β-内酰胺后叶加压素V1a拮抗剂

摘要

本发明介绍了新的2-(氮杂环丁-2-酮-1-基)链烷双酸衍生物以及2-(氮杂环丁-2-酮-1-基)烷氧基链烷酸衍生物用于治疗对后叶加压素V1a受体拮抗作用敏感的疾病状态的用途。

权利要求

1.一种具有下式结构的化合物或其药学上可接受的酸加成盐：其中：

n′为整数1-3；

5

A为XNH-或RXN-；

2

R 为氢或C1-C6烷基；

3

R 为选自以下的结构：

4

R 为C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8环烷基、C3-C9环烯基、柠檬烯基、蒎烯基、C1-C3链烷酰基、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)、任选取代的芳基(卤代C1-C4烷基)、任选取代的芳基(烷氧基C1-C4烷基)、任选取代的芳基(C2-C4烯基)、任选取代的芳基(卤代C2-C4烯基)或任选取代的芳基(C2-C4炔基)；

5

R 选自以下的基团：羟基、C1-C6烷基、C1-C4烷氧基羰基和苄基；X选自以下基团：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、(C1-C4烷氧基)-(C1-C4烷基)、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)、任选取代的芳基(C3-C7环烷基)、任选取代的茚满-1-基、任选取代的茚满-2-基、任选取代的1，2，3，4-四氢萘-1-基、任选取代的1，2，3，4-四氢萘-2-基、杂环Y、Y-(C1-C4

7 8 7 8

烷基)、RRN-和RRN-(C2-C4烷基)；其中杂环Y选自以下基团：四氢呋喃基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基或奎宁环基；其中所述吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基或奎宁环基任选在N位被C1-C4烷基或任选取代的芳基(C1-C4烷基)取代；或者5

R 和X与所连接的氮原子一起构成选自以下的任选取代的杂环：吡咯烷基、哌啶基、哌

10 12 7 8 7 8

嗪基和高哌嗪基；其中所述杂环任选被R 、R 、RRN-或RRN-(C1-C4烷基)取代；

6

R′选自以下的基团：C1-C6烷基；C3-C8环烷基；(C1-C4烷氧基)-(C1-C4烷基)；任选取

7 8

代的芳基(C1-C4烷基)；Y′-(C1-C4烷基)，其中Y′-为杂环；和R′R′N-(C2-C4烷基)；

其中杂环Y′选自以下的基团：四氢呋喃基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基或奎宁环基；其中所述吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基或奎宁环基任选在N位被C1-C4烷基或任选取代的芳基(C1-C4烷基)取代；

7

R 为氢或C1-C6烷基；

8

R 为C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的芳基或任选取代的芳基(C1-C4烷基)；或者

7 8

R 和R 与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪

12

基和高哌嗪基；其中所述哌嗪基或高哌嗪基任选在N位被R 取代；

7

R′为氢或C1-C6烷基；

8

R′为C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的芳基或任选取代的芳基(C1-C4烷基)；或者

7 8

R′和R′与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、

12

哌嗪基和高哌嗪基；其中所述哌嗪基或高哌嗪基任选在N位被R ′取代；

10 11

R 和R 各自独立选自以下基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C5链烷酰氧基、苄氧基、苯甲酰氧基、二苯基甲氧基、三苯基甲氧基、任选取代的芳基和任选取代的芳基(C1-C4烷基)；

其中C1-C6烷基或C3-C8环烷基任选被选自以下的取代基单取代：羟基、保护的羧基、氨基甲酰基、硫代苄基和C1-C4硫代烷基；且其中所述苄氧基或所述苯甲酰氧基的苄基任选被一个或两个独立选自以下的取代基取代：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基、氰基、氨基甲酰基、氨基、单(C1-C4烷基)氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷基磺酰基氨基和硝基；

12 12

R 和R 各自独立选自以下基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C4烷氧基羰基、任选取代的芳氧基羰基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)和任选取代的芳酰基；

其中每个芳基独立地选自呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡啶基、噻唑基、 唑基、异 唑基、异噻唑基、咪唑基、吡唑基、苯基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、噻二唑基、 二唑基、萘基、茚满基、芴基、喹啉基、异喹啉基、苯并二 烷基、苯并呋喃基和苯并噻吩基；

其中任选的取代基各自独立地选自以下基团：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷硫基、羟基、硝基、卤代、羧基、氰基、C1-C4卤代烷基、C1-C4卤代烷氧基、氨基、羧酰胺基、氨基、单(C1-C4烷基)氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷基磺酰基氨基。

2.权利要求1的化合物，其中A为XNH-。

5 5

3.权利要求1的化合物，其中A为RXN-；其中R 选自以下基团：羟基、C1-C6烷基、C1-C4烷氧基羰基和苄基；其中X选自以下的基团：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、(C1-C4烷氧基)-(C1-C4烷基)、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)、任选取代的芳基(C3-C7环烷基)、任选取代的茚满-1-基、任选取代的茚满-2-基、任选取代的1，2，3，4-四氢

7 8 7 8

萘-1-基、任选取代的1，2，3，4-四氢萘-2-基、杂环Y、Y-(C1-C4烷基)、RRN-和RRN-(C2-C4烷基)。

5 5

4.权利要求1的化合物，其中A为RXN-，其中R 和X与所连接的氮原子一起构成选自

10 12 7 8

以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和高哌嗪基；其中所述杂环任选被R 、R 、RRN-或

7 8

RRN-(C1-C4烷基)取代。

5

5.权利要求4的化合物，其中R 和X与所连接的氮原子一起构成在4位任选被以下基团取代的哌啶基：羟基、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C4烷氧基、(C1-C4烷氧基)羰基、(羟基

7 8 7 8

(C2-C4烷氧基))-(C2-C4烷基)、RRN-、RRN-(C1-C4烷基)、二苯基甲基、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)或哌啶-1-基(C1-C4烷基)。

5

6.权利要求4的化合物，其中R 和X与所连接的氮原子一起构成在4位任选被以下基团取代的哌嗪基：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)、

7 8

α-甲基苄基、N-(C1-C5烷基)乙酰胺-2-基、N-(C3-C8环烷基)乙酰胺-2-基、RRN-或(C1-C4烷氧基)羰基。

5

7.权利要求4的化合物，其中R 和X与所连接的氮原子一起构成在4位任选被以下基团取代的高哌嗪基：C1-C4烷基、芳基或芳基(C1-C4烷基)。

5 5

8.权利要求1的化合物，其中A为RXN-，其中R 和X与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷酮基、哌啶酮基、2-(吡咯烷-1-基甲基)吡咯烷-1-基、1，2，3，4-四氢异喹啉-2-基。

4

9.权利要求1的化合物，其中R 为任选取代的芳基(C1-C4烷基)、任选取代的芳基(C2-C4烯基)或任选取代的芳基(C2-C4炔基)。

3

10.权利要求1的化合物，其中R 为以下结构：2

11.权利要求1的化合物，其中R 为氢。

5 5

12.权利要求1的化合物，其中A为RXN-，其中R 和X与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基和哌嗪基；其中所述杂环任选被以下基团取代：C1-C6烷基、

7 8 7 8

C3-C8环烷基、RRN-、RRN-(C1-C4烷基)、任选取代的芳基或任选取代的芳基(C1-C4烷基)。

13.权利要求1的化合物，其中A为XNH-，其中X为任选取代的芳基(C1-C4烷基)。

14.权利要求13的化合物，其中：

4

R 为任选取代的芳基(C1-C4烷基)、任选取代的芳基(C2-C4烯基)或任选取代的芳基(C2-C4炔基)；

3

R 为以下结构：

和

2

R 为氢。

15.权利要求1的化合物，其中整数n′为1。

16.权利要求1的化合物，其中整数n′为2。

17.权利要求1的化合物或其药学上可接受的酸加成盐，所述化合物具有下式：其中A’为4-(哌啶-1-基)哌啶-1-基。

18.权利要求1的化合物或其药学上可接受的酸加成盐，所述化合物具有下式：其中A’为4-[2-(哌啶-1-基)乙基]哌啶-1-基。

19.一种药用制剂，该制剂包含权利要求1-18中任一项的化合物以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

20.权利要求1-18中任一项的化合物在制备用于治疗需要治疗的哺乳动物的对后叶加压素V1a受体拮抗作用敏感的疾病状态的药物中的应用。

21.权利要求20的应用，其中所述疾病状态选自：早产、疼痛、炎性肠病、充血性心力衰竭、血栓形成、强迫症、攻击性疾病、焦虑症、抑郁症、精神分裂症、痴呆、呕吐及它们的组合。

说明书

β-内酰胺后叶加压素V1a拮抗剂

发明领域

[0001] 本发明涉及新的2-(氮杂环丁-2-酮-1-基)链烷双酸衍生物作为后叶加压素V1a受体拮抗剂。本发明还涉及需要减缓后叶加压素V1a受体相关性疾病状态以及对后叶加压素V1a受体拮抗作用敏感的疾病状态的哺乳动物的治疗方法。

[0002] 发明背景

[0003] 后叶加压素是一种产生于下丘脑的垂体神经部神经肽，它参与水代谢体内平衡、肾功能、心血管功能介导作用、疼痛耐受力的非阿片类介导作用以及哺乳动物的温度调节。此外，由于经由垂体后叶释放进入循环，后叶加压素在脑中作为神经递质。已经鉴定出三种后叶加压素受体亚型，命名为V1a、V1b和V2。已经克隆出人类V1a受体(Thibonnier等，The Journal of Biological Chemistry，269(5)，3304-3310(1994))，并且通过放射性配体结合技术证实存在于血管平滑肌细胞、肝细胞、血小板、淋巴细胞和单核细胞、II型肺泡细胞、肾上腺皮质、脑、生殖器官、视网膜上皮细胞、肾的系膜细胞以及A10、A7r5、3T3和WRK-1细胞系(Thibonnier，Neuroendocrinology of the Concepts in Neurosurgery Series 5，(Selman，W.主编)，19-30，Williams and Wilkins，Baltimore，(1993))。

[0004] 对后叶加压素的结构修饰已经提供了大量的后叶加压素激动剂(Sawyer，Pharmacol.Reviews，13，255(1961))。另外，已经设计出多种有效的选择性后叶加压素肽拮抗剂(Lazslo等，Pharmacological Reviews，43，73-108(1991)；Mah和Hofbauer，Drugs of the Future，12，1055-1070(1987)；Manning和 Sawyer，Trends in Neuroscience，7，8-9(1984))。但是，由于它们的低口服生物利用度和短半衰期限制了这些类似物的治疗效果。虽然已经发现新结构类型的非肽基后叶加压素V1a拮抗剂(Yamamura等，Science，
275，572-574(1991)；Serradiel-Le Gal 等，Journal of Clinical Investigation，
92，224-231(1993)；Serradiel-Le Gal 等，Biochemical Pharmacology，47(4)，
633-641(1994))，但作为临床候选药还有待鉴定。

[0005] 已知通常结构类型的取代的2-(氮杂环丁-2-酮-1-基)乙酸酯和乙酰胺为制备β-内酰胺抗生素的合成中间体(参见例如美国专利4,751,299)。

[0006] 发明概述

[0007] 已经发现常规类型2-(氮杂环丁-2-酮-1-基)链烷双酸衍生物的某些化合物对后叶加压素V1a受体产生活性。本发明介绍的新的2-(氮杂环丁-2-酮-1-基)链烷双酸酯和双酰胺可用于治疗哺乳动物的后叶加压素V1a受体相关性疾病状态以及对后叶加压素V1a受体拮抗作用敏感的疾病状态。

[0008] 本发明还介绍了治疗需要这种治疗的哺乳动物的对后叶加压素V1a受体拮抗作用敏感的疾病状态的方法，该方法包括给予哺乳动物药学有效量这样的2-(氮杂环丁-2-酮-1-基)链烷双酸衍生物的步骤。

[0009] 具体地讲，本发明介绍了下式I化合物及其水合物、溶剂化物和药学上可接受的酸加成盐：

[0010]

[0011] 其中：

[0012] n为整数0-2；6

[0013] A为RO-、单取代的氨基或双取代的氨基；6

[0014] A′为R′O-，单取代的氨基或双取代的氨基；2

[0015] R 为氢或C1-C6烷基；3

[0016] R 为选自以下的结构：

[0017]

[0018] R4为C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8环烷基、C3-C9环烯基、柠檬烯基、蒎烯基、C1-C3链烷酰基、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)、任选取代的芳基(C2-C4烯基)或任选取代的芳基(C2-C4炔基)；

[0019] R6和R6′各自独立选自以下基团：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、(C1-C4烷氧基)-(C1-C4烷基)、任选取代的芳基(C1-C4烷基)、第一种杂环Y-、Y-(C1-C4烷基)、第二种杂环Y′-、7 8 7 8
Y′(C1-C4烷基)、RRN-(C2-C4烷基)和R′R′N-(C2-C4烷基)；

[0020] 其中第一种杂环Y和第二种杂环Y′各自独立选自以下基团：四氢呋喃基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基或奎宁环基；其中所述吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基或奎宁环基任选在N位被C1-C4烷基或任选取代的芳基(C1-C4烷基)取代；

[0021] R7为氢或C1-C6烷基；

[0022] R8为C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的芳基或任选取代的芳基(C1-C4烷基)；或者

[0023] R7和R8与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、12
哌嗪基和高哌嗪基；其中所述哌嗪基或高哌嗪基任选在N位被R 取代；

[0024] R7′为氢或C1-C6烷基；

[0025] R8′为C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的芳基或任选取代的芳基(C1-C4烷基)；或者

[0026] R7′和R8′与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、吗啉12
基、哌嗪基和高哌嗪基；其中所述哌嗪基或高哌嗪基任选在N位被R ′取代；

[0027] R10和R11各自独立选自以下基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C5链烷酰氧基、苄氧基、苯甲酰氧基、二苯基甲氧基、三苯基甲氧基、任选取代的芳基和任选取代的芳基(C1-C4烷基)；

[0028] 其中C1-C6烷基或C3-C8环烷基任选被选自以下的基团单取代：羟基、保护的羧基保护、氨基甲酰基、硫代苄基和C1-C4硫代烷基；且

[0029] 其中所述苄氧基或所述苯甲酰氧基的苄基任选被一个或两个独立选自以下的取代基取代：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基、氰基、氨基甲酰基、氨基、单(C1-C4烷基)氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷基磺酰基氨基和硝基；

[0030] R12和R12′各自独立选自以下基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C4烷氧基羰基、任选取代的芳氧基羰基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)和任选取代的芳酰基；

[0031] 前提条件是：

[0032] a)当A为R6O-时，则A′不为苄基氨基或取代的苄基氨基；

[0033] b)当A为R6O-且整数n为0时，则A′不为R6′O-；

[0034] c)当A为单取代的氨基且整数n为0时，则A′不为苯氨基、取代的苯氨基、苄基氨基或取代的苄基氨基。

[0035] 另外，本发明介绍了下式II的化合物及其水合物、溶剂化物和药学上可接受的酸加成盐：

[0036]

[0037] 其中：

[0038] n′为整数1-3；

[0039] A为R6O-、单取代的氨基或双取代的氨基；

[0040] R2为氢或C1-C6烷基；

[0041] R3为选自以下的结构：

[0042]4

[0043] R 为C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8环烷基、C3-C9环烯基、柠檬烯基、蒎烯基、C1-C3链烷酰基、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)、任选取代的芳基(卤代C1-C4烷基)、任选取代的芳基(烷氧基C1-C4烷基)、任选取代的芳基(C2-C4烯基)、任选取代的芳基(卤代C2-C4烯基)或任选取代的芳基(C2-C4炔基)；6

[0044] R 选自以下的基团：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、(C1-C4烷氧基)-(C1-C4烷基)、任选7 8
取代的芳基(C1-C4烷基)、第一种杂环Y-、Y-(C1-C4烷基)和RRN-(C2-C4烷基)；

[0045] 其中第一种杂环Y选自以下的基团：四氢呋喃基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基或奎宁环基；其中所述吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基或奎宁环基任选在N位被C1-C4烷基或任选取代的芳基(C1-C4烷基)取代；6

[0046] R′选自以下的基团：C1-C6烷基；C3-C8环烷基；(C1-C4烷氧基)-(C1-C4烷基)；任7 8
选取代的芳基(C1-C4烷基)；Y′-(C1-C4烷基)，其中Y′-为第二种杂环；R′R′N-(C2-C4烷基)；

[0047] 其中第二种杂环Y′选自以下的基团：四氢呋喃基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基或奎宁环基；其中所述吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基或奎宁环基任选在N位被C1-C4烷基或任选取代的芳基(C1-C4烷基)取代；7

[0048] R 为氢或C1-C6烷基；8

[0049] R 为C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的芳基或任选取代的芳基(C1-C4烷基)；或者
7 8

[0050] R 和R 与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、12
哌嗪基和高哌嗪基；其中所述哌嗪基或高哌嗪基任选在N位被R 取代；
7

[0051] R′为氢或C1-C6烷基；8

[0052] R′为C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的芳基或任选取代的芳基(C1-C4烷基)；或者
7 8

[0053] R′和R′与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、吗啉12
基、哌嗪基和高哌嗪基；其中所述哌嗪基或高哌嗪基任选在N位被R ′取代；
10 11

[0054] R 和R 各自独立选自以下基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C5链烷酰氧基、苄氧基、苯甲酰氧基、二苯基甲氧基、三苯基甲氧基、任选取代的芳基和任选取代的芳基(C1-C4烷基)；

[0055] 其中C1-C6烷基或C3-C8环烷基任选被选自以下的基团单取代：羟基、保护的羧基、氨基甲酰基、硫代苄基和C1-C4硫代烷基；且

[0056] 其中所述苄氧基或所述苯甲酰氧基的苄基任选被一个或两个独立选自以下的取代基取代：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基、氰基、氨基甲酰基、氨基、单(C1-C4烷基)氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷基磺酰基氨基和硝基；

[0057] R12和R12′各自独立选自以下基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C4烷氧基羰基、任选取代的芳氧基羰基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)和任选取代的芳酰基。

[0058] 式I和II的示例化合物，其中A为非环状双取代的氨基。

[0059] 式I和II的示例化合物，其中A为环状双取代的氨基。

[0060] 式I和II的示例化合物，其中A为XNH-结构的单取代氨基，其中X选自以下的基团：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、(C1-C4烷氧基)-(C1-C4烷基)、任选取代的芳基、任选取代的芳7 8 7 8
基(C1-C4烷基)、第一种杂环Y、Y-(C1-C4烷基)、RRN-和RRN-(C2-C4烷基)。

[0061] 式I和II的示例化合物，其中A为R5XN-结构的双取代氨基；其中R5选自以下的基团：羟基、C1-C6烷基、C1-C4烷氧基羰基和苄基；且其中X选自以下的基团：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、(C1-C4烷氧基)-(C1-C4烷基)、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)、第7 8 7 8
一种杂环Y、Y-(C1-C4烷基)、RRN-和RRN-(C2-C4烷基)。

[0062] 式I和II的示例化合物，其中A为R5XN-结构的双取代氨基，其中R5和X与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和高哌嗪基；其中所述杂10 12 7 8 7 8
换任选被以上定义的R 、R 、RRN-或RRN-(C1-C4烷基)取代。

[0063] 式I和II的示例化合物，其中R5和X与所连接的氮原子一起构成在4位任选被以下基团取代的哌啶基：羟基、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C4烷氧基、(C1-C4烷氧基)羰7 8 7 8
基、(羟基(C2-C4烷氧基))-(C2-C4烷基)、RRN-、RRN-(C1-C4烷基)、二苯基甲基、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)或哌啶-1-基(C1-C4烷基)。

[0064] 式I和II的示例化合物，其中R5和X与所连接的氮原子一起构成在4位任选被以下基团取代的哌嗪基：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)、α-甲基苄基、N-(C1-C5烷基)乙酰胺-2-基、N-(C3-C8环烷基)乙酰胺-2-基、7 8
RRN-或(C1-C4烷氧基)羰基。

