基质金属蛋白酶（MMP）抑制剂用于治疗痔的新用途

摘要

本发明涉及基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂的新用途，特别是基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、基质金属蛋白酶12(MMP12)抑制剂的新用途。更具体的讲，本发明涉及应用基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂特别是基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、基质金属蛋白酶12(MMP12)抑制剂治疗和/或预防痔。再具体的讲，本发明涉及基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂特别是基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、基质金属蛋白酶12(MMP12)抑制剂在制备治疗和/或预防痔的药物或药物组合物中的应用。

权利要求

1.基质金属蛋白酶抑制剂在制备治疗和/或预防痔的药物组合物中的应用，其中所述的基质金属蛋白酶抑制剂是指抑制基质金属蛋白酶的表达、分泌和/或活性的物质以及具有此作用的所有的化合物，其中所述的基质金属蛋白酶抑制剂选自6-去甲基-6-脱氧-4-去二甲基氨基四环素、曲格列酮、罗格列酮和/或匹格列酮。

2.根据权利要求书1的应用，其中所述的基质金属蛋白酶抑制剂是6-去甲基-6-脱氧-4-去二甲基氨基四环素和/或罗格列酮。

3.根据权利要求1的应用，其中所述的药物组合物还包括用于治疗痔的微循环调节剂、止痛剂、大便软化剂、止血药物、消炎药物和/或肛垫黏膜保护剂。

4.根据权利要求1的应用，其中所述的药物组合物是栓剂、膏剂、霜剂或熏洗剂。

5.根据权利要求4的应用，其中所述栓剂包含以下成分：6-去甲基-6-脱氧-4-去二甲基氨基四环素20mg、双氯芬酸钠25mg、氧化锌80mg聚氧乙烯二醇棕榈酸硬脂酸酯160mg、饱和多糖甘油酯120mg、二甲聚硅氧烷320mg、疏水性羟丙基甲基纤维素275mg、丙二醇200mg、尼泊金甲酯4mg、尼泊金丙酯2mg、山梨酸钾20mg和可可脂2774mg。

6.根据权利要求4的应用，其中所述栓剂包含以下成分：罗格列酮2mg、双氯芬酸钠

25mg、氧化锌80mg、聚氧乙烯二醇棕榈酸硬脂酸酯160mg、饱和多糖甘油酯120mg、二甲聚硅氧烷320mg、疏水性羟丙基甲基纤维素275mg、丙二醇200mg、尼泊金甲酯4mg、尼泊金丙酯

2mg、山梨酸钾20mg和可可脂2792mg。

说明书

基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂用于治疗痔的新用途

技术领域：

[0001] 本发明涉及基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂的新用途，特别是基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、基质金属蛋白酶12(MMP12)抑制剂的新用途。更具体的讲，本发明涉及应用基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂特别是基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、基质金属蛋白酶12(MMP12)抑制剂治疗和/或预防痔。再具体的讲，本发明涉及基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂特别是基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶
9(MMP9)、基质金属蛋白酶12(MMP12)抑制剂在制备治疗和/或预防痔的药物或药物组合物中的应用。

[0002] 发明背景：

[0003] 痔是肛垫(肛管血管垫)的支持结构、血管丛及动静脉吻合支的病理改变和(或)异常移位，可导致出血、脱出等一系列临床症状。“肛垫”是指齿状线上区的增厚的黏膜下组织，内有大量窦状血管组织、平滑肌以及胶原和弹性结缔组织纤维(Treitz肌)等，其结构特性与海绵体或勃起组织相似。本领域技术人员称此部黏膜为“直肠海绵体”或“肛门血管衬垫”(简称肛垫)。

[0004] 目前，痔的病因并不十分明确，便秘和排便习惯异常通常被认为与痔的发生相关。流行病学调查显示，年龄、性别、饮食、文化、环境等因素在痔的发病率中均有一定影响，此外，痔病患者常呈家族聚集性，提示遗传因素可能参与了痔的发生。关于痔的发病机理还存在很多争议，目前本领域技术人员众所周知的理论包括血液动力学理论、肛垫下移理论和盆底动力学理论，但是，由于缺乏痔组织的病理学变化证据以及分子生物学变异资料，上述理论均没有在本领域得到完全完善和证实。

