[0001] 本发明涉及一种包含至少一种有益微生物和至少一种瓜尔豆胶的组合物。本发明更尤其涉及至少一种瓜尔豆胶在包含至少一种有益微生物的组合物中作为耐雨剂的用途。

[0002] 近年来，对环境和人类健康的关注促进了对推广合成农药的替代品的兴趣。

[0003] 生物防治被认为是可持续农业最有前途的替代方法之一，但由于若干原因(包括在不利条件下缺乏生物学效力)，其总体采用率仍低于常规农药。

[0004] 农药处理的主要问题之一是农药通常易于从处理过的农业目标(包括植物部分和土壤)中浸出。当施用在植物部分(如叶)上时，它们可能例如遭受由快速浇水、雨或其他水暴露引起的径流或损失。作为另一个实例，当植物和/或杂草发芽时，出苗前试剂(即，在植物或杂草发芽之前施用至土壤的那些试剂)需要在施用它们的地方停留一段时间。在发芽期期间，由水暴露等产生的径流引发的出苗前试剂消散显然是不令人希望的。

[0005] 当使用有益微生物时，这些问题尤其重要，这些有益微生物通常需要在延长的时间段内发挥作用来获得其希望的效果。这是因为与常规合成农用化学产品、尤其是常规合成农药相比，有益微生物通常作用时间更长，因为其效果是基于可存活且可繁殖的微生物。

[0006] 通常，微生物必须在施用后的一段时间内保持活性，并且理想地在害虫可能侵袭作物的整个时期、或者在整个作物周期的土壤中保持活性。

[0007] 然而，由于如风、雨或淋洗等不利条件的作用，它们经常从目标位置物理地失去。

[0008] 这就是仍然需要以下组合物的原因，这些组合物包含至少一种有益微生物并且展现出所述有益微生物在农业目标上的改进的保留特性、尤其是改进的耐雨性。

[0009] 还仍然需要新的耐雨剂，其不仅改进有益微生物在农业目标上的保留特性、尤其是耐雨性，而且还维持或甚至改进所述有益微生物的生物学效力。

[0010] 例如，在生物杀虫剂的情况下，仍然需要新的耐雨剂，这些耐雨剂不仅改进生物杀虫剂在农业目标上的保留特性、尤其是耐雨性，而且还维持或甚至改进所述生物杀虫剂对抗目标病原体的生物杀虫剂效力。

[0011] 还仍然需要新的耐雨剂，其具有有利的毒理学和/或生态学特性以及尤其在可生物降解性、低毒性和/或低危害水平方面的希望的特征。

[0012] 出乎意料地，已经发现有益微生物在农业目标上的改进的保留特性、并且尤其是改进的耐雨性可以通过使用一种如下文所述的瓜尔豆胶来实现。

[0013] 在一个实施例中，本发明涉及一种用于改进至少一种有益微生物在农业目标上的耐雨性的方法，该方法包括将所述有益微生物与至少一种瓜尔豆胶组合在所述农业目标上的步骤。

[0014] 在一个实施例中，本发明还涉及一种用于改进至少一种有益微生物在农业目标上的耐雨性的方法，其中所述方法包括将至少所述有益微生物和至少一种瓜尔豆胶一起施用至所述农业目标的步骤。

[0015] 根据一个实施例，本发明尤其涉及一种用于改进喷雾在农业目标上的至少一种含有有益微生物的溶液的耐雨性的方法，其中所述方法至少包括以下步骤：

[0016] ‑提供本发明的瓜尔豆胶，

[0017] ‑将所述瓜尔豆胶与至少一种有益微生物组合以获得该溶液，以及

[0018] ‑将所得溶液喷雾在该农业目标上。

[0019] 可替代地，本发明还涉及一种用于改进喷雾在农业目标上的至少一种含有有益微生物的溶液的耐雨性的方法，其中所述方法至少包括以下步骤：

[0020] ‑将含有本发明的瓜尔豆胶的溶液喷雾在该农业目标上，以及同时地或依次地，[0021] ‑将含有一种有益微生物的溶液喷雾在该农业目标上。

[0022] 在一个实施例中，本发明还涉及一种包含至少一种瓜尔豆胶和至少一种有益微生物的农用组合物，其中所述瓜尔豆胶以足够的量存在以改进所述有益微生物在农业目标上的耐雨性。

[0023] 在一个实施例中，本发明还涉及一种通过将至少一种有益微生物、尤其是一种生物杀虫剂和至少一种如上所述的瓜尔豆胶一起施用至需要其的农业目标来治疗植物侵染的方法。此类治疗方法包括预防侵染。

[0024] 在一个实施例中，本发明还涉及一种至少包含如下文所述的瓜尔豆胶的农用配制品，其中所述配制品可以在农业目标上形成涂层。

[0025] 根据一个实施例，所述涂层可以是耐水的、耐摩擦的、和/或耐雨的。

[0026] 根据一个实施例，在经受不利条件时，所述涂层可以有利地保留农业目标上的有益微生物，其中不利条件可能是如降雨或其他水暴露、摩擦、风、和二次农业处理等条件。

[0027] 出乎意料地，还已经发现当使用一种本发明的瓜尔豆胶作为耐雨剂时，可以增加与所述瓜尔豆胶组合的有益微生物的生物学效力(通常被称为“生物效力”)，尤其是在暴露于水之后。

[0028] 在一个实施例中，本发明还涉及一种用于增加有益微生物的生物效力的方法，该方法包括以下步骤：(i)将所述有益微生物与至少有效量的一种瓜尔豆胶组合，以及随后(ii)使所述有益微生物经受暴露于水。

[0029] 在另一个实施例中，本发明还涉及一种用于增加有益微生物的生物效力的方法，该方法包括以下步骤：(i)将所述有益微生物与至少有效量的一种瓜尔豆胶一起施用，以及随后(ii)使所述有益微生物经受暴露于水。

