右旋吗啡喃的神经保护特性

摘要

本发明公开了一种含有吗啡喃化合物的用于治疗帕金森病和精神药物中毒/滥用潜力的药物组合物。

权利要求

1.3-羟基吗啡喃、3-烯丙氧基-17-甲基吗啡喃、3-环丙基甲氧基-17-甲基吗啡喃、

3-甲基-17-甲基-吗啡喃或者其药学可接受的盐用于制备治疗帕金森病、阿尔茨海默病、精神药物中毒或麻醉药依赖的药物的用途。

2.根据权利要求1的用途，其中所述3-羟基吗啡喃、3-烯丙氧基-17-甲基吗啡喃、

3-环丙基甲氧基-17-甲基吗啡喃、3-甲基-17-甲基-吗啡喃或者其药学可接受的盐为设计来为人类口腔摄取的形式，并且以充分减少帕金森病、阿尔茨海默病、精神药物中毒或麻醉药依赖的症状的治疗有效剂量存在。

3.根据权利要求2的用途，其中所述3-羟基吗啡喃、3-烯丙氧基-17-甲基吗啡喃、

3-环丙基甲氧基-17-甲基吗啡喃、3-甲基-17-甲基-吗啡喃或者其药学可接受的盐被装在包含易消化的胶囊内。

4.根据权利要求2的用途，其中所述剂量为约250毫克/天或者更少。

5.根据权利要求2的用途，其中所述形式为缓释剂型。

6.根据权利要求2的用途，其中所述药物还包含神经保护剂。

7.根据权利要求1的用途，其中所述帕金森病治疗包括防止黑质中多巴胺产生减少。

8.根据权利要求1的用途，其中所述麻醉药是可卡因、吗啡或去氧麻黄碱。

说明书

右旋吗啡喃的神经保护特性

技术领域

[0001] 本发明涉及一种神经保护化合物。本发明还涉及一种用于治疗多种神经学病症包括帕金森病或帕金森病症状、阿尔茨海默病的学习和记忆受损、对麻醉药如可卡因、吗啡和去氧麻黄碱中毒和或依赖症状的吗啡喃化合物。本发明还涉及这种吗啡喃化合物的药物制剂。

背景技术

[0002] 右甲吗喃(DM，3-甲氧基-17-甲基吗啡喃)是一种非麻醉性吗啡喃衍生物，广泛用作镇咳药已差不多40年了。其由于神经保护特性而引起注意(5，9，17-20，23，24，26，27，33，34，46，50，51)。然而，与大剂量DM摄取有关的儿童毒性事件(43，45)和苯环己哌啶(PCP)类拟精神病反应(8，12，44，53)可能归因于右吗喃(DX，3-羟基-17-甲基吗啡喃)，所述右吗喃是DM的主要代谢产物(50，51)。用于神经保护作用的DM剂量(17-20，50，51)比咳嗽抑制剂量大得多。临床上，大剂量的DM会产生影响精神状态的作用(8，12，19，43-45，
53)。此外，许多国家已将DM作为寻找药物过程的目标化合物(19，43，45)。以前，有人提出DM加强可卡因引起的小鼠的精神作用(13，25)，并且DM本身可在小鼠体内产生精神作用(12，15，20，24，27)。而且，有人证实，长期服用DM，干扰细胞免疫反应(16)，这与PCP引起的免疫抑制作用相似(19)。在过去的十年中，研究者已经证明DM对于神经保护具有N-甲基D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗效应(5，9，19，20，50)。因此，在体内不转化成DX并保留其神经保护作用的DM类似物将会是非常有用的(7，24，27，46，50，51)。

[0003] 最近，为了开发精神作用可以忽略且保留抗惊厥活性/神经保护特性的化合物，合成了一系列在吗啡喃环体系的3位和17位改性的化合物(24)。为了减少PCP类行为副作用(24，39，46)，同时保留抗惊厥作用/神经保护作用，制备出一系列与DM结构相似的3位和17位取代的吗啡喃，但是与DM相比，它们既不能代谢成DX，也不能以较低的比率达到该效果(24)。

[0004] 1-甲基-4-苯基-1，2，5，6-四氢吡啶(MPTP))(3，40)、脂多糖(LPS)(10，28，40)和去氧麻黄碱(MA)(21，22，29)都引起啮齿类动物、灵长类动物以及其它物种的黑质纹状体多巴胺能神经元变性和纹状体多巴胺减少(40)。大量的证据表明DM具有体内(14，47)和体外(33)抗帕金森病的作用。此外，DM改善左旋多巴相关的帕金森病的运动波动和运动障碍，但是DM的窄治疗指数和影响精神状态的作用限制了它的临床应用(52)。

[0005] 因此，在神经生物学领域，需要一种基本没有不可接受的副作用的神经保护药物化合物，比如，可以治疗帕金森病的症状而不引起其它不利的心理作用的化合物。

发明内容

[0006] 本发明涉及一种神经保护化合物或者含有神经保护化合物的组合物。一方面，本发明涉及一种治疗帕金森病的药物组合物，其包含有效抗帕金森病量的3-羟基吗啡喃(HM)或者其中3位和17位被派生的3-羟基吗啡喃(HM)的吗啡喃衍生物，包括但不限于3-烯丙氧基-17-甲基吗啡喃(AM)、3-环丙基甲氧基-17-甲基吗啡喃(CM)和3-甲基-17-甲基-吗啡喃(DF)，或者其生理可接受的盐，以及药用载体或赋形剂。所述组合物可以包含吗啡喃化合物的混合物。具体而言，本发明涉及3-羟基吗啡喃。所述组合物还可以包含其它神经保护剂或任何其它药理可接受化合物。所述组合物可以是缓释剂型。

[0007] 在本发明的另一方面，本发明涉及一种治疗帕金森病的单位剂量制剂，以设计来为人类口腔摄取的形式包含上述吗啡喃或其药学可接受的盐，其中吗啡喃或其盐的存在剂量使得吗啡喃在充分减少帕金森病症状方面是治疗有效的，而不引起不可接受的副作用。所述单位剂量制剂可以包含易消化的胶囊，所述胶囊内装有吗啡喃或者其药学可接受的盐。在该制剂中，预期吗啡喃的含量可以是约250毫克/天或更少。

[0008] 在另一方面，本发明涉及一种治疗帕金森病或帕金森病症状的方法，包括向需要这种治疗的患者或动物施用有效抗帕金森病量的上述组合物。在这种治疗方法中，所述组合物可以包含上述吗啡喃化合物的混合物。具体而言，所述吗啡喃化合物可以是3-羟基吗啡喃。此外，在该方法中，所述组合物可以是缓释剂型。而且，所述组合物可以包含易消化的胶囊，所述胶囊内装有吗啡喃或者其药学可接受的盐。此外，所述组合物的施用量可以是约250毫克/天或更少。并且所述组合物可以进一步包含神经保护剂。

[0009] 在又一方面，本发明涉及一种防止对象的黑质(substantia nigra)中多巴胺产生减少的方法，包括向所述对象施用保护有效量的上述组合物。

[0010] 本发明还涉及一种治疗或预防阿尔茨海默病症状的药物组合物，其包含有效抗阿尔茨海默病量的3-羟基吗啡喃(HM)或者其中3位和17位被派生的3-羟基吗啡喃(HM)的吗啡喃衍生物，包括但不限于3-烯丙氧基-17-甲基吗啡喃(AM)、3-环丙基甲氧基-17-甲基吗啡喃(CM)和3-甲基-17-甲基-吗啡喃(DF)，或者其生理可接受的盐，以及药用载体或赋形剂。所述组合物可以包含吗啡喃化合物的混合物。具体而言，本发明涉及3-羟基吗啡喃。所述组合物可以进一步包含其它神经保护剂或任何其它药理可接受化合物。所述组合物可以是缓释剂型。具体而言，可以治疗与阿尔茨海默病相关的学习和记忆受损。在这点上，本发明还涉及治疗或预防与阿尔茨海默病相关的学习和记忆受损的方法，包括向需要这种治疗的患者或动物施用有效抗阿尔茨海默病量的上述组合物。

[0011] 在另一方面，本发明还涉及用于治疗麻醉药或精神药物中毒或依赖症状的药物组合物，其包含有效抗中毒量的3-羟基吗啡喃(HM)或者其中3位和17位被派生的3-羟基吗啡喃(HM)的吗啡喃衍生物，包括但不限于3-烯丙氧基-17-甲基吗啡喃(AM)、3-环丙基甲氧基-17-甲基吗啡喃(CM)和3-甲基-17-甲基-吗啡喃(DF)，或者其生理可接受的盐，以及药用载体或赋形剂。所述组合物可以包含吗啡喃化合物的混合物。具体而言，本发明涉及3-羟基吗啡喃。所述组合物可以进一步包含其它神经保护剂或任何其它药理可接受化合物。所述组合物可以是缓释剂型。在这点上，本发明还涉及治疗麻醉药中毒的方法，包括向需要这种治疗的患者或动物施用有效抗中毒量的上述组合物。具体而言，其中麻醉剂可以是但不限于可卡因、吗啡或去氧麻黄碱。

[0012] 本发明还涉及一种治疗麻醉药依赖的方法，包括向需要这种治疗的患者或动物施用有效抗依赖量的上述组合物。具体而言，麻醉药依赖可以是但不限于可卡因、吗啡或去氧麻黄碱依赖。

[0013] 通过对本发明的下列说明、附图和所附权利要求书，将更加充分地理解本发明的这些和其它目的。

附图说明

[0014] 通过下文的详细说明和仅仅为了说明目的而给出并因此不限制本发明的附图，将更加充分地理解本发明，其中：

[0015] 图1显示作为示例的右旋吗啡喃类似物的化学结构。

[0016] 图2A-2B显示吗啡喃或者苯环己哌啶(PCP)多次给药后的运动行为变化。DM＝右甲吗喃，DX＝右吗喃，HM＝3-羟基吗啡喃，AM＝3-烯丙氧基-17-甲基吗啡喃，CM＝3-环丙基甲氧基-17-甲基吗啡喃，DF＝二甲吗喃。图2A中，在最后的治疗之后30min内，测定动物在水平运动行为中“以cm计的总移动距离”。图2B中，测定运动行为后，在3分钟的监控期间内，使用自动视频跟踪系统分析“绝对转动角度”参数，以检测边缘行为(marginal aactivity)(转圈行为)。每个数值是10只动物的平均值±S.E.M。相对于盐水组，P＜0.05，b c d
P＜0.01，P＜0.001；相对于PCP 2.5mg/kg组，P＜0.05(ANOVA与DMR测试)。

[0017] 图3A-3H显示代表性的运动模式描图；A.盐水注射，腹膜内(i.p.)；B.苯环己哌啶(PCP)5mg/kg，i.p.；C.右甲吗喃(DM)40mg/kg，i.p.；D.右吗喃(DX)40mg/kg，i.p.；E.3-羟基吗啡喃(HM)40mg/kg，i.p.；F.3-烯丙氧基-17-甲基吗啡喃(AM)40mg/kg，i.p.；
G.3-环丙基甲氧基-17-甲基吗啡喃(CM)40mg/kg，intrapentoneal(i.p.)；H.二甲吗喃(DF)40mg/kg，i.p.。注意到使用PCP、DX或DM治疗后边缘行为(转圈行为)的特殊增加。

[0018] 图4显示吗啡喃或苯环己哌啶(PCP)多次给药后条件位置偏好(CPP)特征的变化；DM＝右甲吗喃，DX＝右吗喃，HM＝3-羟基吗啡喃，AM＝3-烯丙氧基-17-甲基吗啡喃，CM＝3-环丙基甲氧基-17-甲基吗啡喃，DF＝二甲吗喃。每个数值是15只动物的平a b c均值±S.E.M。相对于盐水组，P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001；相对于相应剂量的DMd e f
组，P＜0.05；相对于相应剂量的DX组，P＜0.05，P＜0.01；相对于PCP 2.5mg/kg组，g h
P＜0.05；相对于DX 20mg/kg组，P＜0.05(ANOVA与DMR测试)。

[0019] 图5A-5B显示吗啡喃类似物对MPTP诱导的小鼠运动行为(A)和运动模式(B)的#影响。每个数值是10只动物的平均值±S.E.M(A)。相对于盐水+盐水组，P＜0.01；相＊
对于盐水+MPTP组，P＜0.01。使用MPTP治疗后动物的运动行为/模式的显著降低在HM或者DM的存在下显著增加。这种降低在使用HM治疗的动物体内更加明显。

[0020] 图6A-6B.图6A显示吗啡喃类似物(24mg/kg，i.p.)对使用MPTP治疗的小鼠体内黑质(SN)多巴胺能神经元中酪氨酸羟化酶样免疫反应(TH-IR)的影响。放大倍数为40倍。图6B中每个数值是15只动物的平均值±S.E.M。计算整个SN密部的TH阳性神经元的总数目。使用配有分级目镜的显微镜辨认和计算具有明显染色体(stained somata)的TH阳性神经元。在图像分析系统(Optimas version 6.2)下通过Abercrombie法(1)修正截面# ＊
厚度的神经元总数。相对于盐水+盐水组，P＜0.01；相对于盐水+MPTP组，P＜0.05，(Fischer LSD测试)。

[0021] 图7A-7B显示吗啡喃类似物对LPS诱导的小鼠运动行为(A)和运动模式(B)的# ＊影响。每个数值是10只动物的平均值±S.E.M(A)。P＜0.01，相对于盐水+盐水组；P＊＊
＜0.05，相对于盐水+LPS组； P＜0.01，相对于盐水+LPS组。使用LPS治疗后动物的运动行为/模式的显著降低在HM或者DM的存在下显著增加。这种降低在使用HM治疗的动物体内更加明显。

[0022] 图8A-8B.图8A显示吗啡喃类似物(24mg/kg，i.p.)对使用LPS治疗的小鼠体内黑质(SN)多巴胺能神经元中酪氨酸羟化酶样免疫反应(TH-IR)的影响。放大倍数为40倍。图8B中每个数值是5只动物的平均值±S.E.M。计算整个SN密部的TH阳性神经元的总数目。使用配有分级目镜的显微镜辨认和计算具有明显染色体(stained somata)的TH阳性神经元。在图像分析系统(Optimas version 6.2)下通过Abercrombie法(1)修正截面# ＊
厚度的神经元总数。相对于盐水+盐水组，P＜0.01；相对于盐水+MPTP组，P＜0.05，(Fischer LSD测试)。

[0023] 图9显示去氧麻黄碱(MA)研究的试验表。小鼠以2h的时间间隔接受4次MA.HCl注射(7.5mg/kg，i.p.，以游离碱(free base)计)。在每次MA治疗后的40min时记录直肠温度。每一吗啡喃施用2次，第一次注射MA前4小时40分钟和40分钟。最后的MA注射3天后处死小鼠。

[0024] 图10A-10B显示吗啡喃对去氧麻黄碱(MA)引起的高热的影响。在22±0.5℃的环境温度下，小鼠以2h的时间间隔接受MA的i.p.注射(4次，每次7.5mg/kg)。在每次MA治疗(箭头＝MA注射)后的40min时记录直肠温度。HM在减弱MA引起的高热方面是最有# ＊效的。每个数值是12只动物的平均值±S.E.M。P＜0.01，相对于盐水组；P＜0.05，相＊＊
对于MA单用组； P＜0.01，相对于MA单用组(ANOVA进行多次测试)。

[0025] 图11A-11B显示吗啡喃类似物对去氧麻黄碱(MA)引起的小数运动行为(A)和运#动模式(B)的影响。每个数值是10只动物的平均值±S.E.M(A)。P＜0.01，相对于盐水＊
+盐水组；P＜0.01，相对于盐水+MA组。使用MA治疗后动物的运动行为/模式的显著降低在HM或者DM的存在下显著增加。这种降低在使用HM治疗的动物体内更加明显。

[0026] 图12A-12B显示吗啡喃类似物(24mg/kg，i.p.)对使用去氧麻黄碱(MA)治疗的小鼠体内黑质(SN)多巴胺能神经元中酪氨酸羟化酶样免疫反应(TH-IR)的影响。放大倍数为40倍。图12B中，每个数值是5只动物的平均值±S.E.M。计算整个SN密部的TH阳性神经元的总数目。使用配有分级目镜的显微镜辨认和计算具有明显染色体(stained somata)的TH阳性神经元。在图像分析系统(Optimas version 6.2)下通过Abercrombie法(1)修正# ＊
截面厚度的神经元总数。相对于盐水+盐水组，P＜0.01；相对于盐水+MA组，P＜0.05，(Fischer LSD测试)。

