一种治疗和预防乳腺癌疾病的组合物及其应用

摘要

本发明公开了一种治疗和预防乳腺癌疾病的组合物及其应用，所述组合物的活性成分来自于由香附、薤白、鹿角、贝母、莪术、蜈蚣、天冬、鳖甲、人参和桔梗，具体包括以下活性成分：α‑香附酮、薤白皂苷、鹿角胶、贝母素乙、β榄香烯、蜈蚣、天冬多糖、鳖甲胶原、人参皂苷和桔梗多酚。本发明在原有乳癖宁的基础上对组方的活性成分进行筛选，得到了包含α‑香附酮、薤白皂苷、鹿角胶、贝母素乙、β榄香烯、蜈蚣、天冬多糖、鳖甲胶原、人参皂苷和桔梗多酚的组合物，令人预料不到的是，该组合物可以显著降低血清雌激素，抑制肿瘤发生，对乳腺癌有较好的治疗效果。

权利要求

1.一种预防和治疗乳腺癌疾病的组合物，该组合物的活性成分来自于香附、薤白、鹿角、贝母、莪术、蜈蚣、天冬、鳖甲、人参和桔梗，其特征在于，所述组合物由以下重量份的活性成分组成：α‑香附酮40‑50份、薤白皂苷29‑33份、鹿角胶200‑300份、贝母素乙29‑35份、β榄香烯20‑30份、蜈蚣200‑300份、天冬多糖20‑30份、鳖甲胶原100‑200份、人参皂苷50‑75份和桔梗多酚12‑18份。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，由以下重量份的活性成分组成：α‑香附酮45‑48份、薤白皂苷30‑32份、鹿角胶225‑275份、贝母素乙31‑34份、β榄香烯22‑25份、蜈蚣

230‑280份、天冬多糖23‑28份、鳖甲胶原120‑170份、人参皂苷55‑70份和桔梗多酚14‑17份。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述人参皂苷为人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rg3中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述桔梗多酚的制备方法为：将桔梗粉碎，得到桔梗粉，向桔梗粉中加乙醇，超声处理，抽滤，浓缩干燥、粉碎过筛，得到所述桔梗多酚。

5.权利要求1‑4任一项所述的组合物在制备治疗和预防乳腺癌药物中的应用。

6.一种治疗和预防乳腺癌的药物，其特征在于，由权利要求1‑4任一项所述的组合物和医学上可接受的辅料组成。

7.根据权利要求6所述的药物，其特征在于，所述药物为片剂、胶囊剂、颗粒剂、膏剂、混悬剂、粉剂、注射剂、喷雾剂或丸剂。

说明书

一种治疗和预防乳腺癌疾病的组合物及其应用

技术领域

[0001] 本发明涉及中药技术领域，具体来说，涉及一种治疗和预防乳腺癌疾病的组合物及其应用。

背景技术

[0002] 乳腺癌是是女性最常见的恶性肿瘤之一，其发病率逐年增高，严重危害广大女性的健康。目前，乳腺癌治疗主要有手术、放化疗、内分泌治疗、靶向药物治疗和中医药辅助治疗等。对于乳腺癌高危人群，早期开展预防，可减少或避免癌症的发生。近50年的临床实践显示：中药治疗肿瘤在改善机体内环境，带瘤生存和防治肿瘤的转移复发等方面优势明显。同时，中药能减少因手术、放化疗等损伤性治疗给患者带来的不良反应，而且毒副反应小，价格低廉，其作为补充和替代医疗(ComplementaryandAlternative Medicine，简称CAM)的主体，优势与特色日益彰显。因此，从中草药中寻找具有抗乳腺癌的天然生理活性物质具有十分重要的意义。

[0003] CN1194735C公开了一种治疗乳腺增生的中药制剂(乳癖宁)，该制剂的配方由香附、鹿角（鹿角脱盘）、浙贝、莪术、鳖甲、人参、天冬、薤白、桔梗和蜈蚣组成，该制剂可以促进增生的乳腺组织恢复正常，提高胸腺细胞自发增殖反应，具有抗炎镇痛治疗乳腺增生的效果。

[0004] CN102302730A公开了一种治疗乳腺增生的中药组合物，该中药组合物由以下重量份的原料药制成：香附挥发油5‑30份、鹿角胶10‑50份、贝母生物碱5‑50份、莪术油8‑50份、鳖甲胶原10‑50份、人参皂苷Re 0.1‑0.5份、人参皂苷Rg1 0.1‑0.5份、天冬提取物10‑50份、薤白提取物10‑50份、桔梗皂苷5‑25份、蜈蚣40‑200份，该发明在乳癖宁的基础上进行改进，通过对原配方中化学活性成分的筛选，进一步提升了治疗乳腺增生的效果。

