一种具有保湿功能的丝胶蛋白肽及其制备方法和应用

摘要

本发明提供一种具有保湿功能的丝胶蛋白肽及其制备方法和应用。本发明第一方面提供一种具有保湿功能的丝胶蛋白肽，所述丝胶蛋白肽组成中至少包括肽段GGS、AS以及GS；基于所述丝胶蛋白肽的质量，所述肽段GGS的含量≥0.80%，所述肽段AS的含量≥0.20%，所述肽段GS的含量≥0.50%。本发明提供的丝胶蛋白肽中含有GGS、AS以及GS三个功能肽段，具有明显的保湿作用。

权利要求

1.一种具有保湿功能的丝胶蛋白肽，其特征在于，所述丝胶蛋白肽组成中至少包括肽段GGS、AS以及GS；

基于所述丝胶蛋白肽的质量，所述肽段GGS的含量≥0.80%，所述肽段AS的含量≥

0.20%，所述肽段GS的含量≥0.50%；

所述丝胶蛋白肽是以无蛹蚕茧为原料，依次经过丝胶蛋白溶出、发酵、酶解、吸附脱色、干燥处理后得到的；

其中，所述发酵使用产朊假丝酵母；

所述酶解包括使用碱性蛋白酶、中性蛋白酶进行酶解；

基于每克所述无蛹蚕茧，所述碱性蛋白酶的酶活力为3000‑6000U，所述中性蛋白酶的酶活力为500‑1500U；

所述酶解的温度为45‑55℃，时间为4‑6h。

2.根据权利要求1所述的丝胶蛋白肽，其特征在于，所述丝胶蛋白肽中蛋白质的含量≥

85%，游离氨基酸的含量≤5%，酸溶蛋白的含量≥80%，相对分子量1000以下成分的含量≥

85%。

3.一种权利要求1‑2任一项所述丝胶蛋白肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）将无蛹蚕茧中的丝胶蛋白溶出，得到丝胶蛋白溶液；

2）使用产朊假丝酵母对所述丝胶蛋白溶液进行发酵，发酵结束后，得到丝胶蛋白发酵液；

3）向所述丝胶蛋白发酵液中加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解，酶解结束后，得到丝胶蛋白酶解液；

4）向所述丝胶蛋白酶解液中加入活性炭进行吸附脱色处理，处理结束后收集滤液，并干燥所述滤液得到所述丝胶蛋白肽；

基于每克所述无蛹蚕茧，所述碱性蛋白酶的酶活力为3000‑6000U，所述中性蛋白酶的酶活力为500‑1500U；

所述酶解的温度为45‑55℃，时间为4‑6h。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤1）具体包括：按照质量比1：10‑30将无蛹蚕茧与纯水混合，并在110‑125℃下处理10‑90min，使所述无蛹蚕茧中的丝胶蛋白溶出，得到所述丝胶蛋白溶液。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，基于每克所述无蛹蚕茧，所述产朊假

5 7

丝酵母的菌落数为10‑10个。

6.根据权利要求3或5所述的制备方法，其特征在于，所述发酵的温度为28‑32℃，时间为36‑72h。

7.权利要求1‑2任一项所述的丝胶蛋白肽在保湿产品中的应用。

说明书

一种具有保湿功能的丝胶蛋白肽及其制备方法和应用

技术领域

[0001] 本发明涉及一种具有保湿功能的丝胶蛋白肽及其制备方法和应用，涉及蚕丝蛋白加工技术领域。

背景技术

[0002] 长期以来，蚕丝主要作为纺织原料被利用，蚕丝中蛋白质含量高达98%以上，自上世纪七十年代末开始，研究者开始逐渐重视蚕丝的新用途，目前，蚕丝在日用化工、医药及生物材料、保健功能食品等领域已经先后得到了不同程度的应用，对蚕丝蛋白的开发成为了近年来的研究热点。

[0003] 蚕丝蛋白主要包括丝素蛋白和丝胶蛋白，其中，丝素蛋白的质量占蚕丝蛋白总质量的70%‑80%，其不溶于水和乙醇，具有紧密有序的聚集态结构，必须用强极性溶剂破坏结构才能溶解；丝胶蛋白的质量占蚕丝蛋白总质量的20‑30%，是一种球状蛋白，相对分子质量为1.4‑31.4万，由18种氨基酸组成，其中丝氨酸含量最高，约占30%，易溶于水，并具有良好的吸湿性；随着对丝胶蛋白研究的深入，丝胶蛋白具有优良的细胞亲和性和生物相融性，并具有酪氨酸酶抑制活性、抗紫外线活性、保湿美容护发等功能。

