苦参素用于制备手术后肠功能恢复药物的用途转让专利
申请号 : CN200510044489.3
文献号 : CN1923198B
文献日 : 2010-07-28
发明人 : 刘志峰 , 曲新国 , 吴海霞 , 李春梅
申请人 : 山东绿叶天然药物研究开发有限公司
摘要 :
本发明提供了苦参素在制备促进术后肠功能恢复的药物中的应用，本发明还提供了苦参素在制备预防术后肠粘连的药物中的应用。本发明提供的苦参素在用于治疗术后肠功能恢复及预防肠粘连时的给药剂量范围是10～800mg/人/次。
权利要求 :
1.苦参素在制备预防术后肠粘连的药物中的用途。
说明书 :
发明领域
本发明涉及苦参素的一种新的医药用途，具体涉及苦参素用于制备手术后肠功能恢复药物的用途。
背景技术
肠功能紊乱是腹部手术或其他需要腰麻或硬膜外麻醉的手术常见的术后并发症，主要表现为肠蠕动消失，术后排气、排便功能障碍，直接影响病人的愈后，因此，缩短术后第一次排气时间，尽早恢复正常的进食功能，是病人康复过程中非常重要而且急需解决的问题，也是促进机体功能恢复的一个重要环节。
苦参素是氧化苦参碱和极少量氧化槐果碱的混合物，广泛存在于豆科植物苦参、苦豆子及广豆根中，其中氧化苦参碱含量大于98％，是苦参素中的主要成分，临床上主要用于抗肝炎病毒、抗肝纤维化、免疫调节及抗炎、抗变态反应等作用【王新峰，李磊，韩国柱，苦参素药理作用的研究进展，医药导报，2005年6月第24卷第6期】。但关于苦参素促进手术后肠功能恢复及预防肠粘连的用途还未见报道，鉴于此，本发明人经过大量的实验研究，提供了苦参素在制备促进术后肠功能恢复及预防术后肠粘连的药物中的应用。
技术内容
本发明提供了苦参素在制备促进术后肠功能恢复的药物中的应用。
本发明提供了苦参素在制备预防术后肠粘连的药物中的应用。
本发明提供了由苦参素和药学上可接受的的载体或辅料组成的用于治疗术后肠功能恢复及预防肠粘连的药物组合物。
本发明提供的苦参素在用于治疗术后肠功能恢复及预防肠粘连时，其给药方式可以为注射、口服或经皮肤粘膜给药。
本发明提供的苦参素在用于治疗术后肠功能恢复及预防肠粘连时，其给药剂量范围是10～800mg/人/次，一天1～4次给药。
本发明人经过药理研究发现，苦参素具有促进肠道动力的作用，其能够明显促进肠道的蠕动，拮抗由于吗啡等药物所致的肠活动低下，缩短肠排空的时间，可用于改善手术后肠功能活动低下，有利于肠功能的恢复，对降低肠粘连的发生具有重要的意义。
本发明通过以下实验来证实苦参素具有治疗术后肠功能恢复及预防肠粘连的作用，但并不意味着本发明仅限与此。
苦参素是氧化苦参碱和极少量氧化槐果碱的混合物，广泛存在于豆科植物苦参、苦豆子及广豆根中，其中氧化苦参碱含量大于98％，是苦参素中的主要成分，临床上主要用于抗肝炎病毒、抗肝纤维化、免疫调节及抗炎、抗变态反应等作用【王新峰，李磊，韩国柱，苦参素药理作用的研究进展，医药导报，2005年6月第24卷第6期】。但关于苦参素促进手术后肠功能恢复及预防肠粘连的用途还未见报道，鉴于此，本发明人经过大量的实验研究，提供了苦参素在制备促进术后肠功能恢复及预防术后肠粘连的药物中的应用。
技术内容
本发明提供了苦参素在制备促进术后肠功能恢复的药物中的应用。
本发明提供了苦参素在制备预防术后肠粘连的药物中的应用。
本发明提供了由苦参素和药学上可接受的的载体或辅料组成的用于治疗术后肠功能恢复及预防肠粘连的药物组合物。
本发明提供的苦参素在用于治疗术后肠功能恢复及预防肠粘连时，其给药方式可以为注射、口服或经皮肤粘膜给药。
