提高认知和记忆的组合物转让专利
申请号 : CN200480011342.8
文献号 : CN1787820B
文献日 : 2010-05-05
发明人 : 纳瓦·奇撒贝尔 , 姆士·劳丹
申请人 : 纽里姆药品(1991)有限公司
摘要 :
本发明涉及一种用于治疗失眠症患者的药物活性组合物，其包括(a)至少一种选自褪黑激素、其他褪黑激素能药剂、褪黑激素激动剂以及褪黑激素拮抗剂的第一活性成分；以及(b)至少一种选自烟碱和烟碱受体激动剂的第二活性成分；本发明也涉及含有成分(a)和含有或不含有成分(b)的药物在缓解接受或没有接受烟碱替代治疗过程的患者发生的至少一种如下副作用中的用途：损害睡眠质量、损害认知能力和损害记忆力；本发明还涉及一种用于治疗失眠症患者的试剂盒，其包括单位剂型的成分(a)和成分(b)。
权利要求 :
1.一种用于治疗失眠症患者的协同药物活性组合物，其适用于直肠、肠胃外、舌下、肺内或经皮给药，并包括：(a)至少一种选自褪黑激素的第一活性成分；以及(b)至少一种选自烟碱的第二活性成分。
2.根据权利要求1所述的药物活性组合物，其具有以下特征中的至少一种：(i)其包括至少一种稀释剂、载体或者佐剂；
(ii)其是剂量单元形式；
(iii)其是一种可控制释放、缓释或者长时间释放制剂；
(iv)其是在预选时间段内在体内缓慢释放所述活性成分的储存形式；
(v)所述成分(a)是褪黑激素；
(vi)所述成分(b)是烟碱；
(vii)其包括至少一种褪黑激素受体调节剂和/或褪黑激素分布调节剂；
(viii)所述第一活性成分(a)和所述第二活性成分(b)在单一制剂中配制。
3.根据权利要求2所述的药物活性组合物，其是所述的剂量单元形式，其中每一剂量单元包括0.025-100mg的活性成分(a)。
4.根据权利要求3所述的药物活性组合物，其中活性成分(a)和(b)中至少一者的含量为0.25-50mg。
5.根据权利要求4所述的药物活性组合物，其中所述含量为0.5-40mg。
6.至少一种可控释放形式的选自褪黑激素的第一活性成分(a)在制备用于治疗接受烟碱替代治疗过程的患者以缓解所述患者的认知能力损害和/或记忆力损害或协同地缓解所述患者的失眠的第一药物中的用途。
7.根据权利要求6所述的用途，其中每种所述药物具有以下特征中的至少一种：(i)其包括至少一种稀释剂、载体或者佐剂；
(ii)其是剂量单元形式，这些剂量单元适合于口服、直肠、肠胃外、舌下、肺内或经皮给药；
(iii)其是在预选时间段内在体内缓慢释放所述活性成分的储存形式；
(iv)所述成分(a)是褪黑激素；
(v)所述成分(b)是烟碱；
(vi)其包括至少一种褪黑激素受体调节剂和/或褪黑激素分布调节剂；
(vii)所述第一活性成分(a)和所述第二活性成分(b)在单一制剂中配制。
8.根据权利要求7所述的用途，其中所述第一药物和所述第二药物分别是所述的剂量单元形式，其中所述每一剂量单元包括0.025-100mg的活性成分(a)。
9.根据权利要求8所述的用途，其中活性成分(a)和(b)中至少一者的含量为0.25-50mg。
10.根据权利要求9所述的用途，其中所述含量为0.5-40mg。
11.至少一种选自褪黑激素的第一活性成分(a)在制备第一药物中的用途，所述第一药物用于治疗同时接受包括至少一种选自烟碱的第二活性成分(b)的第二药物的患者，以缓解所述患者的认知能力损害和/或记忆力损害或协同缓解所述患者的失眠。
12.根据权利要求11所述的用途，其中每种所述药物具有以下特征中的至少一种：(i)其包括至少一种稀释剂、载体或者佐剂；
(ii)其是剂量单元形式，这些剂量单元适合于口服、直肠、肠胃外、舌下、肺内或经皮给药；
(iii)其是一种可控制释放、缓释或者长时间释放制剂；
(iv)其是在预选时间段内在体内缓慢释放所述活性成分的储存形式；
(v)所述成分(a)是褪黑激素；
(vi)所述成分(b)是烟碱；
(vii)其包括至少一种褪黑激素受体调节剂和/或褪黑激素分布调节剂；
(viii)所述第一活性成分(a)和所述第二活性成分(b)在单一制剂中配制。
13.根据权利要求12所述的用途，其中所述第一药物和所述第二药物分别是所述的剂量单元形式，其中所述每一剂量单元包括0.025-100mg的活性成分(a)。
14.根据权利要求13所述的用途，其中活性成分(a)和(b)中至少一者的含量为0.25-50mg。
15.根据权利要求14所述的用途，其中所述含量为0.5-40mg。
16.一种用于治疗失眠症患者的试剂盒，其包括如下定义的协同药物活性组合物：(A)单位剂型的第一药物制剂，包括：除了至少一种稀释剂、载体或者佐剂之外，至少一种选自褪黑激素的第一活性成分；以及(B)单位剂型的第二药物制剂，包括：除了至少一种稀释剂、载体或者佐剂之外，至少一种选自烟碱的第二活性成分；
其中，(A)和(B)中的剂量单元独立地选自适合于口服、直肠、肠胃外、舌下、肺内或经皮给药的那些剂量单元。
17.根据权利要求16所述的试剂盒，其还具有至少一个以下特征：(α)(A)和(B)中至少一种是可控制释放、缓释或者长时间释放制剂；
(β)(A)和(B)中至少一种是在预选时间段内在体内缓慢释放所述活性成分的储存形式；
(γ)所述至少一种第一活性成分包括褪黑激素；
(δ)所述至少一种第二活性成分包括烟碱；
(ε)(A)还包含至少一种褪黑激素受体调节剂和/或褪黑激素分布调节剂；
(ζ)(A)还包含至少一种选自烟碱的其他活性成分；
(η)所述第一活性成分以及可能存在的所述其他活性成分，共存于所述剂量单元中，其量为0.025-100mg。
18.根据权利要求17所述的试剂盒，其中所述第一和所述第二活性成分以及可能存在的所述其他活性成分，共存于所述剂量单元中，其量为0.25-50mg。
19.根据权利要求18所述的试剂盒，其中所述第一和所述第二活性成分以及可能存在的所述其他活性成分，共存于所述剂量单元中，其量为0.5-40mg。
20.根据权利要求16-19中任一项所述的试剂盒，其中(A)和(B)中的每一个是经皮贴片。
21.根据权利要求16-19中任一项所述的试剂盒，其中(A)是口服的可控制释放型片剂，(B)是经皮贴片。
说明书 :
发明领域
本发明涉及用于治疗失眠症患者的一种药物活性组合物和一种试剂盒；以及褪黑激素和相关化合物在制备用于缓解在烟碱替代治疗过程中出现的副作用的药物中的用途。
发明背景
乙酰胆碱是大脑和周围神经系统中的主要神经传递素，它通过结合并活化属于蕈毒碱(由蕈毒碱根据它们的活化作用限定)和烟碱乙酰胆碱(由烟碱根据它们的活化作用限定)受体家族的特效受体来引起各种各样的生理和行为反应。
神经元的烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)属于广泛分布于中心和周围神经系统的配体门控性离子通道家族。nAChR是神经中枢中快速突触传递的主要介质，因而也是自主神经系统中处理神经信息的主要分子。nAChR同时还关系到器官系统(譬如心脏、内脏、膀胱等)的控制。在这一方面，特别需要重点注意的是，溃疡性结肠炎(UC)是非吸烟者易患的疾病，这里，烟碱具有治疗作用。作用的方式尚且未知，但可能与肠壁上的烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)有关(Richardson，C.E.，J.M.Morgan等人(2003).“Effect of smoking and transdermal nicotine on colonic nicotinicacetylcholine receptors in ulcerative colitis.”Q J Med 96：57-65)。
在大脑中，除了与烟草使用相关的作用外，nAChR还和多种行为能力有关系，包括认知能力(Araki，H.，K.Suemaru等人(2002).“NeuronalNicotinic Receptor and Psychiatric Disorders：Functional and BehavioralEffects of Nicotine.”Jpn.J Pharmacol 88：133-138)。无论是急性还是慢性烟碱给予都明显地改变了大鼠在放射臂迷宫中的工作记忆能力。对于人类而言，nAChR的活化作用能够对认知障碍进行有益的治疗，譬如阿兹海默症(Alzheimer′s Disease)、精神分裂症、注意力缺乏及活动亢进紊乱症(ADHD)。烟碱在所有这些病症中都显现出了提高注意能力的作用。nAChR参与了几类大脑紊乱的发病机理(帕金森症、阿兹海默症、图雷特氏综合症、精神分裂症、忧郁症、注意力缺乏紊乱)。这些疾病的临床研究表明，无论是作为预防还是治疗药剂，烟碱都具有有益的作用。
随着衰老或者痴呆病症的发展，神经元烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)的活化作用体现出了对认知能力的保持(Picciotto，M.R.and M.Zoli(2002).“Nicotinic Receptors in Aging and Dementia.”J Neurobiol 53(4)：641-55)。烟碱以及烟碱激动剂体现出了对年老或受伤害受试者的认知能力的提高(Rezvani，A.H.和E.D.Levin(2001).“Cognitive Effects ofNicotine.”Biol Psychiatry 49：258-267)。一些流行病学的研究显示，吸烟可以预防神经退化性疾病。对动物的体内和体外研究也都显示烟碱具有神经保护作用，这支持了前述观点。因而，烟碱激动剂治疗可用于减缓神经退化性疾病的进展，也可用于提高患有这种疾病的患者的机能。烟碱成瘾(主要通过吸烟)是一种难以治疗的慢性复发病症。DSM-IV(Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders-第四版，AmericanPsychiatric Association，Washington D.C.，1994出版)记录了一种烟碱戒断综合症，症状为渴望抽烟、易怒、忧虑、内心焦躁不安、精神难以集中等.尽管一些症状会在最后一次抽烟后的4-6小时内出现，但这些症状主要经常出现在骤然戒烟的前两周内.烟碱替代治疗减弱了这些症状.
