防治稻瘟病的生物农药和化学农药的组合制剂

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防治稻瘟病的生物农药和化学农药的组合制剂
申请号	CN201210271397.9	申请日	2012-07-31	公开(公告)号	CN103563992A	公开(公告)日	2014-02-12
申请人	江苏丘陵地区镇江农业科学研究所; 江苏丰源种业有限公司;			发明人	潘以楼; 朱桂梅; 郭建;
摘要	本发明涉及稻瘟病生防菌——短短小芽孢杆菌TW菌株和化学杀菌剂配伍和应用，所述发明的有效成分之一是短短小芽孢杆菌TW菌株(A)，另一有效成分(B)是三环唑、咪鲜胺、稻瘟灵、异稻瘟净、嘧菌酯、稻瘟酰胺中的任一种。其活性成分A和B的配比为在50∶1～1∶50，优选配比为20∶1～1∶20；本发明中短短小芽孢杆菌TW菌株和化学杀菌剂具有协同增效作用，提高了对稻瘟病的防治效果，且较大地减少了化学杀菌剂的用量，节省了药剂成本。
权利要求	1.一种杀菌组合物，其特征在于：其有效成分为短短小芽孢杆菌(A)和咪鲜胺、嘧菌酯、三环唑、稻瘟灵、异稻瘟净、稻瘟酰胺及春雷霉素中任一种(B)。 2.如权利要求1所述的杀菌组合物，其特征在于，短短小芽孢杆菌(A)和咪鲜胺、嘧菌酯、三环唑、稻瘟灵、异稻瘟净、稻瘟酰胺及春雷霉素中任一种(B)的重量配比为50∶1～ 1∶50。 3.如权利要求1、2所述的杀菌组合物，其特征在于，短短小芽孢杆菌(A)和咪鲜胺、嘧菌酯、三环唑、稻瘟灵、异稻瘟净、稻瘟酰胺及春雷霉素中任一种(B)的重量配比优选比例为20∶1～1∶20。 4.如权利要求1所述的杀菌组合物，其特征在于，所述辅助成分为溶剂、乳化剂、分散剂、稳定剂、防冻剂、增稠剂中的一种或几种，加工制成可用于农业的所有剂型。 5.如权利要求1所述的杀菌组合物在防治水稻稻瘟病上的应用。
说明书全文	防治稻瘟病的生物农药和化学农药的组合制剂技术领域 [0001] 本发明涉及一种生物农药和化学杀菌剂混合制剂的加工和其应用方法，更具体地说，涉及一种短短小芽孢杆菌(I)和化学杀菌剂(II)复配杀菌剂及其应用方法。背景技术 [0002] 稻瘟病又称稻热病、火烧瘟、叩头瘟，分布在全国各稻区，主要危害叶片、茎秆、穗部。因危害时期、部位不同分为苗瘟、叶瘟、节瘟、穗颈瘟、谷粒瘟，对水稻生长影响很大，稻苗生长前期发病，可造成稻苗的枯死，抽穗期发病，可造成枯白穗，严重影响水稻产量。对稻瘟病最有效的防治方法是药剂防治，主要药剂有三环唑、稻瘟灵、多菌灵、甲基硫菌灵、稻瘟肽、克瘟散、异稻瘟净、菌毒清、春雷霉素等。 [0003] 近年来随着稻瘟病发生越来越严重，施用化学药剂是最为有效的防治手段，但长期连续使用高剂量的、作用方式单一的化学杀菌剂，容易带来药剂残留、环境污染以及耐抗药性等问题。稻瘟病的生物防治越来越受到重视，许多研究单位先后筛选出有效的生防菌。 [0004] 杨敬辉、潘以楼等在专利ZL200710021509.1中公开了一种用于防治稻瘟病的短短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)TW菌株的制剂，该制剂对水稻稻瘟病的防治效果在60％～80％间。但在稻瘟病发生严重田的防病效果还不能达到理想要求。