[0065] 式I和II的示例化合物，其中R5和X与所连接的氮原子一起构成在4位任选被以下基团取代的高哌嗪基：C1-C4烷基、芳基或芳基(C1-C4烷基)。

[0066] 式I和II的示例化合物，其中A为R5XN-结构的双取代氨基，其中R5和X与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷酮基、哌啶酮基、2-(吡咯烷-1-基甲基)吡咯烷-1-基、1，2，3，4-四氢异喹啉-2-基。

[0067] 式I的示例化合物，其中A′为非环状双取代的氨基。

[0068] 式I的示例化合物，其中A′为环状双取代的氨基。

[0069] 式I的示例化合物，其中A′为X′NH-结构的单取代氨基；其中X′选自以下基团：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、(C1-C4烷氧基)-(C1-C4烷基)、任选取代的芳基、任选取代的芳7 8 7 8
基(C1-C4烷基)、第二种杂环Y′、Y′-(C1-C4烷基)、R′R′N-和R′R′N-(C2-C4烷基)。

[0070] 式I的示例化合物，其中A′为R5′X′N-结构的双取代氨基；其中R5′选自以下的基团：羟基、C1-C6烷基、C1-C4烷氧基羰基和苄基；且X′选自以下基团：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、(C1-C4烷氧基)-(C1-C4烷基)、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)、第7 8 7 8
二种杂环Y′、Y′-(C1-C4烷基)、R′R′N-和R′R′N-(C2-C4烷基)。

[0071] 式I的示例化合物，其中A′为R5′X′N-结构的双取代氨基，其中R5′和X′与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和高哌嗪基；其中所10 12 7 8 7 8
述杂环任选被以上定义的R 、R ′、R′R′N-或R′R′N-(C1-C4烷基)取代。

[0072] 式I的示例化合物，其中R5′和X′与所连接的氮原子一起构成在4位任选被以下基团取代的哌啶基：羟基、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C4烷氧基、(C1-C4烷氧基)羰基、7 8 7 8
(羟基(C1-C4烷氧基))-(C1-C4烷基)、R′R′N-、R′R′N-(C1-C4烷基)、二苯基甲基、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)或哌啶-1-基(C1-C4烷基)。

[0073] 式I的示例化合物，其中R5′和X′与所连接的氮原子一起构成在4位任选被以下基团取代的哌嗪基：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)、α-甲基苄基、N-(C1-C5烷基)乙酰胺-2-基、N-(C3-C8环烷基)乙酰胺-2-基、7 8
R′R′N-或(C1-C4烷氧基)羰基。

[0074] 式I的示例化合物，其中R5′和X′与所连接的氮原子一起构成在4位任选被以下基团取代的高哌嗪基：C1-C4烷基、芳基或芳基(C1-C4烷基)。

[0075] 式I的示例化合物，其中A′为R5′X′N-结构的双取代氨基，其中R5′和X′与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷酮基、哌啶酮基、2-(吡咯烷-1-基甲基)吡咯烷-1-基、1，2，3，4-四氢异喹啉-2-基。

[0076] 式I和II的示例化合物，其中R4为任选取代的芳基(C1-C4烷基)、任选取代的芳基(C2-C4烯基)或任选取代的芳基(C2-C4炔基)。

[0077] 式I和II的示例化合物，其中R3为以下结构：

[0078]

[0079] 式I和II的示例化合物，其中R2为氢。

[0080] 式I和II的示例化合物，其中A为R5XN-结构的双取代氨基，其中R5和X与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基和哌嗪基；其中所述杂环任选被以下基团取代：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、R7R8N-、R7R8N-(C1-C4烷基)、任选取代的芳基或任选取代的芳基(C1-C4烷基)。

[0081] 式I和II的示例化合物，其中A为XNH-结构的单取代氨基，其中X为任选取代的芳基(C1-C4烷基)。

[0082] 式I和II的示例化合物，其中：

[0083] R4为任选取代的芳基(C1-C4烷基)、任选取代的芳基(C2-C4烯基)或任选取代的芳基(C2-C4炔基)；

[0084] R3为以下结构：

[0085]

[0086] R2为氢。

[0087] 式I的示例化合物，其中A′为R6′O-，其中R6′为C1-C6烷基。

[0088] 式I的示例化合物，其中A′为X′NH-结构的单取代氨基，其中X′为任选取代的芳基(C1-C4烷基)、第二种杂环Y′、Y′-(C1-C4烷基)、R7′R8′N-或R7′R8′N-(C2-C4烷基)。

[0089] 式I的示例化合物，其中X′为R7′R8′N-或R7′R8′N-(C2-C4烷基)。

[0090] 式I的示例化合物，其中X′为第二种杂环Y′或Y′-(C1-C4烷基)，其中第二种杂环Y′选自以下的基团：吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基和高哌嗪基，其中所述第二种杂环在N位任选被任选取代的芳基(C1-C4烷基)取代。

[0091] 式I和II的示例化合物，其中R8′选自以下基团：C1-C6烷基、C3-C8环烷基和芳基(C1-C4烷基)。

[0092] 式I和II的示例化合物，其中R7′和R8′与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基和高哌嗪基，其中所述哌嗪基或高哌嗪基在4位任选被(C1-C4烷基)、(C3-C8环烷基)或芳基(C1-C4烷基)取代。

[0093] 式I的示例化合物，其中A′为R5′X′N-结构的双取代氨基。

[0094] 式I的示例化合物，其中R5′为芳基(C1-C4烷基)，X′选自以下的基团：任选取代的芳基(C1-C4烷基)、第二种杂环Y′、Y′-(C1-C4烷基)、R7′R8′N-和R7′R8′N-(C2-C4烷基)。

[0095] 式I和II的示例化合物，其中R8′选自以下基团：C1-C6烷基、C3-C8环烷基和芳基(C1-C4烷基)。

[0096] 式I和II的示例化合物，其中R7′和R8′与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基和高哌嗪基，其中所述哌嗪基或高哌嗪基在4位任选被(C1-C4烷基)、(C3-C8环烷基)或芳基(C1-C4烷基)取代。

[0097] 式I的示例化合物，其中R5′和X′与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、哌嗪-1-基和高哌嗪-1-基；其中所述杂环被以下基团取代：
C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)、第二种杂环Y′、Y′-(C1-C4烷基)、R7′R8′N-、R7′R8′N-(C1-C4烷基)或R7′R8′N-C(O)-(C1-C4烷基)。

[0098] 式I的示例化合物，其中R5′和X′与所连接的氮原子一起构成选自哌啶-1-基和哌嗪-1-基的杂环，其中所述杂环被以下基团取代：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)、R7′R8′N-或R7′R8′N-(C1-C4烷基)。

[0099] 式I和II的示例化合物，其中R7′和R8′与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基和高哌嗪基，其中所述哌嗪基或高哌嗪基在4位任选被(C1-C4烷基)、(C3-C8环烷基)或芳基(C1-C4烷基)取代。

[0100] 式I的示例化合物，其中R5′和X′与所连接的氮原子一起构成哌嗪-1-基，其中所述哌嗪-1-基被C1-C6烷基、C3-C8环烷基或芳基(C1-C4烷基)取代。

[0101] 式I的示例化合物，其中整数n为1。

[0102] 式I的示例化合物，其中整数n为2。

[0103] 式II的示例化合物，其中整数n′为1。

[0104] 式II的示例化合物，其中整数n′为2。

[0105] 本发明还介绍了包含选自以上的化合物以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药用组合物。

[0106] 用于以上结构式的常规化学术语具有它们的通常的含义。举例来讲，术语“烷基”包括这样的基团：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、3-戊基、新戊基、己基、庚基、辛基等。

[0107] 术语“环烷基”包括这样的基团：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等。

[0108] 术语“烯基”包括这样的基团：乙烯基、丙烯基、2-丁烯基等。

[0109] 术语“炔基”包括这样的基团：乙炔基、丙炔基、1-丁炔基等。

[0110] 术语“芳基”是指芳族环或杂芳族环，包括这样的基团：呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡啶基、噻唑基、 唑基、异 唑基、异噻唑基、咪唑基、吡唑基、苯基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、噻二唑基、 二唑基、萘基、茚满基、芴基、喹啉基、异喹啉基、苯并二 烷基、苯并呋喃基、苯并噻吩基等。

[0111] 术语“任选取代的”是指一个或多个、优选1-3个氢原子被一个或多个取代基取代。这样的取代基包括这样的基团：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷硫基、羟基、硝基、卤代、羧基、氰基、C1-C4卤代烷基、C1-C4卤代烷氧基、氨基、甲酰胺基、氨基、单(C1-C4烷基)氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷基磺酰基氨基等。

[0112] 术语“杂环”是指含一个或多个杂原子(例如氮、氧、硫等)的饱和环状结构，包括这样的基团：四氢呋喃基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基、奎宁环基等。

[0113] 术语“烷氧基”包括这样的基团：甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、叔丁氧基等。

[0114] 术语“酰基”和“链烷酰基”包括这样的基团：甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基等。

[0115] 术语“卤代”是指氟、氯、溴和碘。

[0116] 术语“链烷酰氧基”包括这样的基团：甲酰氧基、乙酰氧基、正丙酰氧基、正丁酰氧基、新戊酰氧基以及类似低级链烷酰氧基。

[0117] 术语“任选取代的C1-C4烷基”和“任选取代的C2-C4烯基”是指任选被最多两个甲基或C1-C4烷氧基羰基取代的烷基或烯基链。

[0118] 术语“(C1-C4烷基)”用于例如“芳基(C1-C4烷基)”、“(C1-C4烷氧基)-(C1-C4烷基)”等时是指含例如芳基、C1-C4烷氧基等取代基的1-4个碳原子的饱和直链或支链二价烷基链，包括例如这样的基团：苄基、苯乙基、苯丙基、α-甲基苄基、甲氧基甲基、乙氧基乙基等。

[0119] 术语“任选取代的苯基”是指任选被一个或两个独立选自以下的取代基取代的苯基：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羟基、卤代、硝基、三氟甲基、亚磺酰氨基、氰基、氨基甲酰基、氨基、单(C1-C4烷基)氨基、二(C1-C4烷基)氨基、C1-C4烷基磺酰基氨基和吲哚-2-基。

[0120] 术语“氨基保护基团”是指在制备以及随后的反应中用于保护β-内酰胺环中氮的胺保护基团。这样的基团实例有苄基、4-甲氧基苄基、4-甲氧基苯基或三烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基)。

[0121] 术语“保护的羧基”是指被通常用于临时封闭酸性羧基的常规保护基团保护或封闭的羧基。这样的基团实例包括低级烷基(例如叔丁基)、卤代低级烷基(例如2-碘乙基和2，2，2-三氯乙基)、苄基、取代的苄基(例如4-甲氧基苄基和4-硝基苄基)、二苯基甲基、烯基(例如烯丙基)、三烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基和叔丁基二乙基甲硅烷基)以及类似的羧基保护基团。

[0122] 用于本发明说明书的术语“拮抗剂”是指完全或部分拮抗剂。后叶加压素V1a受体的部分拮抗剂化合物必须具有足够的拮抗活性，从而以可接受的剂量抑制后叶加压素或后叶加压素激动剂的作用。虽然任何固有活性的部分拮抗剂都是有用，但是优选至少约50％拮抗作用的部分拮抗剂，更优选至少约80％拮抗作用的部分拮抗剂。最优选后叶加压素V1a受体的完全拮抗剂。

[0123] 发明详述

[0124] 优选式I或式II的某些类型的本发明化合物。在以下的段落中介绍这样的化合物的示例类型。

[0125] 式I的一类化合物，其中：

[0126] (aa)A为R6O-；

[0127] (ab)R6为C1-C6烷基；

[0128] (ac)R6为任选取代的芳基(C1-C4烷基)；

[0129] (ad)A为XNH-结构的单取代氨基；

[0130] (ae)A为R5XN-结构的双取代氨基；

[0131] (af)A′为X′NH-结构的单取代氨基；

[0132] (ag)A′为R5′X′N-结构的双取代氨基；

[0133] (ah)A′为R6′O-；

[0134] (ai)R6′为C1-C6烷基；

[0135] (aj)R6′为任选取代的芳基(C1-C4烷基)；

[0136] (ak)X为任选取代的芳基(C1-C4烷基)；

[0137] (al)X为R7R8N-(C1-C4烷基)；

[0138] (am)R7和R8与所连接的氮原子一起构成杂环；

[0139] (an)R5和X与所连接的氮原子一起构成杂环；

[0140] (ao)所述杂环任选被以下基团取代：任选取代的芳基(C1-C4烷基)，第一种杂环Y或C3-C8环烷基；

[0141] (ap)R2为氢；

[0142] (aq)R2为C1-C6烷基；

[0143] (ar)R2为C1-C2烷基；

[0144] (as)R3为4-取代的 唑烷-2-酮-3-基；

[0145] (at)R3为4，5-二取代的 唑烷-2-酮-3-基；

[0146] (au)R3为2-取代的 唑烷-4-酮-3-基；

[0147] (av)R3为2-取代的咪唑啉-4-酮-3-基；

[0148] (aw)R3为1，2-二取代的咪唑啉-4-酮-3-基；

[0149] (ax)R3为5-取代的咪唑啉-2-酮-1-基；

[0150] (ay)R3为4，5-二取代的咪唑啉-4-酮-1-基；

[0151] (az)R4为任选取代的2-芳基乙-1-基；

[0152] (ba)R4为任选取代的2-芳基乙烯-1-基；

[0153] (bb)R5′为苄基；

[0154] (bc)X′为杂环Y；

[0155] (bd)X为任选取代的芳基(C1-C4烷基)；

[0156] (be)芳基为任选取代的苯基；

[0157] (bf)X′为R7′R8′N-(C1-C4烷基)；

[0158] (bg)X′为R7′R8′N-；

[0159] (bh)R7′为C1-C6烷基；

[0160] (bi)R8′为C1-C6烷基；

[0161] (bj)R7和R8与所连接的氮原子一起构成杂环；

[0162] (bk)R7和R8相同且为C1-C6烷基；

[0163] (bl)R5′和X′与它们所连接的氮一起构成吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基；其中所述7 8
吡咯烷基、哌啶基或哌嗪基任选被第二种杂环Y′或RRN-(C1-C4烷基)取代；

[0164] (bm)R5′和X′与它们所连接的氮一起构成在4位任选被以下基团取代的哌啶基：羟基、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C4烷氧基、(C1-C4烷氧基)羰基、(羟基(C1-C4烷氧7 8 7 8
基))-(C1-C4烷基)、RRN-、RRN-(C1-C4烷基)、苯基、苯基(C1-C4烷基)、任选取代的苯基(C1-C4烷基)、呋喃基(C1-C4烷基)、吡啶基(C1-C4烷基)、噻吩基(C1-C4烷基)或哌啶-1-基(C1-C4烷基)；

[0165] (bn)R5′和X′与它们所连接的氮-起构成在4位任选被以下基团取代的哌嗪基：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的苯基、任选取代的苯基(C1-C4烷基)、N-(C1-C5烷基)
7 8
乙酰胺-2-基、N-(C3-C8环烷基)乙酰胺-2-基、RRN-或(C1-C4烷氧基)羰基；

[0166] (bo)R5′和X′与它们所连接的氮一起构成在4位任选被以下基团取代的高哌嗪基：C1-C4烷基、苯基或苯基(C1-C4烷基)。

[0167] 应当理解的是上述各类化合物可以组合构成其它示例类型的化合物。所述各类型组合的例子可以为这样一类化合物，其中A为XNH-结构的单取代氨基，其中X为任选取代5 5
的芳基(C1-C4烷基)，且A′为R′X′N-结构的双取代氨基，其中R′和X′与所连接的氮原子一起构成杂环，例如哌啶、哌嗪等。上述各类化合物的进一步的组合包括在本发明范围内。

[0168] 进一步的示例类型的化合物为下式III的化合物：

[0169]

[0170] 其中：

[0171] Ar为任选取代的苯基、任选取代的吡啶基、任选取代的呋喃基或任选取代的噻吩基；

[0172] R2为氢；

[0173] A为XNH-；

[0174] A′为X′NH-；

[0175] A′为R5′X′N-；

[0176] n为0、1或2；

[0177] X为任选取代的芳基(C1-C4烷基)，且芳基为取代的苯基；

[0178] A′为R6′O-；

[0179] R6′为C1-C6烷基；

[0180] X′为R7′R8′N-；

[0181] X′为任选取代的芳基(C1-C4烷基)；

[0182] X′为第二种杂环Y′；

[0183] R5′和X′与所连接的氮原子一起构成哌啶基、哌嗪基或高哌嗪基；其中所述哌啶基，哌嗪基或高哌嗪基任选被以下基团取代：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、第二种杂环Y′、任选7 8 7 8 7 8
取代的芳基(C1-C4烷基)、RRN-、RRN-(C1-C4烷基)或RRN-C(O)-(C1-C4烷基)；

[0184] R8′为C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)；

[0185] R7′和R8′与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、吗啉基和哌嗪基；其中所述哌嗪基在4位任选被C1-C4烷基取代。

[0186] 进一步的示例类型的化合物为下式IV的化合物：

[0187]

[0188] 其中：

[0189] Ar为任选取代的苯基、任选取代的吡啶基、任选取代的呋喃基或任选取代的噻吩基；

[0190] R2为氢；

[0191] A为XNH-；

[0192] n′为1、2或3；

[0193] X为任选取代的芳基(C1-C4烷基)，芳基为取代的苯基；

[0194] R6′为

[0195] R8′为C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳基(C1-C4烷基)；

[0196] R7′和R8′与所连接的氮原子一起构成选自以下的杂环：吡咯烷基、哌啶基、吗啉基和哌嗪基；其中所述哌嗪基在4位任选被C1-C4烷基取代。

[0197] 以下表1-5为属于本发明范围的示例化合物。

[0198]

[0199]

[0200]

[0201]

[0202]

[0203]

[0204]

[0205] 本发明化合物包含氮杂环丁酮核，所述核在3位和4位有不对称碳原子，如以下结构图接说明：

[0206]

[0207] 因此，本发明化合物存在单一的非对映异构体、各种非对映异构体的混合物或外消旋混合物，它们都是有用的并且为本发明的一部分。优选本发明的氮杂环丁酮核以单一的非对映体形式存在。最优选氮杂环丁酮核为(3S，4R)-非对映异构体。

[0208] 应当理解的是除了A＝A′且n＝0时外，承载R2的碳原子也不对称。此外，当R33
为4-取代的 唑烷-2-酮-3-基时，该环的4位是不对称的。另外，当R 为2，5-二取代的 唑烷-4-酮-3-基或1，2，5-三取代的咪唑啉-4-酮-3-基时，以上环的2位和5位碳
3 14 15
原子是不对称的。最后，当R 为琥珀酰亚胺基且R 和R 之一为氢时，承载非氢取代基的碳也是不对称的。虽然本发明包括具有所有立体化学纯度组合的化合物，但是应当理解在许多情况下，至少有一个上述手性中心以单一的绝对构型存在。

[0209] 本发明化合物可用于后叶加压素V1a受体拮抗作用的方法。这样的拮抗作用可用于治疗哺乳动物的与该受体有关的各种疾病。通过给予本发明化合物治疗的哺乳动物优选为人。

[0210] 由于某些本发明化合物为胺，它们为碱性，因此与任何无机酸和有机酸反应形成药学上可接受的酸加成盐。因为本发明化合物某些游离胺在室温下通常为油状，所以优选将游离胺转化为它们的药学上可接受的酸加成盐，使得容易运输和用药，因为后者在室温通常为固体。通常用于形成这样的盐的酸包括无机酸(例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、磷酸等)以及有机酸(例如对甲苯磺酸、甲磺酸、乙二酸、对溴苯磺酸、碳酸、丁二酸、柠檬酸、苯甲酸、乙酸等)。由此形成的药学上可接受的盐的例子有硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、酸式亚硫酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、乙二酸盐、丙二酸盐、丁二酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、延胡索酸盐、顺丁烯二酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯基乙酸盐、苯基丙酸盐、苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、β-羟基丁酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、杏仁酸盐等。优选的药学上可接受的盐为上述与盐酸、三氟乙酸、顺丁烯二酸或富马酸形成的盐。