[0027] 图13显示大鼠大脑皮层膜内CB1受体激动剂[3H]CP55，940特异结合的位移。每个数值是3个独立试验的平均值。

[0028] 图14显示HM(3-羟基吗啡喃)的CB1拮抗特性(部分激动剂)。CP＝CP 55，940，选择性CB1激动剂，AM-251＝选择性CB1拮抗剂。

[0029] 图15A-15F显示黑质内上次MPTP给药后1周，使用酪氨酸羟化酶进行免疫标记的黑质的代表性照片。HM的神经保护作用受到CB1激动剂ACEA的抵触。在每次MPTP治疗前45min施用CB1激动剂或者拮抗剂，同时在每次MPTP治疗前30min注射HM(20mg/kg，i.p./天，共7天)。在最后一次MPTP之后，施用化合物7天。放大倍数＝40。

[0030] 图16显示CB1受体激动剂ACEA或CB1受体拮抗剂AM-251对HM响应脂多糖(LPS)引起的死亡率的行为的影响。双侧纹状体内注射LPS(一侧：2μg×2)后2周内观察死亡率。注意HM(20mg/kg)的组合治疗没有产生LPS诱导的死亡率。在LPS之后，HM(20mg/kg)连同或者不连同ACEA(2mg/kg)/AM-251(0.3mg/kg)一天注射一次，持续2周。第一次ACEA或者AM-251治疗在LPS之后45min时进行，第一次HM治疗在LPS之后30min时进行。

[0031] 图17A-17F显示黑质内上次LPS施用后2周时，使用酪氨酸羟化酶进行免疫标记的黑质的代表性照片。HM的神经保护作用受到CB1激动剂ACEA的阻碍。放大倍数＝40。

[0032] 图18A-18F显示黑质内上次去氧麻黄碱(MA)施用后3天时，使用酪氨酸羟化酶进行免疫标记的黑质的代表性照片。HM的神经保护作用受到CB1激动剂ACEA的阻碍。MA注射之前和之后3天施用化合物。每次ACEA(2mg/kg)或者AM-251(0.3mg/kg)治疗在HM(20mg/kg)之前15min进行。药物的第一次预处理方法如下：在MA之前45min时进行ACEA或者AM-251治疗，同时在MA之前30min时进行HM治疗。最后一次MA后72h时处死动物。放大倍数＝40。

[0033] 图19显示与左旋多巴连同或不连同卡比多巴的情况相比，MPTP模型内的HM效果评估的试验表。

[0034] 图20A-20B显示卡比多巴、左旋多巴、卡比多巴+左旋多巴和HM对MPTP引起的小＊鼠运动行为(A)和运动模式(B)变化的影响。每个数值是10只动物的平均值±S.E.M。
#
P＜0.05，相对于盐水+MPTP组；P＜0.01，相对于盐水+盐水组(ANOVA与DMR测试)。

[0035] 图21A-21G显示卡比多巴、左旋多巴、卡比多巴+左旋多巴和HM对使用MPTP治疗的小鼠黑质酪氨酸羟化酶样免疫反应性(TH-IR)的影响。每个数值是5只动物的平均值#±S.E.M。计算整个黑质密部的TH阳性神经元的总数目。P＜0.01，相对于盐水+盐水组；
＊
P＜0.05，相对于盐水+MPTP组(ANOVA与DMR测试)。放大倍数＝40。

[0036] 图22显示与左旋多巴连同或不连同卡比多巴的情况相比，LPS模型内的HM效果评估的试验表。

[0037] 图23显示卡比多巴、左旋多巴、卡比多巴+左旋多巴或者HM响应LPS引起的死亡＊率的影响。LPS注射后2周内观察死亡率。 P＜0.01，相对于盐水+LPS组(x2检验)。

[0038] 图24显示HM、卡比多巴、左旋多巴、卡比多巴+左旋多巴对LPS引起的运动减少#(hypolocomotion)的影响。每个数值是10只动物的平均值±S.E.M。P＜0.01，相对于盐＊ ＊＊
水+盐水组；P＜0.05，相对于盐水+LPS组， P＜0.01，相对于盐水+LPS组(ANOVA与DMR测试)。

[0039] 图25显示关于卡比多巴、左旋多巴、卡比多巴+左旋多巴和HM响应LPS的影响的小鼠的典型运动模式。

[0040] 图26A-26J显示关于卡比多巴、左旋多巴、卡比多巴+左旋多或者HM对LPS引起的TH-IR减少的影响的显微照片。放大倍数＝40。

[0041] 图27显示卡比多巴、左旋多巴、卡比多巴+左旋多巴和HM对使用LPS治疗的小鼠黑质酪氨酸羟化酶样免疫反应性(TH-IR)的影响。每个数值是10只动物的平均值±S.E.M。# ＊ ＊＊
P＜0.01，相对于盐水+盐水组；P＜0.05，相对于盐水+LPS组； P＜0.01，相对于盐水+LPS组(ANOVA与DMR测试)。

[0042] 图28显示关于小鼠黑质内F4/80标记的小胶质细胞的感应的典型显微照片。放大倍数＝40。

[0043] 图29显示卡比多巴、左旋多巴、卡比多巴+左旋多巴和HM对使用LPS治疗的小鼠#F4/80免疫反应性的黑质增加的影响。每个数值是6只动物的平均值±S.E.M。P＜0.01，＊ ＊＊
相对于盐水+盐水组；P＜0.05，相对于盐水+LPS组； P＜0.01，相对于盐水+LPS组(ANOVA与DMR测试)。

[0044] 图30显示与左旋多巴连同或不连同卡比多巴的情况相比，去氧麻黄碱模型内的HM效果评估的试验表。

[0045] 图31A-31B显示药物对MA引起的高热的影响。在22.0±0.5℃的环境温度下，小#鼠以2h的时间间隔接受MA注射。每个数值是6只动物的平均值±S.E.M。P＜0.01，相＊
对于盐水组；P＜0.01，相对于MA单用组(ANOVA进行多次测试)。

[0046] 图32显示HM、卡比多巴、左旋多巴、卡比多巴+左旋多巴对MA引起的小鼠运动减＊ #少的影响。每个数值是10只动物的平均值±S.E.M。 P＜0.01，相对于盐水+盐水组；P##
＜0.05，相对于盐水+LPS组，P＜0.01，相对于盐水+LPS组(ANOVA与DMR测试)。

[0047] 图33A-33G显示卡比多巴、左旋多巴、卡比多巴+左旋多巴和HM对使用MA治疗的小鼠黑质酪氨酸羟化酶样免疫反应性(TH-IR)的影响。每个数值是5只动物的平均值#±S.E.M。计算整个黑质密部的TH阳性神经元的总数目。P＜0.01，相对于盐水+盐水组；
＊
P＜0.05，相对于盐水+MA组(ANOVA与DMR测试)。放大倍数＝40。

[0048] 图34A-34B显示吗啡喃对可卡因引起的小鼠活动过度的影响。在可卡因(5和20mg/kg，i.p.)之前30min施用吗啡喃(15和30mg/kg，i.p.)。中央行为指在箱子的中央相对非特异性的运动行为。边缘行为指转圈行为。所有治疗都进行7天。每个数值是6只＊ ＊＊ #
动物的平均值±S.E.M。 P＜0.05，相对于盐水组； P＜0.01相对于盐水组；P＜0.05##
或者 P＜0.01，相对于盐水+相应剂量的可卡因组(ANOVA与DMR测试)。

[0049] 图35A-35D显示二甲吗喃(DF)对可卡因引起的小鼠活动过度的影响。在可卡因(5和20mg/kg，i.p.)之前30min施用DF(20mg/kg，i.p.)。所有治疗都进行7天。每个数＊ ** #值是6只动物的平均值±S.E.M。 P＜0.05，相对于盐水组；P＜0.01相对于盐水组；P##
＜0.05，相对于相应的对照组；p＜0.01，相对于相应的对照组(ANOVA与DMR测试)。

[0050] 图36A-36F显示小鼠大脑背外侧纹状体内Fos相关抗原免疫反应神经元的典型显微镜照片。A：盐水；B：DM(20mg/kg，i.p.)+可卡因(5mg/kg，i.p.)；C：可卡因(5mg/kg，i.p.)；D：DF(20mg/kg，i.p.)+可卡因；E：AM(20mg/kg，i.p.)+可卡因；F：CM(20mg/kg，i.p.)+可卡因。放大倍数100倍。

[0051] 图37显示大麻素CB1受体调节对响应可卡因引起的条件位置偏好的HM介导作＊ ＊＊用的影响。每个数值是10只动物的平均值±S.E.M。相对于盐水治疗组，P＜0.05或# §
P＜0.01；相对于可卡因组，P＜0.05；相对于可卡因+HM组，P＜0.05(ANOVA与DMR测试)。

[0052] 图38显示大麻素CB1受体调节对响应可卡因引起的行为致敏的HM介导作用的影＊ ＊＊响。每个数值是10只动物的平均值±S.E.M。相对于盐水组，P＜0.05或 P＜0.01；
#
相对于可卡因单用组，P＜0.05(ANOVA与DMR测试)。

[0053] 图39A-39D显示吗啡喃对MA引起的小鼠活动过度的影响。每一吗啡喃(20mg/kg，i.p.)在MA(1mg/kg，i.p.)之前30min给药。所有治疗都进行7天。每个数值是6只动物＊ ＊＊的平均值±S.E.M。相对于盐水组，P＜0.05；相对于盐水组， P＜0.01；相对于盐水§
+MA组，P＜0.05(ANOVA与DMR测试)。

[0054] 图40显示小鼠大脑背外侧纹状体内Fos相关抗原免疫反应神经元的典型显微镜照片。A：盐水；B：MA(1mg/kg，i.p.)；C：DM(20mg/kg，i.p.)+MA；D：DF(20mg/kg，i.p.)+MA；E：AM(20mg/kg，i.p.)+MA；F：CM(20mg/kg，i.p.)+MA。放大倍数100倍。

[0055] 图41A-41B显示吗啡喃对MA引起的小鼠致敏的影响。吗啡喃(20mg/kg，i.p.)在洗出期间的最后3天给药。每个数值是6只动物的平均值±S.E.M。相对于盐水+盐＊ ＊＊ #水组，P＜0.05；相对于盐水+盐水组， P＜0.01；相对于相应剂量的盐水+MA组，P＜0.05(ANOVA与DMR测试)。

[0056] 图42显示大麻素CB1受体调节对响应MA引起的条件位置偏好的HM介导作用的影＊ ＊＊响。每个数值是10只动物的平均值±S.E.M。相对于盐水组，P＜0.05或 P＜0.01；
# §
相对于MA单用组，P＜0.01；相对于MA+HM组，P＜0.01(ANOVA与DMR测试)。

[0057] 图43显示大麻素CB1受体调节对响应MA引起的行为致敏的HM介导作用的影响。＊ ＊＊
每个数值是10只动物的平均值±S.E.M。相对于盐水组，P＜0.02， P＜0.01；相对于# §
MA单用组，P＜0.05；相对于MA+HM组，P＜0.01(ANOVA与DMR测试)。

具体实施方式

[0058] 在本申请中，无量词修饰用于指一个和多个目标。如此处所用，“与”一种或多种其它治疗剂“组合”施用包括同时(并行)和以任何顺序连续施用。

[0059] 如本文所用，“有效量”是指足以达到有益的所希望的临床或生物化学效果的量。有效量可以一次性或者分多次施用。为了本发明的目的，有效量的吗啡喃化合物是足以减轻、改善、稳定、逆转、减慢或者延迟疾病状态或病况的进程的量。在本发明的优选实施方案中，“有效量”被定义为能预防黑质中的多巴胺形成减少的量，以及显著减少帕金森病的症状的量。其它形式的有效量可以是用于治疗或预防与阿尔茨海默病相关的学习和记忆受损的量。此外，其它形式的有效量可以指有效治疗麻醉药所致的中毒症状的量，其中所述症状包括但不限于：痛觉丧失，欣快症，呼吸抑制，瞳孔缩小，镇静，烦躁不安，幻觉，精神错乱和癫痫发作。有效量还可以指可用于显著减轻或缓解个体对麻醉药例如但不限于可卡因、吗啡或去氧麻黄碱的依赖。在另一实施方案中，“有效量”被定义为吗啡喃的神经保护有效量。

[0060] 如本文所用，“与”一种或多种其它治疗剂“组合”施用包括同时(并行)和以任何顺序连续施用。

[0061] 如本文所用，用于治疗目的的“哺乳动物”或“对象”是指归类为哺乳动物的任何动物，包括人类，家养和农场动物，还有动物园、运动场的动物或宠物，例如狗，猫，牛，马，羊，猪等等。优选哺乳动物是人类。

[0062] 如本文所用，“神经保护”剂指用来预防由于局部缺血、中风、惊厥或者外伤引起的大脑或者脊髓损伤的药物或者化学试剂。一些必须在事前施用，而其它的可以是事后有效的。它们通过多种机理起作用，但是通常直接或间接地使内生的刺激性氨基酸所产生的损伤最小化。神经保护还包括针对神经退化和神经毒素的保护。此外，“神经保护”是指包括减慢或中断神经元退化进程的干预。神经保护还可以用于预防或推进疾病的发展，如果它可以在征兆之前的阶段被确认的话。

[0063] 如本文所用，“帕金森病”是指一种慢性进行性神经疾病，主要跟晚年黑质中的多巴胺产生减少有关。症状包括佝偻(stooped posture)，静止性震颤，静止性肌肉虚弱，微跛(shuffling gait)，语言障碍，运动困难和心智活动的最终延缓以及痴呆。

[0064] 吗啡喃类似物

[0065] 本发明中神经保护吗啡喃类似物或者衍生物是3位和17位取代的3-羟基吗啡喃。这些类似物可以包括但不限于3位上被氧，氮，卤素，烷基包括乙基，丙基等等取代的取代产物。17位的氮基也可以使用多种基团进行衍生。用于神经保护目的的本发明化合物的示例如下以及如本申请的制备实施例部分中所示。

[0066] 源自3-羟基吗啡喃、保留O的衍生物的合成

[0067] 方案1N，O烷基化

[0068]

[0069] 3位O取代化合物

[0070] 方案1

[0071]

[0072] 1)3-氨基吗啡喃衍生物的合成

[0073] 方案2

[0074]

[0075] 2)3-卤代吗啡喃衍生物的合成

[0076] 如方案3中所示通过在3位上引入锡衍生物而合成卤代化合物和羟甲基衍生物，收率非常低，并且不能由有限量的初始物得到所希望的化合物。

[0077] 方案3

[0078]

[0079] 3)3-乙基吗啡喃衍生物的合成

[0080] 由于不能从上述的2)中得到3-卤代化合物，因此直接在3位加入乙烯基得到相似的衍生物。乙烯基的引入很成功，如下列方案4所示合成出了几种衍生物。

[0081] 方案4

[0082]

[0083] 示例性化合物列表

[0084]

[0085]

[0086]

[0087]

[0088]

[0089]

[0090]

[0091]

[0092]

[0093]

[0094]

[0095]

[0096]

[0097] 吗啡喃和帕金森病

[0098] 大量证据表明右甲吗喃(DM)具有体内和体外抗帕金森作用。然而，众所周知，DM诱导的影响精神状态的作用会限制其临床应用。先前合成了右旋吗啡喃3-羟基吗啡喃(HM)、3-烯丙氧基-17-甲基-吗啡喃(AM)、3-环丙基甲氧基-17-甲基吗啡喃(CM)和二甲吗喃(DF)(BioorgMed Chem Lett 2001；11：1651-1654，Behav.Brain Res.2004；151：267-276，Br.J.Pharmacol.2005；144：908-918)。它们表现出如DM或其主要代谢物右吗喃(DX)中所看到的可忽略的行为副作用。本发明涉及使用右旋吗啡喃治疗或处理帕金森病的症状。DM，HM和CM减轻了1-甲基-4-苯基-1，2，5，6-四氢吡啶(MPTP)、脂多糖(LPS)或去氧麻黄碱(MA)引起的运动功能减退、纹状体内多巴胺及其代谢物水平的减少以及黑质酪氨酸羟基激酶样免疫反应(TH-IR)的减少。虽然AM和DF没有显著影响由MPTP或者LPS引起的这些毒性，但是减轻了MA引起的神经毒性(高热，运动功能减退，纹状体内多巴胺及其代谢物水平的减少，以及黑质TH-IR的减少)。

