被取代的二氢异喹啉酮化合物

摘要

本发明涉及通式(I)的化合物其中R1、R2、R3、R4、L、X与Z如本申请中所定义，及其药学上可接受的盐，关于包含该化合物与盐的药物组合物，及关于将所述化合物、盐与组合物用于治疗异常细胞生长(包括癌)的方法。

权利要求

1.一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中：

R1选自由下列各项组成的组：H、F、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C(O)R5、C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C1-C4烷基或C1-C4烷氧基各自任选地被一个或多个R6取代，且所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代；

R2是H、F或C1-C4烷基；

L是键或C1-C4亚烷基；

R3选自由下列各项组成的组：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、OH、CN、C(O)R8、COOR9、NR10R11、OR12、C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C1-C4烷基或C1-C4烷氧基各自任选地被一个或多个R6取代，且所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代；

R4是H、卤素或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R6取代；

R5是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

各个R6独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；

各个R7独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基；

R8是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

R9是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

R10与R11独立地是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

R12选自由下列各项组成的组：C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代；

13 15

各个R 独立地是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R 取代；

R14与R15各自独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

2.权利要求1的化合物或盐，其中R2是H。

4

3.权利要求1或2的化合物或盐，其中R是Cl、F、Br或CH3。

4.权利要求1、2或3的化合物或盐，其中X是CH3、OCH3或OCHF2，及Z是CH3。

5.权利要求1至4中任一项的化合物或盐，其中R1是任选地被一个或多个R6取代的C1-C4烷氧基。

6.权利要求5的化合物或盐，其中所述C1-C4烷氧基是OCH3。

7.权利要求1至4中任一项的化合物或盐，其中R1是任选地被一个或多个R6取代的C1-C4烷基。

8.权利要求1至7中任一项的化合物或盐，其中L是键，及R3是任选地被一个或多个R7取代的3至12元杂环基。

9.权利要求8的化合物或盐，其中所述3至12元杂环基选自由下列各项组成的组：氧杂环丁烷基、四氢呋喃基与四氢吡喃基，它们各自任选地被一个或多个R7取代。

10.一种式(I-A)的化合物或其药学上可接受的盐，其中：

1

R是C1-C4烷氧基；

R2是H；

L是键；

R3是3至12元杂环基，其任选地被一个或多个R7取代；

4

R是H或Cl；

R7各自独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基；

R13各自独立地是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R15取代；

15

R 各自独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

11.权利要求10的化合物或盐，其中R3是选自由下列各项组成的组的3至12元杂环基：氧杂环丁烷基、四氢呋喃基与四氢吡喃基，它们各自任选地被一个或多个R7取代。

12.一种化合物，其是5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[(R)-甲氧基(氧杂环丁烷-3-基)甲基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮，或其药学上可接受的盐。

13.一种化合物，其是5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[(R)-甲氧基(氧杂环丁烷-3-基)甲基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。

14.一种化合物，其是5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧杂环丁烷-3-基)甲基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮，或其药学上可接受的盐。

15.一种化合物，其是5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[(S)-甲氧基(氧杂环丁烷-3-基)甲基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮，或其药学上可接受的盐。

16.一种式(III)的化合物或其药学上可接受的盐，其中：

1 3 7

R与R合在一起形成任选地被一个或多个R取代的3至12元杂环基；

R2是H、F或C1-C4烷基；

R4是H、卤素或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R6取代；

R6各自独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；

7 13 13

R各自独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R 、SO2R 或3至6元杂环基；

R13各自独立地是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R15取代；

R15各自独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

17.权利要求16的化合物或盐，其中R1与R3合在一起形成选自由下列各项组成的组的3至12元杂环基：氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基与高哌啶基，它们各自任选地被一个或多个R7取代。

18.权利要求17的化合物或盐，其中R7是CHO、C(O)R13或SO2R13，且R13各自独立地是任选地被一个或多个R15取代的C1-C4烷基。

19.一种药物组合物，其包含权利要求1至18中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体或赋形剂。

20.权利要求1至18中任一项的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗患者中异常细胞生长的药物中的用途。

21.权利要求20的用途，其中所述异常细胞生长是癌。

22.权利要求20或21的用途，其中所述患者是人。

23.权利要求1至18中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗患者中的异常细胞生长。

24.权利要求1至18中任一项的化合物或其药学上可接受的盐与一种或多种另外的抗癌剂的组合。

说明书

被取代的二氢异喹啉酮化合物

[0001] 相关申请的交叉参考

[0002] 本申请请求享有2014年6月17日提交的第62/013,410号美国临时申请与2015年5月4日提交的第62/156,533号美国临时申请的优先权利益，以引用方式将它们各自的全部
内容并入本申请。
发明领域

[0003] 本发明涉及式I、I’、II、II’与III的化合物及其药学上可接受的盐、包含该化合物与盐的药物组合物及其用途。本发明的化合物、盐与组合物可用于治疗或改善异常细胞增生性病症(例如癌)。

[0004] 背景

[0005] 外遗传改变在细胞过程(包括细胞增生、细胞分化与细胞存活)中扮演着重要角色。通过变更CpG岛甲基化模式、组织蛋白修饰与DNA结合蛋白的调节异常，可发生肿瘤抑制基因的外遗传沉默与致癌基因的活化。果蝇Pc基因是一组外遗传效应器。EZH2(zeste同系
物2的增强子)是果蝇Pc基因阻抑物复合物2(PRC2)的催化组分，果蝇Pc基因阻抑物复合物2
是一种通过使组织蛋白H3上的赖氨酸27(H3K27)甲基化来阻抑基因转录的保守多亚基复合
物。EZH2在调节基因表达模式(其调节细胞命运决定，例如分化与自我更新)中扮演着关键
角色。某些癌细胞中过度表达EZH2，其中EZH2和细胞增生、细胞侵袭、化学抗性与转移有关连。

[0006] 在几种癌类型中，高EZH2表达与预后差、癌级数高与癌阶段高有关连，所述癌类型包括乳房癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、胃癌、肝癌、肾癌、肺癌、黑色素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌与膀胱癌。参见Crea等人，Crit.Rev.Oncol.Hematol.2012，83：184-193，以及其中所引用的文献；还参见Kleer等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 2003，100：11606-11；Mimori等人，Eur.J.Surg.Oncol.2005，31：376-80；Bachmann等人，J.Clin.Oncol.2006，24：268-273；Matsukawa等人，Cancer Sci.2006，97：484-491；Sasaki等人Lab.Invest.2008，88：
873-882；Sudo等人，Br.J.Cancer 2005，92(9)：1754-1758；Breuer等人，Neoplasia 2004，
6：736-43；Lu等人，Cancer Res.2007，67：1757-1768；Ougolkov等人，Clin.Cancer 
Res.2008，14：6790-6796；Varambally等人，Nature 2002，419：624-629；Wagener等人，Int.J.Cancer 2008，123：1545-1550；与Weikert等人，Int.J.Mol.Med.2005，16：349-353。

[0007] 在弥散性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)与滤泡性淋巴瘤(FL)中已鉴定出EZH2的再发性体细胞突变。据报告，在多达22％的生发中心B细胞DLBCL与7％的FL中观察到改变EZH2酪氨酸641(例如Y641C、Y641F、Y641N、Y641S与Y641H)的突变。Morin等人Nat.Genetics 2010 Feb；42(2)：181-185。也有丙胺酸677(A677)与丙胺酸687(A687)突变之报告。McCabe等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 2012，109：2989-2994；Majer等人FEBS Letters 2012，586：
3448-3451。业已提出EZH2活化性突变改变底物特异性，其导致高水平的三甲基化的H3K27
(H3K27me3)。

[0008] 因此，抑制野生型和/或突变形式的EZH2的活性的化合物对于癌症的治疗可能是令人感兴趣的。

[0009] 概述

[0010] 本发明一部分提供新颖的化合物与药学上可接受的盐。该化合物可调控EZH2的活性，藉此实现生物学功能，例如通过抑制细胞增生与细胞侵袭、抑制转移、诱发细胞凋亡或抑制血管生成。本发明还提供药物组合物与药物，其包含本发明的化合物或盐，本发明的化合物或盐单独与其它治疗剂或减轻剂(姑息剂)组合。本发明一部分还提供用于制备新颖的
化合物、盐与其组合物的方法，及使用该新颖的化合物、盐与其组合物的方法。

[0011] 一方面，本发明提供一种式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，

[0012]

[0013] 其中：

[0014] R1选自由下列各项组成的组：H、F、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C(O)R5、C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C1-C4烷基或C1-C4烷氧基各自任选地被一个或多个R6取代，且所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个7
R取代；

[0015] R2是H、F或C1-C4烷基；

[0016] L是键或C1-C4亚烷基；

[0017] R3选自由下列各项组成的组：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、OH、CN、C(O)R8、COOR9、10 11 12
NR R 、OR 、C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C1-C4烷基或C1-C4烷氧基各自任选地被一个或多个R6取代，且所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代；

[0018] R4是H、卤素或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R6取代；

[0019] R5是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0020] 各个R6独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；

[0021] 各个R7独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基；

[0022] R8是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0023] R9是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0024] R10与R11独立地是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0025] R12选自由下列各项组成的组：C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代；

[0026] 各个R13独立地是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R15取代；

[0027] R14与R15各自独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及

[0028] X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

[0029] 在有些实施方案中，如式(I-A)或(I-B)所示，式(I)的化合物在具有R1与R2取代基的碳原子上具有绝对立体化学：

[0030]

[0031] 或其药学上可接受的盐，

[0032] 其中：

[0033] R1、R2、L、R3、R4、X与Z具有对于式(I)所定义的含义。

[0034] 另一方面，本发明提供一种式(II)、(II-A)或(II-B)的化合物，或其药学上可接受的盐，

[0035]

[0036] 其中：

[0037] R1、L、R3与X具有对于式(I)所定义的含义；以及

[0038] R4是H、Cl、Br、F或CH3。

[0039] 另一方面，本发明提供一种式(III)的化合物，或其药学上可接受的盐，

[0040]

[0041] 其中：

[0042] R1与R3合在一起形成任选地被一个或多个R7取代的3至12元杂环基；

[0043] R2是H、F或C1-C4烷基；

[0044] R4是H、卤素或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R6取代；

[0045] R6各自独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；

[0046] R7各自独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基；

[0047] R13各自独立地是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R15取代；

[0048] R15各自独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及

[0049] X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

[0050] 另一方面，本发明提供一种药物组合物，其包含本申请中所述式之一的化合物，或其药学上可接受的盐，与药学上可接受的载体或赋形剂。在有些实施方案中，药物组合物包含二种或更多种药学上可接受的载体和/或赋形剂。

[0051] 本发明还提供治疗方法与用途，其包括施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐。

[0052] 一方面，本发明提供一种用于治疗患者的异常细胞生长的方法，其包括将治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐施用给所述患者。

[0053] 在本申请中所提供的方法的常见实施方案中，所述异常细胞生长是癌。在有些实施方案中，所提供的方法导致下列效果中的一种或多种：(1)抑制癌细胞增生；(2)抑制癌细胞侵袭；(3)诱发癌细胞凋亡；(4)抑制癌细胞转移；或(5)抑制血管生成。

[0054] 另一方面，本发明提供一种用于治疗患者的EZH2介导的病症的方法，其包括以治疗该病症有效的量将本发明的化合物或其药学上可接受的盐施用给所述患者。本发明的化
合物与盐可抑制野生型与某些突变型人组织蛋白甲基转移酶EZH2。

[0055] 另一方面，本发明提供本申请中所述式之一的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗患者的异常细胞生长。

[0056] 另一方面，本发明提供本申请中所述式之一的化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于治疗患者的异常细胞生长。

[0057] 另一方面，本发明提供本申请中所述式之一的化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制备用于治疗异常细胞生长的药物。

[0058] 在常见实施方案中，所述异常细胞生长是癌，且所述患者是人。

[0059] 在有些实施方案中，本申请中所述的方法进一步包括将一定量的抗癌治疗剂或减轻剂施用给所述患者，所述的量可一起有效治疗所述的异常细胞生长。在有些实施方案中，所述一种或多种抗癌治疗剂选自抗肿瘤剂、抗血管生成剂、信号传导抑制剂与抗增生剂，所述的量一起有效治疗所述的异常细胞生长。在有些这样的实施方案中，所述抗肿瘤剂选自
由下列各项组成的组：有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢药、嵌入性抗生素、生长因子抑制剂、放射、细胞周期抑制剂、酶、拓朴异构酶抑制剂、生物反应调节剂、抗体、细胞毒剂、抗激素与抗雄激素。

[0060] 在其它实施方案中，本申请中所述的用途包括本申请中所述式之一的化合物或其药学上可接受的盐与一种或多种选自抗肿瘤剂、抗血管生成剂、信号传导抑制剂与抗增生
剂的物质组合的用途。

[0061] 在有些实施方案中，本申请中所述的药物可适合与一种或多种选自抗肿瘤剂、抗血管生成剂、信号传导抑制剂与抗增生剂的物质组合使用。

[0062] 下述本发明化合物的各个实施方案可以与本申请中所述的一种或多种本发明化合物的其它实施方案组合(该其它实施方案与其组合的实施方案不相矛盾)。此外，下列描
述本发明的各个实施方案在其范围内设想包含本发明的化合物的药学上可接受的盐在内。
因此，在本申请中所述的所有化合物的描述中隐含短语“或其药学上可接受的盐”。

[0063] 详细描述

[0064] 参照下列本发明的优选实施方案与所包括的实施例的详细说明，可更容易地了解本发明。应当理解，本申请中所用的术语仅用于描述特定实施方案的目的，而不想对其进行限制。应当进一步理解，除非在本申请中被明确地定义，否则本申请中所用的术语的含义是相关技术领域中已知的惯用含义。

[0065] 本申请中所用的单数形式“a”、“an”与“the”包括复数引用，除非另外指出。例如，“a”取代基包括一个或多个取代基。

[0066] “烷基”是指包括具有特定碳原子数的直链与支链基团的饱和一价脂族烃基。烷基取代基通常含有1至20个碳原子(“C1-C20烷基”)，优选为1至12个碳原子(“C1-C12烷基”)，更优选为1至8个碳原子(“C1-C8烷基”)，或1至6个碳原子(“C1-C6烷基”)，或1至4个碳原子(“C1-C4烷基”)。烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、正庚基、正辛基等。烷基可被取代或未被取代。特别地，除非另外具体指定，烷基可被一个或多个(最多是存在于烷基上的氢原子总数)卤基取代。因此，C1-C4烷基包括卤代烷基，特别是1至4个碳原子的氟代烷基，例如，三氟甲基或二氟乙基(即CF3与-CH2CHF2)。

[0067] 本申请中描述为任选被取代的烷基可被一个或多个取代基取代，该取代基被独立地选择，除非另外指出。取代基总数可等于在烷基部分上的氢原子总数，只要该取代在化学上合理。任选被取代的烷基通常含有1至6个任选的取代基，有时为1至5个任选的取代基，优选为1至4个任选的取代基，或更优选为1至3个任选的取代基。

[0068] 适合于烷基的任选的取代基包括，但不限于C3-C8环烷基、3至12元杂环基、C6-C12芳基与5至12元杂芳基、卤素、＝O(氧代)、＝S(硫羰基)、＝N-CN、＝N-ORX、＝NRX、-CN、-C(O)Rx、-CO2Rx、-C(O)NRxRy、-SRx、-SORx、-SO2Rx、-SO2NRxRy、-NO2、-NRxRy、-NRxC(O)Ry、-NRxC(O)NRxRy、-NRxC(O)ORx、-NRxSO2Ry、-NRxSO2NRxRy、-ORx、-OC(O)Rx与-OC(O)NRxRy；其中Rx与Ry各自独立地是H、C1-C8烷基、C1-C8酰基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8环烷基、3至12元杂环基、C6-C12芳基或5至12元杂芳基，或Rx与Ry可与所连接的N原子合在一起形成3至12元杂环基或5至12元杂芳基，其各自任选地含有1、2或3个选自O、N与S的另外的杂原子；Rx与Ry各自任选地被
1至3个独立地选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤素、＝O、＝S、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、-CN、-C(O)R’、-CO2R’、-C(O)NR’2、-SR’、-SOR’、-SO2R’、-SO2NR’2、-NO2、-NR’2、-NR’C(O)R’、-NR’C(O)NR’2、-NR’C(O)OR’、-NR’SO2R’、-NR’SO2NR’2、-OR’、-OC(O)R’与-OC(O)NR’2；其中各个R’独立地是H、C1-C8烷基、C1-C8酰基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8环烷基、3至12元杂环基、C6-C12芳基或C5-C12杂芳基；且其中所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基、C6-C12芳基与5至
12元杂芳基各自任选地被取代，如本申请中进一步所定义。

[0069] 烷基上的典型取代基包括卤素、-OH、C1-C4烷氧基、-O-C6-C12芳基、-CN、＝O、-COORx、-OC(O)Rx、-C(O)NRxRy、-NRxC(O)Ry、-NRxRy、C3-C8环烷基、C6-C12芳基、5至12元杂芳基与3至12元杂环基；其中Rx与Ry各自独立地是H或C1-C4烷基，或Rx与Ry可与所连接的N合在一起形成3至12元杂环基或5至12元杂芳基环，其各自任选地含有1、2或3个选自O、N与S的另外的杂原子；其中所述C3-C8环烷基、C6-C12芳基、5至12元杂芳基与3至12元杂环基各自任选地被1至3个独立地选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤素、-OH、＝O、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6羟烷基、C1-C4烷氧基-C1-C6烷基、-CN、-NH2、-NH(C1-C4烷基)与-N(C1-C4烷基)2。

[0070] 在有些实施方案中，烷基任选地被一个或多个取代基，且优选地被1至3个取代基取代，该取代基独立地选自由下列各项组成的组：卤素、-OH、C1-C4烷氧基、-O-C6-C12芳基、-CN、＝O、-COORx、-OC(O)Rx、-C(O)NRxRy、-NRxC(O)Ry、-NRxRy、C3-C8环烷基、C6-C12芳基、5至12元杂芳基与3至12元杂环基；其中Rx与Ry各自独立地是H或C1-C4烷基，或Rx与Ry可与所连接的N合在一起形成3至12元杂环基或5至12元杂芳基环，其各自任选地含有1、2或3个选自O、N与S的另外的杂原子；且所述C3-C8环烷基、C6-C12芳基、5至12元杂芳基与3至12元杂环基各自任选地被1至3个独立地选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤素、-OH、＝O、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6羟烷基、C1-C4烷氧基-C1-C6烷基、-CN、-NH2、-NH(C1-C4烷基)与-N(C1-C4烷基)2。

[0071] 在其它实施方案中，烷基任选地被一个或多个取代基，且优选地被1至3个取代基取代，该取代基独立地选自由下列各项组成的组：卤素、-OH、C1-C4烷氧基、-CN、-NRxRy、C3-C8环烷基、3至12元杂环基、C6-C12芳基与5至12元杂芳基；其中Rx与Ry各自独立地是H或C1-C4烷基，或Rx与Ry可与所连接的N合在一起形成3至12元杂环基或5至12元杂芳基环，其各自任选地含有1、2或3个选自O、N与S的另外的杂原子；且其中所述环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自任选地被1至3个独立地选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤素、-OH、＝O、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6羟烷基、C1-C4烷氧基-C1-C6烷基、-CN、-NH2、-NH(C1-C4烷基)与-N(C1-C4烷基)2。

[0072] 在某些情况下，可根据取代基来特别地命名被取代的烷基。例如，“卤代烷基”是指具有指定数目的碳原子的烷基，其被一个或多个卤素取代基取代，且通常含有1至6个碳原子与1、2或3个卤素原子(即“C1-C6卤代烷基”)或有时含有1至4个碳原子与1、2或3个卤素原子(即“C1-C4卤代烷基”)。因此，C1-C4卤代烷基包括三氟甲基(-CF3)与二氟甲基(-CF2H)。更具体地，氟化的烷基可明确地被称为氟代烷基，例如，C1-C6或C1-C4氟代烷基。

[0073] 类似地，“羟烷基”是指具有指定数目的碳原子的烷基，其被一个或多个羟基取代基取代，且通常含有1至6个碳原子与1、2或3个羟基(即“C1-C6羟烷基”)。因此，C1-C6羟烷基包括羟甲基(-CH2OH)与2-羟乙基(-CH2CH2OH)。

[0074] “烷氧基烷基”是指具有指定数目的碳原子的烷基，其被一个或多个烷氧基取代基取代。烷氧基烷基通常在烷基部分含有1至6个碳原子且被1、2或3个C1-C4烷氧基取代基取代。本申请中有时将该基团称为C1-C4烷氧基-C1-C6烷基。

[0075] “氨基烷基”是指具有指定数目的碳原子的烷基，其被一个或多个被取代或未被取代的氨基取代，本申请中进一步定义该基团。氨基烷基通常在烷基部分含有1至6个碳原子且被1、2或3个氨基取代基取代。因此，C1-C6氨基烷基包括，例如，氨基甲基(-CH2NH2)、N,N-二甲基氨基乙基(-CH2CH2N(CH3)2)、3-(N-环丙氨基)丙基(-CH2CH2CH2NH-cPr)与N-吡咯烷乙基(-CH2CH2-N-吡咯烷基)。

[0076] “烯基”是指本申请中所定义的烷基，其由至少二个碳原子与至少一个碳-碳双键组成。通常，烯基具有2至20个碳原子(“C2-C20烯基”)，优选为2至12个碳原子(“C2-C12烯基”)，更优选为2至8个碳原子(“C2-C8烯基”)，或2至6个碳原子(“C2-C6烯基”)，或2至4个碳原子(“C2-C4烯基”)。代表性的实例包括，但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、
2-丁烯基或3-丁烯基等。烯基可未被取代或被本申请中所述的适合于烷基的基团取代。

[0077] “炔基”是指本申请中所定义的烷基，其由至少二个碳原子与至少一个碳-碳三键组成。炔基具有2至20个碳原子(“C2-C20炔基”)，优选为2至12个碳原子(“C2-C12炔基”)，更优选为2至8个碳原子(“C2-C8炔基”)，或2至6个碳原子(“C2-C6炔基”)，或2至4个碳原子(“C2-C4炔基”)。代表性的实例包括，但不限于乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基或
3-丁炔基等。炔基可未被取代或被本申请中所述的适合于烷基的基团取代。

[0078] 本申请中所用的“亚烷基”是指具有指定数目的碳原子的二价烃基，其可将二个其它基团连接在一起。有时亚烷基是指-(CH2)n-基，其中n是1至8，优选地n是1至4。当被指定时，亚烷基还可被其它基团取代且可包括一个或多个不饱和度(即亚烯基或亚炔基)或环。亚烷基的开放价不必在链的相对端。因此，支链亚烷基，例如-CH(Me)-与-C(Me)2-，也包括在术语“亚烷基”的范围内，包括环基团，例如环丙-1,1-二基与不饱和基团，例如亚乙基(-CH＝CH-)或亚丙基(-CH2-CH＝CH-)。当亚烷基被描述成任选地被取代时，取代基包括本申
请中所述的通常存在于烷基上的取代基。

[0079] “亚杂烷基”是指上述的亚烷基，其中所述亚烷基链的一个或多个非相连碳原子被-N(R)-、-O-或-S(O)q-取代，其中R是H或C1-C4烷基并且q是0至2。例如，-O-(CH2)1-4-基是“C2-C5”-亚杂烷基，其中对应的亚烷基的碳原子之一被O替代。

[0080] “烷氧基”是指一价-O-烷基，其中烷基部分具有指定数目的碳原子。烷氧基通常含有1至8个碳原子(“C1-C8烷氧基”)，或1至6个碳原子(“C1-C6烷氧基”)，或1至4个碳原子(“C1-C4烷氧基”)。例如，C1-C4烷氧基包括-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、-OC(CH3)3等。本申请中也可能将所述基团称为甲氧基、乙氧基、异丙氧基、叔丁氧基等。烷氧基可未被取代或在烷基部分上被本申请中所述的适合于烷基的基团取代。特别地，烷氧基可被一个或多个(最多是存在于烷基部分上的氢原子总数)卤基取代。因此，C1-C4烷氧基包括卤化的烷氧基，例如，三氟甲氧基与2,2-二氟乙氧基(即-OCF3与-OCH2CHF2)。在某些情况下，卤化的烷氧基可被称为“卤代烷氧基”(或，当氟化时，更明确地被称为“氟代烷氧基”)，其具有指定数目的碳原子且被一个或多个卤素取代基取代，且通常含有1至6个碳原子与1、2或3个卤素原子(即“C1-C6卤代烷氧基”)或有时含有1至4个碳原子与1、2或3个卤素原子(即“C1-C4卤代烷氧基”)。因此，C1-C4卤代烷氧基包括三氟甲氧基(-OCF3)与二氟甲氧基(-OCF2H)。更具体地，氟化的烷氧基可明确地被称为氟代烷氧基，例如，C1-C6或C1-C4氟代烷氧基。

[0081] 类似地，“硫烷氧基”是指一价-S-烷基，其中烷基部分具有指定数目的碳原子，且在烷基部分上可任选地被本申请中所述的适合于烷基的基团取代。例如，C1-C4硫烷氧基包括-SCH3与-SCH2CH3。

[0082] “环烷基”是指非芳香性、饱和或部分不饱和的含有指定数目的碳原子的碳环系统，其可为单环、桥连或稠合的双环或多环系统，其通过环烷基环上的碳原子与基础分子连接。通常，本发明的环烷基含有3至12个碳原子(“C3-C12环烷基”)，优选为3至8个碳原子(“C3-C8环烷基”)。代表性的实例包括，例如，环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烯、环己烷、环己烯、环己二烯、环庚烷、环庚三烯、金刚烷等。环烷基可未被取代或被本申请中所述的适合于烷基的基团取代。

[0083] 环烷基环的实例包括，但不限于

[0084]

[0085] “环烷基烷基”可用于描述环烷基环，典型为C3-C8环烷基，其通过亚烷基连接基(典型为C1-C4亚烷基)与基础分子连接。通过在碳环中的碳原子总数与连接基来描述环烷基烷基，其通常含有4至12个碳原子(“C4-C12环烷基烷基”)。因此，环丙基甲基是C4-环烷基烷基，及环己基乙基是C8-环烷基烷基。环烷基烷基可未被取代或在环烷基和/或亚烷基部分被本
申请中所述的适合于烷基的基团取代。

[0086] 术语“杂环基”、“杂环”或“杂脂环”在本申请中可交换地使用，指非芳香性、饱和或部分不饱和的环系统，其含有指定数目的环原子(包括至少一个作为环成员的选自N、O与S的杂原子)，其中杂环通过环原子(可为C或N)与基础分子连接。杂环可与一个或多个其它杂环或碳环稠合，该稠环可为饱和、部分不饱和或芳香性的。优选地，杂环含有1至4个(更优选为1至2个)的选自N、O与S的环上杂原子作为环成员，条件是该杂环不含二个相连的氧原子。
杂环基可未被取代或被本申请中所述的适合于烷基、芳基或杂芳基的基团取代。此外，环N原子可任选地经适合于胺的基团(例如烷基、酰基、氨甲酰基、磺酰基取代基等)取代，且环S原子可任选地被一个或二个氧代取代(即S(O)q，其中q是0、1或2)。

[0087] 优选的杂环包括本申请中所定义的3至12元杂环基。

[0088] 部分不饱和的杂环基的实例包括，但不限于：

[0089]

[0090] 桥连杂环基与稠合杂环基的实例包括，但不限于：

[0091]

[0092] 饱和杂环基的实例包括，但不限于：

[0093]

[0094] 在常见实施方案中，杂环含有3至12个环成员，其包括碳与非碳杂原子，优选为4至6个环成员。在某些实施方案中，包含3至12元杂环的取代基选自由下列各项组成的组：氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基与硫代吗啉基，它们各自可任选地被取代，只要该取代在化学上是合理的。在其它实施方案中，包含3至12元杂环的取代基选自由下列各项组成的组：氧杂环丁烷基、四氢呋喃基与四氢吡喃基，它们各自可任选地被取代，只要该取代在化学上合理。在特定实施方案中，所述3至12元杂环是氧杂环丁烷基，其任选地被取代，只要该取代在化学上合理。

[0095] 应理解，通常不超过二个N、O或S原子依序连接，但是氧代与N或S连接以形成硝基或磺酰基的情形，或某些杂芳香环，例如三嗪、三唑、四唑、 二唑、噻二唑等情形例外。

[0096] 术语“杂环烷基”可用于描述指定大小的杂环基，其通过指定长度的亚烷基连接基与基础分子连接。通常，杂环烷基含有任选被取代的3至12元杂环，其通过C1-C4亚烷基连接基与基础分子连接。在指定的情况下，杂环烷基可在亚烷基部分任选地被本申请中所述的适合于烷基的基团取代，和在杂环部分任选地被本申请中所述的适合于杂环的基团取代。

[0097] “芳基”或“芳香基”是指任选被取代的单环、联芳基或稠合双环或多环系统，其具有众所周知的芳香性，其中至少一个环含有完全共轭π电子系统。通常，芳基含有作为环成员的6至20个碳原子(“C6-C20芳基”)，优选为6至14个碳原子(“C6-C14芳基”)，或更优选为6至12个碳原子(“C6-C12芳基”)。稠合芳基可包括芳基环(例如苯环)，其与另一个芳基环稠合，或与饱和或部分不饱和的碳环或杂环稠合。与该稠合芳基环系统上的基础分子连接之点可
为环系统的芳香部分的C原子或非芳香部分的C或N原子。芳基的非限制性的实例包括苯基、联苯基、萘基、蒽基、菲基、二氢茚基、茚基与四氢萘基。芳基可未被取代或被取代，如本申请中进一步描述。

[0098] 类似地，“杂芳基”或“杂芳香基”是指单环、杂联芳基或稠合双环或多环系统，其具有众所周知的芳香性，且含有指定数目的环原子且包括作为芳香环中的环成员的至少一个选自N、O或S的杂原子。包括杂原子使得5元环与6元环可具有芳香性。通常，杂芳基含有5至
20个环原子(“5至20元杂芳基”)，优选为5至14个环原子(“5至14元杂芳基”)，与更优选为5至12个环原子(“5至12元杂芳基”)。杂芳基环通过杂芳香环的环原子与基础分子连接以维持芳香性。因此，6元杂芳基环可通过环上C原子与基础分子连接，而5元杂芳基环可通过环上C或N原子与基础分子连接。未被取代的杂芳基的实例通常包括，但不限于吡咯、呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、异 唑、 唑、异噻唑、噻唑、三唑、 二唑、噻二唑、四唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、苯并咪唑、吲唑、喹啉、异喹啉、嘌呤、三嗪、萘啶与咔唑。在常见优选实施方案中，5或6元杂芳基选自由下列各项组成的组：吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、异 唑基、 唑基、异噻唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基与哒嗪基环。杂芳基可未被取代或被取代，如本申请中进一步描述。

[0099] 本申请中所述的任选被取代的芳基、杂芳基与杂环基可被一个或多个取代基取代，该取代基被独立地选择，除非另外指出。取代基总数可等于芳基、杂芳基或杂环基上的氢原子总数，只要该取代在化学上合理且在芳基环与杂芳基环时维持芳香性。任选被取代
的芳基、杂芳基或杂环基通常含有1至5个任选的取代基，有时含有1至4个任选的取代基，优选为1至3个任选的取代基，或更优选为1至2个任选的取代基。

[0100] 适合于芳基、杂芳基与杂环基环的任选的取代基包括，但不限于：C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8环烷基、3至12元杂环基、C6-C12芳基与5至12元杂芳基；以及卤素、＝O、-CN、-C(O)Rx、-CO2Rx、-C(O)NRxRy、-SRx、-SORx、-SO2Rx、-SO2NRxRy、-NO2、-NRxRy、-NRxC(O)Ry、-NRxC(O)NRxRy、-NRxC(O)ORx、-NRxSO2Ry、-NRxSO2NRxRy、-ORx、-OC(O)Rx与-OC(O)NRxRy；其中Rx与Ry各自独立地是H、C1-C8烷基、C1-C8酰基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8环烷基、3至12元杂环基、C6-C12芳基或5至12元杂芳基，或Rx与Ry可与所连接的N原子合在一起形成3至12元杂环基或5至12元杂芳基，其各自任选地含有1、2或3个选自O、N与S的另外的杂原子；Rx与Ry各自任选地被1至3个独立地选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤素、＝O、＝S、＝N-CN、＝N-OR’、＝NR’、-CN、-C(O)R’、-CO2R’、-C(O)NR’2、-SR’、-SOR’、-SO2R’、-SO2NR’2、-NO2、-NR’2、-NR’C(O)R’、-NR’C(O)NR’2、-NR’C(O)OR’、-NR’SO2R’、-NR’SO2NR’2、-OR’、-OC(O)R’与-OC(O)NR’2，其中各个R’独立地是H、C1-C8烷基、C1-C8酰基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8环烷基、3至12元杂环基、C6-C12芳基或5至12元杂芳基；且所述C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8环烷基、3至12元杂环基、C6-C12芳基与5至12元杂芳基各自任选地被取代，如本申请中进一步所定义。

[0101] 在典型实施方案中，芳基、杂芳基与杂环基环上的任选的取代基包括一个或多个取代基，优选地包括1至3个取代基，其独立地选自由下列各项组成的组：卤素、C1-C8烷基、-OH、C1-C8烷氧基、CN、＝O、-C(O)Rx、-COORx、-OC(O)Rx、-C(O)NRxRy、-NRxC(O)Ry、-SRx、-SORx、-x x y x y x y x x y x y x y
SO2R 、-SO2NR R 、-NO2、-NR R 、-NR C(O)R 、-NR C(O)NR R 、-NR C(O)OR 、-NR SO2R 、-NRxSO2NRxRy、-OC(O)Rx、-OC(O)NRxRy、C3-C8环烷基、3至12元杂环基、C6-C12芳基、5至12元杂芳基、-O-(C3-C8环烷基)、-O-(3至12元杂环基)、-O-(C6-C12芳基)与-O-(5至12元杂芳基)；其中Rx与Ry各自独立地是H或C1-C4烷基，或Rx与Ry可与所连接的N合在一起形成3至12元杂环基或
5至12元杂芳基环，其各自任选地含有1、2或3个选自O、N与S的另外的杂原子；且其中所述C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C3-C8环烷基、3至12元杂环基、C6-C12芳基、5至12元杂芳基、-O-(C3-C8环烷基)、-O-(3至12元杂环基)、-O-(C6-C12芳基)与-O-(5至12元杂芳基)，其被描述成任选的取代基或是Rx或Ry中的一部分任选地被1至3个独立地选自由下列各项组成的组的取代
基取代：卤素、-OH、＝O、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6羟烷基、C1-C4烷氧基-C1-C6烷基、-CN、-NH2、-NH(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)2与N-吡咯烷基。