[0211] 式I和II的2-(氮杂环丁酮-1-基)链烷双酸酯和双酰胺通过本领域众所周知的合成方法制备。作为式I化合物的例子，2-(氮杂环丁酮-1-基)链烷双酸酯如下获得：如合成流程I，适当取代的乙酸衍生物(i)和亚胺酯(ii)的2+2环加成反应，其中Z为离
2 3 4
去基团，整数n以及A、A′、R、R 和R 部分同前述定义。在下文中使用的术语“离去基团”是指存在于活性碳原子上并且可以被亲核试剂置换的取代基，例如卤代、酰氧基、苯甲酰氧基等。合成流程I介绍的化学过程可用于含酯、硫酯或酰胺部分的亚胺(ii)。

[0212] 合成流程I

[0213]

[0214] 美国专利4,665,171和4,751,299综合介绍了合适的亚胺(ii)和大多数所需的乙酰卤或乙酸酐(i)的制备方法以及环加成方法，通过引用结合到本文。式II化合物的类似合成可以用合适的烷氧基取代的氨基酸亚胺按照此方法完成。

[0215] 上述需要R3为4-取代的 唑烷-2-酮-3-基或1，4，5-三取代的咪唑啉-2-酮-3-基的式I和式II化合物用相应的(4-取代的 唑烷-2-酮-3-基)-或(1，
4，5-三取代的咪唑啉-2-酮-3-基)-乙酰卤或乙酸酐制备。所述酰基卤或酸酐可由适当取代的甘氨酸获得。首先将甘氨酸转化为氨基甲酸酯，然后还原获得相应的醇。再将醇环化为4-取代的 唑烷-2-酮，随后用卤代乙酸酯将其N-烷基化。水解所得酯，再将获得的酸转化为乙酰卤或乙酸酐(i)。

[0216] 上述需 要R3为2，5-二取 代的 唑烷-4-酮-3-基 或1，2，5-三取 代的咪唑啉-4-酮-3-基的本发明化合物可以分别用相应的(2，5-二取代的 唑
烷-4-酮-3-基)-或(1，2，5-三取代的咪唑啉-4-酮-3-基)乙酰氯或乙酸酐制备。美国专利4,772,694介绍了制备这些试剂的化学过程，通过引用结合到本文。简单地讲，所需的 唑烷酮或咪唑啉酮分别用α-羟基酸或α-氨基酸获得。咪唑酮如下制备：将α-氨
11 10
基酸(R )-CH(NH2)CO2H转化为氨基被保护的酰胺，然后使酰胺与醛(R )-CHO在酸存在下
10 11
缩合形成3-保护的咪唑啉-4-酮，其中R 和R 的定义同上。1位可以用合适的试剂官能
12 12
化以引入R ，然后脱去3位的保护，其中R 的定义同上。然后将咪唑啉-4-酮环用卤代乙酸酯烷基化，将酯脱酯化，再将所得乙酸转化为所需的酰基卤或酸酐(i)。所需的 唑烷酮
11
用相应的α-羟基酸(R )-CH(OH)CO2H按照类似的方法制备。

[0217] 需要R3为琥珀酰亚胺基的本发明化合物用相应的2-(琥珀酰亚胺基)乙酰卤或乙酸酐制备。美国专利4,734,498介绍了制备这些试剂的化学过程，通过引用结合到本文。10 11
简单地讲，这些试剂用酒石酸制备，或者R 和R 之一为氢时，用苹果酸制备。酒石酸被酰化或烷基化，相应的二酰基或二-O-烷基酒石酸用酸酐处理形成琥珀酸酐，琥珀酸酐与甘氨酸的酯反应，首先生成非环状一酰胺酯，然后将其环化为3，4-二取代的琥珀酰亚胺基乙酸酯。将酯基团脱酯化，再将所得酸转化为相应的酰基卤或酸酐(i)。用苹果酸生成琥珀酸酐，然后如上所述生成琥珀酰亚胺获得单取代的琥珀酰亚胺基乙酰卤或乙酸酐。

[0218] 需要R3为N-取代的胺或N′-取代的脲的本发明化合物可以用相应的苯二甲酰亚氨基保护的3-氨基类似物制备。邻苯二甲酰亚胺保护基团可以用常规方法脱去，例如用肼处理等方法。一旦脱去保护，所得胺可以用任何一种烷基、环烷基的卤化物和硫酸酯烷基化，例如甲基碘、异丙基溴、硫酸二乙酯、环丙基甲基溴、环戊基碘等。这样的胺也可以用酰基卤、酸酐、异氰酸酯、异硫氰酸酯(例如乙酰基氯、丙酸酐、异氰酸甲酯、异硫氰酸3-三氟甲基苯基酯等)酰化。

[0219] 除其它碱外，用于合成流程I的碱包括脂族叔胺(例如三甲胺和三乙胺)、环状叔胺(例如N-甲基哌啶和N-甲基吗啉)、芳族胺(例如吡啶和二甲基砒啶)以及其它有机碱(例如1，8-二氮杂二环[5，4，0]十一碳-7-烯(DBU)。

[0220] 除其它溶剂外，可用于合成流程I的反应中的溶剂包括二 烷、四氢呋喃、乙醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、苯、甲苯、乙腈、二甲亚砜和N，N-二甲基甲酰胺。

[0221] 或者，式I和II的化合物可以如用于式I化合物的合成流程II说明经过N-C(4)2 3 4
环化反应制备：由β-羟基酰胺iii(其中R、R、R、A和A′的定义同前)按照文献中的方法环化反应(Townsend和Nguyen，J.Am.Chem.Soc.1981，103，4582；Miller和Mattingly，Tetra.1983，39，2563，公开的内容通过引用结合到本文)。式II化合物的类似合成可以通过烷氧基取代的氨基酸的β-羟基酰胺的环化反应完成。

[0222] 合成流程II

[0223]3 4 2

[0224] 氮杂环丁酮环还可以用没有取代基R、R 或R-取代的N-链烷双酸或烷氧基链烷酸的部分制备，但是所述部分具有能够通过随后的化学转化反应加工为这样的式I和II的基团的取代基。通常，氮杂环丁酮可以如流程III所示按照文献的方法通过N-C(4)环化反2 3 4
应(例如将异羟肟酸酰基酯iv环化为氮杂环丁酮中间体v)制备，其中R、R、R、A和A′定义同上(Mattingly等，J.Am.Chem.Soc.1979，101，3983和Accts.Chem.Res.1986，19，49，公开的内容通过引用结合到本文)。应当理解的是其它异羟肟酸酯(例如异羟肟酸烷基酯、异羟肟酸芳基酯等)适合进行以上环化反应。

[0225] 合成流程III

[0226]

[0227] 随后按照常规方法进行酰氧基氮杂环丁酮v的化学转化反应引入例如R2-取代的链烷双酸部分将获得式I化合物。式II化合物的类似合成可以用适当的R2-取代的烷氧基链烷酸通过此方法完成。

[0228] 形成中间体氮杂环丁酮(它可以被进一步加工为式I和II化合物)的另一种环化反应可以如下进行：如合成流程IV所示根据文献的方法将异羟肟酸酰基酯vi氧化环化3
为中间体氮杂环丁酮vii，其中R 的定义同上(Rajendra和Miller，J.Org.Chem.1987，52，
4471；Tetrahedron Lett.1985，26，5385，公开的内容通过引用结合到本文)。流程IV的基
4
团R为所选的烷基或芳基部分以在随后的转化反应后提供同上定义的R。举例来讲，R可以
4
为基团PhCH2-(如vii-a)，氧化脱去HBr后将获得所需的R(vii-b中为苯乙烯基基)。应
4
当理解的是将R加工为R 不一定要在环化反应后进行，可以在合成式I和II化合物的其它步骤后方便地进行。还需要理解的是所示其它异羟肟酸酰基酯(例如异羟肟酸烷基酯、异羟肟酸芳基酯等)也适合进行所述环化反应。

[0229] 合成流程IV

[0230]

[0231] 其它有用的中间体(例如制备式I化合物的合成流程V所示氮杂环丁酮-4-甲醛4
viii)可以通过烯化反应进一步被加工为4-(R)-取代的氮杂环丁酮。

[0232] 选择流程V中的基团R使得在甲醛成功烯化后，所得基团R-CHCH-与同上定义4
的所需烷基或芳基部分R 一致。这样的烯化反应可以通过任何已知方法完成，例如通过Wittig烯化反应、Peterson烯化反应等。合成流程V示例说明用正膦ix进行相应的Wittig烯化反应。式II化合物的类似合成可以用适当的烷氧基取代的氮杂环丁酮-4-甲醛衍生物衍生物通过此方法完成。

[0233] 合成流程V

[0234]

[0235] 其它有用的中间体(例如氮杂环丁酮基乙酸衍生物x)可以按照合成流程VI中合2
成式I化合物的示例说明转化为式I和II的化合物。R 部分以及式I化合物的羧酸衍生
6
物A′-C(O)-(CH2)n-或式II化合物的烷氧基链烷酸衍生物R′O-(CH2)n′-的引入可以
2 3 4 6
通过烷基化x的阴离子完成，其中整数n和n′以及基团R、R、R、R′、A和A′的定义同上。

[0236] 合成流程VI

[0237]

[0238] 将乙酸衍生物x去质子化，随后用与R2-Z(其中Z为离去基团)一致的烷基卤烷基化获得中间体xi。举例来讲，xi的阴离子可以用化合物Z′-(CH2)nCOA′(其中Z′为2
离去基团)烷基化获得式I化合物。应当理解的是熟练技术人员可以方便地选择取代基R
6
或酸衍生物-(CH2)nCOA′或烷氧基链烷酸衍生物-(CH2)n′OR′的引入顺序，并且这样的引入顺序对不同的式I或式II化合物可能不同。

[0239] 将2-(3，4-二取代的氮杂环丁-2-酮-1-基)乙酸衍生物x或xi在适当溶剂(例如四氢呋喃、二 烷或乙醚)中的溶液用非亲核性碱处理分别获得x或xi的阴离子。此转化的合适碱包括二异丙基氨基锂、2，2，6，6-四甲基哌啶氨基锂或双(三甲基甲硅烷基)氨基2 5
锂。然后将阴离子用适当亲电子试剂猝灭获得所需化合物。式R-Z、R′X′N-C(O)-(CH2)
6
n-Z或R′O-C(O)-(CH2)n-Z的示例性亲电子试剂分别提供相应的式xi或I化合物。式II
6
化合物的类似合成可以用式R′O-(CH2)n′-Z亲电子试剂通过此方法完成。

[0240] 如上所述，合成流程I、II、III、IV、V和VI制备的化合物可以为纯净的非对映异构体、非对映异构体混合物或外消旋体。化合物的实际立体化学成分将取决于具体的反应条件、取代基组合以及所用反应物的立体化学。应当理解的是非对应异构体混合物可以通过色谱法或分步结晶法分离获得所需的单一非对映异构体。特别是合成流程III、IV和VI2
介绍的反应在承载R 的碳产生新的手性中心，但在n＝0且A＝A′时除外。

[0241] 式I化合物2-(3，4-二取代的氮杂环丁-2-酮-1-基)链烷双酸一酯，例如A′为6
R′O-的化合物I-a，可以其本身用作后叶加压素V1a试剂，也可以如合成流程VII所示转
2 3 4 5 6
化为相应的一缩酸xii，其中整数n和基团R、R、R、R′、R′、A和X′的定义同前。这些
5
中间体可用于制备本发明其它化合物，例如I-b，其中A′为R′X′N-。应当理解的是合
6
成流程VII所示转化同样可用于制备A′为X′NH-或需要不同R′O-的式I化合物。

[0242] 合成流程VII

[0243]

[0244] 必须的羧酸xii可以如下制备：将相应的酯在标准条件下用氢氧化物处理皂化，6
然后质子化所得羧酸阴离子。其中R′为叔丁基，酯I-a可以用三氟乙酸处理脱烷基化。其
6
中R′为苄基，酯I-a可以在温和氢解条件下脱烷基化，或者与在液氨中的元素钠或锂反应
6
脱烷基化。最后，其中R′为2-(三甲基甲硅烷基)乙基，可以用氟化物离子源(例如四丁
6
基氟化铵)处理将酯I-a脱去保护并转化为相应的酸xii。所选条件取决于R′部分的性质以及分子中其它官能团与反应条件的相容性。

[0245] 在本领域众所周知的标准条件下，将羧酸xii转化为相应的酰胺I-b。可以首先将所述酸转化为相应的酰基卤，优选为酰基氯或酰基氟，然后用适当的伯胺或仲胺处理获得相应的酰胺。或者，可以在标准条件下将所述酸转化为混酐。此过程通常如下完成：首先用胺(例如三乙胺)处理所述羧酸获得相应的羧酸阴离子。然后将羧酸盐与合适的卤代甲酸酯(例如氯甲酸苄基酯、氯甲酸乙基酯或氯甲酸异丁基酯)反应获得相应的混酐。然后将此酸酐用适当的伯胺或仲胺处理获得所需酰胺。最后，所述羧酸可以用典型肽偶合剂(例如N，N′-羰基二咪唑(CDI)、N，N′-二环己基碳二亚胺(DCC)和1-(3-二甲基氨基5
丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC))处理，然后用式RXNH的合适胺处理。Tetrahedron Letters，34(48)，7685(1993)(公开的内容通过引用结合到本文)介绍了载于聚合物形式的EDC，它在制备本发明化合物中非常有用。应当理解的是以上合成流程中用适当醇取代适
6
当胺将获得本发明的酯，例如含不同酯R′O-的I-a类似物。

[0246] 或者，所述羧酸可以如下转化为相应的叔丁酯：用酸催化剂(例如浓硫酸等)处理所述酸，然后在合适溶剂(例如二 烷等)中用异丁烯处理。此反应优选在压力下、适当容器中(例如压力瓶等)中进行。常需要约18小时的反应时间。在合适的有机溶剂(例如乙酸乙酯等)和碱性水层(例如冷的1N氢氧化钠等)间分配后，所需的酯可以从有机层分离出来。

[0247] 应当理解的是合成流程VII所示的转化反应也可用于以类似方式将A为R6O-的5 6
一酯I转化为相应的酸，随后转化为A为XNH-、RXN-或不同RO-的衍生物I。最后，应当
6
理解的是合成流程VII的转化反应还可用于以类似方式将A为RO-的式II酯转化为相应
5 6
的酸，随后转化为A为XNH-、RXN-或不同RO-的式II衍生物。

[0248] R4包括乙烯基或乙炔基间隔基的式I和II化合物(例如分别为I-c和I-d的化合物)可以如用于式I化合物的合成流程VIII所示通过还原转化为相应的芳基乙基衍生2
物化合物I-e。转化反应通过催化氢化以及其它类似还原反应完成，其中整数n和基团R、
3
R、A和A′的定义同前。相应的式II化合物也可以用其乙炔和乙烯前体以类似方式转化。
选择流程VIII中图示的R基团使得取代基R-CC-、R-CHCH-或R-CH2CH2-与以上定义的式I
4
或II中所需的R 一致。

[0249] 合成流程VIII

[0250]

[0251] 三键或双键的氢化很容易通过贵金属催化剂(例如碳载钯)完成。氢化溶剂可以为低级链烷醇(例如甲醇或乙醇)、四氢呋喃或者四氢呋喃与乙酸乙酯的混合溶剂系统。所述氢化反应的初始氢气压为约20-80p.s.i.、优选约50-60p.s.i.，温度为约0-60℃、优选在室温至约40℃，反应约1小时至约3天。

[0252] 或者，用中毒的催化剂(例如Pd/BaSO4、Lindlar氏催化剂等)，化合物I-c的乙炔基间隔基可以被选择性还原为化合物的I-d乙烯基间隔基。应当理解的是通过选择合适的反应条件，可有利于获得化合物I-d的Z或E双键几何结构。式II化合物的类似合成可以通过此方法完成。

[0253] 如用于式I化合物的合成流程IX，可以用肼或肼衍生物(例如甲基肼)方便地3
处理R 为苯二酰亚氨基的式I和II化合物制备相应的2-(3-氨基-4-取代的氮杂环
4 12
丁-2-酮-1-基)链烷双酸衍生物xiii，其中整数n和基团R、R、R 、A和A′的定义同前。
然后此化合物可以用合适的烷基化剂或酰基化剂处理以制备相应的胺或酰胺I-g，或者中间体xiii可以用适当异氰酸酯制备相应的脲I-h。

[0254] 合成流程IX

[0255]

[0256] 脲I-h如下制备：将适当的胺xiii在合适溶剂(例如氯仿或二氯甲烷)中的溶液用合适异氰酸酯R12NCO处理。如果需要，使用过量异氰酸酯确保初始胺完全反应。反应在约室温至约45℃进行约3小时至约3天。通常，用水洗涤反应物并减压浓缩剩余有机组分可分离出产物。但是，使用了过量异氰酸酯时，适合加入聚合物结合的伯胺或仲胺(例如氨基甲基化聚苯乙烯)帮助除去过量的试剂。使用聚合物结合的试剂后从反应物中分离产物就非常简单，只需要过滤反应混合物，然后减压浓缩滤液。

[0257] 取代的胺和酰胺I-g如下制备：分别用适当的酰化剂R12-C(O)Z或烷基化剂R12-Z处理合适胺xiii在适当溶剂(例如氯仿或二氯甲烷)中的溶液。如果需要，使用过量酰化剂或烷基化剂确保初始胺的完全反应。反应在约室温至约45℃进行约3小时至约3天。通常，用水洗涤反应物并减压浓缩剩余有机组分可分离出产物。但是，使用了过量酰化剂或烷基化剂时，适合加入聚合物结合的伯胺或仲胺(例如氨基甲基化聚苯乙烯)帮助除去过量的试剂。使用聚合物结合的试剂后从反应物中分离产物就非常简单，只需要过滤反应混合物，然后减压浓缩滤液。式II化合物的类似合成可以通过此方法完成。

[0258] 以下的制备方法和实施例进一步说明本发明化合物的合成方法，但并非对本发明范围的任何限制。除非另有说明，否则所有的反应在室温进行，所有的蒸发操作在真空下进行。下述的所有化合物通过标准分析技术表征，包括核磁共振谱(1H NMR)和质谱分析(MS)。

[0259] 实施例1.(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯

[0260] 将1.0当量(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酸(Evans，美国专利4,665,171)和1.3当量乙二酰氯在200mL二氯甲烷的溶液用催化量无水二甲基甲酰胺(85μL/毫当量乙酸衍生物)处理使得产生大量气体。在45分钟后，气体释放完全停止，减压浓缩反应混合物，在真空干燥2小时后获得乳白色固体标题化合物。

[0261] 实施例2.用活性酯衍生物生成酰胺的常规方法

[0262] N-苄氧基羰基-L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺

[0263] N-苄氧基羰基-L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-N-羟基琥珀酰亚胺酯(1.95g，4.64mmol，Advanced ChemTech)的20mL无水四氢呋喃溶液用0.68mL(4.74mmol)3-(三氟甲基)苄基胺处理。反应完成后(TLC，60∶40己烷/乙酸乙酯)，蒸发混合物，所得油状物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液间分配。蒸发有机层获得2.23g(定量收率)白色固体标题
1
化合物；H NMR(CDCl3)δ1.39(s，9H)，2.61(dd，J＝6.5Hz，J＝17.2Hz，1H)，2.98(dd，J＝
3.7Hz，J＝17.0Hz，1H)，4.41(dd，J＝5.9Hz，J＝15.3Hz，1H)，4.50-4.57(m，2H)，5.15(s，
2H)，5.96-5.99(m，1H)，6.95(s，1H)，7.29-7.34(m，5H)，7.39-7.43(m，2H)，7.48-7.52(m，
2H)。