[0005] 近年来，国内外对中药的化学成分、药理作用与应用的广泛的研究，中药活性成分成为新药研发的重要途经，如何在传统方剂的基础上开发出一种预防和治疗乳腺癌疾病的组合物具有重要的意义。

发明内容

[0006] 为了解决上述技术问题，本发明提供了一种预防和治疗乳腺癌疾病的组合物及其应用。

[0007] 为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

[0008] 一种预防和治疗乳腺癌疾病的组合物，该组合物的活性成分来自于由香附、薤白、鹿角、贝母、莪术、蜈蚣、天冬、鳖甲、人参和桔梗，所述组合物包括以下活性成分：α‑香附酮、薤白皂苷、鹿角胶、贝母素乙、β榄香烯、蜈蚣、天冬多糖、鳖甲胶原、人参皂苷和桔梗多酚。

[0009] 优选地，所述α‑香附酮、β榄香烯、人参皂苷和桔梗多酚的质量比为40‑50：20‑30：50‑75：12‑18；进一步优选地，所述α‑香附酮、β榄香烯、人参皂苷和桔梗多酚的质量比为45‑
48：22‑25：55‑70：14‑17；最优选地，所述α‑香附酮、β榄香烯、人参皂苷和桔梗多酚的质量比为46：22：60：15。

[0010] 优选地，所述组合物，包括以下重量份的活性成分：α‑香附酮40‑50份、薤白皂苷29‑33份、鹿角胶200‑300份、贝母素乙29‑35份、β榄香烯20‑30份、蜈蚣200‑300份、天冬多糖
20‑30份、鳖甲胶原100‑200份、人参皂苷50‑75份和桔梗多酚12‑18份。

[0011] 进一步优选地，所述组合物，包括以下重量份的活性成分：α‑香附酮45‑48份、薤白皂苷30‑32份、鹿角胶225‑275份、贝母素乙31‑34份、β榄香烯22‑25份、蜈蚣230‑280份、天冬多糖23‑28份、鳖甲胶原120‑170份、人参皂苷55‑70份和桔梗多酚14‑17份。

[0012] 最优选地，所述组合物，包括以下重量份的活性成分：α‑香附酮46份、薤白皂苷31份、鹿角胶250份、贝母素乙33份、β榄香烯24份、蜈蚣250份、天冬多糖25份、鳖甲胶原150份、人参皂苷60份和桔梗多酚15份。

[0013] 优选地，所述人参皂苷为人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rg3中的至少一种，进一步优选为20（S）‑人参皂苷Rg3。

[0014] 优选地，所述桔梗多酚的制备方法为：将桔梗粉碎，得到桔梗粉，向桔梗粉中加乙醇，超声处理，抽滤，浓缩干燥、粉碎，得到所述桔梗多酚。

[0015] 进一步优选地，所述乙醇的体积分数为30‑50%。

[0016] 进一步优选地，所述桔梗粉和乙醇的质量体积比g/ml 为1：10‑15。

[0017] 本发明还提供了上述组合物在制备治疗和预防乳腺癌药物中的应用。

[0018] 本发明还提供了一种治疗和预防乳腺癌的药物，包含上述组合物和医学上可接受的辅料。

[0019] 优选地，所述药物可以为片剂、胶囊剂、颗粒剂、膏剂、混悬剂、粉剂、注射剂、喷雾剂、丸剂。

[0020] 本发明的有益效果为：

[0021] 本发明在原有乳癖宁的基础上对组方的活性成分进行筛选，得到了本发明包含α‑香附酮、薤白皂苷、鹿角胶、贝母素乙、β榄香烯、蜈蚣、天冬多糖、鳖甲胶原、人参皂苷和桔梗多酚的组合物，令人预料不到的是，该组合物可以显著降低血清雌激素，抑制肿瘤发生，对乳腺癌有较好的治疗效果。

具体实施方式

[0022] 以下实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。对所公开的实施例的下述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例中，而是可以应用于符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的更宽的范围。虽然在本发明的实施或测试中可以使用与本发明中所述相似或等价的任何方法和材料，本文在此处列举优选的方法和材料。