[0102] 单环杂芳基的实例包括，但不限于

[0103]

[0104] 稠环杂芳基的实例包括，但不限于：

[0105]

[0106]

[0107] “芳基烷基”是指本申请中所述的芳基，其通过亚烷基或类似的连接基与基础分子连接。通过环与连接基中的碳原子总数来描述芳基烷基。因此，苄基是C7-芳基烷基，苯乙基是C8-芳基烷基。通常，芳基烷基含有7至16个碳原子(“C7-C16芳基烷基”)，其中芳基部分含有6至12个碳原子及亚烷基部分含有1至4个碳原子。芳基烷基还可被表示成-C1-C4亚烷基-C6-C12芳基。

[0108] “杂芳基烷基”是指上述的杂芳基，其通过亚烷基连接基与基础分子连接，且不同于“芳基烷基”的方面在于芳香基团中的至少一个环原子是选自N、O与S的杂原子。本申请中有时根据在所结合的环与连接基中的非氢原子(即C、N、S与O原子)总数(不包括取代基)来描述杂芳基烷基。因此，例如，吡啶基甲基可被表示成“C7”-杂芳基烷基。通常，未被取代的杂芳基烷基含有6至20个非氢原子(包括C、N、S与O原子)，其中杂芳基部分通常含有5至12个原子且亚烷基部分通常含有1至4个碳原子。杂芳基烷基还可被表示成-C1-C4亚烷基-5至12
元杂芳基。

[0109] 类似地，“芳基烷氧基”与“杂芳基烷氧基”是指芳基与杂芳基，其通过亚杂烷基连接基(即-O-亚烷基)与基础分子连接，其中根据在所结合的环与连接基中的非氢原子(即C、N、S与O原子)总数来描述该基团。因此，-O-CH2-苯基与-O-CH2-吡啶基分别被表示成C8-芳基烷氧基与C8-杂芳基烷氧基。

[0110] 当芳基烷基、芳基烷氧基、杂芳基烷基或杂芳基烷氧基被描述成任选地被取代时，取代基可为在基团的二价连接基部分上或在芳基或杂芳基部分上。任选地存在于亚烷基或亚杂烷基部分的取代基通常与上述烷基或烷氧基的相同，而任选地存在于芳基或杂芳基部
分的取代基通常与上述芳基或杂芳基的相同。

[0111] “羟基”是指-OH基。

[0112] “酰氧基”是指一价基团-OC(O)烷基，其中烷基部分具有指定数目的碳原子(典型为C1-C8，优选为C1-C6或C1-C4)，且可任选地经适合于烷基的基团取代。因此，C1-C4酰氧基包括-OC(O)C1-C4烷基取代基，例如-OC(O)CH3。

[0113] “酰氨基”是指一价基团，-NHC(O)烷基或-NRC(O)烷基，其中烷基部分具有指定数目的碳原子(典型为C1-C8，优选为C1-C6或C1-C4)，且可任选地经适合于烷基的基团取代。因此，C1-C4酰氨基包括-NHC(O)C1-C4烷基取代基，例如-NHC(O)CH3。

[0114] “芳氧基”或“杂芳氧基”是指任选地被取代的-O-芳基或-O-杂芳基，在各种情形下芳基与杂芳基如本申请中进一步所定义。

[0115] “芳氨基”或“杂芳氨基”是指任选地被取代的-NH-芳基、-NR-芳基、-NH-杂芳基或-NR-杂芳基，在各种情形下芳基与杂芳基如本申请中进一步所定义且R代表适合于胺的取代基，例如烷基、酰基、氨甲酰基或磺酰基等。

[0116] “氰基”是指-C≡N基。

[0117] “未被取代的氨基”是指-NH2基。当氨基被描述成被取代或任选地被取代时，该术语包括-NRxRy形式，其中Rx与Ry各自独立地是H、烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、酰基、硫酰基、芳基、杂芳基、杂烷基烷基、芳基烷基或杂芳基烷基，在各种情形下其具有指定数目的原子且任选地被取代，如本申请中所述。例如，“烷基氨基”是指-NRxRy基，其中Rx与Ry之一是烷基且另一个是H，“二烷基氨基”是指-NRxRy基，其中Rx与Ry皆是烷基，其中烷基具有指定数目的碳原子，例如-NH-C1-C4烷基或-N(C1-C4烷基)2。通常，在胺上的烷基取代基含有1至8个碳原子，优选为1至6个碳原子，或更优选为1至4个碳原子。该术语还包括其中Rx与Ry与所连接的N合在一起形成3至12元杂环基或5至12元杂芳基环的形式，其本身可如本申请中所述地任选地代替杂环基或杂芳基环，且其可1至3个选自N、O与S的另外的杂原子含有作为环成员，条件是该环不含二个相连的氧原子。

[0118] “卤素”或“卤基”是指氟、氯、溴与碘(F、Cl、Br、I)。优选地，卤素是指氟或氯(F或Cl)。

[0119] 本申请中有时将“杂形式”(heteroform)用于指基团(例如烷基、芳基或酰基)的衍生物，其中指定的碳环基中的至少一个碳原子被选自N、O与S的杂原子替代。因此，烷基、烯基、炔基、酰基、芳基与芳基烷基的杂形式分别是杂烷基、杂烯基、杂炔基、杂酰基、杂芳基与杂芳基烷基。应理解，通常不超过二个N、O或S原子依序连接，但氧代与N或S连接以形成硝基或磺酰基情形例外。

[0120] “任选的”或“任选地”表示后续描述的事件或情形可能发生但不是一定发生，且该描述包括该事件或情形有与没有发生的情况。

[0121] 术语“任选地被取代”与“被取代或未被取代”可用于交换地表示所述的特定基团可能没有非氢取代基(即未被取代)或可能有一个或多个非氢原子取代基(即被取代)。若没有另外具体指定，则可能存在的取代基总数等于存在于所述的基团的未被取代形式上的H
原子数，只要该取代在化学上合理。当任选的取代基通过双键连接(例如氧代(＝O)取代基)时，其占据二个有效价，所以可包括的其它取代基的总数减去2。在任选的取代基独立地选自可替代项的名单的情形下，被选择的基团可相同或不同。

[0122] 一方面，本发明提供一种式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，

[0123]

[0124] 其中：

[0125] R1选自由下列各项组成的组：H、F、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C(O)R5、C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C1-C4烷基或C1-C4烷氧基各自任选地被一个或多个R6取代，且所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代；

[0126] R2是H、F或C1-C4烷基；

[0127] L是键或C1-C4亚烷基；

[0128] R3选自由下列各项组成的组：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、OH、CN、C(O)R8、COOR9、NR10R11、OR12、C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C1-C4烷基或C1-C4烷6
氧基各自任选地被一个或多个R 取代，且所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代；

[0129] R4是H、卤素或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R6取代；

[0130] R5是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0131] 各个R6独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；

[0132] 各个R7独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基；

[0133] R8是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0134] R9是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0135] R10与R11独立地是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0136] R12选自由下列各项组成的组：C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代；

[0137] 各个R13独立地是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R15取代；

[0138] R14与R15各自独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及

[0139] X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

[0140] 在有些实施方案中，式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在具有R1与R2取代基的碳原子上具有绝对立体化学，如式(I-A)或式(I-B)所示：

[0141]

[0142] 其中：

[0143] R1、R2、L、R3、R4、X与Z具有对于式(I)所定义的含义。

[0144] 本申请中所述的与式(I)有关的各个方面与实施方案也适用于式(I-A)或(I-B)的化合物。

[0145] 在常见的式(I)的实施方案中，R2是H。

[0146] 在常见式(I)的实施方案中，R4是H、Cl、Br、F或CH3。在有些这样的实施方案中，R4是H或Cl。在有些实施方案中，R4是H。在其它实施方案中，R4是Cl。在另外的实施方案中，R4是Cl或Br。

[0147] 在式(I)的化合物中，X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。在有些实施方案中，Z是C1-C4烷基，例如CH3或C2H5(即甲基或乙基)。在有些实施方案中，X是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基。在特定实施方案中，X是CH3、OCH3或OCHF2(即甲基、甲氧基或二氟甲氧基)。在另外的实施方案中，X是CH3、OCH3或OCHF2，与Z是CH3。

[0148] 在有些式(I)的实施方案中，R1是H或F。

[0149] 在其它的式(I)的实施方案中，R1是C1-C4烷基或C1-C4烷氧基，其各自任选地被一个或多个R6取代。在有些这样的实施方案中，所述烷基或烷氧基经至少一个OH或CN取代。在特定实施方案中，R1是CH3、C2H5、CH2OH、CH2CH2OH、CH(OH)CH3或CH2CN(即甲基、乙基、羟甲基、2-羟乙基、1-羟乙基或氰甲基)。在其它特定实施方案中，R1是OCH3(即甲氧基)。

[0150] 在其它的式(I)的实施方案中，R1是C(O)R5，其中R5是任选地被一个或多个R14取代的C1-C4烷基。在有些这样的实施方案中，R5是任选地经OH取代的C1-C4烷基。在特定实施方案中，R5是CH3、CH2OH、CH2CH2OH或CH(CH3)OH，使得R1是C(O)CH3、C(O)CH2OH、C(O)CH2CH2OH或C(O)CH(CH3)OH(即乙酰基、α-羟基乙酰基、3-羟基丙酰基或2-羟基丙酰基)。

[0151] 在其它的式(I)的实施方案中，R1是C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基，其中所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代。

[0152] 在有些这样的实施方案中，R1是任选地被一个或多个R7取代的C3-C8环烷基。在有些这样的实施方案中，R1是环丙基、环丁基、环戊基或环己基，它们各自任选地被一个或多个R7取代。

[0153] 在其它实施方案中，R1是任选地被一个或多个R7取代的3至12元杂环基。在有些这样的实施方案中，所述3至12元杂环基选自由下列各项组成的组：四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢噻吩基、四氢噻喃基、吡咯烷基、哌啶基与吗啉基，它们各自任选地被一个或多个R7取代。在其它这样的实施方案中，所述3至12元杂环基选自由下列各项组成的组：氧杂环丁烷基、四氢呋喃基与四氢吡喃基，它们各自任选地被一个或多个R7取代。在特定实施方案中，所述3至12元杂环基是任选地被一个或多个R7取代的氧杂环丁烷基。在有些这样的实施方
案中，所述氧杂环丁烷基未被取代。

[0154] 在其它这样的实施方案中，R1是任选地被一个或多个R7取代的5至12元杂芳基。在有些这样的实施方案中，R1是5或6元杂芳基。在特定实施方案中，所述5或6元杂芳基选自由下列各项组成的组：吡唑基、咪唑基、异 唑基、 唑基、异噻唑基、噻唑基与三唑基，它们各自任选地被一个或多个R7取代。

[0155] 在某些实施方案中，当R1是C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基时，各个R7独立地是CH3、OH、F、CN、OCH3、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基，其中各个R13是任选地经OH取代的CH3或C2H5(例如R13是CH3、CH2OH、CH2CH2OH或CH(CH3)OH。

[0156] 在式(I)的化合物中，L是键或C1-C4亚烷基。在有些式(I)的实施方案中，L是键。在其它的式(I)的实施方案中，L是C1-C4亚烷基。在特定实施方案中，L是亚甲基或亚乙基。

[0157] 在式(I)的化合物中，R3选自由下列各项组成的组：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、OH、CN、C(O)R8、COOR9、NR10R11、OR12、C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C1-C4烷基或C1-C4烷氧基各自任选地被一个或多个R6取代，且所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代。

[0158] 在有些实施方案中，R3是C1-C4烷基、C1-C4烷氧基或3至12元杂环基，它们如上所述任选地被取代。在有些实施方案中，R3是C1-C4烷基或C1-C4烷氧基，特别是CH3或OCH3(即甲基或甲氧基)。

[0159] 在另外的实施方案中，R3是任选地被一个或多个R7取代的3至12元杂环基。在有些这样的实施方案中，所述3至12元杂环基选自由下列各项组成的组：四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢噻吩基、四氢噻喃基、吡咯烷基、哌啶基与吗啉基，它们各自任选地被一个或多个R7取代。在其它这样的实施方案中，所述3至12元杂环基选自由下列各项组成的组：氧杂环丁烷基、四氢呋喃基与四氢吡喃基，它们各自任选地被一个或多个R7取代。在特定实施方案
中，所述3至12元杂环基是任选地被一个或多个R7取代的氧杂环丁烷基。在有些这样的实施方案中，所述氧杂环丁烷基未被取代。

[0160] 在另外的实施方案中，L是键，及R3是C1-C4烷基、C1-C4烷氧基或3至12元杂环基，它们如上所述任选地被取代。在特定实施方案中，L是键，及R3是C1-C4烷基或C1-C4烷氧基，特别是CH3或OCH3(即甲基或甲氧基)。

[0161] 在另外的实施方案中，L是键，及R3是任选地被一个或多个R7取代的3至12元杂环基。在有些这样的实施方案中，L是键，及该3至12元杂环基选自由下列各项组成的组：四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢噻吩基、四氢噻喃基、吡咯烷基、哌啶基与吗啉基，它们各自任选地被一个或多个R7取代。在其它这样的实施方案中，L是键，及该3至12元杂环基选自由下列各项组成的组：氧杂环丁烷基、四氢呋喃基与四氢吡喃基，它们各自任选地被一个或多个R7取代。在特定实施方案中，L是键，及该3至12元杂环基是任选地被一个或多个R7取代的氧杂环丁烷基。在有些这样的实施方案中，所述氧杂环丁烷基未被取代。

[0162] 在其它该实施方案中，L是C1-C4亚烷基，及R3是C1-C4烷基、C1-C4烷氧基或3至12元杂环基，它们如上所述任选地被取代。

[0163] 在其它实施方案中，R3是OH、CN、C(O)R8或COOR9，其中R8是任选地被一个或多个R14取代的C1-C4烷基，及R9是H或任选地被一个或多个R14取代的C1-C4烷基。

[0164] 在有些这样的实施方案中，L是键，及R3是OH、CN、C(O)R8或COOR9，其中R8与R9如上所述。

[0165] 在其它实施方案中，L是C1-C4亚烷基，及R3是OH、CN、C(O)R8或COOR9，其中R8与R9如上所述。在特定实施方案中，L是C1-C4亚烷基，例如亚甲基或亚乙基，及R3是OH或CN。

[0166] 在另外的实施方案中，R3是OR12、C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基，其中所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代，且其中R12是C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基，它们各自任选地被一个或多个R7取代。

[0167] 在有些这样的实施方案中，L是键，及R3是OR12、C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基，如上所述。在其它这样的实施方案中，L是C1-C4亚烷基，及R3是OR12、C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基，如上所述。

[0168] 在式(I)的化合物中，各个R6独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基。在常见实施方案中，6
至少一个R是OH或F。

[0169] 在式(I)的化合物中，各个R7独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基。在有些实施方案中，至少一个R7是C(O)R13，其中R13是C1-C4烷基且所述C1-C4烷基任选地被一个或多个R15进一步取代。在有些实施方案中，至少一个R7是SO2R13，其中R13是C1-C4烷基且所述C1-C4烷基任选地被一个或多个R15进一步取代。在其它特定实施方案中，至少一个R7是OH、F或C1-C4烷基(例如CH3)。

[0170] 在特定实施方案中，R1和/或R3是被一个或多个R7取代的3至12元杂环基，其中至少一个R7是CHO或C(O)R13，且其中R13是CH3、CH2OH或CH2CN，使得R7是CHO、C(O)CH3、C(O)CH2OH或C(O)CH2CN(即分别是甲酰基、乙酰基、羟基乙酰基或氰基乙酰基)。

[0171] 在特定实施方案中，R1和/或R3是被一个或多个R7取代的3至12元杂环基，其中至少一个R7是SO2R13，且其中R13是CH3、CH2OH或CH2CN，使得R7是SO2CH3、SO2CH2OH或SO2CH2CN。

[0172] 在另外的特定实施方案中，R1和/或R3是被一个或多个R7取代的3至12元杂环基，其中至少一个R7是OH。

[0173] 在式(I)的化合物中，R8是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代。

[0174] 在式(I)的化合物中，R9是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代。在有些这样的实施方案中，R9是H。在其它这样的实施方案中，R9是如上所述任选被取代的C1-C4烷基。

[0175] 在式(I)的化合物中，R10与R11独立地是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代。

[0176] R14与R15各自独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基。

[0177] 在一优选实施方案中，本发明提供式(I)、(I-A)或(I-B)的化合物，或其药学上可接受的盐，其中：

[0178] R1是3至12元杂环基或5至12元杂芳基，其中所述3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代；

[0179] R2是H；

[0180] L是C1-C4亚烷基；

[0181] R3是OH或CN；

[0182] R4是H或Cl；

[0183] 各个R7独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基；

[0184] 各个R13独立地是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R15取代；

[0185] 各个R15独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及

[0186] X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

[0187] 在另一优选实施方案中，本发明提供式(I)、(I-A)或(I-B)的化合物，或其药学上可接受的盐，其中：

[0188] R1是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基任选地被一个或多个R6取代；

[0189] R2是H；

[0190] L是键或C1-C4亚烷基；

[0191] R3选自由下列各项组成的组：C1-C4烷基、OH、CN、C(O)R8、COOR9、NR10R11、C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R6取代，且所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代；

[0192] R4是H或Cl；

[0193] 各个R6独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；

[0194] 各个R7独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基；

[0195] R8是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0196] R9是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0197] R10与R11独立地是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0198] 各个R13独立地是各自任选地被一个或多个R15取代的C1-C4烷基；

[0199] R14与R15各自独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及

[0200] X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

[0201] 在另一优选实施方案中，本发明提供式(I)、(I-A)或(I-B)的化合物，或其药学上可接受的盐，其中：

[0202] R1是C1-C4烷氧基，其任选地被一个或多个R6取代；

[0203] R2是H；

[0204] L是键或C1-C4亚烷基；

[0205] R3选自由下列各项组成的组：C1-C4烷基、OH、C(O)R8与3至12元杂环基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R6取代，且该3至12元杂环基各自任选地被一个或多个R7取代；

[0206] R4是H或Cl；

[0207] 各个R6独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；

[0208] 各个R7独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基；

[0209] R8是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0210] 各个R13独立地是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R15取代；

[0211] R14与R15各自独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及

[0212] X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

[0213] 在另一优选实施方案中，本发明提供式(I)、(I-A)或(I-B)的化合物，或其药学上可接受的盐，其中：

[0214] R1是C1-C4烷基，其任选地被一个或多个R6取代；

[0215] R2是H；

[0216] L是键或C1-C4亚烷基；

[0217] R3是OR12；

[0218] R4是H或Cl；

[0219] 各个R6独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；

[0220] 各个R7独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基；

[0221] R12选自由下列各项组成的组：C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代；

[0222] 各个R13独立地是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R15取代；

[0223] 各个R15独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及

[0224] X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

[0225] 在另一优选实施方案中，本发明提供式(I)、(I-A)或(I-B)的化合物，或其药学上可接受的盐，其中：

[0226] R1是C1-C4烷氧基；

[0227] R2是H；

[0228] L是键；

[0229] R3是3至12元杂环基，其优选地选自由下列各项组成的组：氧杂环丁烷基、四氢呋喃基与四氢吡喃基，它们各自任选地被一个或多个R7取代；

[0230] R4是H或Cl；

[0231] 各个R7独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基；

[0232] 各个R13独立地是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R15取代；

[0233] 各个R15独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及

[0234] X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

[0235] 在另一优选实施方案中，本发明提供式(I)、(I-A)或(I-B)的化合物，或其药学上可接受的盐，其中：

[0236] R1是3至12元杂环基，其优选地选自由下列各项组成的组：氧杂环丁烷基、四氢呋喃基与四氢吡喃基，它们各自任选地被一个或多个R7取代；

[0237] R2是H；

[0238] L是键；

[0239] R3是C1-C4烷氧基，其任选地被一个或多个R6取代；

[0240] R4是H或Cl；

[0241] 各个R6独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；

[0242] 各个R7独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基；

[0243] 各个R13独立地是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R15取代；

[0244] 各个R15独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及

[0245] X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

[0246] 另一方面，本发明提供一种式(II)、(II-A)或(II-B)的化合物，或其药学上可接受的盐，

[0247]

[0248] 其中：

[0249] R1、L、R3与X具有对于式(I)所定义的含义；以及

[0250] R4是H、Cl、Br、F或CH3。

[0251] 本申请中所述的式(I)、(I-A)与(I-B)的实施方案也适用于式(II)、(II-A)与(II-B)的化合物，只要它们不矛盾。

[0252] 另一方面，本发明提供一种式(III)的化合物，或其药学上可接受的盐，

[0253]

[0254] 其中：

[0255] R1与R3合在一起形成任选地被一个或多个R7取代的3至12元杂环基；

[0256] R2是H、F或C1-C4烷基；

[0257] R4是H、卤素或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R6取代；

[0258] 各个R6独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；

[0259] 各个R7独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、CHO、C(O)R13、SO2R13或3至6元杂环基；

[0260] 各个R13独立地是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R15取代；

[0261] 各个R15独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及

[0262] X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

[0263] 在有些式(III)的实施方案中，R2是F或CH3。

[0264] 在式(III)的化合物中，R1与R3合在一起形成3至12元杂环基，其任选地被一个或多个R7取代。在有些这样的实施方案中，所述3至12元杂环基选自由下列各项组成的组：氮杂7
环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基与高哌啶基，它们各自任选地被一个或多个R 取代。在其它这样的实施方案中，所述3至12元杂环基选自由下列各项组成的组：氧杂环丁烷基、四氢呋喃基与四氢吡喃基，它们各自任选地被一个或多个R7取代。

[0265] 在式(III)的化合物中，各个R7独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O、13 13 7 13 13 13
CHO、C(O)R 、SO2R 或3至6元杂环基。在有些实施方案中，R 是CHO、C(O)R 或SO2R ，其中R各自独立地是任选地被一个或多个R15取代的C1-C4烷基。在有些这样的实施方案中，R13是任选地被一个或多个R15取代的C1-C4烷基与各个R15独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基。在特别实施方案中，R13是任选地经OH取代的C1-C4烷基。在特定实施方案中，R13是CH3或CH2OH，使得R7是C(O)CH3、C(O)CH2OH、SO2CH3或SO2CH2OH(即乙酰基、α-羟基乙酰基、甲磺酰基或α-羟基甲磺酰基)。

[0266] 在有些实施方案中，R4是H、CH3或Cl。

[0267] 在有些实施方案中，Z是CH3。

[0268] 在有些实施方案中，X是CH3或OCH3。

[0269] 在一优选实施方案中，本发明提供一种式(III)的化合物，或其药学上可接受的盐，其中：

[0270] R2是F或CH3；

[0271] R1与R3合在一起形成3至12元杂环基，它们各自任选地被一个或多个R7取代；

[0272] R4是H、CH3或Cl；

[0273] Z是CH3；以及

[0274] X是CH3或OCH3。

[0275] 在另一优选实施方案中，本发明提供一种式(III)的化合物，或其药学上可接受的盐，其中：

[0276] R2是F或CH3；

[0277] R1与R3合在一起形成选自由下列各项组成的组的3至12元杂环基：氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基与高哌啶基，它们各自任选地被一个或多个R7取代；

[0278] R4是H、CH3或Cl；

[0279] R7是C(O)R13或SO2R13；

[0280] 各个R13独立地是任选地被一个或多个R15取代的C1-C4烷基；

[0281] 各个R15独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；

[0282] Z是CH3；以及

[0283] X是CH3或OCH3。

[0284] 另一方面，本发明提供一种式(I’)的化合物，或其药学上可接受的盐，

[0285]

[0286] 其中：

[0287] R1选自由下列各项组成的组：H、F、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C(O)R5、C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C1-C4烷基或C1-C4烷氧基各自任选地被一个或多个R6取代，且所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代；

[0288] R2是H、F或C1-C4烷基；

[0289] L是键或C1-C4亚烷基；

[0290] R3选自由下列各项组成的组：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、OH、CN、C(O)R8、COOR9、NR10R11、OR12、C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C1-C4烷基或C1-C4烷氧基各自任选地被一个或多个R6取代，且所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳7
基各自任选地被一个或多个R取代；

[0291] R4是H、卤素或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R6取代；

[0292] R5是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0293] 各个R6独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；

[0294] 各个R7独立地是C1-C4烷基、OH、F、CN、C1-C4烷氧基、＝O或C(O)R13；

[0295] R8是C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0296] R9是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0297] R10与R11独立地是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R14取代；

[0298] R12选自由下列各项组成的组：C3-C8环烷基、3至12元杂环基与5至12元杂芳基，其中所述C3-C8环烷基、3至12元杂环基或5至12元杂芳基各自任选地被一个或多个R7取代；

[0299] 各个R13独立地是H或C1-C4烷基，其中所述C1-C4烷基各自任选地被一个或多个R15取代；

[0300] R14与R15各自独立地是OH、F、CN或C1-C4烷氧基；以及

[0301] X与Z独立地是C1-C4烷基、C1-C4氟代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4氟代烷氧基。

[0302] 在有些实施方案中，式(I’)的化合物或其药学上可接受的盐在具有R1与R2取代基的碳原子上具有绝对立体化学，如式(I-A’)或式(I-B’)所示：

[0303]

[0304] 其中：

[0305] R1、R2、L、R3、R4、X与Z具有对于式(I)所定义的含义。

[0306] 本申请中所述的式(I)、(I-A)与(I-B)的实施方案也适用于式(I’)、(I-A’)与(I-B’)的化合物，只要它们不矛盾。

[0307] 另一方面，本发明提供一种式(II’)、(II-A’)或(II-B’)的化合物，或其药学上可接受的盐，

[0308]

[0309] 其中：

[0310] R1、L、R3与X具有对于式(I’)所定义的含义；以及

[0311] R4是H、Cl、Br、F或CH3。

[0312] 本申请中所述的式(I)、(I-A)与(I-B)的实施方案也适用于式(II’)、(II-A’)与(II-B’)的化合物，只要它们不矛盾。

[0313] “药物组合物”是指作为活性成分的本申请中所述的化合物中的一种或多种或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物或前药，与至少一种药学上可接受的载体或赋形剂的混合物。

[0314] 另一方面，本发明提供一种药物组合物，其包含本申请中所述式之一的化合物或其药学上可接受的盐，与药学上可接受的载体或赋形剂。在有些实施方案中，药物组合物包含二种或更多种药学上可接受的载体和/或赋形剂。

[0315] 在有些实施方案中，药物组合物可进一步包含至少一种另外的抗癌治疗剂或减轻剂。在有些这样的实施方案中，所述至少一种另外的药物或药用物质是如下所述的抗癌剂。
在有些这样的实施方案中，所述组合提供加和的、大于加和的或协同的抗癌效果。在有些这样的实施方案中，所述一种或多种抗癌治疗剂选自由下列各项组成的组：抗肿瘤剂、抗血管生成剂、信号传导抑制剂与抗增生剂。

[0316] 一方面，本发明提供一种治疗患者的异常细胞生长的方法，其包括将治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐施用给所述患者。

[0317] 在有些实施方案中，本申请中所述的方法进一步包括将一定量的抗癌治疗剂或减轻剂施用给所述患者，所述的量一起有效治疗所述的异常细胞生长。在有些实施方案中，所述一种或多种抗癌治疗剂选自抗肿瘤剂、抗血管生成剂、信号传导抑制剂与抗增生剂，所述的量一起有效治疗所述的异常细胞生长。在有些这样的实施方案中，所述抗肿瘤剂选自由
下列各项组成的组：有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢药、嵌入性抗生素、生长因子抑制剂、放射、细胞周期抑制剂、酶、拓朴异构酶抑制剂、生物反应调节剂、抗体、细胞毒剂、抗激素与抗雄激素。

[0318] 在本申请中所提供的方法的常见实施方案中，所述异常细胞生长是癌。在有些实施方案中，本申请中所提供的方法导致下列效果中的一种或多种：(1)抑制癌细胞增生；(2)抑制癌细胞侵袭；(3)诱发癌细胞凋亡；(4)抑制癌细胞转移；或(5)抑制血管生成。

[0319] 另一方面，本发明提供一种用于治疗患者的EZH2介导的病症的方法，其包括以治疗该病症有效的量将本发明的化合物或其药学上可接受的盐施用给所述患者。

[0320] 除非另外指出，本申请中所有对本发明的化合物的引用包括对其盐、溶剂合物、水合物与复合物的引用，与对其溶剂合物、水合物与复合物的引用，其包括多晶型物、立体异构体与经同位素放射性标记的形式。

[0321] 本发明的化合物可以本申请中所提供的式之一的化合物的药学上可接受的盐(例如酸加成盐或碱加成盐)形式存在。本申请中所用的术语“药学上可接受的盐”是指保留母体化合物的生物有效性与特性的盐类。本申请中所用的短语“药学上可接受的盐”，除非另外指示，否则包括可能存在于本申请中所公开的式的化合物中的酸性基团或碱性基团的盐
类。

[0322] 例如，碱性的本发明的化合物能够和各种各样的无机酸与有机酸形成各种各样的盐类。尽管对施用给动物而言该盐类必须是药学上可接受的，然而在实作上通常期望在一
开始先从反应混合物分离出本发明的化合物的药学上不可接受的盐，然后通过碱试剂处理
将药学上不可接受的盐简单地转化为游离碱化合物，接着将该游离碱转化为药学上可接受
的酸加成盐。碱性的本发明的化合物的酸加成盐可通过用实质等量的被选无机酸或有机酸
与水性溶剂或适当有机溶剂(例如甲醇或乙醇)处理碱性化合物而制得。蒸发掉溶剂后，得
到期望的固体盐。也可将适当无机酸或有机酸加到游离碱的有机溶剂的溶液中而使期望的
酸盐沉淀出来。

[0323] 可用于制得所述碱性化合物的药学上可接受的酸加成盐的酸，形成无毒酸加成盐，即含有药理学上可接受的阴离子的盐类，例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乙酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、糖质酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐与双羟萘酸盐[即1,1’-亚甲基-双(2-羟基-3-萘甲酸)
盐]。

[0324] 盐类的实例包括，但不限于乙酸盐、丙烯酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐(例如氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐与甲氧基苯甲酸盐)、碳酸氢盐、硫酸氢盐、亚硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、氢溴酸盐、丁炔-1,4-二酸盐、乙二胺四乙酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、盐酸盐、己酸盐、辛酸盐、棒酸盐、柠檬酸盐、癸酸盐、二盐酸盐、磷酸二氢盐、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐、依托酸盐、乙磺酸盐、乙基琥珀酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、对羟乙酰氨基苯胂酸盐、庚酸盐、己炔-1,6-二酸盐、己基间苯二酚酸盐、哈胺(hydrabamine)盐、氢溴酸盐、盐酸盐、γ-羟基丁酸盐、碘化物、异丁酸盐、异硫磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、十二烷酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、苯乙醇酸盐、甲磺酸盐、偏磷酸盐、甲磺酸盐、甲硫酸盐、磷酸氢盐、黏酸盐、萘磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、硝酸盐、油酸盐、乙二酸盐、亚甲基双羟萘酸盐(恩波酸盐)、十六烷酸盐、泛酸盐、苯乙酸盐、苯丁酸盐、苯丙酸盐、邻苯二甲酸盐、磷酸/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙磺酸盐、丙酸盐、丙炔酸盐、焦磷酸盐、焦硫酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、次乙酸盐、辛二酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、磺酸盐、亚硫酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐、甲苯磺酸盐、三乙碘化物(triethiodode)与戊酸盐。

[0325] 适当盐类的实例包括由氨基酸(例如甘氨酸与精氨酸)、氨、伯胺、仲胺与叔胺与环胺(例如哌啶、吗啉与哌嗪)衍生的有机盐，与由钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝与锂衍生的无机盐。

[0326] 包括碱性基团(例如氨基)的本发明的化合物除了上述酸类外，还可和各种各样的氨基酸形成药学上可接受的盐。

[0327] 酸性的本发明的化合物能够和各种各样的药理学上可接受的阳离子形成碱盐。该盐的实例包括碱金属盐或碱土金属盐，特别是钠盐与钾盐。这些盐类可通过惯用技术制得。
可用作制得本发明的药学上可接受的碱式盐的试剂的化学碱包括和本申请中的酸性化合
物形成无毒碱盐的化学碱。这些盐类可通过任何适当方法，例如用无机碱或有机碱，例如伯胺、仲胺或叔胺、碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物等处理游离酸而制得。这些盐类也可通过用含有期望的药理学上可接受的阳离子的水溶液处理对应的酸性化合物，然后优选地
以减压将所得的溶液蒸发到干而制得。或者，这些盐类也可通过将酸性化合物与期望的碱
金属烷氧化物的低级烷醇溶液一起混合，然后以上述方式将所得的溶液蒸发到干而制得。
在任一情形下，可使用化学计量的试剂以确保反应完全与所期望的最终产物的最大收率。

[0328] 可用作制得酸性的本发明的化合物的药学上可接受的碱盐的试剂的化学碱是可和酸性的本发明的化合物形成无毒碱盐的化学碱。该无毒碱式盐包括，但不限于由该药理
学上可接受的阳离子，例如碱金属阳离子(例如钾与钠)和碱土金属阳离子(例如钙与镁)，
铵或水溶性胺加成盐(例如N-甲基葡萄糖胺-(meglumine))，和低级烷醇铵所衍生的碱式盐
与其它药学上可接受的有机胺的碱盐。

[0329] 也可形成酸与碱的半盐，例如半硫酸盐与半钙盐。

[0330] 对于适当盐类的综述，参见Stahl and Wermuth的Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use(Wiley-VCH，2002)。用于制造药学上可接受的盐的方法是本领域技术人员已知的。

[0331] 本发明的盐类可根据本领域技术人员已知的方法而制得。本发明的化合物的药学上可接受的盐视情况而定可通过将本发明的化合物与期望的酸或碱的溶液一起混合而容
易地制得。该盐可从溶液沉淀出来并过滤收集得到，或可蒸发掉溶剂后回收得到。盐的离子化程度可从完全离子化至几乎不离子化不等。