[0004] 丝氨酸是人体皮肤中天然存在的保湿因子，具有良好的吸收水分子功能，在化妆品中常用作基础保湿剂存在，而富含丝氨酸的丝胶蛋白或蚕丝蛋白，既具有天然保湿的结构优势，又具有天然蛋白营养和护肤功能属性，在开发保湿功能化妆品原料方面具有潜力。

[0005] 目前针对蚕丝蛋白的深加工方法集中于高温高压脱除丝胶，并使用酸或碱水解获取丝素肽，又或者使用酸碱结合酶解法处理蚕丝蛋白制备蚕丝肽，这类方法获得的丝素肽或蚕丝肽中的游离氨基酸含量较高，具体高达13%以上，并且酸碱试剂处理过程中可能会产生有害物质或引起一定的污染。

发明内容

[0006] 本发明提供一种具有保湿功能的丝胶蛋白肽，该丝胶蛋白肽通过包含的特定质量含量的功能肽段，甘氨酸‑甘氨酸‑丝氨酸（Gly‑Gly‑Ser，GGS）、丙氨酸‑丝氨酸（Ala‑Ser，AS）以及甘氨酸‑丝氨酸（Gly‑Ser，GS），因而在保湿方面表现出良好的功效。

[0007] 本发明还提供一种具有保湿功能的丝胶蛋白肽的制备方法，通过该制备方法制备得到的丝胶蛋白肽中包含的特定质量含量的功能肽段，甘氨酸‑甘氨酸‑丝氨酸（Gly‑Gly‑Ser，GGS）、丙氨酸‑丝氨酸（Ala‑Ser，AS）以及甘氨酸‑丝氨酸（Gly‑Ser，GS），因而在保湿方面表现出良好的功效。

[0008] 本发明还提供上述丝胶蛋白肽在保湿产品中的应用。

[0009] 本发明第一方面提供一种具有保湿功能的丝胶蛋白肽，所述丝胶蛋白肽组成中至少包括肽段GGS、AS以及GS；

[0010] 基于所述丝胶蛋白肽的质量，所述肽段GGS的含量≥0.80%，所述肽段AS的含量≥0.20%，所述肽段GS的含量≥0.50%。

[0011] 此外，本发明提供的丝胶蛋白肽中，除具备上述特殊肽段外，所述丝胶蛋白肽中蛋白质的含量≥85%，游离氨基酸的含量≤5%，酸溶蛋白的含量≥80%，分子量1000以下成分的含量≥85%。

[0012] 在一种具体实施方式中，所述丝胶蛋白肽是以无蛹蚕茧为原料，依次经过丝胶蛋白溶出、发酵、酶解、吸附脱色、干燥处理后得到的；

[0013] 其中，所述发酵使用产朊假丝酵母；

[0014] 所述酶解包括使用碱性蛋白酶、中性蛋白酶进行酶解。

[0015] 本发明第二方面提供上述任一所述丝胶蛋白肽的制备方法，包括如下步骤：

[0016] 1）将无蛹蚕茧中的丝胶蛋白溶出，得到丝胶蛋白溶液；

[0017] 2）使用产朊假丝酵母对所述丝胶蛋白溶液进行发酵，发酵结束后，得到丝胶蛋白发酵液；

[0018] 3）向所述丝胶蛋白发酵液中加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解，酶解结束后，得到丝胶蛋白酶解液；

[0019] 4）向所述丝胶蛋白酶解液中加入活性炭进行吸附脱色处理，处理结束后收集滤液，并干燥所述滤液得到所述丝胶蛋白肽。

[0020] 在一种具体实施方式中，图1为本发明一实施例提供的丝胶蛋白肽制备方法的流程示意图，如图1所示，该方法具体包括如下步骤：

[0021] 步骤1）将无蛹蚕茧中的丝胶蛋白溶出，得到丝胶蛋白溶液；

[0022] 以市售无蛹蚕茧为原料，按照质量比为1：10‑30将无蛹蚕茧与纯水混合，并在110‑125℃下处理10‑90min，处理过程中，蚕茧中的丝胶蛋白溶出至纯水中，得到丝胶蛋白溶液。