[0023] 除非另外定义，本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同意义。

[0024] 本发明实施例中的活性成分来自于由香附、薤白、鹿角、贝母、莪术、蜈蚣、天冬、鳖甲、人参和桔梗。其中，所述人参皂苷的具体种类对本发明的技术效果无显著影响，如无特殊说明，实施例和对比例中采用的人参皂苷为20（S）‑人参皂苷Rg3；所述桔梗多酚的制备方法为：将桔梗粉碎，过60目筛，得到桔梗粉，按料液比1：12g/ml向桔梗粉中加体积分数为40%乙醇，超声处理，抽滤，浓缩干燥、粉碎，得到所述桔梗多酚。

[0025] 实施例1

[0026] 一种预防和治疗乳腺癌疾病的组合物，包括以下重量份的活性成分：α‑香附酮40份、薤白皂苷29份、鹿角胶200份、贝母素乙29份、β榄香烯20份、蜈蚣200份、天冬多糖20份、鳖甲胶原100份、人参皂苷50份和桔梗多酚12份。

[0027] 实施例2

[0028] 一种预防和治疗乳腺癌疾病的组合物，包括以下重量份的活性成分：α‑香附酮45份、薤白皂苷30份、鹿角胶225份、贝母素乙31份、β榄香烯22份、蜈蚣230份、天冬多糖23份、鳖甲胶原120份、人参皂苷55份和桔梗多酚14份。

[0029] 实施例3

[0030] 一种预防和治疗乳腺癌疾病的组合物，包括以下重量份的活性成分：α‑香附酮46份、薤白皂苷31份、鹿角胶250份、贝母素乙33份、β榄香烯24份、蜈蚣250份、天冬多糖25份、鳖甲胶原150份、人参皂苷60份和桔梗多酚15份。

[0031] 实施例4

[0032] 一种预防和治疗乳腺癌疾病的组合物，包括以下重量份的活性成分：α‑香附酮48份、薤白皂苷32份、鹿角胶275份、贝母素乙34份、β榄香烯25份、蜈蚣280份、天冬多糖28份、鳖甲胶原170份、人参皂苷70份和桔梗多酚17份。

[0033] 实施例5

[0034] 一种预防和治疗乳腺癌疾病的组合物，包括以下重量份的活性成分：α‑香附酮50份、薤白皂苷33份、鹿角胶300份、贝母素乙35份、β榄香烯30份、蜈蚣300份、天冬多糖30份、鳖甲胶原200份、人参皂苷75份和桔梗多酚18份。

[0035] 对比例1

[0036] 一种预防和治疗乳腺癌疾病的组合物，包括以下重量份的活性成分：α‑香附酮60份、薤白皂苷33份、鹿角胶300份、贝母素乙35份、β榄香烯30份、蜈蚣300份、天冬多糖30份、鳖甲胶原200份、人参皂苷80份和桔梗多酚10份。

[0037] 对比例2

[0038] 一种预防和治疗乳腺癌疾病的组合物，包括以下重量份的活性成分：α‑香附酮35份、薤白皂苷33份、鹿角胶300份、贝母素乙35份、β榄香烯33份、蜈蚣300份、天冬多糖30份、鳖甲胶原200份、人参皂苷45份和桔梗多酚15份。

[0039] 对比例3

[0040] 一种预防和治疗乳腺癌疾病的组合物，包括以下重量份的活性成分：α‑香附酮50份、薤白皂苷33份、鹿角胶300份、贝母素乙35份、二去甲氧基莪术素25份、春藤皂苷元40份、蜈蚣300份、天冬多糖30份、鳖甲胶原200份、人参皂苷60和木犀草素18份。

[0041] 对比例4

[0042] CN102302730A实施例1公开的组合物：香附挥发油5份、鹿角胶10份、贝母生物碱5份、莪术油8份、鳖甲胶原10份、人参皂苷Re0.1份、人参皂苷Rg10.1份、天冬提取物10份、薤白提取物10份、桔梗皂苷5份、蜈蚣40份；