[0030] 根据本发明，表述“增加有益微生物的生物效力”是指所述有益微生物的微生物活性得到增加。

[0031] 有利地，尤其当有益微生物的生物效力在本发明的耐雨剂存在下增加时，可以在处理配制品中使用减少总量的有益微生物和/或可以在农业目标上使用降低的施用率。

[0032] 有利地，本发明的瓜尔豆胶还可以在含有其的配制品中赋予改进的保湿性。

[0033] 当本发明的一些有益微生物的活性可能具有某些水分需求时，这是特别有利的。例如，用于对抗植物病原体的拮抗细菌需要植物表面湿润，以便它们自己立足。其他实例包括可能需要高湿度来发芽的真菌孢子。

[0034] 有利地，本发明的瓜尔豆胶通常被认为是安全的，这对于尤其是在具有可食用皮的水果或蔬菜上使用是特别有利的。

[0035] 在一个实施例中，本发明的瓜尔豆胶可以是有机生产的。

[0036] 在一个实施例中，本发明的瓜尔豆胶可能不符合由欧洲化学品管理局(ECHA)制定的关于限制使用氧化塑料(oxo‑plastic)和有意添加的微塑料颗粒的规定。

[0037] 本发明的各种其他目的和优势将从以下附图的简要说明和本发明的详细说明中变得显而易见。

[0038] 图1是示出在没有辅助剂下的对照组合物(左侧)、本发明的含有辅助剂1的组合物(中间)和含有辅助剂2的对比组合物(右侧)上，辅助剂对在没有和有不同雨冲刷量(20‑mm和40‑mm)下的 效力的影响的图。

[0039] 瓜尔豆胶

[0040] 在本申请中，瓜尔豆指代植物从关华豆(Cyanopsis tetragonoloba)。瓜尔豆(Cyamopsis tetragonoloba)(瓜尔豆(guar))胶定义如下。

[0041] 在本申请中，“瓜尔豆种子”指代衍生自瓜尔豆的种子。瓜尔豆种子包括外壳(其或多或少是纤维的)、胚芽和两个构成了瓜尔豆的胚乳的“瓜尔豆片”或“胚乳半体”。片(或胚乳)富含半乳甘露聚糖。瓜尔豆种子通常由按重量计35％至40％的胚乳、按重量计42％至47％的胚芽以及按重量计14％至17％的外壳构成。

[0042] 在本申请中，“瓜尔豆粉”或“瓜尔豆粉末”指代衍生自瓜尔豆胚乳的粉末。

[0043] 在本申请中，“天然瓜尔豆”指代衍生自瓜尔豆胚乳的半乳甘露聚糖类型的大分子链，尚未通过接枝化学基团而化学改性。天然瓜尔豆包含大分子，这些大分子含有连接在β(1‑4)位的D‑吡喃甘露糖单元的主链，其被在β(1‑6)位的D‑吡喃半乳糖单元取代。天然瓜尔豆的甘露糖/半乳糖比率约为2。

[0044] 在本申请中，“瓜尔豆(瓜尔豆)胶”(也称为“瓜尔豆胶”)指代基本上由天然瓜尔豆(呈瓜尔豆片、或瓜尔豆粉或粉末的形式)组成的产品。

[0045] 如本文所用，瓜尔豆胶的“平均分子量”意指所述瓜尔豆胶的重均分子量。

[0046] 根据本发明实施例中的任一个，本发明的瓜尔豆胶可以具有在2,000道尔顿与5,000,000道尔顿之间的平均分子量(Mw)。在一个实施例中，本发明的瓜尔豆胶可以具有在
100,000道尔顿与4,500,000道尔顿之间，例如在500,000道尔顿与4,000,000道尔顿之间，例如在1,000,000道尔顿与3,500,000道尔顿之间，例如在2,000,000与3,500,000道尔顿之间的平均分子量(Mw)。

[0047] 在另一个实施例中，本发明的瓜尔豆胶可以具有在约100,000道尔顿与2,000,000道尔顿之间，例如在约300,000道尔顿与1,800,000道尔顿之间，例如在约350,000道尔顿与1,700,000道尔顿之间，例如在约400,000与1,500,000道尔顿之间的平均分子量(Mw)。

[0048] 可以通过GPC(凝胶渗透色谱法)测量瓜尔豆胶的平均分子量。例如，可以使用Shodex OH Pak柱和安捷伦公司(Agilent)折光率检测器进行测量。

[0049] 本发明的瓜尔豆胶可以是交联的或不是交联的。

[0050] 根据本发明实施例中的任一个，本发明的瓜尔豆胶不是交联的。

[0051] 根据本发明实施例中的任一个，本发明的瓜尔豆胶可以是交联的。例如，可以用交联剂处理该瓜尔豆胶。例如，硼砂(四硼酸钠)通常在水‑瓜尔豆片工艺的反应步骤中用作加工助剂以部分交联瓜尔豆片的表面并且由此在加工期间降低被瓜尔豆片所吸收的水的量。其他交联剂，例如像乙二醛，或者金属像钛、锆或铝也被广泛使用。

[0052] 含有瓜尔豆(瓜尔豆)胶的组合物可以是固体或液体组合物。

[0053] 根据本发明实施例中的任一个，含有瓜尔豆(瓜尔豆)胶的组合物可以是固体组合物。

[0054] 在其中该组合物是固体的情况下，该组合物可以处于粉末、颗粒、团聚体、薄片、粒料、球粒、片剂、砖形物、膏剂、块状物(如模制的块状物)、单位剂量物的形式，或本领域技术人员已知的另一种固体形式。特别地，该固体组合物可以处于粉末或粒料的形式。

[0055] 根据本发明实施例中的任一个，含有瓜尔豆(瓜尔豆)胶的组合物可以是液体组合物。

[0056] 在该组合物是液体的情况下，该液体组合物可以是悬浮液、分散体、浆料、液体载体(选自水、有机溶剂油或其混合物)中的溶液。可以通过使用常规方法通过将如上所述的瓜尔豆(瓜尔豆)胶与液体载体、任选地与其他组分混合来制备液体组合物。

