生物碱制剂

摘要

本发明提供了一种生物碱制剂，包含一种或多种生物碱与一种或多种电子转移剂的一种或多种磷酸盐衍生物的反应产物。

权利要求

1.一种生物碱制剂，其包含：

(1)具有叔胺基的生物碱与

(2)生育酚磷酸盐的反应产物；其中所述的生育酚磷酸盐不是生育酚磷酸盐与络合剂形成的络合物，所述络合剂选自两性表面活性剂、阳离子表面活性剂、具有氮官能团的氨基酸和富含此种氨基酸的蛋白质。

2.根据权利要求1所述的生物碱制剂，其中所述的生育酚磷酸盐衍生于α-生育酚。

3.根据权利要求1或2所述的生物碱制剂，其中所述的生育酚磷酸盐选自磷酸单生育酚、磷酸二生育酚及其混合物。

4.根据权利要求3所述的生物碱制剂，其中所述的生育酚磷酸盐为磷酸单生育酚与磷酸二生育酚的混合物。

5.根据前述任一权利要求所述的生物碱制剂，其中具有叔胺基的生物碱选自颠茄碱、奎宁、类罂粟碱、芬太尼、尼古丁、芬司匹利、盐酸氟胺和可待因。

6.根据权利要求5所述的生物碱制剂，其中所述的生物碱为颠茄碱或吗啡。

7.根据前述任一权利要求所述的生物碱制剂，其中所述制剂是局部制剂或口服制剂。

8.根据前述任一权利要求所述的生物碱制剂，其中所述制剂为进一步含有肠溶包衣的口服制剂。

9.根据前述任一权利要求所述的生物碱制剂，其中所述的制剂为片剂、粉剂、嚼用片、胶囊剂、口服混悬剂、混悬剂、乳剂或液体制剂、儿童制剂、肠内营养制剂、营养制品、功能性食品、辅助食品、栓剂或皮肤贴。

10.根据前述任一权利要求所述的生物碱制剂，其中所述的制剂为静脉给药、鼻腔给药或皮肤给药。

11.一种提高具有叔胺基的生物碱效力的方法，该方法包括生物碱和生育酚磷酸盐反应的步骤；其中所述的生育酚磷酸盐不是生育酚磷酸盐与络合剂形成的络合物，所述络合剂选自两性表面活性剂、阳离子表面活性剂、具有氮官能团的氨基酸和富含此种氨基酸的蛋白质。

12.具有叔胺基的生物碱与生育酚磷酸盐的反应产物在生产生物碱制剂中的应用，其中所述的生育酚磷酸盐不是生育酚磷酸盐与络合剂形成的络合物，所述络合剂选自两性表面活性剂、阳离子表面活性剂、具有氮官能团的氨基酸和富含此种氨基酸的蛋白质。

13.一种药物组合物，该组合物含有权利要求1-10中任一权利要求所述的生物碱制剂和药学上可接受的载体。

说明书

生物碱制剂

技术领域

[0001] 本发明直接涉及包含一种或多种生物碱的制剂。特别涉及(但不限于)含有一种或多种生物碱和一种或多种电子转移剂磷酸盐衍生物的制剂。

背景技术

[0002] 本说明书中对于文献、行为或知识的引用或讨论并非承认该文献、行为或知识或其任意组合在优先日时是：公知的知识的一部分，或已知与本说明书涉及的问题的解决相关。

[0003] 生物碱

[0004] 生物碱作为药用的历史悠久。这些化合物最初是从植物中提取的，包括那些作为药品和毒品对人具有生理作用的氮化合物。本说明书及权利要求书中使用的术语“生物碱”(alkaloid)包括所有包含伯胺、仲胺或叔胺取代基的天然或合成的活性化合物。胺基可被加入一个或两个环中，但是非环结构也包括在内。例如，包括：

[0005] 叔胺，其为：

[0006] 三个环共用氮原子的脂环族(例如：吗啡、颠茄碱、奎宁)；或

[0007] 将氮加入单环并被烷基化的环状结构(例如：尼古丁或芬司必利)；或[0008] 加入氮的非环(例如：盐酸氟胺)；

[0009] 将氮加入脂环结构(例如：Conline、芬地林)或线型结构的仲胺(例如：肾上腺素)；

[0010] 伯胺(例如：麻黄素)；

[0011] 吡啶(例如：尼古丁)；

[0012] 甲脒(Methamidine)衍生物；

[0013] 喹啉(例如：金鸡纳宁)；

[0014] 胍(例如：精氨酸)

