将脱碳乙氧基氯雷他定或其可药用盐用于制备治疗荨麻疹的药物的用途

摘要

本发明公开的是将有效治疗量的脱碳乙氧基氯雷他定或其可药用盐用于制备治疗荨麻疹、同时可减少发生与施用非镇静性抗组胺药物相关的不良副作用的药物的用途。

权利要求

1.一种将有效治疗量的脱碳乙氧基氯雷他定或其可药用盐用于制备治疗荨麻疹、同时可减少发生与施用非镇静性抗组胺药物相关的不良副作用的药物的用途，其中，所述不良副作用是指心律失常或肿瘤促进作用。

2.权利要求1的用途，其中，所述药物适于以每天0.1mg到10mg的量施用脱碳乙氧基氯雷他定。

3.权利要求2的用途，其中，所述药物适于以每天0.1mg到5mg的量施用脱碳乙氧基氯雷他定。

4.权利要求1的用途，其中，所述量的脱碳乙氧基氯雷他定或其可药用盐是可与可药用载体一起施用的。

说明书

将脱碳乙氧基氯雷他定或其可药用盐用于制备治疗荨麻疹

的药物的用途

[0001] 本申请是1995年12月11日提交的题为“用脱碳乙氧基氯雷他定治疗过敏性鼻炎及其它疾病的方法和组合物”的PCT/US95/15995号发明专利申请的分案申请，原申请进入中国国家阶段获得的国家申请号为95197713.X。

[0002] 技术领域

[0003] 本发明的方法包括施用有效治疗量的氯雷他定(loratadine)代谢衍生物。化学上地，这种衍生物是8-氯-6，11-二氢-11-(4-亚哌啶基)-5H-苯并[5，6]芳庚并[1，2-b]吡啶，被称为脱碳乙氧基氯雷他定(descarboethoxyloratadine，DCL)。Quercia等在Hosp.Formul.28：137-53(1993)和美国专利4,659,716号中对此化合物进行过具体描述。 [0004] 氯雷他定是组胺H-1受体蛋白的拮抗剂。组胺的H-1受体和H-2受体是两种已被充分鉴定的形式。H-1受体介导对传统抗组胺药物的拮抗反应。H-1受体存在于例如人和其它哺乳动物的回肠、皮肤和支气管平滑肌中。

[0005] 氯雷他定优先与外周的H-1受体而非中枢的H-1受体结合。Quercia等，Hosp.Formul.28：137-53(1993)。在豚鼠中，氯雷他定与特非那定(terfenadine)相比，是对5-羟色胺诱导支气管痉挛的较有力的抑制剂。同上137-38。它在动物模型中的抗过敏作用可与特非那定和阿司咪唑(astemizole)相比。同上，138。然而，用标准的动物模型试验，在毫克对毫克的基础上，氯雷他定对过敏性支气管痉挛的抑制作用比特非那定强四倍。同上。而且，通过评价药物抑制风团形成的能力证明了氯雷他定在人类中的抗组胺作用。同上。临床效力试验表明氯雷他定是有效的H-1拮抗剂。Clissold等，药物37：42-57(1989)。 [0006] 通过H-2受体介导的反应，组胺在哺乳动物中刺激胃酸分泌，在离体哺乳动物心房中促进变时性效应。氯雷他定对组胺诱导的胃酸分泌无效，并且也不改变组胺对心房的变时性效应。所以，氯雷他定对H-2受体没有明显作用。

[0007] 除被彻底代谢外，氯雷他定能被很好地吸收。Hilbert等，临床药理学杂志27：694-98(1987)。其主要的代谢产物已确定为DCL，据报导有药理学活性。Clissold，药物37：
42-57(1989)。在美国专利4,659,716号中也报导其具有抗组胺活性。该专利推荐的口服剂量范围为5-100mg/天，优选10-20mg/天。

[0008] 氯雷他定治疗季节性过敏性鼻炎的效力可与特非那定相比。Quercia等，Hosp.Formul.28：137，141(1993)。氯雷他定开始起效比阿司咪唑要快得多。同上。 [0009] Clissold等在药物37：42，50-54(1989)中论述，研究表明氯雷他定在季节性和全年性鼻炎、感冒(用假麻黄碱)和慢性荨麻疹中有效。也有建议说氯雷他定会对过敏性气喘的治疗有效。Temple等，前列腺素 35：549-554(1988)。

[0010] 氯雷他定也许对晕动病和眩晕的治疗有效。已发现一此抗组胺药对晕动病的预防和治疗有效。Wood，药物17：471-79(1979)。已证明一些抗组胺药对前庭疾病如美尼尔氏病和其它类型的眩晕有效。Cohen等， 神经学丛刊27：129-35(1972)。

