氟[18F]贝他嗪注射液的检测方法及应用

摘要

本发明涉及药品分析检测技术领域，尤其涉18及氟[ F]贝他嗪注射液的检测方法及应用。该检测方法包括采用十八烷基硅烷键合硅胶填料的色谱柱结合特定的流动相以及洗脱程序分离氟[18F]贝他嗪注射液。通过本发明的色谱条件18 18能够将氟[ F]贝他嗪注射液中的氟[ F]贝他嗪与杂质实现很好的分离，而且各杂质之间也有较好的分离度，有利于有效的监测氟[18F]贝他嗪注射液的产品质量，指导产品工艺的开发。

权利要求

18

1.氟[ F]贝他嗪注射液的检测方法，其特征在于，包括：

18

采用十八烷基硅烷键合硅胶填料的色谱柱分离氟[ F]贝他嗪注射液；

其中，流动相A为8 12 mM乙酸铵溶液；流动相B为乙腈；

~

梯度洗脱程序如下：

各阶段流动相A和流动相B的体积百分比之和为100%；

流动相A在各阶段的体积百分比如下：；

采用紫外检测器检测梯度洗脱后的样品；

或采用放射性流量检测器检测梯度洗脱后的样品；

或采用紫外检测器以及放射性流量检测器检测梯度洗脱后的样品；

当采用紫外检测器检测时，紫外检测器的检测波长为360 370nm。

~

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱的柱温为25 35℃；

~

和/或，流动相的流速为0.5 1.5 mL/min。

~

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，采用二极管阵列检测器检测梯度洗脱后的样品。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，采用二极管阵列检测器以及放射性流量检测器检测梯度洗脱后的样品。

18

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，还包括：采用外标法对氟[ F]贝他嗪

18

注射液中氟[ F]贝他嗪的化学含量进行测定。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，还包括：采用峰面积归一化法对氟

18

[ F]贝他嗪注射液的放射化学纯度进行检测。

18

7.权利要求1 6中任一项所述的检测方法在氟[ F]贝他嗪注射液产品质检中的应用。

~

说明书

18

氟[ F]贝他嗪注射液的检测方法及应用

技术领域

[0001] 本发明涉及药品分析检测技术领域，尤其涉及氟[18F]贝他嗪注射液的检测方法及应用。

背景技术

[0002] 氟[18F]贝他嗪（18Florbetazine）注射液是一种新型的放射性诊断药物，它是由氟18
[ F]标记的正电子发射断层扫描（PET）的显像剂，靶向于大脑的β淀粉样蛋白（Aβ）斑块用于阿尔茨海默病（AD）的诊断药物。其活性成分是基于专利“与Aβ蛋白和Tau蛋白具有高亲和力的双腙类化合物及其衍生物与应用（CN201910007703.X）”描述的化合物，对其通过进一步工艺和处方的开发而研制的。

[0003] 氟[18F]贝他嗪（18Florbetazine）注射液活性成分的化学结构如下：

[0004] 。

[0005] 随着氟[18F]贝他嗪注射液在市场中迅速增长的应用需要，为了更好地控制氟18 18
[ F]贝他嗪注射液的产品质量，指导产品工艺的开发，很有必要对氟[ F]贝他嗪注射液中
18
氟[ F]贝他嗪的化学含量、放射化学纯度、杂质等项目进行检测。

[0006] 然而迄今为止，还未有针对氟[18F]贝他嗪注射液检测方法的相关现有技术。

发明内容

[0007] 鉴于此，特提出本发明。

[0008] 首先，本发明提供了一种氟[18F]贝他嗪注射液的检测方法，包括：

[0009] 采用十八烷基硅烷键合硅胶填料的色谱柱分离氟[18F]贝他嗪注射液；

[0010] 其中，流动相A为8 12 mM乙酸铵溶液；流动相B为乙腈；~

[0011] 梯度洗脱程序如下：

[0012] 各阶段流动相A和流动相B的体积百分比之和为100%；

[0013] 流动相A在各阶段的体积百分比如下：

[0014] 。

[0015] 本发明通过对色谱条件的优化，发现在上述色谱条件下氟[18F]贝他嗪注射液中的18
氟[ F]贝他嗪与杂质的分离度高（分离度＞1.5），各杂质之间也有较好的分离度，而且峰型
18
好，柱效佳，能够有效的监测氟[ F]贝他嗪注射液的产品质量。

[0016] 优选地，所述色谱柱的柱温为25 35℃；和/或，流动相的流速为0.5 1.5 mL/min。~ ~

[0017] 更优选地，所述色谱柱的柱温为28 32℃；和/或，流动相的流速为0.8 1.2 mL/~ ~min。

[0018] 优选地，采用紫外检测器（VWD）检测梯度洗脱后的样品。

[0019] 优选地，采用二极管阵列检测器（DAD）检测梯度洗脱后的样品。

[0020] 优选地，采用放射性流量检测器检测梯度洗脱后的样品。

[0021] 优选地，采用紫外检测器以及放射性流量检测器检测梯度洗脱后的样品；

[0022] 或，采用二极管阵列检测器以及放射性流量检测器检测梯度洗脱后的样品。

[0023] 经过上述色谱条件分离后的样品，能够在紫外检测器（或二极管阵列检测器）以及18
放射性流量检测器联合检测时，实现同时准确检测氟[ F]贝他嗪注射液的放射化学纯度和
18
含量，准确分析氟[ F]贝他嗪注射液中由工艺引入以及辐射自分解产生的放射化学杂质和非放射性化学杂质。