[0015] 大多数生物碱都不溶于水但溶于有机溶剂。但所有生物碱都是碱性的并可与酸结合形成结晶盐，该盐通常至少部分溶于水。通常，生物碱以盐的形式口服或静脉注射。生物碱是一类一般不透皮给药的药物，这是因为盐类的亲水性质通常会限制透皮吸收。例如吗啡和颠茄碱就是在临床中使用但不采用透皮给药的生物碱。另外，由于生物碱被认为是通过淋巴系统起作用，所以期望改良生物碱的口服给药途径。

[0016] 局部给药

[0017] 局部给药是指直接将药物施用到身体某个部位，包括透皮给药(施用到皮肤上)和含服(口腔内施用)。

[0018] 皮肤是人体最大的器官，其功能是保护内部器官不受外部的化学、物理和病理伤害。正常皮肤分为三层：表皮、真皮和皮下组织。表皮的外部角质化层即角质层具有强度、柔韧性、高电阻和干燥属性，阻止微生物的侵入和繁殖。角质层还是透皮吸收的主要障碍。

[0019] 透皮给药技术包括药物的单独应用和作为制剂的应用，所述制剂通常含有能够提高透皮吸收速率的物质。历史上透皮给药曾作为软膏剂、乳膏剂、泥敷剂、硬膏剂使用，以便与皮肤有效接触。后来，这项技术经过改进，将硬膏剂制成“贴剂”使其能够更好地粘附于皮肤上并且能够更好地控制透过速率。

[0020] 人们已经认识到透皮给药具有若干潜在的优点，这些优点包括：使血液中药物浓度达到接近缓慢静脉注入的水平却没有静脉注入带来的不便；与口服相比，更好的控制吸收和代谢；药效持久，特别是对于半衰期较短的药物；由于绕过了肝脏首过效应，因此减少药物剂量也能达到同等的疗效；发生剂量不足或过量的风险低；通过给药方案的简化而获得更好的病人依从性。

[0021] 并非所有药物都能够以足够高的速率透皮给药，来达到对系统治疗有治疗作用的血药浓度。例如，分子量和分子大小接近的药物可能会以不同的速率透皮吸收。已经开发出皮肤增进剂(skinenhancer)和各种不同的制剂技术来提高药物的透皮吸收。但引起了人们对长期风险的关注，因为药物透过性的提高是以破坏皮肤极其重要的保护层为代价的。

[0022] 当前改进透皮疗法的各种方案还没有完全成功，尚存在进一步改进的空间。特别是需要能够运送生物碱的透皮给药系统的应用。

[0023] 人们对含服给药的兴趣也越来越大，因为这种服用方法避免了口服药物时会产生的肝脏代谢问题。通常，将药物制成锭剂置于舌下。口腔内表面层没有相当于皮肤角质层的结构，因此含服给药并不困难，但是，这种方法没有被普遍采用，这是因为如果口腔膜不允许透过或主动转运，透过率可能会比较低而不能获得有效的结果。例如，国际专利申请号PCT/AU03/00998揭示了一种药用载体，该载体包含药用可接受的化合物的磷酸盐衍生物的络合物(complex)，例如，月桂醇氨基二丙酸磷酸生育酚(laurylaminodipropionic acidtocopheryl phosphates)。PCT/AU03/000998揭示了磷酸生育酚与络合剂络合，所述络合剂选自：两性表面活性剂、阳离子表面活性剂、具有氮功能团的氨基酸和富含这些氨基酸的蛋白质。已经表明这种载体能够改善睾丸素、雌激素、颠茄碱和吗啡的局部给药。但是，对于吗啡和颠茄碱，还需要进一步提高皮肤透过。

[0024] 口服给药

[0025] 许多药物都是采用口服，但是有一大批潜在的有用药物由于不能够穿过肠壁而被弃之不用。可以理解脂肪等物质能够有效地透过肠壁运送，但是有许多物质如生育酚就很难透过肠壁运送。因此有必要提供一种能够提高生物碱口服效果的给药系统。

发明内容

[0026] 已经发现：当生物碱化合物直接络合到电子转移剂的磷酸盐衍生物时，给药效果会有显著提高。例如，吗啡被直接络合到生育酚磷酸盐(tocopheryl phosphate)后，其给药效果得到改善。

