苯丙素酯型儿茶素及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种苯丙素酯型儿茶素及其制备方法和应用，属于生物碱类化合物制备领域。采用紫鹃绿茶为原料，将其粉碎干燥后，得到绿茶粉末；采用石油醚、乙酸乙酯、甲醇分步浸提绿茶粉末，得到浸提液；浸提液进行萃取处理和减压浓缩处理，得到浸提物；对提取物进行分离纯化处理，即得苯丙素酯型儿茶素。本发明提取制得的苯丙素酯型儿茶素对秀丽隐杆线虫具有寿命延长的作用，可以用于制备抗衰药，对农业和医药领域具有重要的意义，为有效开发利用紫鹃绿茶提供了更为广阔的前景。本发明还公开了该苯丙素酯型儿茶素的检测方法，操作简单，准确率高，可用于寻找含有苯丙素酯型儿茶素的生物资源，增加了苯丙素酯型儿茶素的获取路径，提高其利用度。

权利要求

1.一种苯丙素酯型儿茶素，其中，该儿茶素由式I或式II所示的结构表示：

2.一种根据权利要求1所述苯丙素酯型儿茶素在制备延长秀丽隐杆线虫寿命药物中的用途。

3.一种延长秀丽隐杆线虫寿命药物，该药物包括：

如权利要求1所述的苯丙素酯型儿茶素以及药用辅料制成。

4.根据权利要求3所述的延长秀丽隐杆线虫寿命药物，其中：该药物类型选自：口服型、外用型和注射型。

5.一种制备如权利要求1所述的苯丙素酯型儿茶素的方法，包括：(1)原料粉碎：取紫鹃绿茶粉碎并干燥，得绿茶粉末备用；

(2)分级浸提：采用石油醚、乙酸乙酯、甲醇进行分级浸提，得到的浸膏待甲醇彻底挥发后，加水置换成水浸提液备用；

(3)萃取除杂：对水浸提液进行二氯甲烷萃取处理和减压浓缩处理，得水浸膏备用；

(4)分离纯化：将水浸膏依次经过MCI gel CHP20P柱层析，Sephadex LH‑20凝胶柱层析，硅胶柱层析，Toyopearl HW‑40F柱层析和高效液相色谱柱洗脱处理，即得一种苯丙素酯型儿茶素。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其中：

步骤(4)所述分离纯化处理包括：

①将水浸膏经过MCI gel CHP20P柱层析，使用甲醇与水作为流动相，按照甲醇：水体积比依次为0:100、10:90、30:70、50:50、70:30、80:20和100:0进行梯度洗脱，收集合并得到C1‑C7共7个组分，将50％至70％甲醇水洗脱得到C4‑C6合并，得到第一组分；

②第一组分通过Sephadex LH‑20柱进行梯度洗脱，使用甲醇与水作为流动相，按照甲醇比水的体积比依次为0:100、10:90、30:70、50:50、70:30、80:20和100:0进行梯度洗脱，收集得到D1‑D8共8个组分，将50％至70％甲醇水洗脱得到的D4‑D7合并，得到第二组分；

③第二组分通过硅胶柱进行梯度洗脱，使用CH2Cl2‑H2O作为流动相，按照CH2Cl2：H2O体积比依次为50:1，30:1，10:1，5:1，1:1进行梯度洗脱，收集并合并得到E1‑E6共6个组分，将E4‑E6组分合并，得到第三组分；

④第三组分再过Toyopearl HW‑40F及Sephadex LH‑20纯甲醇洗脱，并采用Waters e2695高效液相色谱系统和半制备色谱柱进行制备分离。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其中：

步骤④所述半制备色谱柱采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB‑C18 column柱，流速

2mL/min，流动相为色谱级乙腈和超纯水。

8.根据权利要求6所述的制备方法，其中：

所述苯丙素酯型儿茶素I和II的洗脱条件为：0‑30min，65％乙腈水等度洗脱；

苯丙素酯型儿茶素I的保留时间为8.7min，质量6.3mg；

苯丙素酯型儿茶素II的保留时间为11.5min，质量9.0mg。

9.一种检测权利要求1所述的苯丙素酯型儿茶素的方法，包括：采用UPLC‑Q‑TOF‑MS检测方法检测丙素酯型儿茶素，其中：流速：0.2mL/min；

流动相：A相0.1％甲酸水，B相含0.1％甲酸的乙腈；

洗脱条件：0‑5min，5‑15％乙腈水；5‑12min，15‑20％乙腈水；12‑17min，20‑25％乙腈水；17‑18min，25‑35％乙腈水；18‑20min，35‑45％乙腈水；20‑21min，45‑65％乙腈水；21‑