[0005] 所述的Treitz肌是肛垫的重要组分和支持结构，它是纤维结缔组织和平滑肌纤维的网状复合体，是肛垫的固定装置，排便结束后有使肛垫向上回缩的作用，如果断裂，肛垫即可出现回缩障碍。。Hass和Fox(1984)通过组织学研究发现，胎儿和小儿的Treitz肌纤维排列规律致密，相互平行，弹性纤维较多，缠绕痔血管的纤维网较紧密并固定于内括约肌。他们认为Treitz肌随年龄增长出现退行变性现象，包括纤维逐渐出现扭曲、断裂和疏松，弹性纤维较少。Bernstein经组织学观察，发现脱出性痔的上方直肠粘膜下层的结缔组织纤维呈现肥大、崩解和断裂现象，有力地支持了Haas-Fox的论断。目前认为肛垫的支持结构的退行性变，导致肛垫下移和痔血管丛的扩张，与痔的发生和严重度有关。

[0006] 目前口服或外用的治疗痔的药物主要包括微循环调节剂、止痛剂、大便软化剂、止血药物、消炎药物以及肛垫黏膜保护剂。所述的微循环调节剂也称为静脉活性药物，其治疗的理论基础是所述血液动力学理论，主要的药理作用为改善静脉张力，减轻静脉的扩张。但是，由于没有发现痔组织血液动力学调控紊乱的信号因子或信号通路，所述的口服或外用药物在缓解痔的症状方面有一定的作用，但并不能阻止痔的病理发展进程。

[0007] 基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase，MMP)是一类活性依赖于锌离子和钙离子的蛋白水解酶，主要的生理功能是降解细胞外基质(ECM)成分，如胶原、明胶、弹性蛋白、纤连蛋白和蛋白聚糖等。目前已发现25种人源MMP，按结构和底物选择性分成5类：明胶酶、胶原酶、基质酶、膜型基质金属蛋白酶(membrane type-MMP，MT-MMP)以及MMP-7、
12、19、23、26等结构与功能比较特殊的MMP。其中MMP1即胶原酶1，主要参与降解I，II，III，VII和X型胶原；MMP3即基质裂解素1，主要参与降解III，IV，IX，and X型胶原，并且是MMP1的表达促进因子；MMP9即明胶酶B，主要参与降解I，IV，V，and X型胶原，MMP12即金属弹性蛋白酶，是降解弹性蛋白的主要水解酶。

[0008] 正常成人MMP的表达高度受控，大部分组织MMP的表达很少，只是在某些生理过程，如女性的月经、排卵、胚胎植入、分娩、产后子宫和乳腺的恢复、胚胎发育，以及组织分化更新，炎症细胞转移，伤口愈合和骨吸收等中表达增高，大都以非激活状态的酶原形式分泌至细胞外。MMP调节机制的失衡使某些MMP表达和活性异常升高，参与了许多疾病，包括癌症、关节病(包括关节强硬性脊椎炎、类风湿关节炎、痛风性关节炎(痛风)、炎性关节炎、Lyme病和骨关节炎等的发生和发展。

[0009] “基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂”是指可在一定程度上阻断和/或干扰基质金属蛋白酶(MMP)的表达、分泌及酶活性的天然的或合成的化合物和/或其他物质。。体内存在MMP的天然抑制物，如非特异性的蛋白酶抑制因子α2-巨球蛋白和一组特异性的MMP组织抑制因子(TIMP)。目前已知存在4种内源性的特异性MMP抑制因子(TIMP-1、-2、-3、-4)。人工合成的MMP抑制剂主要包括两大类：拟肽类金属蛋白酶抑制剂，如Batimastat、marimastat、BB-94等，它们能够模拟胶原的结构，与MMPs活性部位结合，从而有效地抑制大多数MMPs成员的活性，包括MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7和MMP-9；非拟肽类金属蛋白酶抑制剂，如Ag33340、Bay 12-9566、BMS-275291、CGS 27023A、6-去甲基-6-脱氧-4-去二甲基氨基四环素(也称COL-3或metastat)以及格列酮类药物等。AG3340是一种有效的选择性的口服抑制剂，可抑制MMP-2、-9、-13和-14。BAY12-9566能选择性抑制MMP-2、-3和-9。BMS-275291能广谱抑制基质金属蛋白酶。6-去甲基-6-脱氧-4-去二甲基氨基四环素(也称COL-3或metastat)是四环素衍生物，能抑制MMP-2、MMP-9、VEGF和BFGF。格列酮类药物有三种，即：
曲格列酮(troglitazone)、罗格列酮(roseglitazone)和匹格列酮(pioglitazone)，研究显示，格列酮类药物可抑制人类巨噬细胞及血管平滑肌细胞中MMP2和MMP9的表达及其活力。