[0011] 此外，氯雷他定能用于治疗糖尿病型视网膜病和其它与糖尿病有关的微血管(small vessel)疾病。用链佐星(streptozocin)诱导的糖尿病大鼠进行的试验中，用抗组胺药物治疗可阻止视网膜组胺受体的激活，而该受体与糖尿病的发展相关。美国专利5,019,591号中阐明了用抗组胺药治疗视网膜病和与糖尿病有关的微血管疾病。 [0012] 也有人提出氯雷他定与非甾类抗炎剂或非麻醉性止痛药合用，会有利于咳嗽、感冒、类感冒和/或流感症状以及与它们相关的不舒适、疼痛、头痛、发烧和周身不适的治疗。
治疗上述症状的方法中所应用的组合物可选地包括一种或多种其它的活性组分，包括减充血剂(如假麻黄碱)、咳嗽抑制剂/镇咳剂(如右旋甲氧甲基吗啡喃)或祛痰剂(如愈甘醚)。

[0013] 许多抗组胺药物有不良副作用。这些不良副作用包括镇静作用，胃肠不适，口干，便秘或腹泻等，但并不仅限于此。与其它抗组胺药相比，发现氯雷他定所引起的镇静作用相对较弱。而引起的疲劳、头痛和恶心等与应用特非那定时所观察到的相似。Quercia等，Hosp.Formul.28：137，142(1993)。

[0014] 此外，已知非镇静类的组胺药(包括氯雷他定、阿司咪唑和特非那定)可对电生理带来严重不良副作用。这些不良副作用与QT间隔延长相关，包括但并不限于室颤和心律失常，如室性心动过速或torsades depointes。Knowles，加拿大医用药理学杂志，45：33，37(1992)；Craft，英国医学杂志，292：660(1986)；Simons等，柳叶刀，2：624(1988)； Unknown，药物的副作用年刊12：142和14：135。

[0015] Quercia等在Hosp.Formul.28：137，142(1993)中指出，具报导在接受特非那定同时使用凯托康唑(ketoconazole)或红霉素的“健康”患者中出现严重的心血管方面的不良副作用，包括torsades de pointes和其它心室的心律失常。Quercia等又指出，也有与阿司咪唑和红霉素或与红霉素加凯托康唑同时应用引起心律失常的报导。因此他警告氯雷他定不要与凯托康唑、伊曲康唑(itraconazole)、大环内酯类如红霉素同时应用。 [0016] 此外，已知凯托康唑和/或红霉素干扰细胞色素P450，由此可抑制非镇静性抗组胺药如特非那定和阿司咪唑的代谢。因为干扰氯雷他定的代谢，所以与氯雷他定或其它已知的抑制细胞色素P450的非镇静性抗组胺药物如凯托康唑，伊曲康唑和红霉素(但并不仅限于这些)之间很可能存在不良的相互作用。

[0017] Brandes等在癌症研究(52)3796-3800(1992)中指出药物在体内促进肿瘤生长的趋势与抑制Con A刺激淋巴细胞进行有丝分裂相关，Brandes等，国家癌症研究所杂志86：(10)771-775(1994)，通过体外方法对氯雷他定进行的评定预测它在体内能促进肿瘤生长。
他发现氯雷他定和阿司咪唑与黑色素瘤和纤维肉瘤的生长均有关系。该研究中氯雷他定的剂量是10mg/天。

[0018] 上面的参考文献中没有讲授本发明的方法，包括给人施用DCL，而又避免了与施用非镇静性抗组胺药相关的不良副作用，也没有使这些方法成为可能；参考文献单独或联合起来也没建议这些方法。所以，特别希望找到一种治疗方法，它具有已知非镇静性抗组胺药物的优点而不具有前面提到的缺点。

发明内容

[0019] 现在已经发现DCL是一种有效的非镇静性抗组胺药物，它能用于治疗人类的过敏性鼻炎，同时又避免了通常与应用氯雷他定、阿司咪唑、特非那定等其它属于非镇静性抗组胺类药物相关的不良副作用。这些不良副作用包括：心律失常、心脏传导障碍、疲劳、头痛、胃肠不适、食欲刺激、体重增加、口干和便秘或腹泻，但并不仅限于这些。 [0020] 并且DCL可用于治疗过敏性鼻炎而避免了与氯雷他定和其它非镇静性抗组胺药物相关的肿瘤促进作用。因此，本发明也涉及到治疗人类 过敏性鼻炎的新方法，而患者的患癌倾向和癌症发生率比通常的要高。

[0021] 而且，现在也已经发现DCL可用于治疗人类的过敏性气喘，同时又避免了与应用其它非镇静性抗组胺药物相关的不良副作用。如上所述，这些副作用的例子是食欲刺激、体重增加、促进肿瘤、心律失常和心脏传导障碍。因此，本发明也涉及到治疗人类过敏性气喘的一种新方法，而患者的患癌倾向和癌症发生率比通常要高。