[0264] 实施例3-5根据实施例2的方法制备，除了N-苄氧基羰基-L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-N-羟基琥珀酰亚胺酯用合适的氨基酸衍生物替代以及3-(三氟甲基)苄基胺用合适的胺替代。

[0265] 实施例3.N-苄氧基羰基-L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-[4-(2-苯基乙基)]哌嗪酰胺

[0266] N-苄氧基羰基-L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-N-羟基琥珀酰亚胺酯(5.0g，12mmol，Advanced ChemTech)和4-(苯基乙基)哌嗪2.27mL(11.9mmol)获得5.89g(定
1
量收率)乳白色油状标题化合物；H NMR(CDCl3)δ1.40(s，9H)，2.45-2.80(m，10H)，
3.50-3.80(m，4H)，4.87-4.91(m，1H)，5.08(s，2H)，5.62-5.66(m，1H)，7.17-7.33(m，10H)。

[0267] 实施例4.N-苄氧基羰基-L-谷氨酸γ-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺

[0268] N-苄氧基羰基-L-谷氨酸β-叔丁酯α-N-羟基琥珀酰亚胺酯(4.83g，11.1mmol，Advanced ChemTech)和3-(三氟甲基)苄基胺)1.63mL(11.4mmol)获得5.41g(98％)乳1
白色固体标题化合物；H NMR(CDCl3)δ1.40(s，9H)，1.88-1.99(m，1H)，2.03-2.13(m，1H)，
2.23-2.33(m，1H)，2.38-2.47(m，1H)，4.19-4.25(s，1H)，4.46-4.48(m，2H)，5.05-5.08(m，
2H)，5.67-5.72(m，1H)，7.27-7.34(m，5H)，7.39-7.43(m，2H)，7.48-7.52(m，2H)。

[0269] 实施例5.N-苄氧基羰基-L-谷氨酸γ-叔丁酯α-[4-(2-苯基乙基)]哌嗪酰胺[0270] N-苄氧基羰基-L-谷氨酸γ-叔丁酯α-N-羟基琥珀酰亚胺酯(5.0g，12mmol，Advanced ChemTech)和4-(苯基乙基)哌嗪2.19mL(11.5mmol)获得5.87g(定量收率)乳1
白色油状标题化合物；H NMR(CDCl3)δ1.43(s，9H)；1.64-1.73(m，1H)；1.93-2.01(m，1H)；
2.23-2.40(m，2H)；2.42-2.68(m，6H)；2.75-2.85(m，2H)；3.61-3.74(m，4H)；4.66-4.73(m，
1H)；5.03-5.12(m，2H)；5.69-5.72(m，1H)；7.16-7.34(m，10H)。

[0271] 实施例5A.N-[(9H-芴-9-基)甲氧基羰基]-O-(苄基)-D-丝氨酸叔丁酯

[0272] N-[(9H-芴-9-基)甲氧基羰基]-O-(苄基)-D-丝氨酸(0.710g，1.70mmole)的二氯甲烷(8mL)溶液用乙酸叔丁酯(3mL)和浓硫酸(40L)在封闭烧瓶中于0℃处理。反应完成后(TLC)，反应物用二氯甲烷(10mL)和饱和碳酸氢钾水溶液(15mL)猝灭。有机层用蒸馏水洗涤，然后蒸发。所得残余物用快速柱色谱法提纯(98∶2二氯甲烷/甲醇)获得无1
色油状标题化合物(0.292g，77％)；H NMR(CDCl3)δ1.44(s，9H)；3.68(dd，J＝2.9Hz，J＝
9.3Hz，1H)；3.87(dd，J＝2.9Hz，J＝9.3Hz，1H)；4.22(t，J＝7.1Hz，1H)；4.30-4.60(m，
5H)；5.64-5.67(m，1H)；7.25-7.39(m，9H)；7.58-7.61(m，2H)；7.73-7.76(m，2H)。

[0273] 实施例5B.O-(苄基)-D-丝氨酸叔丁酯

[0274] 实施例5A(0.620g，1.31mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液用三(2-氨基乙基)胺(2.75mL)处理5h。所得混合物用磷酸盐缓冲溶液(pH＝5.5)洗涤两次，用饱和碳酸氢钾1
溶液洗涤一次，然后蒸发获得0.329g(定量收率)乳白色固体标题化合物；H NMR(CD3OD)δ1.44(s，9H)；3.48(dd，J＝ J′ ＝4.2Hz，1H)；3.61(dd，J＝4.0Hz，J＝ 9.2Hz，1H)；
3.72(dd，J＝4.6Hz，J＝9.2Hz，1H)；4.47(d，J＝12.0Hz，1H)；4.55(d，J＝12.0Hz，1H)；
7.26-7.33(m，5H)。

[0275] 实施例6.用羧酸制备酰胺的常规方法

[0276] N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺

[0277] 1g(2.93mmol)N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物(Novabiochem)的3-4mL二氯甲烷溶液中依次加入0.46mL(3.21mmol)3-(三氟甲基)苄基胺、0.44g(3.23mmol)1-羟基-7-苯并三唑和0.62g(3.23mmol)1-[3-(二甲基氨基)丙
基]-3-乙基碳二亚胺盐酸盐。在室温下至少12小时后，或者直到薄层色谱法检测反应完全(95∶5二氯甲烷/甲醇洗脱剂)，反应物依次用饱和碳酸氢钠水溶液和蒸馏水洗涤。
1
蒸发有机层获得1.41g(定量收率)乳白色固体标题化合物；H NMR(CDCl3)δ1.39(s，9H)；
2.61(dd，J＝6.5Hz，J＝17.2Hz，1H)；2.98(dd，J＝4.2Hz，J＝17.2Hz，1H)；4.41(dd，J＝
5.9Hz，J＝15.3Hz，1H)；4.50-4.57(m，2H)；5.10(s，2H)；5.96-6.01(m，1H)；6.91-7.00(m，
1H)；7.30-7.36(m，5H)；7.39-7.43(m，2H)；7.48-7.52(m，2H)。

[0278] 实施例7和7A-7E根据实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用合适的氨基酸衍生物替代，3-(三氟甲基)苄基胺用合适的胺替代。

[0279] 实施例7.N-苄氧基羰基-D-谷氨酸γ-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺

[0280] 用N-苄氧基羰基-D-谷氨酸γ-叔丁酯(1.14g，3.37mmol)和0.53mL(3.70mmol，Novabiochem)3-(三氟甲基)苄基胺获得1.67g(定量收率)为乳白色固体的实施例7。

[0281] 实施例7A.N-苄氧基羰基-L-谷氨酸α-叔丁酯γ-(4-环己基)哌嗪酰胺

[0282] 用 N- 苄 氧 基 羰 基 -L- 谷 氨 酸 α- 叔 丁 酯 (1.36g，4.03mmol) 和1
0.746g(4.43mmol)1-环己基哌嗪获得1.93g(98％)为乳白色固体的实施例7A；H
NMR(CDCl3)δ1.02-1.12(m，5H)；1.43(s，9H)，1.60-1.64(m，1H)；1.80-1.93(m，5H)；
2.18-2.52(m，8H)；3.38-3.60(m，4H)；4.20-4.24(m，1H)；5.03-5.13(m，2H)；5.53-5.57(m，
1H)；7.28-7.34(m，5H)。

[0283] 实施例7B.N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(2-氟-3-三氟甲基)苄基酰胺

[0284] 用N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物(Novabiochem)(0.25g，0.73mmol)和0.12mL(2-氟-3-三氟甲基)苄基胺获得0.365g(定量收率)为乳白色固体
1
的实施例7B；H NMR(CDCl3)δ1.38(s，9H)；2.59(dd，J＝6.5Hz，J＝17.0Hz，1H)；2.95(dd，J＝4.3Hz，J＝17.0Hz，1H)；4.46-4.56(m，3H)；5.11(s，2H)；5.94-5.96(m，1H)；7.15(t，J＝8.0Hz，1H)；7.30-7.36(m，5H)；7.47-7.52(m，2H)。

[0285] 实施例7C.N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-[(S)-α-甲基苄基]酰胺

[0286] 用N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物(Novabiochem)(0.25g，1
0.73mmol)和0.094mL(S)-α-甲基苄基胺获得0.281g(90％)为乳白色固体的实施例7C；H NMR(CDCl3)δ1.41(s，9H)；1.44(d，J＝7.0Hz，3H)；2.61(dd，J＝7.0Hz，J＝17.0Hz，1H)；
2.93(dd，J＝4.0Hz，J＝17.5Hz，1H)；4.50-4.54(m，1H)；5.04-5.14(m，3H)；5.94-5.96(m，
1H)；6.76-6.80(m，1H)；7.21-7.37(m，10H)。

[0287] 实施例7D.N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-[(R)-α-甲基苄基]酰胺

[0288] 用N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物(Novabiochem)(0.25g，1
0.73mmol)和0.094mL(R)-α-甲基苄基胺获得0.281g(90％)为乳白色固体的实施例7D；H NMR(CDCl3)δ1.38(s，9H)；1.43(d，J＝6.9Hz，3H)；2.54(dd，J＝7.3Hz，J＝17.2Hz，1H)；
2.87(dd，J＝4.1Hz，J＝17.3Hz，1H)；4.46-4.50(m，1H)；4.99-5.15(m，3H)；5.92-5.96(m，
1H)；6.78-6.82(m，1H)；7.21-7.33(m，10H)。

[0289] 实施例7E.N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸γ-叔丁酯α-[N-甲基-N-(3-三氟甲基苄基)]酰胺

[0290] 用N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸γ-叔丁酯(0.303g，0.89mmol，Novabiochem)和0.168g(0.89mmol)N-甲基-N-(3-三氟甲基苄基)胺获得0.287g(65％)为乳白色固体1
的实施例7E；H NMR(CDCl3)δ1.40(s，9H)；2.55(dd，J＝5.8Hz，J＝15.8Hz，1H)；2.81(dd，J＝7.8Hz，J＝15.8Hz，1H)；3.10(s，3H)；4.25(d，J＝15.0Hz，1H)；4.80(d，J＝15.5Hz，
1H)；5.01-5.13(m，3H)；5.52-5.55(m，1H)；7.25-7.52(m，10H)。

[0291] 实施例8.苄氧基羰基胺的常规氢化方法

[0292] L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺

[0293] 2.23g(4.64mmol)N-苄氧基羰基-L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺和钯(5％wt.载于活性碳，0.642g)的30mL甲醇悬浮液保持在氢气氛下直到薄层色谱法(95∶5二氯甲烷/甲醇洗脱剂)检测出完全转化为止。过滤反应物除去碳载钯，蒸1
发滤液获得1.52g(96％)油状标题化合物；H NMR(CDCl3)δ1.42(s，9H)；2.26(brs，2H)；
2.63-2.71(m，1H)；2.82-2.87(m，1H)；3.75-3.77(m，1H)；4.47-4.50(m，2H)；7.41-7.52(m，
4H)；7.90(brs，1H)。

[0294] 实施例9-13和13A-13E根据实施例8的方法制备，除了N-苄氧基羰基-L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺用合适的氨基酸衍生物替代。

[0295] 实施例9.L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-[4-(2-苯基乙基)]哌嗪酰胺

[0296] 用N-苄氧基羰基-L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-[4-(2-苯基乙基)]哌嗪酰胺1
(5.89g，11.9mmol)获得4.24g(98％)乳白色油状实施例9；HNMR(CDCl3)：δ1.42(s，9H)；
2.61-2.95(m，10H)；3.60-3.90(m，4H)；4.35-4.45(m，1H)；7.17-7.29(m，5H)。

[0297] 实施例10.D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺

[0298] 用N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺(1.41g，1
2.93mmol)获得0.973g(96％)乳白色油状实施例10；HNMR(CDCl3)：δ1.42(s，9H)；
2.21(brs，2H)；2.67(dd，J＝7.1Hz，J＝16.8Hz，1H)；2.84(dd，J＝3.6Hz，J＝16.7Hz，
1H)；3.73-3.77(m，1H)；4.47-4.50(m，2H)；7.41-7.52(m，4H)；7.83-7.87(m，1H)。

[0299] 实施例11.L-谷氨酸γ-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺

[0300] 用N-苄氧基羰基-L-谷氨酸γ-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺(5.41g，1
10.9mmol)获得3.94g(定量收率)乳白色油状实施例11；HNMR(CDCl3)：δ1.41(s，9H)；
1.73-1.89(m，3H)；2.05-2.16(m，1H)；2.32-2.38(m，2H)；3.47(dd，J＝5.0Hz，J＝7.5Hz，
1H)；4.47-4.49(m，2H)；7.36-7.54(m，4H)；7.69-7.77(m，1H)。

[0301] 实施例12.L-谷氨酸γ-叔丁酯α-[4-(2-苯基乙基)]哌嗪酰胺

[0302] 用N-苄氧基羰基-L-谷氨酸γ-叔丁酯α-[4-(2-苯基乙基)]哌嗪酰胺1
(5.86g，11.50mmol)获得4.28g(99％)乳白色油状实施例12；H NMR(CDCl3)δ1.39(s，9H)；
2.00-2.08(m，1H)；2.38-2.46(m，1H)；2.55-2.90(m，9H)；3.61-3.82(m，4H)；4.48-4.56(m，
1H)；7.17-7.26(m，5H)。

[0303] 实施例13.D-谷氨酸γ-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺

[0304] 用N-苄氧基羰基-D-谷氨酸γ-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺(1.667g，1
3.37mmol)获得1.15g(94％)乳白色油状实施例13；H NMR(CDCl3)δ1.41(s，9H)；
1.80-2.20(m，4H)；2.31-2.40(m，2H)；3.51-3.59(m，1H)；4.47-4.49(m，2H)；7.39-7.52(m，
4H)；7.71-7.79(m，1H)。

[0305] 实施例13A.L-谷氨酸α-叔丁酯γ-(4-环己基)哌嗪酰胺

[0306] 用N-苄氧基羰基-L-谷氨酸α-叔丁酯γ-(4-环己基)哌嗪酰胺(1.93g，1
3.96mmol)获得1.30g(93％)乳白色油状实施例13A；H NMR(CDCl3)δ1.02-1.25(m，
5H)；1.41(s，9H)；1.45-1.50(m，1H)；1.56-1.60(m，1H)；1.69-1.80(m，6H)；3.30(dd，J ＝
4.8Hz，J＝8.5Hz，1H)；3.44(t，J＝9.9Hz，2H)；3.56(t，J＝9.9Hz，2H)。

[0307] 实施例13B.D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(2-氟-3-三氟甲基)苄基酰胺

[0308] 用N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(2-氟-3-三氟甲基)苄基酰胺1
(0.36g，0.72mmol)获得0.256g(92％)乳白色油状实施例13B；H NMR(CDCl3)δ1.39(s，
9H)；2.50(brs，2H)；2.74(dd，J ＝ 7.0Hz，J ＝ 16.5Hz，1H)；2.86(dd，J ＝ 4.8Hz，J ＝
16.8Hz，1H)；3.89(brs，2H)；4.47-4.57(m，2H)；7.16(t，J＝7.8Hz，1H)；7.48(t，J＝73Hz，
1H)；7.56(t，J＝7.3Hz，1H)；7.97-8.02(m，1H)。

[0309] 实施例13C.D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-[(S)-α-甲基]苄基酰胺

[0310] 用N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-[(S)-α-甲基苄基]酰胺1
(0.275g，0.65mmol)获得0.17g(90％)乳白色油状实施例13C；HNMR(CDCl3)δ1.40(s，
9H)；1.47(d，J ＝ 6.9Hz，3H)；1.98(brs，2H)；2.49(dd，J ＝ 7.9Hz，J ＝ 17.7Hz，1H)；
2.83(dd，J ＝ 3.6Hz，J ＝ 16.7Hz，1H)；3.69(brs，1H)；4.99-5.10(m，1H)；7.19-7.33(m，
5H)；7.65-7.68(m，1H)。

[0311] 实施例13D.D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-[(R)-α-甲基苄基]酰胺

[0312] 用N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-[(R)-α-甲基苄基]酰胺1
(0.273g，0.64mmol)获得0.187g(定量收率)乳白色油状实施例13D；H NMR(CDCl3)δ1.38(s，9H)；1.46(d，J ＝ 6.9Hz，3H)；1.79(brs，2H)；2.51(dd，J ＝ 7.8Hz，J ＝
17.5Hz，1H)；2.87(dd，J ＝ 3.6Hz，J ＝ 16.9Hz，1H)；4.19(brs，1H)；4.99-5.11(m，1H)；
7.18-7.34(m，5H)；7.86-7.90(m，1H)。

[0313] 实施例13E.D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-[N-甲基-N-(3-三氟甲基苄基)]酰胺[0314] 用N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-[N-甲基-N-(3-三氟甲基苄基)]酰胺(0.282g，0.57mmol)获得0.195g(95％)乳白色油状实施例13E。

[0315] 实施例14.用亚胺和乙酰氨制备2-氮杂环丁酮的常规方法

[0316] 步骤1：用氨基酸衍生物制备亚胺的常规方法

[0317] 将1当量α-氨基酸酯或酰胺的二氯甲烷溶液依次用1当量合适的醛和干燥剂(例如硫酸镁或硅胶)处理，用量为约2g干燥剂/g初始α-氨基酸酯或酰胺。在室温下搅拌反应物直到所有的反应物耗尽(薄层色谱法)。通常该反应在1小时内完成。然后过滤反应混合物，滤饼用二氯甲烷洗涤，减压浓缩滤液获得在随后步骤中直接使用的亚胺。

[0318] 步骤2：亚胺和乙酰氯的2+2环加成的常规方法

[0319] 将亚胺(10mL二氯甲烷/1g亚胺)的二氯甲烷溶液冷却至0℃。在此冷溶液中加入1.5当量合适的胺(通常为三乙胺)，然后滴加1.1当量合适乙酰氯的二氯甲烷溶液(例如实施例1中介绍的乙酰氯(10mL二氯甲烷/1g适当乙酰氯))。让反应混合物在1小时内升至室温，然后加入饱和氯化铵水溶液猝灭。所得混合物在水和二氯甲烷间分配。分离出各层，有机层依次用1N盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤。用硫酸镁干燥有机层，减压浓缩。残余物可以直接用于下一步反应，或者如果需要，通过色谱法提纯或用合适溶剂系统结晶提纯。

[0320] 实施例15.[3(S)-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]乙酸叔丁酯

[0321] 按照实施例14的方法，将用4.53g(34.5mmol)甘氨酸叔丁酯和肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合获得5.5g(30％)无色结晶的实施例15(重结晶，正氯代丁烷)；mp194-195℃。

[0322] 实施例16.酰化(氮杂环丁-2-酮-1-基)乙酸酯的常规方法

[0323] 将(氮杂环丁-2-酮-1-基)乙酸酯的四氢呋喃(0.22M的氮杂环丁酮溶液)溶液冷却至-78℃，加入双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(2.2当量)。所得阴离子用合适酰基卤(1.1当量)处理。在氮杂环丁酮完全转化后，反应物用饱和氯化铵水溶液猝灭，在乙酸乙酯和水间分配。有机相依次用1N盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤。干燥所得有机层(硫酸镁)，然后蒸发。残余物通过硅胶色谱法(用合适的洗脱剂，例如3∶2己烷/乙酸乙酯)提纯。

[0324] 实 施 例 17.2(RS)-( 叔 丁 氧 基 羰 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]乙酸2，2，2-三氯乙酯

[0325] 按照实施例16的方法，将9.0g(20mmol)实施例15用4.2g(20mmol)氯甲酸三氯乙酯酰化获得7.0g(56％)实施例17；mp 176-178℃。