一般而言，烟碱乙酰胆碱受体药理学在戒烟和神经退化性疾病的临床症候学方面正在变得越来越重要，特别是在认知和行为方面。胆碱酯酶抑制剂(ChEI)会抑制乙酰胆碱的降解，从而提高了乙酰胆碱在大脑中的浓度。ChEI凭借其具有提高大脑中乙酰胆碱浓度进而使nAChR活化的能力，而被用于治疗痴呆症。此外，烟碱乙酰胆碱受体的变构调制原理已经成为治疗药剂的研究重点。就此而言，雪花胺(galantamine，一种最近批准的用于增强阿兹海默症患者认知能力的药物)能够适当地抑制乙酰胆碱酯酶，并且对于烟碱受体具有变构增效配体作用(Woodruff-Pak，D.S.，C.Lander等人(2002).“Nicotinic Cholinergic Modulation：Galantamine as aPrototype.”CNS Drug Reviews 8(4)：405-426)。
然而，令人感兴趣的事实在于，不同亚型的神经元nAChR也受到内生源物质(诸如胆碱、色氨酸代谢物犬尿喹啉酸、神经类固醇、β-淀粉样肽)和外生源致幻觉药(诸如苯环己哌啶、克他命)的调制(Pereira，E.F.，C.Hilmas等人(2002).“Unconventional Ligands and Modulators of NicotinicReceptors.”J Neurobiol 53(4)：479-500)。近来，已经发现了缓释安非它酮(bupropion SR)在戒烟中的治疗效果(Jorenby，D.(2002).“Clinical Efficacyof Bupropion in the Management of Smoking Cessation.”Drugs 62(2)：25-35)。
当烟碱胆碱受体出现在大脑的很多区域时，尽管烟碱对于睡眠和日间警醒度的作用已经很清楚，但其中这种作用的重要性还不是很清楚。涉及烟碱对非吸烟者睡眠作用的文献也非常之少，而吸烟者在戒烟初期伴随有睡眠断续的症状(Wetter，D.W.，M.C.Diore等人(1995).“TobaccoWithdrawal and Nicotine Replacement Influence Objective Measures ofSleep.”Journal of Consulting and Clinical Psychology 63(4)：658-667)。
已经发现，贴片烟碱替代的明显副作用之一是失眠症(Jorenby，D.E.，S.J.Leischow等人(1999).“A Controlled Trial of Sustained-ReleaseBupropion，A Nicotine Patch，or Both for Smoking Cessation.”The NewEngland Journal of Medicine 340(9)：685-691)。根据烟碱对于皮质醇分泌物的公知刺激作用，明显减少的皮质醇浓度很可能是戒烟过程中神经内分泌的结果。烟碱替代治疗可以活化HPA轴，并提高皮质醇的水平。据推测，这种活化可能会引起睡眠问题，因为最近的发现表明较高的皮质醇水平会伴随有较差的睡眠质量(Rodenbeck，A.，G.Huether等人(2002).“Interactions between evening and nocturnal cortisol secretion and sleepparameters in patients with severe chronic primary insomnia.”NeuroscienceLetters 324：159-163；和Vgontzas，A.N.，E.O.Bixler等人(2001).“ChronicInsomnia Is Associated with Nyctohemeral Activation of theHypothalamic-Pituitary-Adrenal Axis：Clinical Implications.”J ClinEndocrinol Metab 86(8)：3787-3794)。
当在白天(即褪黑激素在体内水平很低的时候)提供褪黑激素(一种由松果腺在晚上分泌的激素)时，其具有促进睡眠的性能。尽管催眠药物(苯并二氮和非苯并二氮)经常减弱白天的警醒度，但已经发现的可以缩短睡眠潜伏期的作用被视为是药物催眠作用的证明.事实上，象催眠药物那样，在给予褪黑激素后一小时，就可使警醒度和行为能力严重减弱(Wurtman United States Patent 5,641,801 June 24，1997；Graw，P.，E.Werth等人(2001).“Early morning melatonin administration impairs psychomotorvigilance.”Behavioural Brain Research 121：167-172；Dollins，A.B.，H.J.Lynch等人(1993).“Effect of pharmacological daytime doses of melatoninon human mood and performance.”Psychopharmacology 112：490-496)。
此外，本领域的专家可能会报告说褪黑激素事实上损害了警醒度，的确我们已经发现，在每日口服褪黑激素1周后，患者会出现精神沮丧(Sherer，M.A.，H.Weingartner等人(1985).“Effects of melatonin onperformance testing in patients with seasonal affective disorder.”Neuroscience Letters 58：277-82)。因此，低剂量(0.3-10mg)褪黑激素的药理活性被视为催眠。同样，我们不能期望给予后短期内就能提高精神活动能力或认知能力，或者提高白天的机能。
老年失眠症患者，也就是那些因为年老和疾病而使褪黑激素产量很低的患者，以及明显涉及到褪黑激素缺乏的其他病例证实了晚间褪黑激素对睡眠的诱导作用。对于患有失眠症的老年受试者而言，与给予安慰剂相比，夜晚给予褪黑激素(每日0.3-2mg，给予1-3周)可以提高睡眠质量(Haimov，I.，P.Lavie等人(1995).“Melatonin replacement therapy ofelderly insomniacs.”Sleep 18(7)：598-603；18：598-603；Garfinkel，D.，M.Laudon等人(1995).“Improvement of sleep quality in elderly people bycontrolled-release melatonin.”The Lancet 346：541-544)。然而，对于明显能够在内部产生足够量褪黑激素的年轻失眠症患者而言，褪黑激素在夜间产生的作用较差(James，S.P.，D.A.Sack等人(1990).“Melatoninadministration in insomnia.”Neuropsychopharmacology 3：19-23；James，S.P.，W.B.Mendelson等人(1987).“The effect of melatonin on normal sleep.”Neuropsychopharmacology 1：4144)。在最近研究中，对一组与年龄相关的睡眠持续失眠症患者给予即释性(傍晚或子夜给予)或长时间释放性(傍晚给予)褪黑激素(0.5mg)。所有三类褪黑激素治疗都缩短了永久睡眠的潜伏期，但对于持续睡眠不是很有效(Hughes，R.J.，R.Sack等人(1998).“Therole of melatonin and circadian phase in age-related sleep-maintenanceinsomnia：assessment in a clinical trial of melatonin replacement.”Sleep21(1)：52-68)。因而，对于能够在内部产生足够量激素的患者而言，褪黑激素并不能有效地促进夜晚的睡眠。
动物和人类的体内研究没能证明烟碱对于内生褪黑激素制备的明显影响(Tarquini，B.，F.Perfetto等人(1994).“Daytime circulating melatoninlevels in smokers.”Tumori 80：229-232；Gaddnas，H.，K.Pietila等人(2002).“Pineal melatonin and brain transmitter monoamines in CBA mice duringchronic oral nicotine administration.”Brain Research 957：76-83)。因而，无论是以吸烟的形式或是对戒烟者进行烟碱替代治疗，都不能推断出伴随着烟碱治疗，褪黑激素可以缓解睡眠问题。在一项研究中，在停止吸烟后的很短时间内(4小时)，相比于受安慰剂治疗的对照受试者而言，给予外生褪黑激素而不进行烟碱替代治疗，可以缓解骤然戒断烟碱后的症状；给予褪黑激素(4mg，i.p.)的这些受试者镇静和疲乏感也没有加强(Zhdanova，I.and V.Piotrovskaya(2000).“Melatonin treatment attenuatessymptoms of acute nicotine withdrawal in humans.”Pharmacology，Biochemistry and Behavior 67：131-135).这些数据显示单独褪黑激素就可以减缓戒烟的症状，但是不能说明同时可以减缓烟碱替代治疗的症状.因为，一方面，烟碱不能抑制褪黑激素制备；另一方面，褪黑激素也不能有效提高能够产生足量激素的受试者的睡眠质量；此外，褪黑激素的任何催眠作用都有可能伴随着认知能力和行为能力的下降，因此现有数据中没有任何资料能够显示褪黑激素可以作为减缓因烟碱替代治疗引发的失眠症的有效药剂，也没有任何数据可以显示其可以增强烟碱对认知能力的影响.
