杀菌剂

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杀菌剂
申请号	CN201110068242.0	申请日	2009-09-30	公开(公告)号	CN102177893A	公开(公告)日	2011-09-14
申请人	浙江大洋化工股份有限公司;			发明人	王国平; 章初龙; 林福呈; 毛黎娟; 周转忠;
摘要	本发明公开了一种杀菌剂，该杀菌剂包含2-甲基-丙酸甲酯、2-甲基丙酸、1-乙烯基-1-甲基-2,4-二(1-甲基乙烯基)-环已烷、石竹烯、2,6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯)二环[3.1.1]庚-2-烯、1,2,3,4,5,6,7,8-八氢化-1,4-二甲基-7-(1-甲基亚乙基)薁、1,2,3,4,4a,5,6,8a-八氢化-4a,8-二甲基-2-(1-甲基乙基)萘和3,3,7,11-四甲基三环[6.3.0.0(2,4)]十一碳-8-烯等。其可抑制或杀死农作物生产过程中的病原微生物、建筑材料霉变微生物及人类或动物生存环境中的病原微生物。
权利要求	1.杀菌剂，其特征是：所述杀菌剂包含0.65％～10.2％2-甲基-丙酸甲酯、28％～ 78％2-甲基丙酸、0.6％～2.5％1-乙烯基-1-甲基-2.4-二(1-甲基乙烯基)-环已烷、 0.10％～0.4％石竹烯、0.06％～1％ 2,6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯)二环[3.1.1]庚-2-烯、0.8％～3.5％1,2,3,4,5,6,7,8-八氢化-1,4-二甲基-7-(1-甲基亚乙基)薁、5.8%~11%1,2,3,4,4a,5,6,8a-八氢化-4a,8-二甲基-2-(1-甲基乙基)萘、0.05％～ 0.2％的3,3,7,11-四甲基三环[6.3.0.0(2,4)]十一碳-8-烯、0.3％～2.8％a-水芹烯、 4％～45％β-水芹烯、0.1％～0.6％反式1-甲基-4-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇、 0.08％～0.4％顺式1-甲基-4-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇、0.25％～4％反式3-甲基-6-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇和0.03％～0.28％顺式3-甲基-6-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇；其余为溶剂；以上百分比均为体积百分比。 2.根据权利要求1所述的一种杀菌剂，其特征是：所述杀菌剂包含9.5％～10.2％ 2-甲基-丙酸甲酯、60％～61％2-甲基丙酸、2.0％～2.1％1-乙烯基-1-甲基-2.4-二(1-甲基乙烯基)-环已烷、0.36％～0.4％石竹烯、0.9％～1％2,6--二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯)二环[3.1.1]庚-2-烯、3.3％～3.4％1,2,3,4,5,6,7,8-八氢化-1,4-二甲基-7-(1-甲基亚乙基) 薁、6.9%~7.0%1,2,3,4,4a,5,6,8a-八氢化-4a,8-二甲基-2-(1-甲基乙基)萘、0.13％～0.17％的3,3,7,11-四甲基三环[6.3.0.0(2,4)]十一碳-8-烯、0.3％～0.35％a-水芹烯、5.8％～5.95％β-水芹烯、0.2％～0.25％反式1-甲基-4-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇、0.08％～0.12％顺式1-甲基-4-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇、0.25％～0.32％反式3-甲基-6-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇、 0.05％～0.07％顺式3-甲基-6-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇；其余为溶剂。 3.