紫草素联合CM-272在制备治疗肺癌药物中的应用

摘要

本发明涉及药物制备技术领域，尤其涉及紫草素联合CM‑272在制备治疗肺癌药物中的应用。本发明提供了紫草素与CM‑272在制备治疗非小细胞肺癌药物以及设计相关治疗方案上的应用，所述化学成分在一定浓度下可抑制非小细胞肺癌细胞生长、促进非小细胞肺癌细胞凋亡，进而达到治疗非小细胞肺癌的目的。

权利要求

1.紫草素联合CM‑272在制备治疗肺癌药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肺癌为非小细胞肺癌。

3.一种用于治疗肺癌的药物，包括紫草素、CM‑272和药学上可接受的辅料。

4.根据权利要求3所述的药物，其特征在于，所述药物的剂型包括胶囊、丸剂、片剂、颗粒剂或注射剂。

说明书

紫草素联合CM‑272在制备治疗肺癌药物中的应用

技术领域

[0001] 本发明涉及药物制备技术领域，尤其涉及紫草素联合CM‑272在制备治疗肺癌药物中的应用。

背景技术

[0002] 肺癌是一种发病率和死亡率均较高的癌症。对于这种发病率高、死亡率高、治愈率低的癌症，探索新的治疗途径，开发新的治疗药物迫在眉睫。肺癌分为两种类型：小细胞肺癌和非小细胞肺癌，其中非小细胞肺癌占85％，小细胞肺癌占15％。由此可见，针对非小细胞肺癌的治疗是肺癌治疗中的一个关键点。经过科研人员多年不懈的探索努力，非小细胞肺癌治疗在放疗、化疗、免疫药物治疗、靶向治疗等方面取得了很大的突破，但是药物治疗所带来的耐药性也是不可避免的。

[0003] 目前，已有研究证实联合治疗不仅是解决单药耐药问题较为成熟可靠的方式，更能提高药物疗效并减轻药物毒性。因此，对非小细胞肺癌联合治疗方案的探索将为临床用药带来新的思路和方向。

发明内容

[0004] 本发明的目的在于提供紫草素与CM‑272在制备治疗非小细胞肺癌药物以及设计相关治疗方案上的应用，提供以上两种药物的新用途。

[0005] 为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

[0006] 本发明提供了紫草素联合CM‑272在制备治疗肺癌药物中的应用。

[0007] 优选的，所述肺癌为非小细胞肺癌。

[0008] 优选的，所述紫草素与CM‑272的体积比为4～12:1。

[0009] 本发明还提供了一种用于治疗肺癌的药物，包括紫草素、CM‑272和药学上可接受的辅料。

[0010] 优选的，所述药物的剂型包括胶囊、丸剂、片剂、颗粒剂或注射剂。

[0011] 与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：

[0012] 1、紫草一般指紫草的根部，属于一种中药，一般用于治疗感染、炎症和出血性疾病。紫草素是紫草的主要活性成分，近期研究表明其具有多种生物活性，且与癌症治疗有关。紫草素虽具有抗癌活性，但由于毒性问题迄今为止并没有进入临床应用。CM‑272是一种新型的组蛋白甲基转移酶(euchromatic histone‑lysine N‑methyltransferase 2，EHMT2)G9a可逆抑制剂，研究发现G9a抑制剂可通过调节PI3K‑mTOR‑Akt信号通路促使癌细胞凋亡。由于紫草素对PI3K‑mTOR‑Akt信号通路也有影响，因此两者存在联合应用治疗非小细胞肺癌的可能，本发明则创造性的将紫草素与CM‑272联合使用，其得到的药物组合物拥有更优异的抑制肺癌细胞生长的作用。

[0013] 2、本发明提供了紫草素与CM‑272在制备治疗非小细胞肺癌药物以及设计相关治疗方案上的应用，所述化学成分在一定浓度下可抑制非小细胞肺癌细胞生长、促进非小细胞肺癌细胞凋亡，进而达到治疗非小细胞肺癌的目的。

附图说明

[0014] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。

[0015] 图1：紫草素与CM‑272对人非小细胞肺癌细胞A549增殖的影响：将一定浓度的紫草素与CM‑272与非小细胞肺癌细胞作用14天，然后通过镜下成像与酶标仪半定量的分析方法检测非小细胞肺癌细胞的相对克隆数量。结果显示与对照组相比，紫草素与CM‑272均对非小细胞肺癌细胞的增殖有抑制作用，且两者联用效果较单用更佳；在每一系列中n＝3；与对## ΔΔ照组相比，**P<0.01；与紫草素组(Shi)相比，P<0.01；与CM‑272组(CM)相比， P<0.01；

[0016] 图2：紫草素与CM‑272对人非小细胞肺癌细胞A549凋亡的影响：将一定浓度的紫草素与CM‑272与非小细胞肺癌细胞作用24小时，然后通过AnnexinV‑FITC和PI染色的分析方法检测非小细胞肺癌细胞的凋亡情况。结果显示紫草素与CM‑272均可促进非小细胞肺癌细胞凋亡，且两者联用效果较单用更佳；箭头所指处为凋亡细胞；A:Control.B:Shikonin.C:CM‑272.D:Shikonin+CM‑272.

