[0001] 【相关申请的交叉引用】

[0002] 本申请要求提交于2008年12月4日的美国临时申请No.61/119,763的权益。【技术领域】

[0003] 本发明涉及乳头密封制剂和它们用于治疗和预防动物乳腺炎中的用途。【背景技术】

[0004] 乳腺炎是奶牛的最常见的疾病。在商业畜群中，由于降低的乳质量造成的成本可为极其显著的。此成本可由减少的产率和从生产流抑制污染的乳的需要造成。

[0005] 乳腺炎是由于一些形式的损伤导致的乳房组织的炎症应答，最常见的是细菌感染。炎症应答由乳腺组织和乳中血蛋白和白细胞增加构成。此应答的目的旨在毁坏刺激物、修复损伤的-组织和恢复乳房的正常功能。

[0006] 发炎的特征在于：(a)乳房肿胀，其中持续的发炎导致乳房内组织损伤和分泌组织被非生产性结缔组织取代，(b)乳凝固，其中这些凝块是冷凝的白细胞、分泌细胞和蛋白，和(c)更低乳产率。

[0007] 乳腺炎在细菌经过乳管且进入被称为乳池的部分乳头后开始。此可在2个主要时期发生：哺乳期间或非-哺乳(干)期间。

[0008] 在哺乳期间，挤奶期间通常发生乳头侵入。当容许挤奶单元中有不期望的空气时，乳中或在乳头端存在的生物进入乳管及乳池。挤奶后，乳管保持膨胀1～2小时而损伤的乳头管可永久性地部分打开。此使来自环境的或在损伤的皮肤发现的生物更容易进入乳管。细菌香衬于乳池及管的组织的附着可阻止在挤奶期间冲洗出及辅助建立感染。细菌最终进入腺组织，在那里它们影响肺泡细胞。由细菌产生的毒素导致分泌乳的上皮细胞的死亡或对分泌乳的上皮细胞的损伤，及这些细胞向血流产生增加血管通透性的物质。此允许白细胞从血移动到小泡，在那里它们通过吞噬细菌发挥作用。

[0009] 在哺乳期结束和一旦挤奶季节性地停止时，乳管通过形成天然的角蛋白乳头栓关闭。此一般发生2～3周的时期。但是在形成此乳头栓之前，乳管开启且高度易患于细菌感染。在乳头栓发育不良时也如此，有持续感染的机会。的确，对于多数牛耗时1和9周之间形成此栓，且达5％的牛不形成此栓。一般50％的乳头可在干燥的10天后仍“开启”(见，例如，Williamson JH，Woolford MW，Day AM.The prophylactic effect of a dry cow antibiotic against Streptococcus uberis.New Zealand Veterinary Journal(1995)43，228-234)。

[0010] 为阻止干期间乳腺炎的新病例，许多农民用乳房内抗生素的预防性处理来处理牛。这以与抗生素输注的糊剂或凝胶形式施用。使用注射器直接将材料经在乳头基部开口插入乳管。乳腺炎的防止依赖于乳管保留以杀死任何可在干时期进入乳管的细菌的足够的抗生素。

[0011] 但是最近对有关所述抗生素预防剂在奶牛中的用途有增加的关心。这是由于2原因：(a)乳中抗生素残留物的潜力，其可在产生基于培养的奶产品时，导致乳处理器问题和(b)发展对于跨从动物到人株的抗生素的细菌抗性的潜力。

[0012] 此问题的有趣的解决方案是设计来在乳管内创建机械屏障的模拟牛天然的角蛋白乳头栓的作用的乳房内物品的开发。通过应用所述屏障，在乳管被角蛋白栓的形成所密封的点之前从细菌进入潜在保护牛。

[0013] 已建议此人工机械屏障可形成的各手段。这些包括：(a)膜屏障(例如，U.S.专利No.6,030,633)，其中将膜形成喷雾应用于乳头外侧和基部，(b)硅酮等构成的物理栓(例如，U.S.专利公开No.20070239181)，其设计来发挥用于乳头栓形成的基材的作用、或本身发挥乳头栓的作用及插入乳管，(c)重金属惰性糊剂(例如，U.S.专利Nos.6,506,400、6,340,469和6,254,881)，其通过注射器施加，且设计为在乳管阻断管一次，直到通过新生牛犊吸吮乳头的作用、或通过农民手动挤奶或“剥去”糊剂而放出。

[0014] 在这些情况中，这些屏障不含抗生素或任何种类的抗-感染剂。新感染的防止单纯依赖于跨乳头开口或在乳管内形成的屏障的完整性。但是，如在干燥期挤奶停止后立即的乳压力的建立可导致乳从乳头泄漏及破坏天然的角蛋白栓形成，此相同的事件可导致这些非天然的物理屏障的损伤。

[0015] 实际上，对重金属乳头密封剂处理的牛处理的100天后的乳头的X射线成像揭示，至少部分密封材料“消失”(见、例如、Woolford，M.W.，Williamson，J.H.，Day，A.M.and Copeman，P.J.A.(1998)The prophylactic effect of a teat sealer on bovine mastitis during the dry period and the following lactation.NZ Vet.J.46：12-19)。乳头密封剂材料可在乳腺内片段化或迁移到更高位置。或者其可由于由牛的移动产生的乳腺压力的建立或由于持续但降低的乳产生而经乳管压出。

[0016] 因此，如在天然的角蛋白栓上一样有机会通过人工物理屏障感染。

[0017] 因此，存在对不辅助以上讨论的问题的更佳乳头栓产品的需要。

[0018] 【发明概述】

[0019] 提供制剂，其包括植物油和碱式硝酸铋，其中制剂是凝胶或糊剂。制剂优选含来自植物油的天然的抗-感染剂，且由此具有抗-感染性质。制剂对于治疗或预防动物乳房组织的乳腺炎有用。

