一种防治小麦赤霉病的杀菌组合物及其应用

摘要

本发明提供一种防治小麦赤霉病的杀菌组合物及其应用，属于农用杀菌剂领域，具体为一种包含解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂和丙硫菌唑的杀菌组合物及其在防治小麦赤霉病的应用；所述解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂和丙硫菌唑的质量配比为80：1‑1:8。本发明利用生物‑化学协同防治策略，综合了生防菌剂和化学杀菌剂的优点，既能减少化学药剂的施用量、提高生物防治的稳定性，又能延缓病原菌对化学药剂抗药性的产生，达到有效控制病害的效果，组合物表现为显著的增效作用。

权利要求

1.一种防治小麦赤霉病的杀菌组合物，其特征在于，所述的杀菌组合物由解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂和丙硫菌唑组成；所述解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂和丙硫菌唑的质量配比为

50:1‑5:1；其中解淀粉芽孢杆菌WHIG于2015年04月15日保藏于在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号为

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CGMCCNo.10722；解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂浓度1×10‑1×10cfu／mL。

2.根据权利要求1所述的杀菌组合物，其特征在于，解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂浓度1×9

10cfu／mL；所述解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂和丙硫菌唑的质量配比为50：1‑5:1。

3.根据权利要求1‑2任一项所述的杀菌组合物用于防治作物病害的用途，其特征在于，所述的作物病害为小麦赤霉病。

说明书

一种防治小麦赤霉病的杀菌组合物及其应用

技术领域

[0001] 本发明属于农用杀菌剂领域，具体为一种防治小麦赤霉病的杀菌组合物及其应用。

背景技术

[0002] 小麦赤霉病(Fusarium head blight，简称FHB或Scab)主要是由禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)引起的一种危害性很强的真菌病害，是我国乃至世界范围内小麦产区最常见的流行性病害，已成为当前制约我国小麦生产安全及麦类食品质量安全的最重要的病害之一。该病不仅对小麦产量造成严重损失，且感病籽粒中含有的多种真菌毒素还会恶化品质，严重影响食品安全，危害人畜健康。

[0003] 由于小麦赤霉病抗性种质资源有限，抗性机制较为复杂，生产中尚未获得高抗赤霉病的品种，无法满足生产中对抗性品种的需求。目前，防控赤霉病的主要措施是在小麦齐穗期至扬花期进行药剂防治。由于小麦赤霉病病原菌群体对传统药剂如多菌灵及其复配制剂等已产生抗性，导致防效降低甚至防治失败的问题，市场上涌现出一批具有不同作用机制的杀菌剂，如戊唑醇、氰烯菌酯、丙硫菌唑、氟唑菌酰羟胺等。

[0004] 化学药剂的常年使用，会导致小麦赤霉病菌对杀菌剂产生抗药性，从而使化学药剂的防治效果下降，甚至防治失败。为了提高防效，就会加大化学农药的使用量，不仅会积累化学农药残留，影响人体健康，更会破坏生态平衡，引起环境污染。随着人们对环境保护、生态平衡、食品安全等问题日益重视，研究开发以高效、安全、无公害微生物复配农药为主的综合防治小麦赤霉病的技术迫在眉睫。生物防治对人畜安全，而且具有绿色、环保、作用时间长、病菌不易产生抗药性等优点，不仅可以减少化学农药的使用，提高品质，还能减轻对生态、环境的污染，作为一种对环境友好的防治技术越来越受到人们的青睐。

[0005] 解淀粉芽孢杆菌属革兰阳性芽孢杆菌，是一种与枯草芽孢杆菌亲缘性很高的细菌，在自然界中分布广泛。解淀粉芽孢杆菌生长过程中可以产生一系列具有广泛地抑制真菌和细菌的活性的代谢产物，在生物防治方面具有广阔的应用前景，已逐步成为具有生物农药开发潜力的微生物。解淀粉芽孢杆菌WHIG由安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所水稻病害防治课题组分离获得，具有广谱的抑菌活性，对多种病原菌均有较好的抑制作用。2015年04月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号为CGMCCNo.10722。该菌株命名为WHIG，分类命名：解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)(参考CN107136120A)。