根据权利要求1所述的一种杀菌剂，其特征是：所述杀菌剂包含0.68％～0.72％ 2-甲基-丙酸甲酯、28％～28.5％2-甲基丙酸、2％～2.5％1-乙烯基-1-甲基-2.4-二(1-甲基乙烯基)-环已烷、0.10％～0.14％石竹烯、0.12％～0.18％ 2,6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯)二环[3.1.1]庚-2-烯、2％～2.5％1,2,3,4,5,6,7,8-八氢化-1,4-二甲基-7-(1-甲基亚乙基)薁、10.26%~10.76%1,2,3,4,4a,5,6,8a-八氢化-4a,8-二甲基-2-(1-甲基乙基)萘、0.14％～0.18％的3,3,7,11-四甲基三环[6.3.0.0(2,4)]十一碳-8-烯、2.38％～2.8％a-水芹烯、43.5％～45％β-水芹烯、 0.5％～0.54％反式1-甲基-4-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇、0.34％～0.38％顺式 1-甲基-4-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇、3.85％～4％反式3-甲基-6-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇、0.22％～0.26％顺式3-甲基-6-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇；其余为溶剂。 4.根据权利要求1所述的一种杀菌剂，其特征是：所述杀菌剂包含7.8％～8.2％2-甲基-丙酸甲酯、76.5％～78％2-甲基丙酸、0.63％～0.7％1-乙烯基-1-甲基-2.4-二(1-甲基乙烯基)-环已烷、0.10％～0.12％石竹烯、0.06％～0.08％2,6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯)二环[3.1.1]庚-2-烯、0.8％～0.9％1,2,3,4,5,6,7,8-八氢化-1,4-二甲基-7-(1-甲基亚乙基)薁、5.8%~6.2%1,2,3,4,4a,5,6,8a-八氢化-4a,8-二甲基-2-(1-甲基乙基)萘、0.05％～0.07％的3,3,7,11-四甲基三环[6.3.0.0(2,4)]十一碳-8-烯、 0.3％～0.4％a-水芹烯、4％～4.5％β-水芹烯、0.1％～0.15％反式1-甲基-4-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇、0.08％～0.12％顺式1-甲基-4-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇、0.3％～0.35％反式3-甲基-6-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇、0.03％～ 0.05％顺式3-甲基-6-（1-甲基乙基）-2-环已烯-1-醇；其余为溶剂。
说明书全文	杀菌剂 [0001] 本发明是申请日为2009.09.30，申请号为200910153513.5的《Muscodor属植物内生真菌及其用途和杀菌剂》的分案申请。技术领域 [0002] 本发明涉及微生物学及杀菌剂领域，具体地说，本发明涉及一种新Muscodor属植物内生真菌和基于或源自它的挥发性混合物及其用途。背景技术 [0003] 真菌是微生物中的一个庞大的家族，真菌与人类的关系非常密切，真菌可用以制造医药、食品、化工等工农业上重要的产品。著名的青霉素和头孢霉素是迄今为止真菌带给医药界的最珍贵的药物之一，也是目前最重要的抗生素，被广泛应用于细菌感染疾病的治疗上，并挽救了千千万万人类的生命。 [0004] 植物内生真菌(endophytic fungi)是真菌的一个重要类群，据Dreyfuss和Chapel估计内生真菌总数达100万种。现在已有少数几种被用于医药、农艺生产或工业应用方面，但是植物内生真菌资源还远远未被充分发掘。内生真菌具有多种多样的生态学功能，内生真菌的生态学功能很可能是与其多样性相关，而内生真菌的多样性意味着其化学多样性。内生真菌可以产生各种各样的次生代谢产物，它们在人类生活、生产中具有重要的应用潜力，如内生真菌可以产生紫杉醇等抗肿瘤化合物；oreganic acid等新抗肿瘤活性物质；抗白色念珠菌、须癣毛癣菌和红色发癣菌等病原真菌的新化合物cryptocin、cryptocandin等；产生具有抗幽门螺杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷氏菌和鼠伤寒沙门氏菌等病原细菌的periconicins、rhizoctonic acid等。 [0005] 现在已发现多种不同的微生物具有产生控制植物病害的生物活性物质，包括杀虫剂、杀菌剂及植物生长调节剂等。目前对于控制农作物生产过程中的病原微生物、建筑材料霉变微生物及人类或动物生存环境的病原微生物的研究也有许多，而且也有重要的进展，但主要还是依靠化学合成方法来生产杀菌剂或杀虫剂。