[0020] 也公开治疗或预防动物乳房组织的乳腺炎或发炎的方法。本文中公开的制剂可与乳房组织接触来预防或治疗乳腺炎。

[0021] 也提供制备本文中描述的制剂的方法。本文中描述的制剂可通过接触或混合制剂成分以形成凝胶或糊剂的任何知道的方法制备。【附图说明】

[0022] 图1显示通过周输注的乳头密封剂的平均(SEM)log10重量(g/腺)。

[0023] 【发明详述】

[0024] 本发明涉及包括一种或多种植物油和碱式硝酸铋的兽医学或药学制剂和它们的制备方法和用途。制剂作为乳头密封剂来预防或治疗动物乳腺炎有用。

[0025] 本文中描述的制剂通过它们形成物理屏障来阻止新细菌或真菌感染进入和活跃地阻止细菌围绕或通过乳头栓应欠完美形成的乳头栓介质进入的能力有益。理想情况下，这些额外的防御性性质将不依赖于抗生素、不同于天然的抗-感染剂，其可导致在牛或乳中潜在的抗生素残留。

[0026] 除非别样解释，本文中使用的全部技术和科学术语具有与本公开所属领域技术人员通常明白的相同的含义。单数术语“a”、“an”和“the”包括复数个指示物，除非上下文明显表示别的。类似地，词汇“或”旨在包括“和”，除非背景明显表示别的。

[0027] 本文中使用的术语“动物”包括全部哺乳动物、鸟和鱼，且也包括全部脊椎动物，包括人。其也包括全部发育阶段(包括胚胎和胚胎阶段)的个体动物。本文中使用的术语″家畜动物″指任何人以使用目的或商业目的畜养的动物品种或群。例如，所述动物包括，但限于：牛(牛)、羊(绵羊)、猪(猪(porcine)或猪(swine))、家禽(禽)等。本文中使用的术语“牛(cow)”或“牛(cattle)”通常指任何年龄的牛来源的动物。可互换的术语包括“牛(bovine)”、“牛犊(calf)”、“steer”、“公牛(bull)”、“小母牛(heifer)”、“牛(cow)”等。本文中使用的术语“猪”通常指任何年龄的猪来源的动物。可互换的术语包括“小猪(piglet)”、“母猪(sow)”等。

[0028] 需知，在本公开且尤其在权利要求和/或段落中，术语例如“包括(comprises)”、“包括(comprised)”、“包括(comprising)”等可具有美国专利法中规定的含义；例如，它们可指“包括(includes)”、“包括(included)”、“包括(including)”等；且术语例如“基本上由...构成(consisting essentially of)”和“基本上由...构成(consists essentially of)”具有美国专利法规定的含义，例如，它们允许未明确地叙述的要素，但排除现有技术中发现的或影响本发明的基本的或新特征的要素。

[0029] 本发明部分基于申请人的以油不具有从密封剂迁移出及进入周围的组织的趋势的方式含有重金属密封剂基础材料的低水平的已知具有抗-感染性质的天然的植物油提取物制剂的发现。

[0030] 在一实施方式中，本发明涉及乳头密封制剂，其包括至少一种植物油和碱式硝酸铋，其中所述制剂是凝胶或糊剂。凝胶或糊剂可还包括液状石蜡、硬脂酸铝和/或二氧化硅。植物油选自：百里香(野生)油、百里香(红)油、百里香(香叶醇)油、肉桂树皮油、肉桂叶油，及其混合物。植物油可以约1％～约15％w/w、约1％～约14％w/w、约1％～约13％w/w、约1％～约10％w/w、约2％～约12％w/w、约2％～约11％w/w、约2％～约10％w/w、约3％～约9％w/w、约3％～约8％w/w、约4％～约8％w/w、约4％～约7％w/w、约
4％～约6％w/w、约1％～5％w/w、约1％w/w、约1.5％w/w、约2％w/w、约2.5％w/w、约
3％w/w、约3.5％w/w、约4％w/w、约4.5％w/w或约5％w/w的量存在。而且，植物油可为肉桂树皮或肉桂叶油，其可以约1％～约10％w/w、或约1％～5％w/w，或约2.5％～5％w/w的量存在。在另一实施方式中，植物油可为百里香油，其可以约1％～约10％w/w、约1％～
5％w/w，或约1％～3％w/w的量存在。