[0099] 考察了小鼠体内右旋吗啡喃的行为和抗帕金森效果。作为行为副作用的参数，考察PCP引起的行为特征，典型的特征是转圈行为和条件位置偏好(CPP)(13、27、37)。有意思的是，边缘运动模式(转圈行为)跟前面的CPP相似(13、27)。DX的作用在性质上跟PCP相似，跟以前的研究一致(24、27)。尽管DM引起的行为特征表现为不如DX明显，但是观察到它以与剂量相关的方式影响精神状态的作用。更重要的是，吗啡喃环体系的3位(和17)位经过修饰的AM，CM，HM和DF保留神经学活性但具有弱的行为副作用(7、24、27、46)。以前的研究认为AM，CM或者DF抗惊厥/神经保护作用的机制可能是通过σ1受体而不是PCP位点介导(7、24、27、46)。AM，CM或者DF对PCP位点的非常低亲和力显示，作用于PCP位点可能不是吗啡喃的抗惊厥/神经保护作用的先决条件。虽然DM，AM，CM和DF表现出抗惊厥作用，但是HM没有显示出对于海人藻酸(kainate)(24)或者最大电击(27)的抗惊厥作用，这表明HM的药理学作用对于多巴胺能系统来说可能是特异性的。DM迅速通过O-去甲基作用代谢成PCP类化合物DX(50、51、54)。然后DX发生N-去甲基作用得到HM。DX和HM通过葡萄糖苷酸化过程消除。作为替代方案，DM首先通过N-去甲基作用得到3-甲氧基吗啡喃来进行代谢，然后发生O-去甲基反应得到HM(54)。这些代谢过程可有利于降低多巴胺能毒性，但是应当收集更多的证据。与DM或者DX相比，推测3-甲氧基吗啡喃和HM具有较低的CNS活性，但是要考虑吗啡喃施用的途径特异性效果、吗啡喃剂量的影响，以及体内葡萄糖苷酸化能力(54)。

[0100] 虽然DM和DX具有很多共性作用，但是它们的受体结合特征和体内药理学不同(7、27、34、50)。DM在不同的DM识别位点和σ受体结合位点具有高结合力，但是在DX标记的位点具有相对低的亲和力。相比之下，DX对于大脑DX和PCP结合位点具有高亲和力，而对于DM和σ位点具有低至中等的亲和力(50)。因此，高于推荐的镇咳药剂量的DM剂量应当产生与DX相关的类似于PCP的效应(1、2)。此外，DM可能具有混合激动剂的特性(17、
19、20、50、51)，其以低剂量用作非竞争性NMDA受体拮抗剂，但是较高剂量时是部分激动剂(20、48、49)。因此，DM可以与PCP-NMDA-σ受体复合物相互作用(20、48、49、50)。

[0101] 为了减少PCP样行为副作用(24、39)，同时保留神经保护作用，制备出和DM结构相似的一系列的3位和17位取代的吗啡喃，但是不能预期代谢成DX，也不能预期以与DM相比减少的比率达到相同的效果。考虑了醚的尺寸效应和水解速率(24)。

[0102] 帕金森病中，纹状体多巴胺能去神经支配是主要的生物化学损害，主要导致以下临床症状，例如运动不能，张力减退，震颤和姿势不稳(35)。除了开发新的多巴胺能药物，尤其是多巴胺激动剂的多种尝试之外，左旋多巴仍然是治疗帕金森病的“金标”(35)。然而，长期使用出现一些副作用，比如，运动失常，行为波动，幻觉和精神错乱(35、36)。因此，从治疗的角度出发，需要以新的病理生理学研究为基础的新策略。因此，作用于耐左旋多巴的症状或具有神经保护作用的药物将是非常有价值的。

[0103] 已经提议低亲和力的NMDA打开通道的拮抗剂会是抗帕金森病药物的良好替代品。DM具有复杂的药理学特征，包括对于NMDA受体通道的微摩尔亲和力。在2个开放性临床试验中，发现DM显著改善一些帕金森病志愿者症状。而且，注射DM和氯胺酮后看到经利血平治疗的小鼠的活动的适度恢复，但是动物之间具有很大的不同(47)。

[0104] 对人类施用NMDA受体拮抗剂的一个主要的问题是它们会引起不可接受的副作用。这些副作用包括精神兴奋和记忆损伤，以及肌肉松弛和共济失调。但是理论认为，对于NMDA受体相关离子通道具有低亲和力的化合物可能是最有效的，并且对于可用的很多NMDA受体拮抗剂而言是最低毒性的(32)。在这些NMDA受体拮抗剂中，DM大致与这些理论模型匹配，在几个小组的先天性帕金森患者中试验，有成功也有失败(47)。

[0105] 早期的报道已经显示NMDA受体阻断可以直接恢复帕金森类小鼠(4)和大鼠(30)的运动性，但是灵长类(6)不行。然而，不是所有实验室都发现了这种现象，这个主题存在争议(14)。

[0106] 相比之下，本申请中公开的右甲吗喃类似物比如HM、AM、CM和DF与NMDA受体相关的PCP位点具有很低的亲和力(7、27)，表明NMDA相关的PCP位点不是它们抗帕金森作用的首要条件。此外，前面的报道表明DM、DX、HM、AM、CM和DF是σ1受体的高亲和配基(7、27、46)。而且，认识到σ1受体调节谷氨酸NMDA受体功能和多巴胺的释放(11)。已经提议将选择性σ1受体配基作为新一类神经退行性疾病的治疗剂的代表，尽管仍然未将其引
3
入治疗应用中(11)。近来，证实了σ1受体激动剂抑制NMDA刺激的[H]多巴胺从大鼠和豚鼠纹状体、前额皮质和伏核(nucleus accumbens)的切片中的释放(2)。此外，σ1受体在多巴胺传递的促进中起到重要作用(31、42)。该现象部分包括在多巴胺合成速率的增加中。不受理论束缚，尽管吗啡喃通过NMDA受体拮抗作用所表现出来的贡献不能被排除，但是吗啡喃的初步作用机制，至少部分地，与σ1受体调节有关。

[0107] 总之，本研究的结果显示DM对MPTP、LPS和MA模型具有突出的抗帕金森作用，但是DM具有行为副作用。更重要的是，其它吗啡喃不产生DM或DX的PCP样行为副作用。而且，HM和CM对MPTP、LPS和MA具有显著的抗帕金森作用。AM和DF有效抑制MA引起的神经毒性。MA引起的多巴胺能毒性长期以来被认为是最重要的帕金森病动物模型之一。

[0108] 治疗制剂

[0109] 吗啡喃及其混合物和/或药学可接受的盐可以口服或透皮或通过静脉，肌内，皮下，鞘内，硬膜外或大脑室内注射来施用。有效的剂量水平可以宽范围变化，例如，约0.25-约250mg/天，当然，实际用量要根据所治疗病人的状态和情况决定。如本领域技术人员所认为的，治疗医师应考虑许多改变此处活性物质的作用的因素，比如患者的年龄、体重、性别、饮食和状态，给药时间，给药速率和给药途径，等等。对于给定系列条件的最佳剂量可以由本领域技术人员根据本文所提供的试验数据利用传统的剂量测定试验来确定。

[0110] 包含吗啡喃、它们的混合物和/或药学可接受的盐的治疗组合物一般由一种或者多种药学可接受成分根据已知的实践制备。因此，吗啡喃，它们的混合物和/或药学可接受的盐可以配制成液体，粉末，酏剂，注射溶液等等。口服制剂可以提供为明胶硬胶囊，其中吗啡喃、它们的混合物和/或药学可接受的盐和惰性固体稀释剂比如碳酸钙、磷酸钙或者高岭土混合，或者提供为明胶软胶囊，其中吗啡喃、它们的混合物和/或者药学可接受的盐和油性介质例如液体石蜡或者橄榄油混合。

[0111] 水性混悬液可以包含吗啡喃，它们的混合物和/或药学可接受的盐和药学可接受的赋形剂比如混悬剂，例如羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，藻酸钠，聚乙烯吡咯烷酮，黄蓍胶和阿拉伯胶；分散剂或者润湿剂比如天然磷脂，例如卵磷脂，或者碱性氧化物与脂肪酸的缩合产物，例如，聚氧乙烯硬脂酸酯，或者环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如，十七烷基乙烯-氧化十六醇(heptadecaethylene-oxycetanol)，或者环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物，例如聚氧化乙烯山梨糖醇一油酸酯，或者环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物，例如聚氧化乙烯山梨糖醇酐一油酸酯。这些水性混悬液还可以包含一种或多种防腐剂，例如乙基-or-正丙基-对-羟基苯甲酸酯，一种或多种着色剂，一种或多种调味剂，以及一种或多种甜味剂，例如蔗糖、糖精或者环己氨基磺酸钠或钙。

[0112] 适用于通过加入水来制备水性混悬液的可分散粉末和颗粒提供与分散剂或者润湿剂、混悬剂和一种或者多种防腐剂混合的吗啡喃、它们的混合物和/或者药学可接受的盐。合适的分散剂或者润湿剂和混悬剂前面已经例举。可以存在另外的赋形剂，例如，甜味剂，调味剂和着色剂。糖浆剂和酏剂可以与甜味剂，例如，甘油，山梨醇或蔗糖一起配制。这些制剂还可包含缓和剂，防腐剂，调味剂和着色剂。

[0113] 吗啡喃、它们的混合物和/或者药学可接受的盐有利地提供为缓释剂型，其中许多种是已知的，例如，美国专利4788055、4816264、4828836、4834965、4834985、4996047、5071646和5133974中所述的那些，所述专利的内容在此处引入作为参考。

[0114] 本发明的范围内还有，在任何其它已知的用于处理或治疗帕金森病症状的药理活性物质之前、同时或之后施用吗啡喃、它们的混合物和/或者药学可接受的盐。这些药理活性物质包括但不限于其它神经保护剂。

[0115] 神经保护剂试图从不可逆损伤中挽救大脑中的缺血性神经元。其它的神经保护剂预防与血流回流有关的潜伏性有害事件。尽管血流回流至大脑通常与输出量提高有关，但是再次灌注会有助于另外的脑损伤。回流的血包含会阻塞小血管并释放毒性产物的白细胞。局部缺血导致刺激性氨基酸受体的过量激活，细胞内钙的积聚，以及引起细胞损伤的其它毒性产物。通过防止刺激性神经递质的释放，神经保护剂可以降低局部缺血对于细胞的有害作用。

[0116] 研究最多的神经保护剂阻断N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体。调节其它非-NMDA受体和通道，还可以减少刺激性神经递质的释放。抗粘附抗体比如可以阻断内皮细胞间粘附分子(ICAM)的单克隆抗体可以用于防止血管壁上的白细胞粘附。因为抗ICAM抗体阻断与再灌注相关的损伤的早期阶段，所以它们显示出有希望的保护神经元功能的机理。其它神经保护剂产生膜稳定性能。例如，CDP-胆碱的外源形式用于膜生物合成并减少了自由基的形成。神经元愈合药物例如碱性成纤维细胞生长因子也可以使用。

[0117] 指导说明

[0118] 本发明还涉及关于使用本发明的吗啡喃治疗多种神经学病症包括帕金森病或帕金森病症状、阿尔茨海默病的学习和记忆受损、对麻醉药如可卡因、吗啡和去氧麻黄碱中毒和或依赖症状的指导说明。这种指导说明可以是永久的或临时的格式。所述指导说明可以是书面形式，例如但不限于教科书、议定书、目录、互联网址等等。这种指导说明可以通过计算机屏幕在阴极射线管、LCD、LED等上提供，只要所述指导说明能够通过眼睛看到即可。所述指导说明还可以为音频/视频媒体的形式，或者作为用于治疗上述各种症状的药盒的一部分。

[0119] 本发明并不限于这里所述的具体实施方案所限定的范围。事实上，根据前述说明和附图，除本文如上所述以外的对本发明的种种改进对于本领域技术人员来说将变得明显。这些改进意于落在所述权利要求书的范围内。所附实施例以描述而不是限制本发明的方式提供。

[0120] 实施例

[0121] 实施例1-制备实施例

[0122] 制备实施例1.1-3-羟基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃2和3-O-(叔丁氧基羰基)-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃3的制备

[0123]

[0124] 向3-羟基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃(200mg，0.62mmol)在干燥的二氯甲烷(3.0ml)中的溶液中，依次加入三乙胺(250μl，1.83mmol)和Boe2O(190mg，0.88mmol)，并在室温下搅拌所述混合物。2h后，减压除去溶剂，剩余物利用硅胶柱层析进行纯化，1
得到化合物2(168mg，79％)和化合物3(43mg，16％)：H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.04～
7.08(3H，m)；3.73(2H，m)；3.68(1H，m)；3.08(2H，m)；2.15(1H，m)；1.83(2H，m)；1.50 ～
1.70(8H，m)；1.40(9H，s)(for 2)，δ7.05～6.83(3H，m)；4.30(0.50H，br)4.00(0.50H，br)；3.85(0.50H，m)；3.68(0.50H，m)；3.05～3.25(1H，m)；2.50～2.70(2H，m)；1.65～
1.80(5H，br)；1.57(9H，s)；1.49(9H，s)；1.15～1.30(6H，m)(对于3而言)。

[0125] 制备实施例1.2-3-O-炔丙基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃4的制备

[0126]

[0127] 向化合物2(22mg，0.064mmol)在干燥的DMF(2.0ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(40mg，0.29mmol)和炔丙基溴(34μl，0.384mmol)，并将混合物在60℃下回流。18h后，向所述混合物中加入氯化钠饱和水溶液(2ml)，并用EtOAc(3ml×3)萃取该混合物。混合的有机层经无水硫酸镁干燥，过滤，并浓缩，粗产物经硅胶柱层析，得到20mg(82％)白色固体：1H NMR (300MHz，CDCl3)δ7.04～6.89(3H，m)；4.70(2H，s)；4.33(0.5H，br)；4.18(0.5H，m)；3.90(0.5H，d)；3.73(0.5H，d)；3.15～3.07(1H，m)；2.59(1H，s)；2.30(1H，br)；1.83(2H，m)；1.60(2H，m)；1.44～1.47(9H，s)；1.15～1.30(8H，m)。

[0128] 制备实施例1.3-3-(2-丙炔基)氧基吗啡喃盐酸盐5的制备

[0129]

[0130] 向化合物4(22mg，0.052mmol)在干燥的DCM(1ml)中的溶液中，加入4N的HCl的1，4-二氧杂环己烷溶液(160μl)，并将混合物在室温下搅拌6h。经TLC而原料消失后，蒸发溶剂。得到18mg(96％)白色固体：

[0131] 1NMR (300MHz，CD3OD)δ7.04 ～ 6.89(3H，m)；4.75(2H，s)；4.33(0.5H，br)；4.18(0.5H，m)；3.90(0.5H，d)；3.73(0.5H，d)；3.15～3.07(1H，m)；2.59(1H，s)；2.30(1H，br)；1.83(2H，m)；1.60(2H，m)；1.15～1.30(8H，m).

