PIVAS工作区域细胞毒药物残留清洁方法转让专利
申请号 : CN202210773675.4
文献号 : CN115156168B
文献日 : 2023-08-11
发明人 : 袁中珍 , 李丽仙 , 陈万一 , 刘玲 , 张敏 , 李巧巧 , 唐甜甜 , 刘宇
申请人 : 重庆大学附属肿瘤医院
摘要 :
本发明公开了一种PIVAS工作区域细胞毒药物残留清洁方法，其包括以下步骤：1)用10‑2M十二烷基硫酸钠作为清洁溶剂，按照从上到下、从外到里的路径，取一块干纱布用清洁溶剂润湿后横向擦拭工作环境物表，然后另取一块干纱布竖向擦拭工作环境物表，以上步骤重复2次；2)待工作环境物表面自然干后，按照从上到下、从里到外的方向用75％乙醇对环境物表面进行消毒。本发明PIVAS工作区域细胞毒药物残留清洁方法，其采用10‑2M十二烷基硫酸钠联合干纱布清洁，再联合75％乙醇消毒，可有效减少PIVAS工作区域细胞毒药物残留，降低工作人员职业暴露风险。
权利要求 :
1.PIVAS工作区域细胞毒药物残留清洁方法，其特征在于：包括以下步骤：‑2
1)用10 M十二烷基硫酸钠作为清洁溶剂，按照从上到下、从外到里的路径，取一块干纱布用清洁溶剂润湿后横向移动擦拭工作环境物表一次，然后另取一块干纱布竖向移动擦拭工作环境物表一次，以上步骤重复2次；在从上到下、从外到里清洁过程中，纱布在工作环境物上从靠近人体的一侧向远离人体的一侧移动；
2)按照从上到下、从里到外的方向用75％乙醇对环境物表面进行消毒。
说明书 :
PIVAS工作区域细胞毒药物残留清洁方法
技术领域
[0001] 本发明涉及细胞毒药物残留清洁技术领域，特别涉及一种PIVAS工作区域细胞毒药物残留的清洁方法。
背景技术
[0002] 细胞毒药物作为抗肿瘤治疗的重要手段之一，临床应用广泛。国际癌症研究机构将十余种细胞毒药物归类为1类致癌物与2A类疑似致癌物。在细胞毒药物准备过程中，医护人员长期在低剂量细胞毒药物的暴露下存在潜在基因突变、生殖影响和致癌等危害。有研究报道，细胞毒药物职业暴露生殖毒性可能导致流产、暂时性或永久性不孕、早产、先天畸形和接触者子女的学习障碍；长期职业暴露会增加脱发、感染、器官毒性、骨髓毒性、粘膜溃疡、疲劳、出血和头痛的风险；此外，职业暴露的个体DNA损伤、染色体异常和癌症的发生率更高。
[0003] 不同于传统在各个病区配置细胞毒药物，国家卫生健康委发布静脉用药调配中心建设与管理指南指出细胞毒药物必须在静脉药物调配中心(Pharmacy Intravenous Admixture Services，PIVAS)实行集中配置和供应，PIVAS工作人员每天参与排药、混合调配、成品复核等不可避免的暴露于各类细胞毒药物环境中，面临着很大的职业暴露风险。PIVAS工作环境物表上残留的细胞毒药物主要是一些低分子量药物，皮肤接触和经皮吸收是其职业暴露的主要途径。研究表明，即使采取了先进防护技术，但在细胞毒药物的储存、配置、使用等环节仍然存在一定细胞毒药物残留的情况，甚至在清洁后的表面仍有细胞毒药物残留。根据《静脉用药调配中心质量管理规范》规定进行清洁：先用清水再用75％酒精，从上到下，从里到外进行擦拭，清水作为清洁溶剂，75％乙醇作为消毒剂。由于细胞毒药物种类较多，有些细胞毒药物不易溶于水，这导致清洁之后还有可测量水平的细胞毒药物残留。
发明内容
[0004] 有鉴于此，本发明的目的是提供一种PIVAS工作区域细胞毒药物残留清洁方法，以解决PIVAS工作环境表面细胞毒药物残留问题，降低工作人员职业暴露风险。
[0005] 本发明PIVAS工作区域细胞毒药物残留清洁方法包括以下步骤：