[0027] 本发明提供了一种生物碱制剂，包含一种或多种多种生物碱与一种或多种多种电子转移剂的一种或多种多种磷酸盐衍生物的反应产物。

[0028] 优选的，所述电子转移剂的磷酸盐衍生物选自：一种或多种生育酚的磷酸衍生物。

[0029] 优选的，所述生物碱制剂是局部给药或口腔给药。

[0030] 本发明的第二方面是提供了一种提高生物碱疗效的方法，该方法包含的步骤有：将所述生物碱与一种或多种电子转移剂的一种或多种磷酸盐衍生物进行反应。

[0031] 本发明还提供了一种或多种生物碱与一种或多种电子转移剂的一种或多种磷酸盐衍生物的反应产物和赋形剂在制剂生产中的应用。

[0032] 本发明还提供一种药物组合物，包含一种包含一种或多种生物碱与一种或一种以电子转移剂的一种或多种磷酸盐衍生物(例如生育酚的磷酸盐衍生物)的反应产物。

[0033] 优选的，生物碱选自下列叔胺：：(1)三个环共用氮原子的脂环族(例如：吗啡、颠茄碱、奎宁)；(2)将氮加入单环并被烷基化的环(例如：尼古丁或芬司必利)；或(3)不具有含有氮的环状结构(例如：盐酸氟胺)。更优选的，所述生物碱是由包括颠茄碱、奎宁、类罂粟碱(如吗啡)、芬太尼、尼古丁、芬司匹利、盐酸氟胺和可待因。

[0034] 术语“电子转移剂”在本文中是指一类可被磷酸化和(在非磷酸化形态中)能够接受一个电子而生成相对稳定的分子基团或接受两个电子而使其能够参与可逆的氧化还原系统的化学物质。能够被磷酸化的电子转移剂化合物包括：羟基色原烷(hydroxy chromans)，包括异构体和消旋形式的α、β、γ和δ母育酚；维生素K1和辅酶Q10还原形式的氢醌；包括视黄醇在内的羟基类胡萝卜素(hydroxycarotenoid)；麦角钙化醇和抗坏血酸。优选的，所述电子转移剂选自：生育酚及其他母育酚、视黄醇、维生素K1和它们的混合物。更优选的，所述电子转移剂选自母育醇及其混合物。所述母育酚包括6-羟基-2-甲基色原烷(参见下面的结构式)衍生物的全部异构体，式中R1、R2、R3可以是氢或甲基，即，α-5，7，8三甲基、β-5，8二甲基、γ-7，8二甲基；δ8甲基衍生物。在生育酚中，R4被4，8，*12三甲基十三烷基取代，并包括各种立体异构体和旋光异构体(手性中心用 表示)。在生育三烯酚中，R4被4，8，12三甲基(正)十三(碳)烷-3，7，11三烯基取代并且2位可以具有作为R或S立体异构体的立体活性。最优选的，所述电子转移剂是α-生育酚。

[0035]

[0036]

[0037] 术语“磷酸盐衍生物”在本文中是指通过氧与磷酸基团的磷原子共价结合从而形成碳-氧-磷键的化合物。所述氧原子通常是由电子转移剂上的羟基衍生而来。该术语包括：磷酸化电子转移剂的酸形式，包括金属盐(如钠、镁、钾、钙)在内的磷酸盐，以及其他磷酸盐质子被其他取代基(如乙基、甲基或磷脂酰基等)取代的衍生物。该术语包括磷酸盐衍生物的混合物，特别是磷酸化反应产物，以及单独的各种磷酸盐。例如，该术语包括单生育酚磷酸盐(TP)和二生育酚磷酸盐(T2P)的混合物以及单独的TP和T2P。适合的混合物在国际专利申请号PCT/AU01/01475中有述。

[0038] 术语“磷酸盐衍生物”不包括磷酸盐衍生物与络合剂的络合物，所述络合剂选自：两性表面活性剂、阳离子表面活性剂、具有氮官能团的氨基酸和富含此种氨基酸的蛋白质。

[0039] 优选的，所述一种或多种电子转移剂的一种或多种磷酸盐衍生物选自单生育酚磷酸盐(TP)和二生育酚磷酸盐(T2P)及其混合物。更佳的是，所述一种或多种电子转移剂的一种或多种磷酸盐衍生物是单生育酚磷酸盐(TP)和生育酚磷酸盐(T2P)的混合物。