22min，65‑95％乙腈水；22‑24min，95％乙腈水；24‑26min，95‑5％乙腈水；26‑28min，5％乙腈水。

说明书

苯丙素酯型儿茶素及其制备方法和应用

技术领域

[0001] 本发明涉及生物碱类化合物领域，具体地涉及一种苯丙素酯型儿茶素的制备方法和采用该制备方法制得的苯丙素酯型儿茶素及其应用。

背景技术

[0002] 植物次生代谢是其在长期进化过程中与环境相互作用的结果。与其它的植物相比，茶树次生代谢产物具有其独特性，茶树的芽叶里含有极为丰富的儿茶素、茶氨酸和咖啡碱等特征性代谢产物，这些化合物不仅赋予茶叶独特的色、香、味品质，并且与人类健康紧密相关。对于茶叶化学成分的研究是以各类茶树资源为研究对象，以有机化学为基础，以化学和物理方法为手段，研究其次生代谢产物的提取、分离、结构、功能、生物合成和用途的一门科学，是提升茶叶品质、拓宽茶叶应用领域的基础。

[0003] 大量研究表明，儿茶素具有抗衰老，抗氧化，抗肿瘤，预防肥胖，预防神经退行性疾病等功效。然而，尽管有多种生物活性，但具有显著抗衰老活性的儿茶素类化合物一直未被发现。同时，常见的儿茶素的生物利用率也不高，这极大限制了茶叶抗衰老的研究。因此，探索茶叶中新型儿茶素结构及其活性，对茶叶抗衰老具有重要意义。苯丙素酯型儿茶素是一种儿茶素衍生物，通过在儿茶素A环6位或8位取代苯丙素基团生成，也被证明了具有多种生物活性，且优于其母核结构。这些儿茶素类衍生物的发现，揭示了茶叶健康功效的机制，为茶叶综合利用奠定了理论基础。且随着各种高效精准的波谱检测技术发展，加速了这些功能性化合物的发现与鉴定。

[0004] 本发明所用提取原料为绿茶，由紫鹃鲜叶加工制作而成。紫娟(Camellia sinensis var.assamica)，是中国云南的特色品种，因富含花青素以至于它的茎、芽和叶片都是紫色的。而晒青绿茶是取茶树一芽一叶或者一芽二、三叶的鲜叶加工而成，加工只有杀青与晒青两道工序，最大程度地保持了茶叶的“天然性、原始性”。如果能从茶叶中发现新型物质及开发出功能性活性成分，将有助加深我们对茶树体内物质转化形成机制的认识，并且对合理开发利用茶叶提供重要参考，也会对农业和医药等领域作出重要贡献。

[0005] 杀青作为绿茶加工的关键工艺，使绿茶保留了更多的儿茶素类化合物，杀青工艺提供了长时、高温的加工环境，这些都为进一步在加工过程中产生儿茶素衍生物创造了可能。而这些儿茶素及其衍生物作为茶叶中的活性成分，与紫鹃绿茶的各种潜在健康功效密不可分。因此，针对紫鹃绿茶活性成分的分离和鉴定的研究必不可少。从紫鹃绿茶中研究开发出具有生物活性的生物成分，不仅对夏秋季茶树资源的开发利用提供解决方案，还能为天然成分药物的开发应用等领域做出重要贡献。

发明内容

[0006] 基于上述分析，本发明所要解决的技术问题之一是：提供一种苯丙素酯型儿茶素，由式I或II所示结构表示：

[0007]

[0008] 式I和式II所示的苯丙素酯型儿茶素，分别命名为zijuanin E和zijuanin F。

[0009] 本发明所要解决的技术问题之二是：提供一种苯丙素酯型儿茶素在制备延长秀丽隐杆线虫寿命药物中的用途。

[0010] 进一步地，本发明还提供了一种延长秀丽隐杆线虫寿命药物，包括：苯丙素酯型儿茶素和其他药用辅料。

[0011] 进一步地，所述延长秀丽隐杆线虫寿命药物的药物剂型包括但不限于：口服型、外用型和注射型。

[0012] 进一步地，所述口服型包括但不限于：片剂、胶囊剂、颗粒剂；所述外用型包括但不限于：栓剂、捈剂、洗剂、膏剂、透皮贴剂；所述注射型包括但不限于：注射液、混旋液、冻干粉。具体制备方法参照制药领域的常规方法制备，所用药用辅料根据剂型不同选择制药领域通用的辅料。