本发明提供的苦参素在用于治疗术后肠功能恢复及预防肠粘连时，其给药剂量范围是10～800mg/人/次，一天1～4次给药。
本发明人经过药理研究发现，苦参素具有促进肠道动力的作用，其能够明显促进肠道的蠕动，拮抗由于吗啡等药物所致的肠活动低下，缩短肠排空的时间，可用于改善手术后肠功能活动低下，有利于肠功能的恢复，对降低肠粘连的发生具有重要的意义。
本发明通过以下实验来证实苦参素具有治疗术后肠功能恢复及预防肠粘连的作用，但并不意味着本发明仅限与此。
具体实施方式
实验例1苦参素口服对正常小鼠小肠推进的影响
1.1实验材料
苦参素：购自宁夏绿谷制药有限公司，临用时用纯净水稀释；
新斯的明：山东天福制药厂，批号：0404131；
昆明系健康小鼠，清洁级，雌雄各半，体重18-22g，由山东绿叶制药股份有限公司动物实验中心提供，合格证号：SYXK(鲁)20030020。
1.2实验方法
取小鼠50只，随机分为5组，分别为苦参素25mg/kg组、苦参素75mg/kg组、苦参素225mg/kg组、新斯的明组和空白对照组(生理盐水)。苦参素各组分别灌胃给药，新斯的明组4mg/kg，皮下注射，空白对照组灌胃给予生理盐水，连续给药7天，末次给药前禁食不禁水16h，给药30min后灌胃给予炭末混悬液0.2ml/只，20min后脱臼处死小鼠，打开腹腔分离肠系膜，剪取幽门至回盲部的肠管，置于托盘上。轻轻将小肠拉成直线，测量幽门至盲肠距离作为小肠总长度，从幽门至炭末前沿的距离作为炭末在肠内推进距离，按下列公式计算炭末推进率：炭末推进率(％)＝炭末在肠内推进距离(cm)/小肠总长度(cm)×100％，各组活性炭推进率采用组间t检验，进行统计学处理。
1.3实验结果
与对照组比较，苦参素各剂量组对正常小鼠小肠炭末推进率均有明显推进作用，统计差异显著，说明苦参素可明显促进正常小鼠小肠蠕动，具体见表1。
表1 苦参素口服对正常小鼠小肠炭末的推进影响(X±SD)
*与对照组比较P<0.05，**与对照组比较P<0.01。
实施例2苦参素静脉注射对阿托品所致小鼠小肠推进抑制的影响
2.1实验材料
苦参素：购自宁夏绿谷制药有限公司，临用时用生理盐水配制，2.2μ微空滤膜过滤；
阿托品：山东天福制药厂，批号：0409271；
昆明系健康小鼠，清洁级，雌雄各半，体重18-22g，由山东绿叶制药股份有限公司动物实验中心提供，合格证号：SYXK(鲁)20030020。
2.2实验方法
将小鼠随机分为7组，每组10只。即正常对照组(生理盐水)、阿托品组、苦参素10mg/kg组、苦参素50mg/kg组和苦参素200mg/kg组。苦参素各剂量组分别静脉注射给药，正常对照组静脉注射生理盐水，连续5天，末次给药前禁食不禁水16h，于给药20min后，给药组和阿托品组肌肉注射阿托品0.3mg/kg，正常对照组肌肉注射生理盐水，15min后灌胃给予炭末混悬液0.2ml/只，20min后脱臼处死小鼠，计算炭末推进率，方法同实施例1。
2.3实验结果
与正常对照组比较，肌肉注射阿托品(0.3mg/kg)可使小鼠小肠推进明显抑制，炭末推进率由正常的56.99％抑制降低到42.59％，苦参素各剂量组均能明显拮抗这种小肠推进抑制。
表2苦参素对阿托品所致小鼠小肠推进抑制的影响(X±SD)
*与阿托品模型组比较P<0.05；**与阿托品模型组比较P<0.01；ΔΔ与对照组比较P<0.01
实施例3.苦参素栓剂直肠给药对肠手术大鼠排便时间的观察
4.1实验材料
苦参素栓剂：实验室自制。苦参素购自宁夏绿谷制药有限公司，按照以下配方分别制作2mg/粒、4mg/粒2种规格的苦参素栓剂。