[0132] 制备实施例1.3-3-(2-丙炔基)氧基-N-(1-环丙基)甲基吗啡喃6的制备

[0133]

[0134] 向化合物5(6mg，0.017mmol)在干燥的DMF(0.5ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(6.6mg，0.048mmol)和环丙基甲基溴(4.0μl，0.04mmol)，并将混合物在60℃下回流。6h后，向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用DCM(3ml×2)萃取有机物质。混合的有机层经无水硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到4.5mg(79％)白色固体：
1
H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.00 ～ 6.76(3H，m)；4.70(2H，s)；3.18(2H，br)；2.75(2H，m)；
2.68(1H，m)；2.48(1H，d)；2.35(2H，m)；1.56(2H，m)；1；53(1H，br)；1.44(2H，m)；1.25～
1.40(6H，m)；0.95(1H，m)；0.58(2H，s)；0.25(2H，m)。

[0135] 制备实施例1.4-3-(2-炔丙基)氧基-N-烯丙基吗啡喃7的制备

[0136]

[0137] 向化合物5(6mg，0.017mmol)在干燥的DMF(0.5ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(6.6mg，0.048mmol)和烯丙基溴(3.1μl，0.036mmol)，并将混合物在室温下回流。2h后，向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用DCM(2ml×2)萃取该混合物。混合的有1
机层经无水硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到5.1mg(91％)白色固体：H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.73～7.09(3H，m)；5.90(1H，m)；5.14～5.20(2H，m)；4.64(2H，m)；
3.17(2H，m)；2.94(2H，m)；2.85(1H，m)；2.55(1H，d)；2.53(2H，m)；2.00(2H，t)；1.63(2H，br)；1.20～1.48(6H，m)。

[0138] 制备实施例1.5-3-(2-丙炔基)氧基-N-苄基吗啡喃8的制备

[0139]

[0140] 向化合物5(6mg，0.016mmol)在干燥的DMF(0.50ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(6.6mg，0.048mmol)和苄基溴(5.8μl，0.048mmol)，并将混合物在60℃下回流。3h后，向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用EtOAc(3ml×3)萃取该混合物。混合的有机层经无水硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到5.0mg(84％)白色固体：1
H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.73 ～ 7.49(8H，m)；5.30(2H，s)；3.68(2H，br)；3.05(2H，m)；
2.83(1H，br)；2.55(1H，br)；2.35(1H，m)；2.23(1H，m)；1.80(1H，m)；1.13～1.60(10H，m)。

[0141] 制备实施例1.6-3-甲基磺酰氧基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃9的制备

[0142]

[0143] 向化合物2(26mg，0.076mmol)在干燥的DCM(3.0ml)中的溶液中，依次加入三乙胺(32μl，0.23mmol)和甲基磺酰氯(7.6μl，0.098mmol)。并将混合物在60℃下回流。30min后，混合物经无水硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到30mg(94％)白色固体：

[0144] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.04～ 6.89(3H，m)；4.33(0.5H，br)；4.18(0.5H，m)；3.90(0.5H，d)；3.73(0.5H，d)；3.20(3H，s)；3.15～3.07(1H，m)；2.60(1H，m)；2.55(1H，m)；2.30(1H，m)；1.73(2H，m)；1.60(2H，br)；1.44～1.47(9H，s)；1.15～1.30(8H，m).[0145] 制备实施例1.7-3-甲基磺酰氧基吗啡喃盐酸盐10的制备

[0146]

[0147] 向化合物9(27mg，0.019mmol)在干燥的DCM(1.0ml)中的溶液中，加入4N的HCl的1，4-二氧杂环己烷溶液(200μl)，并在室温下搅拌该混合物12h。经TLC而原料消失后，蒸发溶剂，得到25mg(96％)白色固体。

[0148] 制备实施例1.8-3-甲基磺酰氧基-N-(甲基磺酰基)吗啡喃11的制备

[0149]

[0150] 向化合物10(7mg，0.020mmol)在干燥的DCM(1.0ml)中的溶液中，加入三乙胺(32μl，0.23mmol)和甲基磺酰氯(7.6μl，0.098mmol)。将混合物在60℃下回流。2h后，将其经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到7.5mg(94％)白色固体：

[0151] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.2～6.90(3H，m)；4.03(1H，br)；3.68(1H，m)；3.30(2H，m)；3.23(3H，s)；2.82(3H，m)；2.75(3H，s)；2.60(1H，m)；2.35(1H，m)；1.68～1.80(4H，m)；1.25～1.60(6H，m)；1.15～1.20(2H，m)。

[0152] 制备实施例1.9-3-甲基磺酰氧基-N-烯丙基吗啡喃12的制备

[0153]

[0154] 向化合物10(7mg，0.020mmol)在干燥的DMF(0.5ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(6.6mg，0.048mmol)和烯丙基溴(3.0μl，0.036mmol)，并将该混合物在室温下回流。6h后，向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用DCM(2ml×4)萃取该混合物。混合的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到5.0mg(70％)白色固体：

[0155] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.85～7.19(3H，m)；5.90(1H，br)；5.14～5.20(2H，m)；3.14(2H，m)；3.07(3H，s)；2.80(2H，m)；2.40(2H，m)；2.35(1H，d)；1.60～1.90(4H，m)；
1.20～1.48(8H，m).

[0156] 制备实施例1.10-3-甲基磺酰氧基-N-烯丙基吗啡喃13的制备

[0157]

[0158] 向化合物10(7mg，0.020mmol)在干燥的DMF(0.5ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(6.6mg，0.048mmol)和环丙甲基溴(4.0μl，0.04mmol)，并将该混合物在60℃下回流。6h后，向该混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用DCM(3ml×2)萃取该混合物。混合的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到5.5mg(78％)白色固体：

[0159] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.85～7.19(3H，m)；3.07(3H，s)；2.80(2H，m)；2.4～2.60(2H，m)；2.20(2H，m)；2.10(2H，s)；1.700(2H，br)；1.20～1.48(8H，m)；0.80(2H，m)；
0.40(2H，m).

[0160] 制备实施例1.11-3-甲基磺酰氧基-N-苄基吗啡喃14的制备

[0161]

[0162] 向化合物5(7mg，0.020mmol)在干燥的DMF(0.50ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(6.6mg，0.048mmol)和苄基溴(5.8μl，0.048mmol)，并将该混合物在60℃下回流。12h后，向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用EtOAc(3ml×3)萃取该混合物。混合的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到5.9mg(74％)白色固体：

[0163] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.73～7.49(8H，m)；3.68(2H，m)；3.05(3H，s)；2.88(2H，m)；2.65(1H，m)；2.30(1H，m)；2.13(1H，m)；2.00(2H，m)；1.80(1H，m)；1.73(2H，m)；1.40～1.70(6H，m)；1.15～1.33(2H，m).

[0164] 制备实施例1.12-3-苯甲氧基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃15的制备

[0165]

[0166] 向3-羟基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃(20mg，0.058mmol)在干燥的DMF(0.3ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(17mg，0.12mmol)和苄基溴(10μl，0.087mmol)，并将该混合物在60℃下回流。5h后，向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用EtOAc(3ml×3)萃取该混合物。混合的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩，粗产物经柱层析得到22mg(88％)白色固体：
1

[0167] H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.46-7.34(5H，m)；7.00(1H，m)；6.91(1H，m)；6.80(1H，m)；5.04(2H，m)；4.37(0.55H，br)；4.18(0.45H，br)；3.73(1H，m)；3.06(1H，m)；2.65(2H，m)；2.32(1H，m)；1.63-1.08(19H，m).

[0168] 制备实施例1.13-3-苯甲氧基吗啡喃盐酸盐16的制备

[0169]

[0170] 向化合物15(22mg，0.051mmol)在干燥的THF(70μl)中的溶液中，加入4N的HCl的1，4-二氧杂环己烷溶液(110μl)，并将混合物在室温下搅拌2h。经TLC而原料消失后，蒸发溶剂。对粗产物进行简单研磨，得到18mg(97％)白色固体：

[0171] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.43-7.28(5H，m)；7.12(1H，br)；6.88(2H，br)；5.04(2H，m)；3.29(2H，br)；2.90(1H，br)；2.33(2H，br)；1.67-1.10(11H，m).[0172] 制备实施例1.14-3-苯甲氧基-N-(1-环丙基)甲基吗啡喃17的制备

[0173]

[0174] 向化合物16(6mg，0.016mmol)在干燥的DMF(0.16ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(6.6mg，0.048mmol)和环丙基甲基溴(2.3μl，0.024mmol)，并将该混合物在50℃下回流。3h后，向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用EtOAc(3ml×3)萃取该混合物。混合的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到4.5mg(72％)白色固体：

[0175] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.43-7.26(5H，m)；6.99(1H，m)；6.86(1H，m)；6.75(1H，m)；5.01(2H，m)；3.07(1H，br)；2.90(1H，m)；2.67-2.45(3H，m)；2.32-2.28(2H，m)；1.98(1H，m)；1.81-1.25(10H，m)；0.86(1H，br)；0.49(2H，br)；0.09(2H，br).[0176] 制备实施例1.15-3-苯甲氧基-N-烯丙基吗啡喃18的制备

[0177]

[0178] 18

[0179] 向化合物16(6mg，0.016mmol)在干燥的DMF(0.16ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(6.6mg，0.048mmol)和烯丙基溴(2.1μl，0.024mmol)，并将该混合物在50℃下回流。3h后，向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用EtOAc(3ml×3)萃取该混合物。混合的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到5.1mg(85％)白色固体：1

[0180] H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.46-7.30(5H，m)；7.05(1H，m)；6.89(1H，m)；6.80(1H，m)；5.88(1H，br)；5.24-5.15(2H，m)；5.03(2H，m)；3.19(2H，br)；2.94(2H，br)；2.59(2H，m)；2.30(1H，m)；2.04(2H，br)；1.83-1.13(9H，m).

[0181] 制备实施例1.16-3-苯甲氧基-N-苄基吗啡喃19的制备

[0182]

[0183] 向化合物16(6mg，0.016mmol)在干燥的DMF(0.16ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(6.6mg，0.048mmol)和苄基溴(2.9μl，0.024mmol)，并将该混合物在50℃下回流。3h后，向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用EtOAc(3ml×3)萃取该混合物。混合的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到6.2mg(91％)白色固体：1

[0184] H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.43-7.23(10H，m)；6.87(1H，m)；6.86(1H，m)；6.77(1H，m)；5.01(2H，m)；3.73-3.58(2H，m)；2.99(1H，m)；2.83(1H，br)；2.62-2.56(1H，m)；2.43(1H，m)；2.28(1H，m)；2.12(1H，m)；1.85-1.14(10H，m).

[0185] 制备实施例1.17-3-苯甲氧基-N-(甲基磺酰基)吗啡喃20的制备

[0186]

[0187] 向化合物16(6mg，0.016mmol)在干燥的CH2Cl2(0.16ml)中的溶液中，依次加入三乙胺(6.7μl，0.048mmol)和甲基磺酰氯(1.9μl，0.024mmol)，并将该混合物在室温下搅拌2h。向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用EtOAc(3ml×3)萃取该混合物。混合的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到5.7mg(87％)白色固体：

[0188] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.44-7.25(5H，m)；7.04(1H，m)；6.89(1H，m)；6.83(1H，m)；5.05(2H，m)；4.09(1H，m)；3.70(1H，m)；3.38-2.78(6H，m)；2.28(1H，m)；
1.82-1.12(10H，m).

[0189] 制备实施例1.18-3-苯甲氧基-N-(对甲苯磺酰基)吗啡喃21的制备

[0190]

[0191] 向化合物16(6mg，0.016mmol)在干燥的CH2Cl2(0.16ml)中的溶液中，依次加入三乙胺(6.7μl，0.048mmol)和对甲苯磺酰氯(4.6mg，0.024mmol)，并将该混合物在室温下搅拌2h。向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用EtOAc(3ml×3)萃取该混合物。混合的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到7.2mg(92％)白色固体：

[0192] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.71-7.68(2H，m)；7.43-7.26(7H，m)；6.84(2H，m)；6.75(1H，m)；5.00(2H，m)；4.12(1H，m)；3.59(1H，m)；2.89(1H，m)；2.67(1H，m)；2.46(4H，m)；2.26(1H，m)；1.74-1.09(10H，m).

[0193] 制备实施例1.19-3-(4-溴苄氧基)-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃22的制备

[0194]

[0195] 向3-羟基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃(20mg，0.058mmol)在干燥的DMF(0.3ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(17mg，0.12mmol)和对溴苄基溴(22mg，0.087mmol)，将该混合物在60℃下回流。5h后，向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用EtOAc(3ml×3)萃取该混合物。混合的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到26mg(86％)白色固体：

[0196] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.55-7.50(2H，m)；7.36-7.25(2H，m)；7.00(1H，m)；6.87(1H，m)；6.77(1H，m)；5.00(2H，m)；4.37(0.59H，br)；4.18(0.41H，br)；3.75-3.72(1H，m)；3.06(1H，m)；2.67-2.61(2H，m)；2.30(1H，m)；1.65-1.07(19H，m).

[0197] 制备实施例1.20-3-(4-溴苄氧基)吗啡喃盐酸盐23的制备

[0198]

[0199] 向化合物22(26mg，0.050mmol)在干燥的DHF(90μl)中的溶液中，加入4N的HCl的1，4-二氧杂环己烷溶液(130μl)，并将该混合物在室温下搅拌2h。经TLC而原料消失后，减压除去溶剂，对粗产物进行简单研磨得到18mg(96％)白色固体：

[0200] 1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.57-7.51(2H，m)；7.41-7.35(2H，m)；7.17(1H，m)；6.92(2H，m)；5.07(2H，m)；3.26-3.10(2H，m)；2.95-2.81(1H，m)；2.78(1H，m)；2.36(1H，m)；
1.73-1.19(11H，m).

[0201] 制备实施例1.21-3-(4-溴苄氧基)-N-(1-环丙基)甲基吗啡喃24的制备

[0202]

[0203] 向化合物23(6mg，0.016mmol)在干燥的DMF(0.16ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(6.6mg，0.048mmol)和环丙基甲基溴(2.3μl，0.024mmol)，并将混合物在50℃下回流。3h后，向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用EtOAc(3ml×3)萃取该混合物。混合的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到5.7mg(74％)白色固体：

[0204] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.51-7.33(2H，m)；7.30-7.26(2H，m)；7.01(1H，m)；6.84(1H，m)；6.73(1H，m)；4.9g(2H，m)；3.21(1H，br)；2.95-2.85(1H，m)；2.73-2.51(3H，m)；2.32(2H，m)；1.98-1.23(11H，m)；0.75(1H，br)；0.52(2H，br)；0.12(2H，br).[0205] 制备实施例1.22-3-(对溴苄氧基)-N-烯丙基吗啡喃25的制备

[0206]

[0207] 向化合物23(6mg，0.016mmol)在干燥的DMF(0.16ml)中的溶液中，依次加入碳酸钾(6.6mg，0.048mmol)和烯丙基溴(2.1μl，0.024mmol)，并将混合物在50℃下回流。3h后，向混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用EtOAc(3ml×3)萃取该混合物。混合的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到6.3mg(87％)白色固体：

[0208] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.54-7.36(2H，m)；7.31-7.25(2H，m)；7.00(1H，m)；6.82(1H，m)；6.75(1H，m)；5.79(1H，br)；5.28-5.13(2H，m)；5.01(2H，m)；3.21(2H，br)；
2.90(2H，br)；2.62(2H，m)；2.27(1H，m)；2.06(2H，br)；1.85-1.21(9H，m).[0209] 制备实施例1.23-3-羟基-N-(苄氧基羰基)吗啡喃26的制备

[0210]

[0211] 向3-羟基吗啡喃(20mg，0.061mmol)和三乙胺(26μl，0.183mmol)在干燥的二氯甲烷(0.3ml)中的溶液中，于0℃加入氯甲酸苯甲酯(10.5μl，0.073mmol)。将该混合物搅拌2h，并向该混合物中加入NaCl饱和水溶液(2ml)，并用EtOAc(3ml×3)萃取该混合物。混合的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。粗产物经柱层析，得到12mg(51％)标题化合物：

[0212] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.3～7.5(5H，m)6.9(1H，t)；6.8(1H，d)；6.6(1H，t)；5.1(2H，s)；4.3(1H，dd)；3.9(1H，m)；3.1(1H，m)；2.7(2H，m)；2.3(1H，d)；1.0～1.8(10H，m).

[0213] 制备实施例1.24-3-苄氧基羰氧基-N-(苄氧基羰基)吗啡喃27的制备

[0214]

[0215] 向3-羟基吗啡喃(5mg，0.015mmol)和三乙胺(13μl，0.91mmol)在干燥的二氯甲烷(0.3ml)中的搅拌溶液中，于0℃加入氯甲酸苯甲酯(5.2μl，0.036mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌2h。经TLC而原料消失后，除去溶剂，进行柱层析，得到6.3mg(80％)的标题化合物：

[0216] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.3～7.6(10H，m)；7.0(2H，m)；6.9(1H，m)；5.3(2H，s)；5.1(2H，s)；4.3(1H，dd)；3.9(1H，m)；3.1(1H，m)；2.7(2H，d)；2.3(1H，m)；1.0～1.8(10H，m).

[0217] 制备实施例1.25-3-苯胺基羰氧基-N-苯脲基吗啡喃28的制备

[0218]

[0219] 向3-羟基吗啡喃(5mg，0.015mmol)和三乙胺(8.3μl，0.060mmol)在干燥的二氯甲烷(0.3ml)中的搅拌溶液中，于0℃加入苯基异氰酸酯(5μl，0.046mmol)，并将混合物搅拌1h。经TLC而原料消失后，除去溶剂，进行柱层析，得到6.5mg(88％)标题化合物：

[0220] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.4(2H，d)；7.2(6H，m)；7.0(6H，m)；6.3(1H，s)；4.4(1H，s)；3.5(1H，d.d.)；3.1(1H，d.d.)；2.8(2H，m)；2.3(1H，m)；1.籼～1.9(10H，m).[0221] 制备实施例1.26-3-苯胺基羰氧基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃29的制备

[0222]

[0223] 向3-羟基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃(9mg，0.026mmol)和三乙胺(10μl，0.04mmol)在干燥的二氯甲烷(0.3ml)中的搅拌溶液中，加入苯基异氰酸酯(4μl，
0.045mmol)，并将混合物搅拌1h。经TLC而原料消失后，除去溶剂，进行柱层析，得到
11mg(90％)的标题化合物：
1

[0224] H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.4(2H，d)；7.3(2H，t)；7.1(3H，m)；6.9(2H，m)；4.3(1H，m)；3.8(1H，m)；3.1(1H，d.d.)；2.4～2.8(2H，m)；2.3(1H，m)；1.3(9H，s)；1.0～1.7(10H，m).