[0031] 本发明的一实施方式是将低水平的天然的已知具有抗-感染性质的植物油提取物以油不具有从密封剂迁移出及进入周围的组织的趋势的方式添加到重金属密封剂基料。

[0032] 许多油可潜在地用于此目的。油从植物的籽、树皮、花、根或其他部分提取。可在本发明中使用的一些已显示的具有抗-感染性质的植物提取物油的非-限制列表包括：三叶木通(Akebia trifoliate)，紫花苜蓿(Medicago sativa)、紫朱牛舌草(Alkanna Tinctoria)、美 国 小 檗(Berberis Canadensis)，杏 仁 (Prunis amygdalis)，白 蔹(Ampelopsis Japonica)，黄 栌 木 (Berberis amurensis)，黄 蘖 (Phellodendron Amurense)，香 脂 檀 (Amyris blsamifera)，狭 叶 当 归(Angelica anomala)，茴 芹(Pimpinella anisum)，印度草木樨(Melilotus indicus)，苹果(Malus domestica)，新疆紫草(Arnebia euchroma)，澳洲檀香(Santalum spicatum)、白芷(Angelica dahurica)，白术(Atractylodes macrocephala)，黄 芩(Scutellaria baicalensis)，腺叶 小 檗(Berberis georgii)，欧 洲 小 檗(Berberis Vulgaris)、长 距 淫 羊 藿 (Epimedium grandiflorum)，罗勒(Ocimum basilicum)，香叶多香果(Pimenta racemosa)，月桂果(Lauri fructus)，月桂叶油(Lauri folii aetheroleum)，北柴胡(Bupleurum chinense)，北沙参(Glehnia littoralis)，桂皮钓樟(Lindera benzoin)，安息香树 (Styrax benzoin)，香柠檬(Citrus bergamia)，侧柏(Thuja orientalis)，白桦(Betula Alba)，黑桦(Betula lenta)，苦杏仁(Prunus dulcis)，茴香(Foeniculum vulgare)，苦橙(Citrus aurantium)，天蓝苜蓿(Medicago lupulina)，胡椒(Piper Nigrum)，美花小檗(Berberis calliantha)，湖北小檗(Berberis gagnepainii)，香杨梅(Myrica gale)，波耳多叶(Boldo folium)，玻璃苣(Borago Officinalis)，宁夏枸杞(Lycium barbarum)，补骨脂(Psoralea corylifolia)，山布枯(Barosma Betulina)，鼠李树皮(Frangulae cortex)，白鲜 (Dictamnus albus)，酸 刺 柏 (Juniperus Oxycedrus)，白 千 层 (Melaleuca leucadendra)，白千层(Melaleuca leucadendron)，菖蒲(Acorus Calamus)，羽叶十大功劳(Mahonia pinnata)，母 菊 (Matricaria recutita)，母 菊 (Matricariae flos)，樟(Cinnamomum camphora)，葛缕子(Carum carvi)，葛缕子油(Carvi aetheroleum)，小豆蔻(Elettaria Cardamomum)，康乃馨(Dianthus Caryophyllus)，野胡萝卜(Daucus carota)，蓖麻(Ricinus communis)，北美圆柏(Juniperus Virginiana)，北非雪松(Cedrus Atlantica)，芹菜(Apium graveolens)，多茎奥尔曼力斯(Ormenis Multicaulis)，黄兰花(Michelia champaka)，车前子(Plantago asiatica)，金樱子(Rosa laevigata)，天冬(Asparagus cochinchinensis)，中 国 小 檗(Berberis chinensis)，枸 杞 (Lycium Chinense)，黄皮树(Phellodendron chinense)，山楂(Crataegus pinnatifida)，细梗十大功 劳 (Mahonia fortunei)，细 叶 益 母 草(Leonurus sibiricus)，芍 药 (Paeonia Lactiflora)，石竹 (Dianthus chinensis)，荸 荠(Eleocharis dulcis)，具 芒 小 檗(Berberis Aristata)，菊花(Dendranthema x grandiflorum)，锡兰肉桂(Cinnamomum zeylanicum)，肉 桂(Cinnamonum cassia)，亚 香 茅(Cymbopogon nardus)，香 茅 油(Citronellae aetheroleum)，香 紫 苏 (Salvia sclarea)，辣 蓼 铁 线 莲 (Clematis mandschurica)，丁香(Eugenia caryophyllata)，丁香(Syzygium aromaticum)，丁香油(Caryophylli Aetheroleum)，欧洲苍耳(Xanthium strumarium)，椰子(Cocos nucivera)，白茅(Imperata cylindrica)，科罗拉多小檗(Berberis fendleri)，鸡冠花(Celosia argentea cristata)，康德郎皮(Condurango cortex)，日本黄连(Coptis japonica)，芫荽(Coriandrum sativum)，芫荽树皮(Coriandri aetheroleum)，山茱萸属(Cornus spp.)，云木香(Saussurea costus)，云木香根(Sassuriea costus)，草棉(Gossypium herbaceum)，苹 果(Malus sylvestris)，冬 青 叶 十 大 功 劳(Mahonia repens)，东 芎 (Cnidium Officinale)，孜然芹(Cuminum cyminum)，地中海柏木(Cupressus sempervirens)，柏木油(Cupressi aetheroleum)，Cyrtomium fortunei，贯众(Cyrtomium fortunei)，特纳草(Turnera Diffusa)，达氏小檗(Berberis darwinii)，鸭跖草(Commelina communis)，莳萝(Anethum graveolens)，木贼(Equisetum hyemale)，矮小十大功劳(Mahonia pumila)，西洋接骨木(Sambuci flos)，土木香(Inula helenium)，吕宋橄榄(Canarium luzonicum)，土 香薷 (Elsholtzia ciliata)，蓝桉 (Eucalyptus globules)，桉树 油 (Eucalypti aetheroleum)，月见草(Oenothera Biennis)，小茴香(Foeniculi aetheroleum)，龙胆(Gentianae cortex)，香脂冷杉(Abies Balsamea)，白千层(Melaleuca linariifolia)，萝卜(Raphanus sativus oleiformis)，升麻(Cimicifuga foetida)，红鸡蛋花(Plumeria Rubra)，乳 香(Boswellia carteri)，法 国 蔷 薇 (Rosa Gallica)，瞿 麦 (Dianthus superbus)，过江藤(Phyla nodiflora)，密花紫堇(Corydalis solida)，高良姜(Alpinia Officinarum)，古蓬阿魏(Ferula Galbaniflua)，大花栀子(Gardenia grandiflora)，韭菜(Allium tuberosum)，蛇鞭菊(Liatris spicata)，龙胆属(Gentiana spp.)，香叶天竺葵(Pelargonium graveolen)，姜(Zingiber Officinale)，皂荚(Gleditsia sinensis)，金钟花(Forsythia viridissima)，白毛茛(Hydrastis Canadensis)，三叶黄 连(Coptis trifolia)，葡萄柚(Citrus paradisii)，石菖蒲(Acorus gramineus)，牛蒡(Arctium Lappa)，泽泻 (Alisma plantago-aquatica)，仙 鹤 草(Agrimonia pilosa)，何 首 乌(Polygonum multiflorum)，白叶蜡菊(Helichrysum angustifolium)，大麻(Cannabis Sativa)，散沫花(Lawsonia inermis)，有棱小檗(Berberis angulosa)，圣罗勒(Ocimum sanctum)，蔓生盘叶忍冬(Lonicera caprifolium)，啤酒花(Humulus Lupulus)，赤果椒(Ptelea trifoliata mollis)， 辣 根 (Armoracia rusticana)， 厚 朴 (Magnolia Officinalis)， 胡 黄 连 (Picrorhiza scrophulariiflora)， 黄 精 (Polygonatum sibiricum)，黄连(Coptis Chinensis)，黄荆(Vitex negundo)，膜英黄芪(Astragalus Membranaceus)，风信子(Hyacinthus orientalis)，白芨(Bletilla Striata)，神香草(Hyssopus Officinalis)，水晶兰(Monotropa uniflora)，商陆(Phytolacca acinosa)，土木香(Inula graveolens)，洋常春藤(Hedera helix)，乌梅(Prunus mume)，日本小檗(Berberis thunbergii)，忍冬(Lonicera japonica)，槐树(Sophora japonica)，秦椒(Zanthoxylum Piperitum)，日 本 女贞 (Ligustrum Japonicum)，茉 莉花 (Jasminium grandiflorum)，素方花(Jasminum officinale)，欧刺柏(Juniperus Communis)，杜松子(Juniperi fructus)，大三叶升麻(Cimicifuga heracleifolia)，朝鲜小檗(Berberis koreana)，藿香(Agastache