[0006] 丙硫菌唑是拜耳作物科学公司研制的一种甾醇脱甲基化抑制剂类(DMIs)杀菌剂，其主要用于防治谷类、豆类上发生的多种病害，与传统的三唑类杀菌剂相比，丙硫菌唑具有杀菌范围广、防治效果好且增产作用明显等优点。在中国，丙硫菌唑于2019年登记用于小麦赤霉病、白粉病和锈病的防控。丙硫菌唑作为新化学成分对小麦赤霉病具有很好的防治效果，但长期单独使用也有很大的抗性风险。

[0007] 利用生物防治与化学防治相结合的防治策略，既能弥补生物防治药效慢、防治效果和稳定性差的缺点，又能减少化学药剂的施用量，达到有效控制病害的效果，现有技术中并没有将解淀粉芽孢杆菌WHIG和丙硫菌唑组合使用的相关报道。申请人研究发现，解淀粉芽孢杆菌WHIG和丙硫菌唑组合对小麦赤霉病具有很好的协同增效作用。

发明内容

[0008] 本发明利用生物防治与化学防治相结合的防治策略，既能减少化学药剂的施用量、又能提高生物防治的稳定性，达到有效控制病害的目的，且组合物表现为显著的增效作用。

[0009] 本发明的技术方案为：

[0010] 一种防治小麦赤霉病的杀菌组合物，其特征在于，包含解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂和丙硫菌唑；所述解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂和丙硫菌唑的质量配比为80∶1‑1∶8；解淀粉芽孢杆菌WHIG保藏于在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳6
区北辰西路1号院3号，保藏号为CGMCCNo.10722；解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂浓度1×10‑1×
10
10 cfu/mL。

[0011] 优选的，解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂浓度1×107‑1×109cfu/mL；所述解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂和丙硫菌唑的质量配比为50∶1‑5∶1。进一步优选为，解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂9
浓度1×10cfu/mL；所述解淀粉芽孢杆菌WHIG菌剂和丙硫菌唑的质量配比为50∶1‑5∶1。

[0012] 所述的杀菌组合物还包含农药上辅料成分，制备成农药制剂。所述农药制剂为悬浮剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、水乳剂、可分散油悬浮剂。所述辅料选择本领域常规辅料成分，采用常规制备方法进行配制。

[0013] 所述的杀菌组合物可用于防治作物病害，优选作物病害为小麦赤霉病。

[0014] 采用上述技术方案，本发明具有如下有益效果：

[0015] 本发明利用生物防治与化学防治相结合的防治策略，既能减少化学药剂的施用量、又能提高生物防治的稳定性，达到有效控制病害的效果。

[0016] 当WH1G菌悬液与丙硫菌唑的质量配比为50∶1‑5∶1时，组合物对小麦赤霉病产生明显的协同增效作用，不仅可以有效降低化学药剂的使用剂量、延缓病菌抗药性的产生，还能有效防治小麦赤霉病的发生。

具体实施方式

[0017] 下面结合具体的实施例对本发明的具体实施方式做进一步的解释说明。

[0018] 实施例1：复配药剂对小麦赤霉病的室内毒力测试

[0019] 1.1供试材料

[0020] 生防菌：解淀粉芽孢杆菌WH1G，安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所。用改良的NA培养基(牛肉浸膏1.0g、蛋白胨5.0g、酵母膏5.0g、NaCl5.0g、蔗糖10.0g、琼脂20.0g、蒸馏水1000mL，pH值6.8‑7.0)，于28℃恒温箱内培养。配置解淀粉芽胞杆菌WH1G9
菌悬液，浓度含量1×10cfu/mL。

[0021] 小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)由安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所分离、筛选、鉴定和保存。

[0022] 丙硫菌唑，市购。

[0023] 1.2测试方法

[0024] 采用菌丝生长速率法。在预实验的基础上，配制含不同梯度浓度药剂的PDA平板，将活化的小麦赤霉病菌菌块(直径5mm)放在含药平板中央，放置于28℃培养箱中培养。并设置对照，各处理重复4次。待对照菌落长满培养皿2/3时，采用十字交叉法量取各处理的菌落直径，计算平均抑制率。

[0025] 平均抑制率＝[(对照组菌落直径平均值‑处理组菌落直径平均值)/(对照菌落直径平均值‑5.0)]×100％。

[0026] 将菌丝生长抑制率换算成抑制机率值(y)，药剂浓度换算成浓度对数(x)，按浓度对数为横坐标、机率值为纵坐标作毒力回归直线，求得单剂及其混剂对病菌的毒力回归方程，并计算EC50值及相关系数r值。