[0022] 此外，DCL可用于治疗人类与糖尿病相关的视网膜病变和微血管疾病，同时避免了与应用其它非镇静性抗组胺药物相关的不良副作用，也避免了与应用氯雷他定或其它非镇静性抗组胺药物相关的肿瘤促进作用。因此本发明也涉及到一种治疗与糖尿病相关的人类视网膜病变和微血管疾病的新方法，患者的患癌倾向和癌症发生率比通常要高。 [0023] 也已发现DCL与非甾醇类抗炎症药物或其它非麻醉性止痛药物联合应用，可用于治疗人的咳嗽、感冒，类感冒症状和/或流感症状和与此相关的不适、疼痛、头痛、发烧和周身不适等，而又避免了与应用其它非镇静性抗组胺药物相关的不良副作用。这些药物组合物包括DCL，非麻醉性止痛药或非甾类抗炎药如阿斯匹林，醋氨酚或布洛芬；其应用时可选择一或多种其它的活性组分，包括减充血剂(如假麻黄碱)，咳嗽抑制剂/镇咳剂(如右旋甲氧甲基吗啡喃)或祛痰剂(如愈甘醚)。

[0024] 本发明还包括应用上述组合物治疗上述疾病，而避免了与应用氯雷他定和其它非镇静性抗组胺药物相关的肿瘤促进作用。因此，本发明也涉及到这些组合物对患癌倾向和癌症发生率较通常要高的患者出现这些疾病时的治疗。

[0025] 本发明也涉及到一种方法，在治疗过敏性鼻炎，过敏性气喘，糖尿病型视网膜病变和其它糖尿病引起的微血管病变时，这种方法避免了DCL和抑制细胞色素P450药物间的相互作用，这种药物包括凯托康唑，伊曲康唑，红霉素和其它本领域技术人员已知的药物，但并不仅限于这些。

[0026] 本发明也涉及一种方法，在治疗人咳嗽，感冒、类感冒和/或流感症状和与此相关的不适头痛、疼痛、发烧和周身不适时，该方法避免DCL和抑制细胞色素P450药物间相互作用，这些药物包括但并不仅限于凯托康唑、伊曲康唑、红霉素和其它本领域技术人员已知的药物，在治疗时包括给人施用一种组合物，该组合物包括DCL和非甾类抗炎症药物或非 麻醉性止痛药。前面提到的组合物可选地包含一种或多种其它的活性组分，包括减充血剂，咳嗽抑制剂/镇咳药或祛痰药。

[0027] 也已发现DCL可用于治疗与它作为抗组胺药的活性有关的其它过敏性疾病，这些疾病包括人的荨麻疹和症状性皮肤划痕征，但并不仅限于此，应用中避免了与应用其它非镇静性抗组胺药相关的不良副作用，并且/或避免了与应用氯雷他定或其它非镇静性抗组胺药物相关的肿瘤促进作用。因此本发明也涉及到治疗人过敏性疾病的一种新方法，这种疾病包括但不仅限于荨麻疹和症状性皮肤划痕征，患者患癌倾向和癌症发生率较通常要高。本发明也涉及到一种方法，在治疗过敏性疾病(包括但不仅限于荨麻疹和症状性皮肤划痕征)时，该方法避免了氯雷他定或其它非镇静性抗组胺药和抑制细胞色素P450药物(包括但并不仅限于凯托康唑，伊曲康唑，红霉素和其它本领域技术人员已知的药物)间的相互作用，治疗时给患者施用了DCL。

具体实施方式

[0028] 本发明包括一种治疗人类过敏性鼻炎而又避免同时出现与施用非镇静性抗组胺药物相关的不良副作用的方法，其中包括给患者施用有效治疗量的DCL或其药用盐。 [0029] 本发明还包括一种治疗人类过敏性气喘而又避免同时出现与施用非镇静性抗组胺药物相关不良副作用的方法，其中包括给患者施用有效治疗量的DCL或其药用盐。 [0030] 本发明还包括一种治疗人类与糖尿病相关视网膜病变或其它微血管病变的方法，该方法避免了同时出现与施用非镇静性抗组胺药物相关的不良副作用，其包括给患者施用有效治疗量的DCL或其药用盐。

[0031] 本发明还包括一种治疗人类咳嗽、感冒、类感冒和/或流感症状及与此相关的不舒服、头痛、疼痛、发烧和周身不适的方法，该方法避免了同时出现与施用非镇静性抗组胺药物相关的不良副作用，其包括给患者施用一种组合物，该组合物包括(i)有效治疗量的DCL或其药用盐(ii)有效治疗量的，至少一种非甾醇类抗炎药物或非麻醉性止痛药物，如乙酰水杨酸、醋氨酚、布洛芬、酮丙酚和甲氧基甲基萘乙酸或其药用盐。

[0032] 此外，本发明还包括一种治疗人类咳嗽、感冒、类感冒和/或流感症状及与此相关的不舒服、头痛、疼痛、发烧和周身不适的方法，该方法避免了同时出现与施用非镇静性抗组胺药物相关的不良副作用，其包括 给患者施用一组合物，该组合物包括(i)有效治疗量的DCL或其药用盐(ii)有效治疗量的减充血剂如假麻黄碱或其药用盐。

[0033] 发现DCL对肿瘤的促进作用比氯雷他定低5-7倍。因此本发明还包括一种治疗人类过敏性鼻炎的方法，该方法避免了同时发生与施用氯雷他定和其它非镇静性抗组胺药物相关的肿瘤促进作用，其包括给患者施用有效治疗量的DCL或其药用盐。

