国槐在抑制真菌方面的用途及抑菌剂与制备方法

IPRDB

API 数据接口

专利申请

使用指引 chat嘟嘟

会员体验

联系我们

交流群

现在联系顾问~

国槐在抑制真菌方面的用途及抑菌剂与制备方法
申请号	CN202110440041.2	申请日	2021-04-23	公开(公告)号	CN113207914B	公开(公告)日	2022-04-12
申请人	北京农学院;			发明人	刘悦秋; 成军; 张煜;
摘要	本发明“国槐在抑制真菌方面的用途及抑菌剂与制备方法”属于植物提取及新用途技术领域。本发明一方面保护国槐在抑制真菌方面的用途，另一方面保护国槐在制备抑菌剂方面的用途，同时保护基于国槐提取物或萃取物的抑菌剂及其制备方法。本发明证实国槐及其提取物/萃取物对包括植物病原真菌Ectophomamultirostrata、植物病原真菌Fusarium foetens、胶孢炭疽菌Colletotrichumgloeosporioides、灰葡萄孢菌Botrytis cinerea在内的多种植物病原真菌具有显著的抑制活性。
权利要求	1.国槐在抑制真菌方面的用途，其特征在于，所述真菌选自由植物病原真菌Ectophomamultirostrata、植物病原真菌Fusarium foetens组成的组；所述国槐指国槐提取物或国槐萃取物；所述国槐提取物指国槐树枝的乙醇提取物；所述国槐萃取物指国槐树枝乙醇提取物的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物或水萃取物。 2.根据权利要求1所述的国槐在抑制真菌方面的用途，其特征在于，指用国槐提取物或国槐萃取物的水溶液对真菌进行处理。 3.根据权利要求2所述的国槐在抑制真菌方面的用途，其特征在于，所述国槐提取物或国槐萃取物的水溶液的浓度为0.01mg/ml‑100mg/ml。 4.国槐在制备抑菌剂方面的用途，其特征在于，所述抑菌指，抑制或杀灭真菌；所述真菌选自由植物病原真菌Ectophomamultirostrata、植物病原真菌Fusarium foetens组成的组；所述国槐指国槐提取物或国槐萃取物；所述国槐提取物指国槐树枝的乙醇提取物；所述国槐萃取物指国槐树枝乙醇提取物的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物或水萃取物。 5.根据权利要求1‑3任一所述的国槐在抑制真菌方面的用途，其特征在于，所述提取包括：将国槐样品加入溶剂中煮后抽滤，所得滤液浓缩后得到浸膏；所述溶剂为85%‑95%乙醇；所述萃取指，将所述提取得到的浸膏用萃取剂萃取、浓缩；所述萃取剂选自：石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水；所述抑菌指，抑制或杀灭真菌；所述真菌指植物病原真菌；所述植物病原真菌选自由植物病原真菌Ectophomamultirostrata、植物病原真菌Fusarium foetens组成的组。 6.根据权利要求5所述的国槐在抑制真菌方面的用途，其特征在于，所述溶剂为95%乙醇。 7.根据权利要求5所述的国槐在抑制真菌方面的用途，其特征在于，所述国槐样品与溶剂的料液比为1‑5g∶5‑75ml 。 8.根据权利要求7所述的国槐在抑制真菌方面的用途，其特征在于，所述国槐样品与溶剂的料液比为1g:10ml。 9.根据权利要求5所述的国槐在抑制真菌方面的用途，其特征在于，所述煮为50‑80 ºC下煮4‑8 小时。 10.根据权利要求9所述的国槐在抑制真菌方面的用途，其特征在于，所述煮为60 ºC 下煮6 小时。 11.根据权利要求5所述的国槐在抑制真菌方面的用途，其特征在于，所述萃取条件为 20‑30℃下萃取剂与水体积比1∶0.5‑1.5混合静置25min‑35min 。 12.根据权利要求11所述的国槐在抑制真菌方面的用途，其特征在于，所述萃取条件为 25℃下萃取剂与水体积比1:1 混合静置30min。 13.根据权利要求5所述的国槐在抑制真菌方面的用途，其特征在于，所述浓缩指用旋转蒸发仪将溶剂或萃取剂蒸干。 14.根据权利要求5所述的国槐在抑制真菌方面的用途，其特征在于，所述国槐样品指国槐树枝阴干后粉碎得到的粉末。