在Markus，R.P.，J.M.Santos等人(2003).“Melatonin Nocturnal SurgeModulates Nicotinic Receptors and Nicotine-Induced[3H]-GlutamateRelease in Rat Cerebellum Slices.”JPET Fast Forward.45625中报道说，α7nAChR的活化作用引起的[(3)H]-谷氨酸盐溢出量在黑暗阶段(褪黑激素可以内生时)比较高，并且烟碱引起的[(3)H]-谷氨酸盐释放在夜间的增加受到褪黑激素夜间猛增的影响，因为当通过持续48小时光照动物，或者在停止光照前两周注射心得安，松果腺褪黑激素的制备受到抑制时，没有这种现象；可以得出结论：受到夜间松果腺内生褪黑激素猛增的驱使，大鼠小脑中烟碱引起的[(3)H]-谷氨酸盐释放出现了白天的变化。
在Markus，R.P.M.，A，W.M.Zago等人(1996).“Melatoninmodulation of presynaptic nicotinic acetylcholine receptors in the rat vasdeferens.”The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 279：18-22中报道说，在内生褪黑激素增加后，在受到外生褪黑激素孵育的前列腺部分、在夜间被杀死的动物器官中，对烟碱有较高的敏感度，因此得出结论，这可能是由于低亲合神经元烟碱Ach结合点的外观的缘故。
Markus的文章似乎暗示了褪黑激素可以增强烟碱的作用。如果外推至人类，Markus的结论可以解释戒烟期间，当缺少外生烟碱给予时，褪黑激素的有益影响，并已被Zhdanova证实。但是，这些文章也暗示出，在用烟碱治疗的受试者中，褪黑激素会导致戒烟过程中烟碱诱发的失眠症的恶化。
例如，在美国专利US 6,183,775(见下)、WO8803803、WO02076211以及已公开的美国专利申请2001029959中曾经建议为进行治疗而口服烟碱。
已公开的美国专利申请20030051728和20030062042公开了以气雾剂方式输送生理活性化合物(例如，烟碱和褪黑激素等)的方法。
美国专利US 6,183,775公开了一种包括活性物质的可控制释放的锭剂，其中含有提到的烟碱和褪黑激素。
美国专利US 6,068,853描述了一种用于输送活性药剂的经皮输送装置，并提到各种类型的活性药剂及具体实例，譬如褪黑激素和烟碱。
美国专利US 5,284,660描述了一种装置，其可按预定间隔时间向皮肤或向粘膜给药。能够送入的药物可以是譬如烟碱(用于白天给予)或者褪黑激素(用于夜间给予)。这件专利或者其中所提到的任何其他专利文献(专利和已公开的专利申请)都没有描述或者提示组合给予烟碱和褪黑激素。
这里提到的所有专利文件(专利和已公开的专利申请)的全部内容都在本专利申请中作为参考。
现在，我们惊奇地发现，相比于非吸烟者，伴随着烟碱治疗，外生褪黑激素对习惯吸烟的失眠症患者产生了显著的有益作用.烟碱和褪黑激素对睡眠的协同效应在之前从没有被发现过，它可以缓解发生在这些治疗过程中的睡眠问题，在涉及nAChR活化作用的临床介入，特别是烟碱给予中具有潜在的利用价值.此外，褪黑激素和烟碱乙酰胆碱受体调制的伴随治疗在提高一般的老年患者、特别是阿兹海默症患者的认知能力方面，提供了比单独烟碱活化作用更大的潜在有益效果.因为睡眠对记忆力巩固具有重要作用(Maquet，P.(2001).“The Role of Sleep inLearning and Memory.”Science 294：1048-1052)，所以也可以预期到，由于能够增强睡眠依赖性记忆力巩固，因而烟碱和褪黑激素的伴随治疗能够提高第二天的认知和记忆能力。
发明概述
概括地说，本发明涉及为治疗与nAChR活化作用相关的失眠症(在戒烟及其他医学症候中)，并同时提高认识功能和记忆力，而以定期或延长释放剂型给予(或者任何其他方式的给予)褪黑激素及相关化合物。
因而，一方面，本发明提供一种用于治疗失眠症患者的药物活性组合物，其包括：(a)至少一种选自褪黑激素、其他褪黑激素能药剂(melatonergic agents)、褪黑激素激动剂以及褪黑激素拮抗剂的第一活性成分；以及(b)至少一种选自烟碱和烟碱受体激动剂的第二活性成分。在本发明的药物活性组合物中，成份(a)和成分(b)可以分别配制，也可以在单一制剂中配制。
另一方面，本发明包括至少一种选自褪黑激素、其他褪黑激素能药剂、褪黑激素激动剂以及褪黑激素拮抗剂的第一活性成分(a)在制备用于缓解接受烟碱替代治疗过程的患者发生的至少一种如下副作用的第一药物中的用途：损害睡眠质量、损害认知能力和损害记忆力，其中所述患者可以选择性地同时接受包括至少一种选自烟碱和烟碱受体激动剂的第二活性成分(b)的第二药物。
另一方面，本发明包括至少一种选自褪黑激素、其他褪黑激素能药剂、褪黑激素激动剂以及褪黑激素拮抗剂的第一活性成分(a)在制备在如下所述的第二药物存在下用于缓解没有接受烟碱替代治疗过程的患者中的至少一种如下副作用的第一药物中的用途：损害睡眠质量、损害认知能力和损害记忆力，其中所述第二药物包括至少一种选自烟碱和烟碱受体激动剂的第二活性成分(b)。
另一方面，本发明还提供一种用于治疗失眠症患者的试剂盒，其包括：
(A)单位剂型的第一药物制剂，包括：除了至少一种稀释剂、载体或者佐剂之外，至少一种选自褪黑激素、其他褪黑激素能药剂、褪黑激素激动剂以及褪黑激素拮抗剂的第一活性成分；以及
(B)单位剂型的第二药物制剂，包括：除了至少一种稀释剂、载体或者佐剂之外，至少一种选自烟碱和烟碱受体激动剂的第二活性成分；
其中，(A)和(B)中的剂量单元独立地选自适合于口服、直肠、肠胃外、舌下、肺内或经皮给药的那些剂量单元。
发明详细说明
本发明的药物活性组合物以及本发明用途中的每种药物，可以具有以下特征中的至少一种：
(i)其包括至少一种稀释剂、载体或者佐剂；
(ii)其是剂量单元形式，这些剂量单元适合于口服、直肠、肠胃外、舌下、肺内或经皮给药；