[0023] 步骤2）使用产朊假丝酵母对所述丝胶蛋白溶液进行发酵，发酵结束后，得到丝胶蛋白发酵液；

[0024] 对步骤1）获得的丝胶蛋白溶液进行灭菌，灭菌可根据本领域常规技术手段进行，例如115‑121℃下灭菌15‑30min，在灭菌之前，可以对丝胶蛋白溶液进行浓缩，具体可使用旋蒸仪，去除部分水分。

[0025] 灭菌结束后，在丝胶蛋白溶液中加入产朊假丝酵母进行发酵，产朊假丝酵母的生长代谢过程能够产生丰富的短肽和酶类，有利于丰富下一步酶解工艺的酶系，同时也提供了非蚕茧本身可产生的外源性肽类，并且产朊假丝酵母在严格的好氧条件下不产乙醇，具有良好的安全性，具体地，产朊假丝酵母（Candidautilis）可购买自中国工业微生物菌种保藏管理中心（CICC），菌株保藏编号为CICC31170，基于每克所述无蛹蚕茧的质量，所述产朊5 7
假丝酵母的菌落数为10‑10个，控制发酵的温度为28‑32℃，摇床培养，发酵36‑72h，发酵结束后，过滤菌体，收集发酵液得到丝胶蛋白发酵液。

[0026] 步骤3）向所述丝胶蛋白发酵液中加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解，酶解结束后，得到丝胶蛋白酶解液；

[0027] 在丝胶蛋白发酵液中加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解，使丝胶蛋白中的肽键被切断，获得短肽，酶解过程中，基于每克所述无蛹蚕茧，所述碱性蛋白酶的酶活力为3000‑6000U，所述中性蛋白酶的酶活力为500‑1500U，控制酶解的温度为45‑55℃，时间为4‑
6h，酶解结束后得到丝胶蛋白酶解液。

[0028] 步骤4）向所述丝胶蛋白酶解液中加入活性炭进行吸附脱色处理，处理结束后收集滤液，并干燥所述滤液得到所述丝胶蛋白肽；

[0029] 酶解结束后，将丝胶蛋白酶解液的温度提高至85‑95℃，保温处理15‑25min进行灭酶，灭酶结束后，过滤去除大分子蛋白等不溶物，具体可使用孔径为10KD‑20KD的陶瓷膜，收集上清液，并在上清液中加入活性炭进行吸附脱色处理，以吸附上清液中的色素，吸附处理结束后，去除活性炭，收集滤液并干燥得到丝胶蛋白肽，干燥可在喷雾干燥塔内进行，控制进风温度为120‑140℃，出风温度为80‑100℃。

[0030] 本发明第三方面提供上述任一所述的丝胶蛋白肽在保湿产品中的应用。

[0031] 本发明提供的丝胶蛋白肽，明确含有GGS、AS以及GS的功能肽段，并且肽段GGS的含量≥0.80%，肽段AS的含量≥0.20%，肽段GS的含量≥0.50%，经实验证明，具有明显的保湿作用。

[0032] 本发明的实施，至少具有以下优势：

[0033] 1、本发明提供的丝胶蛋白肽，明确含有GGS、AS以及GS的功能肽段，并且肽段GGS的含量≥0.80%，肽段AS的含量≥0.20%，肽段GS的含量≥0.50%，具有明显的保湿作用。