[0010] 基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂以及基质金属蛋白酶9(MMP9)抑制剂目前主要用于治疗癌症、关节强硬性脊椎炎、类风湿关节炎、痛风性关节炎(痛风)、炎性关节炎、Lyme病和骨关节炎等疾病，迄今为止，尚没有文献报道将基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂用于治疗痔以及用于制备治疗痔的药物。

[0011] 本发明人通过实验研究发现痔组织基质MMP1、MMP3、MMP9和/或MMP12的表达显著增高，这说明基质金属蛋白酶(MMP)的主动降解作用是痔组织病理生理发展的重要机制。本发明人认为，MMP抑制剂特别是MMP1、MMP9、MMP3和/或MMP12抑制剂能够阻止痔的病理生理发展过程，可以用于治疗和/或预防痔。基于这种认识，完成了本发明。

[0012] 发明概述：

[0013] 本发明提供了基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂在制备用于治疗和/预防痔的药物组合物中的新用途。所述基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂优选是MMP1、MMP9、MMP3和/或MMP12抑制剂，更优选是Ag33340、Bay 12-9566、BMS-275291、CGS 27023A、COL-3、曲格列酮、罗格列酮和/或匹格列酮，最优选是COL-3和/或罗格列酮。所述的药物组合物进一步包括载体、赋形剂等，进一步还可以包括目前已有的用于治疗痔的微循环调节剂、止痛剂、大便软化剂、止血药物、消炎药物以及肛垫黏膜保护剂等。本发明实施中所用的举证性止痛剂为双氯芬酸钠，所用的肛垫保护剂为氧化锌。

[0014] 所述组合物的给药途径可以是局部给药、口服给药、肌肉注射给药、静脉注射给药。优选是局部给药，更优选是肛门内给药。

[0015] 所述药物组合物可制成栓剂、膏剂、霜剂、熏洗剂、锭剂、片剂、丸剂、胶囊、粉剂、粒剂、注射剂、口服液等多种剂型。上述各种剂型的药物均可按照药学领域的常规方法制备。优选是栓剂、膏剂、霜剂、熏洗剂，更优选是栓剂、膏剂，最优选是栓剂。

[0016] 所述药物组合物中还可加入一种或多种药学上可接受的载体。所述载体包括药学领域常规的稀释剂、填充剂、赋形剂、粘合剂、湿润剂、崩释剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、防腐剂等，必要时加入香味剂、甜味剂等。本发明实施中所用的举证性载体是聚氧乙烯二醇棕榈酸硬脂酸酯、饱和多糖甘油酯、二甲聚硅氧烷、疏水性羟丙基甲基纤维素、丙二醇、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、山梨酸钾和可可脂。

[0017] 所述基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂的每日剂量是1μg-50mg/公斤体重的范围内，更优选是5μg-10mg/公斤体重的范围内，最优选是10μg-1mg/公斤体重的范围内，本发明实施中所用的举证性的剂量为30μg/公斤体重和300μg/公斤体重。

[0018] 本发明实施中所用的举证性基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂是COL-3和罗格列酮。