[0326] 实 施 例 18.2(RS)-( 叔 丁 氧 基 羰 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0327] 0.20g(0.32mmol)实施例17和52μL(0.36mmol)(3-三氟甲基苄基)胺的THF溶液在回流下加热。在转化完毕后(TLC)，蒸发溶剂，重结晶(氯仿/己烷)残余物获得0.17g(82％)白色固体的实施例18；mp182-184℃。

[0328] 实施例19-25和25A-25H根据实施例14的方法制备，其中合适的氨基酸衍生物和醛用于步骤1，合适的乙酰氯用于步骤2。

[0329] 实 施 例19.2(S)-( 叔 丁 氧 基 羰 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)-苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)乙酰胺

[0330] 将用1.52g(4.39mmol)L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺和肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合获得2.94g橙褐色油状物，在用快速柱色谱法提纯(70∶30己烷/乙酸乙酯)后获得2.06g(70％)1
白色固体的实施例19；HNMR(CDCl3)δ1.39(s，9H)；2.46(dd，J＝11.1Hz，J＝16.3Hz，
1H)；3.18(dd，J＝ 3.8Hz，J＝16.4Hz，1H)；4.12-4.17(m，1H)；4.26(d，J＝ 5.0Hz，1H)；
4.45(dd，J＝6.0Hz，J＝14.9Hz，1H)；4.54(dd，J＝5.3Hz，J＝9.8Hz，1H)；4.58-4.66(m，
3H)；4.69-4.75(m，1H)；4.81(dd，J＝3.8Hz，J＝11.1Hz，1H)；6.25(dd，J＝9.6Hz，J＝
15.8Hz，1H)；6.70(d，J ＝ 15.8Hz，1H)；7.14-7.17(m，2H)；7.28-7.46(m，11H)；7.62(s，
1H)；8.27-8.32(m，1H)。

[0331] 实 施 例 20.2(S)-(叔 丁 氧 基 羰 基 乙 基)-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0332] 将用3.94g(10.93mmol)L-谷氨酸γ-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺和肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合，在用快速1
柱色谱法提纯后(70∶30己烷/乙酸乙酯)获得5.53g(75％)实施例20，；H NMR(CDCl3)δ1.36(s，9H)；1.85-1.96(m，1H)；2.18-2.49(m，3H)；4.14-4.19(m，1H)；4.30(d，J ＝
4.9Hz，2H)；4.44(dd，J ＝ 6.1Hz，J ＝ 14.9Hz，1H)；4.56-4.67(m，4H)；4.71-4.75(m，
1H)；6.26(dd，J＝9.6Hz，J＝15.8Hz，1H)；6.71(d，J＝15.8Hz，1H)；7.16-7.18(m，2H)；
7.27-7.49(m，11H)；7.60(s，1H)；8.08-8.12(m，1H)。

[0333] 实 施 例21.2(S)-( 叔 丁 氧 基 羰 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)-苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]乙酸N-[4-(2-苯基乙基)]哌嗪酰胺

[0334] 将用4.20g(11.6mmol)L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-[4-(2-苯基乙基)]哌嗪酰胺和肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合，在用快速柱色谱法提纯后(50∶50己烷/乙酸乙酯)获得4.37g(55％)实施例
21；1H NMR(CDCl3)δ1.34(s，9H)；2.26-2.32(m，1H)；2.46-2.63(m，4H)；2.75-2.89(m，
4H)；3.24-3.32(m，1H)；3.49-3.76(m，3H)；4.07-4.13(m，1H)；4.30(d，J ＝ 4.6Hz，1H)；
4.22-4.48(m，1H)；4.55-4.61(m，1H)；4.69-4.75(m，1H)；5.04-5.09(m，1H)；6.15(dd，J ＝
9.3Hz，J＝15.9Hz，1H)；6.63(d，J＝15.8Hz，1H)；7.18-7.42(m，15H)。

[0335] 实 施 例22.2(S)-( 叔 丁 氧 基 羰 基 乙 基)-2-[3(S)-(4(S)-苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]乙酸N-[4-(2-苯基乙基)]哌嗪酰胺

[0336] 将用2.54g(6.75mmol)L-谷氨酸γ-叔丁酯α-[4-(2-苯基乙基)]哌嗪酰胺和肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合，在用快速柱色谱法提纯后(50∶50己烷/乙酸乙酯)获得3.55g(76％)实施例22；1H NMR(CDCl3)51.32(s，9H)；1.96-2.07(m，1H)；2.15-2.44(m，6H)；2.54-2.62(m，2H)；2.69-2.81(m，3H)；
3.28-3.34(m，1H)；3.59-3.68(m，1H)；4.08-4.13(m，1H)；4.33-4.44(m，2H)；4.48-4.60(m，
2H)；4.67-4.77(m，1H)；6.14(dd，J＝8.9Hz，J＝16.0Hz，1H)；6.62(d，J＝16.0Hz，1H)；
7.16-7.42(m，15H)。

[0337] 实 施 例23.2(R)-( 叔 丁 氧 基 羰 基 甲 基)-2-[3(S)-(4(S)-苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0338] 将用0.973g(2.81mmol)D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺和肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合，1
在用快速柱色谱法提纯后(70∶30己烷/乙酸乙酯)获得1.53g(82％)实施例23；H
NMR(CDCl3)δ1.37(s，9H)；3.10(dd，J＝3.7Hz，J＝17.8Hz，1H)；3.20(dd，J＝10.7Hz，J＝
17.8Hz，1H)；4.02(dd，J＝3.6Hz，J＝10.6Hz，1H)；4.11-4.17(m，1H)；4.24(d，J＝4.9Hz，
1H)；4.46(dd，J＝5.8Hz，J＝15.1Hz，1H)；4.58-4.67(m，3H)；4.70-4.76(m，1H)；6.27(dd，J＝9.5Hz，J＝15.8Hz，1H)；6.79(d，J＝15.8Hz，1H)；7.25-7.50(m，13H)；7.63(s，1H)；
8.50-8.54(m，1H)。

[0339] 实 施 例 24.2(R)-(叔 丁 氧 基 羰 基 乙 基)-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0340] 将用1.15g(3.20mmol)D-谷氨酸γ-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺和肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合，在用快速柱色谱法提纯后(70∶30己烷/乙酸乙酯)获得1.84g(85％)实施例24；1H NMR(CDCl3)δ1.37(s，9H)；2.23-2.39(m，4H)；3.71-3.75(m，1H)；4.13-4.18(m，1H)；4.31(d，J ＝4.9Hz，1H)；4.44-4.51(m，2H)；4.56-4.68(m，2H)；4.71-4.76(m，1H)；6.26(dd，J＝9.5Hz，J＝15.8Hz，1H)；6.71(d，J＝15.8Hz，1H)；7.25-7.52(m，13H)；7.63(s，1H)；8.25-8.30(m，
1H)。

[0341] 实 施 例25.2(S)-( 叔 丁 氧 基 羰 基 乙 基)-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]乙酸N-(4-环己基)哌嗪酰胺

[0342] 将用2.58g(5.94mmol)L-谷氨酸γ-叔丁酯α-(4-环己基)哌嗪酰胺和肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合，在用快速1
柱色谱法提纯后(95∶5二氯甲烷/甲醇)获得3.27g(94％)实施例25；H NMR(CDCl3)δ1.32(s，9H)；1.10-1.18(m，1H)；1.20-1.31(m，2H)；1.38-1.45(m，2H)；1.61-1.66(m，
1H)；1.84-1.89(m，2H)；1.95-2.01(m，1H)；2.04-2.14(m，3H)；2.20-2.24(m，1H)；
2.29-2.35(m，1H)；2.85-2.92(m，1H)；3.24-3.32(m，1H)；3.36-3.45(m，2H)；3.80-3.86(m，
1H)；4.08(t，J ＝ 8.3Hz，1H)；4.27(d，J ＝ 5.0Hz，1H)；4.31-4.55(m，4H)；4.71(t，J ＝
8.3Hz，1H)；4.83-4.90(m，1H)；6.18(dd，J＝9.1Hz，J＝15.9Hz，1H)；6.67(d，J＝15.9Hz，
1H)；7.25-7.44(m，10H)；8.22(brs，1H)。

[0343] 实施例25A.2(S)-(2-(4-环己基哌嗪-1-基羰基)乙基)-2-[3(S)-(4(S)-苯基唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]乙酸叔丁酯将用1.282g(3.63mmol)L-谷氨酸α-叔丁酯γ-(4-环己基)哌嗪酰胺和肉桂醛制备的亚胺与
2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合，在用快速柱色谱法提纯后
1
(50∶50己烷/乙酸乙酯)获得1.946g(80％)实施例25A；H NMR(CDCl3)δ1.15-1.26(m，
6H)；1.39(s，9H)；1.55-1.64(m，2H)；1.77-1.83(m，3H)；2.22-2.35(m，2H)；2.40-2.50(m，
6H)；2.75-2.79(m，1H)；3.43-3.48(m，1H)；3.56-3.60(m，2H)；3.75-3.79(m，1H)；4.10(t，J ＝ 8.3Hz，1H)；4.31-4.35(m，2H)；4.58(t，J ＝ 8.8Hz，1H)；4.73(t，J ＝ 8.4Hz，1H)；
6.17(dd，J＝8.6Hz，J＝16.0Hz，1H)；6.65(d，J＝16.0Hz，1H)；7.27-7.42(m，10H)。

[0344] 实 施 例25B.2(R)-( 叔 丁 氧 基 羰 基 甲 基)-2-[3(S)-(4(S)-苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(2-氟-3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0345] 将用0.256g(0.70mmol)D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(2-氟-3-三氟甲基)苄基酰胺和肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合，在用快速柱色谱法提纯后(70∶30己烷/乙酸乙酯)获得0.287g(60％)实施例
1
25B；H NMR(CDCl3)δ1.38(s，9H)；3.12(dd，J＝ 4.0Hz，J＝ 17.8Hz，1H)；3.20(dd，J ＝
10.4Hz，J＝17.8Hz，1H)；4.05(dd，J＝3.9Hz，J＝10.4Hz，1H)；4.14(dd，J＝J′＝8.2Hz，
1H)；4.25(d，J ＝ 4.9Hz，1H)；4.59-4.67(m，4H)；4.74(t，J ＝8.3Hz，1H)；6.36(dd，J ＝
9.6Hz，J＝15.8Hz，1H)；6.83(d，J＝15.8Hz，1H)；7.02-7.07(m，1H)；7.28-7.55(m，12H)；
8.44-8.48(m，1H)。

[0346] 实 施 例25C.2(R)-( 叔 丁 氧 基 羰 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)-苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-[(S)-α-甲基苄基]-乙酰胺

[0347] 将用0.167g(0.57mmol)D-天门冬氨酸β-叔丁酯[(S)-α-甲基苄基]酰胺和肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合，在用快速柱色谱法提纯后(70∶30己烷/乙酸乙酯)获得0.219g(63％)实施例25C；1H NMR(CDCl3)δ1.35(s，9H)；1.56(d，J＝7.0Hz，3H)；2.97(dd，J＝3.5Hz，J＝18.0Hz，1H)；3.15(dd，J＝11.0Hz，J＝17.5Hz，1H)；4.01(dd，J＝3.0Hz，J＝11.0Hz，1H)；4.14(t，J＝8.5Hz，1H)；4.24(d，J＝5.0Hz，1H)；4.57(dd，J＝5.0Hz，J＝9.5Hz，1H)；4.64(t，J＝8.8Hz，1H)；
5.07(t，J＝8.5Hz，1H)；5.03-5.09(m，1H)；6.43(dd，J＝9.5Hz，J＝16.0Hz，1H)；6.83(d，J＝16.0Hz，1H)；7.16-7.20(m，1H)；7.27-7.49(m，14H)；8.07-8.10(m，1H)。

[0348] 实 施 例25D.2(R)-( 叔 丁 氧 基 羰 基 甲 基)-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-[(R)-α-甲基苄基]-乙酰胺

[0349] 将用0.187g(0.46mmol)D-天门冬氨酸β-叔丁酯[(R)-α-甲基苄基]酰胺和肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合，在用快速1
柱色谱法提纯后(70∶30己烷/乙酸乙酯)获得0.25g(64％)实施例25D；H NMR(CDCl3)δ1.36(s，9H)；1.59(d，J＝7.1Hz，3H)；3.10(dd，J＝3.5Hz，J＝17.8Hz，1H)；3.22(dd，J＝10.9Hz，J＝17.8Hz，1H)；3.93(dd，J＝3.5Hz，J＝10.8Hz，1H)；4.14(t，J＝8.1Hz，
1H)；4.24(d，J＝5.0Hz，1H)；4.58(dd，J＝5.0Hz，J＝9.5Hz，1H)；4.65(t，J＝8.7Hz，1H)；
4.74(t，J＝8.2Hz，1H)；5.06-5.14(m，1H)；6.32(dd，J＝9.5Hz，J＝15.8Hz，1H)；6.74(d，J＝15.8Hz，1H)；7.19-7.43(m，15H)；8.15-8.18(m，1H)。

[0350] 实 施 例25E.2(R)-( 叔 丁 氧 基 羰 基 甲 基)-2-[3(S)-(4(S)-苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-甲基-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0351] 将用0.195g(0.41mmol)D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-[N-甲基-N-(3-三氟甲基苄基)]酰胺和肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合，在用快速柱色谱法提纯后(70∶30己烷/乙酸乙酯)获得0.253g(69％)实施例25E；1H NMR(CDCl3)δ1.36(s，9H)；2.53(dd，J＝4.0Hz，J＝17.0Hz，1H)；3.06(dd，J＝10.8Hz，J＝16.8Hz，1H)；3.13(s，3H)；4.12(dd，J＝8.0Hz，J＝9.0Hz，1H)；4.26(d，J＝5.0Hz，1H)；4.38(d，J＝15.0Hz，1H)；4.46(dd，J＝5.0Hz，J＝9.5Hz，1H)；4.56(t，J＝
6.8Hz，1H)；4.70-4.79(m，2H)；5.27(dd，J＝4.0Hz，J＝11.0Hz，1H)；6.22(dd，J＝9.3Hz，J＝15.8Hz，1H)；6.73(d，J＝15.8Hz，1H)；7.33-7.45(m，14H)；

[0352] 实 施 例25F.2(S)-( 叔 丁 氧 基 羰 基 乙 基)-2-[3(S)-(4(S)-苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-氯苯乙烯-2-基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0353] 将用1.62g(4.44mmol)L-谷氨酸γ-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺和α-氯代肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合，在用快速柱色谱法提纯后(70∶30己烷/乙酸乙酯)获得0.708g(22％)实施例25F；1H NMR(CDCl3)δ1.35(s，9H)；1.68(brs，1H)；2.19-2.35(m，2H)；2.40-2.61(m，2H)；4.13(dd，J＝7.5Hz，J＝9.0Hz，1H)；4.22(t，J＝7.0Hz，1H)；4.34(d，J＝4.5Hz，1H)；4.45(dd，J＝
5.5Hz，J＝15.0Hz，1H)；4.51-4.60(m，3H)；4.89(dd，J＝7.5Hz，J＝8.5Hz，1H)；6.89(s，
1H)；7.28-7.54(m，14H)。

[0354] 实 施 例25G.2(R)-( 叔 丁 氧 基 羰 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)-苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2′-甲氧基苯乙烯-2-基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0355] 将用0.34g(0.98mmol)D-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(3-三氟甲基苄基)酰胺和2′-甲氧基肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例
1)混合，在用快速柱色谱法提纯后(70∶30己烷/乙酸乙酯)获得0.402g(59％)实施
1
例25G；H NMR(CDCl3)δ1.35(s，9H)；1.68(brs，1H)；2.19-2.35(m，2H)；2.40-2.61(m，2H)；
4.13(dd，J＝7.5Hz，J＝9.0Hz，1H)；4.22(t，J＝7.0Hz，1H)；4.34(d，J＝4.5Hz，1H)；
4.45(dd，J＝5.5Hz，J＝15.0Hz，1H)；4.51-4.60(m，3H)；4.89(dd，J＝7.5Hz，J＝8.5Hz，
1H)；6.89(s，1H)；7.28-7.54(m，14H)。

[0356] 实 施 例 25H.(2R)-( 苄 氧 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]乙酸叔丁酯

[0357] 将用0.329g(1.31mmol)O-(苄基)-D-丝氨酸叔丁酯和肉桂醛制备的亚胺与2-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)乙酰氯(实施例1)混合，在用快速柱色谱法提纯后
1
(90∶10己烷/乙酸乙酯)获得0.543g(73％)实施例25H；H NMR(CDCl3)δ1.39(s，9H)；
3.56(dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，1H)；3.82(dd，J＝4.8Hz，J＝9.5Hz，1H)；4.11(t，J＝
8.3Hz，1H)；4.21-4.29(m，2H)；4.50-4.58(m，3H)；4.71-4.78(m，2H)；6.19(dd，J＝9.1Hz，J＝16.0Hz，1H)；6.49(d，J＝16.0Hz，1H)；7.07-7.11(m，1H)；7.19-7.40(m，14H)。

[0358] 实施例26.水解叔丁酯的常规方法

[0359] 将叔丁酯衍生物的甲酸(通常为1g/10mL)溶液在室温下搅拌直到薄层色谱(二氯甲烷95％/甲醇5％)检测不到酯为止，通常的反应时间为约3小时。减压蒸发甲酸；所得固体残余物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液间分配。蒸发有机层获得可以直接用于下一步反应的乳白色固体，或者如果需要，用合适的溶剂系统重结晶。

[0360] 按照实施例26的方法，用合适的叔丁酯制备实施例27-34和34A-34H。

[0361] 实 施 例 27.2(R，S)-( 羧 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0362] 实施例18(0.30g，0.46mmol)水解获得0.27g(定量收率)乳白色固体实施例27；1H NMR(CDCl3)δ4.17-5.28(m，9H)；6.21-6.29(m，1H)，6.68-6.82(m，1H)；7.05-7.75(m，13H)；9.12-9.18(m，1H)。

[0363] 实 施 例 28.2(S)-( 羧 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0364] 实施例19(1.72g，2.59mmol)水解获得1.57g(定量收率)为乳白色固体的1
实 施 例28；H NMR(CDCl3)δ2.61(dd，J＝9.3Hz，J ＝16.6Hz，1H)；3.09-3.14(m，1H)；
4.10-4.13(m，1H)，4.30(d，J＝4.5Hz，1H)；4.39-4.85(m，6H)；6.20(dd，J＝9.6Hz，J ＝
15.7Hz，1H)；6.69(d，J ＝ 15.8Hz，1H)；7.12-7.15(m，2H)；7.26-7.50(m，11H)；7.61(s，
1H)；8.41-8.45(m，1H)。

[0365] 实 施 例 29.2(S)-( 羧 基 乙 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0366] 实施例20(4.97g，7.34mmol)水解获得4.43g(97％)为乳白色固体的实施例29；1H NMR(CDCl3)δ1.92-2.03(m，1H)，2.37-2.51(m，3H)；4.13-4.19(m，1H)，3.32(d，J ＝
4.9Hz，1H)；4.35-4.39(m，1H)；4.44(dd，J＝5.9Hz，J＝14.9Hz，1H)；4.50-4.57(m，2H)，
4.61-4.67(m，1H)；4.70-4.76(m，1H)；6.24(dd，J＝9.6Hz，J＝15.8Hz，1H)；6.70(d，J＝
15.8Hz，1H)；7.18-7.47(m，14H)。

[0367] 实 施 例 30.2(S)-( 羧 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]乙酸N-[4-(2-苯基乙
基)]哌嗪酰胺

[0368] 实施例21(1.88g，2.78mmol)水解获得1.02g(60％)为乳白色固体的实施例30；1H NMR(CDCl3)δ2.63(dd，J ＝ 6.0Hz，J ＝ 16.5Hz，1H)；2.75-2.85(m，1H)；3.00(dd，J ＝ 8.2Hz，J ＝ 16.6Hz，1H)；3.13-3.26(m，4H)；3.37-3.56(m，4H)；3.86-4.00(m，
1H)；4.05-4.11(m，1H)；4.24(d，J ＝ 5.0Hz，1H)；4.46-4.66(m，1H)；4.65-4.70(m，1H)；
5.10-5.15(m，1H)；6.14(dd，J ＝ 9.3Hz，J ＝ 15.9Hz，1H)；6.71(d，J ＝ 15.9Hz，1H)；
7.22-7.41(m，15H)；12.02(s，1H)。

