化合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用

摘要

本发明提供了化合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用；其中，所述化合物为AZD9496或AZD9496的衍生物，所述AZD9496的化学命名为(E)‑3‑[3,5‑二氟‑4‑[(1R,3R)‑2‑(2‑氟‑2‑甲基丙基)‑3‑甲基‑2,3,4,9‑四氢‑1H‑吡啶并[3,4‑b]吲哚‑1‑基]苯基]丙烯酸，所述肿瘤为生长激素腺瘤或垂体无功能腺瘤。通过上述技术方案，本发明可以在给药14天以后对生长激素腺瘤的抑制率达到87.4%，对促性腺激素腺瘤的抑制率达到88.9%，由此提供了对治疗垂体生长激素腺瘤和垂体无功能腺瘤的新的方案。

权利要求

1.化合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用；其中，所述化合物为AZD9496或AZD9496的衍生物，所述AZD9496的化学命名为(E)‑3‑[3,5‑二氟‑4‑[(1R,3R)‑2‑(2‑氟‑2‑甲基丙基)‑3‑甲基‑2,3,4,9‑四氢‑1H‑吡啶并[3,4‑b]吲哚‑1‑基]苯基]丙烯酸，所述肿瘤为生长激素腺瘤或垂体无功能腺瘤；所述垂体无功能腺瘤为促性腺激素腺瘤；所述AZD9496的衍生物为AZD9496的盐或溶剂化物。

2.根据权利要求1所述的应用，其中，AZD9496的盐为AZD9496的马来酸盐。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其中，所述药物以AZD9496或AZD9496的衍生物为单一活性成分或作为活性成分之一。

4.根据权利要求3所述的应用，其中，所述药物还包括药学上可接受的赋形剂、载体和稀释剂中的至少一种。

5.根据权利要求1或2所述的应用，其中，所述药物为片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒剂、混悬剂、口服溶液、粉针或注射剂。

6.根据权利要求5所述的应用，其中，所述药物为口服剂型、舌下或口含给药剂型、静脉、皮下、透皮或肌内给药剂型。

说明书

化合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用

技术领域

[0001] 本发明涉及生物医药领域，具体地，涉及化合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用。

背景技术

[0002] 垂体生长激素腺瘤也就是GH腺瘤，又称之为肢端肥大症。垂体生长激素腺瘤（GH腺瘤）患者的垂体肿瘤细胞分泌过多的生长激素（GH）。发生在儿童骨骺闭合前表现为“巨人症”，发生在成人则表现为“肢端肥大症”。

[0003] 绝大多数垂体腺瘤具有较高的分泌功能，使血中激素水平升高，并产生相应的临床症状。但也有一些垂体腺瘤并不使血中激素水平升高，也无激素过多症状，称为临床无功能垂体腺瘤，简称垂体无功能腺瘤(nonfunctioning pituitary adenoma)。垂体无功能腺瘤占所有垂体腺瘤的25%～30%。

[0004] 垂体生长激素腺瘤可以使用善龙（注射用醋酸奥曲肽微球）来进行治疗，但是治疗效果欠佳。垂体无功能腺瘤现在尚没有可以使用的临床药物，只能使用手术治疗或放射治疗的方式进行治疗。

[0005] 因此，需要开发新的能够用于治疗垂体生长激素腺瘤和垂体无功能腺瘤的药物。

发明内容

[0006] 本发明的目的是提供新的能够用于治疗垂体生长激素腺瘤和垂体无功能腺瘤的药物。

[0007] 为了实现上述目的，本发明提供了化合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用；其中，所述化合物为AZD9496或AZD9496的衍生物，所述肿瘤为生长激素腺瘤或垂体无功能腺瘤。

[0008] 通过上述技术方案，本发明可以在给药14天以后对生长激素腺瘤的抑制率达到87.4%，对促性腺激素腺瘤的抑制率达到88.9%，由此提供了对治疗垂体生长激素腺瘤和垂体无功能腺瘤的新的方案。

[0009] 本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

具体实施方式

[0010] 以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。

[0011] 本发明提供了化合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用；其中，所述化合物为AZD9496或AZD9496的衍生物，所述肿瘤为生长激素腺瘤或垂体无功能腺瘤。