[0034] 2、本发明提供的丝胶蛋白肽制备过程中，无需使用酸、碱进行处理，具有绿色环保的特点。

附图说明

[0035] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

[0036] 图1为本发明一实施例提供的丝胶蛋白肽的制备方法的流程示意图；

[0037] 图2为本发明实施例和对比例1‑4提供的丝胶蛋白肽的保湿率测试结果；

[0038] 图3a为GGS标准品的色谱检测结果；

[0039] 图3b为GGS的标准曲线；

[0040] 图4a为AS标准品的色谱检测结果；

[0041] 图4b为AS的标准曲线；

[0042] 图5a为GS标准品的色谱检测结果；

[0043] 图5b为GS的标准曲线；

[0044] 图6a为本发明实施例提供的丝胶蛋白肽中GGS的色谱检测结果；

[0045] 图6b为本发明实施例提供的丝胶蛋白肽中AS的色谱检测结果；

[0046] 图6c为本发明实施例提供的丝胶蛋白肽中GS的色谱检测结果；

[0047] 图7a为本发明对比例1提供的丝胶蛋白肽中GGS的色谱检测结果；

[0048] 图7b为本发明对比例1提供的丝胶蛋白肽中AS的色谱检测结果；

[0049] 图7c为本发明对比例1提供的丝胶蛋白肽中GS的色谱检测结果；

[0050] 图8a为本发明对比例2提供的丝胶蛋白肽中GGS的色谱检测结果；

[0051] 图8b为本发明对比例2提供的丝胶蛋白肽中AS的色谱检测结果；

[0052] 图8c为本发明对比例2提供的丝胶蛋白肽中GS的色谱检测结果；

[0053] 图9a为本发明对比例3提供的丝胶蛋白肽中GGS的色谱检测结果；

[0054] 图9b为本发明对比例3提供的丝胶蛋白肽中AS的色谱检测结果；

[0055] 图9c为本发明对比例3提供的丝胶蛋白肽中GS的色谱检测结果；

[0056] 图10a为本发明对比例4提供的丝胶蛋白肽中GGS的色谱检测结果；

[0057] 图10b为本发明对比例4提供的丝胶蛋白肽中AS的色谱检测结果；

[0058] 图10c为本发明对比例4提供的丝胶蛋白肽中GS的色谱检测结果；

[0059] 图11为本发明实施例提供的丝胶蛋白肽及特征肽段的保湿率测试结果。

具体实施方式

[0060] 为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明的实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

[0061] 以下实施例和对比例所使用的无蛹蚕茧通过采购得到；产朊假丝酵母（Candidautilis）购买自中国工业微生物菌种保藏管理中心（CICC），菌株保藏编号为CICC31170；碱性蛋白酶购自sigma‑Aldrich公司，中性蛋白酶购自广西南宁庞博生物工程有限公司，活性炭购自广东华一活性炭股份有限公司，氢氧化钠购自西陇化工。
实施例

[0062] 本实施例提供的丝胶蛋白肽的制备方法包括如下步骤：

[0063] 步骤1、称量无蛹蚕茧100g，放入破碎机破碎并使用纯水进行清洗，去除表面浮尘和杂质，去除清洗用水后，以质量比为1：20与纯水混合，在121℃下保压处理30min，处理结束后，去除不溶物收集上清液。

[0064] 采用旋蒸仪对上清液进行浓缩，控制温度为80℃，真空度为‑0.1MPa，待溶液中的水蒸发掉一半后，取出剩余溶液，将剩余溶液在121℃下灭菌15min，得到丝胶蛋白溶液；

[0065] 步骤2、将丝胶蛋白溶液的温度控制在28‑32℃，加入活化后菌数为108的产朊假丝6
酵母（相当于10 /g无蛹蚕茧），并摇床200rpm持续发酵48h，发酵结束后得到丝胶蛋白发酵液；

[0066] 步骤3、使用NaOH溶液将丝胶蛋白发酵液的pH调节至9.0，随后同时加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶，并且基于每克的无蛹蚕茧，所加入的碱性蛋白酶的酶活力为5000U，所加入的中性蛋白酶的酶活力为1000U，在50℃下酶解6h，酶解结束后，得到丝胶蛋白酶解液；

[0067] 步骤4、将丝胶蛋白酶解液的温度升高至95℃，保温15min以灭活蛋白酶，采用孔径为10KD的陶瓷膜对丝胶蛋白酶解液进行过滤，收集上清液进行浓缩，具体可采用旋转蒸发仪，温度设置为80℃，真空度设置为‑0.1MPa，旋转蒸发滤液中的水920mL。

[0068] 将剩余料液取出并升温至70℃，加入4g活性炭，在70℃下搅拌1h，进行吸附脱色处理，处理结束后去除活性炭，收集上清液；

[0069] 将上清液送入喷雾干燥塔（BH‑100压力喷雾干燥塔，江苏博鸿）进行喷雾干燥，控制进风温度为140℃，出风温度为90℃，得到丝胶蛋白肽。

[0070] 对比例1

[0071] 本对比例提供的方法可参考实施例，区别在于，步骤3中，酶解时间为4h，具体地，使用NaOH溶液将丝胶蛋白发酵液的pH调节至9.0，同时加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶，在50℃下酶解4h，酶解结束后得到丝胶蛋白酶解液。