rugosa)，红松(Pinus Koraiensis)，朝鲜白头翁(Pulsatilla koreana)，苦参(Sophora flavescen)，胡黄连(Picrorhiza kurroa)，岩蔷薇(Cistus Ladaniferus)，月桂(Laurus Nobilis)，薰衣草(Lavandula angustifolia)，熏衣草(Lavandulae aetheroleum)，阔叶十大功劳(Mahonia bealei)，柠檬(Citrus limonum)，柠檬油(Citri aetheroleum)，柠檬茶树(Leptospermum petersonii)，柠檬过江籐(Lippia Citriodora)，曲序香茅(Cymbopogon flexuosus)，柠檬桉(Eucalyptus citriodora)，柠檬茶树(Leptospermum liversidgei)，益母草(Leonurus japonicus)，射干(Belamcanda Chinensis)，葶 苈 (Lepidium apetalum)，小 牛 蒡 (Arctium Minus)，来 檬 (Citrus aurantifolia)，裂橄榄(Bursera delpechiana)，欧洲椴(Tilia cordata)，椴树花(Tiliae flos)，亚麻(Linum usitatissimum)，亚麻籽油(Lini oleum)，山鸡椒(Litsea Cubeba)，枇杷(Eriobotrya Japonica)，莲(Nelumbo Nucifera)，马兜铃(Aristolochia debilis)，茶树(Melaleuca Alternifolia)，麦哲伦海峡小檗(Berberis buxifolia)，Mahoberberis aquisargentii，十大功劳属(Mahonia spp.)，银杏(Ginkgo biloba)，玉米(Zea mays)，墨角纶(Majorane herba)，欧洲鳞毛蕨(Dryopteris Filix-mas)，红橘(Citrus reticulata)，乳 香 色 百 里 香(Thymus mastichina)，香 蜂 花 (Melissa Officinalis)，蜂花叶(Melissae folium)，蜂花油(Melissae aetheroleum)，墨西哥十大功劳(Mahonia haematocarpa)，三叶十大功劳(Mahonia trifoliolata)，银荆树(Acacia dealbata)， 薄 荷 (Prostanthera rotundifolia)， 薄 荷 油 (Menthae arvensis aetheroleum)，牡 丹 (Paeonia Suffruticosa)，芥 菜 (Brassica juncea)，没 药(Balsamodendron myrrha)，没药(Commiphora myrrha)，香桃木(Myrtus Communis)，旱金莲(Tropaeolum majus)，尼 泊 尔 老 鹳 草 (Geranium nepalense)，苦 橙 (Citrus aurantium)，绿花白千层(Melaleuca viridiflora)，香附子(Cyperus rotundus)，肉豆蔻(Myristica fragrans)，欧洲栎(Quercus cortex)，橡苔(Evernia prunastri)，油橄榄(Olea europaea)，甜橙(Citrus cinensis blossom)，牛至(Origanum valgare)，冬青叶十大功 劳(Mahonia Aquifolium)，香 橙(Mahonia nervosa)，萝 卜(Raphanus sativus niger)，苏合香(Liquidambar orientalis)，西班牙牛至(Thymus capitatus)，桂花(Osmanthus fragrans)，芍药属(Paeonia spp.)，玫瑰草(Cymbopogon martinii)，三七(Panax pseudoginseng)，红辣椒(Capsici fructus acer)苹果(Malus pumil)，洋芫荽(Petroselinum sativum)，绿叶刺蕊草(Pogostemon patchouli)，败酱属(Patrinia spp.)，花生(Arachis hypogaea)，单叶佩兰(Eupatorium japonicum)，菥蓂(Thlaspi arvense)，唇萼薄荷(Mentha pulegium)，辣薄荷(Mentha piperita)，欧薄荷油(Menthae piperitae aetheroleum)，秘鲁胶树(Miroxylon balsamum)，橙子(Citrus aurantium)，欧洲赤松(Pinus Sylvestris)，猫刺小檗(Berberis soulieana)，伞形梅笠草(Chimaphila umbellate)，石榴(Punica Granatum)，马铃薯(Solanum tuberosum)，紫苏(Perilla frutescens nankinensis)， 商 陆 (Phytolacca esculenta)， 前 胡 (Peucedanum praeruptorum)，青蒿(Artemisia annua)，萝卜(Raphanus sativus)，欧洲油菜(Brassica napus)，鼠尾萝卜(Raphanus sativus caudatus)，芳香罗文莎(Ravensara aromatica)，百里香(Thymus serpyllum)，烈香杜鹃(Rhododendron anthopogon)，大黄(Rhei radix)，长叶车前草(Plantago lanceolata)，意大利芝麻菜(Eruca vesicaria sativa)，白花春黄菊(Anthemis Nobilis)，突厥蔷薇(Rosa Damascena)，蔷薇天竺葵(Pelargonium rosa)，麝香蔷薇(Rosa mochata)，锈红蔷薇(Rosa Rubiginosa)，迷迭香(Rosmarinus Officinalis)，迷迭香叶(Rosmarini folium)，迷迭香油(Rosmarini aetheroleum)，降香(Aniba rosaedora)，头 状 胡枝 子 (Lespedeza capitata)，芸 香(Ruta graveolens)，红 花(Carthamnus tinctorius)，红花(Carthamus tinctorius)，番红花(Crocus Sativus)，药鼠尾草(Salvia Officinalis)，鼠尾草(Salviae aetheroleum)，鼠尾草叶(Salviae folium)，锥 花 小 檗 (Berberis aggregate)，檀 香 (Santalum Album)，大 血 藤(Sargentodoxa cuneata)，五 味 子 (Schisandra chinensis)，玄 参 (Scrophularia ningpoensis)，夏枯草(Prunella Vulgaris)，芝麻(Sesamum Indicum)，山茱萸(Cornus Officinalis)，紫 苏 (Perilla frutescens)，肖 酸 浆(Nicandra physaloides)，蓍(Achillea sibirica)，白花蛇舌草(Oldenlandia diffusa)，皂树(Quillaia saponins)，鬼针草(Bidens bipinnata)，薰衣草叶鼠尾草(Salvia Lavandulaefolia)，留兰香(Mentha spicata)，宽叶薰衣草(Lavandula latifolia)，匙叶甘松(Nardostachys jatamansi)，斑点梅笠草(Chimaphila maculate)，加拿大铁杉(Tsuga Canadensis)，假茴香(Illicium anisatum)，八角茴香(Illicium Verum)，络石(Trachelospermum jasminoide)，荨麻(Urticae herba)，虎耳草(Saxifraga Stolonifera)，细枝雾冰藜(Bassia scoparia)，圆叶茅膏菜(Drosera rotundifolia)，葵花(Helianthus divaricatus)，牛至(Origana majorana)，甜橙(Citrus senensis)，万寿菊(Tagetes glandulifera)，艾菊(Tanacetum vulgare)，蒲公英属(Taraxacum spp.)，狭叶青蒿(Artemisia dracunculus)，滨蒿(Artemisia scoparia)，紫菀(Aster tataricus)，茶树(Melaleuca Alternifolia)，得克萨斯十大功劳(Mahonia swaseyi)，阿尔泰柴胡(Bupleurum Falcatum)，百里香(Thymus vulgaris)，百里香油(Thymiaetheroleum)，香叶风轮菜(Satureja thymbra)，天南星(Arisaema Consanguineum)，臭椿(Ailanthus altissima)，芍药属(Paeonia spp.)，栝楼(Trichosanthes Kirilowii Japonica)，鱼 腥 草 (Houttuynia Cordata)，晚 香 玉(Polianthes Tuberosa)，姜 黄(Curcuma Longa)，油 桐 (Aleurites Fordii)，缬 草(Valeriana officinalis)，扁叶香果兰(Vanilla planifolia)，毛小檗 (Berberis tomentosa)，马鞭草(Verbena Officinalis)，岩兰草(Vetiveria zizanoides)，香堇菜(Viola odorata)，蜡杨梅(Myrica Cerifera)，葱(Allium fistulosum)，桑(Morus Alba)，白芥(Sinapis alba)，细辛(Asarum Sieboldii)，赝靛(Baptisia Tinctoria)，平铺白珠树(Gaultheria procumbens)，欧洲菘蓝(Isatis Tinctoria)，刺五加(Eleutherococcus gracylistylus)，兴安升麻(Cimicifuga Dahurica)，欧亚旋复(Inula Britannica)，山芍药(Paeonia Lactiflora)，千叶蓍(Achillea illefolium)，欧蓍草(Millefolii herba)，茵陈蒿(Artemisia capillaries)，依兰(Cananga Odorata)，云连(Coptis teeta)，香橙(Citrus junos)，爪哇过江藤(Lippia Javanica)。