[0040] 在某些情况下，可能必需使用像磷脂这样的磷酸盐衍生物，其附加性质(如更好的水溶性)是优选的。磷脂酰衍生物是有机磷酸盐的氨烷基衍生物。这些衍生物可以从具有R1R2N(CH2)nOH结构的胺制备，其中n是1到6之间的整数，R1和R2既可以是H也可以是具有3个或小于3个碳原子的短烷基链。R1和R2可以相同也可以不同。磷脂酰衍生物的制备方法是：将电子转移剂的羟基质子与磷酸盐实体转换，然后与某种胺(如乙醇胺或N，N’二甲基乙醇胺)反应生成电子转移剂的磷脂酰衍生物。一种制备磷脂酰衍生物的方法是利用碱性溶剂(如吡啶或三乙基胺)和氧氯化磷来制备中间产物，然后中间体与胺的羟基反应生成相应的磷脂酰衍生物，如P cholyl P生育酚二氢磷酸盐。

[0041] 该生物碱制剂可通过各种剂型方式施用于人或动物，如添加剂、肠内营养剂、静脉注射剂、栓剂、鼻腔给药方式、皮肤给药方式(包括贴剂和乳膏)、含服给药方式。口服或含服给药方式特别适合于具有低水溶性的生物碱。

[0042] 优选的，本发明的口服生物碱制剂还包含肠溶包衣。口服制剂可以是片剂、粉剂、口嚼剂、胶囊剂、口服混悬剂、混悬剂、乳剂或液体剂、儿童制剂、肠内营养剂、营养食品、功能性食品。

[0043] 上述剂型方式还可进一步包括制备时常用的添加剂，如淀粉或聚合粘合剂、甜味剂、上色剂、乳化剂、包衣等。另一种适合的添加剂是电子转移剂的磷酸盐衍生物的络合物，用于需要一些附加性质(如稳定性和运送性)的情况。术语“磷酸盐衍生物的络合物”是指一种或多种络合剂与一种或多种电子转移剂的磷酸盐衍生物的反应产物，如在本说明书中参考引用的国际专利申请号PCT/AU01/01476中所公开，所述络合剂选自两性表面活性剂、阳离子表面活性剂、具有氮功能团的氨基酸和富含这些氨基酸的蛋白质。如果使用此种添加剂，重要的是确保制剂中具有过量的电子转移剂。其他适合的添加剂对于本领域技术人员来说是显而易见的。

附图说明

[0044] 图1是各种颠茄碱对猪的心率的影响。数据是对10分钟期间的累加平均值，并且已经采用共变分析对基值进行了校正(给药前平均1h)。

[0045] 图2是心率对时间曲线的典型微分。数据来自平行实验1期间经制剂C处理的猪1(即，所使用的第一只猪)。处理开始于0分钟并持续了6分钟。直线表示积分被平均后的期间。

[0046] 图3是各种基底膏剂对猪的心率的效果。数据为对10分钟期间累加平均，并且利用共变分析经过校正基值(basal)。

[0047] 图4是典型的心率对时间曲线。数据来自平行实验1期间经制剂C处理的猪1(即，所使用的第一只猪)。处理开始于0分钟并持续了6分钟。直线表示积分被平均后的期间。

[0048] 图5是施用热探针后的处理效果和缩爪反应时间。

[0049] 图6是吗啡1.35、2.7和5.4mg/kg在TPM-01/M制剂中对缩爪反应潜伏期的影响，实验持续8小时。

具体实施方式

[0050] 以下参考非限定性实例对本发明的实施例/方面进行详细说明。

[0051] 实例1

[0052] 本实例研究本发明的颠茄碱制剂对猪进行透皮给药。本实验研究了以凝胶剂形式施用的颠茄碱的透皮给药对猪的心率的影响。

[0053] 方法与材料

[0054] 颠茄碱(20mg/kg)在下列基底膏剂中配制，用于实验。除了下述特殊组份以外，所有膏剂中都含有以下成分：12％Ultrez 10Carbomer-3％溶液，0.25％三乙醇胺，0.1％ Surcide DMDMH和最高到100％的脱离子水。

