协同苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种杀虫混合物

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协同苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种杀虫混合物
申请号	CN201680005870.5	申请日	2016-01-15	公开(公告)号	CN107427013A	公开(公告)日	2017-12-01
申请人	瓦伦特生物科学有限责任公司;			发明人	D·D·布兰思科姆; R·D·斯托里; J·R·爱尔德里奇; E·E·布拉吉尔;
摘要	本发明大体上涉及协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种用于防治小菜蛾、甜菜夜蛾、甘蔗螟、大豆尺蠖、棉铃虫、粉纹夜蛾以及西南玉米秆草螟的用途，其中所述苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与所述苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率是约1:0.001至约1:3.5。
权利要求	1.一种防治作物植物害虫的方法，所述作物植物害虫选自由以下各项组成的组：小菜蛾(Plutella xylostella)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)、甘蔗螟(Diatraea saccharalis)、大豆尺蠖(Chrysodeixis includens)、棉铃虫(Helicoverpa zea)、粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)、以及西南玉米秆草螟(Diatraea grandiosella)，所述方法包括向植物施用协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种(Bacillus thuringiensis subsp.aizawai)和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种(Bacillus thuringiensis subsp.kurstaki)，其中所述苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与所述苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率是约1:0.001至约1:3.5。 2.如权利要求1所述的方法，其中所述苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与所述苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率是约1:0.01至约1:3。 3.如权利要求1所述的方法，其中所述苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与所述苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率是约1:0.1至约1:2.5。 4.如权利要求1所述的方法，其中所述苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种和所述苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的量是每公顷约5克至约400克。 5.如权利要求1所述的方法，其中所述苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种和所述苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的量是每公顷约10克至约350克。 6.如权利要求1所述的方法，其中所述苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种和所述苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的量是每公顷约25克至约300克。 7.如权利要求1所述的方法，其中所述作物植物害虫是小菜蛾(Plutella xylostella)。 8.如权利要求1所述的方法，其中所述作物植物害虫是甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)。 9.如权利要求1所述的方法，其中所述作物植物害虫是甘蔗螟(Diatraea saccharalis)。 10.如权利要求1所述的方法，其中所述作物植物害虫是大豆尺蠖(Chrysodeixis includens)。 11.如权利要求1所述的方法，其中所述作物植物害虫是棉铃虫(Helicoverpa zea)。 12.如权利要求1所述的方法，其中所述作物植物害虫是粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)。 13.如权利要求1所述的方法，其中所述作物植物害虫是西南玉米秆草螟(Diatraea grandiosella)。 14.如权利要求1所述的方法，其中所述植物选自由以下各项组成的组：根和块茎类蔬菜、鳞茎类蔬菜、非芸苔属叶菜类蔬菜、芸苔属叶菜类蔬菜、多汁或干的豆科植物、果实类蔬菜、葫芦科蔬菜、柑橘类水果、仁果类水果、核果类水果、浆果和小果、木本坚果、谷物、饲草和牧草以及干草、非草动物饲料、草药、香料、花卉、花坛植物、观赏花卉、朝鲜蓟、芦笋、咖啡、棉花、热带水果、啤酒花、暗绿叶黄体芋、花生、石榴、油籽蔬菜、甘蔗、烟草、草皮、以及豆瓣菜。 15.如权利要求14所述的方法，其中所述植物是遗传修饰的。 16.如权利要求15所述的方法，其中所述谷物选自由以下各项组成的组：大麦、荞麦、珍珠粟、黍、燕麦、玉米、饲料玉米、甜玉米、玉米种、爆裂种玉米、水稻、黑麦、高粱(milo)、高粱种、普通高粱、苏丹草(种子)、墨西哥类蜀黍、黑小麦、小麦、菰米、以及其栽培品种、变种和杂交种。 17.如权利要求16所述的方法，其中所述植物是遗传修饰的玉米。 18.如权利要求14所述的方法，其中所述多汁或干蔬菜豆科植物选自由以下各项组成的组：羽扇豆属(Lupinus)、菜豆属(Phaseolus)、豇豆属(Vigna)、蚕豆、鹰嘴豆、瓜尔豆、洋刀豆、扁豆、小扁豆、豌豆属(Pisum)、木豆、大豆、未成熟种子大豆、刀豆、花生、以及其栽培品种、变种和杂交种。 19.如权利要求18所述的方法，其中所述植物是遗传修饰的大豆。