[0072] 对比例2

[0073] 本对比例提供的方法可参考实施例，区别在于，步骤3中，仅使用碱性蛋白酶进行酶解，具体地，使用NaOH溶液将丝胶蛋白发酵液的pH调节至9.0，加入碱性蛋白酶，在50℃下酶解6h，酶解结束后得到丝胶蛋白酶解液。

[0074] 对比例3

[0075] 本对比例提供的方法可参考实施例，区别在于，步骤3中，仅使用碱性蛋白酶进行酶解，具体地，使用NaOH溶液将丝胶蛋白发酵液的pH调节至9.0，加入碱性蛋白酶，在50℃下酶解4h，酶解结束后得到丝胶蛋白酶解液。

[0076] 对比例4

[0077] 本对比例提供的方法可参考实施例，区别在于，步骤3中，仅使用中性蛋白酶进行酶解，具体地，使用NaOH溶液将丝胶蛋白发酵液的pH调节至9.0，加入中性蛋白酶，在50℃下酶解4h，酶解结束后得到丝胶蛋白酶解液。

[0078] （一）对实施例和对比例1‑4提供的丝胶蛋白肽的理化指标进行检测，检测方法如下，检测结果见表1：

[0079] 1、水分和灰分检测：采用国标法GB5009.3‑2010测定水分含量；采用国标法GB5009.4‑2016测定灰分含量。

[0080] 2、蛋白质、肽含量、游离氨基酸检测：采用国标法GB5009.5‑2010测定蛋白质（干基）含量；参照国标法GB22729‑2008测定酸溶蛋白的含量以及游离氨基酸含量及肽含量。

[0081] 3、不同分子量成分的分布检测：将乙氨酸‑乙氨酸‑乙氨酸（分子量189）、乙氨酸‑乙氨酸‑酪氨酸‑精氨酸（分子量451）、杆菌酶（分子量1450）、抑肽酶（分子量6500）、细胞色素C（分子量12500）5种肽标准品分别配制成0.1%（M/V）的溶液，用孔径0.2μm聚四氟乙烯过滤膜过滤后进样至高效液相色谱仪（LC‑20AD型高效液相色谱仪，日本岛津公司）进行分析，流动相：V（乙腈）：V（水）：V（三氟乙酸）=45：55：0.1；进样体积：10μL；流速：0.5mL/min；检测波长：220nm；柱温：30℃，利用紫外检测器检测；使用GPC软件处理数据。将样品的色谱数据代入校正曲线方程中进行计算，即可得到样品的肽分子量及其分布范围。用峰面积归一化法可计算得不同分子量范围成分的相对百分比。

[0082] 表1实施例以及对比例1‑4提供的丝胶蛋白肽的理化指标和得率

[0083]

[0084] 根据表1可知，实施例提供的丝胶蛋白肽中肽含量较高，相对分子量1000以下的成分占比较低，并且，相比现有的丝素肽或蚕丝肽产品，游离氨基酸含量较低，有利于人体吸收。

[0085] （二）对实施例和对比例1‑4提供的丝胶蛋白肽的保湿性能进行检测，检测方法如下：

[0086] 将硫酸铵(NH4)2SO（4 分析纯，上海试剂一厂）溶解在水中制备得到饱和硫酸铵(NH4)2SO4水溶液，将其置于空干燥器内模拟相对湿度（R.H.）81%的环境。将待测样品配制成质量浓度为2%的水溶液，以纯水、2%丝氨酸、2%甘油、5%甘油、0.5%HA为对照组，分别称重记为W0，吸取200μL加入到贴有3M胶带的表面皿中，分别经过4h和8h后称量质量，称重记为Wn，根据公式保湿率（%）=(Wn‑W0)÷W0*100%，计算得到保湿率；实验结果以平均值±标准差表示，并采用Tukey'sMethod进行数据分析，p<0.05表示具有显著性差异，采用显著性字母标记法，具有相同字母的即不具备显著性差异，不具有相同字母的即具有显著性差异，测试结果见图2。

