抗菌肽巴布剂及其制备方法转让专利
申请号 : CN200510028036.1
文献号 : CN1899601B
文献日 : 2010-06-09
发明人 : 黄青山 , 李国栋
申请人 : 上海高科联合生物技术研发有限公司
摘要 :
本发明涉及皮肤用抗菌制剂，具体涉及一种抗菌肽巴布剂及其制备方法。本发明公开的抗菌肽巴布剂由抗菌肽、基质、无纺布和防粘膜组成，其中基质由水溶性高分子化合物明胶、阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮和甘油组成。本发明公开了抗菌肽巴布剂的制备方法，先将水溶性高分子化合物分两组分制成I相溶液和II相溶液，再将I、II相溶液混合均匀加入制备好的抗菌肽水溶液，涂布于无纺布上，晾干，盖上防粘膜即抗菌肽巴布剂。本发明公开的巴布剂杀菌效果明显，透气性好，皮肤粘着性适宜，撕下无基质残留。
权利要求 :
1.一种抗菌肽巴布剂，由抗菌肽、基质、无纺布和防粘膜组成，其中基质由水溶性高分子化合物明胶、阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮，甘油和水组成；所述及的基质的组分的重量百分比为明胶1-30％、阿拉伯胶1-30％、聚乙烯吡咯烷酮1-50％和甘油1-50％，抗菌肽的含量为0.1-100ppm，水余量。
2.根据权利要求1所述的抗菌肽巴布剂，其特征在于，所述及的防粘膜是聚乙烯膜或聚丙烯膜。
3.根据权利要求1所述的抗菌肽巴布剂，其特征在于，所述及的抗菌肽是天然发现的抗菌肽或人工设计合成的抗菌肽。
4.根据权利要求1所述的抗菌肽巴布剂，其特征在于，所述及的抗菌肽是protegrin，nisin，cecropin，temporin，11-37，magainin或magainin2中的一种或一种以上。
5.根据权利要求1所述的抗菌肽巴布剂，其特征在于，所述及的抗菌肽是序列表中SEQ.ID.NO：1～SEQ.ID.NO：12中的一条或一条以上。
6.权利要求1至5任一所述的抗菌肽巴布剂的制备方法包括如下步骤：(1)制备I相溶液：将阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮分散于甘油和水中，搅匀成糊状即得I相溶液；
(2)制备II相溶液：将明胶置水中充分溶胀后，在60℃水浴上加热溶解得II相溶液；
(3)制备抗菌肽水溶液：将抗菌肽加入到水中溶解，得抗菌肽水溶液；
(4)制备抗菌肽巴布剂：将I相溶液加入II相溶液中，搅拌混匀后，稍冷，加入抗菌肽水溶液，混匀，涂布于无纺布上，滴去水份，加盖防粘膜即得抗菌肽巴布剂。
说明书 :
技术领域
本发明涉及一种皮肤用抗菌制剂，具体涉及一种抗菌肽巴布剂及其制备方法。
背景技术
目前国内外市场上销售的治疗皮肤或粘膜小创伤、擦伤等的制剂，包括药物或消毒剂、卫生用品等产品，主要是含有杀菌成分的敷料，用途是具有止血、护创作用，用于创伤、擦伤等患处，有助于防止细菌和异物的侵入，加速伤口愈合。其中所含的抗菌成分都是化学成分，虽然具有一定的杀菌活性，但对皮肤有刺激性甚至会有毒性。另外黏附皮肤的胶带会产生过敏反应。目前市场需要一种既能有效的清洁抗菌又不会产生刺激和毒副作用的针对破损皮肤的外用抗菌制剂。
发明内容
本发明需要解决的技术问题是提供一种抗菌肽巴布剂，以克服现有技术的不足。
本发明需要解决的另一个技术问题是提供一种抗菌肽巴布剂的制备方法。
本发明的发明构思是这样的：
抗菌肽是生物体经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽，一般由20-60个氨基酸组成，分子量在2000-7000D左右。随着医学免疫学和分子生物学的迅速发展，抗菌肽的研究越来越成为生物技术与生物医药领域中的热门课题。至今为止，在许多动物(尤其是昆虫)、植物、微生物和人体上已发现了近1000种抗菌肽，这类短肽不仅对细菌、真菌有广谱的杀菌作用，而且对病毒、原虫及癌细胞也有攻击作用。临床试验也表明，在机体感染病菌或可能导致病菌感染的情况下，抗菌肽能快速杀灭已侵入的病菌，并且能阻止病菌的继续侵染。
利用抗菌肽的高效、广谱、无毒副作用、不易产生耐药性等特点，将其制成巴布剂的水溶性剂型。不但解决了消毒杀菌的问题，而且由于巴布剂有透气性好、皮肤粘着性适宜、撕下无基质残留、不会产生皮肤过敏反应、可以反复粘贴的优点，本发明可以应用于治疗小创伤、擦伤等感染的预防和治疗。
本发明的技术方案是这样的：