(iii)其是一种可控制释放、缓释或者长时间释放制剂；
(iv)其是在预选时间段内在体内缓慢释放活性成分的储存形式；
(v)成分(a)是褪黑激素；
(vi)成分(b)是烟碱；
(vii)其包括至少一种褪黑激素受体调节剂和/或褪黑激素分布调节剂；
(viii)第一活性成分(a)和第二活性成分(b)在单一制剂中配制。
本发明的药物活性组合物以及本发明用途中的每种药物，可以是剂量单元形式，其中每一剂量单元包括至少一种其量为0.025-100mg、优选0.25-50mg、特别优选0.5-40mg的活性成分。
本发明的试剂盒还优选具有至少一个以下特征：
i)(A)和(B)中至少一种是可控制释放、缓释或者长时间释放制剂；
ii)(A)和(B)中至少一种是在预选时间段内在体内缓慢释放活性成分的储存形式；
iii)所述至少一种第一活性成分包括褪黑激素；
iv)所述至少一种第二活性成分包括烟碱；
v)(A)还包含至少一种褪黑激素受体调节剂和/或褪黑激素分布调节剂；
vi)(A)还包含至少一种选自烟碱和烟碱受体激动剂的其他活性成分；
vii)所述第一和所述第二活性成分以及可能存在的所述其他活性成分，共存于所述剂量单元中，其量为0.025-100mg，优选为0.25-50mg，特别优选为0.5-40mg。
在不损害本发明这方面一般概念的情况下，目前优选的是(A)和(B)中的每一个是经皮贴片。下面将举例说明这样的试剂盒，试剂盒包括下面制剂实施例(C)中所述的日贴片和夜贴片。
在本发明试剂盒的另一个当前优选实施方案中，(A)可以制成口服的可控制释放型片剂，(B)制成经皮贴片。下面将通过制剂实施例(A)和(B)来说明这样的试剂盒，这种试剂盒包括含有褪黑激素的片剂和含有烟碱的贴片。
根据本发明，当对比吸烟者和非吸烟者的褪黑激素水平时，可以惊奇的发现：每晚给予褪黑激素(2mg可控制释放的制剂)4周后，对55岁以上患失眠症的患者而言，对提高吸烟患者的睡眠质量的影响明显大于非吸烟患者，也超过了对同样患者进行安慰剂治疗的值(参见实施例1)。
此外，每晚给予褪黑激素(2mg可控制释放的制剂)3周后，对于年龄在22-50岁之间的失眠症患者而言，对提高吸烟患者的睡眠质量的影响明显大于非吸烟患者。
此外，每晚给予褪黑激素(2mg可控制释放的制剂)3周后，对55岁以上患失眠症的患者而言，对增强吸烟者的精神活动技能的影响明显大于非吸烟患者(如实施例3所示)。
更加令人吃惊的发现是，与非吸烟者相比，单一给予褪黑激素(2mg可控制释放的制剂)对吸烟患者或戒烟不足6个月的受试者记忆力的提高明显大于受安慰剂治疗的受试者。
下面根据非限制性的实施例来说明本发明。
实施例1
以17例老年失眠症患者(年龄66.9(SD 5.4)岁)为研究对象，按照随机双盲交叉研究方法，研究褪黑激素的可控制释放制剂对于主观评价的睡眠质量的影响。检测夜间(8p.m.-8a.m.)尿液中主要褪黑激素代谢物6-硫酸氧代褪黑激素(6-sulfatoxymelatonin)的基本分泌量，安慰剂治疗受试者1周以建立基线特性，然后对受试者进行2个周期的交叉设计(4周2mg可控制释放的褪黑激素或安慰剂)，两个周期之间间隔一个洗脱期(1周)。在基线期和治疗期的最后1周，通过让患者在140mm的视觉近似评价量尺上划勾来询问他们前一晚的睡眠质量。测量患者标记距离量尺左手侧的距离，较高的值表示较高质量的睡眠。针对吸烟和非吸烟患者，计算休息更好睡眠的评估值与安慰剂值的差。在研究人群中，吸烟者和非吸烟者分泌的夜间6-硫酸氧代褪黑激素量没有明显差别(分别是3.5+1.5vs.6.3+5μg的6-硫酸氧代褪黑激素)。令人惊讶的发现是，对于吸烟者而言，褪黑激素对于睡眠质量的改善明显优于安慰剂，体现了褪黑激素和烟碱的协同效应(表1)。吸烟者和非吸烟者对安慰剂的反应没有差别。
表1：与安慰剂相比，褪黑激素对吸烟和非吸烟失眠症患者的主观评价的睡眠的影响
参数 非吸烟者 (n＝4) 吸烟者 (n＝10) 显著性 (t-试验) 与安慰剂相比，用褪黑激素时主观感觉到的睡眠 质量的平均变化(以mm为单位) -2.8 15 P＝0.003 平均夜间6-硫酸氧代褪黑激素分泌物(μg/晚) 3.5 6.3 P＝0.29
实施例2
以混合年龄段的失眠症患者群体(20-80岁)为研究对象，研究褪黑激素的可控制释放制剂对主观评价的睡眠质量的影响。安慰剂治疗受试者1周以建立基线特性，然后用可控制释放的褪黑激素(1mg/晚)或者安慰剂治疗3周。在基线期和治疗期的最后三天，通过使用Leeds睡眠评估问卷(Parrott，A.C.and I.Hindmarch(1980).“The leeds sleep evaluationquestionnaire in psychopharmacological investigations - a review.”Psychopharmacology(Berl)71(2)：173-9))来询问患者前一晚的睡眠质量，该问卷包括与睡眠质量相关的两个100mm的视觉近似评价量尺。以mm为单位，测量患者标记距离右手侧的距离，对连续3个晚上的两个问题的平均答案进行平均。将平均值超过10mm或以上的答复者定义为患者。令人吃惊的发现是，不管年龄如何，吸烟组(62％，n＝16)中答复者的比例明显高于非吸烟组(40％，n＝43，p＝0.002)。对于安慰剂而言，吸烟组(46％，n＝13)和非吸烟组(44％n＝53，p＝0.89，卡方检验)中答复者的比例没有差别。
实施例3
以40例老年失眠症患者(年龄60.8(SD 0.8)岁)为研究对象，研究褪黑激素的可控制释放制剂对精神活动性能的影响(总反应时间TRT，平均反应时间MRT).安慰剂治疗受试者2周(基线)，用可控制释放的褪黑激素(2mg/晚)治疗3周.在治疗的最后两天中，对全部患者进行精神活动测试，来分析日间警醒度.与非吸烟组相比，接受褪黑激素治疗的吸烟患者其精神活动技能明显提高(TRT为-38.95msec，MRT为-36.07)(分别是-5.21，p＝0.05和0.62msec，p＝0.03).