说明书全文	协同苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种杀虫混合物技术领域 [0001] 本发明大体上涉及协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种(Bacillus thuringiensis subsp.aizawai)和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种(Bacillus thuringiensis subsp.kurstaki)用于防治小菜蛾、甜菜夜蛾、甘蔗螟、大豆尺蠖、棉铃虫、粉纹夜蛾以及西南玉米秆草螟的用途。背景技术 [0002] 鳞翅目(Lepidoptera)是包括蛾和蝴蝶的昆虫的目。据估计，存在超过174,000个鳞翅目物种，被包括在估计126个科中。鳞翅目物种在它们的生命周期中经历了完全变态。成虫交配并且产卵。从卵中出来的幼虫具有圆柱形的身体和咀嚼口器。幼虫经历被称作龄的几个生长阶段直到它们达到它们的末龄为止，然后化蛹。然后鳞翅目作为成年蝴蝶或蛾出现。 [0003] 虽然一些鳞翅目物种由于它们的美学魅力而一般被认为是有益的生物体，但是许多物种对作物造成毁灭性的损害。确切地说，小菜蛾、甜菜夜蛾、甘蔗螟、大豆尺蠖、棉铃虫、粉纹夜蛾以及西南玉米秆草螟对于作物种植者来说特别成问题。 [0004] 小菜蛾(Plutella xylostella)是一种可以扩散长距离的广泛害虫。小菜蛾幼虫吃十字花科植物的叶片、芽、花以及种芽。严重的侵扰可以从植物完全去除所有叶面组织，从而只留下叶脉。即使是较轻的侵扰也可能导致整个一批产品不适合出售。在过去，已经用包括拟除虫菊酯在内的多种杀虫剂来处理小菜蛾。 [0005] 甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)是另一种难以防治的广泛的害虫。幼虫是使寄主植物落叶的贪食者。老龄虫也可以钻入植物。对寄主植物造成的损害致使它不能销售。甜菜夜蛾是针对许多类型的作物的害虫。 [0006] 甘蔗螟(Diatraea saccharalis)主要侵袭甘蔗和甜玉米作物，但是也将侵扰其它寄主植物。幼虫钻入较老的植物的茎中，从而导致植物变得脆弱并且折断或死亡。在较幼小的植物中，叶片的内轮生体将死亡并且产量将受到影响。继发的真菌感染通常也可能作为蔗种掠食的结果而发生。在使用杀虫剂防治甘蔗螟方面已经取得了一定的成功，但是这些杀虫剂需要在幼虫钻入茎中之前施用于植物。 [0007] 大豆尺蠖(Chrysodeixis includens)是一种在北美洲和南美洲普遍存在的蛾。大豆尺蠖的幼虫可能会造成严重的叶面损害，从而导致重大的作物损失。大豆尺蠖难以使用杀虫剂加以防治。在非选择性杀虫剂去除了大豆尺蠖的天敌之后，可能会加剧大豆尺蠖的侵扰。 [0008] 棉铃虫(Helicoverpa zea)已经被称为在美国代价最高的作物害虫。棉铃虫难以使用杀虫剂加以防治，这是因为它们可以钻入植物中并且避免暴露于杀虫剂施用。棉铃虫有许多天敌，但是天敌和寄生蜂单独在预防棉铃虫所造成的作物植物损害方面是无效的。 [0009] 粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)是北美洲的一种破坏性作物害虫。在它们的幼虫阶段，它们每天要吃掉为它们体重三倍的植物材料。一旦它们在作物田间定居，它们就难以防治。 [0010] 西南玉米秆草螟(Diatraea grandiosella)在美国和墨西哥造成作物损害。据估计，西南玉米秆草螟每年造成数百万美元的损害。过冬之后出现的第一代幼虫以植物的轮生体为食并且可能导致植物的完全破坏(枯心)。随后在生长季节出现的第二代以叶腋为食并且最终钻入茎中，这可能导致环剥并且还可能导致植物死亡。 [0011] 苏云金芽孢杆菌是一种天然的土壤细菌。许多苏云金芽孢杆菌菌株在芽孢形成期间产生被称作δ-内毒素的晶体蛋白，所述蛋白可以用作生物杀虫剂。苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和库尔斯塔克亚种产生使一些幼虫的消化系统在数分钟内麻痹的晶体。幼虫最终死于来自毒素与靶标害虫的肠道组织的相互作用的多重毒害作用。苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种是可作为 (可获自瓦伦特生物科技公司，XenTari是瓦伦特生物科技公司的注册商标)商购获得的。苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种是可作为 (可获自瓦伦特生物科技公司，Dipel是瓦伦特生物科技公司的注册商标)商购获得的。SympaticoTM是一种商业产品，它是苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种发酵固体、芽孢、以及毒素的组合(也可获自瓦伦特生物科技公司)。 [0012] 使用苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的一个优势在于它们具有靶标特异性。它们不危害人类或其它非靶标物种。通常当用非选择性杀虫剂处理植物时，所述杀虫剂也会杀灭其它害虫的天敌。这可能会导致靶标昆虫或其它机会性害虫物种的反弹效应。举例来说，在施用非选择性农药杀灭玉米螟虫之后，蛛螨侵扰可能发生，这是因为非选择性农药也杀灭了蛛螨的天敌。 [0013] 苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的又另一个优势在于它们可以用于有机作物上。在没有强制的收获前时间间隔的情况下，它也可以在即将收获前用于作物上。这为具有很少的用于害虫防治的选择方案的有机种植者提供了一种安全和有效的方式来管理可能最终破坏整个作物的昆虫侵扰。 [0014] 因此，需要防治小菜蛾、甜菜夜蛾、甘蔗螟、大豆尺蠖、棉铃虫、粉纹夜蛾以及西南玉米秆草螟的安全和有效的方式。这些方法应当易于施用，具有提高的功效，并且有成本效益。