[0017] 图3：紫草素与CM‑272对人非小细胞肺癌细胞A549凋亡相关蛋白的影响：将一定浓度的紫草素与CM‑272与非小细胞肺癌细胞作用24小时，然后通过WesternBlot分析方法对A549细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl‑2、cleavedcaspase‑8、cyto‑c的表达，结果显示与对照组相比，紫草素与CM‑272均使cleavedcaspase‑8、cyto‑c表达上升，Bax/Bcl‑2比值下降，说明紫草素与CM‑272均促进了非小细胞肺癌细胞A549的凋亡；与紫草素组与CM‑272组相比，联药组cleavedcaspase‑8、cyto‑c表达上升，Bax/Bcl‑2比值下降，说明联药组促进非小细胞肺癌细胞A549凋亡的能力更强；与对照组相比，*P<0.05，**P<0.01；与紫草素组(Shi)相## ΔΔ比，P<0.01；与CM‑272组(CM)相比， P<0.01。

具体实施方式

[0018] 本发明提供了紫草素(S8279，美国Selleck Chemicals)与CM‑272(S8812，美国Selleck Chemicals)在制备治疗非小细胞肺癌药物中的应用。

[0019] 在本发明中，所述紫草素与CM‑272的体积比为4～12:1；优选为6～10:1；进一步优选为8:1。

[0020] 本发明还提供了一种用于治疗肺癌的药物，包括紫草素、CM‑272和药学上可接受的辅料。

[0021] 在本发明中，所述药物的剂型优选包括胶囊、丸剂、片剂、颗粒剂或注射剂。

[0022] 本发明对所述药物中紫草素与CM‑272的含量以及采用的辅料及辅料含量没有特殊限定，采用常规制备各种剂型使用的辅料种类和辅料用量即可，采用各种剂型中常规含有活性物质的含量即可。

[0023] 本发明对所述药物的制备方法没有特殊限定，采用常规剂型的常规制备方法即可。

[0024] 本发明还提供了紫草素与CM‑272在设计治疗非小细胞肺癌的用药方案中的应用。

[0025] 在本发明中，所述药物的剂型优选包括胶囊、丸剂、片剂、颗粒剂或注射剂。

[0026] 本发明对所述药物中紫草素与CM‑272的含量以及采用的辅料及辅料含量没有特殊限定，采用常规制备各种剂型使用的辅料种类和辅料用量即可，采用各种剂型中常规含有活性物质的含量即可。

[0027] 本发明对所述药物的制备方法没有特殊限定，采用常规剂型的常规制备方法即可。

[0028] 本发明对所述药物的使用方法没有特殊限定，按照医嘱即可。

[0029] 下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

[0030] 实施例1

[0031] 紫草素与CM‑272对人非小细胞肺癌细胞A549增殖的影响

[0032] 选用非小细胞肺癌细胞A549在体外使用含10％胎牛血清(FBS)的DMEM培养基培养‑1 ‑124小时后，分别加入紫草素0.4μmol·L ，CM‑2720.05μmol·L ，紫草素+CM‑272(0.4+‑1
0.05)μmol·L ，对照组加入培养基，在体外与细胞作用14天，通过结晶紫染色拍照并使用酶标仪半定量分析细胞增殖情况。结果显示(见图1)与对照组相比，紫草素与CM‑272均对非小细胞肺癌细胞的增殖有抑制作用，且两者联用效果较单用更佳；在每一系列中n＝3；与对## ΔΔ
照组相比，**P<0.01；与紫草素组(Shi)相比，P<0.01；与CM‑272组(CM)相比， P<0.01；

[0033] 实施例2

[0034] 紫草素与CM‑272对人非小细胞肺癌细胞A549凋亡的影响

[0035] 选用非小细胞肺癌细胞A549在体外培养基培养24小时后，分别加入紫草素2μ‑1 ‑1 ‑1mol·L ，CM‑2720.25μmol·L ，紫草素+CM‑272(2+0.25)μmol·L ，对照组加入培养基，在体外与细胞作用24小时，收集细胞加入Annexin V‑FITC和PI染色并进行荧光拍摄分析细胞凋亡情况；提取细胞蛋白通过WesternBlot分析凋亡相关蛋白表达变化情况。结果显示(见图2与图3)紫草素与CM‑272均可促进非小细胞肺癌细胞凋亡，且两者联用效果较单用更佳；
箭头所指处为凋亡细胞；A:Control.B:Shikonin.C:CM‑272.D:Shikonin+CM‑272；与对照组## ΔΔ
相比，*P<0.05，**P<0.01；与紫草素组(Shi)相比，P<0.01；与CM‑272组(CM)相比， P<
0.01；

[0036] 这些结果表明紫草素与CM‑272能够明显抑制非小细胞肺癌细胞A549的增殖并促进其凋亡，且两者联用效果更佳，作为治疗非小细胞肺癌的药物选择及治疗方案选择是可行的。

[0037] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。