[0034] 另一方面本发明包括一种治疗人类过敏性气喘的方法，该方法避免了同时发生与施用氯雷他定和其它非镇静性抗组胺药物相关的肿瘤促进作用，其包括给患者施用有效治疗量的DCL或其药用盐。

[0035] 本发明还包括一种治疗人类与糖尿病相关的视网膜病变和其它微血管病变的方法，该方法避免了同时发生与施用氯雷他定和其它非镇静性抗组胺药物相关的肿瘤促进作用，其包括给患者施用有效治疗量的DCL或其药用盐。

[0036] 因为DCL促进肿瘤的活性比氯雷他定低得多，所以本发明的另一方面是提供了一种治疗人类过敏性鼻炎的方法，其中患者的患癌倾向和癌症发生率比通常要高，该方法包括给患者施用有效治疗量的DCL或其药用盐。

[0037] 本发明还包括一种治疗人类过敏性气喘的方法，其中患者的患癌倾向和癌症发生率比通常要高，该方法包括给患者施用有效治疗量的DCL或其药用盐。

[0038] 本发明还包括一种治疗人类与糖尿病相关的视网膜病变和其它微血管病变的方法，其中患者的患癌倾向和癌症发生率比通常要高，该方法包括给患者施用有效治疗量的DCL或其药用盐。

[0039] 此外，本发明还包括一种治疗人类咳嗽、感冒、类感冒和/或流感症状和与此相关的不舒服、头痛、疼痛、发烧和周身不适的方法，其中患者的患癌倾向和癌症发生率高于正常水平。该方法给患者施用一组合物，该组合物包括(i)有效治疗量的DCL或其药用盐(ii)有效治疗量的非甾醇类抗炎症药物或非麻醉性的止痛药，如乙酰水杨酸、醋氨酚、布洛芬、酮丙酚和甲氧基甲基萘乙酸或其药用盐。

[0040] 此外，本发明还包括一种治疗人类咳嗽、感冒、类感冒和/或流感症状及不舒服、头痛、疼痛、发烧和与此相关的周身不适的方法，其中患者的患癌倾向和癌症发生率高于正常水平，该方法包括给患者施用一种 组合物，该组合物包括(i)有效治疗量的DCL或其药用盐(ii)有效治疗量的减充血剂，如假麻黄碱或其药用盐。

[0041] 也已发现，当DCL与抑制细胞色素P450的药物一起施用时，该药物包括凯托康唑、伊曲康唑、红霉素和其它本领域技术人员已知的药物，但并不仅限于这些，DCL和该药物间的相互作用低于氯雷他定或其它的非镇静性抗组胺药与该药物一起施用时的相互作用。 [0042] 因此，本发明还包括一种方法，在治疗人类过敏性鼻炎时给人类施用DCL或其药用盐，该方法避免了DCL和抑制细胞色素P450药物间的相互作用，该药物包括但不仅限于凯托康唑，伊曲康唑，红霉素和其它本领域技术人员已知的药物。

[0043] 此外，本发明还包括一种方法，在治疗人类过敏性气喘时，给其中的患者施用DCL或其药用盐，这种方法避免了DCL和抑制细胞色素P450药物间的相互作用，该药物包括凯托康唑、伊曲康唑、红霉素和其它本领域技术人员已知的药物，但并不仅限于此。 [0044] 本发明还包括一种方法，在治疗人类与糖尿病相关的视网膜病变或其它微血管病变的时候，给患者施用DCL或其药用盐，该种方法避免了DCL和抑制细胞色素P450药物间的相互作用，这种药物包括凯托康唑，伊曲康唑，红霉素与其它本领域技术人员已知的药物，但并不仅限于此。

[0045] 本发明还包括一种方法。在治疗人类咳嗽、感冒、类感冒和/或流感症状和与此相关的不舒服、头痛、疼痛、发烧和周身不适等症状时，包括给患者施用一组合物，该组合物包括(i)有效治疗量的DCL或其药用盐(ii)有效治疗量的非甾类抗炎药物或非麻醉性的止痛药物，如乙酰水杨酸、醋氨酚、布洛芬、酮丙酚和甲氧基甲基萘酚或其药用盐，这种方法避免了DCL和抑制细胞色素P450药物间的相互作用，这些药物包括凯托康唑，伊曲康唑，红霉素和其它本领域技术人员已知的药物，但并不仅限于此。

[0046] 本发明另一方面提供一种方法，在治疗人类的咳嗽、感冒、类感冒和/或流感症状以及与此相关的不舒服，头痛、疼痛、发烧和周身不适时，包括给患者施用一组合物，该组合物包括(i)有效治疗量的DCL或其药用盐(ii)有效治疗量的减充血剂如假麻黄碱或其药用盐，这种方法避免了DCL和抑制细胞色素P450药物间的相互作用，该种药物包括凯托康唑，伊曲康唑，红霉素和其它本领域技术人员已知的药物，但并不仅限于此。 [0047] 另一方面，本发明包括一种治疗人类荨麻疹的方法，该方法避免了同时发生与施用非镇静性抗组胺药物相关的不良副作用，其包括给患者施用有效治疗量的DCL或其药用盐。