[0332] 本领域技术人员会理解，用化学计量过量的适当酸处理可将具有碱性官能基的游离碱形式的本发明的化合物转化为酸加成盐。通常，于介于约0℃与100℃之间的温度于水
性溶剂存在情形下，用化学计量过量的适当碱(例如碳酸钾或氢氧化钠)处理可将本发明的
化合物的酸加成盐转化为对应的游离碱。通过惯用方式，例如用有机溶剂萃取，可分离出游离碱形式。此外，利用盐类的差异化溶解度，酸类的挥发性或酸度，或用适当负载的离子交换树脂处理可交换本发明的化合物的酸加成盐。例如，本发明的化合物的盐和稍微化学计
量过量的pK值比起始的盐的酸成分低的酸反应可影响交换作用。此转化通常是在介于约0
℃与用作步骤中的溶剂的沸点之间的温度进行。碱加成盐通常通过游离碱形式的中间性使
得类似的交换作用成为可能。

[0333] 本发明的化合物可以未溶剂化形式与溶剂化形式存在。当溶剂或水牢固地结合时，复合物会具有与水分无关的完好化学计量。然而，当溶剂或水微弱地结合时(如在通道溶剂合物与吸湿性化合物中)，含水/溶剂量会取决于水分与干燥条件。在该情形下，非化学计量将是常态。本申请中所用的术语“溶剂合物”描述一种分子复合物，其包含本发明的化合物与一种或多种药学上可接受的溶剂分子(例如乙醇)。当溶剂是水时，使用术语“水合
物”。根据本发明的药学上可接受的溶剂合物包括水合物与溶剂合物，其中结晶化作用的溶剂可经同位素取代，例如D2O、d6-丙酮与d6-DMSO。

[0334] 本发明的范围还包括复合物，例如晶笼化合物(clathrate)、药物-宿主包含复合物，其中，和上述溶剂合物相反，药物与宿主是以化学计量或非化学计量形式存在。本发明的范围还包括含有二种或更多种有机和/或无机成分的药物(可以化学计量或非化学计量
形式存在)的复合物。所得的复合物可离子化、部分离子化或非离子化。对于复合物的综述，参见J Pharm Sci，64(8)，1269-1288 by Haleblian(1975年8月)，以引用方式将其全部内容并入本申请。

[0335] 本发明还涉及本申请中所提供的式的化合物的前药。因此，当施用给所述患者时，某些本身可能具有很少或没有的药理活性的本发明的化合物的衍生物可，例如，水解裂解而转化为本发明的化合物。这类衍生物被称为“前药”。关于前药使用的进一步信息可参见‘Pro-drugs as Novel Delivery Systems’，Vol.14，ACS Symposium Series(T Higuchi和W Stella)与‘Bioreversible Carriers in Drug Design’，Pergamon Press，1987(E B Roche编辑，American Pharmaceutical Association)，以引用方式将其全部内容并入本申请。本申请中所用的“患者”可指人或动物患者。

[0336] 根据本发明的前药可，例如，用本领域技术人员已知的作为“前体部分(pro-moieties)”的某些基团替代存在于本发明的化合物中的适当官能基而制得，参见，例如，H Bundgaard的“Design of Prodrugs”(Elsevier，1985)，以引用方式将其全部内容并入本申请。

[0337] 有些根据本发明的潜在前药的非限定性实例包括：

[0338] (i)当化合物含有羧酸官能基(-COOH)时，例如，其氢被(C1-C8)烷基替代的酯；

[0339] (ii)当化合物含有醇官能基(-OH)时，例如，其氢被(C1-C6)烷酰基氧甲基替代的醚；以及

[0340] (iii)当化合物含有伯胺或仲胺官能基(-NH2或-NHR，其中R≠H)时，例如，其一个或二个氢被代谢不稳定的基团(例如酰胺、氨基甲酸根、脲、膦酸根、磺酸根等)替代的酰胺。

[0341] 根据上述实例的替代基团的另外实例与其它潜在前药类型的实例可参见上述的参考文献。

[0342] 最后，某些本发明的化合物本身可起其它的本发明的化合物的潜在前药的作用。

[0343] 本发明的范围还包括本申请中所述的式的化合物的代谢产物，即在施用药物后于体内形成的化合物。

[0344] 本申请中所提供的式的化合物可具有不对称碳原子。本申请中使用实线实线楔 或虚线楔 表示本发明的化合物的碳-碳键。使用实线表
示不对称碳原子的键旨在包括在不对称碳原子上的所有可能的立体异构体(例如特定对映
异构体、外消旋混合物等)。使用实线楔或虚线楔表示不对称碳原子的键旨在只包括所显示的立体异构体。本发明的化合物可能包含多于一个的不对称碳原子。在该化合物中，使用实线表示不对称碳原子的键旨在包括所有可能的立体异构体。例如，除非另外指出，否则希望本发明的化合物可以对映异构体与非对映异构体，或以其外消旋物与混合物形式存在。使
用实线表示本发明的化合物中的一个或多个不对称碳原子的键与使用实线楔或虚线楔表
示本发明的化合物中的其余不对称碳原子的键旨在指出非对映异构体混合物的存在。

[0345] 具有手性中心的本发明的化合物可以立体异构体(例如外消旋物、对映异构体或非对映异构体)形式存在。

[0346] 本申请中的式的化合物的立体异构体可包括本发明的化合物(包括表现出多于一种异构类型的化合物)的顺式与反式异构体、旋光异构体(例如(R)与(S)对映异构体)、非对映异构体、几何异构体、旋转异构体、阻旋异构体、构象异构体与互变异构体；及其混合物(例如外消旋物与非对映异构体对)。还包括酸加成盐或碱加成盐，其中相对离子是旋光活
性的(例如d-乳酸或l-赖氨酸)或外消旋的(例如dl-酒石酸或dl-精氨酸)。

[0347] 当外消旋物结晶化时，可能有二种不同的结晶。第一种是上述的外消旋化合物(真外消旋物)，其中产生含有二种等摩尔量的对映异构体的一种均相结晶形式。第二种是外消旋混合物或聚集物，其中产生等摩尔量的二种结晶形式，其分别包含一种对映异构体。

[0348] 本发明的化合物可表现出互变异构性与结构异构性现象。例如，本发明的化合物可以几种互变异构体形式(包括烯醇与亚胺形式，以及酮与烯胺形式)和几何异构体与其混
合物的形式存在。本发明的化合物的范围包括所有这些互变异构体形式。互变异构体在溶
液中以互变异构体集合的混合物存在。在固体形式中，通常一种互变异构体占优势。即使可能描述的是一种互变异构体，然而本发明包括所提供的式的化合物的所有互变异构体。

[0349] 此外，有些本发明的化合物可形成阻旋异构体(例如被取代的联芳基)。阻旋异构体是构象异构体，其是在绕着分子中的单键旋转受阻碍或大幅减慢时发生，由于和单键两
端的分子与取代基的其它部分的立体相互作用不对称的结果。阻旋异构体的相互转换足够
慢到可以在预定的条件下分离与分开。热外消旋的能量障壁可通过对形成手性轴的一个或
多个键自由转动的立体阻碍所测定。

[0350] 当本发明的化合物含有烯基或亚烯基时，几何顺式/反式(或Z/E)异构体可能存在。顺式/反式异构体可通过本领域技术人员众所周知的惯用技术(例如色谱法或分级结
晶)分离。

[0351] 用于制备/分离个体对映异构体的惯用技术包括从适当旋光纯的前体手性合成，或将外消旋物(或盐或衍生物的外消旋物)用(例如)手性高压液相色谱法(HPLC)分离。

[0352] 或者，可使外消旋物(或外消旋前体)与适当旋光化合物(例如，乙醇，或在化合物含有酸性基或碱性基时是酸或碱，例如酒石酸或1-苯基乙胺)反应。可将所得的非对映异构体混合物通过色谱法和/或分级结晶法分离，与通过本领域技术人员众所周知的方法将一
种或二种非对映异构体转化为对应的纯对映异构体。

[0353] 利用色谱法(典型为HPLC)于不对称树脂上用流动相可得到对映体富集的形式的本发明的手性异构体(与其手性前体)，所述流动相是由烃(典型为庚烷或己烷)组成，其含
有0至50％(典型为2至20％)的异丙醇，与0至5％的烷基胺(典型为0.1％二乙胺)。浓缩洗出液，得到对映体富集的的混合物。

[0354] 立体异构体聚集物可通过本领域技术人员已知的惯用技术分离，参见，例如，E L Eliel的“Stereochemistry of Organic Compounds”(Wiley，纽约，1994)，以引用方式将其全部内容并入本申请。

[0355] 本申请中所用的“对映体纯”描述以单一对映异构体形式存在且以对映异构体过量(e.e.)表示的化合物。优选地，其中化合物是以对映异构体形式存在，该对映异构体是以大于或等于约80％的对映异构体过量存在，更优选为以大于或等于约90％的对映异构体过
量存在，更优选为以大于或等于约95％的对映异构体过量存在，更优选为以大于或等于约
98％的对映异构体过量存在，最优选为以大于或等于约99％的对映异构体过量存在。类似
地，本申请中所用的“非对映异构体纯”描述以单一非对映异构体形式存在且以非对映异构体过量(d.e.)表示的化合物。优选地，其中化合物是以非对映异构体形式存在，该非对映异构体是以大于或等于约80％的非对映异构体过量存在，更优选为以大于或等于约90％的非
对映异构体过量存在，更优选为以大于或等于约95％的非对映异构体过量存在，更优选为
以大于或等于约98％的非对映异构体过量存在，最优选为以大于或等于约99％的非对映异
构体过量存在。

[0356] 本发明还包括同位素标记化合物，其与本申请中所提供的式之一所述的化合物相同，但是一个或多个原子被原子量或质量数不同于自然界常见的原子量或质量数的原子替
代。

[0357] 本发明的同位素标记化合物通常可通过本领域技术人员已知的惯用技术，或通过类似本申请中所述的方法，以适当同位素标记试剂替代别的方法所用的无标记试剂而制
得。

[0358] 可被结合到本发明的化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟与氯的同位素，例如，但不限于2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F与36Cl。某些本发明的同位素标记化合物，例如其中结合了放射性同位素(例如3H与14C)的那些，可用于药物和/或底物组织分布检定法。因为便于制备与可检测性，可特别优选氚化(即3H)与碳-14(即14C)同位素。另外，用较重的同位素(例如氘2H)取代可得到由潜在较大代谢稳定性而导致的某些潜在治
疗优势，例如可能增加的体内半衰期或可能减少的剂量需求，因此在有些情况下可能是优
选的。本发明的同位素标记化合物通常可通过进行在下列反应计划和/或实施例与制备例
中所公开的步骤，通过以同位素标记试剂代替无同位素标记试剂而制得。

[0359] 本发明的化合物可以结晶产物或无定形产物或其混合物被使用。可通过例如沉淀、结晶化、冷冻干燥、喷雾干燥或蒸发干燥的方法得到实心塞、粉末或薄膜形式的本发明的化合物。微波或高频干燥法可用于该目的。

[0360] 治疗方法与用途

[0361] 本发明进一步提供治疗方法与用途，其包含施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐，单独或合并一种或多种其它治疗剂或减轻剂。

[0362] 一方面，本发明提供一种用于治疗患者的异常细胞生长的方法，其包括将治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐施用给所述患者。

[0363] 另一方面，本发明提供一种用于治疗患者的异常细胞生长的方法，其包括将一定量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐，组合一定量的抗肿瘤剂施用给所述患者，所
述的剂量一起有效治疗所述的异常细胞生长。在有些这样的实施方案中，所述抗肿瘤剂选
自由下列各项组成的组：有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢药、嵌入性抗生素、生长因子抑制剂、放射、细胞周期抑制剂、酶、拓朴异构酶抑制剂、生物反应调节剂、抗体、细胞毒剂、抗激素与抗雄激素。

[0364] 本发明的化合物包括本申请中所述的式中任一者的化合物(即式I、I’、II、II’、I-A、I-A’、I-B、I-B’、II-A、II-A’、II-B、II-B’与III的化合物)，或其药学上可接受的盐。

[0365] 另一方面，本发明提供一种用于治疗患者的异常细胞生长的方法，其包括将有效治疗异常细胞生长的量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐施用给所述患者。

[0366] 另一方面，本发明提供一种抑制患者的癌细胞增生的方法，其包括将有效抑制细胞增生的量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐施用给所述患者。

[0367] 另一方面，本发明提供一种抑制患者的癌细胞侵袭的方法，其包括将有效抑制细胞侵袭的量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐施用给所述患者。

[0368] 另一方面，本发明提供一种诱发患者的癌细胞凋亡的方法，其包括将有效诱发细胞凋亡的量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐施用给所述患者。

[0369] 另一方面，本发明提供一种诱发患者的细胞凋亡的方法，其包括将治疗有效量的本申请中所述式之一的化合物或其药学上可接受的盐施用给所述患者。

[0370] 在本申请中所提供的方法的常见实施方案中，所述异常细胞生长是癌，其中所述的癌选自由下列各项组成的组：基质细胞癌、神经管胚细胞癌、肝癌、横纹肌癌、肺癌、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头颈癌、皮肤或眼球内黑色素瘤、子宫癌、卵巢癌、直肠癌、肛门部癌、胃癌、结肠癌、乳癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌、阴门癌、何杰金氏病、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、肾上腺癌、软组织癌、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、淋巴细胞性淋巴瘤、膀胱癌、肾或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)癌、原发性中枢神经系统(CNS)淋巴瘤、脊髓轴癌、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤或上述癌中的一种或多种的组合。

[0371] 在有些实施方案中，本发明的化合物对突变型EZH2具选择性，使得与某些癌有关的H3K27的三甲基化受到抑制。本申请中所提供的方法与用途可用于治疗癌，包括滤泡性淋巴瘤与弥散性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。

[0372] 本发明的化合物可用于治疗癌，例如肿瘤，例如脑癌、乳癌、子宫颈癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、食道癌、胃癌、头颈癌、肝细胞癌、喉癌、肺癌、口腔癌、卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌与甲状腺癌和肉瘤。

[0373] 本申请中所用的术语“治疗有效量”是指被施用的化合物在一定程度上缓解被治疗的病症的症状中的一种或多种的量。关于癌的治疗，治疗有效量是指对下列有效的量：
(1)使肿瘤的尺寸减小，(2)抑制(即，一定程度上减慢，优选终止)肿瘤转移，(3)一定程度上抑制(即，一定程度上减慢，优选终止)肿瘤生长或肿瘤侵袭，和/或(4)一定程度上缓解(或，优选消除)与癌有关的一种或多种病征或症状。

[0374] 本申请中所用的“患者”是指人或动物患者。在某些优选实施方案中，患者是人。

[0375] 本申请中所用的术语“治疗”，除非另外指出，意指反转该术语适用的病症或病况或者该病症或病况的一种或多种症状、缓和该术语适用的病症或病况或者该病症或病况的一种或多种症状、抑制其进展或预防该术语适用的病症或病况或者该病症或病况的一种或
多种症状。本申请中所用的术语“治疗”，除非另外指出，是指如上面所定义的“治疗”的行动。术语“治疗”还包括患者的辅助与新辅助治疗。

[0376] 本申请中术语“异常细胞生长”与“过度增生性病症”可被交换地使用。

[0377] 本申请中所用的“异常细胞生长”，除非另外指出，是指不受正常调节机制支配(例如丧失接触抑制作用)的细胞生长。异常细胞生长可为良性的(非癌性的)，或恶性的(癌性的)。这包括下列的异常生长：(1)显出增加的EZH2表达的肿瘤细胞(肿瘤)；(2)EZH2被过度表达的其它增生性疾病的良性与恶性细胞；(3)通过异常EZH2活化增生的肿瘤；以及(4)发
生异常EZH2活化的其它增生性疾病的良性与恶性细胞。

[0378] 本申请中所用的“癌”是指由异常细胞生长引起的任何恶性和/或侵袭性生长或肿瘤。本申请中所用的术语“癌”是指实体肿瘤(以形成该肿瘤的细胞类型命名)、血液癌、骨髓癌或淋巴系统癌。实体肿瘤的实例包括，但不限于肉瘤与上皮癌。血液癌的实例包括，但不限于白血病、淋巴瘤与骨髓癌。术语“癌”包括，但不限于起源于身体特定部位的原发癌、从开始的地方扩散到身体其它部位的转移性癌、于缓解后从原发癌再发、和人体内与先前癌
病史不同类型的第二原发癌(新的原发癌)。本发明的化合物可抑制EZH2，所以可用作哺乳
动物(特别是人)的抗增生剂(例如癌)或抗肿瘤剂(例如有效抗实体肿瘤)。特别地，本发明
的化合物可用于预防与治疗各种各样的人类过度增生性病症，例如恶性或良性异常细胞生
长。

[0379] 本申请中所提供的化合物、组合物与方法可用于治疗癌，其包括(但不限于)下列的癌：

[0380] 循环系统，例如心脏(肉瘤[血管肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肪肉瘤]、黏液瘤、横纹肌瘤、纤维瘤、脂肪瘤与畸胎瘤)，纵膈与肋部，和其它胸腔内器官、血管瘤与肿瘤相关血管组织；

[0381] 呼吸道，例如鼻腔与中耳、鼻副窦、喉、气管、支气管与肺，例如小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、支气管癌(鳞状细胞癌、未分化小细胞、未分化大细胞、腺癌)、(小支气管)肺泡癌、支气管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、软骨缺陷瘤、间皮瘤；

[0382] 胃肠系统，例如食道(鳞状细胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)，胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)，胃癌，胰腺癌(导管腺癌、胰岛素瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、类癌瘤、血管活性肠肽肿瘤)，小肠(腺癌、淋巴瘤、类癌瘤、Karposi氏肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神经纤维瘤、纤维瘤)，大肠(腺癌、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、缺陷瘤、平滑肌瘤)；

[0383] 泌尿生殖系统，例如肾(腺癌、Wilms氏瘤[肾胚细胞瘤]、淋巴瘤、白血病)，膀胱和/或尿道(鳞状细胞癌、移行细胞癌、腺癌)，前列腺(腺癌、肉瘤)，睾丸(精原细胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、畸胎上皮癌、绒毛膜癌、肉瘤、间质细胞癌、纤维瘤、纤维腺瘤、腺瘤样肿瘤、脂肪瘤)；

[0384] 肝脏，例如肝癌(肝细胞癌)、胆管癌、肝胚细胞瘤、血管肉瘤、肝细胞腺瘤、血管瘤、胰腺内分泌瘤(例如嗜铬细胞瘤、胰岛素瘤、血管活性肠肽瘤、胰岛细胞瘤与胰高血糖素瘤)；

[0385] 骨，例如骨原性肉瘤(骨肉瘤)、纤维肉瘤、纤维性组织细胞癌、软骨肉瘤、Ewing氏肉瘤、淋巴瘤(网状细胞肉瘤)、多发性骨髓瘤、巨细胞性脊索癌、osteochronfroma(骨软骨性外骨瘤)、良性软骨瘤、软骨胚细胞瘤、软骨黏液纤维瘤、骨样骨瘤与巨细胞瘤；

[0386] 神经系统，例如中枢神经系统(CNS)癌、原发性中枢神经系统(CNS)淋巴瘤、头颅癌(骨瘤、血管瘤、肉芽肿、黄瘤、畸形性骨炎)、脑脊髓膜癌(脑脊髓膜癌、脑脊髓膜肉癌、神经胶质瘤)、脑癌(星形细胞瘤、神经管胚细胞瘤、神经胶质瘤、室管膜瘤、胚细胞瘤[松果体瘤]、多形神经胶母细胞瘤、寡树突神经胶细胞瘤、神经鞘瘤、视网膜胚细胞瘤、先天瘤)、脊髓神经纤维瘤、脑脊髓膜瘤、神经胶质瘤、肉瘤)；

[0387] 生殖系统，例如妇科，子宫(子宫内膜癌)，子宫颈(子宫颈癌、癌前子宫颈发育不良)，卵巢(卵巢癌[浆液性囊腺癌、黏液性囊腺癌、未分类癌]、粒层细胞及鞘细胞瘤、
Sertoli-Leydig细胞瘤、恶性胚细胞瘤、恶性畸胎瘤)，阴门(鳞状细胞癌、上皮内癌、腺癌、纤维肉瘤、黑色素瘤)，阴道(透明细胞癌、鳞状细胞癌、葡萄形肉瘤(胚胎性横纹肌肉瘤)，输卵管(输卵管癌)和与女性生殖器相关的其它部位；胎盘、阴茎、前列腺、睾丸以及与男性生殖器相关的其它部位；

[0388] 血液系统，例如血液(骨髓白血病[急性与慢性]、急性淋巴母细胞白血病、慢性淋巴球性白血病、骨髓增生性疾病、多发性骨髓瘤、骨髓发育不良综合征)，何杰金氏病，非何杰金氏淋巴瘤[恶性淋巴瘤]；

[0389] 口腔，例如唇、舌、齿龈、口底、颚与口的其它部分、腮腺与唾液腺的其它部分、扁桃腺、口咽、鼻咽、梨状窦、下咽与在唇、口腔、咽喉内的其它部位；

[0390] 皮肤，例如黑色素瘤、皮肤黑色素瘤、基质细胞癌、鳞状细胞癌、Karposi氏肉瘤、发育不良的痣、脂肪瘤、血管瘤、皮肤纤维瘤与瘢痕瘤；

[0391] 肾上腺：神经胚细胞瘤；以及

[0392] 其它组织，包括结缔组织与软组织、腹膜后腔与腹膜、眼、眼球内黑色素与附件、乳房、头或/与颈、肛门部、甲状腺、副甲状腺、肾上腺和其它内分泌腺与相关组织、淋巴结继发性与不明性恶性肿瘤、呼吸与消化系统继发性恶性肿瘤和其它部位继发性恶性肿瘤。

[0393] 更具体地，本发明所用的“癌”的实例包括选自下列的癌：肺癌(NSCLC与SCLC)、头颈癌、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、肛门部癌、胃癌、乳癌、肾与输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)癌、原发性中枢神经系统(CNS)淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、脊髓轴癌或上述癌中的一种或多种的组合。

[0394] 还更具体地，本发明所用的“癌”的实例包括选自下列的癌：肺癌(NSCLC与SCLC)、乳癌、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、肛门部癌或上述癌中的一种或多种的组合。

[0395] 在本发明的一个实施方案中，非癌性状况包括增生状况，例如皮肤良性增生(例如牛皮癣)与前列腺良性增生(例如BPH)。

[0396] 另一方面，本发明提供一种用于抑制细胞增生的方法，其包括将有效抑制细胞增生的量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐与细胞接触。

[0397] 另一方面，本发明提供用于诱发细胞凋亡的方法，其包括将有效诱发细胞凋亡的量的本申请中所述的化合物与细胞接触。

[0398] “接触”是指以化合物可直接或间接地影响EZH2活性的方式将本发明的化合物或药学上可接受的盐与表达EZH2的细胞混一起。接触可在体外(即，在人工环境中，例如，不限于，在试管或培养基中)或在体内(即，在活体内，例如，不限于，小鼠、大鼠或兔子)进行。

[0399] 在有些实施方案中，细胞是细胞系(例如癌细胞系)。在其它实施方案中，细胞是在组织或肿瘤中，且该组织或肿瘤可在患者(包括人)体内。

[0400] 剂量形式与方案

[0401] 本发明的化合物的施用可通过使化合物能够递送到作用位置的任何方法实现。这些方法包括经口途径、十二指肠内途径、肠胃外注射(包括静脉注射、皮下注射、肌内注射、血管内注射或输注)、局部施用与直肠施用。

[0402] 剂量方案可被调整以提供最适的期望反应。例如，可施用一次性大剂量注射，可随时间推移施用几个分剂量，或可按治疗情况的急切需要所指示成比例地减少或增加剂量。将肠胃外组合物配制成易于施用与剂量一致性的剂量单位形式是特别有利的。本申请中所
用的剂量单位形式是指适合作为用于待治疗的哺乳动物患者的单一剂量的物理不连续单
位；每一单位含有经计算以产生期望治疗效果的预定量的活性化合物与所需的药用载体。
本发明的剂量单位形式的规格可受支配且直接取决于(a)化学治疗剂的独有特征与欲达到
的特定治疗或预防效果，与(b)在配制用于治疗患者的敏感性的活性化合物的技术领域中
的限制。

[0403] 因此，技术人员根据本申请中提供的公开内容会理解根据治疗技术领域中众所周知的方法来调整剂量与给药方案。也就是说，可容易地确定最大耐受剂量，也可建立提供患者可检测的治疗利益的有效剂量，正如可短暂施用各药剂以提供患者可检测的治疗利益。
因此，尽管本申请中举例说明特定的剂量与给药方案，然而这些的实例决非限制在实践本
发明时可提供给患者的剂量与给药方案。

[0404] 值得注意的是，剂量可随着待缓和的病况的种类与严重程度变动，且可包括单个剂量或多个剂量。应理解，对任一特定患者而言，特定的给药方案应根据患者需要与施用或指导施用组合物的人士的专业判断随时间推移被调整，本申请中所述的剂量范围仅仅是示
范性的且并非意图限制本发明的组合物的范围与实作。例如，剂量可根据药物动力学或药
效学参数被调整，该参数可包括临床效应，例如毒性效应和/或实验数值。因此，本发明包含技术人员所测定的同一病患的剂量增量。测定用于施用化学治疗剂的适当剂量与给药方案
是相关技术领域众所周知的，且技术人员一旦被提供了本申请中提供的教导会理解它包括
在内。

[0405] 被施用的本发明的化合物剂量取决于受治疗的患者、病症或病况的严重程度、施用速率、化合物特性与处方医师的裁量。然而，有效剂量是在每日每千克体重约0.001至约
100毫克，优选为每日每千克体重约1至约35毫克范围内，以一次剂量或分剂量形式。对70千克的人而言，剂量会是每日约0.05至约7克，优选为每日约0.1至约2.5克。在某些情况下，低于上述范围之下限的剂量可能更适当，而在其它情况下，在不导致任何有害副作用前提下
可使用更大的剂量，条件是首先将该更大的剂量分成几份小剂量于一日内施用。

[0406] 制剂与施用途径

[0407] 本发明所用的“药学上可接受的载体”是指对生物不引起显著刺激且不废除活性化合物的生物活性与特性的载体或稀释剂。

[0408] 药学上可接受的载体可包含任何惯用的药用载体或赋形剂。载体和/或赋形剂的选择在很大程度上取决于下列因素：特定施用模式、赋形剂对溶解度与稳定性的效果与剂
量形式特性。

[0409] 适当药用载体包括惰性稀释剂或填料、水与各种各样的有机溶剂(例如水合物与溶剂合物)。如果需要，药物组合物可含有另外的活性成分，例如调味剂、粘合剂、赋形剂等。
因此，对口服而言，可使用含有各种各样的赋形剂(例如柠檬酸)合并各种各样的崩解剂(例如淀粉、海藻酸与特定复合硅酸盐)和粘合剂(例如蔗糖、明胶与阿拉伯胶)的片剂。赋形剂的非限制性的实例包括碳酸钙、磷酸钙、各种各样的糖与淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油与聚乙二醇。此外，制片常使用润滑剂，例如硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠与滑石粉。类似模式的固体组合物也可用于软及硬明胶胶囊。因此，材料的非限制性的实例包括乳糖与高分子
量聚乙二醇。当期望将水性悬浮液或酏剂用于口服时，其中的活性化合物可合并各种各样
的甜味剂或调味剂，着色剂或色素，与(视情况而定)乳化剂或悬浮剂，连同稀释剂(例如水、乙醇、丙二醇、甘油)，或其组合物。

[0410] 例如，药物组合物适合于口服的形式可为片剂、胶囊、药丸、粉末、持续释放制剂、溶液或悬浮液，适合于肠胃外注射的形式可为无菌溶液、悬浮液或乳液，适合于局部性施用的形式可为软膏或乳膏，或适合于直肠施用的形式可为栓剂。

[0411] 示范性肠胃外施用形式包括活性化合物的无菌水溶液(例如丙二醇或葡萄糖水溶液)的溶液或悬浮液。如果需要，该剂量形式可适当地被缓冲。

[0412] 药物组合物可为适合于精确量的单次施用的单元剂量形式。

[0413] 适合于递送活性药物的药物组合物与其制备方法是本领域技术人员非常显见的。该组合物与其制法可参见，例如，‘Remington's Pharmaceutical Science’，第19版(Mack Publishing Company，1995)，以引用方式将其全部内容并入本申请。

[0414] 本发明的化合物可口服。口服可包括吞下(让化合物进入消化道)，或经颊或舌下施用(让化合物直接从口进入血流)。

[0415] 适合于口服的制剂包括固体制剂，例如片剂，含有颗粒、液体或粉末的胶囊，锭剂(包括液体填充的锭剂)、咀嚼剂、多颗粒剂与纳米颗粒剂、凝胶剂、固溶体、脂质体、薄膜剂(包括口腔黏贴片)、卵状剂、喷雾剂与液体制剂。

[0416] 液体制剂包括悬浮液、溶液、糖浆与酏剂。液体制剂可用作软或硬胶囊中的填料且通常包括载体，例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纤维素或适当的油，与一种或多种乳化剂和/或悬浮剂。液体制剂还可由，例如，将来自小药囊的固体重新配制而制得。

[0417] 本发明的化合物还可被用于快速溶解、快速崩解剂量形式，参见Liang和Chen的Expert Opinion in Therapeutic Patents，11(6)，981-986(2001)，以引用方式将其全部内容并入本申请。

[0418] 对片剂剂型而言，活性药剂可占剂型的1wt％至80wt％，更典型占剂型的5wt％至60wt％。除了活性药剂之外，片剂通常含有崩解剂。崩解剂的实例包括淀粉羟基乙酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、微晶纤维素、经低级烷基取代的羟丙基纤维素、淀粉、预糊化淀粉与海藻酸钠。通常，崩解剂可占剂型的1wt％至25wt％，优选为5wt％至20wt％。

[0419] 通常用粘合剂赋予片剂制剂粘附特性。适当粘合剂包括微晶纤维素、明胶、糖类、聚乙二醇、天然胶与合成胶、聚乙烯吡咯烷酮、预糊化淀粉、羟丙基纤维素与羟丙基甲基纤维素。片剂还可含有稀释剂，例如乳糖(一水合物、经喷雾干燥的一水合物、无水物等)、甘露糖醇、木糖醇、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、微晶纤维素、淀粉与磷酸氢钙二水合物。

[0420] 片剂还可任选地包括表面活性剂(例如十二烷基硫酸钠与聚山梨酯80)与助流剂(例如二氧化硅与滑石粉)。当存在时，表面活性剂的量典型为片剂的0.2wt％至5wt％，与助流剂的量典型为片剂的0.2wt％至1wt％。

[0421] 片剂通常还含有润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、硬脂酰富马酸钠、和硬脂酸镁与十二烷基硫酸钠混合物。润滑剂的量通常是片剂的0.25wt％至10wt％，优选为片剂的0.5wt％至3wt％。

[0422] 其它惯用成分包括抗氧化剂、着色剂、调味剂、防腐剂与味觉掩蔽剂。

[0423] 示范性片剂可含有多达约80wt％活性药剂、约10wt％至约90wt％粘合剂、约0wt％至约85wt％稀释剂、约2wt％至约10wt％崩解剂与约0.25wt％至约10wt％润滑剂。

[0424] 片剂掺合物可被直接压片或滚轧成片。或者，在压片前，可将片剂掺合物或部分的掺合物通过湿法制粒、干法制粒或熔解，熔解冻凝，或挤出。最终制剂可包括一层或多层且可包衣或不包衣；或胶囊化。

[0425] H.Lieberman和L.Lachman的“Pharmaceutical Dosage Forms：Tablets，Vol.1”，Marcel Dekker，N.Y.，N.Y.，1980(ISBN 0-8247-6918-X)中详细讨论了片剂的配制，以引用方式将其全部内容并入本申请。

[0426] 口服固体制剂可为了立即释放和/或调控释放目的被配制。调控释放制剂包括延迟释放、持续释放、脉冲释放、控制释放、靶向释放与程序化释放。

[0427] 美国专利第6,106,864号中描述了适当调控释放制剂。其它适当释放技术(例如高能量分散与渗透与被包被的粒子)可参见Verma等人，Pharmaceutical Technology On-
line，25(2)，1-14(2001)。WO 00/35298中描述了利用口香糖来达到控制释放。以引用方式将其全部内容并入本申请。

[0428] 肠胃外施用

[0429] 本发明的化合物还可被直接施用到血流、肌肉或内脏器官中。适当肠胃外施用方法包括静脉内、动脉内、腹膜内、脑脊髓膜内、室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内与皮下施用。
适当肠胃外给药器材包括有针(包括微型针)注射器、无针注射器与输注技术。

[0430] 肠胃外制剂通常为水溶液，其可含有赋形剂，例如盐类、碳氢化合物与缓冲剂(优选为pH 3至9)，但是对某些应用而言，肠胃外制剂可能更适合被配制成无菌非水性溶液或
和适当溶媒(例如无菌无热的水)联用的干燥形式。

[0431] 利用本领域技术人员众所周知的标准制药技术可容易地于无菌条件下(例如通过冷冻干燥)制备肠胃外制剂。

[0432] 利用适当配制技术(例如加入增溶剂)可能使用于制备肠胃外溶液的本发明的化合物的溶解度增加。

[0433] 肠胃外施用制剂可为了立即释放和/或调控释放目的被配制。调控释放制剂包括延迟释放、持续释放、脉冲释放、控制释放、靶向释放与程序化释放。因此，本发明的化合物可能被配制成充当提供调控释放活性化合物的植入式储存剂型的固体、半固体或触变性液
体。肠胃外施用制剂的实例包括涂药支架与PGLA微球。

[0434] 本发明的化合物还可能被局部性施用到皮肤或黏膜上，即皮肤施用或通过皮肤施用。典型的局部性施用制剂包括凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、乳膏、软膏、撒布粉剂、敷料、泡沫体、薄膜剂、皮肤贴剂、糯米纸馕剂、植入物、海绵、纤维、绷带与微乳液。也可使用脂质体。典型的载体包括乙醇、水、矿物油、凡士林油、白凡士林、甘油、聚乙二醇与丙二醇。可加入穿透增强剂，参见，例如，Finnin和Morgan的J Pharm Sci，88(10)，955-958(October 1999)。其它局部性施用方法包括通过电穿孔法、离子电渗法、超音波透入法、超音波导入法与微型针或无针注射(例如PowderjectTM，BiojectTM等)施用。以引用方式将这些参考文献的全部内容并入本申请。