发明内容 [0015] 本发明涉及用于防治小菜蛾(Plutella xylostella)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)、甘蔗螟(Diatraea saccharalis)、大豆尺蠖(Chrysodeixis includens)、棉铃虫(Helicoverpa zea)、粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)、以及西南玉米秆草螟(Diatraea grandiosella)的方法，所述方法包括向植物施用协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种，其中苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率是约1:0.001至约1:3.5。具体实施方式 [0016] 申请人发现以约1:0.001至约1:3.5的比率范围使用苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种和苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种提供抗特定的鳞翅目物种的预料不到的协同效应。这种协同效应是预料不到的，这是因为对处理的响应是高度物种特异性的和不可预测的。 [0017] 苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种协同混合物可安全用于食用植物上。所述混合物的组分同样安全用于有机种植的食用植物上。此外，所述混合物的组分具有靶标特异性并且对有益昆虫或动物构成低至零风险。 [0018] 本发明的另一个优势在于苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的组合与害虫综合管理(IPM)原则相一致。本发明的两种苏云金芽孢杆菌菌种的混合物使幼虫暴露于更广泛的毒素。这意味着苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的混合物可以在同一个季节反复施用以及年复一年反复施用，且具有最低的产生抗性的风险。 [0019] 本发明的又另一个优势在于它允许更少的苏云金芽孢杆菌被施用于植物。举例来说，在标签施用量内，可以施用每一种的亚致死剂量以实现致死剂量和对幼虫的防治。这允许种植者显著节约成本。 [0020] 另一个优势在于苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种具有靶标特异性。这意味着人类和其它非靶标生物体，如小菜蛾、甜菜夜蛾、甘蔗螟、大豆尺蠖、棉铃虫、粉纹夜蛾、以及西南玉米秆草螟的天敌将不会受到本发明的方法危害。 [0021] 在一个实施方案中，本发明涉及用于防治作物植物害虫的方法，所述害虫选自由以下各项组成的组：小菜蛾(Plutella xylostella)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)、甘蔗螟(Diatraea saccharalis)、大豆尺蠖(Chrysodeixis includens)、棉铃虫(Helicoverpa zea)、粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)、以及西南玉米秆草螟(Diatraea grandiosella)，所述方法包括向植物施用协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种，其中苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率是约1:0.001至约1:3.5。 [0022] 如本文所用的“作物植物害虫”仅指小菜蛾(Plutella xylostella)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)、甘蔗螟(Diatraea saccharalis)、大豆尺蠖(Chrysodeixis includens)、棉铃虫(Helicoverpa zea)、粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)、以及西南玉米秆草螟(Diatraea grandiosella)。 [0023] 在一个优选的实施方案中，苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率是约1:0.01至约1:3。在一个更优选的实施方案中，苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率是约1:0.1至约1:2.5。 [0024] 在另一个实施方案中，本发明涉及用于防治作物植物害虫的方法，其中苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种/苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的量是每公顷约5克至约400克。在一个优选的实施方案中，苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种/苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的量是每公顷约10克至约350克。在一个更优选的实施方案中，苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种/苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的量是每公顷约25克至约300克。 [0025] 在另一个实施方案中，本发明涉及用于防治作物植物害虫的方法，其中苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种/苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的量是约7,000IU/mg至约200,000IU/mg。