[0027] 根据Wadley法计算混剂的增效系数(SR)，从而评价药剂混用的增效作用，即SR＞1.5为增效作用，SR＜0.5为拮抗作用，0.5≤SR≤1.5为相加作用。增效系数(SR)计算公式如下：

[0028]

[0029] 式中：X‑混剂的EC50理论值，单位为μg/mL；

[0030] PA‑混剂中WH1G的百分含量，单位为百分率(％)；

[0031] PB‑混剂中丙硫菌唑的百分含量，单位为百分率(％)；

[0032] A‑混剂中WH1G的EC50值，单位为μg/mL；

[0033] B‑混剂中丙硫菌唑的EC50值，单位为μg/mL；

[0034] SR‑混剂的增效系数；

[0035] X1‑混剂的EC50实测值，单位为μg/mL。

[0036] 1.3测试结果

[0037] 经测试WH1G菌悬液对小麦赤霉病菌的EC50值为8.5494mg/L；丙硫菌唑对小麦赤霉病菌的EC50值为1.1016mg/L。当WH1G菌悬液与丙硫菌唑的质量配比为50∶1‑5∶1时对小麦赤霉病菌表现为协同增效作用，其它配比条件下表现为相加作用。当组合物表现为增效作用时，不仅可以有效减低单剂的使用剂量，还能延缓抗药性的产生。

[0038] 表1复配药剂对小麦赤霉病的室内毒力测试

[0039]

[0040] 备注：菌悬液配置中1mL按照1g计算。

[0041] 实施例2：复配药剂对小麦赤霉病的田间药效试验

[0042] 2.1供试材料

[0043] 生防菌：解淀粉芽孢杆菌WH1G，安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所。用改良的NA培养基(牛肉浸膏1.0g、蛋白胨5.0g、酵母膏5.0g、NaCl5.0g、蔗糖10.0g、琼脂20.0g、蒸馏水1000mL，pH值6.8‑7.0)，于28℃恒温箱内培养。配置解淀粉芽胞杆菌WH1G9
菌悬液，菌含量1×10cfu/mL。

[0044] 小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)：由安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所分离、筛选、鉴定和保存。

[0045] 小麦赤霉病菌孢子液：由安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所制6 2
备，孢子液浓度为1×10个/mL，孢子液接种量为450L/hm。

[0046] 丙硫菌唑，市购。

[0047] 2.2测试方法

[0048] 于小麦扬花初期采用赤霉病菌孢子液进行人工接种。于接种后24小时分别将不同浓度的药剂均匀喷施于小麦穗部。设置空白对照。每小区4平米，每个处理重复3次。施药25d后开始调查。每处理每个重复对角线5点取样，每点调查100穗，每个点单独记录病级数和总穗数，分级标准参照农业行业标准《农药田间药效试验准则：杀菌剂防治小麦赤霉病》(NY/T 1464.14‑2007)，通过病穗面积占全穗面积的比例(S)来评价。

[0049] 病害严重度分级标准：

[0050] 0级：全株无病；

[0051] 1级：S＜1/4；

[0052] 3级：1/4≤S＜1/2；

[0053] 5级：1/2≤S＜3/4；

[0054] 7级：S≥3/4。

[0055] 病情指数＝∑[(各级病株数×相对病级数值)/(调查总株数×最高病级数值)]×100

[0056] 防治效果(％)＝[(空白对照区病情指数‑处理区病情指数)/空白对照区病情指数]×100

[0057] 2.3测试结果

[0058] 由表1可知，单独使用WH1G菌悬液对小麦赤霉病的防治效果为％；单独使用丙硫菌唑对小麦赤霉病的防治效果为％。将WH1G菌悬液与丙硫菌唑组合使用后可显著提升药剂对小麦赤霉病的防治效果，具有显著的增效作用。

[0059] 表2复配药剂对小麦赤霉病的田间测试

[0060]

[0061] 备注：每小区喷洒药液量300mL，菌悬液配置中1mL按照1g计算，[0062] 最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有很多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内同直接导出或联想到的所有变形，均认为是本发明的保护范围。