[0369] 实 施 例 31.2(S)-( 羧 基 乙 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]乙酸N-[4-(2-苯基乙
基)]哌嗪酰胺

[0370] 实施例22(0.383g，0.55mmol)水解获得0.352g(定量收率)为乳白色固体的1
实 施 例 31；H NMR(CDCl3)δ1.93-2.01(m，1H)；2.07-2.36(m，6H)；2.82-2.90(m，1H)；
3.00-3.20(m，4H)；3.36-3.54(m，4H)；3.74-3.82(m，1H)；4.06-4.11(m，1H)；4.29(d，J ＝
4.9Hz，1H)；4.33-4.46(m，2H)；4.50-4.58(m，2H)；4.67-4.72(m，1H)；4.95-5.00(m，1H)；
6.18(dd，J ＝ 9.2Hz，J ＝ 16.0Hz，1H)；6.67(d，J ＝ 15.9Hz，1H)；7.19-7.42(m，15H)；
8.80(brs，1H)。

[0371] 实 施 例 32.2(R)-( 羧 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0372] 实施例23(1.51g，2.27mmol)水解获得1.38g(定量收率)为乳白色固体的实施例32。

[0373] 实 施 例 33.2(R)-( 羧 基 乙 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0374] 实施例24(0.604g，0.89mmol)水解获得0.554g(定量收率)为乳白色固体的实施例33。

[0375] 实 施 例 34.2(S)-( 羧 基 乙 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]乙酸N-(4-环己基)哌
嗪酰胺

[0376] 实施例25(0.537g，0.80mmol)水解获得0.492g(定量收率)为乳白色固体的1
实 施 例 34。H NMR(CDCl3)δ1.09-1.17(m，1H)；1.22-1.33(m，2H)；1.40-1.47(m，2H)；
1.63-1.67(m，1H)；1.85-1.90(m，2H)；1.95-2.00(m，1H)；2.05-2.15(m，3H)；2.20-2.24(m，
1H)；2.30-2.36(m，1H)；2.85-2.93(m，1H)；3.25-3.33(m，1H)；3.36-3.46(m，2H)；
3.81-3.87(m，1H)；4.08(t，J ＝ 8.3Hz，1H)；4.28(d，J ＝ 5.0Hz，1H)；4.33-4.56(m，4H)；
4.70(t，J＝8.3Hz，1H)；4.83-4.91(m，1H)；6.17(dd，J＝9.1Hz，J＝15.9Hz，1H)；6.67(d，J＝15.9Hz，1H)；7.25-7.44(m，10H)；8.22(brs，1H)。

[0377] 实施例34A.2(S)-(2-(4-环己基哌嗪-1-基羰基)乙基)-2-[3(S)-(4(S)-苯基唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]乙酸

[0378] 实施例25A(0.787g，1.28mmol)水解获得0.665g(92％)为乳白色固体的实1
施 例 34A；H NMR(CDCl3)δ1.05-1.13(m，1H)；1.20-1.40(m，5H)；1.60-1.64(m，1H)；
1.79-1.83(m，2H)；2.00-2.05(m，2H)；2.22-2.44(m，3H)；2.67-2.71(m，1H)；2.93-3.01(m，
4H)；3.14-3.18(m，1H)；3.38-3.42(m，1H)；3.48-3.52(m，1H)；3.64-3.69(m，1H)；
4.06-4.14(m，2H)；4.34-4.43(m，2H)；4.56(t，J ＝ 8.8Hz，1H)；4.73(t，J ＝ 8.4Hz，1H)；
6.15(dd，J＝9.1Hz，J＝16.0Hz，1H)；6.65(d，J＝16.0Hz，1H)；7.25-7.42(m，10H)。

[0379] 实 施 例 34B.2(R)-( 羧 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]乙酸N-(2-氟-3-三氟
甲基苄基)甲酰胺

[0380] 实施例25B(0.26g，0.38mmol)水解获得0.238g(定量收率)为乳白色固体的实施例34B；1H NMR(CDCl3)δ3.27(d，J＝7.2Hz，1H)；4.06(t，J＝7.2Hz，1H)；4.15(t，J＝8.1Hz，1H)；4.27(d，J＝4.8Hz，1H)；4.56-4.76(m，5H)；6.34(dd，J＝9.5Hz，J＝15.7Hz，
1H)；6.80(d，J＝15.7Hz，1H)；7.06(t，J＝7.7Hz，1H)；7.31-7.54(m，12H)；8.58(t，J＝
5.9Hz，1H)。

[0381] 实 施 例 34C.2(R)-( 羧 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-[(S)-α-甲基苄基]-乙酰胺

[0382] 实施例25C(0.215g，0.35mmol)水解获得0.195g(定量收率)为乳白色固体的实1
施例34C；H NMR(CDCl3)δ1.56(d，J＝7.0Hz，1H)；3.10(dd，J＝4.5Hz，J＝17.9Hz，1H)；
3.18(dd，J＝9.8Hz，J＝17.9Hz，1H)；4.00(dd，J＝4.5Hz，J＝9.7Hz，1H)；4.14(t，J＝
8.2Hz，1H)；4.26(d，J＝4.7Hz，1H)；5.02-5.09(m，1H)；6.41(dd，J＝9.4Hz，J＝15.8Hz，
1H)；6.78(d，J＝15.8Hz，1H)；7.18(t，J＝7.3Hz，1H)；7.26-7.43(m，12H)；8.29(d，J＝
8.2Hz，1H)。

[0383] 实 施 例 34D.2(R)-( 羧 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-[(R)-α-甲基苄基]
乙酰胺

[0384] 实施例25D(0.22g，0.35mmol)水解获得0.20g(定量收率)为乳白色固体的实1
施例34D；H NMR(CDCl3)δ1.59(d，J＝7.0Hz，1H)；3.25(d，J＝7.0Hz，2H)；3.92(t，J＝
7.3Hz，1H)；4.15(t，J＝8.3Hz，1H)；4.26(d，J＝5.0Hz，1H)；4.52(dd，J＝ 4.8Hz，J＝
9.3Hz，1H)；4.65(t，J＝8.8Hz，1H)；4.72(t，J＝8.3Hz，1H)；5.07-5.28(m，1H)；6.29(dd，J＝9.5Hz，J＝15.6Hz，1H)；6.71(d，J＝16.0Hz，1H)；7.20-7.43(m，13H)；8.31(d，J＝
8.0Hz，1H)。

[0385] 实 施 例 34E.2(R)-( 羧 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-甲基-N-(3-三氟甲
基苄基)-乙酰胺

[0386] 实施例25E(0.253g，0.37mmol)水解获得0.232g(定量收率)为乳白色固体的实1
施例34E；H NMR(CDCl3)δ3.07-3.15(m，4H)；4.13(t，J＝8.2Hz，1H)；4.30(d，J＝4.9Hz，
1H)；4.46-4.78(m，5H)；5.23(dd，J＝4.6Hz，J＝9.7Hz，1H)；6.20(dd，J＝ 9.4Hz，J＝
15.9Hz，1H)；6.73(d，J＝15.9Hz，1H)；7.25-7.43(m，15H)。

[0387] 实 施 例 34F.2(S)-( 羧 基 乙 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-氯苯乙烯-2-基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基
苄基)-乙酰胺

[0388] 实施例25F(0.707g，0.99mmol)水解获得0.648g(99％)为乳白色固体的实施1
例 34F；H NMR(CDCl3)δ2.22-2.28(m，2H)；2.49-2.64(m，2H)；4.09(t，J ＝ 8.0Hz，1H)；
4.25-4.62(m，6H)；4.87(t，J＝8.0Hz，1H)；6.88(s，1H)；7.25-7.66(m，15H)。

[0389] 实 施 例 34G.2(R)-( 羧 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2′-甲氧基苯乙烯-2-基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三
氟甲基苄基)-乙酰胺

[0390] 实施例25G(0.268g，0.39mmol)水解获得0.242g(98％)为乳白色固体的实施1
例 34G；H NMR(CDCl3)δ3.26(d，J ＝ 7.1Hz，1H)；3.79(s，3H)；4.14(t，J ＝ 8.2Hz，1H)；
4.25(d，J＝4.5Hz，1H)；4.51(dd，J＝5.9Hz，J＝15.5Hz，1H)；4.53-4.66(m，4H)；6.36(dd，J＝9.4Hz，J＝15.8Hz，1H)；8.88(t，J＝8.2Hz，1H)；6.70(d，J＝15.8Hz，1H)；7.18(d，J＝6.5Hz，1H)；7.25-7.48(m，10H)；7.48(s，1H)；8.66-8.69(m，1H)。

[0391] 实 施 例 34H.2(R)-( 苄 氧 基 甲 基 )-2-[3(S)-(4(S)- 苯 基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-乙酸

[0392] 实施例25H(0.16g，0.28mmol)水解获得0.144g(定量收率)为乳白色固体的实1
施例34H；H NMR(CDCl3)δ3.65(dd，J＝4.0Hz，J＝9.5Hz，1H)；3.82(dd，J＝5.5Hz，J＝
9.5Hz，1H)；4.11(dd，J＝ 7.8Hz，J＝8.8Hz，1H)；4.33(s，2H)；4.50(d，J＝ 5.0Hz，1H)；
4.57(t，J＝9.0Hz，1H)；4.67(dd，J＝4.0Hz，J＝5.0Hz，1H)；4.69(dd，J＝5.0Hz，J＝
9.5Hz，1H)；4.75(t，J＝8.0Hz，1H)；6.17(dd，J＝9.3Hz，J＝15.8Hz，1H)；6.55(d，J＝
16.0Hz，1H)；7.09-7.12(m，2H)；7.19-7.42(m，13H)。

[0393] 实施例35.2(S)-[4-(2-苯基乙基)哌嗪-1-基-羰基乙基]-2-[3(S)-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0394] 按照实施例6的方法，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例29的羧酸替代以及将3-(三氟甲基)苄基胺用4-(2-苯基乙基)哌嗪替代制备标题化合物；1H NMR(CDCl3)δ2.21-2.23(m，1H)；2.25-2.45(m，6H)；2.52-2.63(m，3H)；
2.72-2.82(m，2H)；3.42-3.48(m，2H)；3.52-3.58(m，1H)；4.13-4.18(m，1H)；4.26(dd，J ＝
5.1Hz，J＝8.3Hz，1H)；4.29(d，J＝5.0Hz，1H)；4.44(dd，J＝6.0Hz，J＝15.0Hz，1H)；
4.54(dd，J＝6.2Hz，J＝14.9Hz，1H)；4.61-4.68(m，2H)；4.70-4.75(m，1H)；6.27(dd，J＝
9.6Hz，J＝15.8Hz，1H)；6.73(d，J＝15.8Hz，1H)；7.16-7.60(m，19H)；8.07-8.12(m，1H)；
FAB+(M+H)+/z 794；C45H46F3N5O5的元素分析：C，68.08；H，5.84；N，8.82；实测值：C，67.94；H，
5.90；N，8.64。

[0395] 表6所示实施例36-42和42A按照实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例27替代，并且3-(三氟甲基)苄基胺用合适的胺替代；所列实施例的1H NMR谱与指定结构一致。

[0396]

[0397] 表6.

[0398]

[0399]

[0400] 表7所示实施例43-86和86A按照实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例28替代，并且3-(三氟甲基)苄基胺用合适的胺替1
代；所列实施例的 H NMR谱与指定结构一致。

[0401]

[0402] 表7.

[0403]

[0404]

[0405]

[0406] 表8所 示实 施例 87-120和120A-120D按 照实 施例 6的方 法制 备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例29替代，并且1
3-(三氟甲基)苄基胺用合适的胺替代；所列实施例的 H NMR谱与指定结构一致。

[0407] 表8.

[0408]

[0409]

[0410]

[0411] 表9所示实施例121-132按照实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例30替代，并且3-(三氟甲基)苄基胺用适当的胺替代；1
所列实施例的 H NMR谱与指定结构一致。

[0412]

[0413] 表9.

[0414]

[0415]

[0416] 表10所示实施例133-134和134A-134F按照实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例32替代，并且3-(三氟甲基)苄基胺用合适的胺替代；所列实施例的1H NMR谱与指定结构一致。

[0417]

[0418] 表10.

[0419]

[0420] 表11所示实施例135-140按照实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例33替代，并且3-(三氟甲基)苄基胺用合适的胺替1
代；所列实施例的 H NMR谱与指定结构一致。

[0421]

[0422] 表11.

[0423]

[0424] 表12所示实施例141-171按照实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例34替代，并且3-(三氟甲基)苄基胺用合适的胺替1
代；所列实施例的 H NMR谱与指定结构一致。

[0425]

[0426] 表12.

[0427]

[0428]

[0429] 表13所示 实施 例172-221按照 实施例6 的方法 制备，除了N-苄 氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例34A替代，并且3-(三
1
氟甲基)苄基胺用合适的胺替代；所列实施例的 H NMR谱与指定结构一致。

[0430] 表13.

[0431]

[0432]

[0433]

[0434] 实施例222.2(R)-[[4-(哌啶-1-基)哌啶-1-基]羰基甲基]-2-[3(S)-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]乙酸N-(2-氟-3-三氟甲基苄基)甲酰胺

[0435] 实施例222按照实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例34B替代，并且3-(三氟甲基)苄基胺用4-(哌啶-1-基)哌啶替1
代；实施例222的 H NMR谱与指定的结构一致。

[0436] 实施例223.2(R)-[[4-(哌啶-1-基)哌啶-1-基]羰基甲基]-2-[3(S)-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-[(S)-α-甲基苄基]-乙酰胺

[0437] 实施例223按照实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例34C替代，并且3-(三氟甲基)苄基胺用4-(哌啶-1-基)哌啶替1
代；实施例223的 H NMR谱与指定的结构一致。

[0438] 实施例224.2(R)-[[4-(哌啶-1-基)哌啶-1-基]羰基甲基]-2-[3(S)-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-[(R)-α-甲基苄基]乙酰胺

[0439] 实施例224按照实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例34D替代，并且3-(三氟甲基)苄基胺用4-(哌啶-1-基)哌啶替1
代；实施例223的 H NMR谱与指定的结构一致。

[0440] 实施例225.2(R)-[[4(哌啶-1-基)哌啶-1-基]羰基甲基]-2-[3(S)-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯乙烯基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-甲基-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0441] 实施例225按照实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例34E替代，并且3-(三氟甲基)苄基胺用4-(哌啶-1-基)哌啶替代；实施例223的1H NMR谱与指定的结构一致。

[0442] 表14所示实施例226-230按照实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例34F替代，并且3-(三氟甲基)苄基胺用合适的胺替代；所列实施例的1H NMR谱与指定的结构一致。

[0443]

[0444] 表14.

[0445]

[0446] 实施例231.2(R)-[[4-(哌啶-1-基)哌啶-1-基]羰基甲基]-2-[3(S)-(4(S)-苯基 唑 烷 -2- 酮 -3- 基 )-4(R)-(2 ′ - 甲 氧 基 苯 乙 烯 -2- 基 ) 氮 杂 环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0447] 实施例231按照实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例34G替代，并且3-(三氟甲基)苄基胺用4-(哌啶-1-基)哌啶替1
代；实施例231的 H NMR谱与指定的结构一致。

[0448] 表15所示实施例232-233按照实施例6的方法制备，除了N-苄氧基羰基-D-天门冬氨酸β-叔丁酯一水合物用实施例34H替代，并且3-(三氟甲基)苄基胺用合适的胺1
替代；所列实施例的 H NMR谱与指定结构一致。

[0449]

[0450] 表15.

[0451]

[0452] 实 施 例 234.(2RS)-[4-( 哌 啶 -1- 基 ) 哌 啶 -1- 基 羰 基 ]-2- 甲基-2-[3(S)-(4(S)-苯 基 唑 烷-2-酮 -3-基)-4(R)-(2- 苯 乙 烯 基 )氮 杂 环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0453]

[0454] 将实施例37(50mg，0.067mmol)的四氢呋喃(4mL)溶液在-78℃依次用氢化钠(4mg，0.168mmol)和甲基碘(6μL，0.094mmol)处理。所得混合物缓慢升至室温，然后蒸发。所得残余物在二氯甲烷和水间分配，蒸发有机层。所得残余物用硅胶色谱法提纯(95∶5+ +
氯仿/甲醇)获得28mg(55％)为乳白色固体的标题化合物；MS(ES)：m/z＝757(M)。

[0455] 实施例235.2(S)-[[(1-苄基哌啶-4-基)氨基]羰基甲基]-2-[3(S)-(4(S)-苯基 唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯基乙-1-基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0456] 按照实施例8的方法制备实施例235，除了N-苄氧基羰基-L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺用实施例63(50mg，0.064mmol)替代，得到40mg(80％)为1
乳白色固体的实施例235；实施例235的 H NMR谱与指定的结构一致。

[0457] 实施例236.(2S)-[(4-环己基哌嗪-1-基)羰基乙基]-2-[3(S)-(4(S)-苯基唑烷-2-酮-3-基)-4(R)-(2-苯基乙-1-基)氮杂环丁-2-酮-1-基]-N-(3-三氟甲基苄基)-乙酰胺

[0458] 按照实施例8的方法制备实施例236，除了N-苄氧基羰基-L-天门冬氨酸β-叔丁酯α-(3-三氟甲基)苄基酰胺用实施例110(50mg，0.065mmol)替代获得42mg(84％)为1
乳白色固体的实施例236；实施例236的 H NMR谱与指定的结构一致。

[0459] 表16举例说明各化合物进一步通过质谱分析表征，用FAB+观测相应的(M+H)+母离子。

[0460] 表16.

[0461]

[0462]

[0463]

[0464] 方法实施例1.人后叶加压素V1a受体结合测定

[0465] 在CHO细胞表达人V1a受体的细胞系(以下称为hV1a细胞系)从Dr.Michael Brownstein，NIMH，Bethesda，MD，USA 获 得。Thibonnier 等 (Journal of Biological Chemistry，269，3304-3310(1994))描述了hV1acDNA序列，表达方法与Morel等(1992)介绍的相同。hV1a细胞系在含10％胎牛血清和250μg/ml G418(Gibco，Grand Island，NY，USA)的α-MEM中生长。对于竞争性结合测定，将hV1a细胞从融合烧瓶以1∶10的稀释度接种于6孔培养板，维持培养物至少两天。然后除去培养介质，用2ml结合缓冲液(25mM Hepes，0.25％BSA，1x DMEM，PH＝7.0)洗涤细胞。向各孔中加入990μl含1nM 3H-AVP的结合缓冲液，然后加入10μl系列稀释的实施例化合物的DMSO溶液。所有温育一式三份，剂量抑制曲线包括完全结合(DMSO)和含IC50的5个浓度(0.1、1.0、10、100和1000nM)受试试剂。
100nM冷AVP(Sigma)用于评价非特异性结合。细胞在37℃温育45分钟，移出分析混合物，各孔用PBS(pH＝7.4)洗涤三次。每个孔中加入1ml 2％ SDS，让板静置30min。将孔的所有内含物转移到闪烁小瓶。各孔用0.5ml PBS冲洗，然后将冲洗液加入相应的小瓶。每个小瓶中再加入3ml闪烁液(Ecoscint，National Diagnostics，Atlanta，Georgia)。将样品用液体闪烁计数器(Beckman LS3801)计数。IC50值用Prism Curve拟合软件计算。

[0466] 以上实施例中说明的所有链烷双酸酯和双酰胺按照此分析方法测试。某些优选化合物的结合亲和力总结于表17。

[0467] 表17.