[0013] 本发明所要解决的技术问题之三是：提供一种苯丙素酯型儿茶素的制备方法，包括以下步骤：

[0014] (1)原料粉碎：取紫鹃绿茶粉碎并干燥，得绿茶粉末备用；

[0015] (2)分级浸提：采用石油醚、乙酸乙酯、甲醇进行分级浸提，得到的浸膏待甲醇彻底挥发后，加水置换成水浸提液备用；

[0016] (3)萃取除杂：对水浸提液进行二氯甲烷萃取处理和减压浓缩处理，得水浸膏备用；

[0017] (4)分离纯化：将水浸膏依次经过MCI gel CHP20P柱层析，Sephadex LH‑20凝胶柱层析，硅胶柱层析，Toyopearl HW‑40F柱层析和高效液相色谱柱洗脱处理，即得一种苯丙素酯型儿茶素。

[0018] 进一步的，步骤(4)所述分离纯化处理包括：

[0019] ①将水浸膏经过MCI gel CHP20P柱层析，使用甲醇与水作为流动相，按照甲醇：水体积比依次为0:100、10:90、30:70、50:50、70:30、80:20和100:0进行梯度洗脱，收集合并得到C1‑C7共7个组分，将50％至70％甲醇水洗脱得到C4‑C6合并，得到第一组分；

[0020] ②第一组分通过Sephadex LH‑20柱进行梯度洗脱，使用甲醇与水作为流动相，按照甲醇比水的体积比依次为0:100、10:90、30:70、50:50、70:30、80:20和100:0进行梯度洗脱，收集得到D1‑D8共8个组分，将50％至70％甲醇水洗脱得到的D4‑D7合并，得到第二组分；

[0021] ③第二组分通过硅胶柱进行梯度洗脱，使用二氯甲烷与水作为流动相，按照二氯甲烷比水体积比依次为50:1，30:1，10:1，5:1，1:1进行梯度洗脱，收集并合并得到E1‑E6共6个组分，将E4‑E6组分合并，得到第三组分；

[0022] ④第三组分再过Toyopearl HW‑40F及Sephadex LH‑20纯甲醇洗脱，并采用Waters e2695高效液相色谱系统和半制备色谱柱进行制备分离。

[0023] 进一步的，步骤④所述半制备色谱柱采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB‑C18 column柱(5μm，9.4mm×250mm)，流速2mL/min，流动相为色谱级乙腈和超纯水。

[0024] 进一步的，所述苯丙素酯型儿茶素I和II的洗脱条件为：0‑30min，65％乙腈水等度洗脱；苯丙素酯型儿茶素I的保留时间为8.7min，质量6.3mg；苯丙素酯型儿茶素II的保留时间为11.5min，质量9.0mg。

[0025] 进一步地，本发明还公开了一种根据任一上述制备方法制得的苯丙素酯型儿茶素。

[0026] 进一步地，本发明还公开了一种上述制备方法制得的苯丙素酯型儿茶素在制备延长秀丽隐杆线虫寿命药物中的用途。

[0027] 本发明还公开了一种检测上苯丙素酯型儿茶素的方法，包括：

[0028] 采用UPLC‑Q‑TOF‑MS检测方法检测丙素酯型儿茶素，其中：

[0029] 流速：0.2mL/min；

[0030] 流动相：A相0.1％甲酸水，B相含0.1％甲酸的乙腈；

[0031] 洗脱条件：0‑5min，5‑15％乙腈水；5‑12min，15‑20％乙腈水；12‑17min，20‑25％乙腈水；17‑18min，25‑35％乙腈水；18‑20min，35‑45％乙腈水；20‑21min，45‑65％乙腈水；21‑22min，65‑95％乙腈水；22‑24min，95％乙腈水；24‑26min，95‑5％乙腈水；26‑28min，5％乙腈水。

[0032] 经检测发现，该苯丙素酯型儿茶素I去质子化离子分子量为749.1723，保留时间为11.824min；苯丙素酯型儿茶素II去质子化离子分子量为587.1195，保留时间为14.084min。

[0033] 本发明的有益效果体现在：

[0034] 1.本发明提供的具有生物活性的苯丙素酯型儿茶素对秀丽隐杆线虫寿命具有显著延长作用，可以用于制备减肥药，对农业和医药领域具有重要的意义，为有效开发利用紫鹃绿茶提供了更为广阔的前景。