说明书全文	国槐在抑制真菌方面的用途及抑菌剂与制备方法技术领域 [0001] 本发明属于植物提取及新用途技术领域，具体涉及国槐在抑制真菌方面的用途及抑菌剂与制备方法。背景技术 [0002] 国槐Sophora japonica为高大乔木，其羽状复叶和刺槐相似。花为淡黄色，可烹调食用，也可作中药或染料。未开槐花俗称“槐米”，是一种中药。花期在夏末，和其他树种花期不同，是一种重要的蜜源植物。花和荚果入药，有清凉收敛、止血降压作用；叶和根皮有清热解毒作用，可治疗疮毒；木材供建筑用。种仁含淀粉，可供酿酒或作糊料、饲料。皮、枝叶、花蕾、花及种子均可入药。 [0003] 真菌(学名：Fungi)，是一种具真核的、产孢的、无叶绿体的真核生物。包含霉菌、酵母、蕈菌以及其他人类所熟知的菌菇类。目前已经发现了十二万多种真菌。真菌独立于动物、植物和其他真核生物，自成一界。真菌的细胞有含甲壳素,能通过无性繁殖和有性繁殖的方式产生孢子。 [0004] 真菌无处不在，可能会寄生在任何生物或环境中。例如，水体、土壤、动物、植物中都可能生存或寄生有真菌。寄生于植物的真菌有些对植物有利，例如，蕈菌以及某些植物的内生真菌可增强植物抵抗力，而有些真菌则会引起植物病害，例如植物病原真菌。 [0005] 常见的植物病原真菌有：植物病原真菌YZ‑1(Ectophomamultirostrata)会引起植物根腐病，也在土壤中被分离鉴定过。植物病原真菌YZ‑2(Fusarium foetens)会引起秋海棠、冬葵属植物等园林植物枯萎病。胶孢炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides)是引起植物炭疽病的主要病原菌,可以侵染诸如桃,板栗,杧果,枇杷,番木瓜,麦冬,橡胶等众多植物。灰葡萄孢菌 (Botrytis cinerea)会引起葡萄、番茄、草莓、桃等多种蔬菜和水果产生灰霉病。 [0006] 关于国槐在抑制真菌方面的用途，本领域尚未见报道。发明内容 [0007] 基于本领域的上述空白，本发明首次发现国槐在抑制真菌方面的新用途，并验证了通过不同试剂的提取或萃取得到的国槐提取物对真菌存在不同程度的抑制活性。 [0008] 本发明的技术方案如下： [0009] 国槐在抑制真菌方面的用途。 [0010] 所述真菌指植物病原真菌； [0011] 优选地，所述植物病原真菌选自由植物病原真菌Ectophomamultirostrata、植物病原真菌 Fusarium foetens、胶孢炭疽菌Colletotrichumgloeosporioides、灰葡萄孢菌 Botrytis cinerea组成的组。 [0012] 所述国槐指国槐提取物或国槐萃取物； [0013] 优选地，国槐提取物或国槐萃取物指国槐树枝的提取物或萃取物； [0014] 优选地，所述国槐树枝的提取物选自：国槐树枝的乙醇提取物、水提取物； [0015] 优选地，所述国槐树枝的萃取物选自：国槐树枝的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物。 [0016] 优选地，所述国槐树枝的乙醇提取物的抑菌活性成分包括：2,4‑二叔丁基苯酚、3‑O‑甲基 ‑D‑葡萄糖、十六酸甲酯、硬脂酸甲酯。 [0017] 优选地，所述国槐树枝的石油醚萃取物的抑菌活性成分包括：十七烷、3,5‑双(1,1‑二甲基乙基)苯酚、正十六烷酸、2‑羟基‑1‑(羟甲基)十六酸乙酯； [0018] 在本组另一些实施例中，所述国槐树枝的乙酸乙酯萃取物的抑菌活性成分包括：3‑乙酰基‑2‑辛酮、正十六烷酸、五氟丙酸八烷基叔丁基。 [0019] 在本组的一些实施例中，所述国槐树枝的正丁醇萃取物的抑菌活性成分包括：2,4‑二叔丁基苯酚、3‑O‑甲基‑D‑果糖、2‑氯乙醇，三异丁基甲硅烷基醚、硬脂酸甲酯。 [0020] 在本组另一些实施例中，所述国槐树枝的水萃取物的抑菌活性成分包括：2‑氯乙醇，三异丁基甲硅烷基醚、硬脂酸甲酯、十六酸甲酯。 [0021] 所述的国槐在抑制真菌方面的用途指用国槐提取物或国槐萃取物的水溶液对真菌进行处理；优选地，所述国槐提取物或国槐萃取物的水溶液的浓度为0.01mg/ml‑100mg/ ml。 [0022] 国槐在制备抑菌剂方面的用途。 [0023] 所述抑菌指，抑制或杀灭真菌； [0024] 优选地，所述真菌指植物病原真菌； [0025] 优选地，所述植物病原真菌选自由植物病原真菌Ectophomamultirostrata、植物病原真菌 Fusarium foetens、胶孢炭疽菌Colletotrichumgloeosporioides、灰葡萄孢菌 Botrytis cinerea组成的组； [0026] 优选地，所述国槐指国槐提取物或国槐萃取物； [0027] 优选地，国槐提取物或国槐萃取物指国槐树枝的提取物或萃取物； [0028] 优选地，所述国槐树枝的提取物选自：国槐树枝的乙醇提取物、水提取物； [0029] 优选地，所述国槐树枝的萃取物选自：国槐树枝的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物。 [0030] 一种抑菌剂，其特征在于，其活性成分包括国槐提取物或国槐萃取物。 [0031] 所述抑菌指，抑制或杀灭真菌； [0032] 优选地，所述真菌指植物病原真菌； [0033] 优选地，所述植物病原真菌选自由植物病原真菌Ectophomamultirostrata、植物病原真菌 Fusarium foetens、胶孢炭疽菌Colletotrichumgloeosporioides、灰葡萄孢菌 Botrytis cinerea组成的组； [0034] 优选地，所述国槐提取物或国槐萃取物指国槐树枝的提取物或萃取物； [0035] 优选地，所述国槐树枝的提取物选自：国槐树枝的乙醇提取物、水提取物； [0036] 优选地，所述国槐树枝的萃取物选自：国槐树枝的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物； [0037] 优选地，所述抑菌剂的活性成分包括：国槐提取物或国槐萃取物的水溶液； [0038] 优选地，所述国槐提取物或国槐萃取物的水溶液的浓度为0.01mg/ml‑100mg/ml； [0039] 优选地，所述抑菌剂还包括药用辅料； [0040] 优选地，所述药用辅料选自：溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、释放阻滞剂。 [0041] 一种抑菌剂的制备方法，其特征在于，以国槐提取物或国槐萃取物为抑菌剂的活性成分。 [0042] 所述提取包括：将国槐样品加入溶剂中煮后抽滤，所得滤液浓缩后得到浸膏； [0043] 优选地，所述溶剂为85％‑95％优选95％乙醇； [0044] 优选地，所述国槐样品与溶剂的料液比为1‑5g∶5‑75ml优选1g:10ml； [0045] 优选地，所述煮为50‑80℃优选60℃下煮4‑8小时优选6小时； [0046] 优选地，所述萃取指，将所述提取得到的浸膏用萃取剂萃取、浓缩； [0047] 优选地，所述萃取剂选自：石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水； [0048] 优选地，所述萃取条件为20‑30℃优选25℃下萃取剂与水体积比1∶0.5‑1.5优选1:1混合静置25min‑35min优选30min； [0049] 优选地，所述浓缩指用旋转蒸发仪将溶剂或萃取剂蒸干； [0050] 优选地，所述国槐样品指国槐树枝阴干后粉碎得到的粉末。 [0051] 本发明通过大量抑菌试验筛选得到国槐与若干真菌之间的关联，并开拓性地提出国槐抑制真菌的新用途。