[0006] 1)用10‑2M十二烷基硫酸钠作为清洁溶剂，按照从上到下、从外到里的路径，取一块干纱布用清洁溶剂润湿后横向移动擦拭工作环境物表一次，然后另取一块干纱布竖向移动擦拭工作环境物表一次，以上步骤重复2次；
[0007] 2)按照从上到下、从里到外的方向用75％乙醇对环境物表面进行消毒。
[0008] 进一步，在从上到下、从外到里清洁过程中，纱布在工作环境物上从靠近人体的一侧向远离人体的一侧移动。
[0009] 本发明的有益效果：
[0010] 本发明PIVAS工作区域细胞毒药物残留清洁方法，其采用10‑2M十二烷基硫酸钠联合干纱布清洁，与现有《静脉用药调配中心质量管理规范》规定用清水清洁显著不同。且擦拭方向与《静脉用药调配中心质量管理规范》规定的清洁方式存在明显不同，本发明针对有内腔的工作环境物采用从外到里的擦拭路径，与现有规定的从里到外的擦拭路径截然相反。
[0011] 并且通过实验证实了本发明采用10‑2M十二烷基硫酸钠联合干纱布清洁、再结合特殊的擦拭路径和擦拭次数，能有效减少PIVAS工作区域细胞毒药物残留，能降低工作人员职业暴露风险。
附图说明
[0012] 图1为擦拭清洁方向示意图。
[0013] 图2为不同提取溶剂的提取回收率结果图。
[0014] 图3为不同擦拭溶剂对3种材质上5种药物残留的擦拭回收率的结果图。
[0015] 图4为不同清洁溶剂对3种材质表面细胞毒药物残留清洁效率图。
[0016] 图5为清洁2次和清洁1次的效果对比图。
[0017] 图6为按照两种清洁路径清洁后表面细胞毒药物残留对比图。
[0018] 图7为新清洁方案和传统清洁方案在PIVAS不同工作区域细胞毒药物总体残留情况对比图。
具体实施方式
[0019] 下面结合附图和实施例对本发明作进一步描述。
[0020] 本实施例PIVAS工作区域细胞毒药物残留清洁方法包括以下步骤：
[0021] 1)用10‑2M十二烷基硫酸钠作为清洁溶剂，按照从上到下、从外到里的路径，取一块干纱布用清洁溶剂润湿后横向移动擦拭工作环境物表一次，然后另取一块干纱布竖向移动擦拭工作环境物表一次，以上步骤重复2次。
[0022] 2)按照从上到下、从里到外的方向用75％乙醇对环境物表面进行消毒。
[0023] 作为对上述实施例的改进，在从上到下、从外到里清洁过程中，纱布在工作环境物上从靠近人体的一侧向远离人体的一侧移动。十二烷基硫酸钠为阴离子表面活性剂，具有去污、乳化作用，增强了细胞毒药物清洁效；在从上到下、从外到里清洁过程中，纱布在工作环境物上从靠近人体的一侧向远离人体的一侧移动，减少了靠近人体区域细胞毒药物残留。
[0024] 下面通过实验来验证本实施例中所提PIVAS工作区域细胞毒药物残留清洁方法的有效性。
[0025] 1实验部分
[0026] 1.1实验仪器与试剂
[0027] AB SCIEX Triple QuadTM 4500MD超高效液相色谱‑串联质谱仪(日本Shimadzu公司)；H1‑16KR型医用离心机(湖南可成仪器设备有限公司)；超声波清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司)；Milli‑Q纯水系统(美国Millipore公司)；Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm×50mm，1.7μm)；Quintix125D‑1CN万分之一分析天平(赛多利斯科学仪器有限公司)。
[0028] 乙腈、甲醇(色谱纯，美国TEDIA公司)；甲酸(色谱纯，德国Fluka公司)；DMSO(色谱纯，德国Fluka公司)；水(Milli‑Q高纯水)；滤纸(100张/盒，英国whatman公司)。
