其选自碘化钾，或所述烷基化试剂，其选自2‑氯乙基甲基醚，所述碱，其选自氢氧化钾，和碘催化剂，其选自碘化钾，或所述烷基化试剂，其选自2‑碘乙基甲基醚，和所述碱，其选自氢氧化钠，或所述烷基化试剂，其选自甲磺酸‑2‑甲氧基乙酯，和所述碱，其选自叔丁醇钠，或所述烷基化试剂，其选自对甲苯磺酸‑2‑甲氧基乙酯，和所述碱，其选自双（三甲基硅基）氨基钠。

5.根据权利要求1所述的合成工艺，其特征在于，步骤(i)还包括反应完成后，对反应液进行处理，处理反应液包括：将反应液降温至5 40℃，加入不良溶剂，搅拌0.5 2小时，过滤~ ~或离心得2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷粗品。

6.根据权利要求5所述的合成工艺，其特征在于，所述不良溶剂选自乙腈、丙腈、丁腈、二氯甲烷、四氢呋喃、甲基叔丁基醚、丙酮和乙酸乙酯中的一种或多种。

说明书

一种2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺

技术领域

[0001] 本发明属于化学合成领域，更具体地说，涉及2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺。

背景技术

[0002] 基因疗法是当今最前沿的技术之一，在治疗肿瘤、遗传性疾病、代谢疾病，预防性传染病等方面不断取得突破性进展。其中，小核酸药物是目前发展最为迅猛的基因疗法之一，正在成为新药研发第三次浪潮中的佼佼者。未来，随着小核酸药物的应用领域和技术领域不断突破创新，技术的更新将有助于小核酸药物的发展，市场需求和市场规模将持续扩大。

[0003] 反义寡核苷酸（ASOs）是一类新兴的小核酸药物，具有高选择性和亲和力特性。近年，随着基因组创药的发展，反义寡核苷酸药物被急速开发，随着第二代反义寡核苷酸药物的深入研究，人们发现在核苷酸中引入2’‑O‑烷基核苷，可增强与RNA的亲和力，增强寡核苷酸对核酸内切与外切酶的抗性，这其中又以2’‑O‑甲氧乙基的效果比较优越。因此，2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷在医药领域具有重要的市场前景。

[0004] 迄今为止，制备2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的方法主要有以下几种方法。

[0005] 1．US20080234475 A1中公开的2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的制备方法，其反应方程式如下：

[0006] 。

[0007] 该方法中第一步使用三(2‑甲氧基乙基)硼酸酯作为烷基化试剂，该反应对含水要求非常高，并且为高温反应。第二步使用雷尼镍脱硫，对生产设备要求比较高，对生产安全和环境保护方面来说存在很大的问题。另外，该方法中所用的原料供应商较少，且价格昂贵，不利于工业化生产。

[0008] 2. WO2003087053 A2中公开的2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的制备方法，其反应方程式如下：

[0009] 。

[0010] 该方法中第一步使用MDPSCl2作为保护基，同时保护3’与5’位的羟基，第二步利用2‑溴乙基甲基醚作为烷基化试剂，在NaHMDS、TBAI存在下反应，第三步利用四丁基氟化铵脱保护。该方法的缺点是：MDPSCl2保护基尚未工业化，价格昂贵，故无法商业化运用。并且纯化最终产物时四丁基氟化铵难以完全去除。

[0011] 3. “PROCESS RESEARCH ON THE PREPARATION OF DMT PROTECTED 2'‑O‑METHOXYETHYLGUANOSINE FOR OLIGONUCLEOTIDE SYNTHESIS IN THERAPEUTIC APPLICATIONS”, Shabbir Ali S. Taj, et al., Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids, 27(9):1024–1033, 2008公开了2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的制备方法，其反应方程式如下：

[0012] 。

[0013] 该方法中第一步中利用2‑氨基腺苷为起始原料在KOH存在下与2‑溴乙基甲基醚反应生成中间产物，第二步中，中间产物使用腺苷脱氨酶，在磷酸钠缓冲液中反应生成2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷。该方法的缺点是：第二步的条件比较苛刻，且原料价格比较昂贵，不利于工业化大规模生产。