[0057] 在一个实施例中，该液体组合物呈水溶液的形式。

[0058] 更特别地，本发明的液体组合物可以包含呈悬浮在水性液体介质中的不完全水合的水溶性聚合物的形式的瓜尔豆胶，其中所述组合物优选地进一步含有有效地赋予组合物剪切稀化特性和屈服强度的量的悬浮剂、和任选地水合抑制剂。

[0059] 在另一个实施例中，该液体组合物呈在不是瓜尔豆胶的溶剂的化合物中的分散体的形式，特别地它呈油分散体的形式。

[0060] 更特别地，不是瓜尔豆胶的溶剂的化合物可以选自动物或植物来源的油、或脂肪酸的酯、或烃化油(hydrocarbonated oil)。可以提及的动物来源的油除其他以外还包括抹香鲸、海豚、鲸鱼、海豹、沙丁鱼、鲱鱼、角鲨鱼和鳕鱼肝油。作为植物来源的油的实例，除其他以外，还可以提及以下项：油菜籽、向日葵、花生仁、橄榄、胡桃、玉米、黄豆、亚麻籽、大麻、葡萄籽、椰子核、棕榈、棉籽、巴西棕榈、荷荷巴、芝麻、蓖麻和芫荽油。还可以利用饱和或不饱和的脂肪酸酯，对于酸部分，其包含6至40个碳原子，任选地带有一个或多个羟基化基团。可以特别提及的脂肪酸的实例包括油酸、肉豆蔻油酸、棕榈油酸、伞形花子油酸
(petroselenic)、芥酸、亚油酸、亚麻酸和蓖麻油酸。这些酸的甲基、乙基和丙基酯是特别适合的。更特别地，可以提及油的醇解(或更确切地说甲醇分解)的产物。还可以利用脂肪族烃化石蜡型油或芳香族油(石油馏分等)。

[0061] 例如，本发明的液体组合物可以包含脂肪酸(C1‑C3)烷基酯组分，其包括以下中的一种或多种：己酸甲酯、己酸乙酯或己酸丙酯；庚酸甲酯、庚酸乙酯或庚酸丙酯；辛酸甲酯、辛酸乙酯或辛酸丙酯；壬酸甲酯、壬酸乙酯或壬酸丙酯；癸酸甲酯、癸酸乙酯或癸酸丙酯；十一烷酸甲酯、十一烷酸乙酯或十一烷酸丙酯；十二烷酸甲酯、十二烷酸乙酯或十二烷酸丙酯；十三烷酸甲酯、十三烷酸乙酯或十三烷酸丙酯；十四烷酸甲酯、十四烷酸乙酯或十四烷酸丙酯；十五烷酸甲酯、十五烷酸乙酯或十五烷酸丙酯；十六烷酸甲酯、十六烷酸乙酯或十六烷酸丙酯；十七烷酸甲酯、十七烷酸乙酯或十七烷酸丙酯；十八烷酸甲酯、十八烷酸乙酯或十八烷酸丙酯；十九烷酸甲酯、十九烷酸乙酯或十九烷酸丙酯；二十烷酸甲酯、二十烷酸乙酯或二十烷酸丙酯；二十二烷酸甲酯、二十二烷酸乙酯或二十二烷酸丙酯；二十三烷酸甲酯、二十三烷酸乙酯或二十三烷酸丙酯；二十四烷酸甲酯、二十四烷酸乙酯或二十四烷酸丙酯；顺式‑9‑十六碳烯酸甲酯、顺式‑9‑十六碳烯酸乙酯或顺式‑9‑十六碳烯酸丙酯；全顺式‑7,10,13‑十六碳三烯酸甲酯、全顺式‑7,10,13‑十六碳三烯酸乙酯或全顺式‑7,10,13‑十六碳三烯酸丙酯；顺式‑6‑十八碳烯酸甲酯、顺式‑6‑十八碳烯酸乙酯或顺式‑6‑十八碳烯酸丙酯；反式‑6‑十八碳烯酸甲酯、反式‑6‑十八碳烯酸乙酯或反式‑6‑十八碳烯酸丙酯；顺式‑7‑十八碳烯酸甲酯、顺式‑7‑十八碳烯酸乙酯或顺式‑7‑十八碳烯酸丙酯；顺式‑9‑十八碳烯酸甲酯、顺式‑9‑十八碳烯酸乙酯或顺式‑9‑十八碳烯酸丙酯；反式‑9‑十八碳烯酸甲酯、反式‑
9‑十八碳烯酸乙酯或反式‑9‑十八碳烯酸丙酯；顺式‑11‑十八碳烯酸甲酯、顺式‑11‑十八碳烯酸乙酯或顺式‑11‑十八碳烯酸丙酯；反式‑‑十八碳烯酸甲酯、反式‑‑十八碳烯酸乙酯或反式‑‑十八碳烯酸丙酯；顺式‑12‑十八碳烯酸甲酯、顺式‑12‑十八碳烯酸乙酯或顺式‑12‑十八碳烯酸丙酯；顺式,顺式‑9,12‑十八碳二烯酸甲酯、顺式,顺式‑9,12‑十八碳二烯酸乙酯或顺式,顺式‑9,12‑十八碳二烯酸丙酯；反式‑9,12‑十八碳二烯酸甲酯、反式‑9,12‑十八碳二烯酸乙酯或反式‑9,12‑十八碳二烯酸丙酯；全顺式‑6,9,12‑十八碳三烯酸甲酯、全顺式‑6,9,12‑十八碳三烯酸乙酯或全顺式‑6,9,12‑十八碳三烯酸丙酯；全顺式‑9,12,15‑十八碳三烯酸甲酯、全顺式‑9,12,15‑十八碳三烯酸乙酯或全顺式‑9,12,15‑十八碳三烯酸丙酯；全顺式‑6,9,12,15,‑十八碳四烯酸甲酯、全顺式‑6,9,12,15,‑十八碳四烯酸乙酯或全顺式‑6,9,12,15,‑十八碳四烯酸丙酯；顺式‑11‑二十碳烯酸甲酯、顺式‑11‑二十碳烯酸乙酯或顺式‑11‑二十碳烯酸丙酯；顺式,顺式‑11,14‑二十碳二烯酸甲酯、顺式,顺式‑11,14‑二十碳二烯酸乙酯或顺式,顺式‑11,14‑二十碳二烯酸丙酯；全顺式‑11,14,17‑二十碳三烯酸甲酯、全顺式‑11,14,17‑二十碳三烯酸乙酯或全顺式‑11,14,17‑二十碳三烯酸丙酯；全顺式‑5,8,11,14‑二十碳四烯酸甲酯、全顺式‑5,8,11,14‑二十碳四烯酸乙酯或全顺式‑5,
8,11,14‑二十碳四烯酸丙酯；全顺式‑8,11,14,17‑二十碳四烯酸甲酯、全顺式‑8,11,14,
17‑二十碳四烯酸乙酯或全顺式‑8,11,14,17‑二十碳四烯酸丙酯；全顺式‑5,8,11,14,17‑二十碳五烯酸甲酯、全顺式‑5,8,11,14,17‑二十碳五烯酸乙酯或全顺式‑5,8,11,14,17‑二十碳五烯酸丙酯；顺式‑13‑二十二碳烯酸甲酯、顺式‑13‑二十二碳烯酸乙酯或顺式‑13‑二十二碳烯酸丙酯；顺式,顺式‑13,16‑二十二碳二烯酸甲酯、顺式,顺式‑13,16‑二十二碳二烯酸乙酯或顺式,顺式‑13,16‑二十二碳二烯酸丙酯；全顺式‑6,9,12‑十八碳三烯酸甲酯、全顺式‑6,9,12‑十八碳三烯酸乙酯或全顺式‑6,9,12‑十八碳三烯酸丙酯；全顺式‑7,10,
13,16‑二十二碳四烯酸甲酯、全顺式‑7,10,13,16‑二十二碳四烯酸乙酯或全顺式‑7,10,
13,16‑二十二碳四烯酸丙酯；全顺式‑7,10,13,16,19‑二十二碳五烯酸甲酯、全顺式‑7,10,
13,16,19‑二十二碳五烯酸乙酯或全顺式‑7,10,13,16,19‑二十二碳五烯酸丙酯；全顺式‑
4,7,10,13,16,19‑二十二碳六烯酸甲酯、全顺式‑4,7,10,13,16,19‑二十二碳六烯酸乙酯或全顺式‑4,7,10,13,16,19‑二十二碳六烯酸丙酯；顺式‑15‑二十四碳烯酸甲酯、顺式‑15‑二十四碳烯酸乙酯或顺式‑15‑二十四碳烯酸丙酯；全顺式‑9,12,15,18,21‑二十四碳五烯酸甲酯、全顺式‑9,12,15,18,21‑二十四碳五烯酸乙酯或全顺式‑9,12,15,18,21‑二十四碳五烯酸丙酯；全顺式‑6,9,12,15,18,21‑二十四碳六烯酸甲酯、全顺式‑6,9,12,15,18,21‑二十四碳六烯酸乙酯或全顺式‑6,9,12,15,18,21‑二十四碳六烯酸丙酯；包括任何此类脂肪酸(C1‑C3)烷基酯中的两种或多种的混合物。更典型地，本发明组合物的脂肪酸(C1‑C3)烷基酯组分包括此类脂肪酸(C1‑C3)烷基酯中的两种或更多种的混合物，该混合物呈一种或多种植物油(更典型地为甲基化植物油，甚至更典型地为甲基化大豆油或甲基化油菜籽油)的一种或多种(C1‑C3)烷基酯的形式。