[0468]

[0469] 方法实施例2.磷脂酰肌醇更新的抑制作用

[0470] 后叶加压素的生理影响通过特异性G-蛋白偶联受体介导。后叶加压素V1a受体偶联至G蛋白的Gq/G11家族，介导磷脂酰肌醇更新。本发明化合物的激动剂或拮抗剂特征由抑制后叶加压素介导性磷脂酰肌醇更新的能力确定，检测方法在以下段落中介绍。本发明的代表性化合物实施例35、44、88、110和133的化合物用此分析方法测试，发现为后叶加压素V1a拮抗剂。

[0471] 细胞培养和标记细胞

[0472] 在分析三天前，分离接近融合的培养物hV1a细胞，接种到6孔组织培养板，每个2 3
75cm 烧瓶接种约100个孔(相当于12∶1分流比)。每个孔中有1mL含2μCi[H]肌醇
(American Radiolabeled Chemicals，St.Louis，MO，USA)的生长培养基。

[0473] 温育

[0474] 除了基础和10nM AVP(两者的n＝6)外，其余分析一式三份。将AVP((精氨酸后叶加压素)，Peninsula Labs，Belmont，CA，USA(#8103))溶于0.1N乙酸。受试试剂溶于DMSO，用DMSO稀释200倍得到最终测试浓度。将受试试剂和AVP(或相应体积的DMSO)以5μL的DMSO溶液各自加入到装有1mL分析缓冲液(Tyrode氏平衡盐溶液，其中包含50mM葡萄糖、10mM LiCl、15mM HEPES pH 7.4，10μM膦酰二肽和100μM杆菌肽)的12x75mm玻璃试管中。温育顺序随机排列。如下开始温育：除去预先标记的培养基，用1mL0.9％NaCl洗涤单层一次，然后转移分析管的内含物到相应的孔中。将板在37℃温育1小时。除去温育培养基，加入500μL冰冷的5％(w/v)三氯乙酸并让各孔静置15分钟以中止温育。

[0475] [3H]肌醇磷酸酯的检测方法

[0476] BioRad Poly-Prep Econo-Columns中填装0.3mL AG 1 X-8 100-200甲酸酯形式的树脂。将树脂以1∶1与水混合，并在各柱中加入0.6mL。然后将柱用10mL水洗涤。闪烁小瓶(20mL)放置于各柱下。对于各个孔，内含物转移到小型柱，然后将孔用0.5mL蒸馏水洗涤，将洗涤液也加入小型柱。然后将柱用5mL 5mM肌醇洗涤两次至洗脱液中没有肌醇。等分试样(1mL)转移到20mL闪烁小瓶，加入10mLBeckman Ready Protein Plus。在肌醇
3
洗涤完成后，空的闪烁小瓶放置在柱下，三次加入含0.1N甲酸的1mL 0.5M甲酸铵洗脱[H]肌醇磷酸酯。优化洗脱条件以回收肌醇一、二和三磷酸酯，而不会洗脱更多的代谢惰性的四、五和六-磷酸酯。在各样品中加入10mL高盐容量的闪烁液，例如Tru-Count High Salt Capacity或Packard Hionic-Fluor。如下检测肌醇脂质：各孔中加入1mL 2％十二烷基硫酸钠(SDS)，让各孔静置至少30min，然后将溶液转移到20mL闪烁小瓶，然后向其中加入
10mL Beckman Ready Protein Plus闪烁液。样品用Beckman LS 3801液体闪烁计数器计数10min。各孔的总肌醇结合量计算为游离肌醇、肌醇磷酸酯和肌醇脂质之和。

[0477] M数据分析：浓度抑制实验

[0478] AVP的浓度反应曲线以及受试试剂对10nM AVP的浓度抑制曲线通过非线性最小二乘方曲线拟合至4个参数的逻辑函数来分析。变化基础和最大肌醇磷酸酯、EC50或IC50以及Hill系数的参数实现最佳拟合。在如下假设下加权曲线拟合：标准偏差与放射性dpm成比例。每个试验都制备AVP的完全浓度反应曲线，基于同一试验中AVP的EC50，用6
Cheng-Prusoff方程将IC50值转化为Ki值。肌醇磷酸酯表示为dpm/10dpm总肌醇结合。

[0479] 数据分析：竞争性试验

[0480] 测试受试试剂竞争性的试验包括AVP在没有受试试剂以及存在两种或两种以上浓度的受试试剂下的浓度反应曲线。数据拟合到竞争性逻辑方程：

[0481]

[0482] 其中Y为肌醇磷酸酯的dpm，B为基础肌醇磷酸酯浓度，M为肌醇磷酸酯浓度的最大增量，A为激动剂(AVP)浓度，E为激动剂的EC50，D为拮抗剂浓度(受试试剂)，K为拮抗剂Ki，Q为协同性(Hill系数)。

[0483] 后叶加压素V1a受体介导血小板聚集也是大家所熟知的。后叶加压素V1a受体激动剂引起血小板聚集，而后叶加压素V1a受体拮抗剂抑制由后叶加压素或后叶加压素V1a激动剂促进的血小板聚集作用。本发明化合物的拮抗活性程度可以通过以下段落介绍的分析方法检测。

[0484] 从健康人类志愿者通过静脉穿刺获得血液，将血液与肝素混合(将60mL血加入0.4mL肝素化盐水溶液(4mg肝素/mL盐水))。血小板富集血浆(PRP)通过离心全血制备(150xg)，将消炎痛(3μM)加入PRP阻滞凝血 烷介导性释放反应。在37℃连续搅拌PRP，在加入精氨酸后叶加压素(AVP)(30nM)引起聚集作用后，光密度改变。将化合物溶于50％二甲亚砜(DMSO)，并在加入AVP前加入(10μL/415μL PRP)。测量AVP诱导性聚集作用的抑制百分数并计算IC50。

[0485] 在研究中使用洗涤后的血小板，将50mL全血与10mL柠檬酸盐/肝素溶液(85mM柠檬酸钠，64mM柠檬酸，111mM葡萄糖，5单位/mL肝素)以及上述分离的PRP混合。然后离心PRP(150xg)，将沉淀重悬浮于包含10μM消炎痛的生理缓冲液(10mM HEPES、135mM氯化钠、5mM氯化钾和1mM氯化镁)。将人纤维蛋白原(0.2mg/mL)和氯化钙(1mM)加入搅拌下的血小板，然后如前所述用AVP(30nM)引起聚集作用。

[0486] 式I化合物在拮抗后叶加压素V1a受体中的活性提供了一种拮抗后叶加压素V1a受体的方法，该方法包括给予需要这种治疗的患者有效量的式I化合物。已知给予拮抗后叶加压素V1a受体的药物可获得许多生理学及治疗学上的有益效果。这些活性可以分为外周活性和中枢活性。外周应用包括给予式I后叶加压素V1a拮抗剂作为心力衰竭的附加药物或作为抗血栓形成药。中枢作用包括给予式I后叶加压素V1a拮抗剂治疗强迫症、攻击性疾病、抑郁症和焦虑症。

[0487] 强迫症似乎在程度和症状上有很大的不同，患者通常有不可控制的冲动进行无用的、仪式性的行为。任何超越合理需求的获取、订货、清洁等行为是强迫症的外在特征。严重的强迫症患者可能除了进行仪式性的行为外，不能做任何其它工作。各种类型的强迫症是本发明辅助治疗方法和组合物的优选治疗靶。式I化合物治疗强迫症的效果被以下的检测证实。

[0488] 将后叶加压素(10-100nL，1-100μM)微量注射到黄金地鼠前下丘脑可以诱发一种特殊的刻板症侧腹标记行为(Ferris等，Science，224，521-523(1984)；Albers和Ferris，Regulatory Peptides，12，257-260(1985)；Ferris 等，European Journal of Pharmacology，154，153-159(1988))。随后进行刺激，通过清洁、舔和梳理外侧腹部的大分泌脂质腺引起所述行为。清洁侧腹腺的发作可能非常强烈，以至侧腹区域变得乱蓬蓬并且沾满唾液。在清洁后，地鼠表现出侧腹标记行为(一种涉及嗅觉交流的气味标记行 为 )(Johnston，Physio.Behav.，51，437-448(1985)；Ferris 等，Physio.Behav.，40，661-664(1987))，拱起背部，靠着任何垂直表面强烈摩擦腹侧腺。后叶加压素诱导性侧腹标记行为通常在微量注射后1分钟内诱发(Ferris等，Science，224，521-523(1984))。该行为是后叶加压素特异性的，微量注射其它神经肽、刺激性氨基酸以及儿茶酚胺均不能引起侧腹标记行为(Ferris等，Science，224，521-523(1984)；Albers和Ferris，Regulatory Peptides，12，257-260(1985))。此外，侧腹标记行为对后叶加压素V1受体是特异性的，因为所述行为被V1受体拮抗剂选择性抑制并且被V1受体激动剂选择性活化(Ferris等，Neuroscience Letters，55，239-243(1985)；Albers 等，Journal of Neuroscience，6，
2085-2089(1986)；Ferris等，European Journal of Pharmacology，154，153-159(1988))。

[0489] 所有地鼠为成年雄性黄金地鼠(Mesocricetus auratus)，体重约为160g。地鼠接受立体定位手术，在行为测试前让其恢复。让PlexiglasTM笼中的地鼠保持在反向光循环条件下(14h光，10h黑暗，在19:00开灯)，任意进食和饮水。

[0490] 立体定位手术在戊巴比妥麻醉下进行。立体定位坐标为：前囟前1.1mm，正中矢状缝侧面1.8mm(与垂直线成8°角)，硬脑膜下4.5mm。压尺放置在耳间线水平。将单向26号导向插管降低到所述位置，用牙科粘固粉固定在头颅。将导向插管用33号充填器闭合，但比导管插管延伸1mm。用于微量注射的内部插管比导向插管延长3.0mm达到下丘脑前部。

[0491] 给仓鼠微量注射1μM 150nL后叶加压素。后叶加压素以与200mM、20mM、2mM受试化合物的混合物形式或单独形式溶于溶媒二甲亚砜中使用。后叶加压素和受试化合物都溶于100％二甲亚砜中。所有注射都在下丘脑前部。对在干净笼中的仓鼠的腹侧标记行为计分10分钟。

[0492] 本发明的另一方面是联合用于治疗强迫症、攻击性疾病或抑郁症的血清素再吸收抑制剂使用式I化合物。可用作血清素再吸收抑制剂的化合物包括但不限于：

[0493] 市售的氟西汀(N-甲基-3-(对三氟甲基苯氧基)-3-苯基丙基胺)为盐酸盐形式，是其两种旋光对映体的外消旋混合物。美国专利4,314,081是早期的有关该化合物的文献。Robertson等，J.Med.Chem.，31，1412(1988)，公开了氟西汀的R和S旋光对映体的分离方法，并且证实它们作为血清素摄取抑制剂的活性相互类似。在本文中，术语“氟西汀”是指其任何酸加成盐或游离碱，并且包括外消旋混合物或者任一的R和S旋光对映体；

[0494] 通常给予的度洛西汀(N-甲基-3-(1-萘氧基)-3-(2-噻吩基)丙胺)为其盐酸盐并且为(+)对映异构体。美国专利4,956,388首先公开该化合物，证实了它具有很好药效。本文使用的术语“度洛西汀”是指所述分子的任何酸加成盐或游离碱；

[0495] 文拉法辛为文献已知的，其合成方法和作为血清素和去甲肾上腺素吸收抑制剂的活性在美国专利4,761,501中公开。文拉法辛在该文献中为化合物A；

[0496] 米那普仑(N，N-二乙基-2-氨基甲基-1-苯基环丙烷甲酰胺)在美国专利4,478,836中公开，在该专利的实施例4中制备了米那普仑。专利中介绍该化合物为抗抑郁剂。Moret等，Neuropharmacology，24，1211-19(1985)，描述了作为血清素和去甲肾上腺素再吸收抑制剂的药理学活性；

[0497] 西酞普兰(1-[3-(二甲基氨基)丙基]-1-(4-氟苯基)-1，3-二氢-5-异苯并呋喃腈)作为血清素再吸收抑制剂在美国专利4,136,193中公开。其药理学由Christensen等(Eur.J.Pharmacol.，41，153(1977))公开，对抑郁症的临床效果的报道参见Dufour等，Int.Clin.Psychopharmacol.，2，225(1987)以及Timmerman等，同上，239；

[0498] 氟伏沙明(5-甲氧基-1-[4-(三氟甲基)苯基]-1-戊酮O-(2-氨基乙基)肟)由美国专利4,085,225公开。关于该药物的科技文章已经在以下文献中公开：Claassen等，Brit.J.Pharmacol.，60，505(1977)；De Wilde等，J.Affective Disord.，4，249(1982)；
Benfield等，Drugs，32，313(1986)；

[0499] 帕罗西汀(反式-(-)-3-[(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基氧基)甲基]-4-(4-氟苯基)哌啶)可参见美国专利3,912,743和4,007,196。以下文献中报道了它的药物活性：Lassen，Eur.J.Pharmacol.，47，351(1978)；Hassan等，Brit.J.Clin.Pharmacol.，19，705(1985)；Laursen等，Acta Psychiat.Scand.，71，249(1985)；Battegay等，Neuropsychobiology，13，31(1985)；

[0500] 美国专利4,536,518公开的血清素再吸收抑制剂舍曲林((1S-顺式)-4-(3，4-二氯苯基)-1，2，3，4-四氢-N-甲基-1-萘基胺盐酸盐)在市场上作为抗抑郁剂销售。

[0501] 所有以上涉及的专利都通过引用结合到本文。

[0502] 本发明这方面的辅助治疗是通过任何可在体内同时提供有效浓度的后叶加压素V1a拮抗剂以及血清素再吸收抑制剂的方式给予各化合物完成。所有有关化合物都可口服并且通常口服用药，优选如此口服附加的联合药物。它们可以一起以单一剂型用药，或者可以分开给药。

[0503] 本发明此方面提供有效降低后叶加压素浓度的作用，这是给予后叶加压素V1a拮抗剂并给予血清素再吸收抑制剂后观测到的效果。本发明此方面特别适合用于治疗抑郁症和强迫症。这样的疾病可能常常对仅用血清素再吸收抑制剂的治疗产生耐药性。

[0504] 方法实施例3.人催产素结合作用和功能分析

[0505] 相信本发明化合物为催产素药物。可购买获得治疗用途的催产素制剂和大量催产素激动剂。在最近几年，已经开发出具有抗子宫收缩获性的催产素拮抗剂，并且对其用于治疗早产和痛经的效果进行了评估(Pavo等，J.Med.Chem.，37，255-259(1994)；Akerlund等，Br.J.Obstet.Gynaecol.，94，1040-1044(1987)；Akerlund 等，Br.J.Obstet.Gynaecol.，86，484-487(1979))。对催产素拮抗剂阿托西班进行了临床研究，结果与安慰剂相比有更显著的早产收缩抑制作用(Goodwin 等，Am.J.Obstet.Gynecol.，170，474(1994))。

[0506] 人催产素受体已经被克隆和表达(Kimura等，Nature，356，526-529(1992))，确定保藏号为X64878。为了证明本发明化合物对人催产素受体的亲和力，用在293细胞表达人催产素受体的细胞系(以下称为OTR细胞系)进行结合研究，基本上按照Morel等(Nature，356，523-526(1992))介绍的方法进行。293细胞系是永久系的原代人胚胎肾细胞，其是用剪切后的人腺病毒5型DNA转化的细胞。被命名为ATCC CRL-1533。

[0507] OTR细胞系在含10％胎牛血清、2mM L-谷酰胺、200μg潮霉素(Sigma，St.Louis，MO，USA)和250μg/ml G418(Gibco，Grand Island，NY，USA)的DMEM(Delbecco′s Modified Essential Medium，Sigma，St.Louis，MO，USA)中生长。为了制备膜，OTR在20个转瓶中生长至融合。用无酶细胞分离培养基(Specialty Media，Lavallette，NJ，USA)分离细胞，以3200rpm离心15min。将沉淀重新悬浮于40mL Tris-HCl(三[羟基甲基]氨基甲烷盐酸盐)缓冲溶液(50mM，pH7.4)，用Tekmar Tissumizer(Cincinnatti，OH USA)均浆1min。以40,000xg离心悬浮液10min。将沉淀同上重新悬浮和离心。最后的沉淀悬浮于80mL Tris
7.4缓冲溶液，在-80℃以4mL的等分试样贮存。用于分析时，各等分试样重新悬浮于分析缓冲液，稀释至375μg蛋白/mL。通过BCA分析(Pierce，Rockford，IL，USA)检测蛋白浓度。

[0508] 分析缓冲溶液为50mM Tris-HCl(三[羟基甲基]氨基甲烷盐酸盐)、5mM MgCl2和3 3
0.1％牛血清白蛋白，pH 7.4。结合分析的放射性配体为[H]催产素([酪氨酰-2，6-H]催产素，48.5 Ci/mmol，DuPontNEN，Boston，MA，USA)。加入试剂顺序为195μL分析缓冲液，
200μL含OTR膜(75μg蛋白)的缓冲溶液、5μL受试试剂的二甲亚砜(DMSO)溶液或仅
3
有DMSO、100μL含[H]催产素的分析缓冲液(终浓度1.0nM)。在室温下温育1小时。用Brandel细胞收获器(Gaithersburg，MD，USA)通过Whatman GF/B玻璃纤维滤膜过滤，将已结合的放射性配体与游离的配体分离，所述滤膜预先用0.3％聚环乙亚胺浸润2h。滤膜用冰冷的50mM Tris-HCl(pH 7.7，25℃)洗涤，将滤膜圈置于闪烁小瓶，然后向小瓶中加入TM
5mL Ready Protein Plus 闪烁液，用液体闪烁计数器计数。所有温育一式三份，剂量抑制曲线包括完全结合、非特异性结合(100μM催产素，Sigma，St.Louis，MO，USA)以及含IC50的6种或7种浓度的受试试剂。完全结合通常为约1,000cpm，非特异性结合约200cpm。通过非线性最小乘方曲线拟合至4个参数的逻辑模型计算IC50值。部分式I化合物已被证实对催产素受体具有亲和力。

[0509] 可用几种生物测定方法检测对催产素受体具有亲和力的化合物的激动或拮抗特征。美国专利5,373,089介绍了一种这样的测定方法，通过引用结合到本文。所述生物测定方法源自Sawyer等(Endocrinology，106，81(1980))介绍的方法，后一方法又基于Holton的报道(Brit.J.Pharmacol.，3，328(1948))。Schild(Brit.J.Pharmacol.，2，189(1947))介绍了pA2评价的分析计算方法。

[0510] 分析方法

[0511] 1.动物-自然发情期的未交配大鼠(Holtzman)的一片1.5cm子宫组织用于分析。

[0512] 2.缓冲液/分析浴-所用缓冲液为Munsicks。此缓冲液包含0.5mMMg2+。在缓冲液中连续通入95％氧/5％二氧化碳气体使得pH 7.4。分析浴的温度为37℃。使用10mL分析浴，它有用于保持温度的水夹套以及用于加入和移出缓冲液的入口和出口。

[0513] 3.多种波动描记器/传感器-将分析用子宫组织片固定在一端并连接至另一端的Statham Strain Gauge Force Transducer，传感器再连接到监测收缩的79型Grass Polygraph。

[0514] 4.分析方案：

[0515] (a)让子宫组织在分析浴中平衡1小时，每隔15分钟用新的缓冲液洗涤。整个平衡期间保持1g的张力。

[0516] (b)首先用10nM催产素刺激组织使组织适应，然后用4mM氯化钾(KCl)检测最大收缩反应。

[0517] (c)然后绘制催产素的累积剂量反应曲线，用相当于最大反应的约80％的催产素浓度评价pA2的拮抗作用。

[0518] (d)使子宫组织与催产素(Calbiochemical，San Diego，CA)接触1分钟，然后洗净。间隔三分钟后加入下一剂量的激动剂或拮抗剂。在测试拮抗剂后，加入激动剂前间隔5分钟。加入激动剂1分钟。用7P10 Grass Integrator对所用的反应积分。一种等于80％最大反应的催产素浓度用于测试拮抗作用。使用三种不同拮抗剂浓度，其中两种浓度将减少激动剂的反应少于50％，一种浓度将减少所述反应大于50％(理想的关系为25％、50％和75％)。各个剂量拮抗剂的重复三次得到三点分析数据。