[0435] 局部施用制剂可为了立即释放和/或调控释放目的被配制。调控释放制剂包括延迟释放、持续释放、脉冲释放、控制释放、靶向释放与程序化释放。

[0436] 本发明的化合物还可能被鼻内或吸入施用，典型为来自干粉吸入器的干粉形式(单独，混合物，例如和乳糖的干掺合物，或混合的成分粒子，例如和磷脂(例如卵磷脂)混合)，或在使用或不使用适当推喷剂(例如1,1,1,2-四氟乙烷或1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷)
情形下，来自加压容器、泵、喷雾器、雾化器(优选为利用电流体动力学产生细雾的雾化器)或气雾器的气雾剂形式。对鼻内施用而言，粉末可包括生物黏附性药剂，例如脱乙酰壳多糖或环糊精。

[0437] 加压容器、泵、喷雾器、雾化器或气雾器可含有本发明的化合物的溶液或悬浮液，其包含，例如乙醇、乙醇水溶液或用于使活性化合物分散、溶解或缓释的适当替代药剂、作为溶剂的推喷剂与任选的表面活性剂，例如去水山梨糖醇三油酸酯、油酸或寡乳酸。

[0438] 在用于干粉或悬浮液制剂之前，可先将化合物微粉化至适合于吸入施用的大小(典型为小于5微米)。这可通过任何适当粉碎方法(例如螺旋喷流粉碎、流化床喷流粉碎、超临界流体加工以形成纳米粒子)、高压均质化或喷雾干燥达到。

[0439] 用于吸入器或吹药器中的胶囊(例如，用明胶或HPMC制成)、泡眼包装与药筒可被配制成含有本发明的化合物的粉末混合物、适当粉末基质(例如乳糖或淀粉)与性能改性剂
(例如L-亮氨酸、甘露糖醇或硬脂酸镁)。乳糖可为无水物或一水合物，优选为一水合物。其它适当赋形剂包括葡聚糖、葡萄糖、麦芽糖、山梨糖醇、木糖醇、果糖、蔗糖与海藻糖。

[0440] 用于利用电流体动力学以产生细雾的雾化器的适当溶液制剂于每次驱动可含有1μg至20mg的本发明的化合物且驱动体积可从1μL至100μL不等。典型的制剂包括本发明的化合物、丙二醇、无菌水、乙醇与氯化钠。可被用来替代丙二醇的替代溶剂包括甘油与聚乙二醇。

[0441] 可将适当调味剂(例如甲醇与左旋薄荷醇)或甜味剂(例如糖精或糖精钠)加入用于吸入/鼻内施用的本发明的制剂中。

[0442] 用于吸入/鼻内施用的制剂可为了立即释放和/或调控释放(例如，利用聚乳酸羟基乙酸(PGLA))目的被配制。调控释放制剂包括延迟释放、持续释放、脉冲释放、控制释放、靶向释放与程序化释放。

[0443] 在干粉吸入器与气雾剂情形，利用定量阀来测定剂量。通常安排根据本发明的装置以施用含有希望量的本发明的化合物的定量或“喷气”。每日总剂量可以一次剂量施用或更常见地，分成几次剂量于一日内施用。

[0444] 本发明的化合物可能被直肠或阴道施用，例如以栓剂、阴道栓剂或灌肠剂形式。椰子油是惯用的栓剂基质，但可视情况而定利用各种各样的替代物。

[0445] 用于直肠/阴道施用的制剂可为了立即释放和/或调控释放目的被配制。调控释放制剂包括延迟释放、持续释放、脉冲释放、控制释放、靶向释放与程序化释放。

[0446] 本发明的化合物还可能被直接施用到眼或耳，通常以等渗pH值经调整的无菌盐溶液的微粉化悬浮液或溶液的液滴形式。其它适合于眼与耳施用的制剂可包括软膏、生物可
降解性(例如可吸收性凝胶海绵、胶原)与生物不可降解性(例如聚硅氧)植入物、薄片、镜片与颗粒状或多孔状系统(例如类脂囊泡或脂质体)。可将聚合物与防腐剂(例如氯化苄烷铵)
并用，该聚合物例如交联聚丙烯酸、聚乙烯醇、玻尿酸、纤维素聚合物(例如羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素或甲基纤维素)或杂多糖聚合物(例如结兰胶)。此制剂还可通过离子电渗疗法施用。

[0447] 用于眼/耳施用的制剂可为了立即释放和/或调控释放目的被配制。调控释放制剂包括延迟释放、持续释放、脉冲释放、控制释放、靶向释放或程序化释放。

[0448] 其它技术

[0449] 本发明的化合物可和可溶性大分子实体(例如环糊精与其适当衍生物或含有聚乙二醇的聚合物)并用，以改进其溶解度、溶解率、味觉掩蔽性、生物利用度和/或用于上述施用模式中任一种的稳定性。

[0450] 药物-环糊精复合物，例如，可用于不同的剂量形式与给药途径。包含复合物与非包含复合物皆可能被利用。作为与药物直接复合的可替代物，环糊精可用作辅助添加剂，
即，作为载体、稀释剂或增溶剂。为了实现这些目的，最常用的是α-环糊精、β-环糊精与γ-环糊精，其的实例可参见PCT公开号WO 91/11172、WO 94/02518与WO 98/55148，以引用方式将其全部内容并入本申请。

[0451] 剂量

[0452] 被施用的活性化合物剂量取决于受治疗的患者、病症或病况的严重程度、施用速率、化合物特性与处方医师的裁量。然而，有效剂量典型为在每日每千克体重约0.001至约
100mg，优选为每日每千克体重约0.01至约35mg范围内，以一次剂量或分剂量形式。对70kg的人而言，剂量会是每日约0.07至约7000mg，优选为每日约0.7至约2500mg。在某些情况下，低于上述范围的下限的剂量可能更适当，而在其它情况下，在不造成任何有害副作用前提
下可使用更大的剂量，条件是将该更大的剂量通常分成几份小剂量于一日内施用。

[0453] 部件套装

[0454] 由于施用活性化合物的组合(例如，用于治疗特定疾病或病况的目的)可能是符合需要的，本发明的范围包括可将二种或更多种药物组合物(其中至少一种含有根据本发明
的化合物)可以方便地组合成适合于共同施用药物组合物的套装形式。因此，本发明的套装包括二种或更多种单独的药物组合物(其中至少一种含有本发明的化合物)，以及用于单独
保留药物组合物的装置，例如容器、分瓶或分箔包。该套装的实例是用于包装片剂、胶囊等的惯用泡眼包装。

[0455] 本发明的套装可特别适合于施用不同的剂量形式，例如，口服与肠胃外剂量形式，适合于在不同剂量间隔施用单独的组合物，或适合于单独的组合物彼此滴定。为有助于顺应性，本发明的套装通常包括给药指示且可提供有记忆辅助工具。

[0456] 联合疗法

[0457] 本申请中所用的术语“联合疗法”是指将本发明的化合物连同至少一种另外的药用物质或药剂(例如，抗癌剂)顺序施用或同时施用。

[0458] 如上所述，本发明的化合物可能和下述的一种或多种另外的抗癌剂组合使用。当使用联合疗法时，可将一种或多种另外的抗癌剂和本发明的化合物顺序施用或同时施用。
在一个实施方案中，在施用本发明的化合物之前，先将另外的抗癌剂施用给哺乳动物(例如人)。在另一个实施方案中，在施用本发明的化合物之后，再将另外的抗癌剂施用给哺乳动物。在另一个实施方案中，在施用本发明的化合物同时，将另外的抗癌剂施用给哺乳动物
(例如人)。

[0459] 本发明还涉及用于治疗哺乳动物(包括人)的异常细胞生长的药物组合物，其包含一定量的上述本发明的化合物(包括所述化合物或其药学上可接受的盐的水合物、溶剂合
物与多晶型物)，组合一种或多种(优选为一种至三种)选自抗血管生成剂与信号传导抑制
剂的抗肿瘤剂和药学上可接受的载体，其中活性药剂与组合抗癌剂的量作为一个整体有效
治疗该异常细胞生长。

[0460] 在本发明的一个实施方案中，与本申请中所述的本发明的化合物和药物组合物组合的抗肿瘤剂是抗血管生成剂(例如终止肿瘤发展新血管的药剂)。抗血管生成剂的实例包
括，例如，VEGF抑制剂、VEGFR抑制剂、TIE-2抑制剂、PDGFR抑制剂、血管生成素抑制剂、PKCβ抑制剂、COX-2(环加氧酶II)抑制剂、整联蛋白(α-v/β-3)、MMP-2(基质金属蛋白酶2)抑制剂与MMP-9(基质金属蛋白酶9)抑制剂。

[0461] 优选的抗血管生成剂包括舒尼替尼(sunitinib)(SutentTM)、贝伐单抗(bevacizumab)(AvastinTM)、阿西替尼(axitinib)(AG 13736)、SU 14813(Pfizer)与AG 
13958(Pfizer)。

[0462] 另外的抗血管生成剂包括伐他拉尼(vatalanib)(CGP 79787)、索拉非尼(Sorafenib)(NexavarTM)、培加他尼八钠(pegaptanib octasodium)(MacugenTM)、伐他拉尼(vandetanib)(ZactimaTM)、PF-0337210(Pfizer)、SU 14843(Pfizer)、AZD 2171
(AstraZeneca)、来尼珠单抗(ranibizumab)(LucentisTM)、NeovastatTM(AE 941)、四硫钼酸盐(CoprexaTM)、AMG 706(Amgen)、VEGF Trap(AVE 0005)、CEP 7055(Sanofi-Aventis)、XL 
880(Exelixis)、替拉替尼(telatinib)(BAY 57-9352)与CP-868,596(Pfizer)。

[0463] 其它抗血管生成剂包括恩扎妥林(enzastaurin)(LY 317615)、米哚妥林(midostaurin)(CGP 41251)、哌立福辛(perifosine)(KRX 0401)、替普瑞酮(teprenone)
(SelbexTM)与UCN 01(Kyowa Hakko)。

[0464] 其它可和本申请中所述的本发明的化合物与药物组合物联用的抗血管生成剂的实例包括塞内昔布(celecoxib)(CelebrexTM)、帕瑞考昔(parecoxib)(DynastatTM)、德拉考昔(deracoxib)(SC 59046)、罗美考昔(lumiracoxib)(PreigeTM)、瓦迪考昔(valdecoxib)
(BextraTM)、罗菲考昔(rofecoxib)(VioxxTM)、埃拉莫德(iguratimod)(CareramTM)、IP 751(Invedus)、SC-58125(Pharmacia)与依托考昔(etoricoxib)(ArcoxiaTM)。

[0465] 其它抗血管生成剂包括依昔舒林(exisulind)(AptosynTM)、水杨酸水杨酸酯(salsalate)(AmigesicTM)、二氟苯水杨酸(二flunisal)(DolobidTM)、异丁苯丙酸
TM TM
(ibuprofen)(Motrin )、酮洛芬(ketoprofen)(Orudis )、萘丁美酮(nabumetone)
(RelafenTM)、吡氧噻嗪(piroxicam)(FeldeneTM)、甲氧萘丙酸(naproxen)(AleveTM，
NaprosynTM)、双氯酚酸(二clofenac)(VoltarenTM)、美洒辛(indomethacin)(IndocinTM)、苏灵大(sulindac)(ClinorilTM)、甲苯酰吡酸(tolmetin)(TolectinTM)、依托度酸(etodolac)TM TM TM
(Lodine )、酮咯酸(ketorolac)(Toradol )与奥沙普秦(oxaprozin)(Daypro )。

[0466] 其它抗血管生成剂包括ABT 510(Abbott)、阿帕司特(apratastat)(TMI 005)、AZD 8955(AstraZeneca)、吲环素(incyclinide)(MetastatTM)与PCK 3145(Procyon)。

[0467] 其它抗血管生成剂包括阿维A(acitretin)(NeotigasonTM)、普利肽新(plitidepsin)(aplidineTM)、西蓝肽(cilengtide)(EMD 121974)、康普瑞汀A4磷酸盐
(combretastatin A4)(CA4P)、芬维A胺(fenretinide)(4HPR)、卤夫酮(halofuginone)
(TempostatinTM)、甲氧基雌二醇(PanzemTM)、PF-03446962(Pfizer)、瑞马司特
(rebimastat)(BMS  275291)、卡突美单抗(catumaxomab)(RemovabTM)、来那度胺
(lenalidomide)(RevlimidTM)、角鲨胺(squalamine)(EVIZONTM)、酞胺哌啶酮
(thalidomide)(ThalomidTM)、UkrainTM(NSC 631570)、VitaxinTM(MEDI 522)与唑来膦酸
TM
(zoledronic acid)(Zometa )。

[0468] 在另一个实施方案中，所述的抗癌剂是所谓的信号传导抑制剂(即，抑制调控分子支配细胞中交流的细胞生长、分化与存活的基本过程的机制)。信号传导抑制剂包括小分
子、抗体与反义分子。信号传导抑制剂包括，例如，激酶抑制剂(即酪氨酸激酶抑制剂或丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂)与细胞周期抑制剂。更具体地，信号传导抑制剂包括，例如，法尼基蛋白转移酶抑制剂、EGF抑制剂、ErbB-1(EGFR)、ErbB-2、pan erb、IGF1R抑制剂、MEK、c-Kit抑制剂、FLT-3抑制剂、K-Ras抑制剂、PI3激酶抑制剂、JAK抑制剂、STAT抑制剂、Raf激酶抑制剂、Akt抑制剂、mTOR抑制剂、p70S6激酶抑制剂、WNT途径抑制剂与所谓的多靶向激酶抑制剂。

[0469] 优选的信号传导抑制剂包括吉非替尼(gefitinib)(IressaTM)、西妥昔单抗(cetuximab)(ErbituxTM)、埃罗替尼(erlotinib)(TarcevaTM)、曲妥珠单抗(trastuzumab)(HerceptinTM)、舒尼替尼(sunitinib)(SutentTM)、伊马替尼(imatinib)(GleevecTM)与
PD325901(Pfizer)。

[0470] 其它可和本申请中所述的本发明的化合物与药物组合物联用的信号传导抑制剂的实例包括BMS 214662(Bristol-Myers Squibb)、洛那法尼(lonafarnib)(SarasarTM)、吡利曲索(pelitrexol)(AG 2037)、马妥珠单抗(matuzumab)(EMD 7200)、尼妥珠单抗
(nimotuzumab)(TheraCIM h-R3TM)、帕尼单抗(panitumumab)(VectibixTM)、凡德他尼
(vandetanib)(ZactimaTM)、帕唑帕尼(pazopanib)(SB 786034)、ALT 110(Alteris 
Therapeutics)、BIBW 2992(Boehringer Ingelheim)、CerveneTM(TP 38)。

[0471] 其它信号传导抑制剂的实例包括PF-2341066(Pfizer)、PF-299804(Pfizer)、卡奈替尼(canertinib)(CI 1033)、帕妥珠单抗(pertuzumab)(OmnitargTM)、拉帕替尼
(lapatinib)(TycerbTM)、培利替尼(pelitinib)(EKB 569)、米替福新(miltefosine)
(MiltefosinTM)、BMS 599626(Bristol-Myers Squibb)、Lapuleucel-T(NeuvengeTM)、
NeuVaxTM(E75癌症疫苗)、OsidemTM(IDM 1)、莫立替尼(mubritinib)(TAK-165)、CP-724,714(Pfizer)、帕尼单抗(panitumumab)(VectibixTM)、拉帕替尼(lapatinib)(TycerbTM)、PF-
299804(Pfizer)、培利替尼(pelitinib)(EKB 569)与帕妥珠单抗(pertuzumab)
(OmnitargTM)。

[0472] 其它信号传导抑制剂的实例包括ARRY 142886(Array Biopharm)、伊维莫司(everolimus)(CerticanTM)、唑他利莫司(zotarolimus)(EndeavorTM)、特癌适
TM
(temsirolimus)(Torisel )、AP 23573(ARIAD)与VX 680(Vertex)。

[0473] 此外，其它信号传导抑制剂的实例包括XL 647(Exelixis)、索拉非尼(sorafenib)(NexavarTM)、LE-AON(Georgetown大学)、GI-4000(Globelmmune)。

[0474] 其它信号传导抑制剂的实例包括ABT 751(Abbott)、阿伏西地(alvocidib)(黄酮吡多(flavopiridol))、BMS 387032(Bristol Myers)、EM 1421(Erimos)、吲地磺胺
(indisulam)(E 7070)、塞利西利(seliciclib)(CYC 200)、BIO 112(Onc Bio)、BMS 387032(Bristol-Myers Squibb)、PD 0332991(Pfizer)与AG 024322(Pfizer)。

[0475] 本发明涵盖本发明的化合物连同传统抗肿瘤剂的应用。传统抗肿瘤剂包括，但不限于激素调节剂，例如激素、抗激素、雄激素激动剂、雄激素拮抗剂与抗雌激素治疗剂、组织蛋白去乙酰酶(HDAC)抑制剂、基因沉默剂或基因活化剂、核糖核酸酶、蛋白体剂、拓朴异构酶I抑制剂、喜树碱衍生物、拓朴异构酶II抑制剂、烷化剂、抗代谢药、聚(ADP-核糖)聚合酶-
1(PARP-1)抑制剂、微管蛋白抑制剂、抗生素、植物源的纺锤体形成抑制剂、铂配位化合物、基因治疗剂、反义寡核苷酸、血管靶向药物(VTAs)与抑制素类(statins)。

[0476] 联合疗法中与本发明的化合物联用，任选地与一种或多种其它药剂联用的传统抗肿瘤剂的实例包括，但不限于糖皮质素，例如地塞米松(dexamethasone)、泼尼松
(prednisone)、泼尼松龙(prednisolone)、甲泼尼松龙(methylprednisolone)、氢化可的松(hydrocortisone)，与孕酮类，例如甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮(Megace)、美服培酮
(mifepristone)(RU-486)、选择性雌激素受体抑制剂(SERMs)，例如他莫西芬(tamoxifen)、雷洛西芬(raloxifene)、拉索西芬(lasofoxifene)、阿非昔芬(afimoxifene)、阿佐西芬
(arzoxifene)、巴多西芬(bazedoxifene)、非培米芬(fispemifene)、奥美西芬
(ormeloxifene)、奥培米芬(ospemifene)、替米利芬(tesmilifene)、托瑞米芬
(toremifene)、曲洛司坦(trilostane)、CHF 4227(Cheisi)，选择性雌激素受体下调剂
(SERD)，例如氟维司群(fulvestrant)，依西美坦(exemestane)(Aromasin)、阿那曲唑
(anastrozole)(Arimidex)、阿它美坦(atamestane)、法倔唑(fadrozole)、来曲唑
(letrozole)(Femara)、促性腺激素释放激素(GnRH，通常称为促孕酮释放激素[LHRH])激动剂，例如布舍瑞林(buserelin)(Suprefact)、戈舍瑞林(goserelin)(Zoladex)、亮丙瑞林
(leuprorelin)(Lupron)、曲普瑞林(triptorelin)(Trelstar)、阿巴瑞克(abarelix)
(Plenaxis)、比卡鲁胺(bicalutamide)(Casodex)、环孕酮(cyproterone)、氟他胺
(flutamide)(Eulexin)、甲地孕酮(megestrol)、尼鲁米特(nilutamide)(Nilandron)、奥沙特隆(osaterone)、度他雄胺(dutasteride)、依立雄胺(epristeride)、非那雄胺
(finasteride)、塞润榈(serenoa repens)、PHL 00801、阿巴瑞克(abarelix)、戈舍瑞林
(goserelin)、亮丙瑞林(leuprorelin)、曲普瑞林(triptorelin)、比卡鲁胺
(bicalutamide)、他莫西芬(tamoxifen)、依西美坦(exemestane)、阿那曲唑
(anastrozole)、法倔唑(fadrozole)、福美坦(formestane)、来曲唑(letrozole)，以及它们的组合。

[0477] 与本发明的化合物联用的传统抗肿瘤剂的其它实例包括，但不限于环庚酰苯胺(suberolanilide)羟肟酸(SAHA，Merck Inc./Aton Pharmaceuticals)、酯肽(FR901228或
FK228)、G2M-777、MS-275、丁酸特戊酰氧甲酯与PXD-101；豹蛙酶(onconase)(ranpirnase)、PS-341(MLN-341)、Velcade(硼替佐米(bortezomib))、9-氨基喜树碱、贝洛替康
(belotecan)、BN-80915(Roche)、喜树碱、二氟替康(二flomotecan)、艾特咔林
(edotecarin)、依沙替康(exatecan)(Daiichi)、吉马替康(gimatecan)、10-羟基喜树碱、盐酸伊立替康(irinotecan HCl)(Camptosar)、勒托替康(lurtotecan)、欧勒新(Orathecin)
(鲁比替康(rubitecan)，Supergen)、SN-38、拓朴替康(topotecan)、喜树碱、10-羟基喜树碱、9-氨基喜树碱、伊立替康(irinotecan)、SN-38、艾特咔林(edotecarin)、拓朴替康
(topotecan)、阿柔比星(aclarubicin)、阿霉素(adriamycin)、氨萘非特(amonafide)、氨柔比星(amrubicin)、安那霉素(annamycin)、柔红霉素(daunorubicin)、阿霉素
(doxorubicin)、依沙芦星(elsamitrucin)、表阿霉素(epirubicin)、依托泊苷
(etoposide)、伊达比星(idarubicin)、加柔比星(galarubicin)、羟基脲
(hydroxycarbamide)、奈莫柔比星(nemorubicin)、诺安托(novantrone)(双羟葱醌
(mitoxantrone))、吡柔比星(pirarubicin)、匹杉琼(pixantrone)、丙卡巴肼
(procarbazine)、若贝霉素(rebeccamycin)、索布佐生(sobuzoxane)、特氟甙
(tafluposide)、戊柔比星(valrubicin)、辛卡德(Zinecard)(右雷佐生(dexrazoxane))、氮芥N-氧化物、环磷酰胺(cyclophosphamide)、AMD-473、六甲蜜胺(altretamine)、AP-5280、阿帕醌(apaziquone)、搏妥星(brostallicin)、苯达莫司汀(bendamustine)、白消安
(busulfan)、卡巴醌(carboquone)、卡氮芥(carmustine)、氯芥苯丁酸(chlorambucil)、氮烯唑胺(dacarbazine)、雌二醇氮芥(estramustine)、福莫司汀(fotemustine)、葡磷酰胺
(glufosfamide)、依弗酰胺(ifosfamide)、KW-2170、罗氮芥(lomustine)、马磷酰胺
(mafosfamide)、氮芥(mechlorethamine)、美法仑(melphalan)、二溴甘露醇
(mitobronitol)、二溴卫矛醇(mitolactol)、丝裂霉素C(mitomycin C)、双羟葱醌
(mitoxatrone)、尼氮芥(nimustine)、雷诺氮芥(ranimustine)、替莫唑胺(temozolomide)、硫替派(thiotepa)，与铂配位烷基化化合物，例如顺氯氨铂(cisplatin)、Paraplatin(卡铂(carboplatin))、依铂(eptaplatin)、洛铂(lobaplatin)、奈达铂(nedaplatin)、益乐铂
(Eloxatin)(奥沙利铂，Sanofi)、链脲佐菌素(streptozocin)、赛特铂(satrplatin)，以及它们的组合。

[0478] 本发明亦涵盖本发明的化合物与下列物质联用：二氢叶酸还原酶抑制剂(例如甲氨蝶呤(methotrexate)与NeuTrexin(三甲曲沙葡糖醛酸盐))，嘌呤拮抗剂(例如6-巯基嘌
呤核糖苷、巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、克拉屈滨(cladribine)、氯伐拉滨(clofarabine)
(Clolar)、氟达拉滨(fludarabine)、奈拉滨(nelarabine)与雷替曲塞(raltitrexed))，嘧啶拮抗剂(例如5-氟尿嘧啶(5-FU)、爱宁达(Alimta)(培美曲塞二钠，LY231514，MTA)、卡培他滨(capecitabine)(XelodaTM)、阿糖胞苷(cytosine arabinoside)、GemzarTM(吉西他滨(gemcitabine)，Eli Lilly)、Tegafur(UFT Orzel或Uforal与包括替加氟(Tegafur)、吉美司特(gimestat)与欧妥司特(otostat)的TS-1组合)、脱氧氟尿苷(doxifluridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)(包括ocfosfate、硬脂酸磷酸盐、持续释放与脂质体形式)、依诺他滨(enocitabine)、5-氨基呋喃核糖基三嗪酮(5-azacitidine)(Vidaza)、地西他滨(decitabine)与乙炔胞嘧啶核苷(ethynylcytidine))，与其它抗代谢药，例如依氟鸟
氨酸(eflornithine)、羟基脲、亚叶酸(leucovorin)、诺拉曲塞(nolatrexed)(Thymitaq)、曲亚品(triapine)、三甲曲沙(trimetrexate)、N-(5-[N-(3,4-二氢-2-甲基-4-氧代喹唑
啉-6-基甲基)-N-甲基氨基]-2-噻吩甲酰基)-L-谷氨酸、AG-014699(Pfizer Inc.)、ABT-
472(Abbott Laboratories)、INO-1001(Inotek Pharmaceuticals)、KU-0687(KuDOS 
Pharmaceuticals)、GPI 18180(Guilford Pharm Inc)，以及它们的组合。

[0479] 联合疗法中与本发明的化合物及任选一种或多种其它药剂联用的传统抗肿瘤细胞毒剂的其它实例包括，但不限于白蛋白纳米紫杉醇(Abraxane)(Abraxis BioScience，
Inc.)、巴他布尔(Batabulin)(Amgen)、EPO 906(Novartis)、长春氟宁(Vinflunine)
(Bristol-Myers Squibb公司)、放线菌素D(actinomycin D)、博莱霉素(bleomycin)、丝裂霉素C(mitomycin C)、新制癌菌素(neocarzinostatin)(Zinostatin)、长春花碱
(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、长春地辛(vindesine)、长春瑞滨(vinorelbine)(Navelbine)、多西他赛(docetaxel)(Taxotere)、欧塔紫杉醇(Ortataxel)、紫杉醇
(paclitaxel)(包括Taxoprexin，一种DHA/紫杉醇共轭体)、顺氯氨铂(cisplatin)、卡铂
(carboplatin)、奈达铂(Nedaplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)(Eloxatin)、赛特铂
(Satraplatin)、Camptosar、卡培他滨(capecitabine)(Xeloda)、奥沙利铂(oxaliplatin)(Eloxatin)、泰索帝阿利维A酸、Canfosfamide(TelcytaTM)、DMXAA(Antisoma)、伊班膦酸(ibandronic acid)、左旋天冬酰氨酶(L-asparaginase)、培门冬酶(pegaspargase)
TM TM
(Oncaspar )、乙法昔罗(efaproxiral)(Efaproxyn -放射疗法)、蓓萨罗丁(bexarotene)
(TargretinTM)、替米利芬(Tesmilifene)(DPPE-增强细胞毒剂效力)、TheratopeTM
(Biomira)、Tretinoin(VesanoidTM)、替拉扎明(tirapazamine)(TrizaoneTM)、莫特沙芬钆(motexafin gadolinium)(XcytrinTM)、CotaraTM(mAb)、NBI-3001(Protox Therapeutics)、TM
聚谷氨酸紫杉醇(polyglutamate-paclitaxel)(Xyotax )，以及它们的组合。

[0480] 联合疗法中与本发明的化合物及任选一种或多种其它药剂联用的传统抗肿瘤剂的其它实例包括，但不限于Advexin(ING 201)、TNFerade(GeneVec，一种应答放射疗法而表达TNFα的化合物)、RB94(Baylor College of Medicine)、Genasense(Oblimersen，Genta)、康普瑞汀A4磷酸盐(Combretastatin A4P)(CA4P)、Oxi-4503、AVE-8062、ZD-6126、TZT-
1027、阿伐他汀(Atorvastatin)(Lipitor，Pfizer Inc.)、普伐他汀(Provastatin)
(Pravachol，Bristol-Myers Squibb)、洛伐他汀(Lovastatin)(Mevacor，Merck Inc.)、辛伐他汀(Simvastatin)(Zocor，Merck Inc.)、氟伐他汀(Fluvastatin)(Lescol，Novartis)、西立伐他汀(Cerivastatin)(Baycol，Bayer)、罗苏伐他汀(Rosuvastatin)(Crestor，
AstraZeneca)、洛伐他汀(Lovostatin)、烟酸(Niacin)(Advicor，Kos Pharmaceuticals)、脂脉优(Caduet)、Lipitor、托彻普(torcetrapib)，以及它们的组合。

[0481] 令人特别感兴趣的本发明的另一个实施方案涉及用于治疗需要该治疗的人的乳癌的方法，其包括将一定量的本发明的化合物组合一种或多种(优选一种至三种)选自由下
列各项组成的组的抗肿瘤剂施用给所述的人：曲妥珠单抗(trastuzumab)、他莫西芬
(tamoxifen)、多西他赛(docetaxel)、紫杉醇(paclitaxel)、卡培他滨(capecitabine)、吉西他滨(gemcitabine)、长春瑞滨(vinorelbine)、依西美坦(exemestane)、来曲唑
(letrozole)与阿那曲唑(anastrozole)。

[0482] 在一个实施方案中，本发明提供一种治疗需要该治疗的哺乳动物(例如人)的结肠直肠癌的方法，其通过施用一定量的本发明的化合物组合一种或多种(优选一种至三种)抗
肿瘤剂来进行。特定抗肿瘤剂的实例包括通常被用于辅助化疗的抗肿瘤剂，例如FOLFOX，一种5-氟尿嘧啶(5-FU)或卡培他滨(capecitabine)(Xeloda)，亚叶酸(leucovorin)与奥沙利
铂(oxaliplatin)(Eloxatin)。另外的特定抗肿瘤剂的实例包括通常被用于转移性疾病的
化疗的抗肿瘤剂，例如FOLFOX或FOLFOX合并贝伐单抗(bevacizumab)(Avastin)；以及
FOLFIRI，一种5-FU或卡培他滨(capecitabine)、亚叶酸(leucovorin)与伊立替康
(irinotecan)(Camptosar)的组合物。另外的实例包括17-DMAG、ABX-EFR、AMG-706、AMT-
2003、ANX-510(CoFactor)、海洋环肽(aplidine)(普利肽新(plitidepsin)，Aplidin)、
Aroplatin、阿西替尼(axitinib)(AG-13736)、AZD-0530、AZD-2171、卡介菌(BCG)、贝伐单抗(bevacizumab)(Avastin)、BIO-117、BIO-145、BMS-184476、BMS-275183、BMS-528664、硼替佐米(bortezomib)(Velcade)、C-1311(Symadex)、莫坎妥珠单抗(cantuzumab 
mertansine)、卡培他滨(capecitabine)(Xeloda)、西妥昔单抗(cetuximab)(Erbitux)、氯伐拉滨(clofarabine)(Clofarex)、CMD-193、康普瑞汀(Combretastatin)、Cotara、CT-
2106、CV-247、地西他滨(decitabine)(Dacogen)、E-7070、E-7820、艾特咔林(edotecarin)、EMD-273066、恩扎妥林(enzastaurin)(LY-317615)、埃博霉素B(epothilone B)(EPO-906)、埃罗替尼(erlotinib)(Tarceva)、黄酮吡多(flavopyridol)、GCAN-101、吉非替尼
(gefitinib)(Iressa)、huA33、huC242-DM4、伊马替尼(imatinib)(Gleevec)、吲地磺胺
(indisulam)、ING-1、伊立替康(irinotecan)(CPT-11，Camptosar)、ISIS 2503、伊沙匹隆(ixabepilone)、拉帕替尼(lapatinib)(Tykerb)、马帕木单抗(mapatumumab)(HGS-ETR1)、MBT-0206、MEDI-522(Abregrin)、丝裂霉素(Mitomycin)、MK-0457(VX-680)、MLN-8054、NB-
1011、NGR-TNF、NV-1020、奥利美生(oblimersen)(Genasense，G3139)、OncoVex、ONYX 015(CI-1042)、奥沙利铂(oxaliplatin)(Eloxatin)、帕尼单抗(panitumumab)(ABX-EGF，
Vectibix)、培利替尼(pelitinib)(EKB-569)、培美曲塞二钠(pemetrexed)(Alimta)、PD-
325901、PF-0337210、PF-2341066、RAD-001(Everolimus)、RAV-12、Resveratrol、Rexin-G、S-1(TS-1)、塞利西利(seliciclib)、SN-38脂质体、葡萄糖酸锑钠(Sodium 
stibogluconate)(SSG)、索拉非尼(Sorafenib)(Nexavar)、SU-14813、舒尼替尼
(sunitinib)(Sutent)、特癌适(temsirolimus)(CCI  779)、四硫钼酸盐
(tetrathiomolybdate)、thalomide、TLK-286(Telcyta)、拓朴替康(topotecan)
(Hycamtin)、曲贝替定(trabectedin)(Yondelis)、伐他拉尼(vatalanib)(PTK-787)、伏立诺特(vorinostat)(SAHA，Zolinza)、WX-UK1与ZYC300，其中所述活性剂的量和组合抗肿瘤药的量共同有效治疗结肠直肠癌。

[0483] 令人特别感兴趣的本发明的另一个实施方案涉及用于治疗需要该治疗的人的肾细胞癌的方法，其包括将一定量的本发明的化合物组合一种或多种(优选一种至三种)选自
由下列各项组成的组的抗肿瘤剂施用给所述的人：阿西替尼(axitinib)(AG 13736)、卡培
他滨(capecitabine)(Xeloda)、干扰素α、白介素-2、贝伐单抗(bevacizumab)(Avastin)、吉西他滨(gemcitabine)(Gemzar)、酞胺哌啶酮(thalidomide)、西妥昔单抗(cetuximab)
(Erbitux)、伐他拉尼(vatalanib)(PTK-787)、舒尼替尼(sunitinib)(SutentTM)、AG-13736、SU-11248、Tarceva、易瑞沙(Iressa)、拉帕替尼(Lapatinib)与格列卫(Gleevec)，其中所述活性剂的量和组合抗肿瘤药的量共同有效治疗肾细胞癌。