[0055] 组合物f，H和J与颠茄碱组合产生本发明的制剂。组合物B、D和E产生现有的制剂，组合物A、C和I展示赋形剂的效果。

[0056]代码 组分
A 1.27％Deriphat160
B 40％disodium lauryliminodipropionate monotocopheryl
phosphate和lauryliminodipropionate ditocopheryl phosphate
7.5％的40％磷酸单生育酚二钠lauryliminodipropionate和磷
酸二生育酚
C 0.77％精氨酸
D 7.5％的40％精氨酸磷酸单生育酚和精氨酸磷酸二生育酚
E 7.5％的40％精氨酸磷酸单生育酚
F 3％磷酸单生育酚
G 3％磷酸单生育酚和磷酸二生育酚
H 7.5％磷酸单生育酚二钠lauryliminodipropionate
I 1.5％三乙醇胺
J 磷酸生育酚和磷酸二生育酚

[0057] 本实验中使用了10只雄性杂种(大白猪x兰德瑞斯猪)猪(初使平均体重51.5kg，最终平均体重61.0kg)。研究开始前4天将14只只只猪称重并随机分配到实验基地的单圈中(1.75m×0.65m)进行环境适应。在此期间用动物剪刀(美国产Oster)剪除猪的背毛，然后用电动剃须刀(Philishave HQ5041-Philips Aust Pty公司)定期剃毛。绕猪的胸部放置弹性带使其适应心率监测器。实验开始时，选出十只对环境和操作适应最好的猪并将其覆蔽，使附近的圈内不再有猪。这种身体上的分离避免了在同一频率下工作的心率监测器之间可能存在的信号干扰。这十只只猪被分为两组，每组五只(单双数)并在实验中按天交替使用。因此每两个连续治疗日执行一次重复实验。在每次重复实验中这10只只猪被随机分配到十个治疗组中，因此每只只猪都被5次用于数据捕获，并且每个治疗都重复5次。

[0058] 每个测量日08:00时左右将进行实验的5只只猪称重，安装心率监测仪并开始以1分钟的间隔记录心率。使用人用心率监测器(Polar Sport Tester PE4000-Polar Electro Finland)捕获心率数据。将具有内置传感器和变送器的胸带束缚在猪前腿后的胸前部位。这些束带上的传感器接触区域涂覆了足够的超声波胶(Virbac Aust Pty Ltd)，以便确保能够获得良好的心率信号。围绕变送器带放置有100mm宽弹性维可牢尼龙搭扣制成的第二束带。在记录期间，该束带保护变送器不受损坏，并具有一用来存放监视器记录单元的口袋(类似于手表)。然后用电动剃须刀并猪背上的一块区域剃净。使用一块模板和永久性标
2 0.75
记在该区域内勾勒出172.5cm(75×230mm)的矩形治疗区。然后以100g/kg活重 (例如：
55kg猪＝2020g/天)。开始记录心率至少1小时后开始治疗。三名有关人员佩戴防护橡胶手套用5ml注射器施用各个实验制剂。这项工作包括将产品揉入猪的皮肤，同时一名助手将电吹风机的暖风吹向治疗区域。大约8-10分钟皮肤表面触摸发粘时停止揉搓。然后将3个(10×12cm)透明绷带(Tegaderm-3M Health Care USA)置于治疗区域之上。治疗处理后将猪留下不对其扰动，保持6-7小时的记录周期。在实施前后对治疗中使用的注射器和手套进行称重，以便确保实际施用在猪上的真实剂量计算准确。记录周期结束时，将心率监测器和透明绷带除去，并使用含有少量洗手液的温水将治疗区域洗净。

[0059] 结果

[0060] 表1.各种颠茄碱制剂对60分钟间隔平均心率的影响

[0061]