[0035] 2.本发明苯丙素酯型儿茶素的制备方法工艺简单，容易实施，成本较低，具有非常好的应用前景。

[0036] 3.本发明苯丙素酯型儿茶素的检测方法工艺简单，容易实施，准确率高，可用于寻找含有本发明苯丙素酯型儿茶素的生物资源，增加了本发明苯丙素酯型儿茶素获取路径，提高其利用度。

附图说明

[0037] 图1苯丙素酯型儿茶素I和II化学结构图。

[0038] 图2苯丙素酯型儿茶素I和II质谱信息图。

[0039] 图3苯丙素酯型儿茶素I和II对秀丽隐杆线虫寿命及健康状况影响图，其中A‑B：苯丙素酯型儿茶素I和II可延长野生型秀丽隐杆线虫的寿命和健康寿命。C‑D：20℃正常培养条件下100μM苯丙素酯型儿茶素I和II和白藜芦醇(阳性药物)对N2寿命的影响。E‑F：苯丙素酯型儿茶素I和II对秀丽隐杆线虫身体运动和咽泵频率的影响。G：苯丙素酯型儿茶素I和II处理对后代数的影响。H：苯丙素酯型儿茶素I和II对线虫体长的影响。I：苯丙素酯型儿茶素I和II对线虫体内ROS水平的影响。J‑K：苯丙素酯型儿茶素I和II对N2虫脂褐素积累的影响。数据使用Prism 6.0进行分析。数值代表三个独立实验的平均值±标准差。*p<0.05,**p<
0.01,***p<0.001,****p<0.0001。(化合物1和2代表苯丙素酯型儿茶素I和II，Control代表不加药物的空白组)

具体实施方式

[0040] 本部分对本发明实验中所使用到的材料以及实验方法进行一般性的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料、设备和操作方法是本领域公知的。

[0041] 实施例1

[0042] 苯丙素酯型儿茶素的制备

[0043] 1.1苯丙素酯型儿茶素的说明

[0044] 苯丙素酯型儿茶素的结构如式I或II所示结构表示：

[0045]

[0046] 式I和式II所示的苯丙素酯型儿茶素，分别命名为zijuanin E和zijuanin F。

[0047] 1.2制备方法及结果

[0048] (1)取10kg紫鹃绿茶，对其粉碎处理，得到绿茶粉末；

[0049] (2)如图1所示，向绿茶粉末中加入15L石油醚，常温浸提24h，然后在70Hz下超声浸提2h，之后过滤得到滤液；按上述步骤浸提三次，通过减压蒸馏获得36g石油醚浸膏；

[0050] 待绿茶粉末上的石油醚完全挥发后，继续加入15L乙酸乙酯，常温浸提24h，然后在70Hz下超声浸提2h，之后过滤得到滤液；按上述步骤浸提两次，通过减压蒸馏获得100g乙酸乙酯浸膏；

[0051] 待绿茶粉末上的乙酸乙酯完全挥发后，继续加入15L甲醇，常温浸提24h，然后在70Hz下超声浸提2h，之后过滤得到滤液；按上述步骤浸提三次，通过减压蒸馏获得1200g甲醇浸膏；

[0052] 将甲醇浸膏置于通风橱内，使甲醇挥发，并逐渐加入水，置换为3L水浸提液；

[0053] 用3L二氯甲烷对上述浸提液进行常温萃取，震荡摇匀并静置后，下层即为二氯甲烷萃取液，按上述步骤萃取五次，保留上层经二氯甲烷萃取后的母液，通过减压蒸馏浓缩获得800g水浸膏；

[0054] (3)如图1所示，将紫鹃绿茶水部位浸膏经过MCI gel CHP20P柱层析，使用甲醇与水作为流动相，按照甲醇比水的体积比依次为0:100、10:90、30:70、50:50、70:30、80:20和100:0进行梯度洗脱，收集合并得到C1‑C7共7个组分。其中C4‑C6组分是由50％及70％甲醇水洗脱得到的，并通过Sephadex LH‑20柱进行梯度洗脱，Sephadex LH‑20柱采用与MCI gel CHP20柱相同的流动相及比例进行梯度洗脱，收集得到D1至D8共8个组分。然后将50％及
70％甲醇水洗脱得到的D4至D7合并，通过硅胶柱进行梯度洗脱，二氯甲烷与水作为流动相(体积50:1，30:1，10:1，5:1，1:1)随后收集并合并得到E1至E6共6个组分。将E4至E6组分合并，再过Toyopearl HW‑40F及Sephadex LH‑20纯甲醇洗脱，并采用Waters e2695高效液相色谱系统和半制备色谱柱进行制备分离。其中半制备色谱柱采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB‑C18 column(5μm，9.4mm×250mm)柱，流速2mL/min，流动相为色谱级乙腈和超纯水，苯丙素酯型儿茶素I和II的洗脱条件为：0‑30min，65％乙腈水等度洗脱。苯丙素酯型儿茶素I(保留时间为8.7min，质量6.3mg)；苯丙素酯型儿茶素II(保留时间为11.5min，质量9.0mg)。