[0484] 令人特别感兴趣的本发明的另一个实施方案涉及用于治疗需要该治疗的人的黑色素瘤的方法，其包括将一定量的本发明的化合物组合一种或多种(优选一种至三种)选自
由下列各项组成的组的抗肿瘤剂施用给所述的人：干扰素α、白介素-2、替莫唑胺
(temozolomide)(Temodar)、多西他赛(docetaxel)(Taxotere)、紫杉醇(paclitaxel)、氮烯唑胺(Dacarbazine)(DTIC)、卡氮芥(carmustine)(也称为BCNU)、顺氯氨铂(Cisplatin)、长春花碱(vinblastine)、他莫西芬(tamoxifen)、PD-325,901、阿西替尼(axitinib)(AG 
13736)、贝伐单抗(bevacizumab)(Avastin)、酞胺哌啶酮(thalidomide)、索拉非尼
(sorafanib)、伐他拉尼(vatalanib)(PTK-787)、舒尼替尼(sunitinib)(SutentTM)、CpG-
7909、AG-13736、易瑞沙、拉帕替尼与格列卫，其中所述活性剂的量和组合抗肿瘤药的量共同有效治疗黑色素瘤。

[0485] 令人特别感兴趣的本发明的另一个实施方案涉及用于治疗需要该治疗的人的肺癌的方法，其包括将一定量的本发明的化合物组合一种或多种(优选一种至三种)选自由下
列各项组成的组的抗肿瘤剂施用给所述的人：卡培他滨(capecitabine)(Xeloda)、阿西替
尼(axitinib)(AG 13736)、贝伐单抗(bevacizumab)(Avastin)、吉西他滨(gemcitabine)
(Gemzar)、多西他赛(docetaxel)(Taxotere)、紫杉醇(paclitaxel)、培美曲塞二钠
(premetrexed disodium)(Alimta)、它赛瓦(Tarceva)、易瑞沙、长春瑞滨(Vinorelbine)、伊立替康(Irinotecan)、依托泊苷(Etoposide)、长春花碱(Vinblastine)、舒尼替尼
TM
(sunitinib)(Sutent )与Paraplatin(卡铂(carboplatin))，其中所述活性剂的量和组合
抗肿瘤药的量共同有效治疗肺癌。

[0486] 合成方法

[0487] 本发明的化合物可根据本申请中所提供的示范性程序与本领域技术人员已知的其修改而制得。此外，形成可用作供制备本申请中所要求保护的化合物的原料的各种各样
的化合物的合成途径描述在国际申请号PCT/IB2013/060682中，以引用方式将其全部内容
并入本申请。

[0488] 在本申请中所提供的实施例的制备中举例说明了这些方法与其它的方法。本领域技术人员会理解原料的选择与步骤的特定顺序，包括，例如，形成内酰胺环，导入或操作在稠合内酰胺或其前体上的各种各样的取代基，以及导入吡啶酮部分，可通过选择适当的合
成策略而改变。

[0489] 在下列实施例与表1中提供了合成实施例。表2提供了本发明的示范性化合物对WT EZH2与突变型Y641N EZH2的EZH2 IC50值(μM)。

[0490] 在全部实施例中使用下列缩写：“Ac”意指乙酰基，“AcO”或“OAc”意指乙酰氧基，“Ac2O”意指乙酸酐，“ACN”或“MeCN”意指乙腈，“AIBN”意指偶氮二异丁腈，“BOC”、“Boc”或“boc”意指N-叔丁氧羰基，“Bn”意指苄基，“BPO”意指过氧化二苯甲酰，“Bu”意指丁基，“iBu”意指异丁基，“sBu”意指仲丁基，“tBu”意指叔丁基，“tBuOK”或“KOtBu”意指叔丁醇钾，“CDI”意指羰基二咪唑，“DCE”意指1,2-二氯乙烷，“DCM”(CH2Cl2)意指二氯甲烷，“DEAD”意指偶氮二羧酸二乙酯，“DIAD”意指偶氮二羧酸二异丙酯，“DIPEA”或“DIEA”意指二异丙基乙胺，“DBU”意指1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯，“DIBAL-H”意指氢化二异丁基铝，“DMA”意指N,N-二甲基乙酰胺，“DMAP”意指4-二甲基氨基吡啶，“DME”意指二甲氧基乙烷，“DMF”意指N,N-二甲基甲酰胺，“DMS”意指二甲基硫醚，“DMSO”意指二甲亚砜，“dppf”意指(二苯基膦)二茂铁，“DPPP”意指1,3-双(二苯基膦)丙烷，“Et”意指乙基，“EtOAc”意指乙酸乙酯，“EtOH”意指乙醇，“HATU”意指2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲脲 六氟磷酸盐，“HOAc”或“AcOH”意指乙酸，“i-Pr”或“iPr”意指异丙基，“IPA”意指异丙醇，“KHMDS”意指六甲基二硅氮烷化钾(双(三甲硅烷基)氨化钾)，“LiHMDS”意指六甲基二硅氮烷化锂(双(三甲硅烷基)氨化锂)，“mCPBA”意指间氯过氧苯甲酸，“Me”意指甲基，“MeOH”意指甲醇，“Ms”意指甲磺酸盐或酯(一般称为“mesylate”)，“MTBE”意指甲基叔丁醚，“NBS”意指N-溴琥珀酰亚胺，“NCS”意指N-氯琥珀酰亚胺，“NIS”意指N-碘琥珀酰亚胺，“NMM”意指N-甲基吗啉，“NMP”意指1-甲基-2-吡咯烷酮，“Ph”意指苯基，“RuPhos”意指2-二环己基膦-2',6'-二异丙氧基联苯，“Selectfluor”意指氯甲基-4-氟-1,4-二氮正离子双环[2.2.2]辛基双(四氟硼酸
酯)，“TEA”意指三乙胺，“TFA”意指三氟乙酸，“Tf”意指三氟甲磺酸盐或酯(一般称为“triflate”)，“THF”意指四氢呋喃，“TMS”意指三甲硅烷基，“TMSA”意指叠氮三甲基硅烷，“TsCl”意指甲苯磺酰氯(一般称为“tosylate”)，“SFC”意指超临界流体色谱法，“TLC”意指薄层色谱法，“Rf”意指比移值，“～”意指大约，“rt”意指室温，“h”意指小时，“min”意指分钟，“eq”意指当量。

[0491] 合成中间体的制备

[0492] 化合物D：2-(苄氧基)-3-(氯甲基)-4,6-二甲基吡啶

[0493]

[0494] 将Ag2O(146g，0.631mol)加到2-羟基-4,6-二甲基吡啶-3-腈(85.0g，0.574mol)与苄基氯(87.0g，0.688mol)的甲苯(800mL)溶液中。于110℃搅拌反应混合物过夜。通过
过滤反应混合物并用二氯甲烷清洗固体。真空下浓缩滤液，通过柱色谱法
(石油醚/乙酸乙酯)纯化，得到白色固体2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-腈(Cpd A，89g，
65％)。

[0495] 44.5g X 2批：于0至5℃下将DIBAL-H(224mL，224mmol，1M的甲苯溶液)逐滴加到经搅拌的2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-腈(Cpd A，44.5g，187mmol)的二氯甲烷(500mL)溶液中。让反应混合物升温至室温并搅拌3小时。用1N HCl(200mL)淬灭混合物并将其剧烈搅
拌30分钟。以4N NaOH(20mL)中和反应混合物，过滤二相混合物，以二氯甲烷(500mL)清洗。
用二氯甲烷(200mL)萃取水层，以硫酸钠干燥经合并的有机层，真空下浓缩。将残留物通过柱色谱法(石油醚/EtOAc)纯化，得到黄色固体2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-甲醛(Cpd 
B，70g，78％)。

[0496] 35g×2批：将硼氢化钠(6.60g，174mmol)分几次加到0℃的2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-甲醛(Cpd B，35.0g，145mmol)的甲醇(1000mL)溶液中。于室温搅拌反应混合物2小时。真空下浓缩反应混合物，用饱和NaHCO3水溶液稀释残留物。待冒泡停止后，用乙酸乙酯(2×500mL)萃取水溶液。以硫酸钠干燥经合并的有机层，真空下浓缩，通过柱色谱法(石
油醚/乙酸乙酯)纯化，得到无色油状[2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基]甲醇(Cpd C，
43g，61％)。

[0497] 21.5g×2批：于-40℃于N2下将亚硫酰氯(16.0g，133mmol)加到[2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基]甲醇(Cpd C，21.5g，88.5mmol)的无水二氯甲烷(400mL)溶液中。于-40℃搅拌混合物30分钟。将反应混合物倒入冰水(300mL)中，用NaHCO3固体将pH调整到7至8。分离混合物，用二氯甲烷(300mL)萃取水层。用盐水(300mL)清洗经合并的有机层，以硫酸钠干燥，真空下浓缩。将残留物通过柱色谱法(100：1石油醚/乙酸乙酯)纯化，得到白色固体2-(苄氧基)-3-(氯甲基)-4,6-二甲基吡啶(Cpd D，27.5g，60％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ
7.51-7.49(d，2H)，7.41-7.37(t，2H)，7.34-7.30(t，1H)，6.62(s，1H)，5.45(s，2H)，4.73(s，+
2H)，2.42(s，3H)，2.37(s，3H)。MS：261.9[M+H]。

[0498] 化合物L：2-(苄氧基)-3-(氯甲基)-4-(二氟甲氧基)-6-甲基吡啶

[0499]

[0500] 将丙二腈(100g，1190mmol)的无水四氢呋喃(30mL)溶液逐滴加到经冷却(-10℃)的氢化钠(60wt％矿物油分散体，59.9g，1500mmol)的无水四氢呋喃(1200mL)悬浮液中，缓慢添加足以使内部温度维持低于5℃。加完后，于0℃搅拌混合物1.5小时，接着逐滴加入双乙烯酮(80.1g，1190mmol)，缓慢添加足以使内部温度维持低于0℃。于-10℃搅拌混合物1.5小时，接着用4N盐酸中和，浓缩以除去挥发物。将残留的4N盐酸(2000mL)悬浮液于回流下搅拌5小时，接着于室温搅拌过夜。通过抽气过滤收集所得的白色沉淀物。依序用水(500mL)、乙醇(500mL)与MTBE(300mL)清洗滤饼。干燥固体，得到黄色粉末4-羟基-6-甲基-2-氧代-1,
1
2-二氢吡啶-3-腈(Cpd E，108g，60.3％)。H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.40(br.s.，1H)，
11.72(br.s.，1H)，5.82(s，1H)，2.17(s，3H)。

[0501] 将4-羟基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-腈(Cpd E，91g，610mmol)、磷酰氯(195g，1270mmol)与五氯化磷(265g，1270mmol)的三氯甲烷(1200mL)悬浮液于回流下加热5小时，得到红色均匀混合物。于谨慎地搅拌下将混合物倒入水(2000mL)中，接着用28％氢氧化铵水溶液中和。滤出所得的固体沉淀物，依序用二氯甲烷(400mL)与乙醇(500mL)清洗，干燥，得到黄色固体4-氯-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-腈(Cpd F，78g，76％)。1H NMR
(400MHz，DMSO-d6)δ12.43(br.s.，1H)，6.53(s，1H)，2.28(s，3H)。

[0502] 将4-氯-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-腈(Cpd F，90g，530mmol)、氧化银(I)(136g，587mmol)与苄基氯(81.1g，641mmol)的无水甲苯(1500mL)悬浮液于回流下加热12小时。通过 垫过滤混合物，用二氯甲烷(500mL)清洗滤饼。浓缩滤液，得到残留
物(～100g)，通过柱色谱法(硅胶，石油醚/EtOAc＝50：1～30：1)纯化，得到浅黄色固体2-(苄氧基)-4-氯-6-甲基烟碱甲腈(Cpd G，70g，51％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.49-7.47(m，2H)，7.40-7.33(m，3H)，6.91(s，1H)，5.05(s，2H)，2.50(s，3H)。

[0503] 于室温将乙酸铯(156.0g，812mmol)加到经搅拌的2-(苄氧基)-4-氯-6-甲基烟碱甲腈(Cpd G，70g，270.58mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(300mL)溶液中。于80℃搅拌所得的混合物40小时。以乙酸乙酯(500mL)稀释混合物，用盐水(3×400mL)清洗。以硫酸钠干燥有机
相，过滤，浓缩，得到残留物(～50g)，通过柱色谱法(硅胶，石油醚/EtOAc＝10：1～3：1)纯化，得到浅黄色固体2-(苄氧基)-4-羟基-6-甲基烟碱甲腈(Cpd H，31g，48％)。1H NMR
(400MHz，DMSO-d6)δ12.28(br.s.，1H)，7.51-6.98(m，5H)，6.50(s，1H)，5.41(s，2H)，2.34(s，3H)。MS 226.8[M+Na]+。

[0504] 于室温将碳酸钾(34.5g，250mmol)加到2-(苄氧基)-4-羟基-6-甲基烟碱甲腈(Cpd H，20.0g，83mmol)与氯二氟乙酸钠(25.4g，166mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(200mL)悬浮液
中。加热所得的混合物至100℃维持10分钟。用乙酸乙酯(300mL)稀释反应混合物，以饱和
NH4Cl水溶液(3×400mL)与盐水(3×400mL)清洗。用乙酸乙酯(400mL)反萃取水层。以硫酸
钠干燥经合并的有机层，过滤，浓缩，得到残留物(18g)，通过柱色谱法(硅胶，石油醚/EtOAc＝50：1～20：1)纯化，得到浅黄色固体2-(苄氧基)-4-(二氟甲氧基)-6-甲基烟碱甲腈(Cpd I，16.3g，67％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.49-7.46(m，2H)，7.40-7.33(m，3H)，6.69(t，J＝
71Hz，1H)，6.67(s，1H)，5.51(s，2H)，2.52(s，3H)。

[0505] 于0℃于氮气下将氢化二异丁基铝(1.0M的甲苯溶液，72mL，72mmol)逐滴加到2-(苄氧基)-4-(二氟甲氧基)-6-甲基烟碱甲腈(Cpd I，11g，38mmol)的无水二氯甲烷(250mL)溶液中。加完后，于室温搅拌混合物2.5小时。用1M盐酸将混合物酸化至pH～5。于室温搅拌2小时，以4.0M NaOH水溶液中和混合物。通过 垫过滤混合物，用二氯甲烷
(300mL)清洗滤饼。以二氯甲烷(2×500mL)萃取滤液。用盐水(800mL)清洗经合并的有机层，以硫酸钠干燥，浓缩，得到残留物(13.4g)，通过柱色谱法(硅胶，石油醚/EtOAc＝30：1～10：
1)纯化，得到浅黄色固体2-(苄氧基)-4-(二氟甲氧基)-6-甲基烟碱醛(Cpd J，6g，50％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.40(s，1H)，7.49-7.48(m，2H)，7.40-7.31(m，3H)，6.68(t，J＝72Hz，
1H)，6.62(s，1H)，5.53(s，2H)，2.50(s，3H)。

[0506] 于0℃将硼氢化钠(1.86g，49.16mmol)分几次加到2-(苄氧基)-4-(二氟甲氧基)-6-甲基烟碱醛(Cpd J，12g，41mmol)的甲醇(120mL)溶液中。加完后，于室温搅拌混合物2小时。以饱和NH4Cl水溶液(50mL)终止反应，接着用乙酸乙酯(500mL)与水(100mL)稀释，以乙酸乙酯(2×100mL)萃取。用盐水(300mL)清洗经合并的有机层，以硫酸钠干燥，浓缩，得到残留物(～13.1g)，通过柱色谱法(硅胶，石油醚：EtOAc＝6：1)纯化，得到白色固体(2-(苄氧基)-4-(二氟甲氧基)-6-甲基吡啶-3-基)甲醇(Cpd K，11.7g，97％)。1H NMR(400MHz，
CDCl3)δ7.52-7.46(m，2H)，7.44-7.33(m，3H)，6.60(t，J＝73Hz，1H)，6.55(s，1H)，5.46(s，
2H)，2.46(s，3H)。

[0507] 于-20℃将亚硫酰氯(3.67g，30.9mmol)逐滴加到(2-(苄氧基)-4-(二氟甲氧基)-6-甲基吡啶-3-基)甲醇(Cpd K，7.6g，26mmol)的无水二氯甲烷(120mL)溶液中。于-20℃搅拌混合物1小时，接着倒入水(50mL)中，以饱和NaHCO3水溶液中和。用二氯甲烷(2×90mL)萃取水相。以硫酸钠干燥经合并的有机相，过滤，浓缩，得到残留物(～6.1g)，通过硅胶色谱法(石油醚/EtOAc＝6：1)纯化，得到白色固体标题化合物，即2-(苄氧基)-3-(氯甲基)-4-(二氟甲氧基)-6-甲基吡啶(Cpd L，5.7g，71％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.50(d，J＝7.2，2H)，
7.41-7.33(m，3H)，6.64(t，J＝73Hz，1H),.6.56(s，1H)，5.48(s，2H)，4.69(s，2H)，2.47(s，
3H)。MS：314[M+H]+。

[0508] 化合物S：2-{[2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基]甲基}-7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0509]

[0510] 于110℃于氮气氛下将3-氯-2-甲基苯甲酸(100g，0.58mol)、N-氯琥珀酰亚胺(90g，0.67mol)、乙酸钯(II)(14.7g，65.7mmol)与N,N-二甲基甲酰胺(1L)混合物搅拌过夜。
冷却至室温后，加入碳酸铯(378g，1.16mol)与碘乙烷(317g，2.03mol)，于室温继续搅拌1.5小时。将反应混合物倒入水(1L)与甲基叔丁醚(800mL)混合物中。过滤收集固体，将各层分开。用甲基叔丁醚(600mL)萃取水层。用饱和氯化钠水溶液(1.2L)清洗经合并的有机萃取
物，以硫酸钠干燥，真空下浓缩。将残留物通过硅胶色谱法(用50：1石油醚/乙酸乙酯洗脱)纯化，得到黄色油状3,6-二氯-2-甲基苯甲酸乙酯(Cpd N，110g，～80％纯度，80％收率)。

[0511] 将3,6-二氯-2-甲基苯甲酸乙酯(Cpd N，120g，0.52mol)与N-溴琥珀酰亚胺(147g，0.82mol)的三氯甲烷(1L)溶液用偶氮二异丁腈(25.3g，0.15mol)处理，使混合物于回流下
过夜。冷却至室温后，用二氯甲烷(800mL)稀释混合物，以水(1.2L)清洗。用二氯甲烷
(800mL)萃取水层。用饱和氯化钠水溶液(1.5L)清洗经合并的有机萃取物，以硫酸钠干燥，真空下浓缩，得到2-(溴甲基)-3,6-二氯苯甲酸乙酯(Cpd O，160g，100％收率)，该化合物在未进一步纯化的情况下使用。

[0512] 于室温将氰化钠(75.12g，1.53mol)的水(300mL)溶液逐滴加到2-(溴甲基)-3,6-二氯苯甲酸乙酯(Cpd O，320g，1.03mol)的二甲亚砜(2.4L)溶液中。于室温搅拌混合物1.5小时。将反应混合物倒入水(4L)与甲基叔丁醚(2L)混合物中，将各层分开。用水(2L)与饱和氯化钠水溶液(2L)清洗有机层，以硫酸钠干燥，真空下浓缩。将残留物通过硅胶色谱法(用
30：1石油醚/乙酸乙酯洗脱)纯化，得到黄色油状3,6-二氯-2-(氰甲基)苯甲酸乙酯(Cpd P，
150g，～75％纯度，47％收率)。

[0513] 将六水合氯化钴(II)(166g，0.70mol)加到室温的3,6-二氯-2-(氰甲基)苯甲酸乙酯(Cpd P，90g，0.35mol)的乙醇(1.5L)溶液中，冷却所得的反应混合物至0℃。将硼氢化钠(66.3g，1.74mol)分几次加入。于室温搅拌混合物1小时，接着于回流下过夜。将所得的悬浮液过滤，真空下浓缩滤液。将滤饼中的固体于乙酸乙酯(600mL)中搅拌，接着过滤。重复此步骤。将经合并的滤液加到原来的滤液残留物中，用水(800mL)与饱和氯化钠水溶液(800mL)
清洗此有机溶液，以硫酸钠干燥，真空下浓缩，得到灰白色固体5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-
1(2H)-酮(Cpd Q，29.3g，39％收率)。

[0514] 于60℃将N-溴琥珀酰亚胺(49.7g，0.279mol)分几次加到5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd Q，40g，0.186mol)的浓硫酸(200mL)溶液中。于60℃继续搅拌2小时，接着加入N-溴琥珀酰亚胺(5g，28mmol)。于60℃搅拌1小时，将混合物倒入冰水(500mL)中，接着以二氯甲烷(3×500mL)萃取。用饱和氯化钠水溶液(800mL)清洗经合并的有机萃取物，以硫
酸钠干燥，真空下浓缩。将残留物于乙酸乙酯(40mL)与石油醚(20mL)中搅拌，过滤收集所得的固体，以真空干燥，得到灰白色固体7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd R，
41g，75％收率)。

[0515] 于氮气氛下将叔丁醇钾的四氢呋喃溶液(1.0M，190mL，0.19mol)逐滴加到经冷却(0℃)的7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd R，47g，0.16mol)的无水N,N-二甲基甲酰胺(500mL)溶液中。于0℃继续搅拌5分钟，接着将2-(苄氧基)-3-(氯甲基)-4,6-二甲基吡啶(Cpd D，40.2g，0.15mol)一次全部加入。于0℃搅拌10分钟后，用浓乙酸(2mL)处理混合物并倒入甲基叔丁醚(600mL)中。用水(800mL)与饱和氯化钠水溶液(800mL)清洗有机溶
液，以硫酸钠干燥，真空下浓缩。将残留物通过硅胶色谱法(用30：1至20：1石油醚/乙酸乙酯洗脱)纯化，得到灰白色固体2-{[2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基]甲基}-7-溴-5,8-二
氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd S，50g，64％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.08(s，
1H)，7.45-7.43(m，2H)，7.32-7.29(m，3H)，6.76(s，1H)，5.38(s，2H)，4.71(s，2H)，3.24(t，J＝6Hz，2H)，2.72(t，J＝6Hz，2H)，2.36(s，3H)，2.31(s，3H)。MS：521[M+H]+。

[0516] 化合物T：2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙酸甲酯

[0517]

[0518] 将2-{[2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基]甲基}-7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd S，1.0g，1.9222mmol)、1-(叔丁基二甲硅烷氧基)-1-甲氧基乙烯(1.09g，
5.77mmol)、双(三-叔丁基膦)钯(0)(98.2mg，0.192mmol)、氟化锂(299mg，11.5mmol)与无水N,N-二甲基甲酰胺(18mL)混合物用氮气除气10分钟。在微波反应器中于100℃加热混合物3
小时。将水(20mL)加入反应混合物中，接着用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。用盐水(4×50mL)清
洗经合并的有机层，以硫酸钠干燥，真空下浓缩。将粗制品通过硅胶色谱法(石油醚/EtOAc＝3：1，Rf～0.45)纯化，得到浅黄色固体2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲
基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙酸甲酯(Cpd T，600mg，60.8％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.45(d，J＝6.8Hz，2H)，7.37-7.30(m，4H)，6.62(s，1H)，5.42(s，2H)，
4.87(s，2H)，3.80(s，2H)，3.72(s，3H)，3.28(t，J＝6.4Hz，2H)，2.73(t，J＝6.4Hz，2H)，2.42(s，3H)，2.32(s，3H)。MS：535.0[M+Na]+。

[0519] 化合物U：2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-2-重氮乙酸甲酯

[0520]

[0521] 将1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.22mL，1.47mmol)加到2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙酸甲
酯(500mg，0.974mmol)与4-乙酰基氨基苯磺酰叠氮(281mg，1.17mmol)的无水乙腈(8mL)溶
液中。于室温搅拌所得的反应混合物3小时。除去溶剂后，将所得的残留物通过硅胶柱色谱法(用0至40％EtOAc/庚烷的梯度洗脱)纯化，得到泡沫状固体2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二
甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-2-重氮乙酸甲酯
(Cpd U，454mg，86％收率)。LCMS：511.10/512.10(M-N2)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.64(s，
1H)，7.44(d，J＝6.60Hz，2H)，7.29-7.39(m，3H)，6.63(s，1H)，5.47(s，2H)，4.89(s，2H)，
3.86(s，3H)，3.30(t，J＝5.99Hz，2H)，2.74-2.86(m，2H)，2.43(s，3H)，2.36(s，3H)。

[0522] 化合物W：2-(2-((2-(苄氧基)-4-(二氟甲氧基)-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙酸甲酯

[0523]

[0524] 将叔丁醇钾的四氢呋喃溶液(1.0M，3.2mL，3.2mmol)逐滴加到经冷却(0℃)的7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd R，750mg，2.54mmol)的无水N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶液中。于0℃搅拌混合物15分钟，接着逐滴加入2-(苄氧基)-3-(氯甲基)-4-(二
氟甲氧基)-6-甲基吡啶(Cpd L，798mg，2.54mmol)的无水N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。于0℃搅拌30分钟后，用水(30mL)终止反应，以乙酸乙酯(3×15mL)萃取。依序用水(2×20mL)与
盐水(20mL)清洗经合并的有机层，以硫酸钠干燥，过滤，浓缩，通过柱色谱法(硅胶，石油醚/EtOAc＝7：1)纯化，得到浅黄色固体2-((2-(苄氧基)-4-(二氟甲氧基)-6-甲基吡啶-3-基)
甲基)-7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd V，0.97g，67％)。

[0525] 将2-((2-(苄氧基)-4-(二氟甲氧基)-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd V，500mg，0.874mmol)、1-(叔丁基二甲硅烷氧基)-1-甲氧基乙烯(494mg，2.62mmol)、双(三-叔丁基膦)钯(0)(67mg，0.313mmol)、氟化锂(136mg，
5.24mmol)与无水N,N-二甲基甲酰胺(15mL)混合物用氮气除气10分钟，接着在微波反应器
中于100℃加热3小时。冷却后，用水(30mL)稀释混合物，以乙酸乙酯(4×20mL)萃取。用水(3×15mL)与盐水(15mL)清洗经合并的有机层，干燥与浓缩。将残留物通过制备型TLC(硅胶，
石油醚/EtOAc＝2：1，Rf～0.35)纯化，得到白色固体2-(2-((2-(苄氧基)-4-(二氟甲氧基)-
6-甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙酸甲酯(Cpd W，
175mg，35.4％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.42-7.41(m，2H)，7.37(s，1H)，7.29-7.27(m，
3H)，6.66(t，J＝72Hz，1H)，6.62(s，1H)，5.45(s，2H)，4.82(s，2H)，3.80(s，2H)，3.72(s，
3H)，3.26(t，J＝6.0Hz，2H)，2.73(t，J＝6.4Hz，2H)，2.46(s，3H)。

[0526] 化合物Z：2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-7-溴-8-氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0527]

[0528] 将7-氨基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(1.01g，6.23mmol)与N-氯琥珀酰亚胺(832mg，6.23mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液加热至55℃维持5小时。将混合物倒入
水中，用乙酸乙酯(3x)萃取。浓缩经合并的乙酸乙酯层，以高度真空除去残留的DMF过夜。将所得的深色油状物于硅胶(Biotage SNAP，50g，庚烷中50至100％乙酸乙酯的梯度)上纯化，得到白色固体7-氨基-8-氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd X，0.539g，44％)。1H NMR
(400MHz，DMSO-d6)δ7.87(br.s.，1H)，6.96(d，J＝8.19Hz，1H)，6.87(d，J＝8.19Hz，1H)，
5.32(s，2H)，3.20(dt，J＝3.79，6.17Hz，2H)，2.69(t，J＝6.24Hz，2H)；MS 197[M+H]+。

[0529] 于60℃搅拌溴化铜(I)(1.04g，7.28mmol)的乙腈(20mL)悬浮液10分钟。加入亚硝酸异戊酯(0.348mL，2.91mmol)，接着将7-氨基-8-氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd X，
0.477g，2.43mmol)一次全部加入。于60℃搅拌反应混合物1小时。冷却至室温后，加入饱和NH4Cl水溶液与EtOAc，将二相混合物剧烈搅拌20分钟。将各层分开，浓缩有机层，将残留物于硅胶(Biotage SNAP，10g，HP-Sil，庚烷中40至100％乙酸乙酯的梯度)上纯化，得到黄色固体7-溴-8-氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd Y，0.287g，45％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.70(d，J＝8.07Hz，1H)，7.03(d，J＝8.07Hz，1H)，6.14(br.s.，1H)，3.43-3.57(m，2H)，+
2.95(t，J＝6.36Hz，2H)；MS 260，262[M+H]。

[0530] 将叔丁醇钾(1.3mL，1.3mmol，1.0M的THF溶液)加到经冷却(0℃)的7-溴-8-氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd Y，0.287g，1.10mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中。5分钟后，将2-(苄氧基)-3-(氯甲基)-4,6-二甲基吡啶(Cpd D，0.311g，1.19mmol)一次全部加入。搅拌混合物30分钟，接着以乙酸(3滴)终止反应，用MTBE稀释，用水(2x)清洗。浓缩有机层，将所得的油状物于硅胶(Biotage SNAP，10g，庚烷中0至25％乙酸乙酯的梯度)上纯
化，得到透明胶体2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-7-溴-8-氯-3,4-二氢异
喹啉-1(2H)-酮(Cpd Z，0.387g，72％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.61(d，J＝8.07Hz，1H)，
7.42-7.47(m，2H)，7.28-7.38(m，3H)，6.89(d，J＝8.07Hz，1H)，6.63(s，1H)，5.43(s，2H)，
4.90(s，2H)，3.22-3.29(m，2H)，2.60-2.66(m，2H)，2.42(s，3H)，2.34(s，3H)；MS 485，487[M+H]+。

[0531] 化合物FF：2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5-溴-8-氯-7-碘-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0532]

[0533] 于下列条件下平行进行二批次，接着将它们合并以供后处理与纯化：将乙二酰氯(14.5g，9.97mL，114mmol)与DMF(150mg，2.05mmol)加到室温(15至20℃)的2-(2-溴-5-氯苯基)乙酸(25.0g，100.2mmol)的无水THF(300mL)溶液中，开始产生气体。于室温搅拌混合物2小时，直到TLC显示起始的酸完全耗尽为止。冷却混合物至0℃，将28wt％氢氧化铵水溶液
(154mL)一次全部加入，导致内部温度上升到40℃。除去冷却浴，于室温剧烈搅拌溶液1小
时。将二批混合，用水(500mL)稀释，以乙酸乙酯(2×1000mL)萃取。用水(2×500mL)、1N盐酸(500mL)与盐水(500mL)清洗经合并的有机萃取物，接着以无水硫酸钠干燥，浓缩，得到黄色固体粗制品(～50g)。粗制品从5/1石油醚/乙酸乙酯(200mL×2)结晶出来，干燥，得到白色
固体2-(2-溴-5-氯苯基)乙酰胺(Cpd AA，44.0g，二批共88％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.52(d，J＝8.8Hz，1H)，7.37(d，J＝2.8Hz，1H)，7.16(dd，J＝2.8，8.8Hz，1H)，5.67(br s，
1H)，5.50(br s，1H)，3.70(s，2H)。

[0534] 于下列条件下平行进行二批次，接着将它们合并以供纯化：将硼烷-THF复合物(1.0M的THF溶液，400mL，400mmol)逐滴加到经冷却(0℃)的2-(2-溴-5-氯苯基)乙酰胺(Cpd AA，22.0g，88.5mmol)的无水THF(300mL)悬浮液中。将所得的透明溶液加热至80℃维持2小时，接着冷却至0℃。依序加入水(45mL)与浓盐酸(120mL)淬灭混合物，导致大量气体产生。
于10至15℃继续搅拌16小时，浓缩混合物以除去THF。冷却含水残留物至0℃，接着加入12N氢氧化钠水溶液使pH上升到11。用乙酸乙酯(3×500mL)萃取经碱化的溶液。用盐水(500mL)
清洗经合并的有机萃取物，以无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到黄色油状粗制品(～25g)。
将二批～25g的粗制品混合，以4N HCl/MeOH(500mL)处理，于10至15℃搅拌16小时。浓缩混合物，将残留物于乙酸乙酯(500mL)中搅拌30分钟。过滤收集所得的白色固体，用乙酸乙酯(3×100mL)清洗滤饼。以水(500mL)溶解固体，过滤以除去不溶物，用乙酸乙酯(2×500mL)
萃取滤液。以NaOH固体将水层碱化成pH 10，接着用乙酸乙酯(2×500mL)萃取。用盐水
(500mL)清洗经合并的有机萃取物，以无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到无色油状2-(2-溴-
5-氯苯基)乙-1-胺(Cpd BB，30.0g，二批共72％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.47(d，J＝
8.4Hz，1H)，7.23(d，J＝2.4Hz，1H)，7.07(dd，J＝2.4，8.4Hz，1H)，2.98(t，J＝6.8Hz，2H)，
2.86(t，J＝6.8Hz，2H)，1.28(m，2H)。

[0535] 将氯甲酸4-硝基苯酯(25.5g，127mmol)加到经冷却(0℃)的2-(2-溴-5-氯苯基)乙-1-胺(Cpd BB，28.0g，119mmol)与碳酸钠(32.3g，304mmol)的无水1,2-二氯乙烷(600mL)悬浮液中。于0℃搅拌混合物30分钟，接着于10至15℃搅拌16小时。用水(1000mL)稀释溶液，以二氯甲烷(3×1000mL)萃取。用水(1000mL)与盐水(1000mL)清洗经合并的有机萃取物，以
无水硫酸钠干燥，浓缩。黄色固体粗制品(～55g)从5/1石油醚/EtOAc(100mL×2)结晶出来，得到白色固体(2-溴-5-氯苯乙基)氨甲酸4-硝基苯酯(Cpd CC，40.0g，84％收率)。1H NMR
(400MHz，CDCl3)δ8.25(d，J＝9.2Hz，2H)，7.51(d，J＝8.4Hz，1H)，7.31(m，3H)，7.13(dd，J＝
2.0，8.4Hz，1H)，5.22(br s，1H)，3.57(t，J＝6.8Hz，2H)，3.05(t，J＝6.8Hz，2H)。