[0048] 此外，本发明还包括一种治疗人类症候性皮肤划痕征的方法，该方法避免了同时发生与施用非镇静性抗组胺药物相关的不良副作用，其包括给患者施用有效治疗量的DCL或其药用盐。

[0049] 现在已经发现DCL对组胺受体的效力至少比氯雷他定高二十倍。因此对本文所描述的施用状态和本发明方法中的剂量范围为0.1到小于10mg/天。这明显低于其它非镇静性抗组胺药物的推荐剂量，包括氯雷他定，其推荐的口服剂量为5-100mg/天。不过因为DCL的副作用显著降低，所以它的施用剂量可高于为氯雷他定所建议的，由此其治疗范围宽于氯雷他定。

[0050] 氯雷他定和其它的非镇静性抗组胺药物有抗组胺活性，能为不同情况和与过敏性鼻炎及其它过敏性疾病，糖尿病及其它状态相关的疾病提供治疗、减轻症状，然而这些药物出现所希望的效果时也引起了不良副作用。施用DCL时可出现明确的剂量效应关系，减少不良副作用，因而提高了治疗指数。因此，与施用氯雷他定本身或其它非镇静性抗组胺药物相比，更希望施用DCL。

[0051] “不良作用”一词包括心律失常、心脏传导障碍、食欲刺激、体重增加、镇静、胃肠不适、头痛、口干、便秘和腹泻，但并不仅限于此。“心律失常”包括室性心动过速，torsades de pointes和室颤，但并不仅限于此。

[0052] “有效治疗量”指DCL的量能对如下疾病的治疗或处理带来治疗性的好处，这些疾病为过敏性鼻炎和其它过敏性疾病如荨麻疹，症状性皮肤划痕征，过敏性气喘，与糖尿病相关的视网膜病变或其它微血管病变，及与过敏性鼻炎相关的症状，如咳嗽、感冒、类感冒和/或流感症状包括喷嚏，流鼻涕，流眼泪和皮肤刺激等，但并不仅限于此。

[0053] “过敏性气喘”是以气管和支气管对各种刺激的反应性增加，从而出现喘息，咳嗽，呼吸困难等症状为特征的疾病。

[0054] “糖尿病视网膜病”或“与糖尿病相关的视网膜病变”是由眼内毛细血管的渗透性增加而引起的疾病，可引起眼内出血和水肿也可致盲。“与糖尿病相关的微血管病变”包括但不仅限于糖尿病视网膜病和外周 血管疾病。

[0055] 在疾病的急性或慢性处理中，DCL的预防或治疗量的大小要依需处理病情严重程度的不同和用药途径的不同而改变。剂量，或用药次数也要依年龄、体重、患者的个体反应性而改变。通常用于本文所描述的病情时全天的剂量范围为0.1mg到小于10mg，单独或分成几次口服，局部，经皮或通过呼吸局部施用。例如，优选地口服用全天剂量范围应从0.1mg到5mg左右。更优选的口服剂量是0.2mg-1mg左右。

[0056] 另外还建议小孩，年龄超过65岁的患者及那些肾或肝功能损伤的患者开始用低剂量，以后可在个体反应或血液水平的基础上进行滴定。对本领域技术人员来讲很明了的一些病例中有必要应用这些剂量范围以外的剂量。而且，需指出临床或主治医师要结合患者的个体反应知道如何、何时中断，调整或终止治疗。

[0057] “有效治疗量的DCL或其药用盐”一词包括了上述的剂量。此外，“该组合物包括(i)有效治疗量的DCL或其药用盐(ii)至少一种有效治疗量的，非甾类抗炎药物或非麻醉性的止痛药或其药用盐”和“该组合物包括(i)有效治疗量的DCL或其药用盐(ii)有效治疗量的减充血剂如假麻黄碱或其药用盐”中也包括上述的剂量和剂量施用次数表。 [0058] 依照本发明的方法可应用任何合适的施用组以提供给患者有效剂量的DCL。例如可采用口服、直肠、胃肠外，经皮、皮下、肌内和类似的施用形式。剂量形式包括片剂、锭剂、胶体溶液、悬浮液、溶液、胶囊、膏药等等。

[0059] 本发明的方法中所应用的药物组合物包括DCL，氯雷他定的代谢衍生物作为活性成分，或其药用盐，也可包含药学上的载体和其它选择性的治疗成分。

[0060] “药用盐”指由药学上可接受的无毒性的酸或碱制备而来的盐，其中的酸或碱包括无机酸或碱或有机酸或碱。无机酸的例子为盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸和磷酸。合适的有机酸可选自，例如脂肪族，芳香族，羧基和磺基类的有机酸，例如甲酸、醋酸、丙酸、琥珀酸、羟基乙酸，葡萄糖醛酸、顺丁烯二酸、糠酸、谷氨酸、苯甲酸、邻氨基苯甲酸、水杨酸、苯乳酸、苯乙醇酸、双羟萘酸(pamoic)、甲磺酸、乙磺酸、泛酸、苯磺酸、硬脂酸、磺胺酸、海藻酸和半乳糖醛酸。无机碱的例子包括从铝，钙，锂，镁，钾，钠和锌而来的金属盐。合适的有机碱可选自， 例如N，N-二苄基1，2-2二胺，氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、1，2-乙二胺、甲基葡胺(N-甲基还原葡糖胺)、赖氨酸和普鲁卡因。