[0014] 另外，上面提到的现有技术“PROCESS RESEARCH ON THE PREPARATION OF DMT PROTECTED 2'‑O‑METHOXYETHYLGUANOSINE FOR OLIGONUCLEOTIDE SYNTHESIS IN THERAPEUTIC APPLICATIONS”,  Shabbir Ali S. Taj, et al., Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids, 27(9):1024–1033, 2008中还提到直接烷基化鸟苷是6
不可取的，因为直接烷基化导致大部分产物为碱基部分烷基化（O 烷基化）产物，该是副产物，因此该文献舍弃了使用鸟苷作为起始原料通过直接烷基化其上的2'‑O，合成2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷。

[0015] 因此，本领域迫切需要一种适合工业化生产，对设备要求不高，原料易得，并且能够得到高纯度的2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的制备方法。

发明内容

[0016] 为了解决现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺，该合成工艺以鸟苷为原料经一步反应制备得到2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷，原料便宜易得、生产效率高，工艺简单、易于放大生产、对设备要求也不高。为实现本发明的目的，本发明采用以下技术方案：

[0017] 式II所示2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺，该合成工艺包括步骤(i)：将式I所示鸟苷与烷基化试剂，在反应溶剂中，在碱存在下，反应生成式II所示2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷，其反应方程式如下：

[0018] 。

[0019] 优选地，步骤(i)中式I所示鸟苷与所述烷基化试剂的摩尔比为1：1 1：10，更优选~1：1 1：2，最优选1 1：1.5。
~ ~

[0020] 优选地，步骤(i)中式I所示鸟苷与所述碱的摩尔比为1：1 1：10，更优选1：1 1：4，~ ~最优选1 1：3。
~

[0021] 优选地，步骤(i)中反应溶剂与式I所示鸟苷的体积摩尔比为5 50L/mol，更优选15~25L/mol。
~

[0022] 优选地，步骤(i)中反应温度为10 100℃。~

[0023] 优选地，上述烷基化试剂选自2‑氯乙基甲基醚、2‑溴乙基甲基醚、2‑碘乙基甲基醚、甲磺酸2‑甲氧基乙酯、对甲苯磺酸2‑甲氧基乙酯或对氯苯磺酸2‑甲氧基乙酯。

[0024] 优选地，当所述烷基化试剂选自2‑氯乙基甲基醚或2‑溴乙基甲基醚时，反应体系还包括碘催化剂。

[0025] 优选地，所述碘催化剂选自碘化钾、碘化钠和四丁基碘化铵中的一种或多种。

[0026] 优选地，上述碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、氢化钠、丁基锂、叔丁醇钠、叔丁醇钾和双（三甲基硅基）氨基钠中的一种或多种。

[0027] 优选地，上述反应溶剂选自二甲亚砜，N，N‑二甲基甲酰胺，N，N‑二甲基乙酰胺和N‑甲基吡咯烷酮中的一种或多种的组合，更优选二甲亚砜。

[0028] 优选地，步骤(i)还包括反应完成后，对反应液进行处理，处理反应液包括：将反应液降温至5 40℃，加入不良溶剂，搅拌0.5 2小时，过滤或离心得2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷粗~ ~品。

[0029] 优选地，上述不良溶剂选自乙腈、丙腈、丁腈、二氯甲烷、四氢呋喃、甲基叔丁基醚、丙酮和乙酸乙酯中的一种或多种，更优选乙腈。

[0030] 优选地，上述不良溶剂与式I所示鸟苷的体积摩尔比为30 300L/mol，更优选50~ ~150L/mol。

附图说明

[0031] 图1为实施例1得到的2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的HPLC图谱。

[0032] 图2为实施例1得到的2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的HNMR图谱。

[0033] 图3为实施例2得到的2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的HPLC图谱。

[0034] 图4为实施例3得到的2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的HPLC图谱。

[0035] 图5为实施例4得到的2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的HPLC图谱。

[0036] 图6为实施例5得到的2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的HPLC图谱。

[0037] 图7为实施例6得到的2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的HPLC图谱。

具体实施方式

[0038] 针对现有技术中，2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的制备方法存在的缺陷，本申请发明人经过深入的研究，发现以鸟苷为原料，直接进行2'‑O的烷基化可制得目标产物，该方法原料易得，工艺简单，适合工业大规模生产。在此基础上完成了本发明。