[0029] 标准品：吉西他滨(Gemcitabine，GEM，纯度≥99％)、依托泊苷(Etoposide,VP‑16，纯度≥98％)、紫杉醇(Paclitaxel，TAX，纯度≥98％)、表柔比星(Epirubicin，EPI，纯度≥98％)、环磷酰胺(Cyclophosphamide，CTX，纯度≥98％)、安替比林(Antipyrine，APR，纯度≥98％)。
[0030] 1.2溶液配制
[0031] 配置内标溶液：准确称取安替比林20.0mg，置于20mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，得到1mg/mL内标储备液；精密移取内标储备液0.4mL至20mL容量瓶中，用甲醇稀释为20μg/mL的标准溶液，内标储备液和标准溶液均保存在4℃冰箱中；取一定量的内标储备液用20％乙腈‑0.1％甲酸溶液稀释为10ng/mL内标工作液；
[0032] 配置标准品溶液：分别准确称取吉西他滨、依托泊苷、紫杉醇、表柔比星、环磷酰胺标准品20.0mg，分别置于20mL容量瓶中，用二甲基亚砜溶解并定容，得到1mg/mL单标储备液；分别精密移取单标储备液0.4mL至20mL容量瓶中，用甲醇稀释，配成浓度各为20μg/mL的混合标准溶液；准确移取混合标准溶液至容量瓶中，配制成200、1000、4000ng/mL的混合标准中间液；用10ng/mL内标工作液将混合标准中间液逐级稀释成系列标准工作溶液，上机测定；所有储备液和标准溶液均于4℃冰箱中保存。
[0033] 1.3模拟污染
[0034] 将30cm×30cm不锈钢板、玻璃板、PVC板的表面分成三行三列共9个10cm×10cm的方格区，用50μL 1000ng/mL混合药物溶液分别污染10cm×10cm不锈钢板、玻璃板、PVC板表面，用可调容积的微吸管涂抹，室温下放置，等待试板自然干燥。
[0035] 1.4清洁试板
[0036] 分别选择70％异丙醇(IPA)、10‑2M十二烷基硫酸钠(SDS)、0.1％苯扎氯铵(BZK)溶液以及传统的清水为清洁溶剂，75％乙醇为消毒剂。先取一块干纱布用清洁溶剂润湿后横向擦拭工作环境物，然后另取一块干纱布用清洁溶剂润湿后竖向擦拭工作环境物。待工作环境物表面自然干后，用75％乙醇对环境物表面进行消毒。
[0037] 1.5样品采集和处理
[0038] 用面积为2cm×2cm的滤纸对试板进行一定面积(10cm×10cm)擦拭，0.1mL乙腈‑0.1％甲酸溶液(80:20，V/V)为预湿溶液，重复擦拭2遍，将擦拭后的2张滤纸置于2mL EP管中，加入1mL 10ng/mL内标工作液，超声提取20min，将上清液移至另一4mL离心管中，残渣用
1mL 10ng/mL内标工作液重复提取1次，合并提取液，14000rpm/min离心5min，取上清液200μLUPLC‑MS/MS上样测试。
1mL 10ng/mL内标工作液重复提取1次，合并提取液，14000rpm/min离心5min，取上清液200μLUPLC‑MS/MS上样测试。
[0039] 2实验结果
[0040] 2.1提取溶液和提取次数的选择
[0041] 将浓度4000ng/mL工作液50μL喷洒到2cm×2cm滤纸上，分别对比了20％乙腈‑0.1％甲酸溶液、40％乙腈‑0.1％甲酸溶液、60％乙腈‑0.1％甲酸溶液及80％乙腈‑0.1％甲酸溶液4种提取溶剂的提取效果。结果显示如图2，20％乙腈‑0.1％甲酸溶液为提取溶剂时，
6种药物的平均提取回收率即可达到84.7～102％，乙腈浓度的增加并未显著提高提取回收率，而当乙腈浓度增加到80％时，表柔比星的峰型变得很差，且考虑到有机溶剂的有毒性，因此选择20％乙腈‑0.1％甲酸溶液为提取溶剂。