[0225] 制备实施例1.27-3-苯胺基羰氧基吗啡喃盐酸盐30的制备

[0226]

[0227] 向3-O-苯氨基甲酰基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃D-4(10mg，0.051mmol)在干燥的二氯甲烷(0.5ml)中的溶液中，加入4N的HCl的1，4-二氧杂环己烷溶液(120μl)，并将混合物在室温下搅拌2h。经TLC而原料消失后，将溶剂浓缩。对粗产物进行简单研磨，得到9mg(96％)白色固体：

[0228] 1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.5(2H，d)；7.3(3H，m)：7.1(1H，d)；7.0(2H，m)；3.9(1H，m)；3.0～3.4(3H，m)；2.8(1H，m)；2.5(1H，m)；1.0～1.9(10H，m).

[0229] 制备实施例1.28-N-Boc-3-三甲基乙酰氧基吗啡喃31的制备

[0230]

[0231] 向N-Boc-3-羟基吗啡喃2(20mg，0.058mmol)和三乙胺(9μl，0.064mmol)在干燥的CH2Cl2(1ml)中的溶液中，于0℃缓慢加入三甲基乙酰氯(8μl，0.064mmol)，并将该混合物搅拌1h。减压除去溶剂，将粗产物经硅胶柱层析(5∶1正己烷/EtOAc)而纯化，得到无色油状物(23mg，收率92％)：1

[0232] H NMR(300MHz，CDCl3)9.9 ～ 1.7(m，29H)；2.34(d，J ＝ 9.9Hz，1H)；2.52 ～2.73(m，2H)；3.09～3.17(m，1H)；3.73～3.84(m，1H)；6.83～6.87(m，1H)；6：95(s，1H)；
7.09～7.12(m，1H).

[0233] 制备实施例1.29-N-(1-环丙基)甲基-3-三甲基乙酰氧基吗啡喃33的制备[0234]

[0235] 向N-Boc-3-三甲基乙酰氧基吗啡喃(5mg，0.012mmol)在干燥的CH2Cl2(0.2ml)中的溶液中，加入4M的HCl的二氧杂环己烷溶液(0.5ml)，于0℃搅拌2h。减压蒸发溶剂。将3-三甲基乙酰氧基吗啡喃的粗盐酸盐32溶解于CH3CN(0.5ml)中，并于0℃向其中缓慢加入(溴甲基)环丙烷(2μl，0.020mmol)和TEA(9μl，0.064mmol)。搅拌10h后，减压浓缩反应混合物。将粗产物经硅胶柱层析(95∶5 CH2Cl2/MeOH)而纯化，得到无色油状物(3mg，收率65％)：

[0236] 1H NMR(300MHz，CDCl3)0.43～1.58(m，24H)；2.35～2.52(m，2H)；2.69～2.73(m，1H)；2.90～2.96(m，2H)；3.16～3.35(m，2H)；3.91(s，1H)；6.92～6.96(m，1H)；6.99(s，
1H)；7.17(d，J＝8.2Hz，1H).

[0237] 制备实施例1.30-N-苄基-3-三甲基乙酰氧基吗啡喃34的制备

[0238]

[0239] 向化合物31(5mg，0.012mmol)在干燥的CH2Cl2(0.2ml)中的溶液中，加入4M的HCl的二氧杂环己烷溶液(0.5ml)，并将混合物于0℃搅拌2h。减压蒸发溶剂。将粗胺盐32溶解于CH2Cl2(0.5ml)中，并向其中于0℃缓慢加入苄基溴(2μl，0.020mmol)和TEA(9μl，0.064mmol)。搅拌4h后，反应混合物减压浓缩。将粗产物经硅胶柱层析(3∶1正己烷/EtOAc)而纯化，得到无色油状物(4mg，收率80％)：
1

[0240] H NMR(300MHz，CDCl3)0.91～1.74(m，18H)；1.89(m，J＝12.6Hz，1H)；2.07 ～2.21(m，1H)，2.29～2.48(m，2H)；2.63～2.69(m，1H)；2.87(s，1H)；3.09(d，J＝18.3Hz，
1H)；3.68(dd，J ＝ 13.4Hz，2H)；6.82 ～ 6.93(m，2H)；7.15(d，J ＝ 8.3Hz，1H)；7.25 ～
7.38(m，5H).

[0241] 制备实施例1.31-N-(2-丙炔基)-3-三甲基乙酰氧基吗啡喃35的制备

[0242]

[0243] 向化合物31(5mg，0.012mmol)在干燥的CH2Cl2(1ml)中的溶液中，加入4M的HCl的二氧杂环己烷(0.5ml)，并于0℃将混合物搅拌2h。减压蒸发溶剂。将粗胺盐32溶解于CH2Cl2(0.5ml)中，并于0℃向该混合物中缓慢加入80wt％的炔丙基溴的甲苯(2μl，0.020mmol)溶液和TEA(9μl，0.064mmol)。搅拌4h后，减压浓缩反应混合物。将粗产物经硅胶柱层析(1∶1正己烷/EtOAc)而纯化，得到无色油状物(3mg，收率68％)：

[0244] 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.15～1.87(m，20H)；2.14～2.31(m，2H)；2.67～2.74(m，2H)；3.02(d，J＝18.6Hz，1H)；3.12～3.14(m，1H)；3.36～3.39(m，2H)；6.81～6.93(m，
2H)；7.16(d，J＝8.2Hz，1H).

[0245] 制备实施例1.32-N-(甲基磺酰基)-3-三甲基乙酰氧基吗啡喃36的制备

[0246]

[0247] 向化合物31(5mg，0.012mmol)在干燥的CH2Cl2(0.2ml)中的溶液中，加入4M的HCl的二氧杂环己烷溶液(0.5ml)，并于0℃搅拌2h。减压蒸发溶剂。将粗胺盐32溶解于CH2Cl2(0.5ml)中，并于0℃缓慢加入甲基磺酰氯(2μl，0.030mmol)和TEA(9μl，0.064mmol)。搅拌1h后，减压浓缩反应混合物。将粗产物经硅胶柱层析(3∶1正己烷/EtOAc)而纯化，得到无色油状物(3mg，收率82％)：

[0248] 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.08～1.87(m，20H)；2.36(d，J＝12.4Hz，1H)；2.77 ～2.92(m，5H)；3.51～3.54(m，1H)；4.10～4.15(m，1H)；6.86～6.96(m，2H)；7.13(d，J＝
8.3Hz，1H).

[0249] 制备实施例1.33-3-(三氟甲基磺酰氧基)吗啡喃38的制备

[0250]

[0251] 在0℃ 向化 合物 2(200mg，0.58mmol)和TEA(0.32ml，2.32mmol)在干 燥 的CH2Cl2(5ml)中的溶液中缓慢加入PhNTf2(414mg，1.16mmol)。使反应混合物温热至室温，并搅拌6h。将该溶液用CH2Cl2稀释，用NaHCO3饱和水溶液洗涤，然后用硫酸钠干燥。过滤并使滤液减压浓缩得到粗产物37。向粗产物37在干燥的CH2Cl2(1ml)中的溶液中加入4M的HCl的二氧杂环己烷溶液(5ml)，将该混合物在室温下搅拌5h。真空除去溶剂。将粗胺盐经硅胶柱层析(90∶5∶5的CH2Cl2/MeOH/TEA)纯化，得到淡黄色油状物(184mg，收率85％)：

[0252] 1H NMR(300MHz，CDCl3)0.96～ 2.04(m，12H)；2.27 ～3.18(m，4H)；3.45(s，1H)；7.07～7.15(m，2H)；7.22(s，1H).

[0253] 制备实施例1.34-N-苄基-3-(三氟甲基磺酰氧基)吗啡喃39的制备

[0254]

[0255] 在0 ℃ 向 化 合 物38(50mg，0.13mmol)和 TEA(74μl，0.53mmol)在 干 燥 的CH2Cl2(2ml)的溶液中缓慢加入苄基溴(32μl，0.27mmol)并搅拌5h。减压除去溶剂。将粗产物经硅胶柱层析(90∶5的CH2Cl2/MeOH)纯化，得到无色油状物(51mg，收率84％)：

[0256] 1H NMR(300MHz，CDCl3)1.05～1.72(m，9H)；1.74～1.85(m，1H)；1.90～1.94(m，1H)；1.96～2.05(m，1H)；2.31(d，J＝13.0Hz，1H)；2.48～2.52(m，1H)；2.88～2.91(m，
1H)；3.12(d，J＝18.6Hz，1H)；3.67(dd，J＝13.4Hz，2H)；7.03～7.38(m，8H).[0257] 制备实施例1.35-N-(1-环丙基)甲基-3-(三氟甲基磺酰氧基)吗啡喃40的制备

[0258]

[0259] 在0 ℃ 向 化 合 物38(50mg，0.13mmol)和 TEA(74μl，0.53mmol)在 干 燥 的CH2Cl2(2ml)中的溶液中缓慢加入(溴甲基)环丙烷(25μl，0.26mmol)并将该混合物搅拌5h。减压除去溶剂。将该粗产物经硅胶柱层析(95∶5的CH2Cl2/MeOH)纯化，得到白色固体(43mg，收率77％)：
1

[0260] H NMR(300MHz，CDCl3)0.19～2.10(m，17H)；2.31(d，J＝13.8Hz，1H)；2.47 ～2.59(m，2H)；2.78～2.88(m，2H)；3.30(s，1H)；7.02～7.06(m，1H)；7.13～7.20(m，2H).[0261] 制备实施例1.36-化合物41的制备

[0262]

[0263] 在 圆 底 烧 瓶 中 装 入 Pb(OAc)2(1mg，0.0045mmol)、(S)-(-)-BINAP(3mg，0.0045mmol)和CS2CO3(22mg，0.069mmol)，并用氩气冲洗。向该混合物中加入在DMF(1ml)和二苯甲酮亚胺(13mg，0.069mmol)中的N-(1-环丙基)甲基-3-(三氟甲基磺酰氧基)吗啡喃(40)(20mg，0.046mmol)，将该混合物在80℃加热12h，然后在室温下用2N HCl溶液(3ml)处理2h。减压除去溶剂。将粗产物经硅胶柱层析(95∶5∶5的CH2Cl2/MeOH/TEA)纯化，得到白色固体(10mg，收率73％)：

[0264] 1H NMR(300MHz，CDCl3)0.15～3.24(m，25H)；6.62～6.65(m，1H)；6.75(d，J ＝2.2Hz，1H)；6.94(d，J＝8.2Hz，1H).

[0265] 制备实施例1.37-化合物42的制备

[0266]

[0267] (Ns＝4-硝基苯磺酰基)

[0268] 42

[0269] 在0 ℃ 向 化 合 物41(5mg，0.017mmol)和 TEA(7μl，0.051mmol)在 干 燥 的CH2Cl2(1ml)中的溶液中，缓慢加入4-硝基苯磺酰氯(7mg，0.034mmol)，并将该混合物搅拌1h。减压除去溶剂。将粗产物经硅胶柱层析(95∶5的CH2Cl2二/MeOH)纯化，得到无色油状物(6mg，收率83％)：

[0270] 1H NMR(300MHz，CDCl3)0.19～0.63(m，8H)；0.96～2.11(m，13H)；2.55～3.53(m，6H)；6.83～6.87(m，2H)；7.10(d，J＝8.3Hz，1H)；8.10(d，J＝8.7Hz，2H)；8.38(d，J＝
8.7Hz，2H).

[0271] 制备实施例1.38-化合物43的制备

[0272]

[0273] 在 圆 底 烧 瓶 中 装 入 Pd(OAc)2(1mg，0.0045mmol)、(S)-(-)-BINAP(3mg，0.0045mmol)和CS2CO3(22mg，0.069mmol)，并用氩气冲洗。加入DMF(1ml)中的三氟甲磺酸盐(triflate)39(20mg，0.046mmol)和二苯甲酮亚胺(13mg，0.069mmol)。将该混合物在
80℃下加热12h，然后在室温下用2N HCl水溶液(3ml)处理2h。减压除去溶剂。向粗产物和TEA(17μl，0.127mmol)在干燥的CH2Cl2(1ml)中的溶液中，于0℃缓慢加入4-硝基苯磺酰氯(8mg，0.041mm0l)，并搅拌1h。减压浓缩溶剂。将粗产物经硅胶柱层析(2∶1的正己烷/EtOAc)纯化，得到无色油状物(6mg，收率83％)：
1

[0274] H NMR(300MHz；CDCl3)0.89～2.06(m，12H)；2.46～2.701(m，2H)；2.87(s，1H)；3.06(d，J＝18.6Hz，1H)；3.54～4.10(m，2H)；6.76(s，1H)；6.83～6.86(m，1H)；7.12(d，J＝8.4Hz，1H)；8.04(d，J＝8.8Hz，2H).

[0275] 制备实施例1.39-3-乙烯基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃44的制备

[0276]

[0277] 向3-O-(三氟甲基磺酰基)-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃37(18mg，0.039mmol)在干燥的1，4-二氧杂环己烷(0.8ml)中的溶液中，加入三丁基(乙烯基)锡(17μl，0.059mmol)、LiCl(17.3μl，0.117mmol)，Pd(PPh3)4(17.3μl，0.174mmol)以及少许2，6-二叔丁基-4-甲酚晶体。将所得悬浮液加热回流。经TLC而原料消失后，蒸发溶剂，剩余物经硅胶柱层析，得到8mg(59％)的标题化合物：

[0278] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.25 ～ 7.32(2H，m)7.05(1H，d)；6.62(1H，d.d.)；5.78(1H，d)；5.20(1H，d)；4.30(1H，m)；3.55～4.80(1H，m)；3.10(1H，m)；2.30～2.65(2H，m)；2，05(1H，m)；1.23(9H，s)；1.00～1.80(10H，m).

[0279] 制备实施例1.40-3-乙基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃45的制备

[0280]

[0281] 向3-乙烯基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃44(10mg，0.028mmol)在干燥的甲醇(1ml)中的搅拌溶液中，加入Pd/C(4mg)，烧瓶内通以气球中的氢气。经TLC而原料消失后，蒸发溶剂，剩余物经柱层析，得到7mg(70％)的产物：

[0282] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.06 ～ 7.36(3H，m)；4.37(0.5H，s)；4.19(0.5H，s)；3.88(1H，dd)；3.11(1H，m)；2.63(2H，m)；2.59(2H，m)；2.44(1H，m)；1.60～1.80(4H，m)；
1.40～1.60(9H，d)；0.90～1.40(9H，m).

[0283] 制备实施例1.41-3-乙基吗啡喃盐酸盐46的制备

[0284]

[0285] 向3-乙基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃45(6mg，0.017mmol)在干燥的DCM(1ml)中的溶液中，加入4N的HCl的1，4-二氧杂环己烷(300μl)，并将混合物在室温下搅拌4h。经TLC而原料消失后，蒸发溶剂。

[0286] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.13～7.46(3H，m)；3.27(2H，m)；3.19(2H，s)；2.88(1H，m)；2.81(1H，m)；2.58(2H，m)；1.10～1.80(13H，m).

[0287] 制备实施例1.42-3-乙基-N-烯丙基吗啡喃47的制备

[0288]

[0289] 向3-乙基吗啡喃盐酸盐46(3mg，0.01mmol)在干燥的DMF(0.6ml)中的搅拌溶液中，依次加入碳酸钾(5mg，0.036mmol)、烯丙基溴(5.0μl，0.060mmol)，并将混合物回流。2h后，混合物经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。产物经柱层析，得到～2mg白色固体。

[0290] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.89～7.16(3H，m)；5.80(1H，d)；5.16～5.30(2H，m)；4.00～4.30(1H，dd)；3.68(2H，t)；3.66(1H，m)；3.15(1H，br)；2.68(2H，m)；2.50(2H，m)；
2.38(1H，m)；1.10～1.70(13H，m).

[0291] 制备实施例1.43-3-(1’，2’-二羟乙基)-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃48的制备[0292]

[0293] 向3-乙烯基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃44(10.5mg，0.03mmol)在丙酮∶水＝2∶1溶液(0.3ml)溶液中的搅拌溶液中，加入N-甲基吗啉-N-氧化物(10μl，50wt％，水中)和四氧化锇(一滴)，将混合物在室温下搅拌2h。经TLC而原料消失后，将乙酸乙酯(2ml)和Na2SO3水溶液(2ml)倒入到混合物中，分离有机层，经MgSO4干燥，并浓缩。进行柱层析，得到10mg(87％)的标题化合物：

[0294] 1H NMR(300MHz CDCl3)δ7.29～7.36(1H，m)；7.17～7.10(2H，m)；4.79(1H，d)；4.37(0.55H，br)；4.19(0.45H，br)；3.77～3.66(3H，m)；3.11(1H，m)；2.72～2.41(4H，m)；
2.03(1H，m)；1.71～1.04(19H，m).