实施例4
以16例老年志愿者(＞55岁；年龄59(SD 3.2)岁)为研究对象，研究褪黑激素(2mg可控制释放制剂)和安慰剂对记忆力的影响(Rivermead故事测试)。在随机双盲交叉研究中，晚上给予受试者一片安慰剂以建立基线，然后在1周内随机给予一片褪黑激素或安慰剂，治疗中间没有治疗。给予片剂后在第2小时和第12.5小时时，对患者进行Rivermead测试。令人吃惊的是，在服药后的起先几小时内，褪黑激素对受试者的记忆能力的改善明显大于各安慰剂的值。与基线或交叉安慰剂相比，给予可控制释放的褪黑激素2mg后，对于两种记忆(即时记忆和延迟记忆)的记忆效率都得到了提高，并且对吸烟或在研究前6个月内戒烟的患者的效果比非吸烟者好。
表2：故事中记忆事件的平均值
和吸入安慰剂或褪黑激素2小时后记忆性能与给予安慰剂的差别
定量服药后的时间 吸烟者 (n＝4) 非吸烟者 (n＝12) 作用 (t-试验) 记忆数量-褪黑激素 14.8 9.8 P＝0.056 记忆数量-安慰剂 12.2 12.1 P＝0.33 褪黑激素和安慰剂的记忆差别 3.5 -2.41 P＝0.043
下面说明本发明所用的非限制性药物制剂的实施例。
制剂实施例
(A)可控制释放的褪黑激素
口服的可控制释放制剂可通过以下方法得到：将粉末状原料(即2mg褪黑激素(Lipomed Co.，Switzerland)和丙烯酸树脂载体(Rohm Pharma))进行干法混合，然后在2.5吨压力下在7mm圆筒形冲压机中压制，使得产品中包含RSPO 35.3％、乳糖16.7％、磷酸氢钙41.4％、云母1.3％、硬脂酸镁4％、褪黑激素1.3％。可以将其压成片，包含譬如1mg或2mg的褪黑激素。
(B)仅包含烟碱的制剂
在本实施例中，制得一种可以容纳并输送足够烟碱的经皮贴片，烟碱效力长达24小时。这种贴片一般要每天更换一次，可以用于戒烟治疗或者全身烟碱输送需要的其他情形。晚上给予褪黑激素片剂以缓解烟碱治疗引起的失眠症。褪黑激素在晚上给予，优选以如上述制剂实施例(A)中描述的可控制释放的片剂形式给予，它可以容纳并输送足够的褪黑激素，譬如效力在晚间长达8小时。
为制备1克贴片粘性基质，将丙酮(0.21克)、异丙醇(0.23克)、乙醇(0.117克)置于搅拌槽中，搅拌下分次加入E100(0.422g)，直至全部溶解。然后加入癸二酸二丁酯(0.19g)，继续搅拌20分钟，然后搅拌下加入琥珀酸(0.038克)，搅拌持续10分钟。通过向粘性基质溶液中加入33wt％的液体烟碱，并搅拌30分钟，来制备含有烟碱的粘性溶液。在盘子上铺上一层级别为3M-1005的衬底材料(100cm2)，然后覆上基质混合物。用高度为1500mμ的刀片铸型混合物。盖上盘子，由于溶剂在室温下挥发，从而留下基质。从最终的基质上切下面积为10cm2的贴片。向粘性表面粘贴一种惰性释放的3M-1512衬垫，并在将此装置贴于皮肤之前除去该衬垫。每个贴片上的烟碱量为33mg，能提供药力达24小时。
(C)包含烟碱和褪黑激素的制剂
可以预见到，这个实施例的制剂将用于在夜间的8-12个小时内有效地输送足量的烟碱和褪黑激素(在更换后)，并且优选的是与在12-16小时的期间内用于白天输送的单独贴片一起使用，从而适于戒烟治疗或者全身烟碱输送需要的其他治疗情形，而不会引起失眠症。日贴通常在12-16小时后更换，并可以用如上所述的实施例(B)中描述的那样制备，除了烟碱溶液的浓度是21wt％，而不是33wt％。
为制备1g的夜间贴片粘性基质，将丙酮(0.21克)、异丙醇(0.23克)、乙醇(0.117克)置于搅拌器中，搅拌下分次加入E100(0.422g)，直至全部溶解。然后加入癸二酸二丁酯(0.19g)，继续搅拌20分钟，然后搅拌下加入琥珀酸(0.038克)，搅拌持续10分钟。通过使23wt％的褪黑激素悬浮在0.35g的丙酮/异丙醇/乙醇的混合液(9∶1∶5)中并加入12wt％的液体烟碱，将此悬浮液加到粘性基质溶液中，搅拌30分钟，来制备含有烟碱和褪黑激素的粘性溶液。在盘子上铺上一层级别为3M-1005(100cm2)的衬底材料，然后覆上基质混合物。用高度为2500mμ的刀片铸型混合物。盖上盘子，由于溶剂在室温下挥发，从而留下基质。从最终的基质上切下面积为10cm2的贴片。向粘性表面粘贴一种惰性释放的3M-1512衬垫，并在将此装置贴于皮肤之前除去该衬垫。每个贴片包括12mg的烟碱和23mg的褪黑激素，可以在夜间发挥药力8-12小时。
虽然上文非常详细地描述了本发明的具体实施方案，但是可以明白，本发明并不限于此。本领域所属技术人员可以很容易地做出各种变化和改进。这些没有详细说明的改进和变化都可以视为本发明的等同物。
神经元的烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)属于广泛分布于中心和周围神经系统的配体门控性离子通道家族。nAChR是神经中枢中快速突触传递的主要介质，因而也是自主神经系统中处理神经信息的主要分子。nAChR同时还关系到器官系统(譬如心脏、内脏、膀胱等)的控制。在这一方面，特别需要重点注意的是，溃疡性结肠炎(UC)是非吸烟者易患的疾病，这里，烟碱具有治疗作用。作用的方式尚且未知，但可能与肠壁上的烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)有关(Richardson，C.E.，J.M.Morgan等人(2003).“Effect of smoking and transdermal nicotine on colonic nicotinicacetylcholine receptors in ulcerative colitis.”Q J Med 96：57-65)。
在大脑中，除了与烟草使用相关的作用外，nAChR还和多种行为能力有关系，包括认知能力(Araki，H.，K.Suemaru等人(2002).“NeuronalNicotinic Receptor and Psychiatric Disorders：Functional and BehavioralEffects of Nicotine.”Jpn.J Pharmacol 88：133-138)。无论是急性还是慢性烟碱给予都明显地改变了大鼠在放射臂迷宫中的工作记忆能力。对于人类而言，nAChR的活化作用能够对认知障碍进行有益的治疗，譬如阿兹海默症(Alzheimer′s Disease)、精神分裂症、注意力缺乏及活动亢进紊乱症(ADHD)。烟碱在所有这些病症中都显现出了提高注意能力的作用。nAChR参与了几类大脑紊乱的发病机理(帕金森症、阿兹海默症、图雷特氏综合症、精神分裂症、忧郁症、注意力缺乏紊乱)。这些疾病的临床研究表明，无论是作为预防还是治疗药剂，烟碱都具有有益的作用。
随着衰老或者痴呆病症的发展，神经元烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)的活化作用体现出了对认知能力的保持(Picciotto，M.R.and M.Zoli(2002).“Nicotinic Receptors in Aging and Dementia.”J Neurobiol 53(4)：641-55)。烟碱以及烟碱激动剂体现出了对年老或受伤害受试者的认知能力的提高(Rezvani，A.H.和E.D.Levin(2001).“Cognitive Effects ofNicotine.”Biol Psychiatry 49：258-267)。一些流行病学的研究显示，吸烟可以预防神经退化性疾病。对动物的体内和体外研究也都显示烟碱具有神经保护作用，这支持了前述观点。因而，烟碱激动剂治疗可用于减缓神经退化性疾病的进展，也可用于提高患有这种疾病的患者的机能。烟碱成瘾(主要通过吸烟)是一种难以治疗的慢性复发病症。DSM-IV(Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders-第四版，AmericanPsychiatric Association，Washington D.C.，1994出版)记录了一种烟碱戒断综合症，症状为渴望抽烟、易怒、忧虑、内心焦躁不安、精神难以集中等.尽管一些症状会在最后一次抽烟后的4-6小时内出现，但这些症状主要经常出现在骤然戒烟的前两周内.烟碱替代治疗减弱了这些症状.