[0061] 本发明的方法中所应用的组合物包括组合物，如悬液，溶液，酏剂；喷雾剂；或包括载体如用于口服固体制剂(如粉末，胶囊和片剂)中的淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、成粉剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等，口服固体制剂优于口服流体制剂。最优选的口服固体制剂为片剂。

[0062] 因为片剂和胶囊易于服用，所以它们代表了最有利的口服剂量单元形式，其中应用了固体的药用载体。如果需要的话，可通过标准的水性或非水性技术给片剂加衣。 [0063] 除了上面列出的普通剂型外，本发明的方法中应用的化合物也可通过控制释放手段和/或美国专利3,845,770；3,916,899；3,536,809；3,598,123和4,008,719中所描述的输送装置而施用，在此引入这些专利的内容作为参考。

[0064] 本发明的方法中所应用的药物组合物适于口服施用的可以分散单元的形式存在，如胶囊，扁囊剂或片剂，或气雾剂，每个均含有前面确定量的活性成分，可以粉末或颗粒或溶液或悬于水溶液，非水性液，水包油乳液或油包水乳液中悬液的形式存在。可用任何一种药剂学的方法制备这些组合物，但所有的方法均包括把活性成分与载体相结合这一步，这就构成了一或多种必要成分。通常，把活性成分与流体载体或细碎的固体载体或与二者一起进行均匀，紧密掺和来制备组合物，如果必要的话，接着把产物整成所希望的形状。 [0065] 例如，可选择性地与一或多种辅助成分一起通过压缩或制模而制备片剂。压缩的片剂可在合适机器内通过压缩活性成分而制备，活性成分以自流的形式存在，如粉末或颗粒，选择性地与粘合剂，润滑剂，惰性稀释剂，表面活性剂或分散剂混合。压模片剂在可适合的机器内通过对惰性流体稀释剂弄湿粉末化合物形成的混合物进行压模而制成。希望每片含有大约0.1mg到低于10mg的活性成分，每一扁胶囊或胶囊所含活性成分即DCL的量为0.1mg到低于10mg左右。

[0066] 本发明可通过参考下面的实施例而得到进一步明确，下列的实施例对本发明的方法中所应用的化合物及组合物的制备及其应用进行了详细描述。本领域的技术人员均会明了，在本发明范围内对材料和方法所做的许多调整也可实施。

[0067] 4.实施例

[0068] 4.1实施例1：氯雷他定及其代谢产物的制备

[0069] 可用美国专利4,282,233中所指出的方法合成氯雷他定。用本领域的传统反应步骤可同样制备其代谢产物，如美国专利4,659,716中所述，这些内容在此引入作为参考。一种制备DCL的普通方法是对存在于NaOH和乙醇中的氯雷他定进行回流，如下所示。 [0070]

[0071] 商品药剂Claritin片剂(600×10mg)的萃取

[0072] 用水和氯仿稀释氯雷他定片剂。搅拌混合物，然后通过硅藻土过滤，用氯仿冲洗直到滤液中不再含有氯雷他定。分离的水层用氯仿萃取2次。合并有机层用水盐水冲洗，硫酸钠干燥。蒸发掉溶剂得到纯净的白色固定氯雷他定。

[0073] 氯雷他定的皂化

[0074] 氯雷他定(4.0g)加入到280mL纯乙醇配制的NaOH(5.9g)溶液中，搅拌混合物，回流四天。冷却混合物，浓缩以移去乙醇。用水稀释剩余物，二氯甲烷萃取水层5次。合并有机层，用水盐水冲洗，硫酸钠干燥，蒸发掉溶剂得到2.82g(87％)纯净的浅黄褐色固体氯雷他定衍化物(或代谢物)。

[0075] 4.2实施例2

[0076] 抗组胺活性

[0077] 用豚鼠的离体回肠条对组胺的收缩性比较了氯雷他定和DCL的抗组胺活性。作为预测外周组胺H-1受体效率的方法，这种方法已广泛被 该领域的技术人员所接受。 [0078] 方法：

[0079] 实验在取自雄性豚鼠(Hartley品系，419-560g；Elm Hill饲养实验室，Chelmsford，MA)的回肠片断中进行。组织悬在含40mL泰格溶液的组织腔中，在充有95％氧气和5％CO2，35℃的条件下培养。泰格溶液包括(mM)137NaCl，2.7KCl，2.2CaCl2，
0.025MgCl2，0.4NaHPO4，11.9NaHCO3和5.5葡萄糖。对组胺反应所产生的收缩通过等张换能器(357型，Harvard仪器公司，South Natick，MA)用墨描多波动描记器(7型，Grass仪器公司，Quincy，MA)记录。1克的张力在所有时间所有组织中维持。