[0012] 可选地，所述AZD9496的化学命名为(E)‑3‑[3,5‑二氟‑4‑[(1R,3R)‑2‑(2‑氟‑2‑甲基丙基)‑3‑甲基‑2,3,4,9‑四氢‑1H‑吡啶并[3,4‑b]吲哚‑1‑基]苯基]丙烯酸；CAS号为1639042‑08‑2。

[0013] 可选地，所述AZD9496的衍生物为AZD9496的盐、溶剂化物、卤代产物、磺化产物、硝化产物、羟化产物、烷氧化产物或酯化产物。

[0014] 可选地，AZD9496的盐为AZD9496的马来酸盐。

[0015] 可选地，所述药物以AZD9496或AZD9496的衍生物为单一活性成分或作为活性成分之一。

[0016] 可选地，所述药物还包括药学上可接受的赋形剂、载体和稀释剂中的至少一种。

[0017] 可选地，所述药物为片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒剂、混悬剂、口服溶液、粉针或注射剂。

[0018] 可选地，所述药物为口服剂型、舌下或口含给药剂型、静脉、皮下、透皮或肌内给药剂型。

[0019] 可选地，其中，所述垂体无功能腺瘤为促性腺激素腺瘤。

[0020] 以下通过实施例进一步详细说明本发明。以下实施例中AZD9496为MCE的商品化产品，货号为HY‑12870。

[0021] 实施例1

[0022] 本实施例用于说明AZD9496用于治疗生长激素腺瘤的效果。

[0023] GH3细胞来自中国医学科学院基础所。AZD9496，胰酶，DMEM培养基，胎牛血清，二甲基亚砜，多聚赖氨酸均为市售产品。

[0024] 复苏GH3细胞，待细胞达到80%‑90%融合时，用胰蛋白酶消化收集细胞，用DMEM培养液重悬传代。

[0025] 设置4个不同剂量的处理组，在DMEM培养液中分别添加终浓度为25nM、50nM、100nM和200nM的AZD9496，对照组添加等体积的DMSO，进行细胞培养。

[0026] 倒置相差显微镜下每天观察一次培养细胞的形态特点，记录不同处理组下GH3细胞贴壁的时间及长满单层的时间，结果如表1所示。

[0027] 表1

[0028]处理组（nM） 25 50 100 200
细胞贴壁时间（小时） 10 13.5 18.5 24
长满单层时间（小时） 55 62 74 90

[0029] 表1的结果显示，AZD9496能够抑制生长激素腺瘤肿瘤细胞的生长。

[0030] 生长激素腺瘤肿瘤细胞设置4个不同剂量的处理组，在DMEM培养液中分别添加终浓度为25nM、50nM、100nM和200nM的AZD9496，对照组添加等体积的DMSO，培养GH3细胞到对数生长期，取96孔细胞培养板，每孔加DMEM培养液（加10％胎牛血清）在37℃ 5％ CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养24小时。每孔加10μl CCK8溶液，继续培养2小时显色。检测前摇晃培养板10秒钟混匀颜色，在酶联检测仪上，波长450nm处检测各孔的光吸收值（OD）。用样品稀释度对OD值（OD450）绘制曲线。统计细胞增殖情况如表2所示。

[0031] 表2

[0032] 处理组（nM） 25 50 100 200细胞增殖百分数（%） 86.9 76.3 49.1 25.2

[0033] 表2结果表明在GH3细胞中应用不同剂量的AZD9496，能够明显抑制GH3细胞的增殖。特别是在100‑200nM的处理剂量下，能够获得最佳的抑制增殖效果。

[0034] SPF级BALB/c‑nude小鼠（品种），雌性，4周龄，体重（15±2）g（购于北京维通利华实验动物技术有限公司，实验动物许可证号：SCXK（京）2021‑0006）经前肢腋下皮下接种鼠源垂体生长激素腺瘤GH3细胞（购自中国医学科学院基础研究所细胞中心），待瘤长至约3
120mm从中筛选出体重及瘤体均匀的荷瘤鼠15只，备用。