一般而言，烟碱乙酰胆碱受体药理学在戒烟和神经退化性疾病的临床症候学方面正在变得越来越重要，特别是在认知和行为方面。胆碱酯酶抑制剂(ChEI)会抑制乙酰胆碱的降解，从而提高了乙酰胆碱在大脑中的浓度。ChEI凭借其具有提高大脑中乙酰胆碱浓度进而使nAChR活化的能力，而被用于治疗痴呆症。此外，烟碱乙酰胆碱受体的变构调制原理已经成为治疗药剂的研究重点。就此而言，雪花胺(galantamine，一种最近批准的用于增强阿兹海默症患者认知能力的药物)能够适当地抑制乙酰胆碱酯酶，并且对于烟碱受体具有变构增效配体作用(Woodruff-Pak，D.S.，C.Lander等人(2002).“Nicotinic Cholinergic Modulation：Galantamine as aPrototype.”CNS Drug Reviews 8(4)：405-426)。
然而，令人感兴趣的事实在于，不同亚型的神经元nAChR也受到内生源物质(诸如胆碱、色氨酸代谢物犬尿喹啉酸、神经类固醇、β-淀粉样肽)和外生源致幻觉药(诸如苯环己哌啶、克他命)的调制(Pereira，E.F.，C.Hilmas等人(2002).“Unconventional Ligands and Modulators of NicotinicReceptors.”J Neurobiol 53(4)：479-500)。近来，已经发现了缓释安非它酮(bupropion SR)在戒烟中的治疗效果(Jorenby，D.(2002).“Clinical Efficacyof Bupropion in the Management of Smoking Cessation.”Drugs 62(2)：25-35)。
当烟碱胆碱受体出现在大脑的很多区域时，尽管烟碱对于睡眠和日间警醒度的作用已经很清楚，但其中这种作用的重要性还不是很清楚。涉及烟碱对非吸烟者睡眠作用的文献也非常之少，而吸烟者在戒烟初期伴随有睡眠断续的症状(Wetter，D.W.，M.C.Diore等人(1995).“TobaccoWithdrawal and Nicotine Replacement Influence Objective Measures ofSleep.”Journal of Consulting and Clinical Psychology 63(4)：658-667)。
已经发现，贴片烟碱替代的明显副作用之一是失眠症(Jorenby，D.E.，S.J.Leischow等人(1999).“A Controlled Trial of Sustained-ReleaseBupropion，A Nicotine Patch，or Both for Smoking Cessation.”The NewEngland Journal of Medicine 340(9)：685-691)。根据烟碱对于皮质醇分泌物的公知刺激作用，明显减少的皮质醇浓度很可能是戒烟过程中神经内分泌的结果。烟碱替代治疗可以活化HPA轴，并提高皮质醇的水平。据推测，这种活化可能会引起睡眠问题，因为最近的发现表明较高的皮质醇水平会伴随有较差的睡眠质量(Rodenbeck，A.，G.Huether等人(2002).“Interactions between evening and nocturnal cortisol secretion and sleepparameters in patients with severe chronic primary insomnia.”NeuroscienceLetters 324：159-163；和Vgontzas，A.N.，E.O.Bixler等人(2001).“ChronicInsomnia Is Associated with Nyctohemeral Activation of theHypothalamic-Pituitary-Adrenal Axis：Clinical Implications.”J ClinEndocrinol Metab 86(8)：3787-3794)。
当在白天(即褪黑激素在体内水平很低的时候)提供褪黑激素(一种由松果腺在晚上分泌的激素)时，其具有促进睡眠的性能。尽管催眠药物(苯并二氮和非苯并二氮)经常减弱白天的警醒度，但已经发现的可以缩短睡眠潜伏期的作用被视为是药物催眠作用的证明.事实上，象催眠药物那样，在给予褪黑激素后一小时，就可使警醒度和行为能力严重减弱(Wurtman United States Patent 5,641,801 June 24，1997；Graw，P.，E.Werth等人(2001).“Early morning melatonin administration impairs psychomotorvigilance.”Behavioural Brain Research 121：167-172；Dollins，A.B.，H.J.Lynch等人(1993).“Effect of pharmacological daytime doses of melatoninon human mood and performance.”Psychopharmacology 112：490-496)。
此外，本领域的专家可能会报告说褪黑激素事实上损害了警醒度，的确我们已经发现，在每日口服褪黑激素1周后，患者会出现精神沮丧(Sherer，M.A.，H.Weingartner等人(1985).“Effects of melatonin onperformance testing in patients with seasonal affective disorder.”Neuroscience Letters 58：277-82)。因此，低剂量(0.3-10mg)褪黑激素的药理活性被视为催眠。同样，我们不能期望给予后短期内就能提高精神活动能力或认知能力，或者提高白天的机能。
老年失眠症患者，也就是那些因为年老和疾病而使褪黑激素产量很低的患者，以及明显涉及到褪黑激素缺乏的其他病例证实了晚间褪黑激素对睡眠的诱导作用。对于患有失眠症的老年受试者而言，与给予安慰剂相比，夜晚给予褪黑激素(每日0.3-2mg，给予1-3周)可以提高睡眠质量(Haimov，I.，P.Lavie等人(1995).“Melatonin replacement therapy ofelderly insomniacs.”Sleep 18(7)：598-603；18：598-603；Garfinkel，D.，M.Laudon等人(1995).“Improvement of sleep quality in elderly people bycontrolled-release melatonin.”The Lancet 346：541-544)。然而，对于明显能够在内部产生足够量褪黑激素的年轻失眠症患者而言，褪黑激素在夜间产生的作用较差(James，S.P.，D.A.Sack等人(1990).“Melatoninadministration in insomnia.”Neuropsychopharmacology 3：19-23；James，S.P.，W.B.Mendelson等人(1987).“The effect of melatonin on normal sleep.”Neuropsychopharmacology 1：4144)。在最近研究中，对一组与年龄相关的睡眠持续失眠症患者给予即释性(傍晚或子夜给予)或长时间释放性(傍晚给予)褪黑激素(0.5mg)。所有三类褪黑激素治疗都缩短了永久睡眠的潜伏期，但对于持续睡眠不是很有效(Hughes，R.J.，R.Sack等人(1998).“Therole of melatonin and circadian phase in age-related sleep-maintenanceinsomnia：assessment in a clinical trial of melatonin replacement.”Sleep21(1)：52-68)。因而，对于能够在内部产生足够量激素的患者而言，褪黑激素并不能有效地促进夜晚的睡眠。
动物和人类的体内研究没能证明烟碱对于内生褪黑激素制备的明显影响(Tarquini，B.，F.Perfetto等人(1994).“Daytime circulating melatoninlevels in smokers.”Tumori 80：229-232；Gaddnas，H.，K.Pietila等人(2002).“Pineal melatonin and brain transmitter monoamines in CBA mice duringchronic oral nicotine administration.”Brain Research 957：76-83)。因而，无论是以吸烟的形式或是对戒烟者进行烟碱替代治疗，都不能推断出伴随着烟碱治疗，褪黑激素可以缓解睡眠问题。在一项研究中，在停止吸烟后的很短时间内(4小时)，相比于受安慰剂治疗的对照受试者而言，给予外生褪黑激素而不进行烟碱替代治疗，可以缓解骤然戒断烟碱后的症状；给予褪黑激素(4mg，i.p.)的这些受试者镇静和疲乏感也没有加强(Zhdanova，I.and V.Piotrovskaya(2000).“Melatonin treatment attenuatessymptoms of acute nicotine withdrawal in humans.”Pharmacology，Biochemistry and Behavior 67：131-135).这些数据显示单独褪黑激素就可以减缓戒烟的症状，但是不能说明同时可以减缓烟碱替代治疗的症状.因为，一方面，烟碱不能抑制褪黑激素制备；另一方面，褪黑激素也不能有效提高能够产生足量激素的受试者的睡眠质量；此外，褪黑激素的任何催眠作用都有可能伴随着认知能力和行为能力的下降，因此现有数据中没有任何资料能够显示褪黑激素可以作为减缓因烟碱替代治疗引发的失眠症的有效药剂，也没有任何数据可以显示其可以增强烟碱对认知能力的影响.