6种药物的平均提取回收率即可达到84.7～102％，乙腈浓度的增加并未显著提高提取回收率，而当乙腈浓度增加到80％时，表柔比星的峰型变得很差，且考虑到有机溶剂的有毒性，因此选择20％乙腈‑0.1％甲酸溶液为提取溶剂。
[0042] 本实验分别考察了用1mL 20％乙腈‑0.1％甲酸溶液对提取1次和提取2次的提取效率。结果显示，6种药物提取1次和提取2次的平均回收率分别为84.7～102％和98.0～112％，表柔比星的提取效率从84.7％提高至98.0％，因此选择1mL20％乙腈‑0.1％甲酸溶液提取2次作为本实验的提取方法。
[0043] 2.2擦拭溶液的选择
[0044] 评估了几种擦拭溶剂分别在10cm×10cm的不锈钢、玻璃和PVC板上进行擦拭取样的回收率。用1000ng/mL的标准溶液50μL对10cm×10cm的不锈钢、玻璃和PVC板进行模拟污染，室温放置待干，按照“1.5”进行样品采集和处理。结果显示如图3，用20％乙腈‑0.1％甲酸溶液擦拭在3种材质物表对于表柔比星、紫杉醇的回收率均较低，擦拭回收率分别为18.2～37.6％和13.1～32.2％，增加乙腈比例，表柔比星、紫杉醇的回收率均得到提升。当80％乙腈‑0.1％甲酸溶液为擦拭溶液时，表柔比星和紫杉醇的回收率分别达到71.3～92.5％和88.1～114％。从总体上看，不锈钢材质上的擦拭回收率较玻璃和PVC上低，5种药物在玻璃板、PVC板和不锈钢板上的平均回收率分别为80.8％～106％、80.7％～108％、70.8％～
94.1％，RSD分别为4.8％～11.1％、1.4％～5.3％、2.0％～6.8％，均能够满足本实验研究。
因此，选择80％乙腈‑0.1％甲酸溶液用于不锈钢、玻璃和PVC板表面细胞毒药物残留擦拭取样。
94.1％，RSD分别为4.8％～11.1％、1.4％～5.3％、2.0％～6.8％，均能够满足本实验研究。
因此，选择80％乙腈‑0.1％甲酸溶液用于不锈钢、玻璃和PVC板表面细胞毒药物残留擦拭取样。
[0045] 2.3清洁溶剂的考察
[0046] 将30cm×30cm玻璃板、PVC板和不锈钢板按照“1.3”进行模拟污染后，按照“1.4”图1a路径进行清洁消毒，室温放置待干后按照“1.5”进行样品采集处理。分别对比了70％异丙‑2
醇(IPA)、0.1％苯扎氯铵(BZK)、10 M十二烷基硫酸钠(SDS)及清水对3种材质表面细胞毒药物残留的清洁效率。结果显示如表1和图4，清水和0.1％BZK对疏水性药物紫杉醇的清洁效率较低，尤其是在PVC和不锈钢表面，0.1％BZK对紫杉醇清洁效率仅为58.9±4.4％和59.6±8.4％。70％IPA可显著提高疏水性药物的清洁效率，但高浓度IPA对眼、呼吸道的黏膜有‑2
刺激作用。SDS是一种阴离子表面活性剂，具有去污、乳化作用，总体清洁效率比较，含10 M ‑2
SDS的清洁方案高于70％IPA、0.1％BZK以及清水。10 M SDS+清水清洁组合75％乙醇消毒，在玻璃板、PVC板和不锈钢板上的总体清洁效率分别为99.0±0.5％、97.8±0.1％、95.9±
1.2％，且水和75％乙醇可以有效去除SDS在操作表面的残留。但是在实际应用发现SDS+水+
75％乙醇组合方案的待干时间久，清洁耗时长，实际可操作性差。为缩短清洁时间，提高可‑2
操作性，选择10 M SDS联合干纱布组合清洁，75％乙醇消毒，总体清洁时间缩短，可操作性强，且对玻璃、PVC和不锈钢表面的总体清洁效率可分别达99.6±0.1％、98.5±0.8％、98.0±0.6％。
