粘毛蒿在生物防治方面的用途及其生物防治药剂和制备方法

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粘毛蒿在生物防治方面的用途及其生物防治药剂和制备方法
申请号	CN202110709338.4	申请日	2021-06-25	公开(公告)号	CN113424841A	公开(公告)日	2021-09-24
申请人	宁夏农林科学院植物保护研究所(宁夏植物病虫害防治重点实验室);			发明人	刘畅; 刘志龙; 王芳; 张蓉; 何嘉; 魏淑花; 王颖; 朱猛蒙; 宋双;
摘要	本发明“粘毛蒿在生物防治方面的用途及其生物防治药剂和制备方法”属于生物防治领域。本发明涉及粘毛蒿在生物防治方面的用途，以及基于粘毛蒿精油的生物防治药剂。本发明的生物防治药剂可高效杀灭农业害虫，同时无毒无害、安全可靠、成本低廉。
权利要求	1.粘毛蒿在生物防治方面的用途。 2.根据权利要求1所述的粘毛蒿在生物防治方面的用途，其特征在于，所述生物防治指杀灭、抑制、致死害虫。 3.根据权利要求2所述的粘毛蒿在生物防治方面的用途，其特征在于，所述害虫指农业害虫；优选地，所述农业害虫选自：西花蓟马、棉蚜；优选地，所述杀灭、抑制、致死害虫指采用粘毛蒿精油处理害虫；优选地，所述杀灭方式选自触杀或熏杀。 4.一种生物防治药剂，其特征在于，包括活性成分；所述活性成分包括粘毛蒿精油。 5.根据权利要求4所述的一种生物防治药剂，其特征在于，所述粘毛蒿精油包括：(1E， 6E，8S)‑1‑甲基‑5‑亚甲基‑8‑(1‑甲基乙基)‑1,6‑环癸二烯、阿加来必、5‑甲基‑2‑(1‑甲乙烯基)‑4‑己烯‑1‑醇、1‑石竹烯、α‑姜黄烯、母菊薁、(+)‑翠花醇。 6.根据权利要求4或5所述的一种生物防治药剂，其特征在于，还包括药学上可接受的辅料；优选地，所述药学上可接受的辅料选自：溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、释放阻滞剂。 7.根据权利要求4‑6任一所述的一种生物防治药剂，其特征在于，所述生物防治指杀灭、抑制、致死害虫；优选地，所述害虫指农业害虫；优选地，所述农业害虫选自：西花蓟马、棉蚜；优选地，所述生物防治药剂为杀虫剂。 8.一种生物防治药剂的制备方法，其特征在于，将粘毛蒿精油做为所述生物防治药剂的活性成分。 9.根据权利要求8所述的一种生物防治药剂的制备方法，其特征在于，将粘毛蒿植株经水煮法提取后得到的提取物再经正己烷萃取得到粘毛蒿精油。 10.根据权利要求9所述的一种生物防治药剂的制备方法，其特征在于，所述水煮法温度为90‑120℃优选100℃，时间为4‑8h优选6h；优选地，所述生物防治药剂为杀虫剂；优选地，所述粘毛蒿植株指粘毛蒿全草。
说明书全文	粘毛蒿在生物防治方面的用途及其生物防治药剂和制备方法技术领域 [0001] 本发明属于生物防治领域，具体涉及粘毛蒿在生物防治方面的用途及其生物防治药剂和制备方法。背景技术 [0002] 粘毛蒿(Artemisia mattfeldiiPamp.)是菊科蒿属多年生草本，高35‑50厘米，植株有薄荷香味，有花有果，生于海拔12600‑4700米地区的林缘、草地、荒坡、路旁等，产于甘肃(西南部)、青海(南部)、四川(西部)、西藏(东部)。 [0003] 目前有关粘毛蒿的相关应用研究报道极为罕见，而关于粘毛蒿在生物防治、杀虫方面的报道本领域更是一片空白。发明内容 [0004] 针对本领域现有技术存在的上述空白，本发明提供粘毛蒿在生物防治方面的用途及其生物防治药剂和制备方法，并验证粘毛蒿及其精油在生物防治尤其是抑制西花蓟马、棉蚜等害虫方面的效果。 [0005] 本发明的技术方案如下： [0006] 粘毛蒿在生物防治方面的用途。 [0007] 所述生物防治指杀灭、抑制、致死害虫。 [0008] 所述害虫指农业害虫； [0009] 优选地，所述农业害虫选自：西花蓟马、棉蚜； [0010] 优选地，所述杀灭、抑制、致死害虫指采用粘毛蒿精油处理害虫； [0011] 优选地，所述杀灭方式选自触杀或熏杀。 [0012] 一种生物防治药剂，其特征在于，包括活性成分；所述活性成分包括粘毛蒿精油。 [0013] 所述粘毛蒿精油包括：(1E，6E，8S)‑1‑甲基‑5‑亚甲基‑8‑(1‑甲基乙基)‑1,6‑环癸二烯、阿加来必、5‑甲基‑2‑(1‑甲乙烯基)‑4‑己烯‑1‑醇、1‑石竹烯、α‑姜黄烯、母菊薁、(+)‑ 翠花醇。 [0014] 所述的一种生物防治药剂还包括药学上可接受的辅料； [0015] 优选地，所述药学上可接受的辅料选自：溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、释放阻滞剂。 [0016] 所述生物防治指杀灭、抑制、致死害虫； [0017] 优选地，所述害虫指农业害虫； [0018] 优选地，所述农业害虫选自：西花蓟马、棉蚜； [0019] 优选地，所述生物防治药剂为杀虫剂。 [0020] 一种生物防治药剂的制备方法，其特征在于，将粘毛蒿精油做为所述生物防治药剂的活性成分。 [0021] 将粘毛蒿植株经水煮法提取后得到的提取物再经正己烷萃取得到粘毛蒿精油。 [0022] 所述水煮法温度为90‑120℃优选100℃，时间为4‑8h优选6h； [0023] 优选地，所述生物防治药剂为杀虫剂； [0024] 优选地，所述粘毛蒿植株指粘毛蒿全草。 [0025] 本发明意外发现粘毛蒿在生物防治方面的作用，尤其是杀虫方面的突出效果。通过室内毒力试验对粘毛蒿精油的杀虫效力，粘毛蒿精油触杀棉蚜的半致死浓度仅为 9.37mg/mL，熏杀西花蓟马的半致死浓度仅为2.8mg/L，这充分说明本发明发现的粘毛蒿的生物防治新用途是有效实用的，且经水煮、萃取等常规提取手段得到的粘毛蒿精油可高效杀灭西花蓟马、棉蚜等害虫。另一方面本发明还提供基于粘毛蒿精油的生物防治药剂，并鉴定出该药剂的活性成分包含(1E，6E，8S)‑1‑甲基‑5‑亚甲基‑8‑(1‑甲基乙基)‑1,6‑环癸二烯、3H‑环氧并[8，8a]天青[4，5‑b]呋喃‑8(4aH)‑酮，5，6，6a，7，9a，9b‑六氢‑1，4a‑二甲基‑ 7‑亚甲基‑(3aR，4aS，6aS，9aS，9bR)、5‑甲基‑2‑(1‑甲乙烯基)‑4‑己烯‑1‑醇、1‑石竹烯、α‑ 姜黄烯、母菊薁、(+)‑翠花醇等化合物。 [0026] 本发明的生物防治药剂可高效杀灭害西花蓟马、棉蚜等农业害虫，同时无毒无害、又不产生污染，是安全可靠、成本低廉、环保高效的新型杀虫剂/杀螨剂。粘毛蒿广泛分布于林缘、草地、荒坡、路旁，能轻易大量获取，利用粘毛蒿精油进行生物防治杀虫，符合充分利用、绿色环保的理念。具体实施方式 [0027] 下面结合具体实施例对本发明的内容做进一步详细描述，但并不以此限制本发明的保护范围。 [0028] 生物材料的来源 [0029] 本发明实验例中使用的粘毛蒿采集自甘肃。 [0030] 第1组实施例、本发明粘毛蒿的生物防治新用途 [0031] 本组实施例提供粘毛蒿在生物防治方面的用途。 [0032] 在具体的实施例中，所述生物防治指杀灭、抑制、致死害虫。 [0033] 在一些实施例中，所述害虫指农业害虫； [0034] 优选地，所述农业害虫选自：西花蓟马、棉蚜。 [0035] 基于本发明记载的内容，本领域技术人员在本发明的教导下，可获得奖粘毛蒿用于生物防治领域的启示。生物防治不仅限于杀虫，还可用于杀螨。杀虫不仅限于杀灭西花蓟马、棉蚜，还可用于杀灭其它农业害虫。防治手段不仅限于杀灭、抑制、致死，还可以是趋避、调控生态群落等。本领域技术人员采用粘毛蒿进行防治生物的行为均落入本发明的保护范围。第2组实施例、本发明的生物防治药剂 [0036] 本组实施例提供一种生物防治药剂。本组所有的实施例都具备如下共同特征：所述生物防治药剂包括活性成分；所述活性成分包括粘毛蒿精油。 [0037] 在具体的实施例中，所述粘毛蒿精油包括：(1E，6E，8S)‑1‑甲基‑5‑亚甲基‑8‑(1‑甲基乙基)‑1,6‑环癸二烯、阿加来必、5‑甲基‑2‑(1‑甲乙烯基)‑4‑己烯‑1‑醇、1‑石竹烯、α‑ 姜黄烯、母菊薁、(+)‑翠花醇。 [0038] 上述精油成分为经GC‑MS分析测定出的峰面积百分含量在5％以上的化合物成分，为粘毛蒿精油中占比较大的几类化合物，推定为具有杀虫活性的几类主要的化合物。而其它峰面积百分含量5％以下的化合物不代表不具备杀虫活性。粘毛蒿精油的各类化合物成分以表1记载为准。 [0039] 在进一步的实施例中，所述的一种生物防治药剂还包括药学上可接受的辅料； [0040] 优选地，所述药学上可接受的辅料选自：溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、释放阻滞剂。 [0041] 本领域技术人员可根据实际生产应用需要，对辅料的种类和用量进行常规选择和调整。 [0042] 在一些实施例中，所述生物防治指杀灭、抑制、致死害虫； [0043] 优选地，所述害虫指农业害虫； [0044] 优选地，所述农业害虫选自：西花蓟马、棉蚜。 [0045] 第3组实施例、本发明的生物防治药剂的制备方法 [0046] 本组实施例提供一种生物防治药剂的制备方法。本组所有的实施例都具备如下共同特征：将粘毛蒿精油做为所述生物防治药剂的活性成分。 [0047] 在一些实施例中，将粘毛蒿植株经水煮法提取后得到的提取物再经正己烷萃取得到粘毛蒿精油。 [0048] 在具体的实施例中，所述水煮法温度为90‑120℃优选100℃，时间为4‑8h优选6h； [0049] 优选地，所述萃取的萃取剂采用正己烷，萃取的具体操作为本领域技术人员可根据实际需要、结合具体的原材料、萃取剂等进行常规选择和调整，例如，可参照《正己烷和亚临界法萃取玉米皮油的性质比较分析》一文记载的萃取步骤。 [0050] 实验例、本发明的粘毛蒿精油制备及其效果验证 [0051] 1试验方法 [0052] 1.1植物精油制备 [0053] 10KG粘毛蒿全草水煮法提取挥发油，正己烷萃取得挥发油，计算得油率v/w。得油率计算公式为： [0054] 粘毛蒿全草具有中药领域的常规技术含义，即，出去粘毛蒿植株的根部的地上部分。 [0055] 1.2植物精油GC‑MS分析 [0056] 色谱条件：GCMS‑QP2010plus(Shimadzu)，色谱柱DB‑5MS(60m0.25um0.32mm)(Agilent)，升温速率60℃‑10℃/min‑300℃‑20min，分流比30：1，恒线速度模式30cm/sec，载气He离子，源温度200℃，接口温度300℃，进样口温度320℃，质量扫描范围29‑650m/z，进样量1μL，样品经一次性注射器含0.22um的有机滤膜的滤头过滤，谱库检索Nist 2017标准谱库。 [0057] 1.3粘毛蒿精油对害虫室内毒力测定 [0058] 棉蚜触杀活性测定：采用叶碟法，配制五个浓度(6.02mg/ml、8.13mg/ml、10.97mg/ml、14.81mg/ml、20mg/ml)，定容至5mL备用。从新鲜叶片上剪下健康叶子，用打孔器打孔。将打好孔的叶片分别夹入各浓度药液中，浸叶10s后，自然晾干，用镊子夹入铺有琼脂层的十二孔培养板中，叶片正面与培养板底部完全贴合并与培养板周壁相接。每孔中接入10头棉蚜，接完后，培养板用宣纸条封顶。含有等量无水乙醇及DMSO的水溶液作为空白对照，以除虫菊提取物为阳性对照，每个处理设6次重复，将培养板置于培养箱中，设温度(26±0.5) ℃，相对湿度50％，光照L：D为16：8的光照气候箱。24h后观察并纪录试虫死亡数。用DPS软件，计算生物活性回归方程式、LC50值及95％置信限等指标。 [0059] 西花蓟马熏蒸活性测定：采用熏蒸法，配置不同浓度的精油稀释液，取20mL小瓶吸入10头西花蓟马成虫，用网纱套住放入250mL广口瓶中，瓶盖内固定1cm×6cm滤纸条，将滴有20μl药液的滤纸条晾10‑20s，待溶剂挥发后盖上瓶盖，使滤纸条悬于广口瓶中央，用封口膜包住广口瓶盖。设丙酮溶液为空白对照，敌敌畏为阳性对照，每个浓度设6次重复。处理后将广口瓶放入培养箱中，设温度(26±0.5)℃，相对湿度50％，光照L：D为16：8的光照气候箱。24h后调查并记录各处理死亡虫数，数据处理方法如上。 [0060] 2.试验结果 [0061] 2.1得油率 [0062] 经计算，粘毛蒿植物精油的得油率为0.14％。 [0063] 2.1植物精油GC‑MS分析结果 [0064] 粘毛蒿植物精油GC‑MS分析结果如下表1所示： [0065] 表1 [0066] [0067] [0068] [0069] 上表1中鉴定出来的全部成分的总百分比未到100％，是因为粘毛蒿精油中仍存在未知成分，它们可能是新的化合物，无法利用现有的GC‑MS检测方法鉴定出来。但这并不影响本发明的实现。 [0070] 2.2粘毛蒿精油对害虫室内毒力测定结果 [0071] 粘毛蒿精油对害虫室内毒力测定结果如下表2所示： [0072] 表2 [0073]