植物内生菌DNA提取试剂盒及DNA提取方法转让专利
申请号 : CN202211301682.0
文献号 : CN115505512B
文献日 : 2023-08-22
发明人 : 孙科 , 谭红玲 , 宋凯 , 王皓月 , 张磊磊 , 尹雷 , 姜其华 , 孙雅姝 , 王宇翔 , 孙威岩
申请人 : 徐州生物工程职业技术学院
摘要 :
权利要求 :
1.植物内生菌DNA提取试剂盒,其特征在于,包括盒主体(1),所述盒主体(1)的顶部设有盒盖(2),内部设有粉碎装置;
所述粉碎装置包括空心壳体(3)、辊轴(31)、搅拌轴(32)和电机(33),所述空心壳体(3)的内壁为圆柱形,所述空心壳体(3)安装在所述盒主体(1)内部上端,所述辊轴(31)、所述搅拌轴(32)均设置在所述空心壳体(3)内部,所述辊轴(31)与所述空心壳体(3)的中心轴平行设置,所述辊轴(31)能与所述空心壳体(3)内表面接触,所述搅拌轴(32)一端与所述辊轴(31)一端连接,另一端连接有所述电机(33)的输出轴,所述电机(33)安装在所述空心壳体(3)上,所述空心壳体(3)上设置有进样口和下料口,所述进样口处安装有封闭盖(35),所述下料口处安装有滤网(34);
所述空心壳体(3)的内壁具有一个圆周侧面和位于圆周侧面两侧的平面侧面,所述空心壳体(3)的平面侧面可拆卸安装在所述盒主体(1)内壁上端,所述空心壳体(3)的平面侧面处安装有所述电机(33)和所述进样口;
所述滤网(34)与所述空心壳体(3)拼接成一个完整的圆周侧面;
还包括补水装置,所述补水装置包括滤水层(5)和吸水形变层(51);
所述滤水层(5)设置在所述空心壳体(3)内,并且与所述空心壳体(3)的圆周侧面之间留有储水空间(52),所述吸水形变层(51)用于与所述辊轴(31)接触,并且接触位置被所述辊轴(31)挤压变形,所述吸水形变层(51)沿着所述滤水层(5)内表面铺设,所述空心壳体(3)侧壁上连接有进水管(53),所述进水管(53)与所述储水空间(52)连通;
所述滤水层(5)为拱形,其与所述空心壳体(3)同轴设置;
所述吸水形变层(51)由多个弧形板拼接成拱形,每个所述弧形板的内表面设有刚性板(54),所有的刚性板(54)有拼接成一层拱形的研磨圈;
还包括汁液承接装置,所述汁液承接装置安装在所述盒主体(1)内,并且位于所述粉碎装置下方,所述汁液承接装置包括支撑台(4)、多孔板(41)和连接管(42),所述支撑台(4)设置在所述盒主体(1)内壁,所述多孔板(41)放置在所述支撑台(4)上,所述多孔板(41)的每个孔均连接有所述连接管(42),所述连接管(42)能匹配插入DNA提取所用试管(43)的管口内;
所述多孔板(41)的顶壁设置为上部开口面积大、下部开口面积小的结构;
所述空心壳体(3)还设置有冲水管(6),所述冲水管(6)与所述空心壳体(3)内所述辊轴(31)所在空间连通。
2.利用权利要求1所述的试剂盒提取植物内生菌DNA的方法,其特征在于,包括:
将植物样品表面清洗干净,试剂盒也做消毒杀菌处理;
将处理后的植物样品加入经过消毒杀菌处理的试剂盒的所述空心壳体(3)内,开启所述电机(33),收集汁液;
以汁液作为DNA提取的样品,加入提取DNA的试剂进行DNA的提取。
说明书 :
植物内生菌DNA提取试剂盒及DNA提取方法
技术领域
背景技术
菌,这些内生菌可存在于植物的根、茎、叶、花、果等部位,发现的内生菌的种类也较多,比如
假单胞菌属(Pseudomonas)、肠杆菌属(Enterobacter)、芽孢杆菌属(Bacillus)等。