醇(IPA)、0.1％苯扎氯铵(BZK)、10 M十二烷基硫酸钠(SDS)及清水对3种材质表面细胞毒药物残留的清洁效率。结果显示如表1和图4，清水和0.1％BZK对疏水性药物紫杉醇的清洁效率较低，尤其是在PVC和不锈钢表面，0.1％BZK对紫杉醇清洁效率仅为58.9±4.4％和59.6±8.4％。70％IPA可显著提高疏水性药物的清洁效率，但高浓度IPA对眼、呼吸道的黏膜有‑2
刺激作用。SDS是一种阴离子表面活性剂，具有去污、乳化作用，总体清洁效率比较，含10 M ‑2
SDS的清洁方案高于70％IPA、0.1％BZK以及清水。10 M SDS+清水清洁组合75％乙醇消毒，在玻璃板、PVC板和不锈钢板上的总体清洁效率分别为99.0±0.5％、97.8±0.1％、95.9±
1.2％，且水和75％乙醇可以有效去除SDS在操作表面的残留。但是在实际应用发现SDS+水+
75％乙醇组合方案的待干时间久，清洁耗时长，实际可操作性差。为缩短清洁时间，提高可‑2
操作性，选择10 M SDS联合干纱布组合清洁，75％乙醇消毒，总体清洁时间缩短，可操作性强，且对玻璃、PVC和不锈钢表面的总体清洁效率可分别达99.6±0.1％、98.5±0.8％、98.0±0.6％。
[0047] 表1不同清洁溶剂对5种细胞毒药物残留清洁效率比较
[0048]
[0049] 2.4清洁次数的考察
[0050] 用100μL 4000ng/mL混合工作液按照“1.3”对玻璃板、PVC板、不锈钢表面模拟高剂‑2量污染，分别比较了10 M SDS联合干纱布组合清洁1次和2次，再用75％乙醇消毒，3种材质表面5种细胞毒药物的残留情况。结果显示如图5，清洁2次较清洁1次表面残留量明显减少，清洁效率显著提高。玻璃板、PVC板、不锈钢表面清洁2次和清洁1次的清洁效率分别为99.6±0.1％vs 94.4±1.0％、98.8±0.2％vs 96.5±0.8％、95.5±2.0％vs 93.0±1.3％。
[0051] 2.5清洁路径的考察
[0052] 将30cm×30cm玻璃板、PVC板和不锈钢板按照“1.3”进行模拟污染后，分别按照“1.4”图1a和图1b路径进行清洁消毒，室温放置待干后按照“1.5”进行样品采集处理，对两种清洁路径(从里到外vs从外到里)清洁后表面细胞毒药物残留分布情况进行了分析。结果显示如图6，按照传统“从里到外”路径后，在靠近人体区域(7、8、9号区域)细胞毒药物残留显著高于1、2、3号区域，这对于PIVAS职业防护是不利的。按照“从外到里”的新路径清洁后，在表面9个区域细胞毒药物残留分布较均匀，显著降低了7、8、9号区域细胞毒药物残留，可降低工作人员职业暴露风险。
[0053] 2.6实际样品测定
[0054] 每日细胞毒药物配置结束后工作人员会对生物安全柜、地面、传递仓等进行清洁消毒。对清洁后的生物安全柜工作台面、侧壁、玻璃挡板、地面、传递仓等表面按照“1.5”进‑2行样品采集处理。结果显示，10 M SDS+干纱布按照“从上到下，从外到里”的路径清洁2次，再联合75％乙醇消毒的新清洁方案，与传统清水清洁联合75％乙醇消毒方案比较，PIVAS工作环境中表面细胞毒药物残留显著降低，结果如表2和图7所示。
[0055] 表2新清洁方案vs传统清洁方案PIVAS工作区域5种细胞毒药物残留情况[0056]
[0057] 最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，但这些实质相同的修改或等同替换也均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。