[0295] 制备实施例1.44-3-苯氨基甲酰氧基-N-(3-氯丙基)吗啡喃49的制备

[0296]

[0297] 向3-苯氨基甲酰氧基吗啡喃盐酸盐30(2.8mg，0.007mmol)在干燥的DMF(0.15ml)中的搅拌溶液中，依次加入碳酸钾(5.4mg，0.021mmol)、1-溴-3-氯丙烷(1.9μl，0.042mmol)，并在50℃下搅拌混合物。经TLC而原料消失后，浓缩溶剂，并进行柱层析，得到
2.1mg(70％)的标题化合物：

[0298] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.35(4H，m)；7.10(2H，m)；6.85(1H，d)；6.75(1H，d.d.)；6.28(1H，s)；4.38(1H，m)；4.10(2H，t)；3.80(2H，t)；3.65(1H，m)；3.14(1H，d.d.)；2.83(2H，m)；2.37(1H，m)；2.25(2H，m)；1.00～1.80(10H，m).

[0299] 制备实施例1.45-3-苯氨基甲酰氧基-N-(甲基磺酰基)吗啡喃50的制备

[0300]

[0301] 向3-O-苯氨基甲酰氧基吗啡喃盐酸盐30(2.8mg，0.007mmol)和三乙胺(5.4μl，0.042mmol)在干燥的二氯甲烷(0.3ml)中的搅拌溶液中，加入甲基磺酰氯(1.5μl，
0.021mmol)，并在室温下搅拌混合物。经TLC而原料消失后，除去溶剂，并进行柱层析，得到
2.1mg(70％)的标题化合物：

[0302] 1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.48(2H，d)；7.31（2H，t)；7.15(3H，m)；7.04(1H，m)；6.90(1H，s)；4.11(1H，m)；3.55(1H，m)；3.18(1H，m)；2.93(3H，s)；2.84(2H，m)；2.30(1H，d)；1.00～1.80(10H，m).

[0303] 制备实施例1.46-3-苯氨基甲酰氧基-N-乙酰基吗啡喃51的制备

[0304]

[0305] 向3-O-苯氨基甲酰氧基吗啡喃盐酸盐30(2.8mg，0.007mmol)和三乙胺(5.4μl，0.042mmol)在干燥的二氯甲烷(0.3ml)中的搅拌溶液中，加入乙酰氯(1.4μl，
0.021mmol)，并在室温下搅拌混合物。经TLC而原料消失后，除去溶剂，并进行柱层析，得到
2mg(70％)的标题化合物：

[0306] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.45(2H，d)；7.30(2H，t)；7.15(3H，m)；7.03(2H，m)；4.95(1H，m)；3.55(1H，m)；3.15(1H，m)；2.90(1H，m)；2.75(1H，m)；2.30(1H，m)；2.05(3H，s)；1.00～1.80(10H，m).

[0307] 制备实施例1.47-3-(3-氯丙氧基)-N-(苄氧基羰基)吗啡喃52的制备

[0308]

[0309] 向3-羟基-N-(苄氧基羰基)吗啡喃26(3.6mg，0.009mmol)在干燥的DMF(0.16ml)中的搅拌溶液中，依次加入碳酸钾(4mg，0.028mmol)、1-溴-3-氯丙烷(2.8μl，0.028mmol)，并将混合物在50℃下搅拌。经TLC而原料消失后，除去溶剂，并进行柱层析，得到3mg(70％)的标题化合物：
1

[0310] H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.30(5H，m)；7.00(1H，t)；6.83(1H，d)；6.70(1H，d.d.)；5.10(2H，m)；4.30(1H，m)；4.05(2H，t)；3.90(1H，m)；3.79(2H，t)；3.05(1H，m)；2.75(2H，m)；2.30(1H，m)；2.15(2H，m)；1.00～1.80(10H，m).

[0311] 制备实施例1.48-3-(3-氯丙基氧基)-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃53的制备[0312]

[0313] 向3-羟基-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃(20mg，0.058mmol)在干燥的DMF(0.3ml)中的搅拌溶液中，依次加入碳酸钾(24mg，0.174mmol)、1-溴-3-氯丙烷(17.3μl，0.174mmol)，并将混合物在50℃下搅拌。经TLC而原料消失后，除去溶剂，并进行柱层析，得到18mg(74％)的标题化合物：

[0314] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.05(1H，m)；6.83(1H，d)；6.75(1H，d.d.)；4.28(1H，d)；4.05(2H，t)；3.90(1H，m)；3.83(3H，t)；3.15(1H，m)；2.60(2H，m)；2.30(1H，m)；2.15(1H，m)；1.30(9H，s)；1.00～1.80(10H，m).

[0315] 制备实施例1.49-3-(3-氯丙基氧基)吗啡喃盐酸盐54的制备

[0316]

[0317] 向3-(3-氯丙氧基)-N-(叔丁氧基羰基)吗啡喃53(17mg，0.04mmol)在干燥的二氯甲烷(1.0ml)中的搅拌溶液中，加入4N的HCl的1，4-二氧杂环己烷(200μl)溶液，并将混合物在室温下搅拌2h。经TLC而原料消失后，浓缩溶剂。对粗产物进行简单研磨，得到14mg(97％)的白色固体：
1

[0318] H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.15(1H，d)；6.80～7.10(2H，m)；4.05(2H，t)；3.78(2H，t)；3.65(2H，m)；3.30(1H，m)；3.10(2H，m)；2.78(1H，m)；2.45(1H，m)；2.18(2H，m)；1.00～2.00(10H，m).

[0319] 制备实施例1.50-3-(3-氯丙氧基)-N-(甲磺酰基)吗啡喃55的制备

[0320]

[0321] 向3-(3-氯丙氧基)吗啡喃盐酸盐54(3mg，0.008mmol)和三乙胺(7μl，0.050mmol)在干燥的二氯甲烷(0.3ml)中的搅拌溶液中，加入甲磺酰氯(2μl，
0.025mmol)，并在室温下搅拌混合物。经TLC而原料消失后，除去溶剂，并进行柱层析，得到
3mg(88％)的标题化合物：

[0322] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.01(1H，m)；6.85(1H，d)；6.70(1H，d.d)；4.05(3H，m)；3.78(2H，t)；3.56(1H，d.d.)；3.15(1H，d.d.)；2.90(3H，s)；2.83(2H，m)；2.32(1H，m)；
2.20(2H，m)；1.00～1.90(10H，m).

[0323] 制备实施例1.51-3-(3-氯丙氧基)-N-乙酰基吗啡喃56的制备

[0324]

[0325] 向3-(3-氯丙氧基)吗啡喃盐酸盐54(3mg，0.008mmol)和三乙胺(7μl，0.050mmol)在干燥的二氯甲烷(0.3ml)中的搅拌溶液中，加入乙酰氯(1.8μl，
0.025mmol)，并在室温下搅拌混合物。经TLC而原料消失后，除去溶剂，并进行柱层析，得到
2.5mg(82％)的标题化合物：

[0326] 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.96(1H，t)；6.83(1H，d)；6.75(1H，d.d.)；4.92(1H，m)；4.15(2H，t)；3.81(2H，t)；3.75(1H，m)；3.12(1H，m)；2.95(1H，m)；2.62(1H，m)；2.30(1H，m)；2.18(2H，m)；2.05(3H，s)；1.00～1.80(10H，m).

[0327] 制备实施例1.52-3-(3-氯丙氧基)-N-苄基吗啡喃57的制备

[0328]

[0329] 向3-(3-氯丙氧基)吗啡喃盐酸盐54(3mg，0.008mmol)在干燥的DMF(0.15ml)中的搅拌溶液中，依次加入碳酸钾(7mg，0.024mmol)、苄基溴(2μl，0.032mmol)，并在50℃下搅拌混合物。经TLC而原料消失后，浓缩溶剂，并进行柱层析，得到3mg(87％)的标题化合物：1

[0330] H NMR(300 MHz，CDCl3)δ7.15 ～ 7.35(5H，m)；7.05(1H，d)；6.80(1H，s)；6.73(1H，d)；4.10(2H，t)；3.55～3.85(4H，m)；3.05(1H，m)；2.80(1H，m)；2.56(1H，m)；
2.40(1H，m)；2.00～2.30(4H，m)；1.00～1.90(10H，m).

[0331] 试验实施例1-吗啡喃的神经保护作用

[0332] 试验实施例1.1-动物和药物

[0333] 所有动物均严格按照NIH Guide for the Humane Care and Use ofLaboratory Animals(NIH Guide for the Care and Use of LaboratoryAnimals，NIH Publication No.85-23，1985)进行处理。使重约30±3g的C57BL/6雄性小鼠(Bio Genomics，Inc.，Charles River Technology，Gapyung-Gun，Gyeonggi-Do，Korea)保持12∶12小时的日∶夜循环，并且随意进食。使它们适应上述条件2周，然后进行试验。本研究所用的多巴胺能神经毒素是1-甲基-4-苯基-1，2，5，6-四氢吡啶(MPTP，Sigma，St.Louis，MO)、脂多糖(LPS，Sigma Chem，St.Louis，MO)和去氧麻黄碱(MA；NIDA/NIH，USA)。

[0334] 雄性小鼠每天接受MPTP注射(20mg游离碱/kg，s.c.)，连续7天。在最后三天(从第4天到第7天)，每一吗啡喃在每次注射MPTP之前30min施用。最后一次MPTP治疗后24h处死动物。

[0335] 用水合氯醛(200mg/kg，i.p.)麻醉雄性小鼠，并将其置于小型动物立体定位器中。利用立体定位坐标进行LPS向纹状体区域内的注射，从前囟(Franklin和Paxinos，1997)开始测量：后面+0.7mm，侧面±1.0，腹面-3.4。在2min内向纹状体双侧注射LPS(2μg，溶于2μl PBS中)，注射针在注射后保持在原位置2min。对照动物接受PBS的纹状体注射。使用LPS进行纹状体内注射之前，每一吗啡喃两次给药(4小时40分钟和40分钟)(10，28)。

[0336] 由于在药物治疗期间，通过降低周围环境的温度可以阻断MA引起的高热和神经毒性(22，29)，因此将小鼠安置在温度可控(22.0±0.5℃)的群居室内，并在滤过的正压通风条件下将湿度控制在50±5％，12小时/12小时的日夜循环，随意进食和饮水。小鼠以2h的时间间隔接受四次MA盐酸盐注射(7.5mg/kg，i.p.，以游离碱计)(22，29)。每次治疗后60min记录结肠温度。使用温度计(Thermoscan，San Diego，CA)测量结肠温度。在最后一次测量结肠温度后，将动物放回原来的笼中。在最后一次注射MA后第3天处死小鼠(29)。
每一吗啡喃在第一次MA治疗之前4小时40分钟和40分钟时两次给药。

[0337] 试验实施例1.2-吗啡喃

[0338] 所有溶液都是利用蒸馏去离子水或者盐水新鲜配制的。DM氢溴酸购于Sigma Chemical Co.(St.Louis，MO)。合成了右吗喃(DX)酒石酸盐、3-烯丙氧基-17-甲基吗啡喃(AM)氢溴酸盐、3-环丙基甲氧基-17-甲基吗啡喃(CM)氢溴酸盐、和3-羟基吗啡喃(HM)氢溴酸盐(24)、和二甲吗喃(DF)磷酸盐(38，41，46)(图1)。每一化合物以0.1ml/10g的体积进行i.p.注射。

[0339] 试验实施例1.3-运动行为和运动模式

[0340] C57BL/6小鼠每天一次接受每一化合物(20或者40mg/kg，i.p./天)，持续7天。使用每一药物进行最后一次治疗之后10min，测定运动行为30min。测定运动行为之后(即最后一次药物注射之后40min)，用自动视频跟踪系统(Noldus Information Technology，Wagenin，TheNetherlands)分析3分钟监控期间内的“绝对转动角度”，以检测运动模式。在测试箱边界(边缘)处的运动促进分别定义为边缘行为(转圈行为)(13，25，27)。8个试验箱(40×40×30cm高)同时用IBM电脑操作。动物在每个试验箱中运动期间进行单独研究，开始试验前将动物放在试验箱中适应10min。分析动物在水平运动行为中的移动距离，以cm计(13，25，27)。收集并分析0900-1700h之间的数据。

[0341] 试验实施例1.4-条件位置偏好(心理依赖)

[0342] 作为对照，C57BL/6小鼠接受盐水的i.p.注射，之后立即进入白或黑隔间中。施用溶解于盐水(0.1ml/10g)中的每一化合物(20或40mg/kg，i.p.)之后立即将小鼠置于白隔间中(37)。

[0343] 第1天，将小鼠预先暴露在测试装置中5min，提起隔间的闸门，让小鼠在两个隔间之间自由活动。第2天，在15min内记录每只小鼠在每个隔间中所用的时间。第3，5，7，9，11和13天，给小鼠注射每一药物后限制于非偏好侧的白隔间中，达40min。第4，6，8，10和
12天，给小鼠注射盐水后限制于偏好侧的黑隔间中，达40min。第14天，提起闸门。将小鼠初始置于通道内，并在15min内记录小鼠在2个隔间中所用的时间。根据试验和试验前阶段在白隔间中所用时间的差别计算得分(13，27，37)。分析0900-1700h之间的数据。

[0344] 试验实施例1.5-多巴胺及其代谢物检测

[0345] 迅速取出大脑并在冰上切成1mm的冠状截面。用pasteur细管将纹状体冲出(3，21，22)，并在-70℃下保存。通过HPLC电化学检测测量DA及其代谢物3，4-二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)(3，21，22)。简言之，在0.2M的含有3，4-二羟基苄胺作为内标(10mg湿重组织/ml)的高氯酸中均化纹状体。将均化物离心，将20μl试样量的上清液注入到装配有ODS-C18柱的HPLC中。流动相由26ml乙腈、21ml四氢呋喃和960ml 0.15M的含有50mg/l EDTA和200mg/l的辛基硫酸钠的一氯乙酸(pH3.0)组成。通过比较组织试样与标准物的峰高比检测DA、DOPAC和HVA的量，并以纳克/100mg湿重组织表示。

[0346] 试验实施例1.6-免疫细胞化学

[0347] 将含有海马状突起的冠状截面处理用于酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学。使用第一抗体过夜培养之前，将截面在0.2％Triton X-100中预先清洗15min，再用4％的标准山羊血清预先清洗20min。使用第一抗血清培养24h后，再将截面用第二生物素基化的抗血清(1∶800稀释)培养1h。每个培养步骤之间总是将截面用PBS(pH 7.4)洗3次。以3，3’-二氨基联苯胺四盐酸为色原，利用抗生物素蛋白-生物素复合物法(ABC试剂盒，Vector Laboratories，Inc.)使免疫反应细胞显象。抗TH的抗体(24-27，49，61)稀释2,000倍。
在图像分析系统(Optimasversion 6.2；包括Neurolucida程序-对比校正系统用于以背景信号归一化)下通过Abercrombie法(1)修正神经元总数(3，22)。

[0348] 试验实施例1.7-统计

[0349] 数据采用Fischer LSD试验、ANOVA连同Duncan新多重试验以及连同重复试验进行分析。统计显著性定义为p＜0.05。

[0350] 结果

[0351] 试验实施例1.8-吗啡喃或苯环己哌啶(PCP)多次给药后运动行为的变化[0352] 图2-4中总结了行为数据。注射盐水的动物显示基本的运动行为。DX或者DM(20或者40mg/kg)的多次给药显著增加运动行为。与使用DM治疗的那些相比，使用DX治疗的动物的这种效果看起来更加明显。DX所导致的行为特征与PCP相当。尽管使用AM治疗看起来稍微增加了运动行为，但是使用HM、CM或DF治疗之后的运动行为与使用盐水治疗的相当(图2A)。DX以剂量相关的方式(DX 20或者40mg/kg，相对于盐水组，p＜0.01)引起边缘行为(转圈行为)的显著增加。DX引起的行为效果与PCP(PCP 2.5，相对于5.0mg/kg，p＜0.05)相似。相比之下，DM也引起边缘行为的显著增加(DM 20或者40mg/kg对比盐水组，P＜0.05)。然而，与盐水组比较，HM、AM、CM和DF均没有显著影响边缘行为(图2B)。与任何其它组相比，PCP产生强得多的刻板动作(即转圈行为＝边缘行为)(图2A和B)。

[0353] 盐水治疗的动物不显示任何明显的运动模式。使用PCP，DM和DX治疗后，运动模式明显改变，PCP，DM和DX产生边缘行为(转圈行为)。相比之下，HM，AM，CM和DF不以任何运动模式产生边缘行为(图3)。