一种抗菌肽巴布剂，由抗菌肽、基质、无纺布和防粘膜组成，其中基质由水溶性高分子化合物明胶、阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮和甘油组成。所述及的基质的组分的重量百分比为明胶1-30％、阿拉伯胶1-30％、聚乙烯吡咯烷酮1-50％和甘油1-50％，水余量。防粘膜是聚乙烯膜或聚丙烯膜。抗菌肽的含量为0.1-100ppm。
其中抗菌肽是天然发现的抗菌肽或人工设计合成的抗菌肽。所述及的天然抗菌肽是protegrin，nisin，cecropin，temporin，11-37，magainin或magainin2中的一种或一种以上。人工合成的的抗菌肽是序列表中SEQ.ID.NO：1～SEQ.ID.NO：12中的一条或一条以上。其序列分别如下：
GKV-1：Lys Gly Ala Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Val Ala Arg Lys Ala LeuLys Arg Ala Gly Lys
GKV-2：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys Arg Ala Gly Arg
GKV-3：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys
GKV-4：Lys Gly Val Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Cys Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys
GKV-5：Lys Gly Ala Arg Arg Gly Ala Lys Arg Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala Leu Lys
GKV-6：Lys Gly Ala Arg Arg Leu Ala Lys Arg Ser Gly Lys Lys Val Ala Arg Lys Ala Gly Arg
GKV-7：Lys Phe Ala Arg Arg Leu Ala Lys Arg Leu Gly Lys Lys Val Ala Arg Lys Leu Gly Arg
GKV-8：Lys Phe Leu Arg Arg Leu Ile Lys Arg Leu Val Lys Lys Val Leu Arg Lys Leu Gly Arg
GKV-9：Lys Ala Ala Lys Lys Ala Ala Lys Arg Ala Ala Lys Lys Ala Thr Arg
GKV-10：Lys Ala Leu Lys Lys Ala Leu Lys Arg Ala Leu Lys Lys Ala Leu Arg
GKV-11：Lys Gly Leu Lys Lys Gly Leu Lys Arg Gly Leu Lys Lys Gly Leu Arg
GKV-12：Lys Ala Thr Lys Lys Ala Leu Lys Arg Ala Gly Lys Lys Ala Thr Arg
抗菌肽巴布剂的制备方法包括如下步骤：
(1)制备I相溶液：将阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮分散于甘油和适量水中，搅匀成糊状即得I相溶液；
(2)制备II相溶液：将明胶置适量水中充分溶胀后，在60℃水浴上加热溶解得II相溶液；
(3)制备抗菌肽水溶液：将抗菌肽加入到适量水中溶解，得抗菌肽水溶液；
(4)制备抗菌肽巴布剂：将I相溶液加入II相溶液中，搅拌混匀后，稍冷，加入抗菌肽水溶液，混匀，涂布于无纺布上，晾干，加盖防粘膜即得抗菌肽巴布剂。
本发明利用抗菌肽的高效、广谱、无毒副作用、不易产生耐药性等特点，将其制成巴布剂的水溶性剂型。不但解决了消毒杀菌的问题，而且由于巴布剂有透气性好、皮肤粘着性适宜、撕下无基质残留、不会产生皮肤过敏反应、可以反复粘贴的优点，本发明可以应用于治疗小创伤、擦伤等感染的预防和治疗。
本发明需要解决的另一个技术问题是提供一种抗菌肽巴布剂的制备方法。
本发明的发明构思是这样的：