使用化学合成药剂带来一系列的严重后果：1)高残留：由于化学合成药剂，包括其多种原材料具有致癌性和毒性，进入动植物体内不容易排除，环境降解能力差，造成农药残留量高；2)破坏生态平衡：生物长期进化与适应，自然界中各种生物相对数量达到动态平衡，使用化学药剂造成有害生物的天敌数量大大减少；3)抗药性的产生：自然界中的病原菌及昆虫类的基因具有很强的突变能力，不合理用药、肓目用药促使抗药性的迅速产生。由于上述种种的缺点，化学合成药剂的使用也越来越受限制，开发新的、作用机理独特且对人畜和生态环境无害的生物制剂越来越被重视，也成为现代农药行业发展的重要方向。 [0006] 许多种真菌能产生一些低浓度挥发性气体，而且有些挥发性气体还具有抗菌、杀虫或杀病毒的功能，如Dennis&Webster等发现木霉(Trichoderma)产生的挥发性气体物质能抑制立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、终极腐霉(Pythium ultimum)等的生长。Strobel等从热带木本植物分离到能产生挥发性混合物质(volatile compounds，VOCs)的四种Muscodor属内生真菌，它们分别为樟属植物锡兰肉桂(Cinnamomum zeylanicum)内生真菌Muscodor albus、蕨叶银桦(Grevillea pteridifolia)内生真菌Muscodor roseus、热带木质藤本植物(Paullinia paullinioides)内生真菌Muscodor vitigentis、凤梨属植物Ananas ananassoides内生真菌Muscodor crispans。Muscodor albus、Muscodor roseus、Muscodor vitigentis和Muscodor crispans产生的VOCs对真菌、细菌及病毒等具有抑杀作用，在防治或杀灭农作物生产过程中的病原微生物、建筑材料霉变微生物及人类或动物生存环境中的病原微生物具有重要的应用价值，他们并且也进行了相关的商业化开发。 [0007] 利用真菌产生的VOCs的应用研究目前还不多见，Strobel等关于Muscodor属相关内生真菌的研究成果及开发应用，证明Muscodor属真菌产生的VOCs是寻找新型化合物、新型药物或新型药物中间体的重要途径，也是开发新型生物制剂的重要资源。利用真菌产生的VOCs来控制农作物生产过程中的病原微生物、建筑材料霉变微生物及人类或动物生存环境的病原微生物，具有对非靶标生物无毒害，不污染环境，不破环生态平衡，不会诱导有害微生物、病毒及昆虫等产生抗药性的优点。发明内容 [0008] 本发明要解决的技术问题是提供一种杀菌剂，其可抑制或杀死农作物生产过程中的病原微生物、建筑材料霉变微生物及人类或动物生存环境中的病原微生物。 [0009] 为了解决上述技术问题，本发明提供了一种杀菌剂，该杀菌剂包含0.65％～10.2％2-甲基-丙酸甲酯、28％～78％2-甲基丙酸、0.6％～2.5％1-乙烯基-1-甲基-2.4-二(1-甲基乙烯基)-环己烷、0.10％～0.4％石竹烯、0.06％～1％2，6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯)二环[3.1.1]庚-2-烯、0.8％～3.5％1，2，3，4，5，6，7，8-八氢化-1，4-二甲基-7-(1-甲基亚乙基)薁、5.8％～11％1，2，3，4，4a，5，6，8a-八氢化-4a， 8-二甲基-2-(1-甲基乙基)萘、0.05％～0.2％的3，3，7，11-四甲基三环[6.3.0.0(2， 4)]十一碳-8-烯、0.3％～2.8％a-水芹烯、4％～45％β-水芹烯、0.1％～0.6％反式 1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、0.08％～0.4％顺式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、0.25％～4％反式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、 0.03％～0.28％顺式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇；其余为溶剂；以上百分比均为体积百分比。 [0010] 作为本发明的杀菌剂的一种改进：该杀菌剂包含9.5％～10.2％2-甲基-丙酸甲酯、60％～61％2-甲基丙酸、2.0％～2.1％1-乙烯基-1-甲基-2.4-二(1-甲基乙烯基)-环己烷、0.36％～0.4％石竹烯、0.9％～1％2，6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯)二环[3.1.1]庚-2-烯、3.3％～3.4％1，2，3，4，5，6，7，8-八氢化-1，4-二甲基-7-(1-甲基亚乙基)薁、6.9％～7.0％1，2，3，4，4a，5，6，8a-八氢化-4a，8-二甲基-2-(1-甲基乙基)萘、0.13％～0.17％的3，3，7，11-四甲基三环[6.3.0.0(2，4)]十一碳-8-烯、0.3％～0.35％a-水芹烯、5.8％～5.95％β-水芹烯、0.2％～0.25％反式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、0.08％～0.12％顺式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、 0.25％～0.32％反式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、0.05％～0.07％顺式 3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇；其余为溶剂。 [0011] 作为本发明的杀菌剂的另一种改进：该杀菌剂包含0.68％～0.72％2-甲基-丙酸甲酯、28％～28.5％2-甲基丙酸、2％～2.5％1-乙烯基-1-甲基-2.4-二(1-甲基乙烯基)-环己烷、0.10％～0.14％石竹烯、0.12％～0.18％2，6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯)二环[3.1.1]庚-2-烯、2％～2.5％1，2，3，4，5，6，7，8-八氢化-1，4-二甲基-7-(1-甲基亚乙基)薁、10.26％～10.76％1，2，3，4，4a，5，6，8a-八氢化-4a，8-二甲基-2-(1-甲基乙基)萘、0.14％～0.18％的3，3，7，11-四甲基三环[6.3.0.0(2，4)]十一碳-8-烯、2.38％～2.8％a-水芹烯、43.5％～45％β-水芹烯、0.5％～0.54％反式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、0.34％～0.38％顺式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、 3.85％～4％反式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、0.22％～0.26％顺式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇；其余为溶剂。 [0012] 作为本发明的杀菌剂的又一种改进：该杀菌剂包含7.8％～8.2％2-甲基-丙酸甲酯、76.5％～78％2-甲基丙酸、0.63％～0.7％1-乙烯基-1-甲基-2.4-二(1-甲基乙烯基)-环己烷、0.10％～0.12％石竹烯、0.06％～0.08％2，6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯)二环[3.1.1]庚-2-烯、0.8％～0.9％1，2，3，4，5，6，7，8-八氢化-1，4-二甲基-7-(1-甲基亚乙基)薁、5.8％～6.2％1，2，3，4，4a，5，6，8a-八氢化-4a，8-二甲基-2-(1-甲基乙基)萘、0.05％～0.07％的3，3，7，11-四甲基三环[6.3.0.0(2，4)]十一碳-8-烯、0.3％～0.4％a-水芹烯、4％～4.5％β-水芹烯、0.1％～0.15％反式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、0.08％～0.12％顺式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、 0.3％～0.35％反式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、0.03％～0.05％顺式 3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇；其余为溶剂。 [0013] 溶剂为常规溶剂，例如为：丙酮、环乙烷、甲醇等。 [0014] 它可抑制或杀死农作物生产过程中的病原微生物、建筑材料霉变微生物及人类或动物生存环境中的病原微生物。 [0015] 植物内生真菌Muscodor sp.菌株，保藏名称为：ZJLQ023，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期：2009年1月8日，保藏号：CGMCC 2862。 [0016] 以下简称内生真菌Muscodorsp.菌株ZJLQ023。 [0017] 内生真菌Muscodor sp.