将PEG1000和PEG4000混合均匀，加热为熔融状态，缓慢加入硬脂醇，搅拌至均匀。保温，最后加入主要成分苦参素，搅匀灌模。粒重约100mg/粒。
硫酸钡干混悬剂：青岛东风化工有限公司生产，临用时用纯净水配制，钡剂浓度为170％(每1ml水中加硫酸钡干混悬剂2.77克)。
大鼠由山东绿叶制药股份有限公司动物实验中心提供，合格证号：SYXK(鲁)20030020。
4.2实验方法
将大鼠随机分为4组，每组10只，分别为假手术组、空白对照组、苦参素低剂量组(2mg/粒)、苦参素高剂量组(4mg/粒)。大鼠禁食不禁水48小时，称重后每只大鼠灌胃2ml硫酸钡干混悬剂。大鼠用2％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(2.5ml/Kg)，假手术组麻醉后不进行手术操作。空白对照组麻醉后开腹，找到大鼠盲肠下2cm处结肠，于系膜侧给予横断，切开长度约占肠管周长的1/2～1/3，然后做切开肠壁吻合修补(一层缝合法)，仔细止血后连续缝合法缝合腹膜及肌层，再间断缝合法缝合大鼠皮肤，术后将不含苦参素的空白敷料栓由钝头塑料棒轻柔推至直肠内2cm。苦参素栓剂各剂量组麻醉后，进行上述手术操作，术后将苦参素栓由钝头塑料棒轻柔推至直肠内2cm以上。术后大鼠均单笼饲养，大鼠清醒后恢复正常饮食。观察大鼠术后首次排白色钡剂便时间及白色钡剂便排尽时间；收集其36小时内大鼠粪便，比较其湿量。采用组间比较t检验，所有数据用均数±标准差(X±SD)表示，P<0.05作为统计学显著差异。
4.3实验结果
肠道手术后，大鼠的肠道活动明显减弱，首次排白色钡剂便时间及白色钡剂便排尽时间均较假手术组延长，苦参素各剂量组均明显缩短大鼠首次排白色钡剂便时间及白色钡剂便排尽时间，表明苦参素栓直肠给药可以明显促进大鼠手术麻醉后的肠道蠕动，具体见表4。
表4.苦参素栓剂直肠给药对手术后大鼠排便时间的影响(X±SD)
#与假手术组比较P<0.01；*与空白对照组比较P<0.01。
实施例5.苦参素对大鼠肠粘连的影响
6.1实验材料
苦参素：购自宁夏绿谷制药有限公司，临用时用生理盐水配制，2.2μm微空滤膜过滤；
地塞米松磷酸钠注射液(规格：5mg/支，天津药业涟水有限公司，批号：0105305)
SD大鼠，雌雄各半，体重180-220g，山东省天然药物工程技术研究中心实验动物中心提供，动物合格证：鲁动质字200106005号
6.2实验方法与结果
大鼠40只，禁食16h，以10％水合氯醛腹腔内麻醉。麻醉体积：0.35ml/100g，麻醉后将大鼠仰卧固定于手术板上，腹部脱毛，消毒皮肤，铺无菌巾，取下腹部正中长约2cm切口，提出盲肠，置于干纱布上约5分钟，使浆膜干燥，以解剖刀片轻刮整个盲肠浆膜10遍，造成轻度渗血，以止血钳用同样力度夹小肠两下，再滴入无水酒精于创面上。分两层以1号丝线关腹，随机分为NS组，地塞米松组，苦参素10mg/kg组、50mg/kg组、200mg/kg组，随后立即给药，分笼饲养。每天给药一次，给药体积0.4ml/100g，模型组给予同体积的NS，阳性对照组给予地塞米松，隔天给药，剂量：10mg/kg，给药体积同给药组。术后第7d处死，腹部取“n”形切口开腹，分别进行粘连程度分级评分。观察指标粘连程度分级判断标准参考Nair制定的5级分类法，确定分级标准，见表6，试验结果进行组间秩和检验。
结果表明苦参素各剂量静脉注射给药，明显抑制大鼠肠粘连(与NS组比较，P<0.05)。
表5 肠粘连程度分级评定标准