[0354] 试验实施例1.9-吗啡喃或苯环己哌啶(PCP)多次给药后的条件位置偏好(CPP)特征的变化

[0355] 盐水治疗的动物不显示任何CPP效应。DX治疗的动物以剂量相关的方式(DX 20或者40mg/kg对比盐水组，p＜0.01；DX 20对比40mg/kg，p＜0.01)产生CPP。与DX相同，使用DM治疗也产生CPP(DM 20mg/kg对比盐水组，p＜0.05；DM40mg/kg对比盐水组，p＜0.01)。PCP的CPP最为显著(PCP 5mg/kg对比盐水组，p＜0.001；PCP 2.5对比5.0mg/kg，p＜0.05)。相比之下，HM，CM，AM和DF治疗的动物与盐水治疗的动物相比几乎不显示CPP效应(图4)。

[0356] 试验实施例1.10-吗啡喃对MPTP引起的运动减少(运动行为减少)和多巴胺损失的影响

[0357] 使用MPTP多次治疗(每天20mg/kg，7天)显著减少运动行为(盐水+盐水组对比盐水+MPTP组，P＜0.01)。使用CM(盐水+MPTP组对比CM 24mg/kg+MPTP组，P＜0.05)、DM(盐水+MPTP组对比DM 12或者24mg/kg+MPTP组，P＜0.01)或者HM(盐水+MPTP组对比HM 12或者24mg/kg+MPTP组，P＜0.01)进行预治疗显著预防MPTP引起的运动行为减少(图5A)。它们的行为效果与它们的运动模式一致(图5B)。然而，AM或者DF均没有显著影响MPTP引起的运动活动减退。

[0358] 表1显示使用MPTP治疗的小鼠的纹状体内DA、DOPAC和HVA的水平。没有接受MPTP的动物没有观察到显著差异。MPTP治疗显著降低DA(P＜0.01)、DOPAC(P＜0.01)和HVA(P＜0.01)；使用DM(24mg/kg；DA；P＜0.05，DOPAC；P＜0.05，HVA；P＜0.05)、HM(24mg/kg)(DA；P＜0.01，DOPAC；P＜0.01，HVA；P＜0.01)或者CM(DA；P＜0.05，DOPAC；P＜0.05，HVA；P＜0.05)进行预治疗显著防止这些降低。然而，AM和DF没有改变MPTP引起的DA、DOPAC和HVA的降低。

[0359] 表-1连同或者不连同吗啡喃使用1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(MPTP)治疗的小鼠纹状体内多巴胺(DA)、3，4-二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量[0360]

[0361] 连续7天每天接受MPTP注射(20mg/kg，s.c.)的雄性小鼠。在最后三天，每一吗啡喃在每次MPTP注射之前30min施用。最后一次MPTP注射后24h处死动物。每个数值是8只动物的平均值±S.E.M。aP＜0.01，相对于盐水+盐水组；bP＜0.05，相对于盐水+MPTP组；cP＜0.01，相对于盐水+MPTP组(ANOVA与DMR测试)。

[0362] 图6显示与吗啡喃组合的MPTP治疗所影响的TH样免疫反应(TH-IR)。每只接受盐水的动物显示保持良好的TH-IR。使用MPTP治疗显著降低(P＜0.01)TH阳性细胞的数量。使用HM(24mg/kg)(P＜0.05)、DM(24mg/kg)(P＜0.05)或者CM(24mg/kg)(P＜0.05)进行预治疗显著削弱MPTP引起的TH阳性细胞的减少。结果显示使用MPTP治疗后纹状体内的DA水平与SN中的TH-IR一致。

[0363] 试验实施例1.11-吗啡喃对脂多糖(LPS)引起的运动减少(运动行为减少)和多巴胺损失的影响

[0364] 双侧纹状体内注射LPS(20μg×2)显著减少运动行为(盐水+盐水组对比盐水+LPS组，P＜0.01)。使用CM(盐水+LPS组对比CM 12或24mg/kg+LPS组，P＜0.05)、DM(盐水+LPS组对比DM 12或者24mg/kg+LPS组，P＜0.05)或者HM(盐水+LPS组对比HM 12或者24mg/kg+LPS组，P＜0.05或P＜0.01)进行预治疗显著预防LPS引起的运动行为减少(图7A)。这些行为效果与它们的运动模式一致(图7B)。然而，AM或者DF在削弱LPS引起的运动活动减退方面均没有效果。

[0365] 表2显示使用LPS治疗的小鼠的纹状体内DA、DOPAC和HVA的水平。没有LPS的动物之间没有观察到显著差异。使用LPS的纹状体内注射显著减少DA(P＜0.01)、DOPAC(P＜0.01)和HVA(P＜0.01)；使用DM(24mg/kg；DA；P＜0.01，DOPAC；P＜0.02，HVA；P＜0.02)、HM(24mg/kg)(DA；P＜0.01，DOPAC；P＜0.01，HVA；P＜0.02)或者CM(24mg/kg)(DA；P＜0.05，DOPAC；P＜0.05，HVA；P＜0.05)进行预治疗显著防止这些减少。然而，AM和DF没有改变LPS引起的DA、DOPAC和HVA水平的降低。

[0366] 表-2连同或者不连同吗啡喃使用脂多糖(LPS)处理的小鼠纹状体内多巴胺(DA)、3，4-二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量

[0367]

[0368] 利用立体定位坐标进行LPS向纹状体区域内的注射，从前囟开始测量：后面+0.7mm，侧面±1.0mm，腹面-3.4mm。向纹状体双侧注射LPS(2μg，溶于2μl PBS中)。每一吗啡喃在使用LPS进行纹状体内注射之前4小时40分钟和40分钟时两次给药。LPS治a疗后3周时处死小鼠。每个数值是8只动物的平均值±S.E.M。P＜0.01，相对于盐水+b c d
盐水组；P＜0.02，相对于盐水+LPS组；P＜0.05，相对于盐水+LPS组，P＜0.01，相对于盐水+LPS组(ANOVA与DMR测试)。

[0369] 图8显示连同或不连同吗啡喃进行LPS治疗后的TH样免疫反应(TH-IR)。每只只接受盐水或吗啡喃的动物显示保持良好的TH-IR。使用LPS治疗显著降低(P＜0.01)TH阳性细胞的数量。使用HM(24mg/kg)(P＜0.05)、DM(24mg/kg)(P＜0.05)或者CM(24mg/kg)(P＜0.05)进行预治疗显著削弱由于施用LPS引起的TH阳性细胞的减少。结果显示使用LPS治疗后纹状体内的DA水平与黑质TH-IR一致。

[0370] 试验实施例1.12-吗啡喃对去氧麻黄碱(MA)引起的高热、运动减少和多巴胺(DA)损失的影响

[0371] 已经充分认识到，MA治疗之后的多巴胺能毒性与MA引起的高热有关。本研究所用的吗啡喃都能减弱MA引起的高热(如直肠温度所测定，盐水组相对于MA组，P＜0.01)。5种吗啡喃中(单独使用MA相对于24mg/kg的DM、AM、CM或者DF+MA组，P＜0.05)，HM(单独使用MA相对于24mg/kg的HM+MA组，P＜0.01)在减弱MA引起的高热方面是最有效的(图10)。

[0372] 在最后一次使用MA治疗(7.5mg/kg×4，以两小时的时间间隔)之后第三天观察到显著减少的运动行为(盐水+盐水组相对于盐水+MA组，P＜0.01)。使用吗啡喃进行预治疗显著防止MA引起的运动行为的减少(图11A)。它们的行为效果与它们的运动模式一致(图11B)。HM似乎在防止MA治疗后运动行为减少方面是最有效的(单独使用MA对比12和24mg/kg DM(P＜0.05和P＜0.01)，HM(P＜0.05和P＜0.01)，AM(P＜0.05)，CM(P＜0.05)和DF(P＜0.05))。DM的药理作用和HM相当。

[0373] 表3显示使用MA治疗的小鼠的纹状体内DA、DOPAC和HVA的水平。没有施用MA水平的动物之间没有观察到显著差异。MA治疗显著降低DA(P＜0.01)、DOPAC(P＜0.01)和HVA(P＜0.01)；使用DM(24mg/kg；DA；P＜0.02，DOPAC；P＜0.05，HVA；P＜0.05)、HM(24mg/kg)(DA；P＜0.01，DOPAC；P＜0.01，HVA；P＜0.02)、AM(24mg/kg；DA；P＜0.05，DOPAC；P ＜0.05，HVA；P＜ 0.05)、CM(24mg/kg；DA；P＜ 0.02，DOPAC；P ＜0.05，HVA；P＜0.05)或者DF(24mg/kg；DA；P＜0.05，DOPAC；P＜0.05，HVA；P＜0.05)进行预治疗显著防止这些降低。

[0374] 表-3连同或者不连同吗啡喃使用去氧麻黄碱(MA)治疗的纹状体内多巴胺(DA)、3，4-二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量

[0375]

[0376] 雄性小鼠以2h的时间间隔接受四次MA·HCl注射(7.5mg/kg，i.p.，以游离碱计)。每一吗啡喃在第一次MA治疗之前4小时40分钟和40分钟时两次给药。在最后一次注射MA后第3天处死小鼠。每个数值是8只动物的平均值±S.E.M。aP＜0.01，相对于盐水+盐水组；bP＜0.05，相对于盐水+MA组；cP＜0.02，相对于盐水+MA组；dP＜0.01，相对于盐水+MA组(ANOVA与DMR测试)。

[0377] 图12显示连同或不连同吗啡喃进行MA治疗后的黑质TH样免疫反应(TH-IR)。每只只接受盐水或每一吗啡喃的动物显示保持良好的TH-IR。使用MA治疗显著降低(P＜0.01)TH阳性细胞的数量。使用HM(24mg/kg)(P＜0.05)、DM(24mg/kg)(P＜0.05)、AM(24mg/kg)(P＜0.05)、CM(24mg/kg)(P＜0.05)或者DF(24mg/kg)(P＜0.05)进行预治疗显著削弱由MA引起的TH阳性细胞的减少。一致的是，结果显示在存在或不存在吗啡喃的情况下，使用MA治疗后纹状体DA水平与黑质TH-IR一致。

[0378] 试验实施例2-吗啡喃对大麻素CB1受体的影响

[0379] 试验实施例2.1-HM对于大麻素CB1位点具有高亲和性，并具有CB1受体拮抗特性[0380] 由于近期研究已经表明大麻素CB1受体的阻断对帕金森模型显示有益效果，因此检测3-羟基吗啡喃(HM)对于大麻素CB1位点是否表现出高亲和性，所述3-羟基吗啡喃(HM)是所检测的右旋吗啡喃中对于多巴胺能损伤最有效的吗啡喃。HM对于大麻素CB1位点具有高亲和性(Ki＝11.5nM)(图13)，并且HM具有CB1受体拮抗特性。选择性CB1激动剂CP55，940[1α，2β-(R)-5α-(-)5-(1，1-二甲基)-2-[5-羟基-2-(3-羟丙基)环己基-苯酚]100nM以约120％显著刺激GTPγS结合，而选择性CB1拮抗剂AM-251 100nM以约20％抑制其结合。CP55940引起的GTPγS结合刺激在存在AM 251[N-(哌啶-1-基)-5-(4-碘苯基)-(2，4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-酰胺]的情况下显著减弱。HM 100nM以约60％抑制该结合。CP 55940引起的增加的结合通过使用HM治疗而减少。AM 251减少约三分之一HM引起的结合。因此，HM是CB1受体的部分激动剂，也是CB1受体拮抗剂(图14)。

[0381] 试验实施例2.2-HM削弱MPTP引起的小鼠黑质内降低的酪氨酸羟化酶样免疫反应性(TH-IR)。

[0382] 最后一次使用MPTP(20mg/kg，i.p./天×7)治疗后1天，观察到TH-IR的显著降低。这种TH-IR降低通过使用AM 251治疗而削弱。使用AM-251(0.3mg/kg，i.p.)和HM(20mg/kg，i.p.)的组合治疗比单独使用AM-251治疗对于MPTP引起的TH-IR损失更有效。这种组合的效果与单独使用HM的效果在对抗MPTP方面是等效的。然而，ACEA(花生四烯基(arachidonyl)-2-氯乙酰胺)(2mg/kg，i.p.)与HM的神经保护作用相抵触，表明HM，至少部分地，作为CB1受体拮抗剂起作用(图15)。因此，HM的神经保护作用受到CB1激动剂ACEA的抵触。

[0383] 试验实施例2.3-HM防止LPS引起的死亡作用，并削弱LPS引起的小鼠黑质内降低的酪氨酸羟化酶样免疫反应性(TH-IR)。

[0384] 没有LPS时无动物死亡。双侧纹状体内注射LPS(一侧，2μg×2)后2周内10只小鼠中有6只死亡。AM-251和ACEA都没有显著改变LPS引起的死亡率。在经过HM预治疗的使用LPS治疗的小鼠中，没有动物死亡。ACEA逆转了HM引起的保护(抗死亡)作用。AM-251还表现出阻断LPS引起的死亡率(图16)。

[0385] ACEA没有改变LPS引起的TH-IR降低，但是AM-251削弱这种降低。AM-251和HM的组合治疗在保护LPS引起的神经元损失方面更有效。这种对于LPS危害的神经保护作用与单独使用HM相当。ACEA与HM对LPS引起的TH-IR损失的保护作用相抵触(图17)。

[0386] 试验实施例2.4-HM防止去氧麻黄碱(MA)引起的小鼠黑质内酪氨酸羟化酶样免疫反应性(TH-IR)的降低。

[0387] 和上述的2种神经毒素相似，MA引起的多巴胺能损伤是显著的。ACEA没有改变MA引起的TH-IR降低，但是AM-251削弱这种降低，AM-251和HM的组合治疗在防止MA引起的TH-IR降低方面更有效。这种关于MA毒性的神经保护作用和单独使用HM相当。ACEA逆转了HM对MA引起的TH-IR降低的保护作用(图18)。

[0388] 试验实施例2.5-HM比左旋多巴、卡比多巴或卡比多巴+左旋多巴更有效防止MPTP引起的小鼠运动行为和黑质TH-IR的减少。

[0389] 治疗帕金森患者的处方药是左旋多巴或卡比多巴+左旋多巴。因此，比较HM与左旋多巴、卡比多巴或卡比多巴+左旋多巴的神经保护作用。如图19所示，小鼠接受MPTP(20mg/kg，s.c.)，一天一次，连续7天。最后一次MPTP治疗后，检测运动行为60min。最后一次MPTP给药后24h处死小鼠。首次MPTP激发之前，施用加或者不加卡比多巴(20mg/kg，p.o.)的HM(24mg/kg，i.p.)、左旋多巴(200mg/kg，p.o.)两周。

[0390] MPTP引起运动行为的显著减少(P＜0.01，相对于盐水治疗组)。然而，在存在左旋多巴、卡比多巴和卡比多巴+左旋多巴的情况下，运动行为表现为增加。HM显著增加(P＜0.05对比盐水+MPTP)MPTP引起的活动减少。一致的是，MPTP引起的黑质TH-IR损失(P＜0.01，相对于盐水治疗组)在存在卡比多巴+左旋多巴(P＜0.05对比盐水+MPTP)或者HM(P＜0.05对比盐水+MPTP)的情况下显著削弱。这些结果表明HM比左旋多巴或卡比多巴+左旋多巴更有效(图21)。

[0391] 试验实施例2.6-HM比左旋多巴、卡比多巴或卡比多巴+左旋多巴更有效防止LPS引起的小鼠死亡作用、运动行为、黑质TH-IR的减少以及小胶质细胞的增殖。

[0392] 比较了HM与左旋多巴、卡比多巴或卡比多巴+左旋多巴对LPS引起的多巴胺能损伤的神经保护作用。试验表见图22。LPS的纹状体内注射(2μg×4/头)产生高的死亡率(LPS施用后2周内十二只动物中有十只动物死亡)。尽管单独使用卡比多巴、单独使用左旋多巴或使用卡比多巴+左旋多巴进行预治疗表现为削弱LPS引起的死亡率，但是HM的作用与单独使用卡比多巴、单独使用左旋多巴或使用卡比多巴+左旋多巴相比是最显著的(盐水+LPS相对于HM+LPS，P＜0.01，卡方试验)(图23)。

[0393] LPS治疗后3周，检测运动行为60min。LPS引起的运动行为的显著减少(P＜0.01，相对于盐水治疗组)被左旋多巴(P＜0.05)、卡比多巴+左旋多巴(P＜0.05)或者HM(P＜0.01)削弱(图24和25)。