[0062] 有益微生物

[0063] 如先前所提及，本发明涉及瓜尔豆胶作为耐雨剂用于有益微生物的用途。

[0064] 如本文所用，术语“有益微生物”意指无论是处于营养态、休眠态(例如，孢子)还是在全肉汤培养物、来源于微生物的任何物质(例如，代谢物)、或对植物有益的任何发酵产物(例如，上清液、滤液、提取物等)中的任何微生物。

[0065] 根据本发明，术语“有益微生物”旨在包括(i)生物杀虫剂，(ii)改进植物营养的微生物以及(iii)诱导植物防御反应的微生物。

[0066] 在一个实施例中，有益微生物尤其可以是生物杀虫剂。

[0067] 如本文所用，术语“杀虫的”意指对至少一种目标害虫(例如，线虫、昆虫、螨虫、真菌害虫、细菌害虫、病毒害虫等)具有致病性的任何试剂或试剂的组合。

[0068] 如本文所用，术语“生物杀虫剂”(其相当于“微生物杀虫剂”)意指无论是处于营养态、休眠态(例如，孢子)还是在全肉汤培养物、来源于微生物的任何物质(例如，代谢物)、或任何发酵产物(例如，上清液、滤液、提取物等)中的任何微生物，其对害虫具有致病性(例如，能够侵袭、侵染、杀灭、致残、导致病害、与害虫竞争和/或对害虫造成伤害)，并且因此能够用于通过不利地影响目标害虫的生存力或生长来防治害虫。“微生物杀虫剂”的非限制性实例包括微生物杀线虫剂、微生物杀昆虫剂、微生物杀真菌剂、微生物杀细菌剂、以及微生物杀病毒剂。

[0069] 如本文所用，“来源于”意指从特定来源直接分离或获得，或者可替代地具有从特定来源分离或获得的物质或生物体的识别特征。假如“来源”是生物体，则“来源于”意指它可以从生物体本身或用于培养或生长所述生物体的培养基中分离或获得。