[0062] 表2各种颠茄碱制剂对60分钟间隔平均心率的影响

[0063]870 254 100. 100. 100.
2 x .0 .0 0< 0< 0<
des 3320.0 3590.0 8651.0 5901.0 2502.0
8 ) 6 )1 7 )1 94 )9 6 )7
J 82.2 491( 87.1 .16( 11.0 3.1( 0.0- 8.0( 91.0 5.1(
103 )00 467 )1.8 112 )26. 992. )05. 594 )31.
I .2 2( .1 5( .0 1( 0- 0( .0 3(
H 123.2 )902( 437.1 )2.45( 052.0 )87.1( 724.0- )73.0( 086.0 )97.4(
1 ) 8 )7 4 )2 57 )2 8 )3
G 53.2 422( 37.1 .45( 34.0 7.2( 3.0- 4.0( 08.0 4.6(
F 623.2 )212( 787.1 )2.16( 922.0 )96.1( 39300- )04.0( 426.0 )12.4(
313 )60 627 )2.3 160 )51. 681. )56. 462 )48.
E .2 2( .1 5( .0 1( 0- 0( .0 1(
) 0 ) 4 ) )
92. )591 278. 5.47 60.0 78.0 21.0 57.0 270. 81.1
D 2 ( 1 ( - ( - ( 0 (
3 )4 26 )8. 17 )8 602 )26 39 )74
C 3.2 12( 7.1 75( 1.0 41( .0- .0( 3.0 .2(
) ) 2 ) )
703. )302 409. 2.08 300. 10.1 13.0 94.0 292. 69.1
B 2 ( 1 ( 0 ( - ( 0 (
1 ) 0 )7 5 )3 44 )7 4 )6
A 43.2 912( 97.1 .16( 21.0 3.1( 2.0- 5.0( 53.0 2.2(
1 2
峰g 比 )mp 时g 值峰 )ni 上g 率斜 下g 率斜 2 率 比g
oL 值 bf oL 间 m( oL 升 oL 降 ,1 斜 oL

[0064] 1单位为bpm每分钟2，单位应为负值，但是乘以-1以便进行对数变换[0065] 表3.各种基底膏剂制剂对60分钟间隔平均心率的影响

[0066]

[0067] 讨论与结论

[0068] 数据表明颠茄碱透皮施用会增加猪的心率，峰值大约发生在施用后60分钟。数据还表明基膏本身不会增加心率，制备物的影响来自由颠茄碱本身。

[0069] 含有磷酸生育酚/磷酸双生育酚混合物的制剂G为颠茄碱提供了最好的运送系统。心率加快并与其他制剂相比保持了更长的持续时阊。这在图1中有所体现，在“与基线的差异"标题下0-60分钟和60-120分钟中G的数值最大。表1表明制剂G一贯地较含有lauryliminodipropionate-tocopheryl phosphate的组合物中的类似浓度的颠茄碱更为有效。

[0070] 表2中的数据评定显示出制剂G对制剂H的Log峰值数率、Log时间对峰值、以及重要的Log上升斜率和Log下降斜率具有一贯的增强疗效。

[0071] 还有，本发明的制剂不会导致炎症，因此看来有可能允许较长时间的皮肤接触而不会导致发炎。

[0072] 实例2

[0073] 本实例研究了吗啡对猪的透皮运送。猪的皮肤具有与人的皮肤相近的属性，因此猪是研究药物皮肤运送的理想模型。

[0074] 这项研究是对猪进行吗啡的透皮运送后通过测量尾巴对置于臀部热源(62℃)的退缩反应延迟评定痛觉丧失度。

[0075] 以治疗方法和时间为固定模型，并以猪、重复实验和时间零点时的退缩时间为随机模型，通过残留最大似然(REML，Residualmaximum likelihood)法分析退缩实验数据。最初Log据进行了初步分析，但由于第6小时的一些偏斜数据，因此对这些数据进行Log转换以便于分析。两种分析均给出了本质相同的解释。

[0076] 对以下制剂进行了实验：

[0077]代码 组合物
AGM 吗啡在实例1的制剂G中
AG 无吗啡的制剂G
AHM 吗啡在实例1的制剂H中
AH 无吗啡的制剂H

[0078] 大体来说，使用制备物AGM处理的猪的退缩时间长于其他任何处理方法(见表4，AG、AH、AGM和AHM处理的退缩时间分别为2.63秒、2.88秒、4.82秒和3.17秒)。令人感兴趣的是，处理后6小时的反应最大(图5)，表明具有持续效果，特别是当与对照AG进行比较时。在这里，使用AGM处理的猪在6小时的退缩实验大于AG处理133％。AHM在处理后2小时的退缩时间大于对照AH，但没有持续。AHM不具有AGM所具有的持续性的结果。

[0079] 总之，通过对热处理后1至6小时的尾巴退缩反应的延迟的测量数据表明，，本发明的制剂(AGM)中的吗啡提供迅速持久的痛感丧失。还有，本发明的制剂不会导致炎症，因此看起来有可能允许长时间皮肤接触而不会导致发炎。

[0080] 表4施用热探针后的处理效果与缩爪反应时间(秒1)

[0081]