[0087] 如图2所示，在相对湿度（R.H.）81%环境下，放置4h和放置8h，以纯水作为阴性对照，实施例提供的丝胶蛋白肽的保湿率与纯水、对比例1‑4均具有显著性差异，并且实施例的丝胶蛋白肽的保湿率比同浓度的甘油更高，但与同等浓度的丝氨酸、2%和5%甘油、0.5%的HA差异不显著，这说明，实施例提供的蚕丝胶蛋白肽具有与2%的丝氨酸溶液、2%甘油、5%甘油及5%HA同等的保湿效果。

[0088] （三）对实施例和对比例1‑4提供的丝胶蛋白肽的特征结构进行鉴定，鉴定方法如下：

[0089] 分别准确称取GGS、AS及GS标准品粉末20.0mg（均购自苏州强耀生物科技有限公司，纯度均≥98%），加水溶解，涡旋混匀，定容至100mL，配置得到200µg/mL的标准储备液。分别取500µL上述标准储备液，定容至10mL，即得混合标准中间工作液10µg/mL。将上述混合标准中间工作液用纯水逐级稀释至1.95、3.91、7.81、15.63、31.25、62.5、125、250和500ng/mL的系列标准工作溶液。

[0090] 用纯水将肽样品样品配置成20.0mg/mL，以纯水稀释103倍，待测。

[0091] 使用超高效液相色谱仪NexeraX2与三重四极杆质谱仪联用系统（岛津，日本）进行测试，该系统具体包括：LC‑30AD×2输液泵，SIL‑30AC自动进样器，CTO‑20AC柱温箱，CBM‑20A系统控制器，LCMS‑8060三重四极杆质谱仪，LabSolutionsVer.5.91色谱工作站。
XS205DU分析天平（MettlerToledo，美国）；QL‑901涡旋混合仪（其林贝尔仪器制造有限公司，中国）。

[0092] 液相色谱条件：色谱柱：InertsilODS‑3(5μm,2.1*250mm)；流动相：A为0.1%甲酸水溶液，B为0.1%甲酸乙腈溶液；梯度洗脱程序：0‑15minB0‑50%；15‑20minB50‑100%；20‑25minB100%；25.1‑35minB0%；流速：0.2mL/min；进样体积：5μL；柱温：40°C。

[0093] 质谱条件：离子化模式：ESI,正离子模式；离子喷雾电压：+4.5kV；雾化气流速：氮气3.0L/min；加热气流速：氮气10L/min；干燥气流速：氮气10L/min；DL温度：250°C；加热模块温度：400°C；离子源温度：300°C；扫描模式：多反应监测(MRM)；驻留时间：100ms；延迟时间：3ms；MRM参数：见表2。

[0094] 表2标准品的MRM优化参数

[0095]

[0096] *表示定量离子

[0097] 图3a‑图5b分别为GGS、AS和GS标准品的色谱检测结果和标准曲线，图6a‑图10c分别为实施例和对比例1‑4提供的丝胶蛋白肽中各特征肽段的色谱检测结果，根据图3a‑10c可知，实施例和对比例1‑3中均含有三种特征肽段，而对比例4中仅含有微量的特征肽段GGS和GS，根据标准曲线计算各组蚕丝胶蛋白肽中特征结构的含量，计算结果见表3。

[0098] 表3实施例和对比例1‑4中三种特征肽段的含量

[0099]

[0100] 根据表3可知，相比对比例1‑4，实施例提供的丝胶蛋白肽中同时具备三种特征肽段GGS、AS和GS，并且含量明显优于对比例1‑4，说明根据实施例提供的制备方法，能够有效对蚕丝蛋白进行酶解，并有效得到三种特征肽段GGS、AS和GS。

[0101] （四）对实施例和对比例1‑4提供的丝胶蛋白肽的特征结构的功能进行评价，评价方法如下：

[0102] 将GGS、AS、GS三种特征肽段标准品和实施例提供的丝胶蛋白肽配制成0.4%水溶液，以第（二）部分提供保湿功能评价方法进行保湿率测试，测试结果如图11所示。

[0103] 如图11所示，以纯水作为阴性对照，实施例提供的丝胶蛋白肽具有一定的保湿功能，并且，丝胶蛋白肽与肽段GGS、AS、GS放置4h和8h后的保湿率变化趋势一致，说明本实施例提供的制备方法，很好的保留了蚕丝蛋白中的三种肽段GGS、AS、GS，使其具有相应的保湿功能。

[0104] 最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。