[0070] 如本文所用，“全肉汤培养物”是指含有细胞和培养基二者的液体培养物。如果细菌在板上生长，则可以在水或其他液体全培养物中收获细胞。

[0071] 如本文所用，术语“上清液”是指当细胞在肉汤中生长或从琼脂板在另一种液体中收获并通过离心、过滤、沉降或本领域熟知的其他手段除去时剩余的液体。

[0072] 如本文所定义，“滤液”是指来自穿过膜的全肉汤培养物的液体。

[0073] 如本文所定义，“提取物”是指通过溶剂(水、洗涤剂、缓冲液)从细胞中移出并通过离心、过滤或其他方法与细胞分离的液体物质。

[0074] 如本文所用，“代谢物”是指微生物发酵的化合物、物质或副产物，或从有益微生物(例如具有杀虫活性并且特别是杀昆虫活性的微生物)获得的上清液、滤液或提取物。如本文所定义，“分离的化合物”基本上不含其他化合物或物质，例如如通过包括但不限于色谱方法、电泳方法的分析方法所确定，是至少约20％纯的、优选至少约40％纯的、更优选约60％纯的、甚至更优选约80％纯的、最优选约90％纯的、并且甚至最优选约95％纯的。

[0075] 如本文所用，术语“孢子”、“微生物孢子”等具有本领域技术人员熟知和理解的其普通含义(即处于其休眠、受保护状态的微生物)。

[0076] 如本文所用，术语“一种或多种除草剂”旨在是指能够杀灭杂草和/或抑制杂草生长(这种抑制在某些条件下可逆)的任何试剂或试剂的组合。

[0077] 如本文所用，术语“一种或多种杀真菌剂”旨在是指能够杀灭真菌和/或抑制真菌生长的任何试剂或试剂的组合。

[0078] 如本文所用，术语“杀线虫剂”或“杀线虫的”旨在是指能够杀灭一种或多种线虫和/或抑制一种或多种线虫生长的任何试剂或试剂的组合。

[0079] 如本文所用，术语“杀昆虫剂”或“杀昆虫的”旨在是指能够杀灭一种或多种昆虫和/或抑制一种或多种昆虫生长的任何试剂或试剂的组合。如本文所用，术语“杀螨剂”或“杀螨的”旨在是指能够杀灭一种或多种螨虫和/或抑制一种或多种螨虫生长的任何试剂或试剂的组合。

[0080] 根据本发明实施例中的任一个，本发明的有益微生物可以是选自真菌孢子或细菌孢子的生物杀虫剂。

[0081] 杀昆虫或杀线虫或杀真菌的真菌孢子或分生孢子的实例包括但不限于以下纲：担子菌纲、壶菌纲、半知菌纲、丝壶菌纲、卵菌纲、根肿菌纲、Sordahomycetes、Thchomycetes和接合菌纲，具体地是以下真菌：多孢节丛孢菌(Arthrobotrys superba)、不规则节丛孢菌(Arthrobotrys irregular)、球孢白僵菌、新蚜虫疫霉(Erynia neoaphidis)、镰刀菌属物种、洛斯里被毛孢(Hirsutella rhossiliensis)、汤普生被毛孢(Hirsutella thompsonii)、大链壶菌(Lagenidium giganteum)、金龟子绿僵菌(Metarhiziurn anisopliae)、漆斑菌(Myrothecium)、弗氏新接霉(Neozygites fresenii)(Nowakowski)、莱氏野村菌、淡紫拟青霉、绿针假单胞菌(Pseudomonas chloroaphis)、假单孢菌属物种、酵母絮绒假酶菌(Pseudozyma Flocculosa)、哈茨木霉、以及蜡蚧轮枝霉(Vericillium lecanii.)、蜡蚧轮枝菌(Verticillium lecanii)，加上“Nematology Advances and Perspectives[线虫学进展与前景],第2卷(2004)”一书中描述的那些内寄生真菌，该书通过援引以其相关部分并入本文。还包括了如美国专利号6,168,947(通过援引并入)中描述的真菌属“Esteya vermicola”，以及如美国专利号5,019,389(通过援引并入本文)中描述的“阿肯色州真菌18”。

[0082] 细菌孢子的实例包括但不限于土壤芽胞杆菌、Bacillus aizawai、白色乳杆菌(Bacillus albolactis)、解淀粉芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌、环状芽胞杆菌、凝结芽孢杆菌、Bacillus endoparasiticus、Bacillus endorhythmos、坚强芽抱杆菌、Bacillus kurstaki、Bacillus lacticola、乳病杆菌(Bacillus lactimorbus)、乳杆菌(Bacillus lactis)、侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterosporus)、缓病芽孢杆菌(Bacillus lentimorbus)、地衣芽孢杆菌、浸麻芽孢杆菌(Bacillus macerans)、Bacillus megatehum、水母芽孢杆菌(Bacillus medusa)、Bacillus metiens、纳豆芽孢杆菌、黑色芽孢杆菌(Bacillus nigricans)、金龟子芽孢杆菌(Bacillus popillae)、Bacillus pumiliss、短小芽胞杆菌、暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)、Bacillus sphaehcus、芽孢杆菌属物种、枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、Bacillus uniflagellatus，加上“Todar's Online Textbook of Bacteriology[托达尔的在线细菌学教科书],(2009)”(其通过援引以其相关部分并入本文)中的芽孢杆菌属的类别中所列出的那些。还包括了发光杆菌(Photorhabdus luminescens)、嗜线虫致病杆菌(Xenorhabdus nematophilus)、成团泛菌(pantoea agglomerans)、以及“Nematology Advances and Perspectives[线虫学进展与前景],第2卷(2004)”中所列出的那些杀线虫细菌拮抗剂。