抗菌肽是生物体经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽，一般由20-60个氨基酸组成，分子量在2000-7000D左右。随着医学免疫学和分子生物学的迅速发展，抗菌肽的研究越来越成为生物技术与生物医药领域中的热门课题。至今为止，在许多动物(尤其是昆虫)、植物、微生物和人体上已发现了近1000种抗菌肽，这类短肽不仅对细菌、真菌有广谱的杀菌作用，而且对病毒、原虫及癌细胞也有攻击作用。临床试验也表明，在机体感染病菌或可能导致病菌感染的情况下，抗菌肽能快速杀灭已侵入的病菌，并且能阻止病菌的继续侵染。
利用抗菌肽的高效、广谱、无毒副作用、不易产生耐药性等特点，将其制成巴布剂的水溶性剂型。不但解决了消毒杀菌的问题，而且由于巴布剂有透气性好、皮肤粘着性适宜、撕下无基质残留、不会产生皮肤过敏反应、可以反复粘贴的优点，本发明可以应用于治疗小创伤、擦伤等感染的预防和治疗。
本发明的技术方案是这样的：
一种抗菌肽巴布剂，由抗菌肽、基质、无纺布和防粘膜组成，其中基质由水溶性高分子化合物明胶、阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮和甘油组成。所述及的基质的组分的重量百分比为明胶1-30％、阿拉伯胶1-30％、聚乙烯吡咯烷酮1-50％和甘油1-50％，水余量。防粘膜是聚乙烯膜或聚丙烯膜。抗菌肽的含量为0.1-100ppm。
其中抗菌肽是天然发现的抗菌肽或人工设计合成的抗菌肽。所述及的天然抗菌肽是protegrin，nisin，cecropin，temporin，11-37，magainin或magainin2中的一种或一种以上。人工合成的的抗菌肽是序列表中SEQ.ID.NO：1～SEQ.ID.NO：12中的一条或一条以上。其序列分别如下：
GKV-1：Lys Gly Ala Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Val Ala Arg Lys Ala LeuLys Arg Ala Gly Lys
GKV-2：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys Arg Ala Gly Arg
GKV-3：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys
GKV-4：Lys Gly Val Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Cys Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys
GKV-5：Lys Gly Ala Arg Arg Gly Ala Lys Arg Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala Leu Lys
GKV-6：Lys Gly Ala Arg Arg Leu Ala Lys Arg Ser Gly Lys Lys Val Ala Arg Lys Ala Gly Arg
GKV-7：Lys Phe Ala Arg Arg Leu Ala Lys Arg Leu Gly Lys Lys Val Ala Arg Lys Leu Gly Arg
GKV-8：Lys Phe Leu Arg Arg Leu Ile Lys Arg Leu Val Lys Lys Val Leu Arg Lys Leu Gly Arg
GKV-9：Lys Ala Ala Lys Lys Ala Ala Lys Arg Ala Ala Lys Lys Ala Thr Arg
GKV-10：Lys Ala Leu Lys Lys Ala Leu Lys Arg Ala Leu Lys Lys Ala Leu Arg
GKV-11：Lys Gly Leu Lys Lys Gly Leu Lys Arg Gly Leu Lys Lys Gly Leu Arg
GKV-12：Lys Ala Thr Lys Lys Ala Leu Lys Arg Ala Gly Lys Lys Ala Thr Arg
抗菌肽巴布剂的制备方法包括如下步骤：
(1)制备I相溶液：将阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮分散于甘油和适量水中，搅匀成糊状即得I相溶液；
(2)制备II相溶液：将明胶置适量水中充分溶胀后，在60℃水浴上加热溶解得II相溶液；
(3)制备抗菌肽水溶液：将抗菌肽加入到适量水中溶解，得抗菌肽水溶液；