[0039] 本发明中，2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺包括步骤（i）：将鸟苷与烷基化试剂，在反应溶剂中，在碱存在下，反应生成2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷，其反应方程式如下：

[0040] 。

[0041] 本发明的合成方法中，烷基化试剂的用量可为本领域进行此类反应的常规用量，优选地，式I所示鸟苷与烷基化试剂的摩尔比为1：1 1：10，更优选为1：1 1：2。碱的用量可为~ ~本领域进行此类反应的常规用量，优选地，式I所示鸟苷与碱的摩尔比为1：1 1：10，更优选~
为1：1 1：3。反应溶剂的用量为在反应温度下能够使反应原料完全溶解，优选反应溶剂与式~
I所示鸟苷的体积摩尔比为5 50L/mol。
~

[0042] 本发明的合成工艺中，烷基化试剂包括但不局限于2‑氯乙基甲基醚、2‑溴乙基甲基醚、2‑碘乙基甲基醚、甲磺酸2‑甲氧基乙酯、对甲苯磺酸2‑甲氧基乙酯或对氯苯磺酸2‑甲氧基乙酯。碱包括但不局限于氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、氢化钠、丁基锂、叔丁醇钠、叔丁醇钾或双（三甲基硅基）氨基钠。反应溶剂包括但不局限于二甲亚砜，N，N‑二甲基甲酰胺，N，N‑二甲基乙酰胺或N‑甲基吡咯烷酮。

[0043] 在本发明的一个具体实施例中，步骤（i）的反应体系包括：鸟苷，烷基化试剂，其选自2‑溴乙基甲基醚，碱，其选自双（三甲基硅基）氨基钠，碘催化剂，其选自四丁基碘化铵，和溶剂，其选自DMF。在本发明的一个具体实施方式中，2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺包括步骤（i）：使鸟苷与2‑溴乙基甲基醚在反应溶剂中，在双（三甲基硅基）氨基钠和四丁基碘化铵存在下，10 40℃，更优选15 35℃，反应5‑7小时，生成2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷。~ ~

[0044] 在本发明的一个具体实施例中，步骤（i）的反应体系包括：鸟苷，烷基化试剂，其选自2‑溴乙基甲基醚，碱，其选自氢氧化钾，碘催化剂，其选自碘化钾，和溶剂，其选自DMSO。在本发明的一个具体实施方式中，2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺包括步骤（i）：使鸟苷与2‑溴乙基甲基醚在反应溶剂中，在氢氧化钾和碘化钾存在下，40 80℃，更优选50 70℃，~ ~反应2‑4小时，生成2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷。

[0045] 在本发明的一个具体实施例中，步骤（i）的反应体系包括：鸟苷，烷基化试，其剂选自2‑氯乙基甲基醚，碱，其选自氢氧化钾，碘催化剂，其选自碘化钾，和溶剂，其选自DMSO。在本发明的一个具体实施方式中，2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺包括步骤（i）：使鸟苷与2‑氯乙基甲基醚在反应溶剂中，在氢氧化钾和碘化钾存在下，50 80℃，更优选60 70℃，~ ~反应15‑24小时，生成2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷。

[0046] 在本发明的一个具体实施例中，步骤（i）的反应体系包括：鸟苷，烷基化试剂，其选自2‑碘乙基甲基醚，碱，其选自氢氧化钠，和溶剂，其选自DMSO。在本发明的一个具体实施方式中，2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺包括步骤（i）：使鸟苷与2‑碘乙基甲基醚在反应溶剂中，在氢氧化钾和碘化钠存在下，10 40℃，更优选15 25℃，反应15‑24小时，生成2'‑O‑~ ~(2‑甲氧乙基)鸟苷。

[0047] 在本发明的一个具体实施例中，步骤（i）的反应体系包括：鸟苷，烷基化试剂，其选自甲磺酸‑2‑甲氧基乙酯，碱，其选自叔丁醇钠，和溶剂，其选自DMSO。在本发明的一个具体实施方式中，2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺包括步骤（i）：使鸟苷与甲磺酸‑2‑甲氧基乙酯在反应溶剂中，在叔丁醇钠存在下，10 40℃，更优选15 25℃，反应15‑24小时，生成2'‑~ ~O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷。