菌株ZJLQ023产生的挥发性混合物质(VOCs)是有效的杀菌剂，对立枯丝核菌、终极腐霉、尖孢镰刀菌、细链格孢(Alternaria alternata)、曲霉(Aspergillus sp)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、蚕豆葡萄孢(Botrytis fabae)、圆形刺盘孢(Colletotrichum orbiculare)、泻根亚隔孢壳(Didymella bryoniae)、褐孢霉(Fulvia fulva)、淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)、指状青霉(Penicillum digitatum)、柿盘多毛孢(Pestalotia diospyri)、稻梨孢菌(Pyricularia oryzae)、齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)、核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)、大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、大肠杆菌(Escherichia coli)和叶杆菌(Phyllobacterium sp.)等多种病原丝状真菌、酵母菌及革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌都具有抑制或杀灭作用。 [0018] 内生真菌Muscodor sp.菌株ZJLQ023具有产生VOCs速度快，持效性长的特点，能降解终极腐霉和稻梨孢菌的细胞壁，并且此VOCs具有独特的使人愉悦的香味。 [0019] 本发明的内生真菌Muscodorsp.菌株ZJLQ023能利用大麦粉、细米糠、小米粉和蔗糖等为碳源，能利用蛋白胨、酵母粉、酵母膏、麸皮、豆饼粉和玉米浆干粉等为氮源，能在谷物或麦类、马铃薯葡萄糖琼脂、燕麦葡萄糖琼脂或麦芽汁葡萄糖琼脂上生长，并产生具有抑菌活性的VOCs。 [0020] 本发明的内生真菌Muscodor sp.菌株ZJLQ023的活性载体制剂具有商业开发用途，ZJLQ023培养物及其产生的VOCs可以用于处理或防止建筑材料和建筑物中有毒霉菌，可以用于水果和食品的保鲜防霉，可以用于防止或杀灭粮食和饲料中的有害霉菌，可以用于农业生产中土壤的处理、花卉或果疏病害的防治。 [0021] 本发明的VOCs能从生长在谷物或麦类、马铃薯葡萄糖琼脂、燕麦葡萄糖琼脂或麦芽汁葡萄糖琼脂上的新颖内生真菌Muscodorsp.菌株ZJLQ023培养物上分离得到，VOCs主要活性组分除了： [0022] (a)2-甲基-丙酸甲酯(Propanoic acid，2-methyl-，methyl ester)； [0023] (b)2-甲基丙酸(Propanoic acid，2-methyl-)； [0024] (c)1-乙烯基-1-甲基-2.4-二(1-甲基乙烯基)-环己烷(Cyclohexane，1-ethenyl-1-methyl-2，4-bis(1-methylethenyl)-，[1S-(1.alpha.，2.beta.， 4.beta.)]-)； [0025] (d)石竹烯(Caryophyllene)； [0026] (e)2，6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯)二环[3.1.1]庚-2-烯(-Bicyclo[3.1.1]hept-2-ene，2，6-dimethyl-6-(4-methyl-3-pentenyl)-)； [0027] (f)1，2，3，4，5，6，7，8-八氢化-1，4-二甲基-7-(1-甲基亚乙基)薁(Azulene，1，2，3，4，5，6，7，8-octahydro-1，4-dimethyl-7-(1-methylethenyl)-，[1S-(1.alpha.， 4.alpha.，7.alpha.)]-)； [0028] (g)1，2，3，4，4a，5，6，8a-八氢化 -4a，8- 二甲基 -2-(1- 甲基乙基 ) 萘(Naphthalene，1，2，3，4，4a，5，6，8a-octahydro-4a，8-dimethyl-2-(1-methylethenyl)-，[2R-(2.alpha.，4a.alpha.，8a.beta.)]-)； [0029] (h)3，3，7，11-四甲基三环[6.3.0.0(2，4)]十一碳-8-烯(Tricyclo[6.3.0.0(2，4)]undec-8-ene，3，3，7，11-tetramethyl-)，重要的是含有： [0030] (i)a-水芹烯(alpha.-Phellandrene)； [0031] (j)β-水芹烯(beta.