[0043] 组合物中各活性成分的制备方法同CN102302730A实施例1。

[0044] 上述实施例和对比例所述组合物的制备方法为：将上述配方量的活性成分破碎、混合，过60目筛即可。

[0045] 一、效果评价

[0046] 1. 药物

[0047] 阳性药：他莫昔芬（扬子江药业集团有限公司）；

[0048] 实验药：将上述实施例1‑5和对比例1‑4的组合物分别混合制备得到实验药，备用。

[0049] 2. 实验动物

[0050] 6周龄健康未育雌性SD大鼠，体重：180～220 g，级别：SPF级。

[0051] 3. 主要试剂与材料

[0052] 雌二醇试剂盒：北京优博奥生物技术有限公司；

[0053] 羧甲基纤维素钠：麦克林；

[0054] DMBA：阿拉丁；

[0055] 水合氯醛溶液：阿拉丁。

[0056] 4、实验方法

[0057] 4.1 动物分组

[0058] 120只SD雌性大鼠，自然采光，适应性喂养5天，观察各组大鼠一般情况并将其随机按体重均匀分为12组，分别为正常对照组、模型组、阳性药组、给药各组（实施例1‑5和对比例1‑4），每组10只，并用苦味酸着色剂分别标记各组中每只动物。

[0059] 4.2 给药方法与造模方法

[0060] 正常对照组与模型组每日早晨灌胃0.5%羧甲基纤维素钠（CMC‑Na）混悬液10 ml/kg；阳性药对照组，按照每日5 mg/kg的剂量配置成混悬液后，按10 ml/kg给药；给药组，按照每日4mg/kg的剂量配置成混悬液后，给予药物10 ml/kg。

[0061] 给药七天后，除正常组外，每只大鼠给予单次灌胃DMBA混悬液1 ml （20 mg DBMA/1ml芝麻油）。给药组和对照组动物继续接受实验性药物灌胃12周后实验结束，各组灌胃后每日均自由摄水饮食。

[0062] 4.3 检测指标

[0063] 4.3.1 肿瘤重量及肿瘤抑制率

[0064] 第12周后，处死各组大鼠，切下肿瘤组织，天平称定肿瘤的重量，比较各组间差异。并计算肿瘤抑制率，各组肿瘤抑制率=（模型组平均肿瘤重量‑给药组平均肿瘤重量/模型组肿瘤重量）*100%。

[0065] 4.3.2 脏器系数

[0066] 第12周后，处死各组大鼠，计算胸腺指数[（胸腺重量/大鼠体重）×100%]及脾脏指数[（脾脏重量/大鼠体重）×100%]，并比较各组大鼠胸腺指数与脾脏指数的差异。

[0067] 4.3.3 血清雌激素（E2）水平

[0068] 乳腺癌相关危险因素包含了许多内源性和外源性的影响因子，目前公认E2与乳腺癌的发生密切相关。在动物模型中，E2可诱发雌性动物自发乳腺癌，而抗雌激素能降低甚至预防乳腺癌变的发生。因而E2水平较高，增加E2暴露，进而增加了乳腺癌的发病几率。

[0069] 于实验第12周，腹腔注射30 mg/kg，2%水合氯醛对大鼠进行麻醉，由腹主动脉取血，取血后，室温静置10～20 min，3000 r/min离心15 min，取上清，置于‑20 ℃冰箱保存待测。采用固相夹心法酶联免疫吸附法，通过试剂盒检测大鼠血清中雌激素水平。

[0070] 5、数据处理

[0071] 数据统计应用 SPSS19.0 软件，以均数±标准差（x±SD）表示，符合正态分布的数据分析，多组间均数比较采用 One‑Way ANOVA 法；组与组之间的两两比较采用最小差异法（Least‑Significant Difference）；若不符合正态分布的，则采用单因子方差分析法分析（Kruskal‑Wallis）；组间阳性率比较采用卡方检验（Chi‑Square Test）。若P<0.05，则认为差异具有统计学意义。

[0072] 6、研究结果

[0073] 6.1肿瘤重量及肿瘤发生率

[0074] 表1数据显示，正常对照组大鼠未出现肿瘤，而模型组大鼠肿瘤发生明显，表明造模成功。与模型组比较，实施例1给药组 实施例5给药组大鼠瘤体质量显著降低（p<0.01），~肿瘤抑制率达58.3‑69.8%；对比例1 对比例3给药组大鼠瘤体质量也显著降低（p<0.01），肿~
瘤抑制率为36.6‑42.9%；对比例4给药组大鼠瘤体质量无显著性差异，肿瘤抑制率为19.2%；
同时，与对比例1 对比例3给药组比较，实施例1给药组 实施例5给药组大鼠瘤体质量均呈~ ~
显著差异，表明相比对比例1 对比例3给药组，本发明具备更佳的降低肿瘤重量，抑制肿瘤~
发生的效果。