发明内容 [0005] 本发明的目的在于针对现有技术中存在的不足和问题，提供一种对水稻的稻瘟病具有较好防治效果，且环境友好、安全的复配杀菌物。 [0006] 本发明复配杀菌组合物以短短小芽孢杆菌(A)为一有效成分，其它活性成分咪鲜胺、嘧菌酯、三环唑、稻瘟灵、异稻瘟净、稻瘟酰胺、春雷霉素中的任一种(B)为另一有效成分。其中A与B的质量比例为50∶1～1∶50，其余为农药加工中可以使用和可以接受的辅助成分。 [0007] 作为本发明的一种改进，所述杀菌组合物中有效成分A与B的质量比例优选20∶1～10∶1。 [0008] 本发明技术方案中有效成分B为咪鲜胺、嘧菌酯、三环唑、稻瘟灵、异稻瘟净、稻瘟酰胺或春雷霉素中的任一种，其中： [0009] 咪鲜胺(prochloraz)：化学名称为N-丙基-N-[2-(2，4，6-三氯苯氧基)乙基]-咪唑-1-甲酰胺，是一种广谱杀菌剂，对多种作物由子囊菌和半知菌引起的病害具有明显的防效，也可以与大多数杀菌剂、杀菌剂、杀虫剂、除草剂混用，均有较好的防治效果。对大田作物、水果蔬菜、草皮及观赏植物上的多种病害具有治疗和铲除作用。 [0010] 嘧菌酯(amistar)：化学名称为：(E)-[2-[6-(2-氰基苯氧基)嘧啶-4-基氧]苯基]-3-甲氧基丙烯酸甲酯。甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂，高效、广谱，对几乎所有的真菌界(子囊菌亚门、担子菌亚门、鞭毛菌亚门和半知菌亚门)病害如白粉病、锈病、颖枯病、网斑病、霜霉病、稻瘟病等均有良好的活性。可用于茎叶喷雾、种子处理，也可进行土壤处理，主要用于谷物、水稻、花生、葡萄、马铃薯、果树、蔬菜、咖啡、草坪等。 [0011] 三环唑(tricyclazole)：化学名称：5-甲基-[1，2，4]-三唑并[3，4-b][1，3]苯并噻唑。三环唑具有较强的内吸性的保护性杀菌剂，能迅速被水稻各部位吸收，持效期长，药效稳定，用量低并且抗雨水冲刷。 [0012] 稻瘟灵(isoprothiolane)：化学名称：1，3-二硫戊烷-2-叉丙二酸二异丙酯；稻瘟灵属于低毒、高效内吸杀菌剂，是防治水稻稻瘟病的特效药剂。对稻瘟病具有预防和治疗作用，能够被水稻各部位吸民，并累积到叶部组织，从而发挥药效，耐雨水冲刷并可兼治飞虱。 [0013] 异稻瘟净(iprobenfos)：化学名称为O，O-二异丙基-S-苄基硫赶磷酸酯。异稻瘟净为中等毒性、内吸杀菌剂，主要干扰细胞膜透性，使几丁质合成受阻，从而使菌体不能正常发育，残效期较长，具有抗倒伏及兼治飞虱、叶蝉的功效。 [0014] 稻瘟酰胺(fenoxanil)：化学名称：N-(1-腈基-1，2-二甲基丙基)-2-(2，4-二氯苯氧基)丙酰胺。稻瘟酰胺是一个新颖的用于防治水稻稻瘟病的内吸性杀菌剂，具有新颖作用机制，属于黑色素生物合成抑制剂(MBI)，在叶面和水下施用时防治稻瘟病效果极佳，且持效显著 [0015] 春雷霉素(kasugamycin)：化学名称为(5-氨基-2-甲基-6-(2，3，4，5，6-羟基环己基氧代)四氢吡喃-3-基)氨基-α-亚氨醋酸。春雷霉素是放线菌产生的代谢产物，属内吸抗生素，兼有治疗和预防作用，可防治多种作物病害。 [0016] 以上活性成分是本领域公知的杀菌剂，可以通过各种商业渠道购得。 [0017] 本发明组合物中除短短小芽孢杆菌(A)和其它活性成分(B)外，还包括溶剂、分散剂、乳化剂、稳定剂、防冻剂、湿润剂、抗氧化剂等助剂及其它有益于有效成分在制剂中稳定和药效发挥的已知物质，都是农药制剂加工中常用的各种成分，并无特别限定，具体成分和用量可根据配方要求经过简单试验确定。 [0018] 本发明的杀菌组合物可以用已知的方法加工成适合农业使用的任何一种剂型，比较好的剂型包括水剂、悬浮剂、水乳剂、水分散粒剂。制剂中有效成分的质量百分含量在5％～50％。 [0019] 本发明的杀菌组合物用于防治水稻稻瘟病，以喷雾法施药为宜。 [0020] 本发明的有益效果是： [0021] 本发明利用短短小芽孢杆菌对稻瘟病菌专-抑菌活性和化学杀菌剂混合使用，极大地减少了化学杀菌剂的使用量，同时利用化学杀菌剂对稻瘟病菌抑菌迅速的特点，弥补了短短小芽孢杆菌对稻瘟病菌抑菌速度慢的缺点，综合了生防菌剂和化学药剂的优点，提高了对稻瘟病的防治效果，减少化学杀菌剂在田间的施药量，对环境友好。而且降低了药剂成本。 [0022] 因此，本发明的杀菌组合物水稻绿色栽培中防治稻瘟病的首选制剂，是无公害防治中的理想药剂。具体实施方式 [0023] 实施例1短短小芽孢杆菌与化学杀菌剂对稻瘟病菌的协同作用 [0024] 本发明短短小芽孢杆菌和化学杀菌剂复配对稻瘟病菌的室内活性测定如下： [0025] 试验方法参照《中华人民共和国农业行业标准NY/T1156.2-2006》进行。短短小芽孢杆菌TW保藏菌株在牛肉膏培养基上活化后，洗下菌苔，移入到B培养液在30℃、160rmp/8 min振荡培养48h，将培养液用灭菌水调节菌体浓度为2×10cfu/ml(以下简称：菌液)，将此菌液作为短短小芽孢杆菌TW的原药。供试化学杀菌剂原药(咪鲜胺、三环唑、稻瘟灵、异稻瘟净、稻瘟酰胺或春雷霉素)称取0.1g溶解在0.5ml二甲苯中，并加入0.2ml吐温-20作为湿润剂，用灭菌水定溶至10ml，配制成10000mg/L的母液。 [0026] 将菌液和不同浓度化学杀菌剂溶液按不同比例混合，制成系列浓度的混合液，将混合后的药液按比例加到50℃左右的PSA培养基中并迅速倒入培养皿制成含药平板。冷却后在平皿中央移入预培养7d的稻瘟病菌菌片(直径5mm)。在27℃黑暗条件下培养8d后，十字交叉测量菌落直径(菌落直径-5mm)。按下列公式计算：菌丝生长抑制率(％)＝((对照菌落直径-药剂处理菌落直径)/对照菌落直径)×100。将药剂质量浓度转化成质量浓度对数(x)，菌丝生长抑制率转化成抑制机率值(y)，进行回归分析。计算药剂的毒力回归方程y＝bx+a、有效抑制中浓度(EC50)和相关系数(r)并计算相对毒力指数、理论毒力指数和共毒系数，结果见表1。 [0027] 表1短短小芽孢杆菌TW与化学杀菌剂混配对稻瘟病菌菌丝生长的抑制作用[0028] [0029] 试验结果表明，咪鲜胺、异稻瘟净、稻瘟酰胺、春雷霉素与TW菌液混配其共毒系数均大于120，表明这4种化学杀菌剂与TW菌株混配对稻瘟病菌的菌丝生长的抑制具有协同增效作用；三环唑、稻瘟灵与TW菌液混配其共毒系数均大于80，且小于120，表明这2种化学杀菌剂与TW菌株混配对稻瘟病菌的菌丝生长的抑制具有相加作用。 [0030] 实施例2 35％短短小芽孢杆菌·稻瘟酰胺SC [0031] 短短小芽孢杆菌TW保藏菌株在牛肉膏培养基上活化后，洗下菌苔，移入到B培养液在30℃、160rmp/min振荡培养24h，再原菌液按1∶100比例加到发酵培养液中，30℃、160rmp/min旋转培养48h，发酵液在高速离心机上(8000rmp/min)离心30min，倒去上清液， 12 余下菌体(包括部分发酵物渣)用轻质碳酸钙吸附后，并调节菌体量在3×10 cfu/g，此短短小芽孢杆菌TW菌粉作为原粉使用。 [0032] 称取稻瘟酰胺原药10g，TW菌粉25g，将两原药加入水中，在搅拌釜中搅拌至均相液体，加入分散剂(木质素磺酸钠)0.5％～10％，湿润剂(烷基萘磺酸盐)0.5％～10％，搅拌均匀后；在60～120rpm/min机械搅拌下缓慢加入用水稀释后的增稠剂(聚乙烯醇)0.1％～5％，防冻剂(乙二醇)0.1％～5％，消泡剂(硅油)0.01％～3％，用水补足到100ml，研磨时采用空气压缩管道输送料液，采用4台串联的砂磨机(填装细氧化锆珠和粗氧化锆珠)进行连续砂磨，制成35％短短小芽孢杆菌·稻瘟酰胺SC。 [0033] 该实施例中稻瘟酰胺可替换为嘧菌酯、咪鲜胺、稻瘟灵、春雷霉素、异稻瘟净，形成新的实施例。 [0034] 实施例3 60％短短小芽孢杆菌·三环唑WP [0035] 称取三环唑原药40g，TW菌粉20g，湿润剂(木质素磺酸钠)10g、分散剂(十二烷基硫酸钠)2g，其余为填充料高岭土。将活性成分按配比充分混均，经高速气流粉碎后即得60％短短小芽孢杆菌·三环唑WP。 [0036] 该实施例中三环唑可替换为咪鲜胺、稻瘟灵、春雷霉素、异稻瘟净、嘧菌酯、稻瘟酰胺，形成新的实施例。 [0037] 实施例4 20％短短小芽孢杆菌·春雷霉素EW [0038] 称取春雷霉素原药3g，TW菌粉17g，N-甲基吡咯烷酮2g，十二烷基苯磺酸钙(乳化剂)5g，农乳600#2g，水补足至100。将原药、溶剂、乳化剂加在一起，使溶解成均匀油相；在高速搅拌下，将油相与水混合，制得20％短短小芽孢杆菌·春雷霉素EW。 [0039] 该实施例中春雷霉素可替换为咪鲜胺、稻瘟灵、稻瘟酰胺、异稻瘟净，形成新的实施例。 [0040] 实施例5 60％短短小芽孢杆菌·稻瘟灵WDG [0041] 称取稻瘟灵原药15g，TW菌粉45g，烷基萘磺酸钠(湿润剂)5g，木质素磺酸钠(分散剂)7g，十二烷基磺酸钠(分散剂)2g，硫酸铵(崩解剂)5g，轻质碳酸钙(填料)补足到100g。将活性成分、湿润剂、分散剂、崩解剂和填料按比例充分混均匀，经气流粉碎成可湿性粉剂，再加入一定量的水混合挤压造粒，经干燥分筛后制成60％短短小芽孢杆菌·稻瘟灵WDG。 [0042] 该实施例中稻瘟灵可替换为咪鲜胺、三环唑、稻瘟酰胺、异稻瘟净、嘧菌酯，形成新的实施例。 [0043] 实施例6本发明几个实施例中的制剂对稻瘟病的防治效果 [0044] 2011年应用本发明的中制备的短短小芽孢杆菌与化学杀菌剂混配制得新药剂，在田间进行了防治稻瘟病试验。试验在句容市行香村进行，供试品种为省预-02。在水稻破口期、扬花期各喷药一次。各药剂按试验剂量兑水600kg/hm2用新农手动喷雾器进行。施药后30d在各试验区调查穗瘟的发病程度。各处理重复3次。调查方法和药效计算参照《中华人民共和国国家标准GB/T17980.19-2000》。 [0045] 表2短短小芽孢杆菌TW与化学杀菌剂混配对稻瘟病的防治效果 [0046]