[0019] 附图简述：

[0020] 图1：正常肛垫组织中弹性纤维染色结果

[0021] 图2：痔组织中弹性纤维染色结果

[0022] 图3：正常肛垫组织中MMP1表达情况

[0023] 图4：痔组织中MMP1表达情况

[0024] 图5：正常肛垫组织中MMP3表达情况

[0025] 图6：痔组织中MMP3表达情况

[0026] 图7：正常肛垫组织中MMP9表达情况

[0027] 图8：痔组织中MMP9表达情况

[0028] 图9：正常肛垫组织中MMP12表达情况

[0029] 图10：痔组织中MMP12表达情况

[0030] 图11：栓剂A用药组和对照组缩短疼痛和出血的时间

[0031] 图12：栓剂A用药组和对照组治疗48小时后各项疗效参数下降分值比值[0032] 图13：栓剂A用药组和对照组治疗2周后各项疗效参数下降分值比值

[0033] 图14：栓剂B用药组和治疗组缩短疼痛和出血的时间

[0034] 图15：栓剂B用药组和对照组治疗48小时后各项疗效参数下降分值比值[0035] 图16：栓剂B用药组和对照组治疗2周后各项疗效参数下降分值比值

[0036] 发明详述：

[0037] 本发明是基于本发明人对痔的发病机制的研究的基础上。本研究的一个重要发现是痔组织中MMP1、MMP3，MMP9和/或MMP12的表达显著增高。MMP1即胶原酶1，主要参与降解I，II，III，VII和X型胶原；MMP3即基质裂解素1，主要参与降解III，IV，IX，and X型胶原，并且是MMP1的表达促进因子；MMP9即明胶酶B，主要参与降解I，IV，V，and X型胶原，MMP12即金属弹性蛋白酶，是降解弹性蛋白的主要水解酶。胶原和弹性蛋白是肛垫支持结构的重要组成成分，MMP1、MMP3，MMP9和/或MMP12的表达增加可导致固有层结缔组织疏松，进而可使肛垫弹性下降，血管通透性增加，加重痔组织的水肿形成，并导致痔出血风险增加。本研究的结果表明，痔组织支持结构的破坏或退行性变并是不单纯随年龄增长发生的，而是存在由MMP的表达特别是MMP1、MMP3，MMP9和/或MMP12的表达增高直接降解导致的肛垫支持结构的主动性破坏。

[0038] 本发明人认为，基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂，特别是MMP1、MMP3，MMP9和/或MMP12的抑制剂能够阻止和/或延缓肛垫支持结构的破坏，从而阻止和/或延缓痔的病理发展过程，可以用于治疗和/或预防痔。

[0039] 因此，本发明提供了基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂在制备用于治疗和/预防痔的药物中的新用途。所述基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂优选是MMP1、MMP9、MMP3和/或MMP12抑制剂，更优选是Ag 33340、Bay 12-9566、BMS-275291、CGS 27023A、COL-3、曲格列酮、罗格列酮和/或匹格列酮，最优选是COL-3和/或罗格列酮。

[0040] 本发明还提供了一种治疗和/或预防痔的药物组合物，所述组合物包含至少一种基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂。所述基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂优选是MMP1、MMP9、MMP3和/或MMP12抑制剂，更优选是Ag 33340、Bay 12-9566、BMS-275291、CGS 27023A、COL-3、曲格列酮、罗格列酮和/或匹格列酮，最优选是COL-3和/或罗格列酮。所述组合物进一步包括载体、赋形剂等，进一步还可以包括目前已有的用于治疗痔的微循环调节剂、止痛剂、大便软化剂、止血药物、消炎药物以及肛垫黏膜保护剂等。本发明实施中所用的举证性止痛剂为双氯芬酸钠，所用的肛垫保护剂为氧化锌。

[0041] 所述组合物的给药途径可以是局部给药、口服给药、肌肉内给药、静脉内给药、经皮给药。优选是局部给药，更优选是肛门内给药。

[0042] 根据所用的给药途径，可以将上述组合物以各种可药用的形式进行给药。例如，可将本发明的药物组合物以固体、溶液、乳液、分散体、微胶粒、脂质体等的形式使用，其中，得到的组合物中含有一种或多种用于本发明实践的基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂作为其活性成分，可将活性成分与例如常规的无毒可药用载体混合制成片剂、微丸、胶囊、栓剂、溶液剂、乳液、悬浮液、以及适于应用的其它形式。可使用的载体包括葡萄糖、乳糖、阿拉伯胶、明胶、甘露糖醇、淀粉糊、三硅酸镁、滑石、玉米淀粉、角蛋白、胶态二氧化硅、土豆淀粉、尿素、中等链长的甘油三酯、葡聚糖以及其它适用于制剂生产的固体、半固体或液体形式的载体。此外，还可使用辅料、稳定剂、增稠剂、着色剂、防腐剂和香料。本发明实施中所用的举证性载体是聚氧乙烯二醇棕榈酸硬脂酸酯、饱和多糖甘油酯、二甲聚硅氧烷、疏水性羟丙基甲基纤维素、丙二醇、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、山梨酸钾和可可脂。药物组合物中活性化合物(基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂)的含量为足以在待治疗的疾病中产生所需效果的量。