[0024] 优选地，所述检测方法还包括：采用外标法对氟[18F]贝他嗪注射液中氟[18F]贝他嗪的化学含量进行测定。

[0025] 优选地，所述检测方法还包括：采用峰面积归一化法对氟[18F]贝他嗪注射液的放射化学纯度进行检测。

[0026] 优选地，紫外检测器或二极管阵列检测器的检测波长为360 370nm；更优选为365~ ~370nm。

[0027] 优选地，采用二极管阵列检测器对杂质进一步检测分析。

[0028] 本发明中的杂质包括化学杂质及放射化学杂质。

[0029] 本领域技术人员可以进一步通过对上述优选方案进行组合，以得到其它的较优实施方案。

[0030] 进一步，本发明提供了上述任一方案中的检测方法在氟[18F]贝他嗪注射液产品质检中的应用。

[0031] 与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

[0032] 本发明提供了氟[18F]贝他嗪注射液的检测方法，通过本发明的色谱条件能够将氟18 18
[ F]贝他嗪注射液中的氟[ F]贝他嗪与杂质实现很好的分离，而且各杂质之间也有较好
18
的分离度，有利于有效的监测氟[ F]贝他嗪注射液的产品质量，指导产品工艺的开发。

附图说明

[0033] 图1是实施例1对照品的紫外信号色谱图。

[0034] 图2是实施例1供试品的紫外信号色谱图。

[0035] 图3是实施例1供试品的放射性信号色谱图。

[0036] 图4是实施例2对照品的紫外信号色谱图。

[0037] 图5是实施例2供试品的紫外信号色谱图。

[0038] 图6是实施例2供试品的放射性信号色谱图。

[0039] 图7是对比例对照品的紫外信号色谱图。

[0040] 图8是对比例供试品的紫外信号色谱图。

[0041] 图9是对比例供试品的放射性信号色谱图。

具体实施方式

[0042] 为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

[0043] 实施例中未注明具体技术或条件者，均为常规方法或者按照本领域的文献所描述的技术或条件进行，或者按照产品说明书进行。所用试剂和仪器等未注明生产厂商者，均为18
可通过正规渠道商购买得到的常规产品。氟[ F]贝他嗪注射液由原子高科股份有限公司提供。

[0044] 实施例1

[0045] 本实施例提供了一种氟[18F]贝他嗪注射液的检测方法，步骤如下：

[0046] 对照品溶液配制：精密称量对照品（氟[19F]贝他嗪）10mg，加乙腈溶解逐级稀释定容至2μg/mL。

[0047] 供试品溶液配制：氟[18F]贝他嗪注射液。

[0048] 流动相A配制：精密称量乙酸铵770.82mg，溶解于1000mL水中，超声脱气。

[0049] 流动相B配制：量取1000mL乙腈，超声脱气。

[0050] 检测方法：取对照品溶液和供试品溶液分别由高效液相色谱仪进样，进样量均为10量均，通过色谱柱进行分离，色谱条件为：Waters Xbridge C18反相色谱柱，柱温为30℃；
按表1中的程序进行梯度洗脱；流动相流速为1.0 mL/min；

[0051] 表1

[0052]

[0053] 分离后的样品先后通过二极管阵列检测器（检测波长368nm）及放射性流量检测器，同时获得样品的化学含量及放射化学纯度等信息。

[0054] 基于氟[18F]贝他嗪的非放射性的化学对照品（氟[19F]贝他嗪），通过外标法得到18
样品的化学含量；基于峰面积归一化法，得到氟[ F]贝他嗪注射液的放射化学纯度。

[0055] 检测结果如下。

[0056] 对照品的紫外信号色谱图如图1所示，结果显示，对照品（峰1）的保留时间为15.90分钟，峰面积为2.250mAU*min。对照品无放射性，因此无放射性信号的响应。

[0057] 供试品的紫外信号色谱图如图2所示，结果显示，杂质峰与主峰（峰3，16.018分钟）相距较远，主峰与杂质峰以及各杂质峰的分离度均大于1.5，可进一步根据对照品浓度、峰面积及供试品主峰面积可计算出供试品的含量。

[0058] 供试品的放射性信号色谱图如图3所示，主峰（峰7）保留时间为16.150分钟，根据18
峰面积归一化法，得到氟[ F]贝他嗪的放射化学纯度为92.28%，而且供试品中各杂质峰有较好的分离度，可进一步对杂质进行研究。