[0035] 将荷瘤鼠15只随机均匀分为3组，每组5只，每组分别经灌胃法施用不同剂量AZD9496，每日分1次给药，每次给药剂量分别为0.1mg/kg、0.5mg/kg、5mg/kg。给药14天后处死动物，剥取瘤组织计算抑瘤率TVI，结果如表3所示。

[0036] TVI%=（空白组当天肿瘤体积‑给药组当天肿瘤体积）/（空白组当天肿瘤体积）×100%。

[0037] 表3

[0038] 每次给药剂量（mg/kg） 给药14天后抑瘤率（%）0.1 33.2
0.5 64.5
5 87.4

[0039] 表3的结果显示，AZD9496能够在体内抑制生长激素腺瘤的生长。

[0040] 实施例2

[0041] 本实施例用于说明AZD9496在治疗垂体无功能腺瘤中的效果。

[0042] 对促性腺激素腺瘤设置4个不同剂量的处理组，在DMEM培养液中分别添加终浓度为25nM、50nM、100nM和200nM的AZD9496，对照组添加等体积的DMSO，进行细胞培养。

[0043] 倒置相差显微镜下每天观察一次培养细胞的形态特点，记录不同处理组下各垂体腺瘤细胞贴壁的时间及长满单层的时间并计算平均值，结果如表4所示。

[0044] 表4

[0045] 处理组（nM） 25 50 100 200促性腺激素腺瘤细胞贴壁时间（小时） 12 16 23.5 28
促性腺激素腺瘤长满单层时间（小时） 58 66 75 85

[0046] 表4的结果显示，AZD9496能够抑制促性腺激素腺瘤的生长。

[0047] 对促性腺激素腺瘤设置4个不同剂量的处理组，在DMEM培养液中分别添加终浓度为25nM、50nM、100nM和200nM的AZD9496，对照组添加等体积的DMSO，培养原代无功能垂体腺瘤细胞到对数生长期，取96孔细胞培养板，每孔加DMEM培养液（加10％胎牛血清）在37℃ 5％ CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养24小时。每孔加10μl CCK8溶液，继续培养2小时显色。检测前摇晃培养板10秒钟，混匀颜色，在酶联检测仪上，波长450nm处检测各孔的光吸收值（OD）。用样品稀释度对OD值（OD450）绘制曲线。统计细胞增殖情况如表5所示。

[0048] 表5

[0049] 处理组（nM） 25 50 100 200促性腺激素腺瘤细胞增殖百分数（%） 74.5 53.7 34.3 14.7

[0050] 表5结果表明在原代无功能垂体腺瘤细胞中应用不同剂量的AZD9496，能够明显抑制原代无功能垂体腺瘤细胞的增殖。特别是在100‑200nM的处理剂量下，能够获得最佳的抑制增殖效果。

[0051] SPF级BALB/c‑nude小鼠（品种），雌性，4周龄，体重（15±2）g（购自北京维通利华实验动物技术有限公司，实验动物许可证号：SCXK（京）2021‑0006）经前肢腋下皮下接种原代3
促性腺激素腺瘤细胞，待瘤长至约120mm从中筛选出体重及瘤体均匀的荷瘤鼠15只，备用。

[0052] 将荷瘤鼠15只随机均匀分为3组，每组5只，每组分别经灌胃法施用不同剂量AZD9496，每日分1次给药，每次给药剂量分别为0.1mg/kg、0.5mg/kg、5mg/kg。给药14天后处死动物，剥取瘤组织计算抑瘤率TVI，结果如表6所示。

[0053] TVI%=（空白组当天肿瘤体积‑给药组当天肿瘤体积）/（空白组当天肿瘤体积）×100%。

[0054] 表6

[0055] 每次给药剂量（mg/kg） 给药14天后抑瘤率（%）0.1 41.1
0.5 70.4
5 88.9

[0056] 表6的结果显示，AZD9496能够在体内抑制促性腺激素腺瘤的生长。

[0057] 以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。

[0058] 另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

[0059] 此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想其同样应当视为本发明所公开的内容。