[0536] 将三氟甲磺酸(150g，1000mmol)逐滴加到经冷却(0℃)的(2-溴-5-氯苯乙基)氨甲酸4-硝基苯酯(Cpd CC，40.0g，100mmol)的无水1,2-二氯乙烷(300mL)悬浮液中。在加料期间固体逐步溶解，得到黄色透明溶液。于0℃搅拌混合物10分钟，接着于60至70℃加热3小
时。将所得的棕色溶液倒入冰水(1000mL)中，搅拌到冰全部融化为止。将各层分开，以二氯甲烷(2×1000mL)萃取水层。用2N氢氧化钠水溶液(3×500mL)、水(500mL)与盐水(500mL)清
洗经合并的有机层，接着以无水硫酸钠干燥，浓缩。棕色固体粗制品(～30g)从2/1石油醚/乙酸乙酯(150mL×2)结晶出来，得到棕色固体5-溴-8-氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd 
DD，20.7g，80％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.25(br s，1H)，7.72(d，J＝8.4Hz，1H)，
7.35(d，J＝8.4Hz，1H)，3.12(t，J＝4.4Hz，2H)，2.95(t，J＝6.2Hz，2H)。

[0537] 将N-碘琥珀酰亚胺(53.7g，239mmol)加到经冷却(0℃)的5-溴-8-氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd DD，20.7g，79.6mmol)的98％w/w浓硫酸(300mL)溶液中。于10至15℃将所得的棕色悬浮液搅拌16小时，接着倒入冰水(1000mL)中，搅拌到冰全部融化为止。用乙酸乙酯(3×1000mL)萃取所得的含水悬浮液。用饱和NaHSO3水溶液(2×500mL)、2N氢氧化钠水
溶液(2×500mL)与盐水(500mL)清洗经合并的有机萃取物，接着以无水硫酸钠干燥，浓缩。
黄色固体粗制品(～30g)从1/1石油醚/乙酸乙酯(100mL×2)结晶出来，得到灰白色固体5-
溴-8-氯-7-碘-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd EE，23.0g，75％收率)。1H NMR(400MHz，
DMSO-d6)δppm 8.35(br.s，1H)，8.33(s，1H)，3.30-3.25(2H，m)，2.89(t，J＝6.0Hz，2H)。MS：
386[M+H]+。

[0538] 将叔丁醇钾(1.0M的THF溶液，7.30mL，7.30mmol)逐滴加到经冷却(0℃)的5-溴-8-氯-7-碘-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd EE，2.35g，6.08mmol)的无水DMF(30mL)悬浮液
中。于0℃搅拌混合物30分钟，接着加入2-(苄氧基)-3-(氯甲基)-4,6-二甲基吡啶(Cpd D，
1.75g，6.69mmol)的无水DMF(10mL)溶液，于0℃继续搅拌30分钟。将反应混合物用乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)分配萃取。用水(1×100mL)与盐水(1×100mL)清洗有机相，以硫酸钠
干燥，浓缩到干，通过硅胶色谱法(用庚烷中0至40％乙酸乙酯的梯度洗脱)纯化，得到胶体
2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5-溴-8-氯-7-碘-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-
1
酮(Cpd FF，2.95g，79％收率)。H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.11(s，1H)，7.40-7.47(m，
2H)，7.27-7.37(m，3H)，6.62(s，1H)，5.42(s，2H)，4.85(s，2H)，3.25(t，J＝6.24Hz，2H)，
2.68(t，J＝6.24Hz，2H)，2.41(s，3H)，2.32(s，3H)。MS：611，613[M+H]+。

[0539] 化合物KK：2-(苄氧基)-3-(氯甲基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶

[0540]

[0541] 将苄基溴(19.1g，112mmol)加到室温的2,4-二羟基-6-甲基烟酸乙酯(20.0g，101.4mmol)与碳酸银(15.4g，55.8mmol)的THF(100mL)溶液中，接着加热混合物至60℃维持
18小时。冷却至室温后，通过 垫过滤悬浮液，浓缩滤液，通过硅胶色谱法(用
庚烷中的5％乙酸乙酯洗脱)纯化，得到白色固体2-(苄氧基)-4-羟基-6-甲基烟酸乙酯(Cpd GG，18g，62％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.14(s，1H)，7.40-7.44(m，2H)，7.36(t，J＝7.34Hz，2H)，7.27-7.33(m，1H)，6.44(s，1H)，5.35(s，2H)，4.23(q，J＝7.13Hz，2H)，2.30+
(s，3H)，1.22(t，J＝7.09Hz，3H)。MS：288[M+H]

[0542] 于室温将2-(苄氧基)-4-羟基-6-甲基烟酸乙酯(Cpd GG，18.0g，62.6mmol)与碳酸钾(9.52g，68.9mmol)的DMF(50mL)溶液搅拌10分钟，接着加入碘甲烷(9.98g，68.9mmol)，于室温继续搅拌18小时。将混合物分配在水和乙酸乙酯之间。用饱和NaCl水溶液清洗有机萃
取物，以硫酸钠干燥，浓缩。将残留物通过硅胶色谱法(用庚烷中的0至35％乙酸乙酯洗脱)纯化，得到无色油状2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基烟酸乙酯(Cpd HH，16.7g，89％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.33-7.42(m，4H)，7.26-7.33(m，1H)，6.75(s，1H)，5.36(s，2H)，
4.22(q，J＝7.13Hz，2H)，3.83(s，3H)，2.39(s，3H)，1.20(t，J＝7.09Hz，3H)。)。MS：302[M+ +
H]。

[0543] 将2.0M氢化铝锂的THF溶液逐滴加到经冷却(0℃)的2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基烟酸乙酯(Cpd HH，16.7g，55.4mmol)的THF(100mL)溶液中。加完后，于搅拌18小时下让溶液逐渐升温至室温。用THF(200mL)稀释混合物，冷却至0℃，依序逐滴加入水(3.4mL)、15％氢氧化钠水溶液与水(10.2mL)终止反应。于室温将所得的浆料搅拌2小时，接着通过
垫过滤。浓缩滤液，得到无色油状(2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-
基)甲醇(Cpd JJ，14g，97％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.46(d，J＝7.09Hz，2H)，7.36(t，J＝7.40Hz，2H)，7.25-7.33(m，1H)，6.63(s，1H)，5.35(s，2H)，4.37-4.46(m，3H)，3.82(s，3H)，2.35(s，3H)。MS：260[M+H]+。

[0544] 将亚硫酰氯(6.57g，54.7mmol)逐滴加到经冷却(0℃)的(2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲醇(Cpd JJ，13.5g，52.1mmol)的乙酸乙酯(300mL)溶液中，形成固体沉淀物。把浆料于冷却浴中搅拌30分钟，接着加水以溶解固体。将各相分开，用饱和NaCl水溶液清洗有机层，以硫酸钠干燥，浓缩到干。用庚烷溶解残留物，浓缩到干，得到白色固体2-(苄氧基)-3-(氯甲基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶(Cpd KK，13.9g，95％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.47(d，J＝7.34Hz，2H)，7.38(t，J＝7.40Hz，2H)，7.27-7.34(m，1H)，6.71(s，
1H)，5.40(s，2H)，4.66(s，2H)，3.89(s，3H)，2.38(s，3H)。MS：260[M+H]+。

[0545] 化合物RR：8-氯-7-碘-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0546]

[0547] 费时1小时将硼烷-二甲基硫醚复合物(28.0g，35.0mL，369mmol)逐滴加到经冷却(0℃)的5-氯-2-甲基苯甲酸(20.0g，117mmol)的无水2-甲基四氢呋喃(200mL)溶液中，加料速度慢到足够维持内部温度低于10℃。观察到气体放出与一些沉淀物形成。加完后，除去冷却浴，于室温继续搅拌过夜。谨慎地加入甲醇(50mL)终止反应。浓缩溶液到干，将残留物用乙醚(200mL)和饱和碳酸氢钠水溶液分配萃取。用盐水(200mL)清洗有机层，以硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到油状2-(苄氧基)-4-羟基-6-甲基烟酸乙酯(Cpd LL，18.4g，100％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.36(d，J＝2.08Hz，1H)，7.13-7.19(m，1H)，7.04-7.11(m，1H)，4.63(s，2H)，2.27(s，3H)，2.12(s，1H)。

[0548] 将2-(苄氧基)-4-羟基-6-甲基烟酸乙酯(Cpd LL，18.0g，115mmol)的无水甲苯(300mL)溶液冷却至内部温度低于10℃。逐滴加入亚硫酰氯(21.3g，179mmol)，缓慢添加足以使内部温度维持低于10℃。于此温度搅拌混合物30分钟，接着除去冷却浴，于室温继续搅拌5小时。浓缩溶液以除去挥发物，将残留物用乙酸乙酯(200mL)和碳酸氢钠(200mL)分配萃取。用盐水(200mL)清洗有机相，以硫酸钠干燥，浓缩，得到油状4-氯-2-(氯甲基)-1-甲苯(Cpd MM，17.5g，87％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.33(d，J＝2.20Hz，1H)，7.20-7.25(m，1H)，7.14(d，J＝8.07Hz，1H)，4.55(s，2H)，2.39(s，3H)。

[0549] 将氰化钠固体(5.88g，120mmol)一次全部加到4-氯-2-(氯甲基)-1-甲苯(Cpd MM，17.5g，100mmol)的DMSO(200.0mL)与水(50.0mL)溶液中。反应稍微放热且反应混合物的内
部温度上升至43℃。继续搅拌1小时。将反应混合物用乙酸乙酯(300mL)和水(300mL)分配萃取。用碳酸氢钠(300mL)与盐水(300mL)清洗有机相，以硫酸钠干燥，浓缩，得到油状2-(5-
1
氯-2-甲苯基)乙腈(Cpd NN，16.1g，97％收率)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.37(d，J＝
1.96Hz，1H)，7.21-7.26(m，1H)，7.13-7.17(m，1H)，3.64(s，2H)，2.32(s，3H)。

[0550] 将硼烷-二甲基硫醚复合物(22.3g，293mmol，26.0mL)逐滴加到2-(5-氯-2-甲苯基)乙腈(Cpd NN，16.0g，96.6mmol)的2-甲基四氢呋喃(150mL)溶液中，导致气体放出。加完后，将混合物于回流下加热5小时。冷却至室温后，加入甲醇终止反应直到不再产生气泡为止。浓缩溶液到干。用甲醇溶解残留物，以4M HCl/二 烷溶液(100mL)处理以分解硼复合
物。浓缩溶液到干。用最少量的甲醇(～20mL)溶解白色固体残留物，加入乙酸乙酯(～
200mL)，剧烈搅拌混合物直到黏稠糊料形成。过滤收集固体，用乙酸乙酯清洗，干燥，得到白
1
色固体盐酸2-(5-氯-2-甲苯基)乙-1-胺(Cpd OO，9.5g，48％收率)。H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.24(br.s.，3H)，7.26(s，1H)，7.20(d，J＝1.34Hz，2H)，2.84-3.02(m，4H)，2.27(s，
3H)。MS：170[M+H]+。

[0551] 将经冷却(0℃)的盐酸2-(5-氯-2-甲苯基)乙胺(Cpd OO，8.41g，40.8mmol)的DMF(200mL)溶液与三乙胺(10.3g，102mmol)搅拌10分钟，接着将氯甲酸4-硝基苯酯固体
(8.14g，38.8mmol)一次全部加入。黏稠糊料形成，反应混合物变成浅黄色。于0℃继续搅拌1小时。将反应混合物用乙酸乙酯(300mL)和水(300mL)分配萃取。用水(200mL)、10％碳酸钠(200mL)与盐水(200mL)清洗有机相，接着以硫酸钠干燥，浓缩，得到固体(5-氯-2-甲基苯乙基)氨甲酸4-硝基苯酯(Cpd PP，9.94g，73％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.18-8.29(m，
2H)，7.24-7.32(m，2H)，7.11-7.17(m，3H)，5.28(br.s.，1H)，3.45-3.53(m，2H)，2.85-2.92(m，2H)，2.32(s，3H)。

[0552] 用新开的三氟甲磺酸(45.8g，305mmol，27.0mL)处理经冷却(0℃)的(5-氯-2-甲基苯乙基)氨甲酸4-硝基苯酯(Cpd PP，9.94g，29.7mmol)的无水1,2-二氯乙烷(120mL)悬浮
液，于0℃继续搅拌30分钟。接着加热反应混合物至70℃维持3小时。冷却至室温后，将反应混合物谨慎地倒入冰水(200mL)中，搅拌到冰全部融化为止。用二氯甲烷(2×200mL)萃取二
相混合物。以2M碳酸钠(200mL)清洗经合并的有机萃取物。用二氯甲烷(200mL)反萃取水相。
将二氯甲烷萃取物混合，以硫酸钠干燥，浓缩，得到固体8-氯-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1
(2H)-酮(Cpd QQ，4.17g，72％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ：7.15-7.22(m，1H)，7.08(d，J＝13.69Hz，1H)，6.46(br.s.，1H)，3.43-3.51(m，2H)，2.88(t，J＝6.17Hz，2H)，2.28(s，3H)。
MS：196[M+H]+。

[0553] 将含有8-氯-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd QQ，6.0g，30.7mmol)的烧瓶于冰浴中冷却。加入浓硫酸(125.0mL)，于0℃搅拌混合物30分钟。将N-碘琥珀酰亚胺固体
(20.7g，92.0mmol)一次全部加入，于0℃搅拌混合物3小时。将溶液谨慎地倒入冰水(300mL)中，导致沉淀物形成。用乙酸乙酯(300mL)萃取悬浮液。有机相与水相皆含有沉淀物。以10％Na2S2O3(300mL)清洗有机相除去过量的碘，用乙酸乙酯(200mL)萃取水层。以硫酸钠干燥经合并的有机相，浓缩到干。将固体残留物于甲醇(100mL)中搅拌。过滤收集不溶物，让白色固体沉淀物(～14g)于二硫化碳(100mL)中浆化。过滤收集固体，用二硫化碳清洗，以真空干
燥，得到固体8-氯-7-碘-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd RR，8.57g，87％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.15(br.s.，1H)，7.94(s，1H)，3.26(td，J＝6.17，4.03Hz，2H)，2.75+
(t，J＝6.24Hz，2H)，2.22(s，3H)。MS；321[M＝H]。

[0554] 化合物SS：2-((2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0555]

[0556] 用1.0M叔丁醇钾的THF溶液(65.5mL，65.5mmol)处理室温的7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd R，14.9g，50.4mmol)的乙酸乙酯(300mL)悬浮液，导致固体溶
解。几分钟后，沉淀物开始形成。加入2-(苄氧基)-3-(氯甲基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶(Cpd KK，14.0g，50.4mmol)，将所得的悬浮液于75℃加热4小时。冷却至室温后，用水(2x)与饱和NaCl水溶液清洗混合物，浓缩，残留物从乙酸乙酯结晶出来，得到白色固体2-((2-(苄氧
基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd 
SS，21.96g，81％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.05(s，1H)，7.34-7.40(m，2H)，7.18-
7.25(m，3H)，6.70(s，1H)，5.36(s，2H)，4.68(s，2H)，3.83(s，3H)，3.16(t，J＝6.17Hz，2H)，+
2.71(t，J＝6.17Hz，2H)，2.38(s，3H)。MS：535，537[M+H]。

[0557] 化合物TT：2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-8-氯-7-碘-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0558]

[0559] 将叔丁醇钾固体(796mg，7.09mmol)分几次加到经冷却(0℃)的8-氯-7-碘-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd RR，1.52g，4.73mmol)的无水DMF(20mL)溶液中。于0℃继续搅拌30分钟，接着逐滴加入2-(苄氧基)-3-(氯甲基)-4,6-二甲基吡啶(Cpd D，1.18g，
4.49mmol)的无水DMF(5mL)溶液。于0℃搅拌20分钟，将混合物倒入冰水(50mL)中，用乙酸乙酯(4×50mL)萃取。用盐水(4×50mL)清洗经合并的有机层，以硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将黄色固体粗制品(～2.4g)通过硅胶色谱法(用5/1石油醚/乙酸乙酯洗脱)纯化，得到灰白色固
体2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-8-氯-7-碘-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1
(2H)-酮(Cpd TT，1.7g，66％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.76(s，1H)，7.45(d，J＝
7.2Hz，2H)，7.36-7.30(m，3H)，6.62(s，1H)，5.42(s，2H)，4.88(s，2H)，3.24(t，J＝6.2Hz，
2H)，2.50(t，J＝6Hz，2H)，2.42(s，3H)，2.32(s，3H)，2.13(s，3H)。MS：547[M+H]+。

[0560] 化合物UU：2-((2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-8-氯-7-碘-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0561]

[0562] 将叔丁醇钾固体(1.68g，14.9mmol)分几次加到经冷却(0℃)的8-氯-7-碘-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd RR，3.2g，9.95mmol)的无水DMF(50mL)溶液中。于0℃继续搅拌30分钟，接着逐滴加入2-(苄氧基)-3-(氯甲基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶(Cpd KK，
2.63g，14.9mmol)的无水DMF(50mL)溶液。于0℃搅拌30分钟后，将混合物倒入冰水(100mL)中，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。用盐水(4×100mL)清洗经合并的有机层，以硫酸钠干燥，
过滤，浓缩。将黄色固体粗制品(～5g)通过硅胶色谱法(用石油醚中的20至50％乙酸乙酯洗脱)纯化。将所得的产物用二氯甲烷(10mL)溶解，加到石油醚(30mL)中，于室温搅拌到沉淀物形成为止(30分)。过滤收集沉淀物，干燥成白色固体。沉淀物的TLC显示仍有杂质，所以通过硅胶色谱法(用二氯甲烷中的0至10％甲醇洗脱)再次纯化，得到白色固体2-((2-(苄氧
基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-8-氯-7-碘-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮
(Cpd UU，2.8g，50％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.75(s，1H)，7.42-7.40(m，2H)，7.29-
7.27(m，1H)，7.25-7.22(m，2H)，6.38(s，1H)，5.42(s，2H)，4.87(s，2H)，3.83(s，3H)，3.14(t，J＝6.2Hz，2H)，2.50(t，J＝6.2Hz，2H)，2.44(s，3H)，2.13(s，3H)。MS：563[M+H]+。
实施例

[0563] 通用方法与代表性实施例

[0564] 方法A

[0565] 实施例1：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1R)-2-羟基-1-[(3R)-四氢呋喃-3-基]乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0566] 实施例2：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1R＊)-2-羟基-1-[(3S＊)-四氢呋喃-3-基]乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0567] 实施例3：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1S＊)-2-羟基-1-[(3R＊)-四氢呋喃-3-基]乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0568] 实施例4：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1S)-2-羟基-1-[(3S)-四氢呋喃-3-基]乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0569]

[0570] 用氢化钠(60wt％矿物油分散体，125mg，3.12mmol)处理经冷却(0℃)的2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙
酸甲酯(Cpd T，800mg，0.487mmol)的无水N,N-二甲基甲酰胺(70mL)溶液，接着于10℃搅拌
15分钟。再次冷却混合物至0℃并加入3-碘四氢呋喃(463mg，2.34mmol)。于室温搅拌12小时后，加入冰乙酸(2滴)与水(10mL)，用乙酸乙酯(3×20mL)萃取混合物。用盐水(10mL)清洗经合并的有机萃取物，以硫酸钠干燥，浓缩，通过柱色谱法(硅胶，石油醚/EtOAc＝5：1～1：1)纯化，得到白色固体2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-
1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-2-(四氢呋喃-3-基)乙酸(1a，500mg，56.3％)；以及黄色固体
2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹
啉-7-基)-2-(四氢呋喃-3-基)乙酸甲酯(1b，150mg，16.5％)。

[0571] 于室温将2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-2-(四氢呋喃-3-基)乙酸(1a，650mg，1.14mmol)、碳酸钾
(315mg，2.28mmol)与碘甲烷(324mg，2.28mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(8mL)溶液搅拌12小
时。用水(20mL)与乙酸乙酯(50mL)稀释混合物。将有机层分离出，用乙酸乙酯(2×15mL)萃
取水层。将有机层合并，用盐水(3×10mL)清洗，以硫酸钠干燥，过滤，真空下浓缩，得到粗制品，通过柱色谱法(硅胶，石油醚/EtOAc＝1：1)纯化，得到白色固体2-(2-((2-(苄氧基)-4,
6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-2-(四氢呋喃-
3-基)乙酸甲酯(1b，600mg，90.1％)。

[0572] 将硼氢化锂(28mg，1.29mmol)一次全部加到室温的2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-2-(四氢呋喃-3-基)
乙酸甲酯(1b，250mg，0.428mmol)的无水四氢呋喃(25mL)溶液中。于60℃将所得的混合物加热2小时。用水(5mL)淬灭混合物，接着用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将有机层合并，用盐水
(5mL)清洗，以硫酸钠干燥，过滤，真空下浓缩，得到粗制品，通过制备型TLC(石油醚/EtOAc＝1：1)纯化，得到白色固体2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-
(2-羟基-1-(四氢呋喃-3-基)乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(4种立体异构体的混合物，
160mg，67.2％)。将所合并的各批次(共500mg)的此立体异构体混合物通过制备型手性SFC
(Chiralpak AD，250x30毫米I.D.，5μm，流动相35％EtOH NH3H2O，流速50毫升/分钟)分离，得到白色固体经分离的异构体1c(峰1，80mg，15.9％)、2c(峰2，90mg，17.9％)、3c(峰3，110mg，
21.9％)与4c(峰4，100mg，19.9％)。此阶段未测定各异构体的绝对立体化学。

[0573] 于35℃将2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(2-羟基-1-(四氢呋喃-3-基)乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮立体异构体1c(80mg，0.144mmol)的
二氯甲烷(3mL)与三氟乙酸(3mL)溶液搅拌5小时，接着蒸发到干。取残留物置于甲醇(10mL)中，冷却至10℃，加入碳酸钾(99.5mg，0.720mmol)。于10℃搅拌30分钟，过滤反应混合物，用二氯甲烷/甲醇(10：1，10mL)清洗过滤垫。真空下浓缩滤液，将残留物通过制备型TLC
(CH2Cl2/MeOH＝10：1，CH2Cl2/MeOH＝10：1中Rf＝0.4)纯化，得到白色固体实施例1(38mg，
57％)。

[0574] 通过相同的程序，立体异构体2c(90mg，0.162mmol)得到白色固体实施例2(44mg，59％)；立体异构体3c(110mg，0.198mmol)得到白色固体实施例3(61mg，66％)；以及立体异构体4c(100mg，0.18mmol)得到白色固体实施例4(35mg，41％)。

[0575] 实施例4的小分子X射线晶体结构显示其具有绝对(S,S)立体化学。由于1HNMR光谱与实施例4的相同，实施例1属于绝对(R,R)立体化学。实施例2与实施例3的1HNMR光谱彼此
相同，且与实施例4的明显不同，表明它们为(R,S)与(S,R)立体异构体，尽管各自的绝对构型未测定。

[0576] 实施例1：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1R)-2-羟基-1-[(3R)-四氢呋喃-3-基]乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(基于对映异构
体混合物的晶体结构所指定的绝对立体化学)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.63(s，1H)，6.12(s，1H)，4.77(s，2H)，3.94-3.90(m，1H)，3.81-3.80(m，3H)，3.59-3.57(m，2H)，3.51-3.49(m，2H)，3.17-3.10(m，1H)，2.98-2.95(m，2H)，2.71(br s，1H)，2.30(s，3H)，2.29-2.25(m，
1H)，2.25(s，3H)，1.83-1.78(m，1H)。MS：465[M+H]+。手性分析：95.66％ee/de；保留时间：
6.867分钟；柱：Chiralpak AD-3 150×4.6毫米I.D.，3μm；流动相：CO2中的5％至40％乙醇(0.05％DEA)；流速：2.5毫升/分钟；波长220nm。

[0577] 实施例2：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1R＊)-2-羟基-1-[(3S＊)-四氢呋喃-3-基]乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(相对立体化学已知，绝对立体化学未测定)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.62(s，1H)，6.11(s，1H)，4.76(s，
2H)，4.13-4.11(m，1H)，3.78-3.75(m，1H)，3.69-3.68(m，2H)，3.61-3.59(m，3H)，3.51-3.50(m，2H)，2.98-2.95(m，2H)，2.65(br s，1H)，2.30(s，3H)，2.25(s，3H)，1.77-1.75(m，1H)，+
1.42-1.37(m，1H)。)。MS：465[M+H] 。手性分析：98.70％ee/de；保留时间：7.309分钟；柱：
Chiralpak AD-3 150×4.6毫米I.D.，3μm；流动相：CO2中的5％至40％乙醇(0.05％DEA)；流速：2.5毫升/分钟；波长220nm。

[0578] 实施例3：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-＊ ＊
{(1S )-2-羟基-1-[(3R )-四氢呋喃-3-基]乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(相对立体化
学已知，绝对立体化学未测定)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.62(s，1H)，6.11(s，1H)，4.76(s，
2H)，4.12-4.11(m，1H)，3.80-3.78(m，1H)，3.69-3.67(m，3H)，3.67-3.62(m，2H)，3.61-3.50(m，2H)，2.98-2.95(m，2H)，2.65(br s，1H)，2.29(s，3H)，2.25(s，3H)，1.77-1.74(m，1H)，
1.42-1.37(m，1H)。MS：465[M+H]+。手性分析：96.48％ee/de；保留时间：8.021分钟；柱：
Chiralpak AD-3 150×4.6毫米I.D.，3μm；流动相：CO2中的5％至40％乙醇(0.05％DEA)；流速：2.5毫升/分钟；波长220nm。

[0579] 实施例4：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1S)-2-羟基-1-[(3S)-四氢呋喃-3-基]乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(通过X射线晶
体结构测定的绝对立体化学)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.64(s，1H)，6.13(s，1H)，4.78(s，
2H)，3.95-3.90(m，1H)，3.83-3.81(m，3H)，3.60-3.55(m，2H)，3.55-3.52(m，2H)，3.32-
3.19，(m，1H)，2.99-2.96(m，2H)，2.75(br s，1H)，2.32(s，3H)，2.31-2.29(m，1H)，2.27(s，
3H)，1.84-1.79(m，1H)。MS：465[M+H]+。手性分析：99.18％ee/de；保留时间：8.429分钟；柱：
Chiralpak AD-3 150×4.6毫米I.D.，3μm；流动相：CO2中的5％至40％乙醇(0.05％DEA)；流速：2.5毫升/分钟；波长220nm。

[0580] 方法B

[0581] 实施例5：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{1-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-羟乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0582] 实施例6：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1ξ)-1-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-羟乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮-异构体A

[0583] 实施例7：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1ξ)-1-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-羟乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮-异构体B

[0584]

[0585] 将HBr(800μL，4.42mmol，33％wt的HOAc溶液)加到经冰浴冷却的2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-2-重氮
乙酸甲酯(Cpd U，800mg，1.48mmol)的无水二氯甲烷(10mL)溶液中，导致气体放出。让溶液升温至室温且搅拌过夜。用饱和碳酸氢钠水溶液谨慎地淬灭反应混合物，用乙酸乙酯(2×
50mL)萃取。以硫酸钠干燥经合并的有机相，浓缩到干，通过硅胶柱色谱法(用0至10％MeOH/EA的梯度洗脱)纯化，得到固体外消旋2-溴-2-(5,8-二氯-2-((4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二
氢吡啶-3-基)甲基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙酸甲酯(5a，655mg，88％)。MS：
501.00/502.05.1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.91(s，1H)，6.18(s，1H)，6.03(s，1H)，4.76(s，
2H)，3.81(s，3H)，3.68(t，J＝6.24Hz，2H)，2.98(t，J＝6.24Hz，2H)，2.45(s，3H)，2.37(s，
3H)。

[0586] 于室温将2-溴-2-(5,8-二氯-2-((4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙酸甲酯(5a，162mg，0.323mmol)、(3R)-3-氟吡咯烷盐酸盐(144mg，1.15mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.35mL，2.01mmol)与无水N,N-二甲基甲酰胺(4mL)混合物搅拌过夜。将反应混合物用乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)分配萃取。分离出有机相，依序用水(20mL)和盐水(20mL)清洗，以硫酸钠干燥，浓缩到干，得到粗制2-(5,8-二氯-2-((4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-
基)-2-((R)-3-氟吡咯烷-1-基)乙酸甲酯，为非对映异构体的混合物(5b，162mg，98％收
率)，该物质在未进一步纯化的情况下用于下一步骤。LCMS：T＝510.15/511.10/512.20。

[0587] 用硼氢化锂(2.0M的THF溶液，0.45mL，0.90mmol)处理粗制2-(5,8-二氯-2-((4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-2-((R)-
3-氟吡咯烷-1-基)乙酸甲酯非对映异构体的混合物(5b，152mg，0.298mmol)与无水四氢呋
喃(4.0mL)，接着用几滴甲醇处理。重复加料过程4次，接着用2M NH4Cl(20mL)终止反应，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。以硫酸钠干燥经合并的有机相，浓缩到干，通过制备型HPLC纯化，得到5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{1-[(3R)-3-氟吡
咯烷-1-基]-2-羟乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮，为苄基碳处的非对映异构体的混合物
(实施例5，32.2mg，二个步骤共22％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.66(br.s.，1H)，
7.80(d，J＝3.67Hz，1H)，6.00(s，1H)，5.15-5.43(m，1H)，4.85(br.s.，1H)，4.69(s，2H)，
4.03-4.13(m，1H)，3.66-3.84(m，2H)，3.50-3.63(m，2H)，3.02-3.10(m，1H)，2.94-3.02(m，
2H)，2.71-2.90(m，2H)，2.42-2.55(m，1H)，2.28(s，3H)，2.24(s，3H)，2.09-2.23(m，1H)，
1.87-2.08(m，1H)。MS：482[M+H]+。

[0588] 将5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{1-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-羟乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的非对映异构体的混合物(实施
例5，20.0mg，0.0415mmol)通过手性制备型SFC(Chiralcel OJ-3 4.6x100mm 3μ柱，用10％MeOH/DEA@120bar洗脱，4毫升/分钟)分离，经冷冻干燥后得到实施例6(峰1，保留时间1.18分钟，5.65mg，28％)与实施例7(峰2，保留时间1.42分钟，6.23mg，31％)。各异构体中的苄基碳的绝对立体化学未测定。

[0589] 实施例6：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1ξ)-1-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-羟乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体A。MS：482[M+H]+。手性分析：～88％de，[α]D＝+62.1°(c 0.01MeOH)

[0590] 实施例7：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1ξ)-1-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-羟乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体B。MS：482[M+H]+。手性分析：～98％de；[α]D＝–58.9°(c 0.01MeOH)

[0591] 方法C

[0592] 实施例8：(+)-5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{氟[1-(羟基乙酰基)哌啶-4-基]甲基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0593] 实施例9：(-)-5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{氟[1-(羟基乙酰基)哌啶-4-基]甲基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0594]

[0595] 将iPrMgCl-LiCl(1.3M的THF溶液，0.850mL，1.10mmol)加到-40℃(于乙腈/干冰浴中)的2-{[2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基]甲基}-7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1
(2H)-酮(Cpd S，311.0mg，0.598mmol)的四氢呋喃(5.0mL)与1,4-二 烷(0.5mL)溶液中，
搅拌反应混合物1小时。接着加入N-Boc-4-甲酰基哌啶(0.242g，1.14mmol)，于冰浴中让烧瓶升温至0℃。于0℃维持1小时后，用饱和NH4Cl水溶液终止反应，以MTBE萃取。浓缩MTBE层，将所得的油状物于硅胶(Isco RediSepRf，12g，用梯度10至70％乙酸乙酯/庚烷洗脱)上纯
化，得到白色固体外消旋4-((2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-
氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)(羟基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(8a，0.229g，59％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.66(s，1H)，7.36-7.44(m，2H)，7.18-7.31(m，3H)，6.71(s，1H)，5.42(s，2H)，5.04(d，J＝5.14Hz，1H)，4.83(d，J＝1.96Hz，2H)，4.08(d，J＝12.72Hz，2H)，3.23(t，J＝6.24Hz，2H)，2.73(t，J＝6.11Hz，2H)，2.53-2.71(m，2H)，2.39(s，3H)，2.35(s，3H)，+
1.76-1.90(m，1H)，1.32-1.62(m，13H)；MS 654，656[M+H] .