-Phellandrene)； [0032] (k)反式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇，(2-Cyclohexen-1-ol，1-methyl-4-(1-methylethyl)-，trans-) [0033] (l)顺式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇(2-Cyclohexen-1-ol，1-methyl-4-(1-methylethyl)-，cis-) [0034] (m)反式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇(2-Cyclohexen-1-ol，3-methyl-6-(1-methylethyl)-，trans-) [0035] (n)顺式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇(2-Cyclohexen-1-ol，3-methyl-6-(1-methylethyl)-，cis-)类等活性物质。 [0036] 上述VOCs可作为薰蒸剂用作农作物生产过程中的病原微生物、建筑材料霉变微生物及人类或动物生存环境中的病原微生物的抑制或杀灭，具有从中开发出新型、高效、无毒的天然杀菌剂的巨大潜力。 [0037] 本发明的Muscodor sp.ZJLQ023活体制剂或内生真菌Muscodor sp ZJLQ023培养过程中产生的VOCs及包含一种或多种水芹烯或2-环己烯-1-醇衍生物的合成杀菌剂的用途。它们适用于工业、农业、养殖业和服务行业等。例如它们可以处理或防止建筑材料和建筑物中有毒霉菌；可以用于水果和食品的保鲜防霉；可以用于防止或杀灭粮食和饲料中的有害霉菌；可以用于农业生产中土壤的处理、花卉或果疏病害的防治。附图说明 [0038] 图1是Muscodor sp菌株ZJLQ023挥发性混合物VOCs防治采收后水果腐烂试验图；A、Muscodor sp菌株ZJLQ023培养物；B、空白对照。具体实施方式 [0039] 实施例1、内生真菌Muscodor sp.菌株ZJLQ023产生的VOCs分析 [0040] 内生真菌Muscodor sp.菌株ZJLQ023产生的VOCs采用固相萃取/气相色谱/质谱技术(Solid phase microextraction/Gas chromatograph/Mass spetra，SPME/GC/MS)分析。将Muscodor sp.菌株ZJLQ023菌株接种于PDA培养基上，25℃培养3-5d，切取菌饼转接到PDA或MEA培养基上，用封口膜将一次性塑料培养皿封口，25℃生化培养箱里培养一定时间(3d、5d、10d)，用细针头从培养皿边缘钻一小孔。将固相微萃取不绣钢保护针管插入GC/MS的进样室，推出萃取头，使萃取头暴露GC气化室中，240℃活化20分种，之后将萃取头缩回保护针管，立即插入已准备好的待测培养皿中，推出萃取头，使萃取头暴露在培养皿中，不能碰到菌丝，室温下萃取45分钟后，立即将萃取头缩回保护针管，立即插入GC/MS的进样室，推出萃取头，萃取头暴露GC气化室中，240℃解吸30秒，进行色谱测定。分析操作条件及器材如下： [0041] 仪器、试剂及GC/MS条件：固相微萃取装置(美国Supelco公司)，萃取头涂层为50/30μM DVB/CAR/PDMS；气相色谱仪-质谱仪(Agilent 6890N GC/5975B inert XL MS)，石英毛细管柱HP-5MS(30m×250μm×0.25μm)；数据检索应用NIST05数据库。 [0042] 色谱条件：载气为氦气，柱流量1.0mL·min-1；汽化室温度：240℃，色谱柱初始温-1度30℃，保持3min，以5℃·min 升温速率升至220℃。 [0043] 质谱条件：EI电离源，电离电压70eV，离子源温度230℃，四极杆温度150℃，接口温度280℃，扫描范围：20-450amu，不分流。 [0044] 通过GC/MS分析，得到各成分的总离子流图，根据标准图谱和有关文献确定各组分的化学成分，并按峰面积归一法计算各组分的相对百分含量，测试分析结果见表1： [0045] 表1内生真菌Muscodor sp.菌株ZJLQ023和Muscodor albus培养5d产生的VOCs[0046] [0047] [0048] [0049] [0050] 主要的抗菌活性化合物由： [0051] (a)2-甲基-丙酸甲酯(Propanoic acid，2-methyl-，methyl ester)； [0052] (b)2-甲基丙酸(Propanoic acid，2-methyl-)； [0053] (c)1-乙烯基-1-甲基-2.4-二(1-甲基乙烯基)-环己烷(Cyclohexane，1-ethenyl-1-methyl-2，4-bis(1-methylethenyl)-，[1S-(1.alpha.，2.beta.， 4.beta.)]