[0055] 1.3苯丙素酯型儿茶素的性状验证

[0056] 苯丙素酯型儿茶素I的特性如下：

[0057] 1)可溶于甲醇和DMSO，白色无定型粉末；

[0058] 2) nm：207，286；

[0059] 3)IR(KBr)νmax(cm‑1)：3385,1697,1605,1514,1342,1203,1024,979,821,767；

[0060] 4)HR‑ESI‑MS(负离子模式)：m/z＝749.1722([M‑H]‑，C37H33O17‑理论计算值为749.1718)；

[0061] 5)核磁共振光谱数据见表1。

[0062] 苯丙素酯型儿茶素II的特性如下：

[0063] 1)可溶于甲醇和DMSO，白色无定型粉末；

[0064] 2) nm：196，276；

[0065] 3)IR(KBr)νmax(cm‑1)：3385,1756,1614,1514,1451,1286,1232,1106,996,825,766；

[0066] 4)HR‑ESI‑MS(负离子模式)：m/z＝587.1195([M‑H]‑，C31H23O12‑计算值为587.1190)；

[0067] 5)核磁共振光谱数据见表1

[0068] 表1核磁共振光谱数据表

[0069]

[0070]

[0071] a1H at 600MHz and 13C NMR at 150MHz in DMSO‑d6.s,single peak；d,double peaks；m,multipeaks.

[0072] 根据表1结果可以看出，两个新化合物均通过质谱及核磁共振谱归属，证明了所得化合物的结构。

[0073] 实施例2

[0074] 苯丙素酯型儿茶素对延长秀丽隐杆线虫寿命作用试验，具体结果详见图3。

[0075] NGM培养基配制：2.8g琼脂+0.5g氯化钠+0.42g胰蛋白胨+150mL纯水，120℃高压灭菌20min。

[0076] 线虫同步化：将产卵期野生型秀丽隐杆线虫转至含灭活大肠杆菌的NGM培养基中，12h后，转走成虫，留下卵，生长至L1期。

[0077] 寿命试验：待L4期将线虫转移至含化合物的NGM培养基中，进行给药培养，每隔一天转一次板。化合物溶于0.2％DMSO，包括苯丙素酯型儿茶素I和II，50，100，200，400，1000μM五个浓度，白藜芦醇为阳性对照。Control组(不加药物，加0.2％DMSO)和实验组(加药)，每组三个平行，每个平行50只虫。

[0078] 运动实验：将同步化后的线虫转移至药物的NGM平板上培养，选择给药后第二天和第七天两个时间点，分别观察线虫运动情况，计时30s，数线虫弯曲次数，每次测20条虫子，进行三次平行。

[0079] 咽泵实验：将同步化后的线虫转移至药物的NGM平板上培养，选择给药后第二天和第七天两个时间点，分别观察线虫咽泵情况，计时20s，数线虫弯曲次数，每次测20条虫子，进行三次平行。

[0080] 产卵实验：将同步化后的线虫转移至药物的NGM平板上培养，待至产卵期后每天转移成虫至新板中，每天观察线虫产卵数，产卵期结束后汇总得出总产卵个数。

[0081] 脂褐素实验：将同步化后的线虫转移至药物的NGM平板上培养，选择给药后第五天的虫子，挑出放于2％琼脂糖垫片上并用左旋咪唑(10mM)进行麻醉，将载玻片放置于荧光显微镜下拍照观察。

[0082] 活性氧测定实验：将同步化后的线虫转移至药物的NGM平板上培养，取一千只线虫进行生物破碎，加入2’,7’‑二氯二氢荧光素(50)，涡旋混匀，加入96孔板中，酶标仪(Filter Max)485nm/535nm。

[0083] 应激实验：将同步化后的线虫转移至不同浓度药物的NGM平板上培养，随后将其置于热应激(35℃)、紫外应激(254nm)，百草枯(50mM)中，记录线虫的死亡数目。每组3个平行，每个平行约20条线虫(差异数目不超过5条)。