在一个优选的实施方案中，苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种/苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的量是约20,000IU/mg至约170,000IU/mg。在一个更优选的实施方案中，苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种/苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的量是约25,000IU/mg至约100,000IU/mg。 [0026] 在又另一个实施方案中，本发明涉及用于防治作物植物害虫的方法，其中苏云金芽孢杆菌的总量是约1,000夜蛾属(Spodoptera)U/mg至约100,000夜蛾属U/mg。在一个优选的实施方案中，苏云金芽孢杆菌的量是约10,000夜蛾属U/mg至约90,000夜蛾属U/mg。在一个更优选的实施方案中，苏云金芽孢杆菌的量是约15,000夜蛾属U/mg至约70,000夜蛾属U/mg。 [0027] 尽管在一些实施方案中，苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的施用量是以克/公顷、IU/mg、或夜蛾属U/mg表示的，但是本发明不限于这些测量效力的方法。如果其它产品是用其它效力测量结果来开发或销售的，那么基于申请人在本文中的教导，将施用量转换成与本文中的本发明相一致的有效量以实现对靶标作物植物害虫的协同防治在本领域技术人员的知识范围内。 [0028] 此外，本发明不限于特定类型的制剂。举例来说，在本文的实施例中，使用未配制的技术粉末作为苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的来源。然而，可以使用制剂作为这些活性剂的来源，包括但不限于可乳化的悬浮液、可湿性粉末制剂、水可分散的颗粒、干燥可流动的颗粒、以及其它颗粒。 [0029] 合适的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的亚种菌株包括但不限于VBTS-1857、GB413和GC-91、以及其转化缀合、重组和/或遗传工程亚种。 [0030] 合适的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种商业产品包括但不限于 (如上文所示，可获自瓦伦特生物科技公司，XenTari是瓦伦特生物科技公司的注册商标)、Solbit(可获自绿色生物科技公司)、 (可获自Certis公司，Bacchus是Certis美国有限责任公司的注册商标)、 (可获自Certis公司，Agree是Certis美国有限责任公司的注册商标)、 (可获自Certis公司，Jackpot是Certis美国有限责任公司的注册商标)、以及(可获自Certis公司，Turex是Certis美国有限责任公司的注册商标)。 [0031] 合适的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的亚种菌株包括但不限于VBTS-2546、VBTS-2528、BMP-123、EG-2348、EVB113-19、HD-1、PB-54、SA-11、SA-12、SB4、Z-52、EG-7841、以及其转化缀合、重组和/或遗传工程亚种。 [0032] 合适的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种商业产品包括但不限于 (如上文所示，可获自瓦伦特生物科技公司，DiPel是瓦伦特生物科技公司的注册商标)、BMP 123(可获自贝克尔微生物公司)、Lepinox Plus(可获自CBC Biogard公司)、Rapax(可获自CBC Biogard公司)、Bioprotec 3P(可获自AEF全球公司)、Bacillus Chemia(可获自Chemia公司)、Biolarv(可获自Agrimix公司)、Bacillus Agrogen WP(可获自亚瑟尔有限公司)、Merger/Belthirul(可获自普洛贝尔特公司)、 (可获自Certis公司，Delfin是 Certis美国有限责任公司的注册商标)、 WG(可获自Certis公司，Javelin是Certis美国有限责任公司的注册商标)、 (可获自Certis公司，Costar是Certis美国有限责任公司的注册商标)、 (可获自Certis公司，Deliver是Certis美国有限责任公司的注册商标)、BeTa Pro(可获自巴斯夫公司)、Biolep(可获自生物科技国际有限公司)、Full-Bac WDG(可获自贝克尔微生物公司)、Bacillus MiPeru WP(可获自Manejos Integrados秘鲁股份公司)、以及 (可获自Certis公司，Crymax是Certis美国有限责任公司的注册商标)。 [0033] 在另一个实施方案中，本发明涉及用于防治作物植物害虫的方法，所述方法包括施用协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种，其中苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种与苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的比率是约1:0.001至约1:3.5，并且其中所述植物选自由以下各项组成的组：根和块茎类蔬菜、鳞茎类蔬菜、非芸苔属叶菜类蔬菜、芸苔属叶菜类蔬菜、多汁或干的豆科植物、果实类蔬菜、葫芦科蔬菜、柑橘类水果、仁果类水果、核果类水果、浆果和小果类、木本坚果、谷物、饲草和牧草以及干草、非草动物饲料、草药、香料、花卉、花坛植物、观赏花卉、朝鲜蓟、芦笋、咖啡、棉花、热带水果、啤酒花、暗绿叶黄体芋、花生、石榴、油籽蔬菜、甘蔗、烟草、草皮、以及豆瓣菜。 [0034] 在另一个实施方案中，所述作物植物是遗传修饰的。“遗传修饰的”作物植物是特定基因已经被去除、修饰或具有原生或外来DNA的额外基因拷贝的作物植物。作物植物的DNA的变化可能引起所述作物植物产生的可能影响它对非生物(例如除草剂)或生物(例如昆虫)胁迫的响应、和/或影响它的生长、发育、或产量的RNA、蛋白质和/或其它分子的类型或量的变化。 [0035] 在一个优选的实施方案中，根和块茎类蔬菜选自由以下各项组成的组：秘鲁胡罗卜、竹芋、宝塔菜、菊芋、菜用甜菜、糖用甜菜、牛蒡、食用美人蕉、胡萝卜、苦木薯、甜木薯、块根芹、根用佛手瓜、香菜芹、菊苣、荸荠、芋头(taro)、生姜、人参、辣根、食用蓝花蕉、根用欧芹、欧洲防风草、马铃薯、萝卜、东方萝卜、芜菁甘蓝、婆罗门参、鸦葱、西班牙婆罗门参、泽芹、甘薯、黄肉芋属、姜黄、芜菁、豆薯、食用山药、以及其栽培品种、变种和杂交种。 [0036] 在另一个优选的实施方案中，鳞茎类蔬菜选自由以下各项组成的组：新鲜细香葱叶、新鲜韭菜叶、鳞茎黄花菜、秀丽玉簪(elegans Hosta)、鳞茎贝母、贝母叶、鳞茎大蒜、大头鳞茎蒜、蛇鳞茎蒜、埃及韭葱(kurrat)、垂花葱(lady's leek)、韭葱、野葱、鳞茎百合、贝尔斯维尔分葱、鳞茎洋葱、中国鳞茎洋葱、新鲜洋葱、青葱、薤白、珍珠洋葱、马铃薯鳞茎洋葱、马铃薯鳞茎、珠芽圆葱顶、大葱顶、鳞茎胡葱、新鲜胡葱叶、以及其栽培品种、变种和杂交种。 [0037] 在另一个实施方案中，非芸苔属叶菜类蔬菜选自由以下各项组成的组：苋属菠菜、叶菜类苋属植物、芝麻菜(roquette)、刺菜蓟、芹菜、中国芹菜、芹莴苣、细叶芹、食叶菊花、茼蒿、野苣、独行菜、山芥、蒲公英、蒲公英叶、酢浆草属(dock)、苣荬菜(escarole)、甘茴香、结球莴苣、散叶莴苣、滨藜、欧芹、马齿苋、冬季马齿苋、红菊苣(red chicory)、大黄、菠菜、番杏、落葵、唐莴苣、三色苋、以及其栽培品种、变种和杂交种。 [0038] 在另一个实施方案中，芸苔属叶菜类蔬菜选自由以下各项组成的组：西兰花、芥兰(gai lon)、西洋菜苔(rapini)、球芽甘蓝、甘蓝、大白菜(bok choy)、卷心菜、芥菜(gai choy)、花椰菜、卡瓦卢西兰花(cavalo broccoli)、羽衣甘蓝、无头甘蓝、苤蓝、日本芜菁、芥菜叶、小松菜(mustard spinach)、油菜、以及其栽培品种、变种和杂交种。 [0039] 在又另一个实施方案中，多汁或干蔬菜豆科植物选自由以下各项组成的组：羽扇豆(Lupinus)、菜豆(Phaseolus)、豇豆(Vigna)、蚕豆(fava)、鹰嘴豆(garbanzo)、瓜尔豆、洋刀豆、扁豆、小扁豆、豌豆(Pisum)、木豆、大豆、未成熟种子大豆、刀豆、花生、以及其栽培品种、变种和杂交种。在一个优选的实施方案中，羽扇豆包括谷类羽扇豆、甜羽扇豆、白羽扇豆、白甜羽扇豆、以及其杂交种。在另一个优选的实施方案中，菜豆包括菜角豆、芸豆、利马豆、海军豆、斑豆、红花菜豆、四季豆、花菜豆、蜡豆、以及其杂交种。在又另一个优选的实施方案中，豇豆包括赤豆、长豇豆、黑眼豆、眉豆、中国长豆、牛豆、克劳德豌豆(Crowder pea)、蛾豆、绿豆、赤小豆、圆粒扁豆、黑绿豆、裙带豆、以及其杂交种。在另一个实施方案中，豌豆包括矮豌豆、食荚豌豆、皱粒豌豆、紫花豌豆、菜用豌豆、青豌豆、荷兰豆、蜜豆、以及其杂交种。在一个优选的实施方案中，干蔬菜豆科植物是大豆。在一个更优选的实施方案中，干蔬菜豆科植物是遗传修饰的大豆。 [0040] 在另一个实施方案中，果实类蔬菜选自由以下各项组成的组：灌木番茄、Cocona、醋栗番茄、菜用越橘、枸杞、红菇娘、角胡麻、奎东茄、秋葵、水茄、茄瓜、胡椒、非灯笼椒、玫瑰茄、司考特番茄田玫瑰茄(Scout tomato fields roselle)、茄子、全绿叶茄、非洲茄、龙珠果(sunberry)、粘果酸浆、番茄、树番茄、以及其栽培品种、变种和杂交种。在一个优选的实施方案中，胡椒包括灯笼椒、辣椒、烹饪胡椒、甘椒、甜椒、以及其杂交种。 [0041] 在一个实施方案中，葫芦科蔬菜选自由以下各项组成的组：佛手瓜、佛手瓜果、冬瓜(Chinese preserving melon)、枸橼西瓜、黄瓜、小黄瓜、食用葫芦、苦瓜属(Momordica)物种、香瓜、南瓜、西葫芦、笋瓜、西瓜、以及其栽培品种、变种和杂交种。在一个优选的实施方案中，食用葫芦包括黑欧坦瓜(hyotan)、库库扎瓜(cucuzza)、丝瓜、中国秋葵、以及其杂交种。在另一个优选的实施方案中，苦瓜属蔬菜包括胶苦瓜、香苦瓜、苦瓜、中国黄瓜以及其杂交种。在另一个优选的实施方案中，香瓜包括真哈蜜瓜、哈蜜瓜、卡萨巴甜瓜、克伦肖甜瓜、黄金培肖甜瓜、蜜瓜、蜜球瓜、柑瓜、波斯香瓜、菠萝瓜、圣诞老人瓜、菜瓜、以及其杂交种。在又另一个优选的实施方案中，西葫芦包括弯颈南瓜、扁圆南瓜、直筒南瓜、毛瓜、绿皮密生西葫芦、以及其杂交种。在另一个优选的实施方案中，笋瓜包括奶油南瓜、卡拉巴则瓜(calabaza)、古巴瓜(hubbard squash)、橡果南瓜、金丝瓜、以及其杂交种。 [0042] 在另一个实施方案中，柑橘类水果选自由以下各项组成的组：酸橙、四季橘、香橼、葡萄柚、日本夏季葡萄柚、金橘、柠檬、地中海柑橘、酸橙、甜橙、柚子(pummel)、温州蜜柑、立花橘、橘柚、橘柑、橘橙、中国柑橘树、丑橘、以及其栽培品种、变种和杂交种。在一个优选的实施方案中，酸橙选自由以下各项组成的组：澳洲沙漠青柠、澳洲指橘、澳洲圆酸橙、布朗河指橘、山白酸橙、新几内亚野生酸橙、甜酸橙、罗素河酸橙、塔希提酸橙、以及其杂交种。 [0043] 在一个实施方案中，仁果类水果选自由以下各项组成的组：苹果、南欧山楂果、海棠、枇杷、夏花山楂(mayhaw)、欧楂果、梨、沙梨、榅桲、木瓜、日本贴梗海棠、墨西哥山楂(tejocote)、以及其栽培品种、变种和杂交种。 [0044] 在另一个实施方案中，核果类水果选自由以下各项组成的组：杏、甜樱桃、酸樱桃、油桃、桃、李、奇克索李(Chicksaw plum)、乌制子李(Damson plum)、日本李、李杏、新鲜西梅、以及其栽培品种、变种和杂交种。 [0045] 在另一个实施方案中，浆果和小果类选自由以下各项组成的组：阿穆尔河葡萄、野樱莓、杨梅、熊果、覆盆子、黑莓、蓝莓、矮灌木蓝莓、高灌木蓝莓、香醋栗、水牛果、车果(che)、智利番石榴、美国稠李、阿龙尼亚苦味果、云莓、蔓越莓、三裂叶夹蒾、黑醋栗、红醋栗、接骨木果、欧洲小檗、醋栗、葡萄、食用金银花、越橘、醋栗杂交果(jostaberry)、唐棣(Saskatoon berry)、矮越桔、粉色西番莲、山胡椒浆果、桑椹、鸸鹋苹果(muntries)、天然醋栗、蔓虎刺莓、椴树果(phalsa)、欧洲酸樱桃、黑树莓、红树莓、番樱桃、沙龙白珠、五味子浆果、沙棘、花楸果、草莓、野生树莓、以及其栽培品种、变种和杂交种。