[0043] 所述药物组合物可制成栓剂、膏剂、霜剂、熏洗剂、锭剂、片剂、丸剂、胶囊、粉剂、粒剂、注射剂、口服液等多种剂型。上述各种剂型的药物均可按照药学领域的常规方法制备。优选是栓剂、膏剂、霜剂、熏洗剂，更优选是栓剂、膏剂，最优选是栓剂。

[0044] 所述药物组合物中还可加入一种或多种药学上可接受的载体。所述载体包括药学领域常规的稀释剂、填充剂、赋形剂、粘合剂、湿润剂、崩释剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等，必要时加入香味剂、甜味剂等。

[0045] 所述基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂的每日剂量是1μg-50mg/公斤体重的范围内，更优选是5μg-10mg/公斤体重的范围内，最优选是10μg-1mg/公斤体重的范围内，本发明实施中所用的举证性的剂量为30μg/公斤体重和300μg/公斤体重。

[0046] 本发明实施中所用的举证性基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂是COL-3和罗格列酮。

[0047] 本说明书中所使用的术语“痔“是指肛垫(肛管血管垫)的支持结构、血管丛及动静脉吻合支的病理改变和/或异常移位，可导致出血、脱出等一系列临床症状。本发明所述“痔”包括I度、II度、III度、IV度内痔、外痔和混合痔。

[0048] 本说明书中所使用的术语“基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂”是指天然的或合成的化合物，它可在一定程度上阻断和/或干扰基质金属蛋白酶(MMP)的表达、分泌及酶活性。所述MMP抑制剂可以是激酶抑制剂、转录因子抑制剂例如AP-1抑制剂、组织抑制剂、蛋白酶抑制剂以及基质金属蛋白酶信号转导途径的其它已知抑制剂或新型抑制剂。具体来讲是4种内源性的特异性MMP抑制因子(TIMP-1、-2、-3、-4)，或者是人工合成的拟肽类金属蛋白酶抑制剂，包括Batimastat、marimastat、BB-94，或者是人工合成的非拟肽类金属蛋白酶抑制剂，包括Ag 33340、Bay 12-9566、BMS-275291、CGS 27023A、COL-3、曲格列酮、罗格列酮和/或匹格列酮。

[0049] 所述基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂优选是MMP1、MMP9、MMP3和/或MMP12抑制剂，更优选是Ag 33340、Bay 12-9566、BMS-275291、CGS 27023A、COL-3、曲格列酮、罗格列酮和/或匹格列酮，最优选是COL-3和/或罗格列酮。

[0050] 下面结合附图和实施例详细描述本发明，所述的实施例是用于描述本发明，而不是限制本发明。

[0051] 实施例

[0052] 实施例1：痔组织与相对正常肛垫组织中的弹力纤维和基质金属蛋白酶(MMP)表达情况及差异

[0053] 挑选自2003年10月至2004年8月获得的痔上粘膜环切钉合术(PPH手术)标本24例，主要选择三个母痔中一个或两个母痔病变明显，但至少有一处母“痔”病变不明显的III度痔病人的内痔标本。病人年龄在35-60之间。在PPH手术后，将突出的母痔组织和相对正常的肛垫组织固定于15％中性福尔马林溶液，石蜡包埋、连续切片。

[0054] 采用H.E、免疫组织化学链菌素-亲生物素-过氧化物酶连接法(SP)法，对所有病人的石蜡切片进行染色。5种单克隆抗体分别针对MMP1、MMP2、MMP3，MMP9和MMP12，均购自Santa Cruz公司。免疫组化基本方法为60℃烤片30分钟，二甲苯脱石蜡20分钟，梯度脱水；灭活内源性过氧化物酶；微波抗原修复；羊血清封闭后滴加相应一抗，4℃过夜后依次滴加生物素标记二抗、辣根过氧化物酶标记链酶卵白素，DAB显色，Mayer`s苏木素复染45秒。弹性纤维染色采用地衣红法，切片经乙醇溶液梯度脱水后用地衣红染色3小时，Mayer`s苏木素复染。使用PBS代替一抗作空白对照，用正常血清替代一抗做替代对照，剔除脱片及背景着色过高的样本，以进行痔和正常肛垫的染色质量控制。弹性纤维染色采用地衣红法，切片经乙醇溶液梯度脱水后用地衣红染色3小时，Mayer`s苏木素复染。