[0084] 入核实验：将同步化后的线虫转移至药物的NGM平板上培养，选择给药后第五天的虫子，挑出放于2％琼脂糖垫片上并用左旋咪唑(10mM)进行麻醉，将载玻片放置于荧光显微镜下拍照观察。

[0085] 抗氧化实验：将50μL不同浓度的化合物溶液(50μL/孔)移入96孔板中，每孔加入200μL DPPH溶液并混合。在室温黑暗中孵育30min后，用酶标仪测定517nm处的吸光度(Abs)。过硫酸钾(K2S2O8,4.95mM)与ABTS(7.0mM)在室温黑暗条件下混合12h，生成ABTS自由基溶液。ABTS溶液用0.2M PBS(pH 7.4)稀释，得到在734nm处读数为0.7±0.02的溶液。然后将20μL复合物溶液与200μLABTS溶液混合，室温反应6min，测定734nm处的抗体。以抗坏血酸(VC)为阳性对照。

[0086] 数据分析：所有数据通过软件GraphPad Prism 6.0分析，最终数值用平均值±标准差(mean±SD)表示，并通过Tukey检验分析数据之间的显著性差异。

[0087] 表2不同化合物对秀丽隐杆线虫寿命实验

[0088]

[0089]

[0090] 注：所有数据表示为平均值±标准差(mean±SD)，通过Tukey检验分析数据之间的显著性差异，白藜芦醇为阳性对照。

[0091] 根据表2实验结果表明，苯丙素酯型儿茶素I和II对线虫寿命具有显著的延长效果。其中，在100μM的浓度下，化合物I的效果最好，达到67.2％，其次是化合物II，为56.0％。本发明的两个苯丙素酯型儿茶素在100μM浓度下，延长寿命效果均极显著高于常见儿茶素EGCG和阳性对照白藜芦醇。

[0092] 根据图3中的A和B可以看出：100μM苯丙素酯型儿茶素I和II相比经白藜芦醇干预后的野生型秀丽隐杆线虫的存活天数更长，显著长于空白对照组，且效果显著优于阳性药物白藜芦醇。根据图3中的C‑D可以看出：不同浓度苯丙素酯型儿茶素I和II对线虫寿命影响不同，其中100μM苯丙素酯型儿茶素I和II延长线虫寿命最好，50、200、400这三个浓度也有延长寿命效果。根据图3中E‑F可以看出：100μM苯丙素酯型儿茶素I和II可以改善秀丽隐杆线虫身体肌肉状况(与年龄相关)，其中苯丙素酯型儿茶素I干预第2天和第7天，秀丽隐杆线虫运动能力分别提高了18.4％和39.7％；秀丽隐杆线虫咽泵率分别提高了11.0％和20.1％。根据图3中G可以看出：对于线虫后代数方面，100μM苯丙素酯型儿茶素I和II与阳性对照组无显著差异，说明化合物不影响线虫的生育能力。根据图3中H可以看出：在线虫体长方面，苯丙素酯型儿茶素I和II与阳性对照组无显著差异，说明化合物不影响虫体的身形。
根据图3中I可以看出：苯丙素酯型儿茶素I和II分别使线虫体内ROS水平显著降低51.1％和
35.2％。根据图3中J‑K可以看出：与阳性对照组相比，100μM的苯丙素酯型儿茶素I和II处理后线虫的荧光强度分别降低了37.7％和27.1％，说明该两个化合物可以显著降低虫脂褐素在线虫体内的积累。

[0093] 世界人口老龄化不断加剧，中国作为世界第一人口大国，65岁以上的人口近3亿人，随着年龄的增长，相关疾病发生的概率也指数增加，解决老龄化问题迫在眉睫。因此开发抗衰老药物，对预防和改善人类健康具有重要意义。

[0094] 因此本发明名苯丙素酯型儿茶素可应用于抗衰老药物的制备。具体地说是将本发明苯丙素酯型儿茶素按医学上可接受的剂量和药学上所通用的辅料制成一抗衰老药物。该药物剂型包括口服型、外用型和注射型等。所述口服型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂等；所述外用型包括栓剂、捈剂、洗剂、膏剂、透皮贴剂等；所述注射型包括注射液、混旋液、冻干粉等。具体制备方法参照制药领域的常规方法制备。

[0095] 应当理解本文所述的例子和实施方式仅为了说明，并不用于限制本发明，本领域技术人员可根据它做出各种修改或变化，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。