(4)制备抗菌肽巴布剂：将I相溶液加入II相溶液中，搅拌混匀后，稍冷，加入抗菌肽水溶液，混匀，涂布于无纺布上，晾干，加盖防粘膜即得抗菌肽巴布剂。
本发明利用抗菌肽的高效、广谱、无毒副作用、不易产生耐药性等特点，将其制成巴布剂的水溶性剂型。不但解决了消毒杀菌的问题，而且由于巴布剂有透气性好、皮肤粘着性适宜、撕下无基质残留、不会产生皮肤过敏反应、可以反复粘贴的优点，本发明可以应用于治疗小创伤、擦伤等感染的预防和治疗。
具体实施方式
实施例1抗菌肽巴布剂的制备
配方及其配比(共约30ml)：
I相溶液：阿拉伯胶5.5g(18.3％)、聚乙烯吡咯烷酮2.5g(8.3％)、甘油12g(40％)、水2mL；
II相溶液：明胶3g(10％)、水8mL
抗菌肽：300ug(10ppm)
GKV-1：Lys Gly Ala Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Val Ala Arg Lys Ala LeuLys Arg Ala Gly Lys
余量为水。
制备方法：
1.制备I相溶液：将阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮分散于甘油和水中，搅匀成糊状即得I相溶液；
2.制备II相溶液：将明胶置水中充分溶胀后，在60℃水浴上加热溶解得II相溶液；
3.制备抗菌肽水溶液：将抗菌肽加入到水中溶解，搅拌得抗菌肽水溶液；
4.制备抗菌肽巴布剂：将I相溶液加入II相溶液中，搅拌混匀后，稍冷，加入抗菌肽水溶液，搅匀，涂布于无纺布上，滴去水份，加盖防粘膜即得抗菌肽巴布剂。
实施例2抗菌肽巴布剂体外杀菌试验
1、试验样品的制备：
(1)抗菌肽巴布剂样品：按实施例1的方法制备，
I相溶液：阿拉伯胶5.5g、聚乙烯吡咯烷酮2.5g、甘油12g；
II相溶液：明胶2.5-3g、水8mL
抗菌肽：300ug(10ppm)余量为水。
GKV-2：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys AlaLeu Lys Arg Ala Gly Arg
(2)对照样品：
I相溶液：阿拉伯胶5.5g、聚乙烯吡咯烷酮2.5g、甘油12g；
II相溶液：明胶2.5-3g、余量为水。
2、试验菌株：金黄色葡萄球菌CMCC26003，枯草杆菌DB430，大肠杆菌ATCC8099，肺炎克雷伯氏菌CMCC46117，绿脓杆菌CMCC10104，白色念珠菌ATCC10231。(以上菌株来自于中国生物制品检定所)。
3、试验步骤：
(1)将培养好的试验菌株用1％蛋白胨PBS洗下新鲜斜面，并稀释到适宜浓度，在107～108cfu/ml。
(2)将实验样品和对照样品制成1×3cm大小，并放置在无菌平皿中。
(3)取20ul菌液滴加到巴布剂上，涂抹均匀同时开始计时。
(4)作用到预定时间后用无菌镊子将巴布剂投入含5ml中和剂的试管中，充分振荡混匀。
(5)对照投入中和剂试管，充分振荡后做适当稀释。
(6)取终液0.5ml进行倾注平板，37℃恒温倒置培养48小时。
(7)计算对照回收菌量及样品回收菌量，得出杀灭率。
4、试验结果
表1：抗菌肽巴布剂体外杀菌试验杀灭率结果
实施例3 动物体内急性毒性试验
1、样品：抗菌肽溶液，即将抗菌肽溶于水中，使抗菌肽注射剂量达到1mg/kg其中序列分别为：
GKV-2：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys Arg Ala Gly Arg
GKV-3：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys
2、试验动物：采用昆明小白鼠60只，雌雄各半，体重33.5±0.25g，由复旦大学实验动物部提供。
3、试验方法：每日一次连续7天经肌注小白鼠，观察动物在最大剂量下毒性反应。实验结果表明，动物经肌注7天后，无异常反应，活动正常。经7天观察，60只小白鼠全部存活。证明无毒性作用。
实施例4抗菌肽巴布剂对试验动物阴道黏膜刺激试验
1、样品制备：按实施例1的方法制备。
其中抗菌肽序列为：
GKV-2：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys Arg Ala Gly Arg
GKV-3：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys
2、试验动物：SD大鼠，雌性，普通级，18只，体重230克-250克，随机分三组，杀菌巴布剂组、赋形剂组和空白对照组，每组6只，由复旦大学实验动物部提供。
3、试验方法：参照消毒技术规范(第三版)1999.11中的3.8条。将杀菌巴布剂置动物阴道内，与阴道黏膜接触4小时。赋形剂组用棉条0.01克浸以灭菌生理盐水作同样的试验。空白对照组不做任何处理。于24小时处死动物，取出局部阴道组织，观察有无充血、水肿现象。参照消毒技术规范(第三版)1999.11中皮肤刺激反应强度的评分标准评分及皮肤刺激强度分级，进行对阴道黏膜刺激强度的评定。
4、试验结果：
表2：抗菌肽巴布剂对试验动物阴道黏膜刺激试验
抗菌肽巴布剂对大鼠阴道黏膜刺激反应最高总积分均值为0，属无刺激性。
序列表
<110>上海高科联合生物技术研发有限公司
<120>抗菌肽巴布剂及其制备方法
<130>
<160>12
<170>Patent In Version2.1
<210>1
<211>25
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<221>CHAIN
<400>1
<210>2
<211>25
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<221>CHAIN
<400>2
<210>3
<211>21
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<221>CHAIN
<400>3
<210>4
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<213>人工序列
<220>
<221>CHAIN
<400>4
<210>5
<211>20
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<213>人工序列
<220>
<221>CHAIN
<400>5
<210>6
<211>20
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<221>CHAIN
<400>6
<210>7
<211>20
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<400>7
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<211>20
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<213>人工序列
<220>
<221>CHAIN
<400>8
<210>9
<211>16
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<213>人工序列
<220>
<221>CHAIN
<400>9
<210>10
<211>16
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<213>人工序列
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<213>人工序列
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<213>人工序列
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<400>12
配方及其配比(共约30ml)：
I相溶液：阿拉伯胶5.5g(18.3％)、聚乙烯吡咯烷酮2.5g(8.3％)、甘油12g(40％)、水2mL；
II相溶液：明胶3g(10％)、水8mL
抗菌肽：300ug(10ppm)
GKV-1：Lys Gly Ala Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Val Ala Arg Lys Ala LeuLys Arg Ala Gly Lys
余量为水。
制备方法：
1.制备I相溶液：将阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮分散于甘油和水中，搅匀成糊状即得I相溶液；
2.制备II相溶液：将明胶置水中充分溶胀后，在60℃水浴上加热溶解得II相溶液；