[0055] 阅片由不了解病人资料的病理科医师按照文献报告的方法进行基质金属蛋白酶9(MMP9)染色以出现棕黄色颗粒为阳性。选取表达最强的部位，按着色程度分级：基本未着色、染色与背景相似者为0分；着色浅、略高于背景者为1分；中度着色、明显高于背景者为
2分；强染、着色深棕者为3分。视野下阳性细胞数＜25％为0分，≥25％～50％为1分，≥50％～75％为2分，≥75％为3分。两项计分相加后分为4级：0～1分为(-)，2分为(+)，3～4分为(++)，5分以上为(+++)。所有数据用SPSS

[0056] 12.0 for Windows统计程序进行统计学分析。采用完全随机设计多个样本比较即2
Kruskal-Wallis H检验、t检验和x 检验。

[0057] 可以观察到痔及肛垫的弹性纤维的形态及其异常，正常肛垫组织中纤维复合体的纤维形态规则、较密集，断裂和变形少见，但痔组织中纤维复合体的纤维出现明显的变形和断裂等形态学改变。(正常肛垫组织中弹性纤维染色和痔组织中弹性纤维染色结果见图1、2)

[0058] 本研究的一个重要发现是，与正常肛垫组织相比，痔组织中MMP1、MMP3，MMP9和/或MMP12的表达显著增高(P＜0.05)(表1)(参见附图3、4、5、6、7、8、9、10)。MMP1即胶原酶1，主要参与降解I，II，III，VII和X型胶原；MMP3即基质裂解素1，主要参与降解III，IV，IX，and X型胶原，并且是MMP1的表达促进因子；MMP9即明胶酶B，主要参与降解I，IV，V，andX型胶原，MMP12即金属弹性蛋白酶，是降解弹性蛋白的主要水解酶。胶原和弹性蛋白是肛垫支持结构的重要组成成分，MMP1、MMP3，MMP9和/或MMP12的表达增加可导致固有层结缔组织疏松，进而可使肛垫弹性下降，血管通透性增加，加重痔组织的水肿形成，并导致痔出血风险增加。本实施例的结论是，痔组织支持结构的破坏或退行性变并是不单纯随年龄增长发生的，而是存在由MMP的表达特别是MMP1、MMP3，MMP9和/或MMP12的表达增高直接降解导致的肛垫支持结构的主动性破坏。

[0059] 表1正常肛垫组织与痔组织中各因子表达的比较

[0060]

[0061] *两组间比较具有统计学显著性意义(P＜0.05)

[0062] 实施例2：含有基质金属蛋白酶抑制剂-COL-3的栓剂A的制备

[0063] 用常规的栓剂制作方法将下列化合物按下表(表2)所述含量比例混合：

[0064] 表2：栓剂A的组成和各成分含量

[0065]

[0066] 具体的讲，生产方法是往加热熔化的脂肪族基质——可可脂中逐步加入上表所述其他成分，同时不断搅拌并使其分散均匀。冷却至大约50℃时，将混合物注入到栓剂容器并进一步冷却成形给出栓剂。按照上述方法制备的每粒栓剂质量为4g。

[0067] 另外，将表2所述的成分中的脂肪族基质改为纯水，可制成相应膏剂[0068] 实施例3：含有基质金属蛋白酶抑制剂——罗格列酮的栓剂B的制备

[0069] 用常规的栓剂制作方法将下列化合物按下表(表3)所述含量比例混合：

[0070] 表3：栓剂B的组成和各成分含量

[0071]

[0072] 具体的讲，生产方法是往加热熔化的脂肪族基质——可可脂中逐步加入上表所述其他成分，同时不断搅拌并使其分散均匀。冷却至大约50℃时，将混合物注入到栓剂容器并进一步冷却成形给出栓剂。按照上述方法制备的每粒栓剂质量为4g。