[0080] 每一实验中，从一个动物要移取3或4片回肠，悬浮去各自的组织腔中，应用任-7 -6何药物之前用溶液平衡1小时。在最初4个试验中，组织暴露在浓度为1×10 ，1×10 ，-5 -6
1×10 mol/L的组胺中，组胺在1×10 mol/L时，可在对数浓度效应曲线的线性部分诱导最强收缩，在以后所有的实验中均选择组胺的这一浓度。

[0081] 为了检测氯雷他定和DCL的抗组胺活性，15分的间隔内，组织简短地(约15秒)-6暴露给1×10 mol/L的组胺。连续2次暴露给组胺，可诱导接近和同大小的收缩，之后把其终浓度改变了3或10倍的氯雷他定和DCL，加入到除一个以外的所有组织腔中，未处理的组织作为处理组织的对照。经药物处理的组织每暴露给组胺一次后，组织腔中的液体就用不含组胺却含有同一浓度的相同药物的液体所取代。这种组胺刺激在暴露给药物5、20、35、
50、65、80、95、110和125分钟时进行，或在对照组的对照时间进行。

[0082] 随后对从每组实验所获得结果进行的分析包括(i)用最后一次用药前收缩百分率的形式表达所有的收缩，以使从每一组织获得的结果规范化，从而区分其内在的收缩性(ii)以未处理组织相对应值的百分率形式来表达接触药物过程中所记录的收缩，以此来规范数据，进行时间和收缩性变化的相关性分析，最后包括(iii)计算与药物相关的每一收缩的减少百分率。

[0083] 所获得的药物浓度和相对应的组胺反应减少百分率这一套数据，用于估计每一种实验中对组胺反应减少为50％时的药物浓度，即IC50。方法是这样的用最小乘方原则给数据配合直线，然后用线路方程来计算 IC50。计算每种药物在实验中的均值±标准误，用Kruskal Wallis 1-way排列变化的方法来检测药物间的差别。

[0084] 结果的小结列在下面2个表中。离体豚鼠回肠与不同浓度的各种药物接触125分钟时，其对组胺诱导收缩的减少百分率列在下面：

[0085] 表1.组胺诱导豚鼠回肠收缩的减少(百分率)

[0086] 实验号

[0087] 药物 No. 药物浓度(mol/l)

[0088] 3×10-10 1×10-9 3×10-9 1×10-8 3×10-8 1×10-7[0089] 氯雷他定 1 - 19.05 - 13.33 - 88.57 [0090] 2 - - - 28.32 54.42 98.66 [0091] 3 - - - 39.64 44.68 93.38 [0092] 4 - - - 55.86 45.83 86.46 [0093] DCL 1 11.93 73.12

[0094] 2 38.91 38.81 56.71

[0095] 3 40.00 62.69 76.21

[0096] 4 35.43 44.13 76.43

[0097] 表2.组胺诱导豚鼠回肠收缩的减少(IC50)

[0098] 药物 实验 IC50(M)

[0099] 氯雷他定 1 1.90×10-8

[0100] 2 2.21×10-8

[0101] 3 2.10×10-8

[0102] 4 1.22×10-8

[0103] 均值 1.86×10-8

[0104] 标准差 0.22

[0105] DCL 1 6.36×10-10

[0106] 2 19.2×10-10

[0107] 3 5.26×10-10

[0108] 4 8.66×10-10

[0109] 均值 9.75×10-10

[0110] 标准差 3.20

[0111] 注：在IC50值(P＝0.0209)时，有统计上显著的药物相关差异。

[0112] 结果显示DCL对组胺受体的效力比氯雷他定高将近20倍。

[0113] 4.3实施例3

[0114] 受体结合试验

[0115] 进行了氯雷他定和DCL对组胺H-1受体结合亲和力的受体结合试验。 [0116] 本结合性试验中应用了Dini等的方法，在此引入作为参考(药剂和作用，33：181-184，1991)。豚鼠的小脑膜与0.5nM 3H-新安替根(pyrilamine)一起在25℃时培养
10分钟，随后应用Brandel细胞收集器测定在真空下通过GF/B玻璃纤维滤纸(Whatman)过滤，用冰冷的缓冲液冲洗几次。通过应用液体闪烁液(Formula 989，DuPont NEN)，结 合的放射活性用液闪仪测定(LS 6000，Beckman)。

[0117] 测定了所试验的化合物及新安替根对H-1组胺受体的IC50值。

[0118] 表3.新安替根结合H-1受体的抑制

[0119] H-1受体

[0120] 化合物 IC50(nM) (nH)

[0121] 氯雷他定 721 (1.55)

[0122] DCL 51.1 (1.12)

[0123] 新安替根 1.4 (0.98)