3.制备抗菌肽水溶液：将抗菌肽加入到水中溶解，搅拌得抗菌肽水溶液；
4.制备抗菌肽巴布剂：将I相溶液加入II相溶液中，搅拌混匀后，稍冷，加入抗菌肽水溶液，搅匀，涂布于无纺布上，滴去水份，加盖防粘膜即得抗菌肽巴布剂。
实施例2抗菌肽巴布剂体外杀菌试验
1、试验样品的制备：
(1)抗菌肽巴布剂样品：按实施例1的方法制备，
I相溶液：阿拉伯胶5.5g、聚乙烯吡咯烷酮2.5g、甘油12g；
II相溶液：明胶2.5-3g、水8mL
抗菌肽：300ug(10ppm)余量为水。
GKV-2：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys AlaLeu Lys Arg Ala Gly Arg
(2)对照样品：
I相溶液：阿拉伯胶5.5g、聚乙烯吡咯烷酮2.5g、甘油12g；
II相溶液：明胶2.5-3g、余量为水。
2、试验菌株：金黄色葡萄球菌CMCC26003，枯草杆菌DB430，大肠杆菌ATCC8099，肺炎克雷伯氏菌CMCC46117，绿脓杆菌CMCC10104，白色念珠菌ATCC10231。(以上菌株来自于中国生物制品检定所)。
3、试验步骤：
(1)将培养好的试验菌株用1％蛋白胨PBS洗下新鲜斜面，并稀释到适宜浓度，在107～108cfu/ml。
(2)将实验样品和对照样品制成1×3cm大小，并放置在无菌平皿中。
(3)取20ul菌液滴加到巴布剂上，涂抹均匀同时开始计时。
(4)作用到预定时间后用无菌镊子将巴布剂投入含5ml中和剂的试管中，充分振荡混匀。
(5)对照投入中和剂试管，充分振荡后做适当稀释。
(6)取终液0.5ml进行倾注平板，37℃恒温倒置培养48小时。
(7)计算对照回收菌量及样品回收菌量，得出杀灭率。
4、试验结果
表1：抗菌肽巴布剂体外杀菌试验杀灭率结果
实施例3 动物体内急性毒性试验
1、样品：抗菌肽溶液，即将抗菌肽溶于水中，使抗菌肽注射剂量达到1mg/kg其中序列分别为：
GKV-2：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys Arg Ala Gly Arg
GKV-3：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys
2、试验动物：采用昆明小白鼠60只，雌雄各半，体重33.5±0.25g，由复旦大学实验动物部提供。
3、试验方法：每日一次连续7天经肌注小白鼠，观察动物在最大剂量下毒性反应。实验结果表明，动物经肌注7天后，无异常反应，活动正常。经7天观察，60只小白鼠全部存活。证明无毒性作用。
实施例4抗菌肽巴布剂对试验动物阴道黏膜刺激试验
1、样品制备：按实施例1的方法制备。
其中抗菌肽序列为：
GKV-2：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys Arg Ala Gly Arg
GKV-3：Lys Gly Gly Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Gly Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala LeuLys
2、试验动物：SD大鼠，雌性，普通级，18只，体重230克-250克，随机分三组，杀菌巴布剂组、赋形剂组和空白对照组，每组6只，由复旦大学实验动物部提供。
3、试验方法：参照消毒技术规范(第三版)1999.11中的3.8条。将杀菌巴布剂置动物阴道内，与阴道黏膜接触4小时。赋形剂组用棉条0.01克浸以灭菌生理盐水作同样的试验。空白对照组不做任何处理。于24小时处死动物，取出局部阴道组织，观察有无充血、水肿现象。参照消毒技术规范(第三版)1999.11中皮肤刺激反应强度的评分标准评分及皮肤刺激强度分级，进行对阴道黏膜刺激强度的评定。
4、试验结果：
表2：抗菌肽巴布剂对试验动物阴道黏膜刺激试验
抗菌肽巴布剂对大鼠阴道黏膜刺激反应最高总积分均值为0，属无刺激性。
序列表
<110>上海高科联合生物技术研发有限公司
<120>抗菌肽巴布剂及其制备方法
<130>
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<170>Patent In Version2.1
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