在一个优选的实施方案中，黑莓包括安第斯黑莓、北极黑莓、彬格莱莓(bingleberry)、黑缎莓(black satin berry)、博伊森莓(boysenberry)、黑莓(brombeere)、加利福尼亚黑莓、切斯特莓、切诺基黑莓、夏安黑莓、普通黑莓、科瑞莓(coryberry)、达罗莓(darrowberry)、露莓、德克森无刺莓、常青黑莓、喜马拉雅莓、赫尔莓(hullberry)、拉瓦卡莓(lavacaberry)、罗甘莓、洛氏莓(lowberry)、卢克丽拉莓(Lucreliaberry)、猛犸黑莓、马里昂莓(marionberry)、莫拉莓(mora)、牟礼德龙斯莓(mures deronce)、耐克特莓(nectarberry)、北方露莓、奥拉里莓(olallieberry)、俄勒冈常青莓、非凡浆果(phenomenalberry)、阮杰莓(rangeberry)、雷文莓(ravenberry)、罗斯莓(rossberry)、肖尼黑莓(Shawnee blackberry)、南方露莓、塔伊莓(tayberry)、杨氏莓(youngberry)、萨尔萨莫拉莓(zarzamora)、以及其杂交种。 [0046] 在另一个实施方案中，木本坚果选自由以下各项组成的组：苦杏仁、山毛榉坚果、巴西坚果、胡桃、腰果、栗子、锥栗、榛子、山核桃坚果、澳洲坚果、美洲山核桃、开心果、黑胡桃、英国胡桃、以及其栽培品种、变种和杂交种。 [0047] 在另一个实施方案中，谷物选自由以下各项组成的组：大麦、荞麦、珍珠粟、黍、燕麦、玉米、饲料玉米、甜玉米、玉米种、爆裂种玉米、水稻、黑麦、高粱(milo)、高粱种、普通高粱、苏丹草(种子)、墨西哥类蜀黍、黑小麦、小麦、菰米、以及其栽培品种、变种和杂交种。在一个优选的实施方案中，所述谷物是玉米。在一个更优选的实施方案中，所述谷物是遗传修饰的玉米。 [0048] 在又另一个实施方案中，饲草、牧草以及干草选自由以下各项组成的组：除甘蔗和被包括在谷物组中的那些物种以外的禾本科(Gramineae)成员的草、牧场和牧区草、以及种植用于干草或青贮饲料的草。在另外的实施方案中，禾本科草可以是绿色的或晒干的。 [0049] 在一个实施方案中，非草动物饲料选自由以下各项组成的组：苜蓿、绒毛豆、白花三叶草、草木樨三叶草、野葛、胡枝子、羽扇豆、红豆草、车轴草、野豌豆、多变小冠花、紫云英、以及其栽培品种、变种和杂交种。 [0050] 在另一个实施方案中，草药和香料选自由以下各项组成的组：多香果、当归、茴芹、茴芹籽、八角、胭脂树籽、香脂草、罗勒、玻璃苣、地榆、黄春菊、刺山果花蕾、页蒿、黑页蒿、小豆蔻、桂皮、桂蕾、猫薄荷、芹菜籽、细叶芹、细香葱、中国葱、肉桂、南欧丹参、丁香花蕾、胡荽叶、胡荽籽、艾菊、刺芹叶、刺芹籽、芜荽叶、芜荽籽、小茴香、莳萝、莳萝籽、茴香、普通茴香、甘茴香籽、胡芦巴、天堂椒、苦薄荷、牛膝草、杜松子、熏衣草、香茅、圆叶当归叶、圆叶当归籽、肉豆蔻、万寿菊、墨角兰、薄荷、芥菜籽、旱金莲、肉豆蔻、欧芹、唇萼薄荷、黑胡椒、白胡椒、罂粟籽、迷迭香、芸香、藏红花、鼠尾草、夏香薄荷、山香薄荷、月桂、艾菊、龙蒿、百里香、香草、冬青、香车叶草、苦艾、以及其栽培品种、变种和杂交种。在一个优选的实施方案中，薄荷选自由绿薄荷、胡椒薄荷、以及其杂交种组成的组。 [0051] 在又另一个实施方案中，朝鲜蓟选自由以下各项组成的组：宝塔菜、菊芋、以及其栽培品种、变种和杂交种。 [0052] 在一个实施方案中，热带水果选自由以下各项组成的组：番荔枝、鳄梨、长毛猕猴桃、软枣猕猴桃、香蕉、大蕉、黄金果、杨桃(star fruit)、番石榴、龙眼、人心果、番木瓜、百香果、芒果、荔枝、菠萝蜜、火龙果、马米果(mamey sapote)、椰子、毛叶番荔枝、蛋黄果、孟思特果(monster)、莲雾、石榴、红毛丹、金毛丹、巴基斯坦桑椹、兰撒、榴莲蜜、榴莲、无花果菠萝、嘉宝果(jaboticaba)、山苹果、菠萝、以及其栽培品种、变种和杂交种。 [0053] 在另一个实施方案中，油籽蔬菜选自由以下各项组成的组：玻璃苣、金盏草、蓖麻、乌桕、棉籽、海甘蓝、萼距花、蓝蓟、大戟、月见草、亚麻籽、亚麻荠、兔耳草、芥末、希蒙得木、雷斯克勒(lesquerella)、新月花、白芒花、马利筋、尼日尔草籽、油萝卜、罂粟籽、玫瑰果、芝麻、琉璃菊、萝卜花、小帽桉、茶油植物、斑鸠菊、芥花、或油菜籽、红花、向日葵、以及其栽培品种、变种和杂交种。 [0054] 可以向种子、叶面、或其中意图种植植物的区域施用协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种。 [0055] 可以在生长季节期间一次或多次施用协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种。如果不止一次施用苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种，那么所施用的总量不应当超过由环境保护机构确定的每年最大施用量或相关标签施用量。 [0056] 如本文所用的“植物”指的是至少一株植物而不是植物群体。 [0057] 如本文所用的“防治(control)”或“防治(controlling)”意指幼虫对植物的损害量下降、害虫群体减少、干扰生命周期发展或引起植物保护的其它生理或行为效应。 [0058] 如本文所用，与量、重量百分比等有关的所有数值均被定义为“约”或“大致”每一个具体值，即加上或减去10％。举例来说，短语“至少5.0重量％”应当被理解为“至少4.5重量％至5.5重量％”。因此，与要求保护的值相差10％以内的量由权利要求书的范围所涵盖。 [0059] 所公开的实施方案只是本文所公开的发明构思的示例性实施方案并且除非这样规定，否则不应当被认为具有限制性。 [0060] 以下实施例意图说明本发明并且教导本领域的普通技术人员如何产生和使用本发明。它们不意图以任何方式进行限制。 [0061] 实施例 [0062] 以下实施例说明了苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种(“Bta”)和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种(“Btk”)在防治小菜蛾、甜菜夜蛾、甘蔗螟、大豆尺蠖、棉铃虫、粉纹夜蛾、以及西南玉米秆草螟时的协同效应。在以下实施例中使用工业级粉末。在以下每一个实施例中，进行如下研究。 [0063] 对于这些测试，使用标准化实验室浸叶法以在一种或多种处理存在下对植物材料进行接种。将干的经过处理的叶片放入含有用500μl蒸馏水(“dH2O”)润湿的滤纸的皮氏培养皿(100mm×25mm)中。然后用5只至10只幼虫侵扰每一个培养皿，这取决于物种。以指定的时间间隔进行功效评定。对每一个测试计算协同效应评定。 [0064] 实施例1：小菜蛾 [0065] 在该研究中，观测小菜蛾幼虫对协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种(“Bta”)和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种(“Btk”)的响应。该研究的结果可以见于下表1中。 [0066] 表1 [0067] [0068] 如在表1中所看到，本发明的混合物提供了大于累加的效应。通过使用下式，本发明的申请人能够确定这一响应是协同的：Cexp％＝A+B-(AB/100)。 [0069] Cexp％＝A+B-(AB/100)，其中Cexp％是预期功效并且“其中A和B是由单一[杀虫剂]所提供的控制水平。如果通过实验观测到的混合物的功效Cobs与混合物的预期功效之间的比率大于1，那么在所述混合物中存在协同相互作用。”(Gisi,Synergisitic Interaction of Fungicides in Mixture,The American Phytopathological Society,86:11,1273-1279,1996)。采用保守方法，申请人将确定在≥1.15的比率协同效应是否存在。 [0070] 施用10ppm(10μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种。施用3.125ppm(3.125μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种。以10ppm苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和3.125ppm苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的浓度施用苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种/苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种混合物。 [0071] 在该测定中指示协同效应的协同效应比是在正常田间比率下(或随着活性成分会随时间推移因暴露于雨水、UV辐射、以及温度极限而发生降解自然发送的比率)在田间将看到的协同效应的预测因子。选择该测定是因为它能够准确地预测幼虫在田间的死亡率。 [0072] 该计算的结果表明协同效应比是1.02(在24小时)和2.02(在48小时)。由于高于1指示协同效应(根据Gisi，或甚至根据申请人，≥1.15)的发现，因此2.02的比率是协同的。在1:3.2的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率显示出协同效应。 [0073] 实施例2：甜菜夜蛾 [0074] 在该研究中，观测甜菜夜蛾幼虫对协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的响应。该研究的结果可以见于下表2中。 [0075] 表2 [0076] [0077] 如在表2中所看到，本发明的混合物提供了大于累加的效应。通过使用下式，申请人能够确定这一响应是协同的：Cexp％＝A+B-(AB/100)。 [0078] 施用10ppm(10μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种。施用3.125ppm(3.125μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种。以10ppm苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和3.125ppm苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的浓度施用苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种/苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种混合物。 [0079] 该计算的结果表明协同效应比是1.43(在24小时)和2.43(在48小时)。由于高于1指示协同效应的发现，因此1.43和高于1.43的比率是协同的。在1:3.2的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率显示出协同效应。 [0080] 实施例3：粉纹夜蛾 [0081] 在该研究中，观测粉纹夜蛾幼虫对协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的响应。该研究的结果可以见于下表3中。 [0082] 表3 [0083] [0084] 如在表3中所看到，本发明的混合物提供了大于累加的效应。通过使用下式，申请人能够确定这一响应是协同的：Cexp％＝A+B-(AB/100)。 [0085] 施用10ppm(10μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种。施用3.125ppm(3.125μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种。以10ppm苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和3.125ppm苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的浓度施用苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种/苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种混合物。 [0086] 该计算的结果表明协同效应比在48小时是2.71。由于高于1指示协同效应的发现，因此2.71的比率明显是协同的。在1:3.2的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率显示出协同效应。 [0087] 实施例4：甘蔗螟 [0088] 在该研究中，观测甘蔗螟幼虫对协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的响应。