[0033] 各油含可具有一系列临床效应(例如抗-细菌或抗-真菌)的成分的混合剂。

[0034] 表1.精油的精确成分

[0035]精油 主要成分(含量)
肉桂树皮油 桂醛(63.1％)
香茅油 橙花醛(33.2％)，香叶醛(37.8％)
紫苏油 苧烯(18.9％)，紫苏醛(60.8％)
百里香(野生)油 香芹酚(80.0％)
百里香(红)油 苧烯(25.8％)，γ-萜品烯(19.4％)，麝香草酚(25.5％)
百里香(香叶醇)油 香叶醇(32.7％)，乙酸香叶酯(55.6％)
辣薄荷油 p-薄荷酮(19.5％)，薄荷醇(63.5％)
茶树油 γ-萜品烯(17.7％)，萜品烯-4-醇(42.5％)
芫荽油 里哪醇(73.2％)
熏衣草(穗)油 1，8-桉树脑(23.7％)，里哪醇(46.3％)，樟脑(17.1％)
熏衣草(真)油 里哪醇(30.1％)，乙酸里哪酯(36.6％)
迷迭香油 α-蒎烯(24.1％)，1，8-桉树脑(23.5％)，樟脑(19.7％)
桉树(radiata)油 1，8-桉树脑(74.3％)，α-萜品醇(10.3％)
柠檬油 苧烯(83.1％)

[0036] 制剂可包括铋、例如碱式硝酸铋，或重碱式硝酸铋。本发明还包括其他铋盐、例如但不限于：氯氧化铋、碱式碳酸铋、碱式没食子酸铋、碱式水杨酸铋或碲化铋。在一实施方式中、铋、例如碱式硝酸铋、可以约40％～约90％w/w、约45％～约85％w/w、约50％～约80％w/w、约55％～约75％w/w或约60％～约70％w/w的量存在。在另一实施方式中，碱式硝酸铋可以约50％～约70％w/w的量存在。

[0037] 本发明可也包括液状石蜡。液状石蜡或矿油是较重烷的混合物，且具有数个名称，包括：奴约耳、adepsine油、alboline、glymol、医药石蜡、saxol或USP矿油。在一实施方式中、液状石蜡可以约5％～约50％w/w、约10％～约45％w/w、约15％～约40％w/w、约20％～约35％w/w或约25％～约30％w/w的量存在。在另一实施方式中，液状石蜡可以约
25％～约40％w/w的量存在。

[0038] 本发明可也包括硬脂酸盐、例如但不限于：硬脂酸铝、硬脂酸铵、硬脂酸钡、硬脂酸丁酯、硬脂酸镉、硬脂酸钙、硬脂酸钴、硬脂酸铜、乙二醇硬脂酸酯、硬脂酸锂、硬脂酸镁、硬脂酸锰、硬脂酸甲酯、硬酯酸钠、硬脂酸锶或硬脂酸锌。在一实施方式中，硬脂酸盐是硬脂酸铝。硬脂酸盐、例如硬脂酸铝、可以约0.1％～约10％、约1％～约5％、约2％～约4％w/w、约2％～约3％w/w、约2.1％～约2.9％w/w、约2.1％～约2.8％w/w、约2.2％～约2.7％w/w、约2.2％～约2.6％w/w、约2.3％～约2.5％w/w、约2.3％～约2.4％或约2.3％w/w的量存在。在另一实施方式中，硬脂酸铝可以约1.5％～约4％w/w的量存在。