[0083] 有利地，根据本发明的瓜尔豆胶的使用还适合于改进常规农药，例如像硫磺的耐雨性。

[0084] 根据本发明实施例中的任一个，本发明涉及瓜尔豆胶作为常规农药、特别是硫磺的耐雨剂的用途。

[0085] 农业目标

[0086] 如先前所提及，本文披露的农业配制品和方法可用于在农业目标上保留有益微生物。

[0087] 本发明提供了瓜尔豆胶用于改进有益微生物在农业目标上的耐雨性的用途。

[0088] 根据本发明，术语“农业目标”旨在包括植物部分和土壤。

[0089] 在一个示例性实施例中，农业目标是植物部分。

[0090] 如本文所用，术语“植物部分”应理解为意指植物在地上和地下的所有部分和器官，如芽、叶、花和根，可以提及的实例是叶、针叶、秆、茎、花、子实体、果实、种子、根、块茎和根茎。植物部分还包括收获材料和营养和生殖繁殖材料(例如，插条、块茎、根茎、分枝和种子等)。

[0091] 在一个特定实施例中，农业目标是植物种子。

[0092] 在另一个特定实施例中，农业目标是植物枝叶。

[0093] 如本文所用，术语“枝叶”旨在意指植物在地上的所有部分和器官。非限制性实例包括叶、针叶、秆、茎、花、子实体、果实等。如本文所用，术语“叶面施用”、“叶上施用”及其变体旨在包括将配制品施用至植物的枝叶或地上部分(例如植物的叶)。

[0094] 在另一个示例性实施例中，农业目标是土壤。

[0095] 农业生长培养基、或其他农业培养料在本发明的意义上也被认为是可能的农业目标。

[0096] 术语“农业目标”不包括微生物学中使用的微生物培养基。

[0097] 因此在任何情况下，根据本发明，本发明的农业目标不同于微生物学中使用的培养基。

[0098] 根据本发明实施例中的任一个，农业目标可以包括各种作物和植物。

[0099] 典型的作物和植物包括例如：

[0100] ‑热带作物，如可可、咖啡、番木瓜、芒果、菠萝、鳄梨、甜瓜、西瓜和香蕉；

[0101] ‑蔬菜作物，如南瓜、洋葱、芹菜、生菜、菠菜、西葫芦、西红柿、茄子、胡椒、西兰花、卷心菜、黄瓜等；

[0102] ‑块根作物，如马铃薯、甜菜、胡萝卜、芜菁、生姜、和甘薯；

[0103] ‑豆类作物，如豆角、大豆、和花生；

[0104] ‑粮谷，如玉米、燕麦、小麦、高粱、苜蓿、大麦、和稻；

[0105] ‑树坚果作物，如扁桃树、腰果树、澳洲坚果树、核桃、山核桃、和开心果；

[0106] ‑树果实，如苹果、梨、桃子、李子、樱桃、柠檬、橙子、葡萄柚、柚子、和酸橙；

[0107] ‑浆果作物，如草莓、覆盆子、蓝莓、蔓越莓、黑莓、和接骨木果；

[0108] ‑葡萄藤，例如用于生产鲜食葡萄、果汁、或葡萄酒；和/或

[0109] ‑草皮草，草坪、高尔夫球场、和观赏植物。

[0110] 根据本发明，尤其可以提及葡萄藤。

[0111] 耐雨性

[0112] 本发明提供了瓜尔豆胶用于改进有益微生物在农业目标上的耐雨性的用途。

[0113] 根据本发明，术语“耐雨性”(或“耐水性”)是指物质经受住被降水、凝结、吐水或灌溉冲掉的能力。

[0114] 根据本发明，术语“降水”是指降雨，并且尤其包括中雨(20‑mm)和更大的雨(40‑mm)。在一个实施例中，重晨露也可以被认为归入术语“降水”。

[0115] 如本文所用，术语“增加的耐雨性”、“增强的耐雨性”或“改进的耐雨性”是等同的并且全部是指耐雨性的增加。

[0116] 本领域已知的任何标准方法，包括但不限于实例中所披露的那些，可以用来测量耐雨性。

[0117] 本发明的瓜尔豆胶可以用作有益微生物的耐雨剂，即能够增强所述有益微生物的耐雨性的成分，优选当与所述有益微生物一起施用时。

[0118] 可以通过针对用给定有益微生物进行的限定处理对有益微生物暴露于水(例如模拟降雨)后的生物效力与所述有益微生物在不暴露于水(例如模拟降雨)的情况下(对照)的生物效力进行比较，来评估耐雨性。

[0119] 可以通过对用含有辅助剂的给定有益微生物进行的限定处理与在限定的水(例如像模拟降雨)暴露下用不含辅助剂的所述有益微生物进行的处理的生物效力增益进行比较，来评估由辅助剂像瓜尔豆胶所带来的耐雨性性能增强(根据本发明，也称为“生物效力增加”)。

[0120] 可以通过对用含有辅助剂的给定有益微生物进行的限定处理与用不含辅助剂的所述有益微生物(不经受暴露于水，例如像模拟雨)进行的处理的效力增益进行比较，来评估由辅助剂像瓜尔豆胶“原样”(不暴露于水，如雨)所带来的生物效力性能增强。

[0121] 取决于有益微生物的作用方式，可以容易地实施不同方法来确定所述有益微生物对任何农业目标的生物效力。

[0122] 在一些实施例中，耐雨性可以由最初施用在农业目标上的有益微生物(和/或其代谢物，例如像在苏云金芽孢杆菌的孢子形成期间产生的蛋白质的晶体团聚体)在一段或多段降水、凝结、吐水或灌溉的时期之后仍然留在农业目标上的量来测量。

[0123] 可以通过对在有和没有本发明耐雨剂的情况下在一段或多段降水、凝结、吐水或灌溉的时期之后仍然留在农业目标上的有益微生物(和/或其代谢物，例如像在苏云金芽孢杆菌的孢子形成期间产生的蛋白质的晶体团聚体)的量进行比较，来评估由辅助剂像瓜尔豆胶所带来的耐雨性性能增强。

[0124] 本发明主要提供了瓜尔豆胶用于改进有益微生物在农业目标上的耐雨性的用途。

[0125] 在一个示例性实施例中，本发明的瓜尔豆胶还可以保护有益微生物免受其他不利条件的影响，这些不利条件如摩擦、风、以及可能从农业目标中稀释或除去有益微生物的二次农业处理(例如，随后的喷雾或随后的施用或利用农业处理剂)。