位中,比如,聚集在叶片间隙细胞中的Herbaspirillum spB501,聚集在小麦茎组织细胞间
隙中的固氮菌Pantoea agglomerans。植物内生菌在植物体内的聚集与定殖既可以帮助这
些内生菌躲避来自植物体外的环境生存压力,又能够给植物体的生命活动提供帮助。
是内生菌的分离还是内生菌DNA的提取,都会涉及到对植物材料的研磨或粉碎处理步骤,收
集植物汁液,然后从植物汁液中分离或者提取内生菌。
再转移至过滤装置中过滤,浪费的植物样品资源较多。
发明内容
体内部,所述辊轴与所述空心壳体的中心轴平行设置,也就是所述辊轴的中心轴与所述空
心壳体的中心轴平行设置,所述辊轴与所述空心壳体内表面接触,所述搅拌轴一端与辊轴
一端连接,另一端连接有所述电机的输出轴,所述电机安装在所述空心壳体的平面侧面的
内表面或者外表面,所述空心壳体的平面侧面设置有进样口,进样口处安装有封闭盖,所述
下料口处安装有滤网。
上端,所述空心壳体的平面侧面处安装有所述电机和所述进样口。
板和连接管,所述支撑台设置在所述盒主体内壁,所述多孔板放置在所述支撑台上,所述多
孔板的每个孔均连接有所述连接管,所述连接管能匹配插入DNA提取所用试管的管口内。
水形变层沿着所述滤水层内表面铺设,所述空心壳体侧壁上连接有进水管,所述进水管与
所述储水空间连通。
作用下,可将装入空心壳体内的植物样品进行挤压碎。电机电动控制滚轴转动,减少劳动
力,提高了挤压碎化的效率。如果辊轴与竖直杆转动连接,则一方面电机带动辊轴沿着空心
壳体内壁转动,另一方面辊轴能自转,双重转动效果对植物样品进行挤压碎化,效果更佳。
为了便于植物样品与其汁液的分离,本发明设置了滤网。本发明实现了一边研磨一边挤压
过滤的效果,过滤效果要更好,无需再转移至过滤装置中过滤,避免植物样品资源浪费。
骤,还方便将试管拆下进行水浴等DNA提取的操作步骤。
开并被吸水形变层吸收,在粉碎装置工作的过程中,被挤压变形的吸水形变层位置挤出水
分,与植物样品接触,经过研磨释放出的植物内生菌进入水中形成汁液。
附图说明
具体实施方式
的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。本发明所述“内”的方
向是指向空心壳体3内部中心轴的方向,“外”是指向空心壳体3外部的方向。
地包括一个或者更多个该特征;在本发明的描述中,除非另有说明,“多个”的含义是两个或
两个以上。
装粉碎装置和盛接汁液。盒主体1的顶部可拆卸盖合有盒盖2,盒盖2扣合或者螺接在盒主体
1顶部的开口处。
的内壁形状与外壁形状可以相同,也可以不同。空心壳体3可拆卸安装在盒主体1顶部,比如
将空心壳体3的平面侧面通过磁铁吸附在盒主体1侧壁上端内表面,或者在空心壳体3的平
面侧面外表面以及盒主体1顶部内表面均设置安装板,通过贯穿两个安装板的螺栓将空心
壳体3安装在盒主体1顶部处。辊轴31、搅拌轴32均设置在空心壳体3内部,并且辊轴31的中
心轴与空心壳体3的中心轴平行设置,且辊轴31与空心壳体3接触。搅拌轴32为直角,具有竖
直杆和水平杆,竖直杆一端与辊轴31一端转动连接或者固定连接,水平杆的一端与竖直杆
的另一端固定连接,另一端连接有电机33的输出轴,电机33安装在空心壳体3的平面侧面的
内表面或者外表面均可;如果电机33安装在空心壳体3平面侧面的外表面,则水平杆贯穿空
心壳体3平面侧面中心开设的开孔,再与电机33的输出轴连接,开孔与水平杆的连接处设有
密封部件密封,密封部件采用密封油或者密封垫,既不影响水平杆的转动,也不漏液。