在Markus，R.P.，J.M.Santos等人(2003).“Melatonin Nocturnal SurgeModulates Nicotinic Receptors and Nicotine-Induced[3H]-GlutamateRelease in Rat Cerebellum Slices.”JPET Fast Forward.45625中报道说，α7nAChR的活化作用引起的[(3)H]-谷氨酸盐溢出量在黑暗阶段(褪黑激素可以内生时)比较高，并且烟碱引起的[(3)H]-谷氨酸盐释放在夜间的增加受到褪黑激素夜间猛增的影响，因为当通过持续48小时光照动物，或者在停止光照前两周注射心得安，松果腺褪黑激素的制备受到抑制时，没有这种现象；可以得出结论：受到夜间松果腺内生褪黑激素猛增的驱使，大鼠小脑中烟碱引起的[(3)H]-谷氨酸盐释放出现了白天的变化。
在Markus，R.P.M.，A，W.M.Zago等人(1996).“Melatoninmodulation of presynaptic nicotinic acetylcholine receptors in the rat vasdeferens.”The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 279：18-22中报道说，在内生褪黑激素增加后，在受到外生褪黑激素孵育的前列腺部分、在夜间被杀死的动物器官中，对烟碱有较高的敏感度，因此得出结论，这可能是由于低亲合神经元烟碱Ach结合点的外观的缘故。
Markus的文章似乎暗示了褪黑激素可以增强烟碱的作用。如果外推至人类，Markus的结论可以解释戒烟期间，当缺少外生烟碱给予时，褪黑激素的有益影响，并已被Zhdanova证实。但是，这些文章也暗示出，在用烟碱治疗的受试者中，褪黑激素会导致戒烟过程中烟碱诱发的失眠症的恶化。
例如，在美国专利US 6,183,775(见下)、WO8803803、WO02076211以及已公开的美国专利申请2001029959中曾经建议为进行治疗而口服烟碱。
已公开的美国专利申请20030051728和20030062042公开了以气雾剂方式输送生理活性化合物(例如，烟碱和褪黑激素等)的方法。
美国专利US 6,183,775公开了一种包括活性物质的可控制释放的锭剂，其中含有提到的烟碱和褪黑激素。
美国专利US 6,068,853描述了一种用于输送活性药剂的经皮输送装置，并提到各种类型的活性药剂及具体实例，譬如褪黑激素和烟碱。
美国专利US 5,284,660描述了一种装置，其可按预定间隔时间向皮肤或向粘膜给药。能够送入的药物可以是譬如烟碱(用于白天给予)或者褪黑激素(用于夜间给予)。这件专利或者其中所提到的任何其他专利文献(专利和已公开的专利申请)都没有描述或者提示组合给予烟碱和褪黑激素。
这里提到的所有专利文件(专利和已公开的专利申请)的全部内容都在本专利申请中作为参考。
现在，我们惊奇地发现，相比于非吸烟者，伴随着烟碱治疗，外生褪黑激素对习惯吸烟的失眠症患者产生了显著的有益作用.烟碱和褪黑激素对睡眠的协同效应在之前从没有被发现过，它可以缓解发生在这些治疗过程中的睡眠问题，在涉及nAChR活化作用的临床介入，特别是烟碱给予中具有潜在的利用价值.此外，褪黑激素和烟碱乙酰胆碱受体调制的伴随治疗在提高一般的老年患者、特别是阿兹海默症患者的认知能力方面，提供了比单独烟碱活化作用更大的潜在有益效果.因为睡眠对记忆力巩固具有重要作用(Maquet，P.(2001).“The Role of Sleep inLearning and Memory.”Science 294：1048-1052)，所以也可以预期到，由于能够增强睡眠依赖性记忆力巩固，因而烟碱和褪黑激素的伴随治疗能够提高第二天的认知和记忆能力。
发明概述
概括地说，本发明涉及为治疗与nAChR活化作用相关的失眠症(在戒烟及其他医学症候中)，并同时提高认识功能和记忆力，而以定期或延长释放剂型给予(或者任何其他方式的给予)褪黑激素及相关化合物。
因而，一方面，本发明提供一种用于治疗失眠症患者的药物活性组合物，其包括：(a)至少一种选自褪黑激素、其他褪黑激素能药剂(melatonergic agents)、褪黑激素激动剂以及褪黑激素拮抗剂的第一活性成分；以及(b)至少一种选自烟碱和烟碱受体激动剂的第二活性成分。在本发明的药物活性组合物中，成份(a)和成分(b)可以分别配制，也可以在单一制剂中配制。
另一方面，本发明包括至少一种选自褪黑激素、其他褪黑激素能药剂、褪黑激素激动剂以及褪黑激素拮抗剂的第一活性成分(a)在制备用于缓解接受烟碱替代治疗过程的患者发生的至少一种如下副作用的第一药物中的用途：损害睡眠质量、损害认知能力和损害记忆力，其中所述患者可以选择性地同时接受包括至少一种选自烟碱和烟碱受体激动剂的第二活性成分(b)的第二药物。
另一方面，本发明包括至少一种选自褪黑激素、其他褪黑激素能药剂、褪黑激素激动剂以及褪黑激素拮抗剂的第一活性成分(a)在制备在如下所述的第二药物存在下用于缓解没有接受烟碱替代治疗过程的患者中的至少一种如下副作用的第一药物中的用途：损害睡眠质量、损害认知能力和损害记忆力，其中所述第二药物包括至少一种选自烟碱和烟碱受体激动剂的第二活性成分(b)。
另一方面，本发明还提供一种用于治疗失眠症患者的试剂盒，其包括：
(A)单位剂型的第一药物制剂，包括：除了至少一种稀释剂、载体或者佐剂之外，至少一种选自褪黑激素、其他褪黑激素能药剂、褪黑激素激动剂以及褪黑激素拮抗剂的第一活性成分；以及
(B)单位剂型的第二药物制剂，包括：除了至少一种稀释剂、载体或者佐剂之外，至少一种选自烟碱和烟碱受体激动剂的第二活性成分；
其中，(A)和(B)中的剂量单元独立地选自适合于口服、直肠、肠胃外、舌下、肺内或经皮给药的那些剂量单元。
发明详细说明
本发明的药物活性组合物以及本发明用途中的每种药物，可以具有以下特征中的至少一种：
(i)其包括至少一种稀释剂、载体或者佐剂；
(ii)其是剂量单元形式，这些剂量单元适合于口服、直肠、肠胃外、舌下、肺内或经皮给药；
(iii)其是一种可控制释放、缓释或者长时间释放制剂；
(iv)其是在预选时间段内在体内缓慢释放活性成分的储存形式；
(v)成分(a)是褪黑激素；
(vi)成分(b)是烟碱；
(vii)其包括至少一种褪黑激素受体调节剂和/或褪黑激素分布调节剂；
(viii)第一活性成分(a)和第二活性成分(b)在单一制剂中配制。
本发明的药物活性组合物以及本发明用途中的每种药物，可以是剂量单元形式，其中每一剂量单元包括至少一种其量为0.025-100mg、优选0.25-50mg、特别优选0.5-40mg的活性成分。
本发明的试剂盒还优选具有至少一个以下特征：
i)(A)和(B)中至少一种是可控制释放、缓释或者长时间释放制剂；
ii)(A)和(B)中至少一种是在预选时间段内在体内缓慢释放活性成分的储存形式；
iii)所述至少一种第一活性成分包括褪黑激素；
iv)所述至少一种第二活性成分包括烟碱；
v)(A)还包含至少一种褪黑激素受体调节剂和/或褪黑激素分布调节剂；
vi)(A)还包含至少一种选自烟碱和烟碱受体激动剂的其他活性成分；
vii)所述第一和所述第二活性成分以及可能存在的所述其他活性成分，共存于所述剂量单元中，其量为0.025-100mg，优选为0.25-50mg，特别优选为0.5-40mg。
在不损害本发明这方面一般概念的情况下，目前优选的是(A)和(B)中的每一个是经皮贴片。下面将举例说明这样的试剂盒，试剂盒包括下面制剂实施例(C)中所述的日贴片和夜贴片。
在本发明试剂盒的另一个当前优选实施方案中，(A)可以制成口服的可控制释放型片剂，(B)制成经皮贴片。下面将通过制剂实施例(A)和(B)来说明这样的试剂盒，这种试剂盒包括含有褪黑激素的片剂和含有烟碱的贴片。
根据本发明，当对比吸烟者和非吸烟者的褪黑激素水平时，可以惊奇的发现：每晚给予褪黑激素(2mg可控制释放的制剂)4周后，对55岁以上患失眠症的患者而言，对提高吸烟患者的睡眠质量的影响明显大于非吸烟患者，也超过了对同样患者进行安慰剂治疗的值(参见实施例1)。
此外，每晚给予褪黑激素(2mg可控制释放的制剂)3周后，对于年龄在22-50岁之间的失眠症患者而言，对提高吸烟患者的睡眠质量的影响明显大于非吸烟患者。