本发明一方面保护国槐在抑制真菌方面的用途，另一方面保护国槐在制备抑菌剂方面的用途，同时保护基于国槐提取物或萃取物的抑菌剂及其制备方法。本发明通过实验证实，利用多种萃取剂(包括乙酸乙酯、石油醚、正丁醇、水等)萃取得到的国槐萃取物或利用溶剂(乙醇或水)提取得到的国槐提取物对包括植物病原真菌 Ectophomamultirostrata、植物病原真菌Fusarium foetens、胶孢炭疽菌 Colletotrichumgloeosporioides、灰葡萄孢菌Botrytis cinerea在内的多种植物病原真菌具有显著的抑制活性。同时经成分检测发现，不同萃取剂或溶剂的国槐萃取物或国槐提取物的抑菌活性物质包括：2,4‑二叔丁基苯酚、3‑O‑甲基‑D‑葡萄糖、十七烷、3,5‑双(1,1‑ 二甲基乙基)苯酚、正十六烷酸、2‑羟基‑1‑(羟甲基)十六酸乙酯、3‑乙酰基‑2‑辛酮、五氟丙酸八烷基叔丁基、三异丁基甲硅烷基醚、硬脂酸甲酯、2‑氯乙醇，三异丁基甲硅烷基醚、硬脂酸甲酯、十六酸甲酯。附图说明 [0052] 图1为本发明实验例部分提供的国槐树枝乙醇提取物的质谱总离子流图。 [0053] 图2为本发明实验例部分提供的国槐树枝石油醚萃取物的质谱总离子流图。 [0054] 图3为本发明实验例部分提供的国槐树枝乙酸乙酯萃取物的质谱总离子流图。 [0055] 图4为本发明实验例部分提供的国槐树枝正丁醇萃取物的质谱总离子流图。 [0056] 图5为本发明实验例部分提供的国槐树枝水萃取物的质谱总离子流图。具体实施方式 [0057] 下面结合具体实施例对本发明的内容做进一步详细描述，但并不以此限制本发明的保护范围。 [0058] 生物材料的来源 [0059] 本发明实验例部分使用的植物实验材料：国槐的一二年生枝条收集于申请人单位的校园内，也可商购获得国槐植株得到其枝条。 [0060] 菌株：植物病原真菌YZ‑1(Ectophomamultirostrata)、植物病原真菌YZ‑2(Fusarium foetens)、胶孢炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides)、灰葡萄孢菌 (Botrytis cinerea)均可商购获得。 [0061] 本发明实验例部分采用的试剂耗材，例如：乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚、水等均可商购获得 [0062] 第1组实施例、本发明国槐的抑菌新用途 [0063] 本组实施例提供国槐在抑制真菌方面的用途。 [0064] 根据本发明记载的内容，本领域技术人员可获得教导，采用国槐的任何部位、器官、组织，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等用于抑制真菌，或者以国槐的任何部位、器官、组织，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等为原料制备出的产品用于抑制真菌。任何利用国槐的任何部位、器官、组织，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等用于抑制真菌，或者以国槐的任何部位、器官、组织，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等为原料制备出的产品用于抑制真菌的行为均落入本发明的保护范围。 [0065] 在具体的实施例中，所述真菌指植物病原真菌； [0066] 优选地，所述植物病原真菌选自由植物病原真菌Ectophomamultirostrata、植物病原真菌 Fusarium foetens、胶孢炭疽菌Colletotrichumgloeosporioides、灰葡萄孢菌 Botrytis cinerea组成的组。 [0067] 本领域技术人员根据本发明的教导，采用国槐或以国槐为来源的产品抑制的真菌对象不限于上述几种植物病原真菌，还可尝试采用国槐或以国槐为来源的产品对本领域其它常见的植物病原真菌进行抑制，例如，可采用国槐或以国槐为来源的产品抑制绵霉菌 (Achlya)、腐霉菌(Pythium)、疫霉菌(Phytophthora)、白锈菌(Albugo)、霜霉菌 (Peronospora)、白粉菌(Erysiphe)、囊壳菌(Gibberella)、黑星菌(Venturia)、核盘菌 (Sclerotinia)、担子菌纲中锈菌、黑粉菌(Ustilago)、半知菌类等，并且能取得与本发明类似的抑制活性，效果可预期。任何采用国槐或以国槐为来源的产品抑制植物病原真菌 Ectophomamultirostrata、植物病原真菌Fusarium foetens、胶孢炭疽菌 Colletotrichumgloeosporioides、灰葡萄孢菌Botrytis cinerea、绵霉菌(Achlya)、腐霉菌 (Pythium)、疫霉菌(Phytophthora)、白锈菌(Albugo)、霜霉菌(Peronospora)、白粉菌 (Erysiphe)、囊壳菌(Gibberella)、黑星菌(Venturia)、核盘菌(Sclerotinia)、担子菌纲中锈菌、黑粉菌(Ustilago) 的行为均落入本发明的保护范围。 [0068] 在更具体的实施例中，所述国槐指国槐提取物或国槐萃取物； [0069] 优选地，国槐提取物或国槐萃取物指国槐树枝的提取物或萃取物； [0070] 优选地，所述国槐树枝的提取物选自：国槐树枝的乙醇提取物、水提取物； [0071] 优选地，所述国槐树枝的萃取物选自：国槐树枝的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物。 [0072] 在一些实施例中，所述国槐在抑制真菌方面的用途指用国槐提取物或国槐萃取物的水溶液对真菌进行处理；优选地，所述国槐提取物或国槐萃取物的水溶液的浓度为 0.01mg/ml‑100mg/ml。 [0073] 第2组实施例、本发明国槐在制备抑菌剂方面的用途 [0074] 本组实施例提供国槐在制备抑菌剂方面的用途。 [0075] 根据本发明记载的内容，本领域技术人员可获得教导，采用国槐的任何部位、器官、组织，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等用于制备抑菌剂，或者以国槐的任何部位、器官、组织，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等为原料制备出的产品用于制备抑菌剂。任何利用国槐的任何部位、器官、组织，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等用于制备抑菌剂，或者以国槐的任何部位、器官、组织，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等为原料制备出的产品用于制备抑菌剂的行为，或者任何在国槐相关产品包装盒上写明抑菌用途的行为，或者任何在抑菌产品中添加国槐相关成分的行为均落入本发明的保护范围。 [0076] 在一些实施例中，所述抑菌指，抑制或杀灭真菌； [0077] 优选地，所述真菌指植物病原真菌； [0078] 优选地，所述植物病原真菌选自由植物病原真菌Ectophomamultirostrata、植物病原真菌 Fusarium foetens、胶孢炭疽菌Colletotrichumgloeosporioides、灰葡萄孢菌 Botrytis cinerea组成的组； [0079] 优选地，所述国槐指国槐提取物或国槐萃取物； [0080] 优选地，国槐提取物或国槐萃取物指国槐树枝的提取物或萃取物； [0081] 优选地，所述国槐树枝的提取物选自：国槐树枝的乙醇提取物、水提取物； [0082] 优选地，所述国槐树枝的萃取物选自：国槐树枝的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物。 [0083] 第3组实施例、本发明的抑菌剂 [0084] 本组实施例提供一种抑菌剂。本组所有的实施例都具备如下共同特征：抑菌剂的活性成分包括国槐提取物或国槐萃取物。 [0085] 本领域技术人员根据本发明的教导，可采用国槐的任何部位、器官、组织，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等进行萃取或提取并将萃取物或提取物做为抑菌剂的活性成分，或者以国槐的任何部位、器官、组织，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等为原料萃取或提取得到的萃取物或提取物进一步加工制备出抑菌剂。任何以国槐的任何部位、器官、组合，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等的萃取物或提取物做为活性成分或者主料、辅料、君药、臣药进行添加、制备、生产抑菌剂的行为，或者任何在含有国槐的任何部位、器官、组织，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等的萃取物或提取物的相关产品包装盒上写明抑菌用途的行为，或者任何在抑菌产品中添加有国槐的任何部位、器官、组织，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等的萃取物或提取物的行为均落入本发明的保护范围。 [0086] 在一些实施例中，所述抑菌指，抑制或杀灭真菌； [0087] 优选地，所述真菌指植物病原真菌； [0088] 优选地，所述植物病原真菌选自由植物病原真菌Ectophomamultirostrata、植物病原真菌 Fusarium foetens、胶孢炭疽菌Colletotrichumgloeosporioides、灰葡萄孢菌 Botrytis cinerea组成的组； [0089] 优选地，所述国槐提取物或国槐萃取物指国槐树枝的提取物或萃取物； [0090] 优选地，所述国槐树枝的提取物选自：国槐树枝的乙醇提取物、水提取物； [0091] 优选地，所述国槐树枝的萃取物选自：国槐树枝的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物； [0092] 在本组的一些实施例中，所述国槐树枝的乙醇提取物的抑菌活性成分包括：2,4‑二叔丁基苯酚、3‑O‑甲基‑D‑葡萄糖、十六酸甲酯、硬脂酸甲酯。 [0093] 在本组的一些实施例中，所述国槐树枝的石油醚萃取物的抑菌活性成分包括：十七烷、 3,5‑双(1,1‑二甲基乙基)苯酚、正十六烷酸、2‑羟基‑1‑(羟甲基)十六酸乙酯。 [0094] 在本组另一些实施例中，所述国槐树枝的乙酸乙酯萃取物的抑菌活性成分包括：3‑乙酰基‑2‑辛酮、正十六烷酸、五氟丙酸八烷基叔丁基。 [0095] 在本组的一些实施例中，所述国槐树枝的正丁醇萃取物的抑菌活性成分包括：2,4‑二叔丁基苯酚、3‑O‑甲基‑D‑果糖、2‑氯乙醇，三异丁基甲硅烷基醚、硬脂酸甲酯。 [0096] 在本组另一些实施例中，所述国槐树枝的水萃取物的抑菌活性成分包括：2‑氯乙醇，三异丁基甲硅烷基醚、硬脂酸甲酯、十六酸甲酯。 [0097] 优选地，所述抑菌剂的活性成分包括：国槐提取物或国槐萃取物的水溶液； [0098] 优选地，所述国槐提取物或国槐萃取物的水溶液的浓度为0.01mg/ml‑100mg/ml； [0099] 优选地，所述抑菌剂还包括药用辅料； [0100] 优选地，所述药用辅料选自：溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、释放阻滞剂。 [0101] 第4组实施例、本发明的抑菌剂制备方法 [0102] 本组实施例提供一种抑菌剂的制备方法。本组所有的实施例都具备如下共同特征：以国槐提取物或国槐萃取物为抑菌剂的活性成分。 [0103] 任何以国槐的任何部位、器官、组织，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等的萃取物或提取物做为活性成分或者主料、辅料、君药、臣药进行添加、制备、生产抑菌剂的行为，或者任何在含有国槐的任何部位、器官、组合，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等的萃取物或提取物的相关产品包装盒上写明抑菌用途的行为，或者任何在抑菌产品中添加有国槐的任何部位、器官、组合，例如：根、树干、树脂、叶片、花、果等的萃取物或提取物的行为均落入本发明的保护范围。 [0104] 在一些实施例中，所述提取包括：将国槐样品加入溶剂中煮后抽滤，所得滤液浓缩后得到浸膏； [0105] 优选地，所述溶剂为85％‑95％优选95％乙醇； [0106] 优选地，所述国槐样品与溶剂的料液比为1‑5g∶5‑75ml优选1g:10ml； [0107] 优选地，所述煮为50‑80℃优选60℃下煮4‑8小时优选6小时； [0108] 优选地，所述萃取指，将所述提取得到的浸膏用萃取剂萃取、浓缩； [0109] 优选地，所述萃取剂选自：石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水； [0110] 优选地，所述萃取条件为20‑30℃优选25℃下萃取剂与水体积比1∶0.5‑1.5优选1:1混合静置25min‑35min优选30min； [0111] 优选地，所述浓缩指用旋转蒸发仪将溶剂或萃取剂蒸干； [0112] 优选地，所述国槐样品指国槐树枝阴干后粉碎得到的粉末。 [0113] 实验例、本发明国槐抑菌新用途的具体实验操作及效果验证 [0114] 一、实验方法 [0115] 1.PDA培养基配置 [0116] 将200g的去皮马铃薯切成小块放入锅中，加入1000ml纯水煮30‑40分钟后，再加入称取的20g葡萄糖和15g琼脂搅匀，分装后灭菌，灭菌条件为121℃，30min。 [0117] 2.样品制备 [0118] (1)磨粉 [0119] 将采集好的国槐树枝用纯水清洗表面的灰尘后，剪成小段，在室内阴干，阴干后称取10Kg 的国槐树枝，用粉碎机磨成粉，备用。 [0120] (2)热回流提取 [0121] 将国槐树枝粉末10Kg与95％的乙醇溶液以1:10的比例混合，运用热回流装置，在60℃煮6小时，煮后用抽滤装置将滤渣滤净，将滤液旋蒸，最终得到浸膏1160g，产率为 11.6％。 [0122] (3)系统溶剂萃取 [0123] 将上述得到的国槐树枝浸膏运用系统溶剂萃取法进行萃取，将浸膏水悬浮，悬浮液分成若干份，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水进行萃取，分别获得石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物以及水萃取物，旋蒸并冷干后得到各组分萃取物粉末，其重量分别为314.36g、368.30g、131.89g、345.33g。将上述提取物(浸膏)及各组分萃取物(粉末) 分别配置为100mg/ml的样品水溶液，其中含1％的吐温‑80和2％的二甲基亚砜，然后用纯水梯度稀释为10mg/ml、1mg/ml、0.1mg/ml、0.01mg/ml的样品溶液，备用。 [0124] 3.质谱全成分分析 [0125] 将上述的国槐树枝提取物和石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物，加入色谱纯的甲醇，将其配置为50mg/L的溶液，利用GC‑MS分析法进行成分分析，分析检测条件如下表1所示。 [0126] 表1.国槐树枝提取物及萃取部位质谱条件 [0127] [0128] 4.