[0394] 没有LPS时，黑质中的TH-IR丝毫无变化。LPS引起的TH-IR损失通过卡比多巴(P＜0.05)、左旋多巴(P＜0.05)、卡比多巴+左旋多巴(P＜0.05)和HM(P＜0.01)的治疗而显著削弱。HM在削弱LPS引起的TH-IR降低方面是最有效的(图26和27)。

[0395] 在没有LPS的情况下，观察F/80样免疫反应性所标记的小胶质细胞非常小的感应。然而，与盐水处理组对照，LPS引起的小胶质细胞增殖显著增强(P＜0.01)。该F4/80样免疫反应性通过卡比多巴(P＜0.05)、左旋多巴(P＜0.05)、卡比多巴+左旋多巴(P＜0.05)和HM(P＜0.01)的治疗而显著削弱。HM在削弱LPS引起的F4/80样免疫反应性增加方面是最有效的(图28和29)。

[0396] 试验实施例2.7-HM比左旋多巴、卡比多巴或卡比多巴+左旋多巴更有效防止去氧麻黄碱(MA)引起的小鼠高热、运动行为和黑质TH-IR的减少。

[0397] 图30是MA加或者不加化合物时的试验范例。使用MA治疗(7.5mg/kg，i.p.×4次，2h的时间间隔)产生高热(P＜0.01)。卡比多巴、左旋多巴、卡比多巴+左旋多巴或者HM的治疗显著减弱MA引起的高热(图31)。

[0398] 注射MA后3天运动行为的显著减少(P＜0.01)通过左旋多巴、卡比多巴+左旋多巴或者HM的治疗而显著增强。HM的作用比左旋多巴或卡比多巴+左旋多巴更有效(图32)。

[0399] 明显观察到MA引起的黑质TH-IR损失(盐水处理组相对于盐水+MA，P＜0.01)。尽管这种减少通过卡比多巴+左旋多巴的治疗而显著减弱，但是HM的作用比卡比多巴+左旋多巴更明显(图33)。

[0400] 试验实施例3-吗啡喃对药物依赖的影响

[0401] 考察了右旋吗啡喃对药物依赖的有益影响。还考察了吗啡喃对可卡因或去氧麻黄碱(MA)引起的行为副作用的影响。考察了在使用可卡因或者MA的较长时间治疗后，右旋吗啡喃，尤其是右吗喃(DM)、3-甲氧吗啡喃(MM)、3-羟基吗啡喃(HM)、3-烯丙氧基-17-甲氧基吗啡喃(AM)、3-环丙基-17-甲氧基吗啡喃(CM)和二甲吗喃(DF)，对运动行为、条件位置偏好(CPP)或者Fos相关抗原免疫反应性(FRA-IR)的影响。使用可卡因进行较长时间的治疗(每天5或者20mg/kg，i.p.，7天)显著增强运动行为。使用DM(15或者30mg/kg，i.p.)的组合治疗削弱由高剂量可卡因(20mg/kg)引起的运动行为过多。然而，DM(30mg/kg)显著增强低剂量可卡因(5mg/kg)引起的运动行为。相似地，尽管MM(15或者30mg/kg)削弱了高剂量可卡因变化引起的运动行为，但是MM没有改变低剂量可卡因(5mg/kg)引起的运动行为，表明这些吗啡喃将它们的剂量响应曲线偏移到左边。相比之下，其它吗啡喃(HM，AM，CM和DF)一致削弱了低剂量可卡因引起的运动行为，但是它们对于高剂量可卡因引起的运动行为的作用不一致。这4种吗啡喃将它们的剂量响应曲线一致偏移到右边。它们的行为效果特征与纹状体FRA-IR类似。由于吗啡喃(尤其是HM)对于大麻素CB1位点具有相对高的亲和性，并且近期的研究表明，CB1受体的阻断提供防止药物依赖的新方向，因此考察CB1受体是否包括在如条件位置偏好(CPP)和行为致敏所测得的HM对于可卡因引起的心理依赖的药理作用中。显著观察到可卡因引起的CPP。CB1受体激动剂ACEA(2mg/kg，i.p.)产生CPP。然而，HM(20mg/kg)和CB1受体拮抗剂AM251(0.3mg/kg，i.p.)都没有表现出CPP。ACEA没有改变可卡因引起的CPP，但是AM251或HM削弱了可卡因引起的CPP。与接受单剂量可卡因(10mg/kg，i.p.)的小鼠相比，在单剂量的可卡因(10mg/kg，i.p.)之前一个月时使用可卡因预治疗(10mg/kg，i.p./天，共7天)的小鼠显著增加了运动行为，表明可卡因引起的行为致敏在该试验范例中明显产生。尽管HM显著削弱可卡因致敏，但是ACEA和AM 251都没有显著改变可卡因致敏。

[0402] 使用MA进行较长时间的治疗(每天1mg/kg，i.p.，7天)增加了运动行为。使用DM(20mg/kg，i.p.)的组合治疗没有改变MA引起的运动行为。然而，DF(20mg/kg，i.p.)、AM(20mg/kg，i.p.)或者CM(20mg/kg，i.p.)明显减弱(P＜0.05)MA引起的运动行为。这些行为效果与小鼠纹状体FRA-IR的特征一致。在MA(1mg/kg，i.p.×1)单次激发之前7天预治疗的MA(每天1mg/kg，i.p.，7天)产生运动行为的显著增加，表明发生了MA引起的行为致敏。尽管DM不影响MA致敏，但是20mg/kg的每一吗啡喃剂量(DF、AM、CM或HM)显著减弱(P＜0.05)MA致敏。ACEA(2mg/kg，i.p.)和AM 251(0.3mg/kg，i.p.)都不影响MA致敏。然而，ACEA与HM对MA致敏的药理学作用显著冲突，而AM 251没有显著影响HM的作用。

[0403] MA引起的CPP是显著的。单独使用ACEA产生它自己的CPP(P＜0.05，相对于盐水治疗组)。相比之下，ACEA不影响MA所产生的CPP。然而，AM251或HM显著阻断MA所产生的CPP。ACEA逆转了HM对于MA所产生的CPP的药理作用，但是AM 251没有显著影响HM的作用。

[0404] 总之，吗啡喃类似物，尤其是DF、AM、CM和HM具有对于可卡因或MA的抗精神药物潜力。具体而言，HM介导的药理学作用是，至少部分是由于CB1受体的阻断。

[0405] 试验实施例3.1-动物和治疗

[0406] 所有动物均按照NIH关于实验室动物人道主义照料的方针来进行管理。使重约25g的C57BL/6雄性小鼠(Bio Genomics，Inc.，CharlesRiver Technology，Gapyung-Gun，Gyeonggi-Do，Korea)保持12∶12小时的日∶夜循环，并且随意进食。使它们适应这些条件2周，然后进行试验。试验前所有的啮齿类动物都没有药物和疾病发作。将可卡因(NIDA/NIH，Rockville，MD)或者去氧麻黄碱(MA；NIDA/NIH，Rockville，MD)溶解于无菌的盐水中。

[0407] 试验实施例3.2-条件位置偏好(心理依赖)

[0408] 对照组小鼠接受盐水的i.p.注射，之后立即进入白或黑隔间中。施用溶解于盐水中的可卡因或者MA之后立即将小鼠置于白隔间中。为了检测单独使用可卡因或者单独使用MA或者和例举的吗啡喃(DM、HM、AM、CM或者DF)合用的效果，在可卡因或盐水注射之前2h施用每一吗啡喃。

[0409] 第1天，将小鼠预先暴露在测试装置中5min。提起隔间的闸门，让小鼠在两个隔间之间自由活动。第2天，在15min内记录每只小鼠在每个隔间中所用的时间。第3，5，7，9，11和13天，给小鼠注射可卡因后限制于非偏好侧的白隔间中，达20min。第4，6，8，10和
12天，给小鼠注射盐水后限制于偏好侧的黑隔间中，达20min。第14天，提起闸门。将小鼠初始置于通道内，并在15min内记录小鼠在2个隔间中所用的时间。根据试验和试验前阶段在白隔间中所用时间的差别计算得分。

[0410] 试验实施例3.3-运动行为

[0411] 用 自 动 视 频 跟 踪 系 统 (Noldus Information Technology，Wagenin，The Netherlands)测定运动行为。8个试验箱(40×40×30cm高)同时用IBM电脑操作。动物在每个试验箱中运动期间进行单独研究，开始试验前将动物放在试验箱中适应5min。每个过程打印出来的数据显示试验箱非固定运动的模式。分析动物在水平运动行为中的移动距离，以cm计。收集并分析0900-1700h之间的数据。

[0412] 试验实施例3.4-Fos相关的抗原免疫反应(FRA-IR)

[0413] 最后一次注射可卡因/MA后18h，以最大水平引起纹状体内的FRA-IR。因此，最后一次可卡因/MA治疗后18h，取出大脑并用于免疫细胞化学分析。将含有纹状体的冠状截面处理用于FRA-IR免疫细胞化学。使用第一抗体过夜培养之前，将截面在0.2％Triton X-100中预先清洗15min，再用4％的标准山羊血清预先清洗20min。使用第一抗血清培养24h后，再将截面用第二生物素基化的抗血清(1∶800稀释)培养1h。每个培养步骤之间总是将截面用PBS(pH 7.4)洗3次。以3，3’-二氨基联苯胺四盐酸为色原，利用抗生物素蛋白-生物素复合物法(ABC试剂盒，Vector Laboratories，Inc.)使免疫反应细胞显象。
FRA抗体以作为最佳稀释度的1∶2,000使用。利用具有偏振片数字纤维照相机的图像分析系统(Optimas version 6.2)计算纹状体内的FRA-IR。

[0414] 试验实施例3.5-统计分析

[0415] 配对数据采用Student的t检验进行显著性分析，采用ANOVA进行重复试验。接受小于0.05的显著水平用于比较。

[0416] 试验实施例3.6-吗啡喃(DM，MM，AM，CM，HM和DF)对可卡因引起的小鼠运动过多的影响

[0417] 单独使用盐水没有显著改变运动行为。可卡因(5或者10mg/kg)引起运动行为随时间的增加。运动行为的增加在第7次可卡因激发之后比第一次激发之后明显。尽管使用DM或者MM(15或者30mg/kg)治疗(可卡因之前30min)削弱(任一剂量的DM或者MM加20mg/kg的可卡因相对于20mg/kg的可卡因，P＜0.05)高剂量可卡因引起的活动过度，30mg/kg的DM增强低剂量可卡因(5mg/kg，i.p.)所产生的运动行为。类似地，任一剂量的MM都不影响低剂量可卡因介导的运动行为。相比之下，其它吗啡喃一致有效削弱低剂量可卡因引起的运动行为。组合地，它们将剂量响应曲线偏移到右边，表明它们具有抗拟精神病药的作用(图34和35)。

[0418] 试验实施例3.7-吗啡喃(DM，MM，AM，CM，HM和DF)对可卡因引起的小鼠纹状体内Fos相关抗原免疫反应(FRA-IR)的影响

[0419] 由精神药物引起的神经元适应/刺激中的重要转录因子之一FRA在没有可卡因时几乎不能表达。使用可卡因(5mg/kg)进行较长时间的治疗显著引起纹状体内的FRA-IR。DM和MM都不影响这种可卡因介导的FRA-IR的发生。相比之下，可卡因引起的FRA-IR通过使用DF、AM、CM或者HM治疗而明显减弱(图36)。

[0420] 试验实施例3.8-大麻素CB1受体激动剂(ACEA)或者CB1受体拮抗剂(AM-251)对HM介导的响应可卡因引起的CPP的药理学作用的影响

[0421] 盐水、AM-251(0.3mg/kg)治疗的和HM(20mg/kg)治疗的动物都没有显示任何CPP应答。相比之下，ACEA(2mg/kg)治疗的动物显示CPP效果(P＜0.05，相对于盐水治疗的动物)。可卡因(10mg/kg)引起显著的CPP效果(P＜0.01)。ACEA没有改变可卡因引起的CPP效果。然而，AM251或者HM显著减少(P＜0.05)可卡因所产生的CPP。AM251不影响HM对于可卡因引起的CPP的作用。相比之下，ACEA表现为与可卡因引起的CPP相抵触(图37)。

[0422] 试验实施例3.9-大麻素CB1受体激动剂(ACEA)或者CB1受体拮抗剂(AM-251)对HM介导的对于可卡因引起的行为致敏的药理学作用的影响

[0423] 盐水、AM 251(0.3mg/kg)、ACEA(2mg/kg)治疗的和HM(20mg/kg)治疗的动物都没有显示特殊的行为效果。接受单次可卡因激发的动物的可卡因引起的显著行为致敏运动行为相对于在单次可卡因激发之前一个月时使用可卡因进行预治疗(每天10mg/kg，i.p.，7天)的动物的运动行为，P＜0.01]。ACEA和AM251都不改变可卡因引起的行为致敏。然而，HM显著降低(P＜0.05)可卡因所产生的行为致敏。ACEA和AM-251都不显著改变HM对可卡因引起的致敏的作用(图38)。

[0424] 试验实施例3.10-吗啡喃(DM，DF，AM或者CM)对去氧麻黄碱(MA)引起的小鼠运动过多的影响

[0425] 单独使用盐水没有显著改变运动行为。MA(1mg/kg)引起运动行为随时间的增加。使用DM(20mg/kg)治疗(每次MA之前30min)不影响MA(每天1mg/kg，i.p.，7天)引起的活动过度。相比之下，DF、AM或者CM一致有效减弱MA引起的运动过多(图39)。

[0426] 试验实施例3.11-吗啡喃(DM，DF，AM或者CM)对去氧麻黄碱(MA)引起的小鼠纹状体内Fos相关抗原免疫反应(FRA-IR)的影响

[0427] 在不存在MA的情况下，几乎观察不到FRA-IR的发生。使用MA进行较长时间的治疗(每天1mg/kg，i.p.，7天)显著引起纹状体内的FRA-IR。DM不影响这种MA介导的FRA-IR的发生。相比之下，MA引起的FRA-IR通过使用DF、AM或者CM治疗而明显减弱(图40)。

[0428] 试验实施例3.12-DM，DF，AM或者CM对去氧麻黄碱(MA)引起的行为致敏的影响[0429] 盐水治疗的动物在视频跟踪系统下没有显示任何特殊的行为效果。MA引起显著的行为致敏[接受单次MA激发的动物的运动行为相对于在单次MA激发之前一周时使用MA进行预治疗(每天1mg/kg，i.p.，7天)的动物的运动行为，P＜0.05]。DM(20mg/kg，i.p.)没有改变MA引起的行为致敏。然而，使用20mg/kg的DF、AM或者CM，显著减少了MA引起的行为致敏(P＜0.05)(图41)。

[0430] 试验实施例3.13-大麻素CB1受体激动剂(ACEA)或者CB1受体拮抗剂(AM 251)对HM介导的对于MA引起的CPP的药理学作用的影响

[0431] 盐水、AM 251(0.3mg/kg，i.p.)治疗的和HM(20mg/kg)治疗的动物都没有显示任何CPP应答。相比之下，ACEA(2mg/kg，i.p.)治疗的动物显示CPP效果(P＜0.05，相对于盐水治疗的动物)。MA产生显著的CPP效果(P＜0.01)。ACEA没有改变MA引起的CPP效果。然而，AM 251(P＜0.05)或者HM(P＜0.01)显著减少MA产生的CPP。AM 251没有显著影响HM对于MA引起的CPP的作用。相比之下，AECA与HM对MA引起的CPP的影响显著冲突(P＜0.01)(图42)。

[0432] 试验实施例3.14-大麻素CB1受体激动剂(ACEA)或者CB1受体拮抗剂(AM 251)对HM介导的对于去氧麻黄碱(MA)引起的行为致敏的药理学作用的影响

[0433] 盐水、AM 251(0.3mg/kg)、ACEA(2mg/kg)治疗的和HM(20mg/kg)治疗的动物都没有任何行为效果。MA引起显著的行为致敏[接受单次MA激发的动物的运动行为相对于在单次MA激发之前一周时使用MA进行预治疗(每天1mg/kg，i.p.，7天)的动物的运动行为，P＜0.01]。ACEA和AM251都不影响可卡因引起的行为致敏。然而，HM显著减少(P＜0.05)MA引起的行为致敏。尽管ACEA显著逆转HM对于MA引起的致敏的影响(P＜0.05)，但是AM 251不影响MA致敏(图43)。

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[0490] 此处所引用的所有参考文献均通过参考整体并入本文。

[0491] 本领域技术人员将认识到，或者仅仅使用常规试验就能够确定，本文所具体描述的本发明具体实施方案的许多等价方案。这些等价方案预期包括在权利要求范围内。