此外，每晚给予褪黑激素(2mg可控制释放的制剂)3周后，对55岁以上患失眠症的患者而言，对增强吸烟者的精神活动技能的影响明显大于非吸烟患者(如实施例3所示)。
更加令人吃惊的发现是，与非吸烟者相比，单一给予褪黑激素(2mg可控制释放的制剂)对吸烟患者或戒烟不足6个月的受试者记忆力的提高明显大于受安慰剂治疗的受试者。
下面根据非限制性的实施例来说明本发明。
实施例1
以17例老年失眠症患者(年龄66.9(SD 5.4)岁)为研究对象，按照随机双盲交叉研究方法，研究褪黑激素的可控制释放制剂对于主观评价的睡眠质量的影响。检测夜间(8p.m.-8a.m.)尿液中主要褪黑激素代谢物6-硫酸氧代褪黑激素(6-sulfatoxymelatonin)的基本分泌量，安慰剂治疗受试者1周以建立基线特性，然后对受试者进行2个周期的交叉设计(4周2mg可控制释放的褪黑激素或安慰剂)，两个周期之间间隔一个洗脱期(1周)。在基线期和治疗期的最后1周，通过让患者在140mm的视觉近似评价量尺上划勾来询问他们前一晚的睡眠质量。测量患者标记距离量尺左手侧的距离，较高的值表示较高质量的睡眠。针对吸烟和非吸烟患者，计算休息更好睡眠的评估值与安慰剂值的差。在研究人群中，吸烟者和非吸烟者分泌的夜间6-硫酸氧代褪黑激素量没有明显差别(分别是3.5+1.5vs.6.3+5μg的6-硫酸氧代褪黑激素)。令人惊讶的发现是，对于吸烟者而言，褪黑激素对于睡眠质量的改善明显优于安慰剂，体现了褪黑激素和烟碱的协同效应(表1)。吸烟者和非吸烟者对安慰剂的反应没有差别。
表1：与安慰剂相比，褪黑激素对吸烟和非吸烟失眠症患者的主观评价的睡眠的影响
参数 非吸烟者 (n＝4) 吸烟者 (n＝10) 显著性 (t-试验) 与安慰剂相比，用褪黑激素时主观感觉到的睡眠 质量的平均变化(以mm为单位) -2.8 15 P＝0.003 平均夜间6-硫酸氧代褪黑激素分泌物(μg/晚) 3.5 6.3 P＝0.29
实施例2
以混合年龄段的失眠症患者群体(20-80岁)为研究对象，研究褪黑激素的可控制释放制剂对主观评价的睡眠质量的影响。安慰剂治疗受试者1周以建立基线特性，然后用可控制释放的褪黑激素(1mg/晚)或者安慰剂治疗3周。在基线期和治疗期的最后三天，通过使用Leeds睡眠评估问卷(Parrott，A.C.and I.Hindmarch(1980).“The leeds sleep evaluationquestionnaire in psychopharmacological investigations - a review.”Psychopharmacology(Berl)71(2)：173-9))来询问患者前一晚的睡眠质量，该问卷包括与睡眠质量相关的两个100mm的视觉近似评价量尺。以mm为单位，测量患者标记距离右手侧的距离，对连续3个晚上的两个问题的平均答案进行平均。将平均值超过10mm或以上的答复者定义为患者。令人吃惊的发现是，不管年龄如何，吸烟组(62％，n＝16)中答复者的比例明显高于非吸烟组(40％，n＝43，p＝0.002)。对于安慰剂而言，吸烟组(46％，n＝13)和非吸烟组(44％n＝53，p＝0.89，卡方检验)中答复者的比例没有差别。
实施例3
以40例老年失眠症患者(年龄60.8(SD 0.8)岁)为研究对象，研究褪黑激素的可控制释放制剂对精神活动性能的影响(总反应时间TRT，平均反应时间MRT).安慰剂治疗受试者2周(基线)，用可控制释放的褪黑激素(2mg/晚)治疗3周.在治疗的最后两天中，对全部患者进行精神活动测试，来分析日间警醒度.与非吸烟组相比，接受褪黑激素治疗的吸烟患者其精神活动技能明显提高(TRT为-38.95msec，MRT为-36.07)(分别是-5.21，p＝0.05和0.62msec，p＝0.03).
实施例4
以16例老年志愿者(＞55岁；年龄59(SD 3.2)岁)为研究对象，研究褪黑激素(2mg可控制释放制剂)和安慰剂对记忆力的影响(Rivermead故事测试)。在随机双盲交叉研究中，晚上给予受试者一片安慰剂以建立基线，然后在1周内随机给予一片褪黑激素或安慰剂，治疗中间没有治疗。给予片剂后在第2小时和第12.5小时时，对患者进行Rivermead测试。令人吃惊的是，在服药后的起先几小时内，褪黑激素对受试者的记忆能力的改善明显大于各安慰剂的值。与基线或交叉安慰剂相比，给予可控制释放的褪黑激素2mg后，对于两种记忆(即时记忆和延迟记忆)的记忆效率都得到了提高，并且对吸烟或在研究前6个月内戒烟的患者的效果比非吸烟者好。
表2：故事中记忆事件的平均值
和吸入安慰剂或褪黑激素2小时后记忆性能与给予安慰剂的差别
定量服药后的时间 吸烟者 (n＝4) 非吸烟者 (n＝12) 作用 (t-试验) 记忆数量-褪黑激素 14.8 9.8 P＝0.056 记忆数量-安慰剂 12.2 12.1 P＝0.33 褪黑激素和安慰剂的记忆差别 3.5 -2.41 P＝0.043
下面说明本发明所用的非限制性药物制剂的实施例。
制剂实施例
(A)可控制释放的褪黑激素
口服的可控制释放制剂可通过以下方法得到：将粉末状原料(即2mg褪黑激素(Lipomed Co.，Switzerland)和丙烯酸树脂载体(Rohm Pharma))进行干法混合，然后在2.5吨压力下在7mm圆筒形冲压机中压制，使得产品中包含RSPO 35.3％、乳糖16.7％、磷酸氢钙41.4％、云母1.3％、硬脂酸镁4％、褪黑激素1.3％。可以将其压成片，包含譬如1mg或2mg的褪黑激素。
(B)仅包含烟碱的制剂
在本实施例中，制得一种可以容纳并输送足够烟碱的经皮贴片，烟碱效力长达24小时。这种贴片一般要每天更换一次，可以用于戒烟治疗或者全身烟碱输送需要的其他情形。晚上给予褪黑激素片剂以缓解烟碱治疗引起的失眠症。褪黑激素在晚上给予，优选以如上述制剂实施例(A)中描述的可控制释放的片剂形式给予，它可以容纳并输送足够的褪黑激素，譬如效力在晚间长达8小时。
为制备1克贴片粘性基质，将丙酮(0.21克)、异丙醇(0.23克)、乙醇(0.117克)置于搅拌槽中，搅拌下分次加入E100(0.422g)，直至全部溶解。然后加入癸二酸二丁酯(0.19g)，继续搅拌20分钟，然后搅拌下加入琥珀酸(0.038克)，搅拌持续10分钟。通过向粘性基质溶液中加入33wt％的液体烟碱，并搅拌30分钟，来制备含有烟碱的粘性溶液。在盘子上铺上一层级别为3M-1005的衬底材料(100cm2)，然后覆上基质混合物。用高度为1500mμ的刀片铸型混合物。盖上盘子，由于溶剂在室温下挥发，从而留下基质。从最终的基质上切下面积为10cm2的贴片。向粘性表面粘贴一种惰性释放的3M-1512衬垫，并在将此装置贴于皮肤之前除去该衬垫。每个贴片上的烟碱量为33mg，能提供药力达24小时。
(C)包含烟碱和褪黑激素的制剂
可以预见到，这个实施例的制剂将用于在夜间的8-12个小时内有效地输送足量的烟碱和褪黑激素(在更换后)，并且优选的是与在12-16小时的期间内用于白天输送的单独贴片一起使用，从而适于戒烟治疗或者全身烟碱输送需要的其他治疗情形，而不会引起失眠症。日贴通常在12-16小时后更换，并可以用如上所述的实施例(B)中描述的那样制备，除了烟碱溶液的浓度是21wt％，而不是33wt％。
为制备1g的夜间贴片粘性基质，将丙酮(0.21克)、异丙醇(0.23克)、乙醇(0.117克)置于搅拌器中，搅拌下分次加入E100(0.422g)，直至全部溶解。然后加入癸二酸二丁酯(0.19g)，继续搅拌20分钟，然后搅拌下加入琥珀酸(0.038克)，搅拌持续10分钟。通过使23wt％的褪黑激素悬浮在0.35g的丙酮/异丙醇/乙醇的混合液(9∶1∶5)中并加入12wt％的液体烟碱，将此悬浮液加到粘性基质溶液中，搅拌30分钟，来制备含有烟碱和褪黑激素的粘性溶液。在盘子上铺上一层级别为3M-1005(100cm2)的衬底材料，然后覆上基质混合物。用高度为2500mμ的刀片铸型混合物。盖上盘子，由于溶剂在室温下挥发，从而留下基质。从最终的基质上切下面积为10cm2的贴片。向粘性表面粘贴一种惰性释放的3M-1512衬垫，并在将此装置贴于皮肤之前除去该衬垫。每个贴片包括12mg的烟碱和23mg的褪黑激素，可以在夜间发挥药力8-12小时。
虽然上文非常详细地描述了本发明的具体实施方案，但是可以明白，本发明并不限于此。本领域所属技术人员可以很容易地做出各种变化和改进。这些没有详细说明的改进和变化都可以视为本发明的等同物。