[0596] 将Deoxo-FluorTM(50％的THF溶液，0.165mL，0.39mmol)加到于干冰/丙酮浴中冷却的外消旋4-((2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)(羟基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(8a，88mg，0.13mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中。于-78℃搅拌5分钟，除去冷却浴，搅拌混合物5分钟。加入饱和NaHCO3水溶液终止反应，将各层分开，浓缩二氯甲烷层。将所得的油状物于硅胶(Biotage SNAP，HP-Sil，10g，用庚烷中0至40％乙酸乙酯的梯度洗脱)上纯化，得到白色黏性固体外消旋4-((2-((2-(苄氧
基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氟甲基)
+
哌啶-1-甲酸叔丁酯(8b，0.075g，85％)。MS：656，658[M+H]。

[0597] 将外消旋4-((2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(8b，0.075g，0.11mmol)的三氟乙
酸(5.0mL)溶液加热至50℃维持1小时。用庚烷稀释反应混合物，真空下浓缩。用乙醇溶解残留物，浓缩。以真空干燥余留的白色固体，得到粗制外消旋5,8-二氯-2-((4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-7-(氟(哌啶-4-基)甲基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(8c，
0.085g，TFA盐)。MS 466，468[M+H]+。用二氯甲烷(5mL)溶解此物质，冷却至0℃。依序加入三乙胺(0.060mL，0.43mmol)与2-乙酰氧乙酰氯(0.017mL，0.16mmol)，搅拌混合物30分钟，接着加入几滴甲醇以抑制过量的试剂。真空下浓缩溶液，用甲醇(5mL)溶解残留物，用碳酸钾(0.100g，0.724mmol)处理。于室温维持4小时后，过滤反应混合物，浓缩，通过制备型手性SFC(OJ-H，21x250mm柱，32mL MeOH：8mL CO2，100bar，40毫升/分钟)纯化，得到白色固体经分离的对映异构体实施例8(峰1，9.6mg，15％)与实施例9(峰2，8.1mg，13％)。各异构体的绝对立体化学未测定，但旋光度测量值已得到。

[0598] 实施例8：(+)-5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-+
{氟[1-(羟基乙酰基)哌啶-4-基]甲基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。MS 524，526[M+H] 。旋光度：[α]D＝+9.9°(c，0.1，DMSO)。手性分析：>99％ee；保留时间8.13分钟，Lux Cellulose-
2 4.6×100mm 3u柱，60％MeOH@120bar，4毫升/分钟。

[0599] 实施例9：(-)-5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-1
{氟[1-(羟基乙酰基)哌啶-4-基]甲基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。H NMR(600MHz，DMSO-
d6)δ11.55(s，1H)，7.58(d，J＝4.95Hz，1H)，5.88(s，1H)，5.72-5.84(m，1H)，4.55(q，J＝
13.75Hz，2H)，4.46(br.s.，1H)，4.30-4.42(m，1H)，4.05-4.13(m，1H)，3.97-4.04(m，1H)，
3.69(t，J＝13.39Hz，1H)，3.45(t，J＝5.78Hz，2H)，2.80-2.98(m，3H)，2.20(d，J＝18.71Hz，
1H)，2.11(s，3H)，1.61(br.s.，1H)，1.46(br.s.，1H)，1.34-1.42(m，1H)，1.23(s，5H)；MS 
524，526[M+H]+。旋光度：[α]D＝–6.5°(c，0.1，DMSO)。手性分析：～95％ee；保留时间10.29分钟，Lux Cellulose-2 4.6×100mm 3u柱，60％MeOH@120bar，4毫升/分钟。

[0600] 方法D

[0601] 实施例10：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-(2-羟基-1-甲氧基乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体A

[0602] 实施例11：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-(2-羟基-1-甲氧基乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体B

[0603]

[0604] 于室温费时60分钟将2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-2-重氮乙酸甲酯(Cpd U，150mg，0.278mmol)的二
氯甲烷(5mL)溶液逐滴加到经搅拌的无水甲醇(12mg，0.36mmol)与四乙酸二铑(1.2mg，
0.0028mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中。加完后，将反应混合物于回流下加热18小时。浓缩混合物，通过急骤色谱法(用石油醚/EtOAc＝10：1洗脱，Rf～0.3)纯化，得到棕色油状的外消旋2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异
喹啉-7-基)-2-甲氧基乙酸甲酯(11a，100mg，66％)。

[0605] 于室温将硼氢化锂固体(12mg，0.55mmol)一次全部加到经搅拌的外消旋2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-
基)-2-甲氧基乙酸甲酯(11a，100mg，0.184mmol)的无水四氢呋喃(10mL)溶液中。于60℃将所得的混合物加热1小时。用水(15mL)终止反应，以乙酸乙酯(3×15mL)萃取。用饱和NaCl水溶液(15mL)清洗经合并的有机萃取物，以硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到粗制品(91mg)。使用急骤色谱法(用石油醚/EtOAc＝1：1洗脱)纯化，得到白色固体外消旋2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(2-羟基-1-甲氧基乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-
酮(11b，60mg，63％)。

[0606] 于室温将外消旋2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(2-羟基-1-甲氧基乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(11b，60mg，0.12mmol)的二氯甲烷(2mL)
与三氟乙酸(2mL)溶液搅拌18小时。LC-MS分析显示苄基完全脱保护，但在吡啶酮氧上有些
三氟乙酸酯，所以将混合物浓缩，接着加入甲醇(10mL)与碳酸钾(80.9mg，0.585mmol)。于室温将所得的混合物搅拌30分钟，此时LC-MS分析显示TFA酯完全脱保护。过滤混合物，将所收集的固体用10：1DCM/MeOH(10mL)清洗，浓缩滤液。使用急骤色谱法(用DCM/MeOH＝10：1洗脱，Rf～0.6)纯化，得到白色固体外消旋5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡
啶-3-基)甲基]-7-(2-羟基-1-甲氧基乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(37mg，75％)。

[0607] 将所合并的各批次的外消旋5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-(2-羟基-1-甲氧基乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(共100mg，0.235mmol)
通过手性SFC(Chiralpak IC 250mm×30mm，10μm柱，用50％EtOH/NH4OH洗脱，流速70毫升/分钟)分离。经冷冻干燥后，得到灰白色固体实施例10(峰1，33mg，33％)与实施例11(峰2，
35mg，35％)。各异构体的绝对立体化学未测定。

[0608] 实施例10：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-(2-羟基-1-甲氧基乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体A。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ
12.23(br.s.，1H)，7.53(s，1H)，5.95(s，1H)，4.92-4.89(m，1H)，4.78(s，2H)，3.80-3.71(m，
1H)，3.68-3.62(m，2H)，3.53-3.51(m，1H)，3.33(s，3H)，2.94(t，J＝6.0Hz，2H)，2.35(s，+
3H)，2.29(s，3H)。MS：425[M+H] 。手性分析：100％ee，保留时间7.717分钟，柱：Chiralpak IC-3 150×4.6毫米I.D.，3μm；流动相：CO2中的40％乙醇(0.05％DEA)；流速：2.35毫升/分钟。

[0609] 实施例11：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-(2-1
羟基-1-甲氧基乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体B。H NMR(400MHz，CDCl3)δ
12.15(br.s.，1H)，7.53(s，1H)，5.95(s，1H)，4.92-4.89(m，1H)，4.78(s，2H)，3.80-3.71(m，
1H)，3.68-3.63(m，2H)，3.55-3.51(m，1H)，3.34(s，3H)，2.94(t，J＝5.6Hz，2H)，2.35(s，
3H)，2.29(s，3H)。MS：425[M+H]+。手性分析：100％ee，保留时间11.063分钟，柱：Chiralpak IC-3 150×4.6毫米I.D.，3μm；流动相：CO2中的40％乙醇(0.05％DEA)；流速：2.35毫升/分钟。

[0610] 方法E

[0611] 实施例12：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1R)-2-羟基-1-[(2S)-四氢呋喃-2-基]乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0612] 实施例13：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1R)-2-羟基-1-[(2R)-四氢呋喃-2-基]乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0613]

[0614] 将三氟甲磺酸铜(II)(120mg，0.332mmol)与(S)-(-)-2,2'-亚异丙基-双(4-苯基-2- 唑啉)(130mg，0.389mmol)的无水四氢呋喃(4mL)溶液加到2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-
二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-2-重氮乙酸甲酯
(Cpd U，1.78g，3.29mmol)的无水四氢呋喃(20mL)溶液中。将所得的溶液于80℃油浴中于回流下加热过夜。冷却至室温，浓缩反应混合物到干，通过硅胶柱(用0至40％EA/HEP的梯度洗脱)纯化，得到于苄基碳上具有(S)几何结构的非对映异构体的混合物(类似于Jiménez-Osé
s，G.等人，J.Org.Chem.2013，78，5851-5857指定立体化学)，(2S)-2-(2-((2-(苄氧基)-4,
6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-2-(四氢呋喃-
2-基)乙酸甲酯(12a，333mg，17％)。MS：583.10/584.20[M+H]+.1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.69(d，J＝2.20Hz，1H)，7.45(d，J＝7.58Hz，2H)，7.30-7.39(m，3H)，6.64(s，1H)，5.45(s，2H)，
4.80-4.92(m，2H)，4.41-4.59(m，1H)，3.79-4.02(m，1H)，3.72-3.80(m，1H)，3.70(d，J＝
5.01Hz，3H)，3.23-3.31(m，2H)，2.69-2.76(m，2H)，2.44(s，3H)，2.34(d，J＝3.79Hz，3H)，
1.93-2.18(m，1H)，1.80-1.94(m，2H)，1.55-1.80(m，2H)。

[0615] [于相同条件下，使用对映异构体(R)-(-)-2,2'-亚异丙基-双(4-苯基-2- 唑啉)配体产生于苄基位置具有(R)几何结构的非对映异构体的混合物，(2R)-2-(2-((2-(苄
氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-2-
(四氢呋喃-2-基)乙酸甲酯。]

[0616] 将硼氢化锂(2.0M的THF溶液，1.0mL，2.0mmol)加到(2S)-2-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)-2-(四氢呋喃-
2-基)乙酸甲酯(12a，333mg，0.571mmol)的无水四氢呋喃(10mL)溶液中，接着加入几滴甲
醇。气体放出。于室温搅拌混合物1小时，接着用2M NH4Cl(10mL)终止反应，用水稀释，用乙醚(3×50mL)萃取。以硫酸钠干燥经合并的有机相，浓缩到干，得到粗制2-((2-(苄氧基)-4,
6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-((1R)-2-羟基-1-(四氢呋喃-2-基)乙基)-3,4-二
氢异喹啉-1(2H)-酮(12b，280mg，88％)，为于苄基碳上具有(R)几何结构的非对映异构体的混合物。此混合物未经进一步纯化就用于下一步骤。MS：555.20/557.20。

[0617] 于50℃将粗制非对映异构体的混合物2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-((1R)-2-羟基-1-(四氢呋喃-2-基)乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮
(12b，280mg，0.504mmol)的三氟乙酸(8mL)溶液搅拌1小时。除去过量的三氟乙酸后，用甲醇(10mL)溶解残留物，于50℃用4M NaOH处理30分钟。将反应混合物用乙酸乙酯(50mL)和水
(50mL)分配萃取。将有机相分离出。将水相酸化至pH～2至3，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。以硫酸钠干燥经合并的有机相，浓缩到干，通过手性SFC(Chiralpak AD-3 4.6x100mm 3μ柱；
用5至60％MeOH洗脱，3分钟，120bar，4毫升/分钟)纯化，得到经分离的非对映异构体产物，实施例12(峰1，32mg，14％)与实施例13(峰2，77mg，33％)。类似于Jiménez-Osés，G.等人，J.Org.Chem.2013，78，5851-5857指定分离出的产物的立体化学。

[0618] 实施例12：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1R)-2-羟基-1-[(2S)-四氢呋喃-2-基]乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。1H NMR
(400MHz，CD3OD)δ7.58(s，1H)，6.11(s，1H)，4.76(s，2H)，4.10-4.21(m，1H)，3.86-3.99(m，
3H)，3.75-3.84(m，1H)，3.64-3.72(m，1H)，3.46-3.55(m，2H)，2.91-3.01(m，2H)，2.29(s，
3H)，2.25(s，3H)，1.73-1.97(m，3H)，1.44-1.58(m，1H)。MS：465{M+H]+。手性分析：91％ee/de；保留时间2.91分钟，Chiralpak AD-3 4.6×100mm 3μ柱；用5至60％MeOH洗脱，3分钟，
120bar，4毫升/分钟。

[0619] 实施例13：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(1R)-2-羟基-1-[(2R)-四氢呋喃-2-基]乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。1H NMR
(400MHz，CD3OD)δ7.66(s，1H)，6.10(s，1H)，4.77(s，2H)，4.27(dt，J＝7.86，6.16Hz，1H)，
3.72-3.91(m，3H)，3.67(t，J＝6.79Hz，2H)，3.49(t，J＝6.24Hz，2H)，2.95(t，J＝6.17Hz，
2H)，2.28(s，3H)，2.24(s，3H)，2.01-2.13(m，1H)，1.68-1.92(m，2H)，1.49-1.62(m，1H)。MS：
465{M+H]+。手性分析：93％ee/de；保留时间3.21分钟，Chiralpak AD-3 4.6×100mm 3μ柱；
用5至60％MeOH洗脱，3分钟，120bar，4毫升/分钟。

[0620] 方法F

[0621] 实施例14：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-(丙-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮

[0622]

[0623] 于微波反应器中于氮气下将加盖微波管中的2-{[2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基]甲基}-7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd S，500mg，0.961mmol)、三乙胺(0.30mL，2.2mmol)与[1,1’-双(二苯膦)二茂铁]二氯化钯(II)-二氯甲烷复合物(24mg，
0.028mmol)的2-丙醇(15mL)溶液于100℃加热1小时。除去溶剂后，用乙醚(3×10mL)萃取产
物，用水(2x)清洗经合并的有机萃取物，以硫酸镁干燥，浓缩，通过急骤色谱法(硅胶，庚烷中的0至60％EtOAc)纯化，得到白色泡沫体2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-
5,8-二氯-7-(丙-1-烯-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(14a，240mg，52％)。1H NMR
(400MHz，CDCl3)δ7.37(d，J＝6.8Hz，2H)，7.30-7.20(m，3H)，7.18(d，J＝2.6Hz，1H)，6.55(s，1H)，5.35(s，2H)，5.16(d，J＝1.5Hz，1H)，4.85(d，J＝1.5Hz，1H)，4.80(s，2H)，3.20(t，J＝6.2Hz，2H)，2.65(t，J＝6.2Hz，2H)，2.34(s，3H)，2.26(s，3H)，2.01(s，3H)。 MS：481[M+ H]+。

[0624] 将2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(丙-1-烯-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(14a，75mg，0.16mmol)与氧化铂(IV)(71mg，0.31mmol)的乙酸乙酯(5mL)溶液于氢气球压力下搅拌2小时。滤出催化剂，以真空除去溶剂。将粗制品通过超临界流体色谱法(SFC/ZymorSpher HAP 150×21.2mm柱，8％MeOH@100bar，58毫升/分钟)纯
化，得到白色固体5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-(丙-
1
2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(实施例14，7mg，10％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.35(s，
1H)，5.90(s，1H)，4.78(s，2H)，3.63(t，J＝6.30Hz，2H)，3.5-3.6(m，1H)，2.90(t，J＝
6.11Hz，2H)，2.35(s，3H)，2.24(s，3H)，1.24(d，J＝6.85Hz，6H)。MS：393[M+H]。

[0625] 方法G

[0626] 实施例15：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-(1-甲氧基丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体A

[0627] 实施例16：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-(1-甲氧基丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体B

[0628]

[0629] 将2-{[2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基]甲基}-7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd S，200mg，0.384mmol)、(Z)-3-己烯基-3-硼酸儿茶酚酯(155mg，
0.769mmol)、氟化铯(182mg，1.20mmol)、二 烷(2mL)与水(0.4mL)混合物用氮气除气5分
钟。加入四(三苯膦)钯(0)(44.4mg，0.0384mmol)，将混合物用氮气除气，接着加热至100℃维持4小时。用水(15mL)稀释混合物，以EtOAc(3×15mL)萃取。用盐水(20mL)清洗经合并的
有机层，以硫酸钠干燥，浓缩，通过柱色谱法(硅胶，石油醚/EtOAc＝10：1，Rf～0.5)纯化，得到无色油状(E)-2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(己-3-烯-3-
基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(15a，150mg，74.5％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.45(d，J＝
7.7Hz，2H)，7.37-7.34(m，3H)，7.19(s，1H)，6.62(s，1H)，5.43(s，2H)，5.28(t，J＝6.8Hz，
1H)，4.88(s，2H)，3.28(t，J＝6.4Hz，2H)，2.73(t，J＝6.4Hz，2H)，2.45-2.43(m，2H)，2.42(s，3H)，2.33(s，3H)，2.19(quint，J＝7.6Hz，2H)，1.04(t，J＝7.6Hz，3H)，0.89-0.86(m，
4H)。

[0630] 将经搅拌的(E)-2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(己-3-烯-3-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(15a，864mg，1.65mmol)的甲醇(46mL)溶液于-
78℃用臭氧冒泡直到呈现浅紫色为止(～10分)。向溶液中通入氮气直到紫色消失为止，接
着加入二甲基硫醚(0.4mL)，将溶液于10℃搅拌3小时。真空下浓缩反应混合物，将残留物通过柱色谱法(硅胶，石油醚/EtOAc＝6：1，Rf～0.5)纯化，得到黄色油状2-((2-(苄氧基)-4,
6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-丙酰基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(15b，346mg，
42.1％)。

[0631] 将硼氢化钠(52.6mg，1.39mmol)加到经冷却(0℃)的2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-丙酰基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(15b，346mg，
0.696mmol)的甲醇(20mL)溶液中，于10℃继续搅拌1小时。用饱和NH4Cl(30mL)终止反应，以乙酸乙酯(3×25mL)萃取。用盐水(25mL)清洗经合并的有机层，以硫酸钠干燥，真空下浓缩。
将残留物通过柱色谱法(硅胶，石油醚/EtOAc＝2：1，Rf～0.6)纯化，得到无色油状的外消旋
2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(1-羟丙基)-3,4-二氢异喹
啉-1(2H)-酮(15c，300mg，86.4％)。

[0632] 将叔丁醇钾(111mg，0.985mmol)与碘甲烷(140mg，0.985mmol)加到经冷却(10℃)的2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(1-羟丙基)-3,4-二氢异喹
啉-1(2H)-酮(15c，246mg，0.493mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(25mL)溶液中，于10℃搅拌过
夜。用水(30mL)终止反应，以EtOAc(3×35mL)萃取。用盐水(35mL)清洗经合并的有机层，以硫酸钠干燥，浓缩，通过柱色谱法(硅胶，石油醚/EtOAc＝5：1)纯化，得到黄色油状的外消旋
2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(1-甲氧基丙基)-3,4-二氢异
喹啉-1(2H)-酮(15d，148mg，58.5％)。

[0633] 于10℃将三氟乙酸(9mL)逐滴加到经搅拌的2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(1-甲氧基丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(15d，218mg，
0.423mmol)的二氯甲烷(9mL)溶液中。于25℃将所得的混合物搅拌过夜。真空下浓缩混合
物，将残留物通过柱色谱法(硅胶，CH2Cl2/MeOH＝10：1，Rf～0.55)纯化，得到粉红色油状的外消旋5,8-二氯-2-((4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-7-(1-甲氧基丙
基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(15e，150mg，83.8％)。将此外消旋混合物通过制备型SFC
[柱：(AD(250mm＊30mm，5μm))，流动相：25％MeOH NH3H2O，流速：50毫升/分钟，波长：220nm，处理：冷冻干燥]分离，得到白色固体异构体A(实施例15，45.65mg，31.4％)与灰白色固体异构体B(实施例16，31.8mg，21.2％)。各异构体的绝对立体化学未测定。

[0634] 实施例15：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-(1-甲氧基丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体A。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ11.88(br s，
1H)，7.53(s，1H)，5.94(s，1H)，4.78(s，2H)，4.69-4.66(m，1H)，3.65(t，J＝4.8Hz，2H)，3.24(s，3H)，2.93(t，J＝6.2Hz，2H)，2.36(s，3H)，2.29(s，3H)，1.76-1.72(m，1H)，1.65-1.60(m，
1H)，0.96(t，J＝7.0Hz，3H)。MS：423[M+H]+。手性分析：100％ee；柱：Chiralpak AD-H 250×
4.6毫米I.D.，5um；保留时间：8.04分钟；流动相：CO2中的5％至40％甲醇(0.05％DEA)；流速：2.5毫升/分钟；波长：220nm。

[0635] 实施例16：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-(1-甲氧基丙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体B。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.88(br s，
1H)，7.53(s，1H)，5.93(s，1H)，4.77(s，2H)，4.69-4.66(m，1H)，3.67-3.63(m，2H)，3.24(s，
3H)，2.93(t，J＝5.8Hz，2H)，2.36(s，3H)，2.28(s，3H)，1.78-1.73(m，1H)，1.65-1.58(m，
1H)，0.96(t，J＝7.2Hz，3H)。MS：423[M+H]+。手性分析：99.6％ee；柱：Chiralpak AD-H 250×4.6毫米I.D.，5um；保留时间：8.34分钟；流动相：CO2中的5％至40％甲醇(0.05％DEA)；流速：2.5毫升/分钟；波长：220nm。

[0636] 方法H

[0637] 实施例75：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{1-[1-(羟基乙酰基)亚氮杂环丁烷-3-基]乙基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。

[0638]

[0639] 将三苯膦(15.83g，60.35mmol)的无水二氯甲烷(16mL)溶液冷却至0℃，用氮气除气5分钟。加入四溴化碳(9.98g，30.1mmol)，于0℃搅拌溶液5分钟，接着通过注射器费时1分钟逐滴加到3-氧代-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.52g，14.7mmol)的无水二氯甲烷(7mL)溶
液中。于0℃搅拌20分钟，于室温搅拌反应混合物22.5小时。加入庚烷(100mL)，过滤以除去所得的沉淀物。浓缩滤液，得到灰白色固体(7.82g)。将此固体于庚烷(100mL)中以超声处理搅拌，接着抽气过滤除去残留的固体。浓缩滤液，得到白色固体3-(二溴乙烯基)氮杂环丁
烷-1-甲酸叔丁酯(75a，4.59g，95％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.32(s，4H)，1.46(s，
9H)。MS：226，228，230[M-Boc+H]+。

[0640] 于-78℃将正丁锂(1.6M的己烷溶液，1.86mL，2.98mmol)加到3-(二溴乙烯基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(75a，542mg，1.66mmol)的THF(16.6mL)溶液中。经过30分钟后，用碘甲烷(325μL，5.22mmol)处理反应，于-78℃继续搅拌1小时。用饱和NH4Cl水溶液终止反应，以MTBE萃取。浓缩有机层，通过硅胶色谱法(用庚烷中的0至25％乙酸乙酯洗脱)纯化，得到透明油状3-(1-溴亚乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(75b，0.230g，53％收率)。1H NMR
(400MHz，CDCl3)δ4.38-4.43(m，2H)，4.31-4.37(m，2H)，2.14(quint，J＝1.74Hz，3H)，1.46(s，9H)。

[0641] 将氯化异丙基镁-氯化锂复合物(1.3M的THF溶液，2.00mL，2.60mmol，2.00mL)加到经冷却(-40℃，乙腈/干冰浴)的2-{[2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基]甲基}-7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd S，657mg，1.26mmol)的THF(12.6mL)溶液中，搅拌混合物1小时。加入氯化三正丁锡(600μL，72.2mmol)，于冰浴中让烧瓶升温至0℃维持30分钟。
用饱和NH4Cl水溶液终止反应，用MTBE萃取。用盐水清洗MTBE层，浓缩，将所得的粗制油状通过硅胶色谱法(用庚烷中的0至30％乙酸乙酯洗脱)纯化，得到透明黏稠油状2-((2-(苄氧
基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(三丁锡烷基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮
(75c，0.699g，76％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.42(d，J＝7.09Hz，2H)，7.37(s，1H)，7.22-
7.34(m，3H)，6.74(s，1H)，5.37(s，2H)，4.69(s，2H)，3.22(t，J＝5.99Hz，2H)，2.72(t，J＝
5.87Hz，2H)，2.35(s，3H)，2.30(s，3H)，1.51(quint，J＝7.76Hz，6H)，1.08-1.35(m，12H)，
0.85(t，J＝7.34Hz，9H)。MS：731[M+H]+＝731。

[0642] 用四(三苯膦)钯(0)(60.8mg，0.0526mmol)与碘化铜(I)(10.0mg，0.0525mmol)处理2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(三丁锡烷基)-3,4-二氢异
喹啉-1(2H)-酮(75c，251mg，0.344mmol)、3-(1-溴亚乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(75b，
103mg，0.393mmol)与1,4-二 烷(4.00mL)混合物。向混合物通入氮气10分钟，接着密封小
瓶，于微波反应器中于120℃照射2小时。以真空除去二 烷，将所得的油状通过硅胶色谱
法(用庚烷中0至40％乙酸乙酯洗脱)纯化，得到透明胶体3-(1-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲
基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)亚乙基)氮杂环丁烷-
1-甲酸叔丁酯(75d，49mg，23％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.43-7.49(m，2H)，7.30-
7.39(m，3H)，7.21(s，1H)，6.65(s，1H)，5.47(s，2H)，4.87(s，2H)，4.57(br.s.，2H)，4.24(br.s.，2H)，3.29(t，J＝6.24Hz，2H)，2.73(t，J＝6.24Hz，2H)，2.45(s，3H)，2.36(s，3H)，
1.87(s，3H)，1.45(s，9H)。MS：622，624[M+H]+。

[0643] 于室温将3-(1-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)亚乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(75d，49mg，0.079mmol)的三氟乙酸(5mL，70mmol)溶液搅拌6小时。浓缩溶液到干。用甲醇溶解残留物，通过SCX柱(Varian Bond elute SCX，2g，用100％MeOH至3.5M NH3的MeOH溶液洗脱)纯化，得到透明胶体粗制7-(1-(亚氮杂环丁烷-3-基)乙基)-5,8-二氯-2-((4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡
啶-3-基)甲基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(实施例74，38mg，100％收率)，该物质在未进一步纯化的情况下用于下一步骤。MS：432，434[M+H]+。

[0644] 依序将三乙胺(10μL，0.072mmol)与乙酰氧乙酰氯(6.5μL，0.060mmol)加到经冷却(0℃)的粗制7-(1-(亚氮杂环丁烷-3-基)乙基)-5,8-二氯-2-((4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(实施例74，24mg，0.056mmol)的二氯甲
烷(3.0mL)溶液中。搅拌混合物30分钟，接着用甲醇终止反应。浓缩混合物，用甲醇(5mL)溶解，用碳酸铯(45mg，0.14mmol)处理，于室温搅拌过夜。将所得的溶液浓缩到干。用DMF溶解残留物，过滤，通过制备型HPLC纯化，得到白色粉末5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,
2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{1-[1-(羟基乙酰基)亚氮杂环丁烷-3-基]乙基}-3,4-二氢异
喹啉-1(2H)-酮(实施例75，9.38mg，34％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.54(br.s.，
1H)，7.51(s，1H)，5.89(s，1H)，4.81-4.99(m，2H)，4.51-4.60(m，3H)，4.48(br.s.，1H)，4.19(br.s.，1H)，3.83-4.01(m，2H)，3.46(t，J＝6.11Hz，2H)，2.88(t，J＝5.87Hz，2H)，2.17(s，
3H)，2.12(s，3H)，1.85(br.s.，3H)。MS；490，492[M+H]+。

[0645] 方法I

[0646] 实施例34：(±)-5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{[1-(羟基乙酰基)哌啶-4-基](甲氧基)甲基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。

[0647] 实施例35：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{[1-(羟基乙酰基)哌啶-4-基](甲氧基)甲基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体B。

[0648] 实施例36：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{[1-(羟基乙酰基)哌啶-4-基](甲氧基)甲基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体A。

[0649]

[0650] 将氯化异丙基镁-氯化锂复合物(1.3M的THF溶液，0.850mL，1.10mmol)加到-40℃(于乙腈/干冰浴中)的2-{[2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基]甲基}-7-溴-5,8-二氯-3,
4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd S，311.0mg，0.598mmol)的四氢呋喃(5.0mL)与1,4-二 烷
(0.5mL)溶液中，搅拌混合物1小时。接着加入N-Boc-4-甲酰基哌啶(0.242g，1.14mmol)，于冰浴中使烧瓶升温至0℃。于0℃经过1小时后，用饱和NH4Cl水溶液终止反应，以MTBE萃取。
浓缩MTBE层，将所得的油状通过硅胶(Isco RediSepRf，12g，庚烷中10至70％乙酸乙酯的梯度)纯化，得到白色固体外消旋4-((2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二
氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)(羟基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(8a，0.229g，
59％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.66(s，1H)，7.36-7.44(m，2H)，7.18-7.31(m，3H)，6.71(s，
1H)，5.42(s，2H)，5.04(d，J＝5.14Hz，1H)，4.83(d，J＝1.96Hz，2H)，4.08(d，J＝12.72Hz，
2H)，3.23(t，J＝6.24Hz，2H)，2.73(t，J＝6.11Hz，2H)，2.53-2.71(m，2H)，2.39(s，3H)，2.35(s，3H)，1.76-1.90(m，1H)，1.32-1.62(m，13H)；MS 654，656[M+H]+。

[0651] 用碘甲烷(34mg，0.24mmol)与叔丁醇钾(1.0M的THF溶液，0.155mL，0.155mmol)处理经冷却(0℃)的外消旋4-((2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-
氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)(羟基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(8a，91.0mg，
0.139mmol)的THF(3.0mL)溶液。于0℃继续搅拌30分钟，将混合物用盐水和MTBE分配萃取。
浓缩有机相到干，得到胶体粗制外消旋4-((2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲
基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)(甲氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
(34b，97mg，100％)。MS：612，614[M+H-tBu]+。

[0652] 将三氟乙酸(0.10mL，1.35mmol)加到室温的粗制外消旋4-((2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)(甲氧基)甲基)
哌啶-1-甲酸叔丁酯(34b，97mg，0.139mmol)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中。于室温搅拌混合物
2小时，于35℃搅拌4小时，于室温搅拌过夜，接着于40℃搅拌6小时。用庚烷稀释溶液，浓缩到干，得到胶体粗制外消旋2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-
(甲氧基(哌啶-4-基)甲基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(34c，124mg，100％)。MS：568，570[M+H]+。

[0653] 将三乙胺(75μL，0.54mmol)与2-乙酰氧乙酰氯(16μL，0.15mmol)加到经冷却(0℃)的粗制外消旋2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(甲氧基(哌啶-4-基)甲基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(34c，124mg，0.139mmol)的二氯甲烷(3.0mL)溶液
中。于0℃搅拌混合物30分钟。接着加入三氟乙酸(2.0mL)，于室温搅拌混合物1小时，接着于
40℃搅拌7小时。浓缩溶液到干，以高度真空干燥2日，得到金黄色油状粗制外消旋2-(4-
((5,8-二氯-2-((4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢
异喹啉-7-基)(甲氧基)甲基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基乙酸酯(34d，204mg，100％)。MS：578，
580[M+H]+。

[0654] 用7N氨的甲醇溶液(4mL，28mmol NH3)溶解粗制外消旋2-(4-((5,8-二氯-2-((4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)(甲氧
基)甲基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基乙酸酯(34d，204mg，0.139mmol)，于室温搅拌1小时，接着于40℃搅拌4小时。浓缩溶液到干，将残留物通过制备型HPLC纯化，得到白色固体(±)-5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{[1-(羟基乙酰基)哌啶-4-
基](甲氧基)甲基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(实施例34，19.87mg，来自8a的收率27％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.44(s，1H)，6.01(s，1H)，4.66(s，2H)，4.56(d，J＝5.62Hz，1H)，
4.35-4.45(m，1H)，4.02-4.17(m，2H)，3.57-3.68(m，1H)，3.43(t，J＝6.24Hz，2H)，3.10(s，
3H)，2.86-2.92(m，2H)，2.75-2.85(m，1H)，2.40-2.54(m，1H)，2.20(s，3H)，2.15(s，3H)，
1.78-1.87(m，1H)，1.60-1.69(m，1H)，1.18-1.47(m，3H)。MS：536，538[M+H]+。

[0655] 将外消旋物(实施例34)通过手性制备型SFC进一步纯化，经过冷冻干燥后得到白色固体实施例35(异构体B，保留时间13.019分钟，9.09mg，从8a起的收率12％)与实施例36(异构体A，保留时间10.712分钟，8.36mg，从8a起的收率11％)。各异构体中的苄基碳的绝对立体化学未测定。

[0656] 实施例35：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{[1-(羟基乙酰基)哌啶-4-基](甲氧基)甲基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体B。MS：
536，538[M+H]+。手性分析：～97％ee，保留时间13.019分钟，Lux Cellulose-4 4.6×100mm 
3u柱，用50％MeOH洗脱，120bar，4毫升/分钟。

[0657] 实施例36：5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{[1-(羟基乙酰基)哌啶-4-基](甲氧基)甲基}-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体A。MS：
536，538[M+H]+。手性分析：>99％ee，保留时间10.712分钟，Lux Cellulose-4 4.6×100mm 
3u柱上，用50％MeOH洗脱，120bar，4毫升/分钟。

[0658] 实施例81：5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[(R)-甲氧基(氧杂环丁烷-3-基)甲基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。

[0659] 实施例82：5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[(S)-甲氧基(氧杂环丁烷-3-基)甲基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。

[0660]

[0661] 将重铬酸吡啶固体(5.87g，15.6mmol)分五次加到室温的经搅拌的氧杂环丁烷-3-基甲醇(2.20g，24.97mmol)的二氯甲烷(110mL)溶液中。于室温将所得的黑色混合物搅拌16小时。接着通过硅胶垫过滤深棕色悬浮液，用二氯甲烷(8×120mL)清洗滤饼。于室温(27至
30℃)减压下部分地浓缩经合并的二氯甲烷滤液，得到无色溶液的氧杂环丁烷-3-甲醛
(81a，3g，～26％收率)，通过NMR测定18.7wt％的二氯甲烷溶液。以硫酸镁干燥溶液，过滤，立即用于下一步骤。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.95(d，J＝2.4Hz，1H)，4.87(m，4H)，3.81(m，
1H)。

[0662] 将2-((2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd SS，500mg，0.932mmol)的无水THF(7mL)溶液冷却至-65℃，接着费时3分钟逐滴加入氯化异丙基镁-氯化锂复合物(1.3M的THF溶液，2.15mL，2.80mmol)。于-65℃将所得的棕色溶液搅拌10分钟，接着升温至-10℃维持30分钟。费时2分钟逐滴加入氧杂
环丁烷-3-甲醛(81a，～2.2g，～4.8mmol，18.7wt％的二氯甲烷溶液)，导致颜色变成浅黄色。于-5℃继续搅拌30分钟。用冰乙酸(0.5mL)终止反应，以乙酸乙酯(10mL)稀释，接着用饱和NaHCO3水溶液/饱和NaCl水溶液(1/1v/v，3×15mL)清洗。以硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩，通过硅胶色谱法(用1/1石油醚/乙酸乙酯洗脱)纯化，得到白色固体外消旋2-((2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(羟基(氧杂环丁烷-3-基)甲基)-3,
4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(81b，300mg，59％收率)。MS：543[M+H]+。

[0663] 将碘甲烷(133mg，0.938mmol)逐滴加到经冷却(-5℃)的2-((2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(羟基(氧杂环丁烷-3-基)甲基)-3,4-二氢异喹
啉-1(2H)-酮(81b，300mg，0.552mmol)的无水THF(5mL)悬浮液中。加入叔丁醇钾(1.0M的THF溶液，0.938mL，0.938mmol)，于0℃搅拌混合物1小时。将反应混合物用饱和NaCl水溶液
(15mL)和MTBE(3×15mL)分配萃取。用饱和NaCl水溶液(30mL)清洗经合并的有机萃取物，以
硫酸钠干燥，浓缩，通过硅胶色谱法(用1/1石油醚/乙酸乙酯洗脱)纯化，得到黄色胶体外消旋2-((2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(甲氧基(氧杂环丁
烷-3-基)甲基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(81c，280mg，91％收率)。MS：557[M+H]+。

