一种香菇多糖的分离纯化方法

摘要

本发明提供了一种香菇多糖的分离纯化方法，它是将香菇多糖提取液，经浓缩，醇沉，碱溶后再醇沉，沉淀用碱溶后经预处理，脱盐，经DEAE-柱层析，超滤，未透过部分浓缩，经冻干或丙酮等沉淀，得香菇多糖，本方法易于大生产，收率高，产品质量好。

权利要求

1.一种香菇多糖分离纯化方法，它包括如下步骤：a、取新鲜香菇或干香菇采用水或碱溶液提取；

b、提取液浓缩，乙醇沉淀、沉淀用0.1～1.0mol/L碱液溶解，过滤，滤液用酸中和，浓缩，得浓缩液；

c、浓缩液再经乙醇沉淀，丙酮和/或乙醇洗涤，干燥，得香菇多糖粗品；

d、将香菇多糖粗品，用0.1～1.0mol/L碱液溶解，上DEAE-纤维素柱，用碱液洗脱，收集多糖反应阳性部分，再用酸中和，得洗脱液；

e、将d步骤的洗脱液进一步纯化，即得香菇多糖。

2.根据权利要求1所述的香菇多糖分离纯化方法，其特征在于：e步骤所述的进一步纯化方法为：将洗脱液经超滤或透析，超滤液或透析液经DEAE-纤维素吸附、上柱、水洗、碱液洗脱，合并糖反应阳性部分，中和，再超滤；取超滤中未透过液，浓缩冻干，或采用丙酮或乙醇沉淀，沉淀干燥得香菇多糖。

3.根据权利要求1或2所述的香菇多糖分离纯化方法，其特征在于：步骤a所述的水或碱溶液提取方法包括如下任一方法：①热水提取，过滤，得提取液；

②香菇用热水提取后，残渣加碱液浸提，碱液中和后与热水合并得提取；

③香菇直接用碱液浸提，过滤，中和得提取液。

4.根据权利要求1或2所述的香菇多糖分离纯化方法，其特征在于：所述步骤中所述的碱液为碳酸钠和/或碳酸氢钠和/或氢氧化钠和/或氢氧化钾溶液。

5.根据权利要求1所述的香菇多糖分离纯化方法，其特征在于：步骤中所述的酸为盐酸。

说明书

一种香菇多糖的分离纯化方法

技术领域

[0001] 本发明提供了一种香菇多糖的分离纯化方法。

背景技术

[0002] 香菇多糖是香菇中分离出来的一种具有明显抗癌效果的活性物质，于1969年在日本首次被发现，1986年日本首先生产并将香菇多糖制备成粉针剂销售国外，临床主要应用于胃癌、直肠癌等消化系统癌症，它的主要给药途径为静脉滴注或推注，我国于1988年开始进口日本味之素的香菇多糖，并应用于临床。自1982年以来，四川抗菌素研究所、河南省医药工业研究所先后从深层发酵培养的香菇液中提取香菇多糖，名为“香菇菌多糖”，以区别从子实体所提取的香菇多糖。1986年河南开封制药厂生产香菇多糖片。同年卫生部批准福州梅峰制药厂试产“香菇菌多糖片”和“香菇多糖肌肉注射剂”，均对慢性迁延性肝炎有效，可使部分乙型肝炎患者表面抗原转阴；并配合化疗药物治疗晚期食道癌、胃癌也有较好疗效。目前市面上主要是南京振中生物工程有限公司生产的以香菇多糖为原料的注射用香菇多糖。

[0003] 香菇多糖系从香菇子实体中获得的单一组分(I)

[0004]

[0005] 它的提取分离十分复杂且得率很低，成本高。日本专利昭48-6767(1973)；昭49-484(1974)。近来曾有报导采用凝胶柱层析法，但该法只能获得少量供研究用样品，无法应用于生产，而且由于凝胶价格昂贵使成本很高。

[0006] CN1153179A公开了香菇多糖的分离纯化方法，它是由香菇多糖热水提取浓缩、乙醇沉淀、沉淀物溶解后透析，乙醇沉淀所得粗品DEAE-纤维素吸附，不同浓度碱液洗脱，糖反应阳性的洗脱液合并酸中和，超过滤，未透过部份浓缩，冻干即得。所用的原料用干香菇，每10公斤得单一香菇多糖2～2.4g，总收率：0.02％～0.022％。该分离纯化工艺收率低，多糖损失大，且工艺重现性、可操作性差。

发明内容

[0007] 为了克服上述问题，本发明的技术方案是提供了香菇多糖分离纯化方法。本发明还提供该分离方法所得的香菇多糖。

[0008] 本发明提供了一种香菇多糖分离纯化方法，它包括如下步骤：

[0009] a、取新鲜香菇或干香菇或经处理的香菇粉和/或块；

[0010] b、采用水或碱溶液提取；

[0011] c、提取液浓缩，乙醇沉淀、沉淀用碱液溶解，过滤，滤液用酸中和，浓缩，得浓缩液；

[0012] d、浓缩液经乙醇沉淀，用丙酮和/或乙醇洗涤，干燥，得香菇多糖粗品；

[0013] e、将香菇多糖粗品，碱液溶解，上DEAE-纤维素柱，用碱液洗脱，收集多糖反应阳性部分，用酸中和，得洗脱液；

[0014] f、洗脱液经超滤或透析；

[0015] g、超滤或透析液，经DEAE-纤维素吸附、上柱、水洗、碱洗，中和，超滤，脱盐。

[0016] h、取超滤中未透过液浓缩后冻干或采用丙酮或乙醇沉淀，沉淀干燥得香菇多糖。

[0017] 其中，步骤b所述的水或碱溶液提取方法包括如下任一方法：

[0018] ①热水提取，过滤，得提取液；

[0019] ②香菇用热水提取后，残渣加碱液浸提，碱液中和后与热水合并得提取液；

[0020] ③香菇直接用碱液浸提，过滤，中和得提取液。

[0021] 其中，所述步骤中碱液为碳酸钠和/或碳酸氢钠和/或氢氧化钠和/或氢氧化钾溶液。进一步地，所述的碱液的浓度为0.1～1.0mol/L。

[0022] 其中，步骤中所述的酸为盐酸。

[0023] 本发明还提供了该方法制备得到的香菇多糖。

[0024] 本发明香菇多糖的分离纯化方法简便易于生产，成本低，收率高。

[0025] 显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

[0026] 以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

[0027] 实施例1：

[0028] 取净制的鲜香菇25kg，捣碎，加水煎煮2次，第一次6h，第二次3h，滤过，合并滤液。滤液浓缩，加乙醇沉淀，静置，滤过，乙醇洗涤，沉淀用碳酸钠液溶液解，滤过，滤液调pH为
7.0，减压浓缩，加乙醇沉淀，静置，滤过，沉淀用丙酮洗涤，减压干燥得香菇多糖粗品。

[0029] 香菇多糖粗品用碳酸钠溶液溶解，滤过，滤液经DEAE-纤维素预柱预处理，中和。超滤，将浓缩液在减压下浓缩，加入到DEAE-纤维素中让其充分吸咐。然后上柱，水洗，最后用氢氧化钠液洗脱，中和，用中空纤维膜超滤，未透过部份浓缩，丙酮沉淀，过滤，沉淀用丙酮洗涤后，于65℃减压干燥。得香菇多糖2.4g，含量99.5％

[0030] 实施例2