[0048] 在本发明的一个具体实施例中，步骤（i）的反应体系包括：鸟苷，烷基化试剂，其选自甲苯磺酸‑2‑甲氧基乙酯，碱，其选自双（三甲基硅基）氨基钠，和溶剂，其选自DMF。在本发明的一个具体实施方式中，2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺包括步骤（i）：使鸟苷与甲苯磺酸‑2‑甲氧基乙酯在反应溶剂中，在双（三甲基硅基）氨基钠存在下，10 40℃，更优选15~25℃，反应15‑24小时，生成2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷。
~

[0049] 本发明的合成方法中，反应是否完成可以通过本领域常用的方法监测，例如，TLC、HPLC或NMR。以原料鸟苷消失时作为反应终点。

[0050] 本发明的合成方法中，反应温度取决于进行烷基化所用反应试剂的性质。反应温度为10 100℃。~

[0051] 本发明的合成方法中，步骤(i)还包括反应完成后，对反应液进行处理，处理反应液包括：将反应液降温5 40℃，更优选15 35℃，加入不良溶剂，搅拌0.5 2小时，过滤或离心~ ~ ~得2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷粗品。不良溶剂包括但不局限于乙腈、丙腈、丁腈、二氯甲烷、四氢呋喃、甲基叔丁基醚、丙酮或乙酸乙酯，更优选乙腈。不良溶剂的用量为能够使得产物充分地从反应溶剂中析出，优选不良溶剂与式I所示鸟苷的体积摩尔比为30 300L/mol，更优~
选为50 150L/mol。
~

[0052] 本发明中，2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷粗品可利用本领域常用的方法进行纯化，例如色谱柱纯化，优选利用反相柱进行纯化，洗脱条件为：流动相为乙腈和水，其中按体积计，乙腈5%，水95%保持30分钟，得到产品。

[0053] 本发明的合成工艺中，整个体系反应过程为非均相体系。

[0054] 本发明的描述中，“多种”指两种或两种以上。

[0055] 本发明中，所用试剂，例如鸟苷、烷基化试剂、碱、碘催化剂等，如未特殊说明，均市售可得。

[0056] 本发明的2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺，以鸟苷为原料一步反应合成2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷，整个工艺过程简便，效率高、易于放大生产、对设备要求不高、且原料便宜易得，避免了使用价格昂贵的保护基，酶以及重金属。

[0057] 本发明的2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的合成工艺的最终产物收率达到35%，与现有技术接近（Nucleosides, Nucleotides & Nucleic Acids (2003), 22(5‑8), 1327‑1330报道2'‑O‑(2‑甲氧乙基)报道鸟苷的收率为40%）。

[0058] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。具体实施例是在以本发明技术方案为前提下进行实施的，给出了详细的实施方式和操作过程。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件进行。除非另有说明，比例和百分数按重量计。

[0059] 下列实施例中进行HPLC检测所用仪器的厂家为Waters，型号为UPLC Hclass。进行HNMR检测所用仪器的厂家布鲁克，型号为Avancelll300。进行纯化的中压色谱厂家为橙达，型号为1802。

[0060] 实施例1

[0061] 2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的制备

[0062] 氮气保护，取鸟苷20.0 g于15 30℃溶解于200 mL的DMF中，加入四丁基碘化铵3.8 ~g和2‑溴乙基甲基醚17.0 g ，降温至0 10℃，滴加1.0M双（三甲基硅基）氨基钠106mL，滴毕，~
回温至15 30℃，保温（15 30℃）搅拌6小时，加入2000 mL乙酸乙酯，保温（15 30℃）搅拌1小~ ~ ~
时，过滤，滤饼于50℃真空干燥后得到2’‑O‑甲氧乙基鸟苷粗品14.3 g，反相柱纯化（流动相为乙腈和水，其中按体积计，乙腈5%，水95%，保持30分钟洗脱产品），得到2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷6.8 g，收率28.1%，HPLC纯度98.6%。产物的HPLC图谱如图1所示，其中0.8分钟为产
1
物峰。产物的HNMR图谱如图2所示，H 核磁共振波谱归属见表1。

[0063] 产物结构式如下式II所示：

[0064]