[0073] 另外，将表3所述的成分中的脂肪族基质改为纯水，可制成相应膏剂。

[0074] 实施例4：含有基质金属蛋白酶抑制剂-COL-3的栓剂A对痔的治疗效果[0075] 采用随机、双盲对照的方法观察20例I-III度痔病患者(用药组10例、对照组10例)。用药组使用实施例2所置备的肛门栓剂A，对照组使用不含活性成分COL-3的相应赋形剂制成的肛门栓剂。患者每天用药2次，早晚各1次，连续使用7天。主要疗效指标为疼痛和止血；次要疗效指标为水肿、糜烂、瘙痒和患者自觉病情开始减轻的时间。所有指标(时间除外)采用4级评分法：1分为无症状、2分为轻度、3分为中度、4分为严重。时间以小时计。

[0076] 结果见图11、图12、图13，如下所述：

[0077] 48h后解除症状的总有效率74.40％；

[0078] 一周后总有效率为82.60％；

[0079] 疼痛开始减轻的平均时间为22.7h，明显早于对照组(48h)；

[0080] 出血开始减少的平均时间为28.6h，也明显早于对照组(55h)。

[0081] 两组患者均未出现对栓剂的不良反应。

[0082] 应用相应的膏剂，也得到了相似的结果。

[0083] 实施例5：含有基质金属蛋白酶抑制剂——罗格列酮的栓剂B对痔的治疗效果[0084] 采用随机、双盲对照的方法观察20例I-III度痔病患者(用药组10例、对照组10例)。用药组使用实施例3所置备的肛门栓剂B，对照组使用不含活性成分罗格列酮的相应赋形剂制成的肛门栓剂。患者每天用药2次，早晚各1次，连续使用7天。主要疗效指标为疼痛和止血；次要疗效指标为水肿、糜烂、瘙痒和患者自觉病情开始减轻的时间。所有指标(时间除外)采用4级评分法：1分为无症状、2分为轻度、3分为中度、4分为严重。时间以小时计。

[0085] 结果见图14、图15、图16，如下所述：

[0086] 48h后解除症状的总有效率76.30％；

[0087] 一周后总有效率为86.40％；

[0088] 疼痛开始减轻的平均时间为21.7h，明显早于对照组(48h)；

[0089] 出血开始减少的平均时间为27.4h，也明显早于对照组(55h)。

[0090] 两组患者均未出现对栓剂的不良反应。

[0091] 应用相应的膏剂，也得到了相似的结果。

[0092] 实施例6：含有COL-3、双氯芬酸钠和氧化锌的栓剂A1的制备以及疗效[0093] 按照实施例2所记载的栓剂A的组成和各成分含量以及制备方法制备栓剂A1，其差别仅在于栓剂A1中还进一步含有双氯芬酸钠(即止痛剂)25mg和氧化锌(即肛垫黏膜保护剂)80mg，将上述成分中的脂肪族基质改为纯水，可制成相应膏剂。

[0094] 按照实施例4所记载的临床试验方法检测栓剂A1的疗效，结果显示：

[0095] 48h后解除症状的总有效率74.90％；

[0096] 一周后总有效率为82.80％；

[0097] 疼痛开始减轻的平均时间为22.2h，明显早于对照组(48h)；

[0098] 出血开始减少的平均时间为28.3h，也明显早于对照组(55h)。

[0099] 两组患者均未出现对栓剂的不良反应。

[0100] 应用相应的膏剂，也得到了相似的结果。

[0101] 实施例7：含有罗格列酮、双氯芬酸钠和氧化锌的栓剂B1的制备以及疗效[0102] 按照实施例3所记载的栓剂B的组成和各成分含量以及制备方法制备栓剂B1，其差别仅在于栓剂B1中还进一步含有双氯芬酸钠(即止痛剂)25mg和氧化锌(即肛垫黏膜保护剂)80mg，将上述成分中的脂肪族基质改为纯水，可制成相应膏剂。

[0103] 按照实施例5所记载的临床试验方法检测栓剂B1的疗效，结果显示：

[0104] 48h后解除症状的总有效率76.90％；

[0105] 一周后总有效率为86.10％；

[0106] 疼痛开始减轻的平均时间为21.2h，明显早于对照组(48h)；

[0107] 出血开始减少的平均时间为26.9h，也明显早于对照组(55h)。

[0108] 两组患者均未出现对栓剂的不良反应。

[0109] 应用相应的膏剂，也得到了相似的结果。