分值等级粘连状况0完全无粘连1内脏间或内脏与腹壁间1条粘连带2内脏间或内脏与腹壁间2条粘连带3多于2条粘连带而内脏未直接粘连至腹壁4内脏直接粘连到腹壁，不管粘连带多少
表6 苦参素对大鼠肠粘连的影响
Δ:P<0.05；ΔΔ:P<0.01，与NS组比较
1.1实验材料
苦参素：购自宁夏绿谷制药有限公司，临用时用纯净水稀释；
新斯的明：山东天福制药厂，批号：0404131；
昆明系健康小鼠，清洁级，雌雄各半，体重18-22g，由山东绿叶制药股份有限公司动物实验中心提供，合格证号：SYXK(鲁)20030020。
1.2实验方法
取小鼠50只，随机分为5组，分别为苦参素25mg/kg组、苦参素75mg/kg组、苦参素225mg/kg组、新斯的明组和空白对照组(生理盐水)。苦参素各组分别灌胃给药，新斯的明组4mg/kg，皮下注射，空白对照组灌胃给予生理盐水，连续给药7天，末次给药前禁食不禁水16h，给药30min后灌胃给予炭末混悬液0.2ml/只，20min后脱臼处死小鼠，打开腹腔分离肠系膜，剪取幽门至回盲部的肠管，置于托盘上。轻轻将小肠拉成直线，测量幽门至盲肠距离作为小肠总长度，从幽门至炭末前沿的距离作为炭末在肠内推进距离，按下列公式计算炭末推进率：炭末推进率(％)＝炭末在肠内推进距离(cm)/小肠总长度(cm)×100％，各组活性炭推进率采用组间t检验，进行统计学处理。
1.3实验结果
与对照组比较，苦参素各剂量组对正常小鼠小肠炭末推进率均有明显推进作用，统计差异显著，说明苦参素可明显促进正常小鼠小肠蠕动，具体见表1。
表1 苦参素口服对正常小鼠小肠炭末的推进影响(X±SD)
*与对照组比较P<0.05，**与对照组比较P<0.01。
实施例2苦参素静脉注射对阿托品所致小鼠小肠推进抑制的影响
2.1实验材料
苦参素：购自宁夏绿谷制药有限公司，临用时用生理盐水配制，2.2μ微空滤膜过滤；
阿托品：山东天福制药厂，批号：0409271；
昆明系健康小鼠，清洁级，雌雄各半，体重18-22g，由山东绿叶制药股份有限公司动物实验中心提供，合格证号：SYXK(鲁)20030020。
2.2实验方法
将小鼠随机分为7组，每组10只。即正常对照组(生理盐水)、阿托品组、苦参素10mg/kg组、苦参素50mg/kg组和苦参素200mg/kg组。苦参素各剂量组分别静脉注射给药，正常对照组静脉注射生理盐水，连续5天，末次给药前禁食不禁水16h，于给药20min后，给药组和阿托品组肌肉注射阿托品0.3mg/kg，正常对照组肌肉注射生理盐水，15min后灌胃给予炭末混悬液0.2ml/只，20min后脱臼处死小鼠，计算炭末推进率，方法同实施例1。
2.3实验结果
与正常对照组比较，肌肉注射阿托品(0.3mg/kg)可使小鼠小肠推进明显抑制，炭末推进率由正常的56.99％抑制降低到42.59％，苦参素各剂量组均能明显拮抗这种小肠推进抑制。
表2苦参素对阿托品所致小鼠小肠推进抑制的影响(X±SD)
*与阿托品模型组比较P<0.05；**与阿托品模型组比较P<0.01；ΔΔ与对照组比较P<0.01
实施例3.苦参素栓剂直肠给药对肠手术大鼠排便时间的观察
4.1实验材料
苦参素栓剂：实验室自制。苦参素购自宁夏绿谷制药有限公司，按照以下配方分别制作2mg/粒、4mg/粒2种规格的苦参素栓剂。
将PEG1000和PEG4000混合均匀，加热为熔融状态，缓慢加入硬脂醇，搅拌至均匀。保温，最后加入主要成分苦参素，搅匀灌模。粒重约100mg/粒。
硫酸钡干混悬剂：青岛东风化工有限公司生产，临用时用纯净水配制，钡剂浓度为170％(每1ml水中加硫酸钡干混悬剂2.77克)。