抑菌活性测定 [0129] 在超净工作台中，吸取1ml上述配制好的样品溶液培养基倒入9ml的PDA培养基于90mm 的培养皿中，充分混合摇匀，制成均匀的带药培养基；然后采用生长速率法，在培养皿接种在己活化的供试菌落中用5mm的无菌打孔器切取菌饼，接到带药培养基上，每皿接入1 个菌饼；最后将接好菌的培养皿置于28℃的恒温培养箱中培养72h，用十字交叉法测量菌落直径，并计算其抑制率，然后求出毒力回归方程、有效中浓度EC50等，并结合了SPSS26.0进行了差异性分析。 [0130] 二、实验结果 [0131] 1.成分检测结果 [0132] 国槐树枝乙醇提取物及萃取各组分gc‑ms分析结果图如图1所示。各组分化学成分如下表2所示。 [0133] 表2.国槐树枝乙醇提取物化学成分鉴定结果 [0134] [0135] [0136] 国槐树枝石油醚萃取物各组分gc‑ms分析结果图如图2所示。各组分化学成分如下表3 所示。 [0137] 表3.国槐树枝石油醚萃取物化学成分鉴定结果 [0138] [0139] [0140] 国槐树枝乙酸乙酯萃取物各组分gc‑ms分析结果图如图3所示。各组分化学成分如下表 4所示。 [0141] 表4.国槐树枝乙酸乙酯萃取物化学成分鉴定结果 [0142] [0143] [0144] 国槐树枝正丁醇萃取物各组分gc‑ms分析结果图如图4所示。各组分化学成分如下表5 所示。 [0145] 表5.国槐树枝正丁醇萃取物化学成分鉴定结果 [0146] [0147] 国槐树枝正丁醇萃取物各组分gc‑ms分析结果图如图5所示。各组分化学成分如下表6 所示。 [0148] 表6.国槐树枝水萃取物化学成分鉴定结果 [0149] [0150] [0151] 2.抑菌结果 [0152] 根据抑菌结果(表7)显示：在48h对1号菌效果最好的是国槐树枝乙酸乙酯萃取物，其EC50为5.13g/L，其次为水萃取物、乙醇提取物、正丁醇萃取物、石油醚萃取物；72h对1 号菌效果最好的是国槐树枝乙酸乙酯萃取物，其EC50为14.66g/L，其次为乙醇提取物、正丁醇萃取物、水萃取物、石油醚萃取物。在48h对2号菌效果最好的是国槐树枝乙酸乙酯萃取物，其EC50为16.47g/L，其次为正丁醇萃取物、乙醇提取物、水萃取物、石油醚萃取物；72h 对2号菌效果最好的是国槐树枝乙酸乙酯萃取物，其EC50为11.49g/L，其次为正丁醇萃取物、乙醇提取物、石油醚萃取物、水萃取物。在48h对胶孢炭疽菌效果最好的是国槐树枝乙酸乙酯萃取物，其EC50为2.58g/L，其次为正丁醇萃取物、乙醇提取物、水萃取物、石油醚萃取物；表8显示，72h对胶孢炭疽菌效果最好的是国槐树枝乙酸乙酯萃取物，其EC50为2.88g/L，其次为正丁醇萃取物、乙醇提取物、水萃取物、石油醚萃取物。在48h对灰葡萄孢菌效果最好的是国槐树枝乙酸乙酯萃取物，其EC50为9.02g/L，其次为石油醚萃取物、正丁醇萃取物、乙醇提取物、水萃取物；72h对灰葡萄孢菌效果最好的是国槐树枝乙酸乙酯萃取物，其EC50为16.68g/L，其次为石油醚萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物、乙醇提取物。整体来说，国槐树枝粗提物在 48h和72小时对于四种菌株均有一定的抑制效果，且抑菌效果随样品溶液浓度呈正相关。四个菌株对于国槐树枝乙酸乙酯萃取物EC50值最小且其斜率在五种粗提物中也是最大，故在五种粗提物中其敏感度最高，其次为正丁醇萃取物，其中对1、2号菌及胶孢炭疽菌敏感性最差的是石油醚提取物，对灰葡萄孢菌敏感性在48h时水萃取物最差，72h乙醇提取物最差。通过实验结果可知，国槐树枝的活性物质主要存在于乙酸乙酯和正丁醇萃取物，这两部分萃取物可作为分离纯化单体化合物的主要方向，为今后得到大量具有活性的单体化合物分离纯化奠定基础。 [0153] 此外，国槐树枝提取物及萃取部位抑菌活性差异性分析的结果是组内无明显差异，组间有一定的差异。 [0154] 表7.国槐树枝粗提物48h的毒力回归分析表 [0155] [0156] 表8.国槐树枝粗提物72h的毒力回归分析表 [0157]