[0075] 表1 大鼠肿瘤发生率与瘤体质量

[0076]  N 瘤体质量mg 肿瘤抑制率%
正常对照组 10 0 ‑
模型组 10 9.83±3.3 ‑
**
阳性药对照组 10 2.97±1.22 69.8
**#◊◎◎
实施例1给药组 10 4.19±1.27 57.4
**#◊◎
实施例2给药组 10 4.00±1.37 59.3
**#◊◎
实施例3给药组 10 3.78±1.87 61.5
**#◊◎◎
实施例4给药组 10 3.93±1.06 60.0
**#◊◎
实施例5给药组 10 4.10±1.18 58.3
**
对比例1给药组 10 5.89±2.16 40.1
**
对比例2给药组 10 5.61±1.82 42.9
对比例3给药组 10 8.92±2.18 16.6
对比例4给药组 10 8.76±2.09 19.2

[0077] *与模型组比较，p<0.05；**与模型组比较，p<0.01；#与对比例1组比较，p<0.05；◊与对比例2组比较，p<0.05；◎与对比例3组比较，p<0.05；◎◎与对比例3组比较，p<0.01。

[0078] 6.2脏器系数

[0079] 表2数据显示，模型组胸腺指数和脾脏指数与正常对照组比较有下降，经实施例1~5干预后，胸腺指数和脾脏指数与模型组比较均显著上升（p<0.05, p<0.01）；但对比例1 4~
干预后，胸腺指数和脾脏指数与模型组比较均上升，但无统计学意义。表2还显示，与对比例
1 4比较，实施例1 5干预后，胸腺指数和脾脏指数提高均呈现显著性差异（p<0.05）。
~ ~

[0080] 表2 大鼠脾脏指数和胸腺指数

[0081]  胸腺指数 脾脏指数
正常对照组 0.176±0.046 0.285±0.041
## #
模型组 0.120±0.029 0.237±0.047
* *
阳性药对照组 0.157±0.041 0.289±0.049
**○▽※ *○▽※
实施例1给药组 0.164±0.036 0.291±0.039
**○▽※ *○▽※
实施例2给药组 0.157±0.023 0.289±0.043
*○▽※ **○▽※
实施例3给药组 0.167±0.045 0.290±0.031
**○▽※ *○▽※
实施例4给药组 0.178±0.050 0.296±0.052
**○▽※ *○▽※
实施例5给药组 0.165±0.023 0.299±0.057
对比例1给药组 0.131±0.023 0.246±0.048
对比例2给药组 0.131±0.026 0.251±0.043
对比例3给药组 0.135±0.014 0.235±0.066
对比例4组给药组 0.138±0.032 0.248±0.041

[0082] ##与正常组比较，p<0.01；*与模型组比较，p<0.05；**与模型组比较，p<0.01；○与对▽ ※比例1组比较，p<0.05；与对比例2组比较，p<0.05；与对比例3组比较，p<0.05。

[0083] 6.3 血清雌激素（E2）水平

[0084] 研究结果表明，实施例1 5和对比例1 4可以调节大鼠雌激素水平。其中，与模型组~ ~比较，实施例1 5可以显著调节大鼠血清雌激素E2水平（p<0.05），对比例1 4虽能降低大鼠~ ~
雌激素水平，但与模型组比较，未见明显差异。

[0085] 表3大鼠血清雌激素E2水平

[0086]   雌激素pg/mL正常对照组 19.62±2.14
##
模型组 27.36±4.17
**
阳性药对照组 21.19±2.92
*
实施例1给药组 23.14±3.10
*
实施例2给药组 22.08±2.77
*
实施例3给药组 23.10±3.51
*
实施例4给药组 22.89±3.01
*
实施例5给药组 23.12±2.13
对比例1给药组 24.11±3.10
对比例2给药组 24.37±3.13
对比例3给药组 24.29±2.45
对比例4给药组 24.86±3.04

[0087] ##与正常组比较，p<0.01；*与模型组比较，p<0.05；**与模型组比较，p<0.01。

[0088] 对相比现有技术，本发明通过对原有乳癖宁组方中活性成分进行筛选，得到的含α‑香附酮、薤白皂苷、鹿角胶、贝母素乙、β榄香烯、蜈蚣、天冬多糖、鳖甲胶原、人参皂苷和桔梗多酚的组合物，其在每日4mg/kg的剂量给药下，表现出了显著降低大鼠雌激素水平，且可以显著抑制肿瘤重量，降低肿瘤发生。

[0089] 以上是结合具体实施例对本发明进一步的描述，但这些实施例仅仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。