大鼠由山东绿叶制药股份有限公司动物实验中心提供，合格证号：SYXK(鲁)20030020。
4.2实验方法
将大鼠随机分为4组，每组10只，分别为假手术组、空白对照组、苦参素低剂量组(2mg/粒)、苦参素高剂量组(4mg/粒)。大鼠禁食不禁水48小时，称重后每只大鼠灌胃2ml硫酸钡干混悬剂。大鼠用2％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(2.5ml/Kg)，假手术组麻醉后不进行手术操作。空白对照组麻醉后开腹，找到大鼠盲肠下2cm处结肠，于系膜侧给予横断，切开长度约占肠管周长的1/2～1/3，然后做切开肠壁吻合修补(一层缝合法)，仔细止血后连续缝合法缝合腹膜及肌层，再间断缝合法缝合大鼠皮肤，术后将不含苦参素的空白敷料栓由钝头塑料棒轻柔推至直肠内2cm。苦参素栓剂各剂量组麻醉后，进行上述手术操作，术后将苦参素栓由钝头塑料棒轻柔推至直肠内2cm以上。术后大鼠均单笼饲养，大鼠清醒后恢复正常饮食。观察大鼠术后首次排白色钡剂便时间及白色钡剂便排尽时间；收集其36小时内大鼠粪便，比较其湿量。采用组间比较t检验，所有数据用均数±标准差(X±SD)表示，P<0.05作为统计学显著差异。
4.3实验结果
肠道手术后，大鼠的肠道活动明显减弱，首次排白色钡剂便时间及白色钡剂便排尽时间均较假手术组延长，苦参素各剂量组均明显缩短大鼠首次排白色钡剂便时间及白色钡剂便排尽时间，表明苦参素栓直肠给药可以明显促进大鼠手术麻醉后的肠道蠕动，具体见表4。
表4.苦参素栓剂直肠给药对手术后大鼠排便时间的影响(X±SD)
#与假手术组比较P<0.01；*与空白对照组比较P<0.01。
实施例5.苦参素对大鼠肠粘连的影响
6.1实验材料
苦参素：购自宁夏绿谷制药有限公司，临用时用生理盐水配制，2.2μm微空滤膜过滤；
地塞米松磷酸钠注射液(规格：5mg/支，天津药业涟水有限公司，批号：0105305)
SD大鼠，雌雄各半，体重180-220g，山东省天然药物工程技术研究中心实验动物中心提供，动物合格证：鲁动质字200106005号
6.2实验方法与结果
大鼠40只，禁食16h，以10％水合氯醛腹腔内麻醉。麻醉体积：0.35ml/100g，麻醉后将大鼠仰卧固定于手术板上，腹部脱毛，消毒皮肤，铺无菌巾，取下腹部正中长约2cm切口，提出盲肠，置于干纱布上约5分钟，使浆膜干燥，以解剖刀片轻刮整个盲肠浆膜10遍，造成轻度渗血，以止血钳用同样力度夹小肠两下，再滴入无水酒精于创面上。分两层以1号丝线关腹，随机分为NS组，地塞米松组，苦参素10mg/kg组、50mg/kg组、200mg/kg组，随后立即给药，分笼饲养。每天给药一次，给药体积0.4ml/100g，模型组给予同体积的NS，阳性对照组给予地塞米松，隔天给药，剂量：10mg/kg，给药体积同给药组。术后第7d处死，腹部取“n”形切口开腹，分别进行粘连程度分级评分。观察指标粘连程度分级判断标准参考Nair制定的5级分类法，确定分级标准，见表6，试验结果进行组间秩和检验。
结果表明苦参素各剂量静脉注射给药，明显抑制大鼠肠粘连(与NS组比较，P<0.05)。
表5 肠粘连程度分级评定标准
分值等级粘连状况0完全无粘连1内脏间或内脏与腹壁间1条粘连带2内脏间或内脏与腹壁间2条粘连带3多于2条粘连带而内脏未直接粘连至腹壁4内脏直接粘连到腹壁，不管粘连带多少
表6 苦参素对大鼠肠粘连的影响
Δ:P<0.05；ΔΔ:P<0.01，与NS组比较