[0039] 在另一实施方式中，其中来自牛的乳最终用于生产干酪，制剂可在凝胶基料中包括无铋，非-毒性重金属盐(见，例如，WO 2008/045920)。此无铋制剂在乳加工成干酪中尤其有用，其中视觉缺陷，称为″黑斑缺陷″(BSD)，取小，黑斑点(直径约0.5～5mm)的形式，在整个老化的干酪呈现。斑点是降低受问题影响的干酪的质量等级(及因此降低市场价值)的纯美感上的、视觉缺陷。斑点不伴随干酪的任何感观缺陷。尽管相比未受影响的干酪等级更低，受黑斑点影响的干酪仍可销售。在此实施方式中，制剂可包括植物油载质、液状石蜡、硬脂酸铝、二氧化硅和非-毒性重金属盐，例如但不限于：二氧化钛、氧化锌、硫酸钡或任何它们的组合。

[0040] 本领域熟知用于本文中描述的制剂的有用的增稠剂。发挥增稠剂的作用的化合物包括，例如、纤维素、淀粉、天然胶、硫代甘油、合成的聚合物、例如聚乙烯吡咯烷酮或(甲基)丙烯酸的聚合物和共聚物等。在一实施方式中，增稠剂包括一种或多种羧甲纤维素钠(CMC)、羟丙基纤维素、黄多糖胶和羟乙基淀粉。增稠剂可以约0.1％～约30％的量存在。在另一实施方式中，增稠剂是氧化硅，例如二氧化硅。在另一实施方式中，二氧化硅的浓度是约0.1％w/w、约0.2％w/w、约0.3％w/w、约0.4％w/w、约0.5％w/w、约0.6％w/w、约0.7％w/w、约0.8％w/w、约0.9％w/w、约1％w/w、约2％w/w、约3％w/w、约4％w/w或约5％w/w。在另一实施方式中，二氧化硅可以约0.1％～约2％w/w的量存在。

[0041] 凝胶基料可为任何适宜凝胶制剂，药学领域知道其宿主。优选的凝胶基料包括硬脂酸铝和液状石蜡(例如矿油，白色矿脂，黄矿脂，等)。典型的凝胶基料包括一些类型的蜡或油、及盐，例如硬脂酸铝或硬脂酸镁。在本发明的另一实施方式中，凝胶包括聚乙烯凝胶。凝胶可基于低密度聚乙烯或高密度聚乙烯。

[0042] 可添加遮光剂来修饰流变学及可由此增强制剂的稳定性。遮光剂包括、例如、氧化锌或二氧化钛和可以约0.5％～约2.5％量存在。尤其优选二氧化钛。本领域技术人员熟知这些化合物。

[0043] 附加地，本文中描述的制剂可含其他惰性成分，例如抗氧化剂和防腐剂。这些化合物是制剂领域熟知。可将抗氧化剂，例如，α生育酚、抗坏血酸、棕榈酸抗坏血酸酯、富马酸、苹果酸、抗坏血酸钠、焦亚硫酸钠、棓酸n-丙酯、BHA(丁基化的羟基茴香醚)、BHT(丁基化的羟基甲苯)硫代甘油等添加到本制剂。抗氧化剂通常以基于制剂总重量的约0.01％～约2.0％的量，尤其优选以约0.05％～约1.0％的量添加到制剂。在制剂中以约0.01％～约2.0％，尤其优选约0.05％～约1.0％的量适宜地使用防腐剂，例如对羟基苯甲酸酯(羟苯甲酯和/或羟苯丙酯)。其他防腐剂包括：苯扎氯铵、苄索氯铵、苯甲酸、苯甲醇、溴硝丙二醇、羟苯丁酯、西曲溴铵、氯己定、三氯叔丁醇、氯甲酚、甲酚、羟苯乙酯、咪脲、羟苯甲酯、苯酚、苯氧乙醇、苯基乙醇、乙酸苯汞、硼酸苯汞、硝酸苯汞、山梨酸钾、苯甲酸钠、丙酸钠、山梨酸、硫柳汞等。这些化合物的范围包括约0.01％～约5％。

[0044] 可着色剂将添加到本发明的制剂。本发明涵盖的着色剂是本领域通常知道的那些。特定着色剂包括，例如，染料、铝色淀、焦糖色、基于氧化铁的着色剂或前述之任何的混合物。尤其优选有机染料和二氧化钛。优选的范围包括约0.5％％～约25％。

[0045] 本发明的制剂可包装入填充有单剂量的本发明的乳头密封剂的注射器。剂量可为约1g、约2g、约3g、约4g、约5g、约6g、约7g、约8g或约9g。在一实施方式中，本发明的制剂通过注射器施加，及设计为在乳管中阻断管一次，直到通过新生牛犊吸吮乳头的作用、或通过农民手动挤奶或“剥去”糊剂或凝胶而放出。

[0046] 本发明也含盖处理动物以预防或治疗乳腺炎的方法，包括给动物施用有效量的本文中描述的任何制剂。优选地，动物乳房组织与本文中描述的制剂接触。制剂可注射或输注进乳房组织。乳房组织包括乳头的全部组织和结构，包括乳管及乳池及周围的组织。“处理(treatment)”或“处理(treating)”被定义为应用或施用本发明的组合物，其中动物患乳腺炎、乳腺炎症状、或向乳腺炎发展的倾向，其中目的旨在治愈、痊愈、减轻、消除、改变、改善、改善或影响疾病、疾病症状，或向疾病发展的倾向。

[0047] 本发明也含盖防止或减少动物乳房组织发炎的方法，包括将组织与本文中描述的制剂接触。在一个实施方式中，制剂控制细菌生长、尤其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、乳房链球菌(Streptococcus uberis)及大肠杆菌。本文中使用的术语“阻止”和“防止”指在治疗时间处理动物至无乳腺炎或乳房组织发炎症状。

[0048] 本发明也含盖制备本文中描述的制剂的方法。将制剂成分接触或混合以形成凝胶或糊剂。任何知道的配制凝胶或糊剂的方法在制备本文中描述的制剂中有用。

[0049] 本发明还通过以下非-限制实施例描述，其进一步阐述本发明，且不旨在也不可解释为限制本发明的范围。【实施例】

[0050] 【实施例1.乳头密封剂基础制剂】

[0051] 为测试潜在的基于植物的油以需要的方式工作的能力，开发了基础制剂。此制剂如下：

[0052] 表2：乳头密封剂

[0053]材料 ％w/w
液状石蜡 25-30％
硬脂酸铝 2.3
二氧化硅 1
植物油载质 1-10％
碱式硝酸铋(重) 至体积

[0054] 制剂通过以下描述的制备方法制备。

[0055] 表3：制备方法

[0056]乳头密封剂
1 负荷液状石蜡，并开始加热
2 添加硬脂酸铝
3 持续混合着加热
4 冷却和添加部分碱式硝酸铋
5 持续混合添加其余碱式硝酸铋
6 添加二氧化硅，植物油提取物并持续混合