-)； [0054] (d)石竹烯(Caryophyllene)； [0055] (e)2，6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯)二环[3.1.1]庚-2-烯(-Bicyclo[3.1.1]hept-2-ene，2，6-dimethyl-6-(4-methyl-3-pentenyl)-)； [0056] (f)1，2，3，4，5，6，7，8-八氢化-1，4-二甲基-7-(1-甲基亚乙基)薁(Azulene，1，2，3，4，5，6，7，8-octahydro-1，4-dimethyl-7-(1-methylethenyl)-，[1S-(1.alpha.， 4.alpha.，7.alpha.)]-)； [0057] (g)1，2，3，4，4a，5，6，8a-八氢化 -4a，8- 二甲基 -2-(1- 甲基乙基 ) 萘(Naphthalene，1，2，3，4，4a，5，6，8a-octahydro-4a，8-dimethyl-2-(1-methylethenyl)-，[2R-(2.alpha.，4a.alpha.，8a.beta.)]-)； [0058] (h)3，3，7，11-四甲基三环[6.3.0.0(2，4)]十一碳-8-烯(Tricyclo[6.3.0.0(2，4)]undec-8-ene，3，3，7，11-tetramethyl-)，重要的是含有： [0059] (i)a-水芹烯(alpha.-Phellandrene)； [0060] (j)β-水芹烯(beta.-Phellandrene)； [0061] (k)反式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇，(2-Cyclohexen-1-ol，1-methyl-4-(1-methylethyl)-，trans-) [0062] (l)顺式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇(2-Cyclohexen-1-ol，1-methyl-4-(1-methylethyl)-，cis-) [0063] (m)反式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇(2-Cyclohexen-1-ol，3-methyl-6-(1-methylethyl)-，trans-) [0064] (n)顺式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇(2-Cyclohexen-1-ol，3-methyl-6-(1-methylethyl)-，cis-)类等活性物质。 [0065] 实施例2、Muscodor sp.菌株ZJ LQ023产生的VOCs防治采收后水果腐烂试验[0066] 为了测试Muscodor sp.菌株ZJLQ023产生的VOCs对采后水果腐烂的防治作用，实施例如下：将用生长在PDA培养基上或制备好的活性载体制剂Muscodor sp.菌株ZJLQ023来控制采收后水果的腐烂问题。具体而言，挑取采收后无伤口和虫害的水果(新疆香梨或水蜜桃)，置于水果保存盒中(可密封)，手术刀轻轻划一伤口，在伤口上接入褐腐病菌(Monilinia fructicola)，并在伤口敷上湿润的滤纸片用于保湿，将生长在PDA培养基上或制备好的活性载体制剂Muscodor sp.菌株ZJLQ023放置于水果保存盒内，用于抑制病原菌的生长，加盖密封，放入25℃的人工气候箱，保持湿度在85％。每处理3重复，以不加Muscodor sp.菌株ZJLQ023培养物为对空白对照，3-5d后取出水果，调查发病情况并拍照记录。结果表明Muscodor sp.菌株ZJLQ023培养物产生的VOCs可以较好的控制采收后水果腐烂问题(图1)。 [0067] 实施例3、Muscodor sp.菌株ZJLQ023产生的VOCs对种苗病害的防治作用[0068] 以萝卜幼苗生长法测定Muscodor sp.菌株ZJLQ023产生的VOCs对种苗病害的防治作用。将磨碎后的咥石装入直径50mm、高度400mm的试管中，装入咥石的高度约为10cm，121℃湿热灭菌20min。在每个试管中接入病原菌终极腐霉菌饼(直径8mm)5-6块，用咥石覆盖，其上撒入10粒种子(短叶十三号萝卜，广东省良种引进服务公司提供)，再用咥石覆盖。测试组试管里挂上Muscodor sp.菌株ZJLQ023活性载体制剂(外面用纱布包装)，以只接病原菌为空白对照，试管用透气软塞封口。移入人工气候箱(25℃，光照∶黑暗＝ 12h∶12h)中培养，定期统计发芽率及观察种苗的发病情况。 [0069] 表2Muscodor sp.