[0664] 将2-((2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(甲氧基(氧杂环丁烷-3-基)甲基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(81c，100mg，0.179mmol)、PtO2(21mg，
0.092mmol)与乙酸乙酯(4mL)混合物于室温于氢气球压力下搅拌3日。通过Celite垫过滤溶
液。用乙酸乙酯(2×10mL)清洗烧瓶与滤垫。浓缩经合并的滤液，通过制备级薄层色谱法(硅胶，用10/1二氯甲烷/甲醇洗脱)纯化，得到白色固体外消旋5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲
基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧杂环丁烷-3-基)甲基]-3,4-二氢异
喹啉-1(2H)-酮(81d，45mg，54％收率)。

[0665] 将多批外消旋5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧杂环丁烷-3-基)甲基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(81d，共140mg)混合，通过制备型SFC[柱：(R,R)Whelk O1 250mm＊30mm，5μm；流动相：base-ETOH；波长：220nm；处理：冷冻干燥]手性分离，得到灰色固体实施例81(50.34mg，36％收率)，通过制备型TLC(硅胶，用10/1二氯甲烷/甲醇洗脱)进一步纯化，得到棕色固体实施例82(22.83g，16％收率)。
实施例82的小分子X射线晶体结构显示其具有绝对(S)立体化学，所以其对映异构体实施例
81属于绝对(R)立体化学。

[0666] 实施例81：5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[(R)-甲氧基(氧杂环丁烷-3-基)甲基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。1H NMR(400MHz，
CDCl3)δ12.34(brs，1H)，7.49(s，1H)，5.93(s，1H)，5.05(d，J＝6.0Hz，1H)，4.78-4.61(m，
6H)，3.88(s，3H)，3.50-3.48(m，2H)，3.38-3.37(m，1H)，3.31(s，3H)，2.94(t，J＝6.2Hz，
2H)，2.35(s，3H)。MS：489[M+Na]+。手性分析：100％ee；保留时间9.85分钟；柱(R,R)Whelk O1，250×4.6毫米I.D.，5微米；流动相：CO2中的50％乙醇(0.05％DEA)；波长220nm。

[0667] 实施例82：5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[(S)-甲氧基(氧杂环丁烷-3-基)甲基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。1H NMR(400MHz，
CDCl3)δ12.38(brs，1H)，7.49(s，1H)，5.92(s，1H)，5.05(d，J＝6.0Hz，1H)，4.78-4.64(m，
6H)，3.87(s，3H)，3.50-3.47(m，2H)，3.38-3.37(m，1H)，3.31(s，3H)，2.93(t，J＝6.2Hz，
2H)，2.35(s，3H)。MS：467[M+H]+。手性分析：98％ee；保留时间8.65分钟；柱：(R,R)Whelk O1，250×4.6毫米I.D.，5微米；流动相：CO2中的50％乙醇(0.05％DEA)；波长220nm。

[0668] 实施例83：8-氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(R)-甲氧基[(3R)-四氢呋喃-3-基]甲基}-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。

[0669] 实施例84：8-氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(R＊)-甲氧基[(3S＊)-四氢呋喃-3-基]甲基}-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。

[0670] 实施例85：8-氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(S＊)-甲氧基[(3R＊)-四氢呋喃-3-基]甲基}-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。

[0671] 实施例86：8-氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(S)-甲氧基[(3S)-四氢呋喃-3-基]甲基}-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。

[0672]

[0673] 用二氯甲烷(2×2.5mL)萃取四氢呋喃-3-甲醛水溶液(～4.0mL的50wt％水溶液，4.0g)。冷却(15℃)经合并的有机层，慢慢加入五氧化二磷。将所得的深色溶液过滤以除去固体，如下所述迅速使用黄色滤液(通过NMR测定～16wt％四氢呋喃-3-甲醛的二氯甲烷溶
液)。

[0674] 费时5分钟将氯化异丙基镁-氯化锂复合物(1.3M的THF溶液，3.73mL，4.85mmol)逐滴加到经冷却(-70℃)的2-((2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-8-氯-7-碘-
5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd UU，910mg，1.617mmol)的无水THF(10mL)溶液中。
于-70℃将所得的棕色混合物搅拌30分钟，接着费时5分钟逐滴加入上面制得的四氢呋喃-
3-甲醛溶液(3.98g的～16wt％二氯甲烷溶液，～636mg四氢呋喃-3-甲醛，～16.35mmol)。
于-70℃继续搅拌30分钟。用冰乙酸(0.5mL)终止反应，以乙酸乙酯(80mL)稀释，接着用饱和NaHCO3水溶液/饱和NaCl水溶液(1/1v/v，3×35mL)清洗。以硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩，通过硅胶色谱法(用1/1石油醚/乙酸乙酯洗脱)纯化，得到白色固体2-((2-(苄氧基)-4-甲
氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-8-氯-7-(羟基(四氢呋喃-3-基)甲基)-5-甲基-3,4-二氢异
1
喹啉-1(2H)-酮(83a，450mg，52％收率，4种非对映异构体的混合物)。H NMR(400MHz，
CDCl3)δ7.37-7.46(m，3H)，7.20-7.31(m，3H)，6.39(s，1H)，5.44(s，2H)，5.22-5.31(m，1H)，
4.87(s，2H)，3.88-4.02(m，1H)，3.83(s，3H)，3.65-3.82(m，3H)，3.16(t，J＝5.99Hz，2H)，
2.71-2.89(m，1H)，2.55(t，J＝6.17Hz，2H)，2.44(s，3H)，2.20(s，3H)，1.66-1.95(m，3H)。

[0675] 将碘甲烷(225mg，1.58mmol)逐滴加到经冷却(-5℃)的2-((2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-8-氯-7-(羟基(四氢呋喃-3-基)甲基)-5-甲基-3,4-二氢异喹
啉-1(2H)-酮(83a，500mg，0.931mmol)的THF(15mL)悬浮液中，接着加入叔丁醇钾(1.0M的
THF溶液，1.58mL，1.58mmol)。于0℃搅拌混合物1小时。加入冰乙酸(0.5mL)与乙酸乙酯
(100mL)，用饱和NaHCO3水溶液(3×20mL)与盐水(30mL)清洗溶液。以硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩，通过硅胶色谱法(用1/1石油醚/乙酸乙酯洗脱)纯化，得到2-((2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-8-氯-7-(甲氧基(四氢呋喃-3-基)甲基)-5-甲基-3,4-二氢
异喹啉-1(2H)-酮，为4种非对映异构体的混合物(400mg，70％收率)。

[0676] 将所述立体异构体通过制备型手性SFC(柱：AD，250＊30mm，5μm，流动相：30％IPA+NH3H2O 60毫升/分钟，波长：220nm，处理：冷冻干燥)分离，得到140mg白色固体峰12(峰1与2的混合物)与120mg白色固体峰34(峰3与4的混合物)。

[0677] 将峰12混合物(140mg)通过制备型SFC(柱：AD，250＊30mm，5μm，流动相：25％MeOH+NH3H2O 60毫升/分钟，波长：220nm，处理：冷冻干燥)分离，得到对映体富集的的峰1(60mg，81％手性纯度，如下所述被进一步纯化)与纯的峰2(1610b，60mg，12％收率，96％手性纯度，该化合物在未进一步纯化的情况下使用)。

[0678] 将峰34混合物(120mg)通过制备型SFC(柱：AD，250＊30mm，5μm，流动相：25％MeOH+NH3H2O 60毫升/分钟，波长：220nm，处理：冷冻干燥)分离，得到纯的峰3(1613b，50mg，9.8％收率，95％手性纯度，该化合物在未进一步纯化的情况下使用)与对映体富集的的峰4(50mg，88％手性纯度，如下所述被进一步纯化)。

[0679] 将对映体富集的的峰1物质(60mg，81％手性纯度)通过制备型SFC(柱：AD，250＊30mm，5μm，流动相：25％MeOH+NH3H2O 70毫升/分钟，波长：220nm，处理：冷冻干燥)进一步纯化，得到纯的峰1(83b，45mg，8.7％收率，98％手性纯度)。

[0680] 将对映体富集的的峰4物质(50mg，88％手性纯度)通过制备型SFC(柱：AD，250＊30mm，5μm，流动相：25％MeOH+NH3H2O 70毫升/分钟，波长：220nm，处理：冷冻干燥)进一步纯化，得到纯的峰4(1613b，45mg，8.7％收率，99％手性纯度)。此阶段未测定各异构体的绝对或相对立体化学。

[0681] 于室温用TFA(2mL)处理经搅拌的2-((2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-8-氯-7-(甲氧基(四氢呋喃-3-基)甲基)-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮峰1
(83b，45mg，0.082mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液。将混合物加热至30℃维持16小时，接着以二氯甲烷(20mL)稀释溶液，浓缩到干。将残留物通过硅胶色谱法(用10/1二氯甲烷/甲醇洗脱)纯化，得到白色固体8-氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-
{(R)-甲氧基[(3R)-四氢呋喃-3-基]甲基}-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(实施例83，
18.55mg，50％收率，100％ee)。实施例83的小分子X射线晶体结构证实其具有绝对(R,R)立体化学。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ12.36(brs，1H)，7.29(s，1H)，5.91(s，1H)，4.85-4.75(m，
3H)，3.89-3.83(m，6H)，3.71-3.69(m，1H)，3.47-3.44(m，2H)，3.16(s，3H)，2.76-2.73(m，
2H)，2.58-2.54(m，1H)，2.34(s，3H)，2.26(s，3H)，1.73-1.70(m，2H)。MS：461[M+H]+。手性分析：100％ee；保留时间34.91分钟；柱：Chiralpak IC 250×4.6毫米I.D.，5微米；流动相：
CO2中的50％乙醇(0.05％DEA)；流速：2.0毫升/分钟；波长：220nm。

[0682] 通过相同的程序，峰2立体异构体(1610b，60.0mg，0.109mmol)得到白色固体8-氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(R＊)-甲氧基[(3S＊)-四氢
呋喃-3-基]甲基}-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(实施例84，30mg，60％收率，97％
ee)。此异构体的绝对立体化学未测定，但1HNMR光谱显示其与实施例83的明显不同，表明实
1
施例84是R,S或S,R异构体。H NMR(400MHz，CDCl3)δ12.33(br.s，1H)，7.30(s，1H)，5.91(s，
1H)，4.84-4.77(m，3H)，3.89-3.86(m，4H)，3.73-3.68(m，2H)，3.60-3.58(m，1H)，3.46-3.44(m，2H)，3.19(s，3H)，2.75-2.73(m，2H)，2.64-2.62(m，1H)，2.34(s，3H)，2.24(s，3H)，1.98-
1.95(m，2H)。MS：461[M+H]+。手性分析：97％ee，保留时间39.01分钟；柱：Chiralpak IC 250×4.6毫米I.D.，5微米；流动相：CO2中的50％乙醇(0.05％DEA)；流速：2.0毫升/分钟；波长：
220nm。

[0683] 通过相同的程序，峰3立体异构体(85b，50.0mg，0.091mmol)得到白色固体8-氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(S＊)-甲氧基[(3R＊)-四氢呋喃-3-基]甲基}-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(实施例85，16.06mg，38％收率，100％ee)。此异构体的绝对立体化学未测定，但1HNMR光谱显示其与实施例83的明显不同，且和实施例84的相同，表明实施例85是S,R或R,S异构体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ12.30(br s，
1H)，7.30(s，1H)，5.91(s，1H)，4.84-4.77(m，3H)，3.89-3.86(m，4H)，3.74-3.66(m，2H)，
3.59-3.58(m，1H)，3.46-3.44(m，2H)，3.19(s，3H)，2.75-2.73(m，2H)，2.65-2.63(m，1H)，
2.34(s，3H)，2.24(s，3H)，1.98-1.95(m，2H)。MS：461[M+H]+。手性分析：100％ee，保留时间
29.05分钟；柱：Chiralpak IC 250×4.6毫米I.D.，5微米；流动相：CO2中的50％乙醇
(0.05％DEA)；流速：2.0毫升/分钟；波长：220nm。

[0684] 通过相同的程序，峰4立体异构体(86b，45.0mg，0.082mmol)得到白色固体8-氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-{(S)-甲氧基[(3S)-四氢呋喃-3-基]甲基}-5-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(实施例86，14.79mg，39％收率，100％ee)。
尽管它在手性柱上具有不同的保留时间，此化合物的1HNMR光谱与实施例83的相同，通过X
射线晶体结构显示实施例83具有R,R立体化学。这表明实施例86是S,S立体异构体。1H NMR
(400MHz，CDCl3)δ12.29(br.s，1H)，7.30(s，1H)，5.91(s，1H)，4.84-4.75(m，3H)，3.89-3.83(m，6H)，3.71-3.69(m，1H)，3.47-3.44(m，2H)，3.16(s，3H)，2.76-2.73(m，2H)，2.58-2.56(m，1H)，2.34(s，3H)，2.25(s，3H)，1.73-1.70(m，2H)。MS：461[M+H]+。手性分析：100％ee，保留时间32.28分钟；柱：Chiralpak IC 250×4.6毫米I.D.，5微米；流动相：CO2中的50％乙醇(0.05％DEA)；流速：2.0毫升/分钟；波长：220nm。

[0685] 方法J

[0686] 实施例87：5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[1-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)乙基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体A。

[0687] 实施例88：5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[1-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)乙基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体B。

[0688]

[0689] 于室温将1-boc-氮杂环丁烷-3-甲酸(5.00g，24.8mmol)与CDI(4.23g，26.1mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液搅拌1小时，接着加入盐酸N,O-二甲基羟胺(4.0g，29.8mmol)，于室温继续搅拌16小时。将所得的悬浮液用水(3×30mL)、饱和NaHCO3水溶液(3×30mL)与盐水
(3×30mL)清洗。以硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩，得到无色油状3-(甲氧基(甲基)氨甲酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(87a，5.1g，84％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.14(br s，
2H)，4.05(t，J＝8.6Hz，2H)，3.66(s，3H)，3.65(m，1H)，3.20(s，3H)，1.43(s，9H)。

[0690] 将溴化甲基镁(3M的THF溶液，10.4mL，31.3mmol)逐滴加到经冷却(0℃)的3-(甲氧基(甲基)氨甲酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(87a，5.1g，20.88mmol)的无水THF(100mL)
溶液中。于0℃继续搅拌1小时，接着于室温搅拌16小时。冷却混合物至0℃，用饱和NaHCO3水溶液(35mL)终止反应，接着以乙酸乙酯(3×40mL)萃取。用盐水(3×40mL)清洗经合并的有
机萃取物，以硫酸钠干燥，过滤，浓缩，通过硅胶色谱法(用10：1至3：1石油醚/乙酸乙酯洗
1
脱)纯化，得到浅黄色油状3-乙酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(87b，3.20g，77％收率)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.05(d，J＝7.6Hz，4H)，3.41(quint，J＝7.6Hz，1H)，2.18(s，3H)，1.43(s，9H)。

[0691] 将2-((2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-7-溴-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd SS，1.20g，2.238mmol)的无水THF(15mL)溶液冷却至-60℃，接着通过注射器费时3分钟逐滴加入氯化异丙基镁-氯化锂复合物(1.3M的THF溶液，5.16mL，
6.71mmol)。于-60℃继续搅拌10分钟，接着于0℃搅拌20分钟。逐滴加入3-(甲氧基(甲基)氨甲酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(87a，892mg，4.48mmol)，接着于0℃搅拌混合物1小时。
用冰乙酸(1mL)终止反应，以乙酸乙酯(100mL)稀释。用NaHCO3/盐水(v/v＝1/1，3×50mL)与盐水(50mL)清洗有机相，以硫酸钠干燥，过滤。浓缩滤液，得到黄色油状粗制品(2.0g)，通过硅胶色谱法(用石油醚/乙酸乙酯＝1：1洗脱)纯化，得到白色固体外消旋3-(1-(2-((2-(苄
氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-
基)-1-羟乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(87c，450mg，31％收率)。MS：656[M+H]+。

[0692] 将三氟甲磺酸(0.54mL，6.15mmol)逐滴加到经冷却(0℃)的外消旋3-(1-(2-((2-(苄氧基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-
基)-1-羟乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(87c，450mg，0.685mmol)的无水二氯甲烷(10mL)溶液中。于5至10℃搅拌混合物1小时，接着冷却至0℃，加入三氟甲磺酸(0.54mL，
6.15mmol)。于2至5℃搅拌12小时后，加入饱和碳酸氢钠水溶液使pH达到～8。浓缩混合物以除去二氯甲烷，用THF(20mL)稀释含水残留物。加入碳酸氢钠固体(288mg，3.43mmol)与二碳酸二(叔丁)酯(448mg，2.06mmol)，于2至5℃搅拌混合物16小时，接着于15℃维持18小时。用乙酸乙酯(2×50mL)萃取溶液。用盐水(2×20mL)清洗经合并的有机层，以硫酸钠干燥，过
滤。浓缩滤液，得到黄色固体粗制品(1g)，首先通过硅胶色谱法(用10％甲醇/二氯甲烷洗
脱)纯化，接着通过制备型SFC(柱：AD 250mm＊30mm，5μm；流动相：35％Base-ETOH；波长：
220nm；处理：浓缩)纯化，得到黄色固体3-(1-(5,8-二氯-2-((4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,
2-二氢吡啶-3-基)甲基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙烯基)氮杂环丁烷-1-甲酸
叔丁酯(87d，256mg，68.1％)。MS：548[M+H]+。

[0693] 将3-(1-(5,8-二氯-2-((4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙烯基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(87d，236mg，
0.43mmol)、氧化铂(80mg，0.35mmol)的乙酸乙酯(15mL)与甲醇(5mL)悬浮液于室温于氢气
球压力下搅拌3小时。过滤除去固体，浓缩滤液，通过制备型TLC(硅胶，用二氯甲烷/甲醇＝
15：1洗脱)纯化，得到白色固体外消旋3-(1-(5,8-二氯-2-((4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,
2-二氢吡啶-3-基)甲基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔
丁酯(87e，180mg，76％收率)。MS：549[M+H]+。

[0694] 将所得的外消旋3-(1-(5,8-二氯-2-((4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(87e，
180mg，0.327mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液与HCl(4.0M的甲醇溶液，5mL，20mmol)于14℃搅拌30分钟。浓缩溶液到干，用甲醇(5mL)溶解残留物。加入浓NH4OH使pH达到～8，浓缩混合物到干，得到白色固体粗制外消旋7-(1-(氮杂环丁烷-3-基)乙基)-5,8-二氯-2-((4-甲氧基-
6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(87f，180mg，
100％)，该化合物在未进一步纯化的情况下使用。

[0695] 将冰乙酸(0.1mL)加到15℃的粗制外消旋7-(1-(氮杂环丁烷-3-基)乙基)-5,8-二氯-2-((4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮
(87f，180mg，0.327mmol)与甲醛(37wt％的水溶液，79.5mg，0.980mmol)的甲醇(5mL)溶液中，于15℃搅拌混合物45分钟。加入氰基硼氢化钠(41mg，0.653mmol)，于室温继续搅拌12小时。用饱和NH4Cl溶液(2mL)终止反应，于15℃搅拌30分钟，接着浓缩以除去溶剂。用二氯甲烷/甲醇(v/v＝10：1，50mL)溶解残留物，过滤。浓缩滤液，通过制备型HPLC[柱：Phenomenex Gemini C18 250＊50 10μ；流动相：4％至34％乙腈(含0.225％甲酸)/水；波长：220nm；处理：冷冻干燥]纯化，得到白色固体(±)-5,8-二氯-2-((4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二
氢吡啶-3-基)甲基)-7-(1-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的
甲酸盐(110mg，66％)。将此外消旋盐的对映异构体通过制备型SFC[柱：AD(250mm＊30mm，5μm)；流动相：30％base-ETOH；波长：220nm；处理：冷冻干燥]分离，将各对映异构体分别通过制备型HPLC[柱：Phenomenex Gemini C18 250＊50 10μ；流动相：28％MeCN(含0.05％氨)/水至48％MeCN(含0.05％氨)/水；波长：220nm；处理：冷冻干燥]纯化，得到白色固体异构体A(实施例87，15.67mg，16％收率)与异构体B(实施例88，13.35mg，13％收率)。各异构体的绝对立体化学未测定。

[0696] 实施例87：5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[1-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)乙基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体A。1H NMR
(400MHz，CD3OD)δ7.44(s，1H)，6.27(s，1H)，4.73(s，2H)，3.91(m，3H)，3.77-3.68(m，2H)，
3.41-3.37(m，3H)，3.16(t，J＝7.4Hz，1H)，2.95-2.92(m，2H)，2.90-2.83(m，2H)，2.39(s，
3H)，2.34(s，3H)，1.16(d，J＝6.4Hz，3H)。MS：464[M+H]+。手性分析：99％ee；保留时间5.511分钟，Chiralpak AD-3 150×4.6毫米I.D.，3微米柱[流动相：A：CO2B：乙醇(0.05％DEA)；梯度：5.0分钟内5％至40％的B并且维持40％2.5分钟，接着5％的B 2.5分钟；波长：220nm]。

[0697] 实施例88：5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[1-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)乙基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮—异构体B。1H NMR
(400MHz，CD3OD)δ7.43(s，1H)，6.26(s，1H)，4.73(s，2H)，3.91(m，3H)，3.77-3.68(m，2H)，
3.41-3.37(m，3H)，3.12(brs，1H)，2.95-2.92(m，2H)，2.90-2.83(m，2H)，2.36(s，3H)，2.33(s，3H)，1.16(d，J＝6.4Hz，3H)。MS：464[M+H]+。手性分析：100％ee；保留时间5.997分钟，Chiralpak AD-3 150×4.6毫米I.D.，3微米柱[流动相：A：CO2B：乙醇(0.05％DEA)；梯度：
5.0分钟内5％至40％的B并且维持40％2.5分钟，接着5％的B 2.5分钟；波长：220nm]。

[0698] 方法K

[0699] 实施例89：(±)-5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[1-(吗啉-4-基)乙基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。

[0700] 实施例90：(+)-5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[1-(吗啉-4-基)乙基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。

[0701] 实施例91：(-)-5,8-二氯-2-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[1-(吗啉-4-基)乙基]-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。

[0702]

[0703] 将氯化异丙基镁-氯化锂复合物(1.3M的THF溶液，22.2mL，28.8mmol)通过注射器加到经冷却(-40℃)的2-{[2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基]甲基}-7-溴-5,8-二氯-3,
4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(Cpd S，5.00g，9.61mmol)的无水THF(50mL)和1,4-二 烷(5mL)溶
液中。于-40℃搅拌30分钟，加入氯化锌(1.0M的乙醚溶液，11.5mL，11.5mmol)。于-40℃继续搅拌30分钟，接着加入四(三苯膦)钯(0)(1.11g，0.961mmol)与乙酰氯(1.51g，19.2mmol)。
费时18小时搅拌混合物且让其升温至室温。用饱和NH4Cl水溶液(5mL)终止反应，以乙酸乙
酯(30mL)稀释，用饱和NH4Cl水溶液(40mL)与盐水(40mL)清洗。以硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩，通过硅胶色谱法(用0至30％乙酸乙酯/石油醚洗脱)纯化，得到黄色固体7-乙酰基-2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(89a，
4.00g，78％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.45(d，J＝6.8Hz，2H)，7.39(s，1H)，7.38-7.27(m，3H)，6.63(s，1H)，5.43(s，2H)，4.86(s，2H)，3.29(t，J＝6.3Hz，2H)，2.75(t，J＝6.3Hz，
2H)，2.63(s，3H)，2.42(s，3H)，2.34(s，3H)。MS：483[M+H]+。

[0704] 将硼氢化钠(47.0mg，1.24mmol)加到室温的7-乙酰基-2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(89a，200mg，0.414mmol)的甲醇(5mL)溶液中。于室温搅拌30分钟，浓缩反应混合物，通过硅胶色谱法(用0至30％乙酸乙酯/石油醚洗脱)纯化，得到白色固体2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二
氯-7-(1-羟乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(89b，190mg，95％收率)。

[0705] 用甲磺酰氯(67.3mg，0.587mmol)处理经冷却(0℃)的2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(1-羟乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(89b，190mg，
0.391mmol)与三乙胺(119mg，1.17mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液，于0℃搅拌1小时。以二氯甲烷(30mL)稀释反应混合物；依序用饱和NH4Cl水溶液、饱和NaHCO3水溶液与饱和NaCl水溶液清洗；以硫酸钠干燥，浓缩到干，得到白色固体粗制外消旋1-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙基甲磺酸酯(89c，
225mg，100％收率)，未经进一步纯化就立即使用。

[0706] 将1-(2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)乙基甲磺酸酯(89c，100mg，0.177mmol)、吗啉(46.4mg，0.532mmol)与碳酸钾(73.6mg，0.532mmol)的乙腈(5mL)悬浮液于回流(85℃)下搅拌2小时。冷却至室温
后，过滤悬浮液以除去固体。浓缩滤液，通过硅胶色谱法(用0至30％乙酸乙酯/石油醚洗脱)纯化，得到胶体外消旋2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(1-吗
啉乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(89d，90mg，91％收率，LCMS测定80％纯度)。MS：576[M++
Na]。

[0707] 将外消旋2-((2-(苄氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-5,8-二氯-7-(1-吗啉乙基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(89d，90mg，0.16mmol)的二氯甲烷(5mL)与三氟乙酸(2mL)
溶液于室温搅拌19小时。将溶液蒸发到干，接着用甲苯(10mL)溶解残留物，加入几滴浓
NH4OH碱化至pH 8至9。浓缩溶液，通过制备型HPLC纯化，得到白色固体(±)-5,8-二氯-2-
[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-7-[1-(吗啉-4-基)乙基]-3,4-二氢异
喹啉-1(2H)-酮(实施例89，29.49mg，39％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.74(s，1H)，5.94(s，1H)，4.87-4.70(m，2H)，4.00(q，J＝6.3Hz，1H)，3.76-3.59(m，6H)，2.99-2.81(m，2H)，+
2.53(br.s.，2H)，2.36(m，5H)，2.29(s，3H)，1.24(d，J＝6.5Hz，3H)。MS：464[M+H]。

[0708] 通过手性SFC分离条件将外消旋物质(实施例89)进一步纯化，得到实施例90的化合物与实施例91的化合物。

[0709] 通过本申请中所举例说明的方法的变化形式制得了本发明的另外的化合物。所制得的所选择的化合物与对应的表征数据呈现在下表1中。

[0710] 表1

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[0808] 生物学试验与数据

[0809] WT与突变型EZH2Y641N的纯化

[0810] 利用相同的程序将WT与突变型EZH2纯化。将EZH2、EED、SUZ12与RBBP4蛋白的基因克隆到pBacPAK9载体(Clontech)中。用FLAG标记RBBP4的N端。将这些蛋白的杆状病毒的表
达用于同时感染SF9昆虫细胞。使昆虫细胞沉淀物溶解于缓冲液(含有25mM Tris pH 8.0、
300mM NaCl、0.5mM TCEP、完全无EDTA的蛋白酶抑制剂(Roche)、0.1％NP-40)。使细胞溶解液的上清液于 M2抗体树脂(Sigma)中温育。将树脂于色谱法柱上清洗且用
0.2mg/ml FLAG肽洗脱。使洗脱液于omnicleave核酸酶(Epicentre Technologies)中于4℃
温育过夜，接着浓缩，装载于Superdex 200(GE Healthcare)柱上。将Superdex 200柱用
25mM Tris pH 8.0、150mM NaCl、0.5mM TCEP洗脱。混合含有PRC2复合物的级分。

[0811] 核小体检测法操作程序：(相同的操作程序被用于WT与突变型EZH2Y6412N检测法)

[0812] A.化合物制备

[0813] 1.由固体材料于100％DMSO中制备10mM母液。

[0814] 2.将10mM化合物母液于100％DMSO中作连续的2或3倍稀释以制得供11点剂量反应的化合物。

[0815] B.试剂制备

[0816] 1.制备1x检测缓冲液(含有100mM Tris pH 8.5、4mM DTT与0.01％吐温20)

[0817] 2.将经纯化的HeLa寡核小体与重组组织蛋白H1(New England Biolabs)于检测缓冲液中稀释成1.67x。

[0818] 3.将PRC2四种蛋白复合物(EZH2、EED、SUZ12、RbAp48)于检测缓冲液中稀释成3.5x。

[0819] 4.用0.94μCi/孔的放射性SAM(Perkin Elmer)与足够的未标记的SAM(Sigma)于检测缓冲液中制备10x 3H SAM溶液，最终浓度1.5μM。

[0820] 5.将TCA用去离子水稀释成20％。

[0821] C.酶反应

[0822] 1.最终反应条件为：PRC2四种蛋白复合物(当使用WT EZH2时是4nM，或当使用Y641N突变型EZH2时是6nM)，1.5μM SAM，25μg/mL寡核小体，50nM rH1，反应体积50μl。

[0823] 2.将1μl稀释的化合物加到检测盘(96孔V型底聚丙烯盘)或加1μl DMSO于对照孔中。

[0824] 3.将30μl核小体加到检测盘。

[0825] 4.将14μl WT或Y641N突变型PRC2四种蛋白复合物加到检测盘。

[0826] 5.加入5μl 3H SAM以起始反应。

[0827] 6.经过60分钟后，加入100μl 20％TCA终止反应。

[0828] 7.将150μl已终止反应的混合物转移到已准备好的过滤板(Millipore#MSIPN4B10)中。

[0829] 8.施加真空于过滤板以通过薄膜过滤反应混合物。

[0830] 9.用5x200μl PBS清洗过滤板，吸干，并在烤箱中干燥30分钟。

[0831] 10.将50μl microscint-20闪烁液(Perkin Elmer)加到各孔中，等待30分钟，以液态闪烁计数仪计数。

[0832] 11.在高SAM条件下测试了有些化合物。在这种情况下，检测如上所述，但是反应混合物含有15μM SAM。将SAM以3.3x母液总共14.5μCi/孔加到检测盘。

[0833] D.数据分析

[0834] 1.利用专用曲线拟合软件将数据拟合四参数IC50方程式而测定IC50值。

[0835] 2.对于在高SAM条件下测试的化合物而言，利用专用曲线拟合软件将剂量反应曲线拟合竞争性抑制模型而得到Kiapp值。

[0836] HeLa寡核小体的制备：

[0837] 试剂

[0838] –细胞沉淀物：15L HeLa S3(Accelgen)+6L HeLa S3(自制)

[0839] –Mnase(Worthington Biochemicals)

[0840] 设备

[0841] –SW-28Rotor

[0842] –杜恩斯匀浆器(Dounce Homogenizer)/B Pestle

[0843] 缓冲液

[0844] –裂解缓冲液：20mM Hepes pH 7.5、0.25M蔗糖、3mM MgCl2、0.5％Nonidet P-40、0.5mM TCEP、1Roche蛋白酶片

[0845] –B：20mM Hepes pH 7.5、3mM MgCl2、0.5mM EDTA、0.5mM TCEP、1Roche蛋白酶片[0846] –MSB：20mM Hepes pH 7.5、0.4M NaCl、1mM EDTA、0.5％v/v甘油、0.5mM TCEP、0.2mM PMSF

[0847] –LSB：20mM Hepes pH 7.5、0.1M NaCl、1mM EDTA、0.5mM TCEP、0.2mM PMSF

[0848] –NG：20mM Hepes pH 7.5、1mM EDTA、0.4M NaCl、0.2mM PMSF、0.5mM TCEP

[0849] –贮藏缓冲液：20mM Hepes pH 7.5、1mM EDTA、10％甘油、0.2mM PMSF、0.5mM TCEP[0850] 操作程序

[0851] A.细胞核

[0852] 1.利用杜恩斯(dounce)匀浆器使～10L细胞沉淀物再悬浮于2x40mL裂解缓冲液中

[0853] 2.以3000xg旋转15分钟

[0854] 3.重复2次

[0855] 4.使细胞沉淀物再悬浮于2x40mL B中

[0856] 5.以3000xg旋转15分钟

[0857] B.细胞核再悬浮

[0858] 1.使细胞沉淀物再悬浮于2x40mL MSB中，以5000xg旋转20分钟

[0859] 2.使细胞沉淀物再悬浮于2x15mL HSB中

[0860] 3.混合与匀浆化40个冲程(Stroke)以切断DNA

[0861] 4.将细胞沉淀物以10000xg旋转20分钟

[0862] 5.于4℃于LSB中透析过夜(O/N)，只有A批于50nM NaCl于LSB中透析3小时

[0863] C.Mnase消化

[0864] 测试Mnase消化(200μl)

[0865] 1.升温至37℃维持5分钟

[0866] 2.加入CaCl2至3mM并加入10U Mnase

[0867] 3.于37℃维持30分钟，每5分钟取样25μL

[0868] 4.用1μL 0.5M EDTA、40μL H2O、15μL 10％SDS、10μL 5M NaCl与100μL苯酚-三氯甲烷进行反应，于每次加料后涡漩震荡

[0869] 5.以13k旋转5分钟

[0870] 6.于1％琼脂胶上进行5μL水相反应

[0871] 7.经过一段时间得到～2kb片段

[0872] 8.为了放大规模，选择15分钟用于A&B，并选择20分钟用于C&D

[0873] 加入NaCl至0.6M

[0874] D.蔗糖梯度1

[0875] 1.将6x34mL梯度5至35％蔗糖的NG溶液(利用AKTA净化器)倒入38.5mL pollyallomer管中

[0876] 2.引导～4.0mL至MN1消化的顶端上

[0877] 3.于4℃以26k旋转16小时

[0878] 4.从顶端取2mL级分

[0879] 5.于Page Gel上运行

[0880] 6.于4℃于4L LSB中透析级分7-14 0/N，只有D批是2x2小时

[0881] 7.重复3次

[0882] E.最后

[0883] 1.于Amicon中混合全部并浓缩(有点混浊)

[0884] 2.加入10％甘油

[0885] 3.以5K旋转15分钟

[0886] 4.1.8mg/mL有80mL共144mg

[0887] 生物活性

[0888] 表3中提供在EZH2核小体检测法中被选实施例的生物活性。如所示，数据以WT与突变型Y641N EZH2IC50值(μM)或Kiapp值(μM)表示。

[0889] 表2

[0890]

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[0894]

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[0896]

[0897]

[0898] 通过引用将本说明书中所引用的所有出版物与专利申请的全部内容并入本申请。尽管上面已通过说明与实施例相当详细地描述了本发明，然而本领域普通技术人员将显而
易知的是，在不脱离后附权利要求的精神或范围的前提下，根据本发明的教导可做出某些
改变与修改。