[0057] 制备含碱式硝酸铋和辣薄荷油或2.5％和5％肉桂树皮油和2.5％肉桂叶油之任一种的乳头密封剂测试样品。

[0058] 进行体外测试，以测定：天然的抗-感染剂可最适合掺入乳头封闭介质；将适当的试剂水平；与知道的基于抗生素的乳房内制剂( 头孢洛宁糊剂8.3％w/w，Merial，Duluth，GA)比较的可具有的试剂活性。

[0059] 也测试可商购的不含抗-感染剂的乳头密封剂产品( 碱式硝酸铋65％w/w，Pfizer，纽约，NY)作为阴性对照。此测试结果显示，如所预期，产品未展示抗-感染活性(表4)。

[0060] 用于测试的方法基于AATCC测试方法147-1998(织物材料的抗细菌活性评定：平行划线法)。

[0061] 各测试中使用的测试生物是：

[0062] 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)ATCC 6538

[0063] 乳房链球菌(Streptococcus uberis)ATCC 19436

[0064] 大肠杆菌ATCC 8739

[0065] 将测试生物根据需要从浓储培养物到适当的维持培养基亚培养。在无菌0.85％氯化钠溶液中由这些制备悬浮液到视觉上与1的McFarland标准相当的密度。使用这些细菌肉汤悬浮液用无菌棉花拭子在测试培养基上划平行线。

[0066] 将50ml的胰蛋白酶大豆琼脂营养培养基(TSA)分注到135mm皿。各板用适当的生物以3个平行条线接种。

[0067] 将约0.1g的测试产品均匀地施加到整个铝箔载质表面。初步测试揭示，铝箔无针对测试生物的抗微生物效应。然后在培养基上垂直于测试生物的平行条线放置载质。

[0068] 抗细菌活性通过含产品的载质周围清晰区域的有或无、及载质下生长的有或无来测量。全部产品和对照以一式两份进行。

[0069] 区域测量指有测试样本的载质和任何清晰区域任意侧的总宽度(以mm的)。如果未观察到清晰区域，记录0mm的结果。

[0070] 表4：商业乳头密封剂的抗细菌活性

[0071]

[0072] 【实施例2.含辣薄荷的乳头密封制剂】

[0073] 对含辣薄荷油的乳头密封制剂(知道有抗-感染性质的材料)进行测试。将这些与可商购的 糊剂制剂比较。在此测试中，样品不展示任何针对分析期间使用的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)及乳房链球菌(Streptococcus uberis)株的抗微生物活性。

[0074] 表5：含辣薄荷油的乳头密封剂的抗细菌活性

[0075]

[0076] 然后进行测试以测定是否更高水平的辣薄荷油可产生更佳结果。针对100％辣薄荷油样品测试了此5％材料。

[0077] 表6：含辣薄荷油的乳头密封剂的抗细菌活性

[0078]

[0079] 辣薄荷油未以增加的水平显示满意的结果。

[0080] 【实施例3.含肉桂树皮油或肉桂叶油的乳头密封制剂】

[0081] 掺入变化的水平的肉桂叶或肉桂树皮油制备了乳头密封介质样品。

[0082] 表7：含肉桂油的乳头密封剂的抗细菌活性

[0083]

[0084] 肉桂树皮和叶油产品分别以2.5和5％水平显示针对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)及乳房链球菌(Streptococcus uberis)的活性。5％树皮产品也显示良好的针对大肠杆菌的活性。此活性被认为高度可接受，给定对于油提取物的包含的原理旨在辅助阻止新细菌通过或围绕乳头密封剂材料进入，且因此在乳管中创建更有效的屏障。

[0085] 也在加速的应激条件下测试了测试制剂。当样品暴露于55℃的温度4周时未观察到成分的物理分离。

[0086] 【实施例4.含百里香油、桉树油和茴香籽油的乳头密封制剂】

[0087] 测试了其他已知具有抗细菌性质的潜在油。这些包括：百里香油、桉树油和茴香籽油，以及其他基于植物的油。

[0088] 表8：乳头密封制剂的抗细菌活性

[0089]

[0090] 测试的3种油中，百里香油被证明具有强烈的抑制性。基于此惊人的结果，测试降低的浓度的百里香油，以测定是否仍可产生满意的活性水平。

[0091] 表9：基于百里香油的乳头密封制剂的抗细菌活性

[0092]

[0093] 结果显示，为了维持针对全部3种主要乳腺炎病原体的抑制的程度，期望在选择的制剂基料中包括高于2％的浓度水平的百里香油。

[0094] 【实施例5.乳头密封制剂的保留测试】

[0095] 牛乳房中乳房内乳头密封剂的保留受包括粘度在内的数种因素的影响。对本文中描述的一批制剂在体温进行粘度测试，并与Pfizer 比较。此测试结果是，本文中描述的基础制剂展示与 相当的粘度。

[0096] 本文中描述的制剂掺入约65％w/w碱式硝酸盐及硬脂酸铝胶凝剂。

[0097] 也对本文中描述的制剂样品和 进行实验，其中，将各1g样品放进个垂直管，并加热到40℃。然后记录各样品行进4cm距离下管所耗时间。结果是，样品的平均所耗时间是49分钟，而本文中描述的制剂样品的平均所耗时
间是53分钟。此测试中2种产品之间的差异不显著。

[0098] 可预期在实际条件下本文中描述的制剂的保留与 相当。但是，正如 可在一些条件下或乳房中片段化，本文中描述的制剂也有发生此现
象的可能性。在这些情况下，由于干期显著的部分的新乳房内细菌感染是由于乳房链球菌(Streptococccus uberis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)或大肠埃希氏菌(Escherichia coli)所致，选择的植物油预期发挥对于新细菌感染进入的额外的屏障的作用。