[0059] 进一步，本实施例对上述检测方法的系统适用性进行考察。

[0060] （1）放射化学纯度检测的系统适用性考察

[0061] 考察目标：依次取空白溶剂（乙腈）、基体溶液（不含活性成分氟[18F]贝他嗪）、对照品溶液、供试品光照溶液各进样1针，取供试品溶液连续进样6针。

[0062] 考察标准：在放射性色谱图中，放射性主峰理论塔板数n≥1000；6针供试品，经衰变校正后，主峰的保留时间和峰面积RSD应≤5.0%；拖尾因子T应≤2；供试品光照溶液的放射性主峰和放化杂质峰的分离度＞1.5。在紫外色谱图中，主峰理论塔板数n≥2000；6针供试品，主峰的保留时间和峰面积RSD应≤5.0%；拖尾因子T应≤2；供试品光照溶液的主峰和相邻杂质峰的分离度＞1.5。

[0063] 实验结果见表2，结果表明，在放射性色谱图中，放射性主峰理论塔板数n≥1000；6针供试品，经衰变校正后，主峰的保留时间RSD为0.04%，峰面积RSD为3.8%，拖尾因子T≤2；供试品光照溶液的放射性主峰和放化杂质峰的分离度＞1.5，说明系统适用性良好。在紫外色谱图中，主峰理论塔板数n≥2000；6针供试品，主峰的保留时间RSD为0.04%，峰面积RSD为
0.97%，拖尾因子T≤2；供试品光照溶液的主峰和相邻杂质峰的分离度＞1.5，说明系统适用性良好。

[0064] 表2

[0065]

[0066] （2）化学含量检测的系统适用性考察

[0067] 考察目标：取空白溶剂、基体溶液、对照品溶液、供试品光照溶液各进样1针，取供试品溶液连续进样6针。

[0068] 考察标准：主峰理论塔板数n≥2000；6针供试品，主峰的保留时间和峰面积RSD应≤5.0%；拖尾因子T应≤2；供试品光照溶液的主峰和相邻杂质峰的分离度＞1.5。

[0069] 实验结果见表3，结果表明，在紫外色谱图中，主峰理论塔板数n≥2000；6针供试品，主峰的保留时间RSD为0.04%，峰面积RSD为0.97%；拖尾因子T≤2；供试品光照溶液的主峰和相邻杂质峰的分离度＞1.5；说明系统适用性良好。

[0070] 表3

[0071]

[0072] 综上，分离度高（＞1.5）证明了上述检测方法的专属性好，理论塔板数较大（n≥2000）证明了上述检测方法的柱效佳，拖尾因子小（≤2）证明了峰形好，重复性实验中峰面积和保留时间RSD数值较小，证明了上述检测方法具有较高的精密度。

[0073] 实施例2

[0074] 本实施例提供了一种氟[18F]贝他嗪注射液的检测方法，步骤仅与实施例1不同的是：按表4中的程序进行梯度洗脱。

[0075] 表4

[0076]

[0077] 检测结果如下。

[0078] 对照品的紫外信号色谱图如图4所示，结果显示，对照品的保留时间为10.612分钟，峰面积为2.263mAU*min。对照品无放射性，因此无放射性信号的响应。

[0079] 供试品的紫外信号色谱图如图5所示，结果显示，杂质峰与主峰（峰3）相距较远，主峰与杂质峰以及各杂质峰的分离度均大于1.5，可进一步根据对照品浓度、峰面积及供试品主峰面积可计算出供试品的含量。

[0080] 供试品的放射性信号色谱图如图6所示，主峰（峰8）保留时间为10.78分钟，根据峰18
面积归一化法，得到氟[ F]贝他嗪的放射化学纯度为97.16%，而且供试品中各杂质峰的分离度均＞1，可进一步对杂质进行研究。

[0081] 实验结果表明，实施例2与实施例1相比，只有出峰时间发生了变化，各峰之间的分离度仍满足分析需求。

[0082] 对比例

[0083] 本对比例提供了一种氟[18F]贝他嗪注射液的检测方法，步骤仅与实施例1不同的是：按表5中的程序进行梯度洗脱。

[0084] 表5

[0085]

[0086] 检测结果如下。

[0087] 对照品的紫外信号色谱图如图7所示，结果显示，对照品的保留时间为20.173分钟，峰面积为2.832mAU*min。对照品峰形较差，峰形不对称，对照品无放射性，因此无放射性信号的响应。

[0088] 供试品的紫外信号色谱图如图8所示，结果显示，相邻杂质峰（或基线）与主峰（峰2）未能有效分离，因此无法定量检测。

[0089] 供试品的放射性信号色谱图如图9所示，主峰（峰7）保留时间为20.10分钟，根据峰18
面积归一化法，得到氟[ F]贝他嗪的放射化学纯度为96.39%，而且供试品中各杂质峰的分离度均＞1，可进一步对杂质进行研究。

[0090] 实验结果表明，该对比例的检测方法无法对样品定量检测，主峰与相邻杂质峰之间的分离度不满足分析需求。

[0091] 最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。