[0082] 1括号中的数值经过Log转换

[0083] 2时间x处理的差别的标准误差。对于处理和时间效果分别乘以0.511和0.497。

[0084] 实例3

[0085] 本实例研究本发明的各种制剂对给小鼠透皮给药的效果，使用络合的磷酸生育酚作为对照进行比较。

[0086] 方法

[0087] 动物：有清醒状态的Sprague Dawley大鼠(～280克)n=6每组

[0088] 透皮制剂制备物：盐酸吗啡，Glaxo Australia Pty Ltd(编目号22284)。通过加入碳酸钾，在水溶液中由HCL形态衍生出吗啡游离碱。这一过程在Monash大学完成(吗啡HCl不能与膏剂使用，因此使用游离碱)。

[0089] 将吗啡(10mg/kg)用于表5中列出的各个制剂。通过大鼠对热的延迟响应来检测效果，由于吗啡的作用使大鼠缩回爪子的时间延迟。

[0090] 表5：磷酸生育酚的制剂

[0091]成分 用途 Vital-ET1 TP/T2P TPM-01 TPM-01/
M M
二钠磷酸生育酚 透皮剂 2.00％ 2.00％ 2.00％ 7.20％
磷酸双生育酚 1.00％ 1.00％ 1.00％ 3.60％
Lauryldiaminopropionic acid 络合剂 3.00％ - - -
吗啡HCl(USP-NF) 活性成分 - - - 5.4％
Ultrez-10卡波姆-3％溶液 赋形剂 0.36％ 0.36％ - -
卡波姆934USP-NF - - - 0.36％ 0.36％
三羟乙基胺(三乙醇胺)USP 赋形剂 0.25％ 0.25％ 0.25％ 0.25％
Surcide DMDMH 防腐剂 0.10％ 0.10％ - -
Germall 115 防腐剂 - - - -
对羟基苯甲酸甲酯USP-NF，BP 防腐剂 0.10％ - 0.10％ 0.10％
净化水USP-NF 溶剂 QS100％ QS100％ QS100％ QS100％

[0092] 作为对照的基底凝胶包含除磷酸生育酚之外的所有成分。本实验中未使用Vital ET，在这里列出作为Vital ET与本发明的制剂组分进行比较。

[0093] 实验方法

[0094] 足底痛觉计(plantar analgesiometer)是为迅速有效地筛分出小型实验室动物的痛感丧失度而设计。该装置用来将热源(由红外光发出～45℃)施加到后爪，并对后爪缩回所用的时间进行测量(缩爪等待时间)。热板提供持续的表面温度，内置精度为0.1℃的数字湿度计和精度为0.1秒的计时器。将动物置于热板上，装于围绕热板的透明丙烯酸笼中，对舔爪反应进行监测。舔爪反应时间加长表明发生痛觉丧失。

[0095] 大鼠在施用透皮贴剂前至少24小时，在后腿背部皮肤区域施用脱毛膏(麻醉状态下)。清醒状态下的Sprague Dawley大鼠(～400克)接受吗啡剂量为每千克体重10mg的吗啡HCl。该制剂含有10％w/w吗啡HCl。早晨施用一次，在不同时间点对痛觉丧失进行测量。然后用Tegaderm透明敷料将暴露于药物/赋形剂的皮肤区域覆盖。对所有动物都进行吗啡施用前和施用后的痛觉丧失实验。

[0096] 实验结果：

[0097] 图6展示了每种制剂产生的结果。该结果表明反应时间取决于剂量而有所增加，表明出现痛觉丧失。具有吗啡但没有TPM的凝胶对照实验表明使透皮途径有效对TPM的基本要求。实验结果以缩回时间的变化与对照相比较的方式表达，对照值来自使用不完全制剂(即：没有吗啡或TPM)处理大鼠得到的值，以及使用完整制剂处理的大鼠的零时间值，TPM-01/M)。

[0098] 本次研究中使用的制剂包含TP/T2P(或TPM)、吗啡HCl和其他表5中列出的赋形剂。

[0099] 图6展示了明显的剂量响应和持续效果。与两种类型的对照(即，仅有赋形剂没有吗啡和TP/T2P混合的对照凝胶，具有赋形剂和吗啡但没有TP/T2P的对照凝胶)进行比较，结果表明与TP/T2P混合配制时吗啡的运送效果最好。

[0100] 本说明书及权利要求书中出现的词汇“含有”及“含有”的其他表示不将各种变化和添加限制于本发明主张的权利范围之外。对本发明的修改和变化对于本技术领域的技术人员显而易见。这种修改和变化均属于本发明技术方案的范围内。