该研究的结果可以见于下表4中。 [0089] 表4 [0090] [0091] 如在表4中所看到，本发明的混合物提供了大于累加的效应。通过使用下式，申请人能够确定这一响应是协同的：Cexp％＝A+B-(AB/100)。 [0092] 施用10ppm(10μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种。施用3.125ppm(3.125μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种。以10ppm苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和3.125ppm苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的浓度施用苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种/苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种混合物。 [0093] 该计算的结果表明协同效应比是2.57(在24小时)和1.26(在48小时)。由于高于1指示协同效应的发现，因此1.26和高于1.26的比率是协同的。在1:3.2的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率显示出协同效应。 [0094] 实施例5：西南玉米秆草螟 [0095] 在该研究中，观测西南玉米秆草螟幼虫对协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的响应。该研究的结果可以见于下表5中。 [0096] 表5 [0097] [0098] 如在表5中所看到，本发明的混合物提供了大于累加的效应。通过使用下式，申请人能够确定这一响应是协同的：Cexp％＝A+B-(AB/100)。 [0099] 施用10ppm(10μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种。施用3.125ppm(3.125μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种。以10ppm苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和3.125ppm苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的浓度施用苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种/苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种混合物。 [0100] 该计算的结果表明在24小时和48小时没有协同效应。 [0101] 实施例6：大豆尺蠖 [0102] 在该研究中，观测大豆尺蠖幼虫对协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的响应。该研究的结果可以见于下表6中。 [0103] 表6 [0104] [0105] 如在表6中所看到，本发明的混合物提供了大于累加的效应。通过使用下式，申请人能够确定这一响应是协同的：Cexp％＝A+B-(AB/100)。 [0106] 施用25ppm(25μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种。施用10ppm(10μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种。以25ppm苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和10ppm苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的浓度施用苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种/苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种混合物。 [0107] 该计算的结果表明协同效应比在24小时和48小时是1.96。由于高于1指示协同效应的发现，因此1.96的比率是协同的。在1:2.5的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率显示出协同效应。 [0108] 实施例7：棉铃虫 [0109] 在该研究中，观测棉铃虫幼虫对协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的响应。该研究的结果可以见于下表7中。 [0110] 表7 [0111] [0112] 如在表7中所看到，本发明的混合物提供了大于累加的效应。通过使用下式，申请人能够确定这一响应是协同的：Cexp％＝A+B-(AB/100)。 [0113] 施用25ppm(25μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种。施用10ppm(10μg/ml)的浓度的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种。以25ppm苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和10ppm苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种的浓度施用苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种/苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种混合物。 [0114] 该计算的结果表明协同效应比在24小时是2.0。由于高于1指示协同效应的发现，因此2.0的比率是协同的。在1:2.5的苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率显示出协同效应。 [0115] 综上所述，观测到对抗小菜蛾、甜菜夜蛾、甘蔗螟、大豆尺蠖、棉铃虫、粉纹夜蛾以及西南玉米秆草螟的协同效应。