[0519] (e)pA2的计算-计算拮抗剂的剂量反应(DR)比例，通过绘制Log(DR-1)对Log(拮抗剂浓度)得到Schild′s Plot。通过最小平方回归分析计算所绘制的线。pA2为回归线与Log(DR-1)纵座标的0点的交叉点的拮抗剂浓度。pA2为负的Log(将减少一半激动剂反应的拮抗剂浓度)。

[0520] 大家熟知催产素在分娩和泌乳中的激素作用。催产素激动剂可用于临床诱导泌乳；诱导或加速分娩；调节产后子宫弛缓和出血；在剖腹产手术后或其它子宫手术期间引起子宫收缩；以及诱发治疗性流产。在神经中枢系统起神经递质作用的催产素在中枢功能表达方面也具有重要作用，例如所述中枢功能有母性行为、性行为(包括阴茎勃起、脊柱前凸和交配行为)、打呵欠、耐受性和依赖性机制、进食、清洁、心血管调节以及体温调节(Argiolas和Gessa，Neuroscience and Biobehavioral Reviews，15，217-231(1991))。催产素拮抗剂作为药物具有以下的治疗作用：延迟或预防早产；或为了采取其它治疗措施短暂减慢或抑制分娩。

[0521] 方法实施例4.速激肽受体结合分析

[0522] 相信本发明化合物为速激肽药物。速激肽为具有共同酰胺化羧基末端序列的肽家族。尽管直到70年代初期才对其纯化以及确定一级序列，但是P物质是此家族分离出的第一种肽。在1983和1984年之间，几个研究小组报道分离出两种新的哺乳动物速激肽，现在命名为神经激肽A(也称为K物质、神经调节肽1和神经激肽α)和神经激肽B(也称为神经调节肽K和神经激肽β)。关于上述发现的综述参见J.E.Maggio，Peptides，6(增刊3)，237-243(1985)。

[0523] 速激肽广泛分布于中枢及外周神经系统。从神经释放后，它们产生各种生物学作用，在大多数情况下，其作用取决于在靶细胞膜上表达的特异性受体的活化作用。许多非神经组织也产生速激肽。哺乳动物的速激肽P物质、神经激肽A和神经激肽B通过三种主要的受体亚型起作用，三种受体亚型分别为NK-1、NK-2和NK-3。这些受体在各种器官中存在。

[0524] 此外，相信P物质参与疼痛感觉(包括偏头痛性疼痛和关节炎性疼痛)的神经传递。这些肽还涉及胃肠疾病和胃肠道疾病(例如炎性肠病)。速激肽还涉及在以下讨论的许多疾病中起一定作用。

[0525] 鉴于存在大量与速激肽过量有关的疾病，开发的速激肽受体拮抗剂将用于这些临床疾病。最早的速激肽受体拮抗剂为肽衍生物。由于它们的代谢不稳定性，这些拮抗剂被证明其药学功效有限。最近的出版物介绍了新型非肽基速激肽受体拮抗剂，通常它们比更早的速激肽受体拮抗剂类型具有更高的口服生物利用度和代谢稳定性。这样的更新的非肽基速激肽受体拮抗剂的例子可在以下文献中找到：欧洲专利公开591,040 A1，1994年4月6日公开；PCT公开WO 94/01402，1994年1月20日公开；PCT公开WO 94/04494，1994年3月3日公开；PCT公开WO 93/011609，1993年1月21日公开，PCT公开WO 94/26735，1994年11月24日公开。可用于评价速激肽受体拮抗剂的分析方法在本领域中众所
周知。参见例如J.Jukic等，Life Sciences，49，1463-1469(1991)；N.Kucharczyk等，Journal of Medicinal Chemistry，36，1654-1661(1993)；N.Rouissi等，Biochemical and Biophysical Research Communications，176，894-901(1991)。

[0526] 方法实施例5.NK-1受体结合分析

[0527] 采用D.G.Payan等(Journal of Immunology，133，3260-3265(1984))公开的方案的修改方案进行放射性受体结合分析。在此分析中，在递增竞争者浓度存在下，IM9细胞的6
等分试样(1x10 细胞/管，补充10％胎牛血清的RPMI 1604培养基)用20pM 125I-标记的P物质在4℃温育45分钟。

[0528] IM9细胞系是被充分表征的细胞系，很容易从出版物获得。参见例如Annals of the New York Academy of Science，190，221-234(1972)；Nature(London)，251，443-444(1974)；Proceedings of the National Academy of Sciences(USA)，71，
84-88(1974)。将这些细胞在补充了50μg/mL硫酸庆大霉素和10％胎牛血清的RPMI 1640常规培养。

[0529] 通过玻璃纤维滤膜收获系统过滤中止反应，使用的滤膜预先用0.1％聚环乙亚胺浸润20分钟。被标记的P物质的特异性结合在20nM未标记配体存在下检测。

[0530] 方法实施例6.NK-2受体结合分析

[0531] CHO-hNK-2R细胞是源自CHO用人NK-2受体变换的细胞系，每个细胞表达约2
400,000个这样的受体，装于75cm 烧瓶或转瓶的CHO-hNK-2R细胞在补充10％胎牛血清的基本成分培养基(α改进)中生长。人NK-2受体的基因序列参见N.P.Gerard等，Journal of Biological Chemistry，265，20455-20462(1990)。

[0532] 为了制备膜，将30个融合转瓶培养物通过如下方法分离：用10ml不含钙和镁的Dulbecco磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤各个转瓶，然后加入10ml无酶细胞分离溶液(PBS基底，Specialty Media，Inc.)。在加入15分钟后，汇集分离的细胞，用临床离心机以1,000RPM离心10min。如下制备膜：用 匀浆器将悬浮于300mL 50mMTris缓冲液(pH 7.4)中的细胞沉淀均浆10-15秒，随后用Beckman JA- 转鼓以
12,000RPM(20,000xg)离心30min。沉淀再按照上述步骤洗涤一次，将最后的沉淀重新悬浮于100-120mL 50mM Tris缓冲液(pH7.4)，以4ml等分试样在-70℃冷冻贮藏。此制剂的蛋白浓度为2mg/mL。

[0533] 对于受体结合分析，将4-mL等分试样的CHO-hNK-2R膜制剂悬浮于40mL分析缓冲液(50mM Tris，pH 7.4，3mM氯化锰，0.02％牛血清白蛋白(BSA)和4μg/mL胰凝乳蛋白酶125
抑制剂)。每个样品使用200μL匀浆(40μg蛋白)。放射性配体为[ I]碘代组氨酰-神经激肽A(New England Nuclear，NEX-252)，2200Ci/mmol。以20nCi/100μL在分析缓冲液中制备所述配体；分析的终浓度为20pM。用1μM麝香蛸素检测非特异性结合。用麝香蛸素的从0.1到1000nM的10种浓度得到标准浓度反应曲线。

[0534] 将所有的样品和标准样品加入溶于10μL二甲亚砜(DMSO)的培养物中进行筛选(一种剂量)或者加入溶于5μL DMSO的培养物中进行IC50检测。获得培养物的试剂加入顺序为190或195μL分析缓冲液、200μL匀浆、10或5μL样品的DMSO溶液、100μL放射性配体。将样品在室温下温育1小时，然后用细胞收获器通过滤膜过滤，滤膜预先用含0.5％BSA的50mM Tris缓冲液(pH 7.7)浸润2小时。将滤膜用约3mL 50mM冷Tris缓冲液(pH7.7)洗涤3次。然后将滤膜圈冲压到12x75mm聚苯乙烯管，用γ计数器计数。

[0535] 速激肽受体拮抗剂可用于治疗许多具有过量速激肽特征的临床疾病。这些临床疾病包括中枢神经系统疾病，例如焦虑症、抑郁症、精神病和精神分裂症；神经变性疾病，例如痴呆(包括阿耳茨海默氏型老年痴呆、阿耳茨海默氏病、AIDS相关性痴呆和Down氏综合征)；脱髓鞘病，例如多发性硬化、肌萎缩性侧索硬化和其它神经病理学疾病(例如外周神经病(例如糖尿病性和化疗诱导性神经病)、带状疱疹后神经痛和其它神经痛)；急性和慢性呼吸道阻塞疾病，例如成人呼吸困难综合征、支气管肺炎、支气管痉挛、慢性支气管炎、drivercough和哮喘；炎性疾病，例如炎性肠病、牛皮癣、纤维组炎、骨关节炎和类风湿性关节炎；肌与骨骼系统的疾病，例如骨质疏松症；变态反应，例如湿疹和鼻炎；过敏症，例如毒葛；眼科疾病，例如结膜炎、春季结膜炎等；皮肤病例如接触性皮炎、特应性皮炎、荨麻疹和其它湿疹样皮炎；成瘾性疾病，例如酗酒；压力相关性身体障碍；反射交感性营养不良，例如肩/手综合征；轻度抑郁症；有害免疫反应，例如移植组织的排斥反应和免疫增强或抑制相关性疾病(例如全身性红斑狼疮)；内脏神经控制相关性胃肠障碍或疾病，例如溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、呕吐和应激性肠综合征；膀胱功能障碍，例如膀胱逼尿肌反射亢进和失禁；动脉粥样硬化；纤维组织形成和胶原病，例如硬皮病和嗜曙红细胞性肝片吸虫病；良性前列腺肥大的刺激性症状；血管舒张和血管痉挛疾病引起的血流障碍，例如心绞痛、偏头痛和雷诺氏病；疼痛或伤害性知觉，例如归咎于任何上述疾病或与其相关的疼痛或伤害性知觉，尤其是偏头痛的疼痛传递。

[0536] NK-1拮抗剂可用于治疗疼痛，尤其是慢性疼痛，例如神经病性疼痛、手术后疼痛和偏头痛、关节炎相关性疼痛、癌症相关性疼痛、慢性下背痛、从集性头痛、疱疹神经痛、幻肢疼痛、中枢性痛、牙痛、神经病性疼痛、阿片样物质耐药性疼痛、内脏痛、手术性疼痛、骨损伤性疼痛、分娩期间的疼痛、烧伤(包括晒伤)性疼痛、产后疼痛、咽痛和泌尿生殖器管道相关性疼痛(包括膀胱炎)。

[0537] 除了疼痛以外，NK-1拮抗剂尤其可用于治疗和预防尿失禁；良性前列腺肥大的刺激性症状；胃肠道的运动性障碍，例如应激性肠综合征；急性和慢性呼吸道阻塞疾病，例如支气管痉挛、支气管肺炎、哮喘和成人呼吸困难综合征；动脉粥样硬化；炎性疾病，例如炎性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、类风湿性关节炎、骨关节炎、神经原性炎症、过敏、鼻炎、咳嗽、皮肤炎、荨麻疹、牛皮癣、结膜炎、呕吐、刺激诱导性瞳孔缩小；组织移植排斥反应；细胞因子化学治疗等引起的血浆外渗；脊髓损伤；中风；大脑中风(局部缺血)；阿耳茨海默氏病；帕金森氏病；多发性硬化；肌萎缩性侧索硬化；精神分裂症；焦虑症；抑郁症。

[0538] NK-2拮抗剂可用于治疗尿失禁、支气管痉挛、哮喘、成人呼吸困难综合征、胃肠道的运动性障碍(例如应激性肠综合征)和疼痛。

[0539] 除以上适应征外，本发明化合物还可用于治疗呕吐，包括急性、延迟性或期待性呕吐，例如化疗、放射、毒素、妊娠、前庭疾病、运动、手术、偏头痛和颅内压差异引起的呕吐。最特别的是式I化合物可用于治疗抗肿瘤(细胞毒素)药物引起的呕吐，所述抗肿瘤药物包括癌症化疗常规使用的抗肿瘤药物。

[0540] 这样的化疗药物实例包括烷基化剂，例如氮芥、乙烯亚胺化合物、磺酸烷基酯以及其它具有烷基化作用的化合物(例如亚硝基脲、顺铂和达卡巴嗪)；抗代谢物，例如叶酸、嘌呤或嘧啶拮抗剂；有丝分裂抑制剂，例如长春花属生物碱以及鬼臼毒素的衍生物；细胞毒素抗生素。

[0541] 化疗药物的具体实例在文献中有介绍，例如D J Stewart，NAUSEA AND VOMITING：RECENT RESEARCH AND CLINICAL ADVANCES，(J.Kucharczyk等主编，1991)，p 177-203。通常使用的化疗药物包括顺铂、达卡巴嗪(DTIC)、放线菌素D、双氯乙基甲胺(氮芥)、链佐星、环磷酰胺、卡莫司汀(BCNU)、罗氮芥(CCNU)、阿霉素、柔红霉素、丙卡巴肼、丝裂霉素、阿糖孢苷、依托泊苷、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、长春花硷、长春新碱、博莱霉素和苯丁酸氮芥。
R.J.Gralla等，Cancer Treatment Reports，68，163-172(1984)。

[0542] 式I化合物还可用于治疗放射(包括例如治疗癌症时的放疗)或放射病引起的呕吐；以及用于治疗手术后恶心和呕吐。

[0543] 虽然可以无需配制直接给予本发明方法使用的化合物，但是通常本发明化合物以包含药学上可接受的赋形剂和至少一种活性成分的药用组合物形式给药。这些组合物可以通过各种途径给药，包括口服、直肠、透皮、皮下、静脉内、肌内和鼻内给药。本发明方法使用的许多化合物以注射组合物和口服组合物使用都有效。这样的组合物按照药学领域众所周知的方法制备，并且包含至少一种活性化合物。参见例如REMINGTON′S PHARMACEUTICAL SCIENCES，(第16版，1980)。

[0544] 在制备本发明使用的组合物中，活性成分通常与赋形剂混合，用赋形剂稀释或者封闭在可以成为胶囊、小药囊、纸容器或其它容器形式的载体内。当赋形剂用作稀释剂时，它可以为固体、半固体或液体材料，它作用活性成分的溶媒、载体或介质。因此，组合物可以为如下形式：片剂、丸剂、散剂、锭剂、小药囊、扁囊剂、酏剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂、气溶胶(为固体或在液体介质中)、软膏剂(例如包含高达10％重量的活性化合物)、软质和硬质明胶胶囊、栓剂、无菌注射溶液剂和无菌包装的散剂。

[0545] 在制备制剂中，可能需要研磨活性化合物以获得合适的粒径，然后与其它成分混合。如果活性化合物基本不溶，通常将其研磨至粒径小于200目。如果活性化合物基本为水溶性，通常通过研磨调节粒径以使其在制剂中基本均匀分布，研磨为例如约40目。

[0546] 合适的赋形剂的部分例子包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐、西黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水、糖浆和甲基纤维素。另外，制剂还可包括：润滑剂，例如滑石粉、硬脂酸镁和矿质油；润湿剂；乳化剂和悬浮剂；防腐剂，例如羟基苯甲酸甲酯和羟基苯甲酸丙酯；甜味剂；调味剂。本发明组合物可通过本领域已知的方法配制为这样的制剂：在给予患者后，提供快速、持续或延迟释放的活性成分。

[0547] 组合物优选配制为单位剂型，各个剂量包含约0.05至约100mg、更常见为约1.0至约30mg活性成分。术语“单位剂型”是指适合人类患者和其它哺乳动物的单位剂量的完全分散单元，各单元包含经计算产生所需治疗效果的预定量的活性物质以及合适的药学赋形剂。

[0548] 通常，本发明活性化合物在很宽的剂量范围内有效。例如，每天的剂量通常在约0.01至约30mg/kg体重。在治疗成人时，尤其优选的剂量范围为约0.1至约15mg/kg/day，为单剂量或分剂量。但是，应当理解的是本发明化合物的实际给予量将由主治医师根据相关的详细情况确定，包括所治疗的疾病、所选的给药途径、实际给予的一种或多种化合物、个体患者的年龄、体重和反应以及患者症状的严重程度，因此，上述剂量范围不是对本发明范围的任何限制。在某些情况下，剂量水平低于前述范围的下限可能更合适，而在另外的情况下，可使用更大的剂量而不会引起副作用，前提条件是这样的更大的剂量首先分为若干小剂量用于一天的给药。

[0549] 制剂实施例1.

[0550] 制备包含以下成分的硬质明胶胶囊剂：

[0551]

[0552] 混合340mg的以上成分并填充到硬质明胶胶囊。

[0553] 制剂实施例2.

[0554] 用以下成分制备片剂：

[0555]

[0556] 将所有成分混合后压制成片剂，每片重240mg。

[0557] 制剂实施例3.

[0558] 制备包含以下成分的无水粉末吸入制剂：

[0559]

[0560] 将活性混合物与乳糖混合，将混合物加入无水粉末吸入装置。

[0561] 制剂实施例4.

[0562] 如下制备片剂，每片包含30mg活性成分：

[0563]

[0564] 将活性成分、淀粉和纤维素通过20目U.S.筛，充分混合。将聚乙烯吡咯烷酮的溶液与所得粉末混合，然后将其通过16目U.S.筛。将如此产生的颗粒在50-60℃干燥，然后通过16目U.S.筛。然后将预先通过30目U.S.筛的羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石粉加入以上颗粒中，在混合后将其用制片机压制为每片120mg的片剂。

[0565] 制剂实施例5.

[0566] 如下制备包含40mg药物的胶囊剂：

[0567]

[0568] 将活性成分、纤维素、淀粉和硬脂酸镁混合，通过20目U.S.筛，然后以150mg的数量填充到硬质明胶胶囊。

[0569] 制剂实施例6.

[0570] 如下制备包含25mg活性成分的栓剂：

[0571]

[0572] 活性成分通过60目U.S.筛，将其悬浮于预先用最少必须热量熔融的饱和脂肪酸甘油酯中。然后将混合物倾入额定2.0g的栓剂模具，让其冷却。

[0573] 制剂实施例7.

[0574] 每5.0ml剂量含50mg药物的混悬剂如下制备：

[0575]

[0576] 将药物、蔗糖和黄原胶混合，通过10目U.S.筛，然后与预先制备的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠的水溶液混合。将苯甲酸钠、调味剂和颜料用部分水稀释，在搅拌下加入。然后加入足量的水获得所需体积。

[0577] 制剂实施例8.

[0578] 含15mg药物的胶囊剂如下制备：

[0579]

[0580] 将活性成分、纤维素、淀粉和硬脂酸镁混合，通过20目U.S.筛，然后以425mg的数量填充到硬质明胶胶囊。

[0581] 制剂实施例9.

[0582] 静脉内制剂可以如下制备：

[0583]

[0584] 制剂实施例10.

[0585] 局部制剂可以如下制备：

[0586]

[0587] 加热白凡士林至熔化。混合液体石蜡和乳化蜡，搅拌直至溶解。加入活性成分，连续搅拌直至分散。然后将混合物冷却为固体。

[0588] 制剂实施例11.

[0589] 含10mg活性成分的舌下或含服片剂可以如下制备：

[0590]

[0591] 连续搅拌将甘油、水、柠檬酸钠、聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮混合在一起，保持温度为约90℃。当聚合物溶入溶液后，将所得溶液冷却至约50-55℃，缓慢混合药物。将均匀混合物倾入惰性材料制备的模中，产生厚度为约2-4mm的含药物的扩散基质。再将此扩散基质切成合适大小的单个片剂。

[0592] 本发明方法使用的另一种优选制剂采用透皮给药装置(“贴剂”)。这样的透皮贴剂可以用于以控制量提供连续或间断输注本发明化合物。制备和使用用于给予药物的透皮贴剂在本领域中众所周知。参见例如美国专利5,023,252，1991年6月11日公开，通过引