[0065] 实施例2

[0066]  2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的制备

[0067] 取鸟苷10.0 g于15 30℃溶解于200 mL的DMSO中，加入氢氧化钾10.0 g和碘化钾~6.0 g，升温至50 70℃，加入2‑溴乙基甲基醚15.0 g，保温（50 70℃）搅拌3小时，降温至15~ ~ ~
30℃，加入1000 mL二氯甲烷，保温（15 30℃）搅拌1小时，过滤，滤饼于50℃真空干燥后得到~
2’‑O‑甲氧乙基鸟苷粗品8.1 g，反相柱纯化（流动相为乙腈和水，其中按体积计，乙腈5%，水
95%，保持30分钟洗脱产品），得到2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷3.8 g，收率31.6%, HPLC纯度
98.3%。产物的HPLC图谱如图3所示，其中0.8分钟为产物峰。

[0068] 实施例3

[0069] 2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的制备

[0070] 取鸟苷100.0 g于15 30℃溶解于1000 mL的DMSO中，加入氢氧化钾79.0 g和碘化~钾58.0 g，升温至60 70℃，加入2‑氯乙基甲基醚67.1 g，保温（60 70℃）搅拌19小时，降温~ ~
至15 30℃，加入15000 mL乙腈，保温（15 30℃）搅拌1小时，过滤，滤饼于50℃真空干燥后得~ ~
到2’‑O‑甲氧乙基鸟苷粗品93.0 g，反相柱纯化（流动相为乙腈和水，其中按体积计，乙腈
5%，水95%，保持30分钟洗脱产品），得到2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷42.4 g，收率35.2%，HPLC纯度98.3%。产物的HPLC图谱如图4所示，其中0.8分钟为产物峰。

[0071] 实施例4

[0072]  2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的制备

[0073] 取鸟苷20.0 g于15 30℃溶解于200 mL的DMSO中，加入氢氧化钠11.3 g，控温15~ ~25℃，加入2‑碘乙基甲基醚26.4 g，保温（15 25℃）搅拌19小时，加入3000 mL四氢呋喃，保~
温（15 25℃）搅拌1小时，过滤，滤饼于50℃真空干燥后得到2’‑O‑甲氧乙基鸟苷粗品19.0 ~
g，反相柱纯化（流动相为乙腈和水，其中按体积计，乙腈5%，水95%，保持30分钟），得到2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷7.4 g，收率30.6%，HPLC纯度97.2%。产物的HPLC图谱如图5所示，其中0.8分钟为产物峰。

[0074] 实施例5

[0075]  2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的制备

[0076] 取鸟苷10.0 g于15 30℃溶解于200 mL的DMSO中，加入叔丁醇钠9.7 g，控温15 25~ ~℃，加入甲磺酸‑2‑甲氧基乙酯12.0 g，保温（15 25℃）搅拌19小时，加入1000 mL甲基叔丁~
基醚，保温（15 25℃）搅拌1小时，过滤，滤饼于50℃真空干燥后得到2’‑O‑甲氧乙基鸟苷粗~
品10.5 g，反相柱纯化（流动相为乙腈和水，其中按体积计，乙腈5%，水95%，保持30分钟），得到2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷3.6 g，收率30.1%，HPLC纯度97.6%。产物的HPLC图谱如图6所示，其中0.8分钟为产物峰。

[0077] 实施例6

[0078] 2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷的制备

[0079] 取鸟苷50.0 g于15 30℃溶解于1000 mL的DMF中，降温0 10℃，滴加1M双（三甲基~ ~硅基）氨基钠四氢呋喃溶液264mL，加入对甲苯磺酸2‑甲氧基乙酯81.7 g，回温至15 30℃，~
保温（15 30℃）搅拌19小时，加入8000 mL丙酮，保温（15 30℃）搅拌1小时，过滤，滤饼于50~ ~
℃真空干燥后得到2’‑O‑甲氧乙基鸟苷粗品51.0 g，反相柱纯化（流动相为乙腈和水，其中按体积计，乙腈5%，水95%，保持30分钟），得到2'‑O‑(2‑甲氧乙基)鸟苷19.6 g，收率32.6%，HPLC纯度98.2%。产物的HPLC图谱如图7所示，其中0.8分钟为产物峰。

[0080] 以上所述的，仅为本发明的较佳实施例，并非用以限定本发明的范围，本发明的上述实施例还可以做出各种变化。即凡是依据本发明申请的权利要求书及说明书内容所作的简单、等效变化与修饰，皆落入本发明专利的权利要求保护范围。本发明未详尽描述的均为常规技术内容。