[0099] 由于在体外研究中，其他油被证明具有一些程度的抑制，因此决定用1％和3％百里香油制剂进行更多测试。根据欧洲药典使用百里香油：

[0100] 描述：通过从新鲜开花的百里香(T.vulgaris L.)、洋百里香(T.zygis Loefl.ex L.)或两个物种的混合物气生部分蒸汽蒸馏来获得精油。

[0101] 呈现：清晰、黄或非常暗棕红色，含特征性，芳香，香辣气味的流动液体，暗示麝香草酚。

[0102] 溶解度：与乙醇及与汽油混溶。

[0103] 关键成分：

[0104] β-香叶烯：1.0％～3.0％，

[0105] -γ-萜品烯：5.0％～10.0％，

[0106] -p-伞花烃：15.0％～28.0％，

[0107] -沉香醇：4.0％～6.5％，

[0108] -萜品烯-4-醇：0.2％～2.5％，

[0109] -麝香草酚：36.0％～55.0％，

[0110] -香芹酚：1.0％～4.0％。

[0111] 样品根据以下配方制备；

[0112] 表10：基于百里香油的乳头密封配方

[0113]编号 材料 ％w/w
1 液状石蜡重 26.7
2 氢氧化铝凝胶 2.3
3 二氧化硅 1
4 碱式硝酸铋(重) 65-67
6 百里香油 1-3.0

[0114] 进行实地研究来比较可商购的 非-抗感染性制剂和2种基于百里香油的制剂(1％和3％百里香油)之间的保留及前/后腺肿胀/疼痛。

[0115] 【基于百里香油的制剂在乳管中的保留】

[0116] 评价了输注后乳管内 和2种基于百里香油的制剂持续的持续时间。在各20头牛中，将阳性对照制剂(即 )和百里香油制剂之一输注到
各2个腺(对于百里香油制剂是左后LR和右前RF，和对于 产品是左前LF
和右后RR)。基于以下标准选择牛：在之前的哺乳中具有＜200,000的最大体细胞计数、无临床乳腺炎的历史及＞60天的预期干期。乳头密封制剂的输注发生在最后一次哺乳挤奶后及无菌制备乳头端后。输注之前，测定牛的直肠温度，触诊乳腺是否有任何热或肿胀。在输注的15分钟后、再次测定直肠温度，以及再触诊腺。

[0117] 在输注后的2、4、6和8周检查牛，和触诊后评定各牛的各腺是否有肿胀或疼痛。在各时间点，随机选择之前分别用1％百里香油、3％百里香油和 处理的5、5和10个腺，及压出乳头密封剂。进行此选择，以至于在各时间点仅压出1个腺/牛。以存在或不存在评分乳头密封剂，及使来自各1/4的乳通过过滤纸，及空气-干燥乳头密封剂，然后称重。压出乳头密封剂后，再次将商业 制剂输注到腺。

[0118] 【分析】

[0119] 使用单变量χ2分析、以周和处理作为自变量分析丢失乳头密封剂的腺的比例。乳头密封剂重量非正态分布。因此分析重量的log10(+1以算未发现乳头密封剂的腺)。使用线性混合模型、以周和治疗作为固定效应及牛作为随机效应、以牛内周为重复的变量和使用复合对称协方差结构分析此数据。

[0120] 【结果】

[0121] 募集后，将10头牛用1％百里香油(n＝20个腺)和 处理，并将11牛用3％百里香油(n＝22腺)和 处理。

[0122] 【输注前后的靶动物安全性数据】

[0123] 在输注的之前及15分钟后平均直肠温度分别是36.9℃(SEM＝0.2)和37.6℃(SEM＝0.1)，最高温度是38.6℃。

[0124] 输注前，在检查的84个腺中的22个中检测到轻微肿胀(分值2)。一个额外的腺(在 组肿)发现在输注的15分钟后肿大(表11)。输注前，在84个腺中的8个中检测到轻微疼痛(分值2)及输注后则无腺检测到(表11)。

[0125] 表11.输注1管1％或3％基于百里香油的乳头密封制剂或商业乳头密封剂后的15分钟时和之前被评分为具有肿胀(分值2)或疼痛(分值2)的腺的数和百分率。

[0126]

[0127] 【输注后】

[0128] 总12个腺在处理后的一些时间点被确定为具有‘肿胀’。全部这些是2分(即最低阳性分值)。发现分别用1％百里香油、3％百里香油和 输注的全部腺(腺×4个时间点)的5(6.2％)、3(3.4％)和4(2.4％)具有肿胀(表12)。

[0129] 以LF、LR、RF和RR腺的分别2、1、1和1检测到疼痛，在全部时间点最大分值是2。在分别用1％百里香油、3％百里香油和 处理的腺的1(1.2％)、2(2.3％)
和2(1.2％)个中检测右疼痛，全部在第4周(表12)。

[0130] 表12.在输注1％或3％百里香油或 的2、4、6和8周后检查时确定为具有肿胀(即分值2)或疼痛(即分值2)的腺的数和百分率

[0131]

[0132] 【乳头密封剂的存在】

[0133] 在研究的时间进程来自乳头密封剂丢失的腺的比例无差异(p＝0.75)。丢失速度对于1％百里香油、3％百里香油和 组分别是4/20(20％)、3/22(14％)和9/42(21％)的腺。周间丢失率无不同，在第2、4、6和8周分别19％、14％、24％和19％的腺丢失乳头密封剂材料(p＝0.89)。

[0134] 【乳头密封剂重量】

[0135] 处理之间乳头密封剂质量无差异(对于1％百里香油、3％百里香油和组分别是0.23±0.06对比0.20±0.05对比0.25±0.04(log10平均
±SEM)，p＝0.73)。无周效应(p＝0.79；图1)。也无通过周相互作用的处理(p＝0.14)。

[0136] 将本文中引用的或参考的全部文献(“本文中引用的文献”)、及本文中引用的文献中引用的或参考的全部文献、伴随本文中或通过引用并入本文中的任何文献中提及的任何产品的任何生产商的使用说明、描述、产品说明书、及产品清单通过引用并入本文中，及可在本发明的实践中采用。

[0137] 由此详细描述了本发明的优选的实施方式、需知，以上段落中定义的发明不限于以上说明书所示的特定细节，因为在不脱离本发明的精神或范围的情况下，许多明显的改变是可能的。