则样品无法从进样口出来,电机33为单向旋转电机或者双向旋转电机,其用于控制搅拌轴
32的转动,进而带动辊轴31沿着空心壳体3内壁转动,在辊轴31的重力以及辊轴31与空心壳
体3的摩擦力的作用下,可将装入空心壳体3内的植物样品进行挤压碎。电机33电动控制滚
轴31转动,减少劳动力,提高了挤压碎化的效率。如果辊轴31与竖直杆转动连接,则一方面
电机33带动辊轴31沿着空心壳体3内壁转动,另一方面,辊轴31能自转,双重转动效果对植
物样品进行挤压碎化,效果更佳。
面拼接成一个完整的圆周侧面,滤网34的外表面可以是立方体形状,便于放置粉碎装置;滤
网34可拆卸的卡接或镶嵌在空心壳体3的下料口处,或者,下料口处固定安装有滤网34。滤
网34的滤孔直径为10目‑200目之间。挤压碎的植物保留在空心壳体3内,汁液则从滤网34的
滤孔处下落,则实现了一边研磨一边挤压过滤的效果,比常规的仅靠重力的漏斗的过滤效
果要更好。并且,使用本实施例的装置处理植物样品的过程无需再转移至过滤装置中过滤,
避免植物样品资源浪费。
支撑台4、多孔板41和连接管42,支撑台4、多孔板41和连接管42均设置在粉碎装置下方,支
撑台4固定在盒主体1内壁,支撑台4为环形,或者由多个呈环形阵列分布的块组成,多孔板
41放置在支撑台4上,支撑台4用于支撑多孔板41及多孔板41上物品的重量,多孔板41为多
孔结构,多孔板41的孔与DNA提取所用试管43的管口尺寸大小相当,方便挤压出的汁液从多
孔板41的孔流入试管43内,多孔板41的每个孔的底部边缘均连接有连接管42,连接管42的
顶口边缘与多孔板41的孔的底部边缘密封连接,防止漏液,连接管42能匹配插入DNA提取所
用试管43的管口内。
试管43拆下进行水浴等DNA提取的操作步骤。试管43的侧壁一般都有刻度,根据刻度读取汁
液体积,便于计算DNA提取试剂的添加量。为了方便汁液流入多孔板41上,多孔板41的顶壁
设置为上部开口面积大、下部开口面积小的圆台形、梯形、锥形或者漏斗形的结构。
过实施例1的结构将其挤压碎,也难以产出汁液。补充无菌水的原因是我们想要提取的是植
物内生菌,要减少植物外部环境因素的干扰,有些植物DNA提取的操作还要对植物表面进行
消毒。
侧面内表面,并且滤水层5与空心壳体3的圆周侧壁之间留有储水空间52,优选的,滤水层5
的底边与滤网34的边缘固定连接。吸水形变层51为海绵等既能吸水又能变形的材质制成,
吸水形变层51用于与辊轴31接触,并且接触位置的吸水形变层51被辊轴31挤压变形,吸水
形变层51沿着滤水层5铺设,并与滤水层5固定连接。空心壳体3的圆周侧壁上、位于储水空
间52处连接有进水管53,进水管53与储水空间52连通。
层51,则被挤压变形的吸水形变层51位置挤出水分,与植物样品接触,经过研磨释放出的植
物内生菌进入水中形成汁液,最后从滤网34处落下。
磨圈,当辊轴31挤压不同位置的吸水形变层51时,随着该位置吸水形变层51的变形,刚性板
54跟随者发生位移,参见图5。需要注意的是,在本实施例中,电机33输出轴所在中心轴线的
位置,与滤水层5和滤网34组成的圆柱形结构的中心轴线位置重合。
间,尽可能是中植物样品中分散出的益生菌被水流冲至从滤网34落下。
述,本发明描述了优选的实施例。尽管已描述了本发明的优选实施例,但本领域内的技术人
员一旦得知了基本创造性概念,则可对这些实施例做出另外的变更和修改。所以,所附权利
要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
之内,则本发明也意图包含这些改动和变型在内。