菌株ZJLQ023产生的VOCs对种苗病害的防治作用 [0070] [0071] Muscodor Sp菌株ZJLQ023活性载体制剂产生的VOCs能有效地抑制终极腐霉对萝卜种子萌发、幼苗生长的影响。 [0072] 实施例4、可分离自Muscodor sp.菌株ZJLQ023培养物产生的VOCs的人工合成混合物杀菌剂 [0073] 本申请人发现，(1)Muscodor sp.菌株ZJLQ023培养物产生VOCs的基本所有成分；(2)Muscodorsp.菌株ZJLQ023培养物产生VOCs中部分成分的组合，或(3)Muscodorsp菌株ZJLQ023培养物的产生VOCs中一种成分的合成VOCs具有Muscodor sp.菌株ZJLQ023的杀菌特性。 [0074] 为了测试各类化合物相对的生物活性和各类化合物在全部混合物中最适浓度及比例，全部混合物为标准培养平板中的培养物上每50mL空域的100μL的检测混合物。例如，β-水芹烯占鉴定挥发物混合物的5.88％，以5.88μL/50mL(0.1176μL/mL)空域测试对β-水芹烯进行测试，其它化合物也是以相同的标准过程。 [0075] 以下百分比均为体积百分比。 [0076] 以10.18％2-甲基-丙酸甲酯、60.42％2-甲基丙酸、2.04％1-乙烯基-1-甲基-2.4-二(1-甲基乙烯基)-环己烷、0.38％石竹烯、0.95％2，6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯)二环[3.1.1]庚-2-烯，2，6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯基)、3.35％1，2，3，4，5，6，7，8-八氢化-1，4-二甲基-7-(1-甲基亚乙基)薁、6.93％1，2，3，4，4a，5，6，8a-八氢化-4a，8-二甲基-2-(1-甲基乙基)萘、0.15％的3，3，7，11-四甲基三环[6.3.0.0(2， 4)]十一碳-8-烯、15.6％丙酮配制成有机混合物(称为组合物1)。 [0077] 设低、中、高三个水平的组合物1与相同体积的a-水芹烯、β-水芹烯、反式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、顺式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、反式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、顺式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇进行混合，测试人工合成的混合性挥性化合物对指示病原菌的抑制性，以终极腐霉为病原指示菌，测试结果见表3。 [0078] 表3三个不同水平的组合物1与其它化合物配成的人工合成挥发性混合物对终极腐霉的抑制率 [0079] [0080] 从测试结果可以看出，高、中、低三个水平的组合物1与相同体积的a-水芹烯、β-水芹烯、反式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、顺式1-甲基-4-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、反式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇、顺式3-甲基-6-(1-甲基乙基)-2-环己烯-1-醇进行混合的挥发性气体对终极腐霉的抑制率不同，低水平时(0.851μL/mL)时的抑制率最低，中水平(1.702μL/mL)和高水平(3.404μL/mL)抑制率都达到100％。 [0081] 实施例5、人工合成的杀菌剂，其包括如表4所述体积百分比的成分，余量为丙酮。 [0082] 表4、杀菌剂的5个实施例 [0083] [0084] 采用二分隔平皿培养法测试以N1～N5和等同于表1的Muscodor albus培养5d产生的VOCs(作为对比例)抑制植物病原菌的活性实验。病原指示菌：灰葡萄孢、立枯丝核菌、细链格孢、齐整小菌核、终极腐霉、尖孢镰刀菌黄瓜专化型、圆形刺盘孢、大丽轮枝菌、核盘菌、柿盘多毛孢、稻梨孢菌、指状青霉、蚕豆葡萄孢、褐孢霉、泻根亚隔孢壳、曲霉、淡紫拟青霉。将病原指示菌接在PDA培养基上活化，切取菌丝块(直径5mm)(曲霉用孢子悬浮液接种)接种于PDA培养基(90mm有隔培养皿)一侧，将以按照N1～N5和等同于表1的Muscodoralbus培养5d产生的VOCs(作为对比例)中各种化合物比例的6种混合物分别加入培养皿另一侧(每种混合物用量均分别为100μL)，用parafilm膜封口，25℃生化培养箱培养。待空白对照皿中病原菌菌落长至快满皿时，测量人工合成的挥发性混合物质VOCs对病原指示菌的生长抑制，计算抑制率，结果如表5所示。 [0085] 表5 [0086]