[0126] 本发明提供了瓜尔豆胶用于在农业目标上保留有益微生物的用途，尤其是当所述农业目标经受如先前所定义的不利条件时。

[0127] 组合物

[0128] 在一个实施例中，本发明涉及一种包含至少一种有益微生物和至少一种如先前所定义的瓜尔豆胶的农用组合物。

[0129] 有益微生物以有效量存在于本发明的农用组合物中。

[0130] 如本文所用，术语“有效量”被定义为足以对植物提供有益效果的有益微生物的量。

[0131] 例如，当有益微生物是生物杀虫剂时，术语“有效量”可以被定义为足以引起害虫侵染的生物杀虫剂的量，这然后将得到对害虫的控制。实际有效量(以绝对值计)可以取决于各种因素，包括但不限于一种或多种害虫的相对于生物杀虫剂的施用率的死亡率，可能增加或降低生物杀虫剂的活性的其他活性或惰性成分之间的协同或拮抗相互作用，害虫的生活期固有易感性和物种，以及生物杀虫剂在组合物中的稳定性。

[0132] 本发明的有益微生物，例如生物杀虫剂的“有效量”可以例如通过常规剂量反应实验来确定。

[0133] 瓜尔豆胶以足以改进有益微生物在农业目标上的耐雨性的量存在于本发明的农用组合物中。

[0134] 根据本发明，本发明的有益微生物和瓜尔豆胶一起施用。

[0135] 术语“一起施用”包括同时施用和依次施用。

[0136] 在一个实施例中，有益微生物和瓜尔豆胶可以作为单一配制品施用。

[0137] 在另一个实施例中，有益微生物和瓜尔豆胶可以经由单独的施用方式来施用。在这种情况下，有益微生物和瓜尔豆胶可以同时施用或依次施用。

[0138] 瓜尔豆胶的量可以在很大程度上变化，尤其取决于其所掺入的农用组合物以及在农业目标上施用之前可能的稀释率。

[0139] 例如，在一个实施例中，相对于旨在施用在农业目标上的含有有益微生物的喷雾处理剂或浆料配制品的总重量，本发明的瓜尔豆胶可以以范围从0.03至3pbw，例如从0.05至1pbw的量使用。

[0140] 本发明的方法和组合物可以通过使用技术人员熟悉的技术以常规方式应用。

[0141] 根据本发明的方法和组合物可以在作物植物出苗前、出苗期间或出苗后应用。

[0142] 在植物出苗后处理的情况下，根据本发明的方法和组合物优选地通过叶面施用来应用。

[0143] 根据本发明的方法和组合物优选地在水暴露之前，尤其是在开始下雨时应用，优选在水暴露之前最多六小时、更优选在水暴露之前最多四小时、特别优选在水暴露之前最多两小时、更特别优选在水暴露之前最多一小时、最优选在水暴露之前最多30min时应用。

[0144] 根据本发明的方法和组合物适合在各种各样的作物植物中应用。

[0145] 本发明的农用组合物可以进一步包含本领域中通常使用的其他农药、生长调节剂、微量营养素、和/或肥料。

[0146] 本发明的农用组合物可以进一步包含，如果希望的话，一种或多种表面活性剂，以及如果希望的话，作物保护组合物所惯用的一种或多种另外的助剂。

[0147] 根据本发明实施例中的任一个，本发明的耐雨剂可以作为添加剂(桶混物)使用。在一个实施例中，耐雨剂可以在植物检疫配制品施用至农业目标之前与其混合。

[0148] 根据本发明实施例中的任一个，本发明的耐雨剂可以作为植物检疫配制品的组分(内置)使用。

[0149] 根据本发明实施例中的任一个，包含至少一种瓜尔豆胶的配制品可以有意是喷雾施用的组合物。

[0150] 在此类实施例中，包含至少一种瓜尔豆胶的喷雾施用的组合物可以是这样的，即，该组合物展现出随着相对量减少漂移趋势降低，该相对量典型地表示为小尺寸喷雾液滴(即，具有低于给定值的液滴尺寸、典型地小于150微米(“μm”)的液滴尺寸的喷雾液滴)的总的喷雾施用的液滴体积的体积百分比。

[0151] 这尤其可有利于减少漂移(即，施用至农业目标的有益微生物组合物的液滴偏离目标的运动)。

[0152] 在一个示例性实施例中，本发明的瓜尔豆胶当在某些条件下存在于喷雾介质中时，可有效地将细喷雾液滴减小到低于150μm。

[0153] 在本发明的一个方面，细液滴(即低于150μm的喷雾液滴)的体积在喷雾组合物期间可以减少至少30％，例如至少40％，例如至少50％。

[0154] 因此，本发明涉及本发明的瓜尔豆胶作为良好的耐雨剂以及良好的漂移控制剂的用途。

[0155] 在一些实施例中，除了提供改进的耐雨性益处之外，使用特定的瓜尔豆胶和/或含有本发明瓜尔豆胶的特定配制品还可以有利地允许在含有其的水性喷雾组合物的液滴的漂移减少与体积平均直径(VMD)之间实现良好的折中，即使在剪切力的影响下，如在喷雾装置中的机械应力下。

[0156] 特别地，VMD可以有利地仅适度增加并且在任何情况下不超过600μm。

[0157] 以下实例出于说明的目的而提供并且不旨在限制如本文所要求的本发明的范围。技术人员想到的示例的实例中的任何变化都旨在落入本发明的范围内。

[0158] 实例：对 的生物转移耐雨性测试(改进的生物杀虫剂配制品特性：耐雨性和生物效力)

[0159] 所用成分

[0160] ·自来水，

[0161] ·1.0*10^5个孢子/ml的灰葡萄孢菌株的校准的悬浮液

[0162] ·微生物生物控制剂： WG，其由Certis欧洲有限公司(Certis Europe BV)销售，为基于解淀粉芽孢杆菌亚种植物乳杆菌(plantarum)D747的菌株的杀真菌剂，
5.10^10CFU/g(250g/kg)