[0124] 如上所示，DCL对组胺H-1受体的亲和力比氯雷他定高14倍。这些结果与发现的一致性证明DCL抑制豚鼠回肠组胺诱导性收缩的效力高于氯雷他定。

[0125] 这些研究结果证实DCL对组胺受体的效力高于氯雷他定。

[0126] 4.4实验例4

[0127] 肿瘤促进活性

[0128] 用淋巴细胞有丝分裂的抑制来检测氯雷他定和DCL作为肿瘤促进剂的可能性。 [0129] 有丝分裂研究

[0130] 从5周龄BALB/L小鼠(Charles River，ST.Constant，PQ)获得的新鲜脾细胞5
(5×10)悬在含2％胎牛血清(Grand Island生物公司，GrandIsland，NY)的RPMI 1640培养基中，加入ConA(2μg/ml，Sigma化学公司，St.Louis，MO)，加到2相同的微孔板(Nunc)中，在缺少或存在溶于盐水或其它媒质浓度逐渐增高的受试验药剂的条件下培养(37℃，
3
95％空气，5％CO2)加入ConA43小时后，每孔加入0.25nmol的 H-胸苷(6.7Ci/nmol；ICN放射性药物，Montreal，PQ)又培养5小时后，用自动细胞分类器把细胞从板中冲洗到滤纸上。把滤纸放到盛有5ml闪烁液(Readysafe；Beckman)的小瓶中，检测48h掺入到DNA中的放射活性(n＝3)。检测了大范围浓度(0.1-10μM)的药物对有丝分裂抑制的IC50值。 [0131] 表4 ConA诱导淋巴细胞刺激的抑制(IC50)

[0132]

[0133] 结果显示DCL对肿瘤生长的促进作用比氯雷他定低5-7倍。

[0134] 4.5实施例5

[0135] 心血管效应：

[0136] 研究了DCL对心脏钾流的影响。

[0137] 方法：

[0138] 用酶分散的方法，从豚鼠和兔子分离单个心室肌细胞(Carmeliet， 实验性治疗药理学杂志1992，262，809-817，在此引入作为参考)。单吸引膜片电极，阳抗为2-5MΩ用作电压钳(Axoclamp 200A)。应用P-clamp软件(Axon Instruments)产生电压钳的应用程序并记录和分析数据。标准溶液含有NaCl 137.6，KCl 5.4，CaCl2 1.8，MgCl2 0.5，HEPES11.6和葡萄糖5，加入NaOH调pH为7.4，均以mM计，细胞内溶液含有KCL 120，MgCL26，CaCL20.154，Na2ATP5，EGTA 5和HEPES 10，加入KOH直到pH为7.2。

[0139] 对兔子心室肌细胞延迟整流性K+流(IKI)的影响

[0140] 电压钳的程序包括4秒内把钳片的夹持电位从-50mV升到10mV。测量终末流的变-7 -5化作为药物浓度的功能。浓度在5步内于10 -10 间变化。暴露给每一浓度持续的时间为15分钟。最后试图在30分内冲洗净。

[0141] 对豚鼠肌细胞内向整流性离子流的影响

[0142] 内向整流性的检测这样进行：倾斜电压钳从-50mV开始，以10mV/秒的速度使膜超去极化达到-120mV。开始的浓度是在前面的实验中确定了的50％效率时的浓度。如果这种起始浓度无效，则用高浓度。

[0143] 对豚鼠心室肌细胞IKs的影响

[0144] 随着2秒钟的去极化，电位位于-30mV和+60mV时测定终末流；夹持电流-50mV。 [0145] 这些研究的结果显示，在抑制心脏延迟整流时，DCL比氯雷他定的作用要小得多，所以它没有心脏副作用的潜在性。因此本发明的方法比 应用其它非镇静性抗组胺药物的方法毒性低。

[0146] 4.6实施例6

[0147] 细胞色素P450的抑制

[0148] 进行这一研究是为了检测氯雷他定和DCL抑制人类细胞色素P4503A4(CYP3A4)的程度。CYP3A4参与许多药物-药物间的相互作用，对氯雷他定或DCL对CYP3A4的抑制进行定量可表明它们对药物-药物间相互作用的潜力。用模型基质睾甾酮和从称做h3A4V3的人类或淋巴细胞系中制备的微粒体中cDNA衍化的CYP3A4测定这种抑制作用。 [0149] 研究设计

[0150] 该抑制作用的研究包括为实验物质测定其50％抑制率时的浓度(IC50)。对单个睾甾酮浓度(120μM，近似明显Km的2倍)和10个由接近1/2log分离的药物浓度进行了多重实验。睾甾酮代谢通过其代谢物6(β)-OH睾甾酮的产生来测定。该代谢物通过HPLC分离用吸收率检测很易定量。

[0151] 试验物质的贮存/制备和用于培养：

[0152] 试验物质在室温下保存，溶在乙醇中以用于培养。溶剂的浓度对试验物质的所有浓度是恒定的。

[0153] IC50检测

[0154] 试验物质的终浓度为100、30、10、3、1、0.3、0.1、0.03、0.01，0.003和0μM。每一试验浓度将按下面的方法进行重复培养。

[0155] 方法

[0156] 0.5ml的反应混合物中含有0.7mg/ml蛋白质，1.3mM NADP+，3.3mM 6-磷酸葡萄糖，0.4U/ml葡萄糖-6-磷酸脱氢酶，3.3mM氯化镁和溶于100mM磷酸钾中(pH7.4)中的120μM