[0163] ·辅助剂1：从索尔维公司(Solvay)可获得的瓜尔豆胶

[0164] ·辅助剂2(对比)： 其由戴商高士公司(De Sangosse)销售，为460.35g/L的合成胶乳

[0165] 样品的制备

[0166] 将30ml的自来水置于50ml离心管(Falcon tube)中并将水置于用磁力搅拌棒的强烈搅拌下。将0.021g的辅助剂1(以达到0.07wt％)或0.03g的辅助剂2( 以达到0.1wt％)添加到50ml离心管中的水中。维持搅拌几分钟，以确保粉末的良好分散。在那之后，将0.25g的 WG添加在3个管中的每一个中，然后在几分钟期间进行磁力搅拌
直至均匀。

[0167] 如此制备以下组合物(对比水含量以重量％计的量)。

[0168]

[0169] 耐雨性和生物效力测试

[0170] 1.用水(未处理的对照物)、系列0配制品、系列1配制品或系列2配制品对葡萄藤叶(霞多丽(Chardonnay))进行喷雾。以下描述中测试的每种条件都使用三片葡萄藤叶。

[0171] 2.处理后，在室温下使葡萄藤叶在层流下干燥30min，并然后置于气候室中进行4小时温育。

[0172] 3.在某些情况下，将20‑mm量(在30min期间40mm/h速率)或40‑mm量(在1h期间40mm/h速率)的人工降雨(经由自动降雨装置产生)施加在上述准备好的葡萄藤叶上，然后在1h期间在层流下进行干燥。然后在气候室中在24h期间温育叶样品。

[0173] 4.将葡萄藤叶转移到含有适合的水琼脂的陪替氏培养皿(Petri dish)中。用1.0*10^5个孢子/ml的灰葡萄孢菌株的校准的悬浮液对葡萄藤叶的下(背面)面接种。每片叶执行两个接种点，每种条件产生总计6个接种事件。

[0174] 5.接种后，将陪替氏培养皿置于气候室(条件：温度为23℃白天/19℃夜间‑且受控相对湿度为100％)中。

[0175] 6.接种后四(4)天和六天(6)，观察每片葡萄藤叶，并测量由灰葡萄孢导致的病变圆的直径。

[0176] 7.以所分析的叶的总长度的百分比计算病害强度。

[0177] 8.病害进展曲线下的面积(AUDPC)是病害强度随时间变化的定量量度。用于估算AUDPC的最常用方法(梯形法)通过将每对相邻时间点之间的平均病害强度乘以对应的时间间隔并将其用于每个间隔时间来进行。用以下公式通过将所有梯形相加来确定AUDPC：

[0178]

[0179] yi＝第i次观察时的病害强度

[0180] ti＝第i次观察时的时间(天)

[0181] N＝总观察次数

[0182] 9.杀真菌剂效力由AUDPC值确定并以未处理的对照物的百分比表示：％效力系列X＝『AUDPC未处理的对照物‑在与未处理的对照物相同的条件下测试的AUDPC系列X]/AUDPC未处理的对照物

[0183] 10.每种配制品系列的耐雨性被评价为所考虑的系列在20mm或者40mm水暴露下的％效力对比所考虑的系列在没有水暴露的情况下的％效力的比率。

[0184] 11.由所测试的辅助剂带来的生物学效力增强(BEE)被评价为由生物杀真菌剂处理(在没有暴露于流水的情况下)中辅助剂的存在所带来的效力增益，即例如对于BEE辅助剂1＝％效力系列1‑％效力系列0

[0185] 12.在20mm或40mm水暴露下由所测试的辅助剂所带来的耐雨性增强(RE)从通过生物杀真菌剂处理(经受20mm或者40mm降雨模拟)中辅助剂的存在所获得的效力增益来评价，即例如对于在20mm降雨暴露下含有辅助剂1的配制品系列1：RE辅助剂1_20mm＝％效力系列1_20mm‑％效力系列0_20mm

[0186] 结果

[0187] 表1： 配制品(0.83％w/v)(单独的(系列0)、具有辅助剂1(系列1)或具有辅助剂2(系列2))在不同的降雨条件(NRW‑没有雨；RW20‑20mm雨；RW40‑40mm雨)下对抗葡萄藤叶上灰葡萄孢发育的耐雨性和生物效力数据/结果。

[0188]

[0189] 通过比较如上述计算的经典耐雨性比，可以观察到在两种雨冲刷条件下，在辅助剂存在下耐雨性比更高。

[0190] 这在较高量的雨(40mm)的情况下特别明显，其中在不存在辅助剂下，生物效力减为零。当通过比较两种辅助剂之间的耐雨性比时，可以容易地注意到在辅助剂2的情况下，值略微更高。

[0191] 然而，如可以看出的，辅助剂1在没有施加雨的情况下已经产生高得多的生物学效力增强(BEE)，即10.24对比1.19(辅助剂2的BEE)，引入另一个描述符号耐雨性增强(RE)以更好地评价和理解在雨的情况下由辅助剂所带来的真实益处，即由辅助剂的存在带来的附加生物效力。

[0192] 确实，在每种雨冲刷条件下，辅助剂1的RE高于辅助剂2的RE，这表明微生物杀真菌剂解淀粉芽孢杆菌亚种植物乳杆菌菌株D747的生物效力的改进更显著，因此耐雨性更好。

[0193] 与对照物(没有辅助剂添加)和辅助剂2相比，辅助剂1不仅在不存在雨下示出了促进效应(高出10％)，而且还揭示了在适度量的雨(20‑mm)的存在下更显著的“协同促进”效应。这种效应被认为与解淀粉芽孢杆菌的水分促进的生长有关。此外，在更显著的雨(40‑mm)冲刷条件下，在对照样品中，此种“协同促进”效应消失，而在辅助剂存在下，尤其是在辅助剂1的情况下保留得出乎意料地好。