诱导牛生产双犊的方法

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诱导牛生产双犊的方法
申请号	CN201310195475.6	申请日	2013-05-23	公开(公告)号	CN103340700A	公开(公告)日	2013-10-09
申请人	中国农业大学;			发明人	田见晖; 曾维斌; 安磊; 吴中红;
摘要	本发明提供了一种诱导牛生产双犊的方法，本发明方法先使牛卵巢上的固有卵泡闭锁，以启动新的卵泡波发育，通过合理控制激素的注射剂量和时间，使卵泡波上出现共优势卵泡，并实现双排卵，再经人工授精使牛生产双犊。本发明方法对专业要求低，本领域技术人员或普通人工作人员按照常规的操作方法即可实现，在生产过程中不需要特殊的设备介入，从而节约了成本，提高了肉牛养殖的社会、经济效益。
权利要求	1.一种诱导牛生产双犊的方法，其包括如下步骤： 1）在处理第0天，给牛放置孕激素阴道栓，并注射孕激素和雌激素，使卵泡闭锁，并开启新的卵泡波发育； 2）在第4.5-6天，间隔10～14小时分4次注FSH，注射剂量依次为：5.5～6.5U/头， 5.5～6.5U/头，4.5～5.5U/头，4.5～5.5U/头，使卵泡波出现共优势卵泡； 3）在6.5-7.5天，注射雌激素反馈抑制FSH的分泌，使没达到优势化的小卵泡受抑制而不再发育； 4）在第8天，撤掉孕激素阴道栓，并注射雌激素，使大卵泡排卵； 5）在第9.5～10天，进行人工授精。 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1）孕激素和雌激素注射剂量分别为45～55mg/头和3.5～4.5mg/头。 3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤1）孕激素和雌激素注射剂量分别为50mg/头和4mg/头。 4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2）在第4.5-6天，间隔12小时分 4次注FSH，注射剂量依次为：6U/头，6U/头，5U/头，5U/头。 5.如权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤3）在6.5-7.5天，间隔10～14小时分3次注射雌激素，每次注射剂量0.15～0.25mg/头，并在后两次分别加注前列腺素，每次20～30mg/头。 6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤3）在6.5-7.5天，间隔12小时分 3次注射雌激素，每次注射剂量0.2mg/头，并在后两次分别加前列腺素，每次25mg/头。 7.如权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤4）在第8天，撤掉孕激素阴道栓，并注射1～2mg/头雌激素。 8.如权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤5）优选在第9.5天和第10天，进行两次人工授精，并在第一次人工授精时注射2mg/头促黄体生成素。 9.如权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，所述雌激素为苯甲酸雌二醇。 10.如权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，所述孕激素为孕酮。
说明书全文	诱导牛生产双犊的方法技术领域 [0001] 本发明涉及家畜繁殖领域，具体涉及诱导牛生产双犊的方法。背景技术 [0002] 牛属于单胎动物，自然状态下每年只能产一犊，为了提高其繁殖率让牛生产双犊，研究者试图通过各种方法控制牛体内大卵泡的发育数量，使得最终只有2个卵泡发育到排卵阶段，以达到生产双犊的目的。 [0003] 一种提高牛双排卵的模式是，刺吸排卵后4-6天≥5mm的所有卵泡(Acosta et al.,2005；Palhao et al.,2009)，在刺吸当天，致使FSH的浓度达到最低值(Kulick et al.,2001)。此后FSH的回升与新卵泡波的出现恰好达到同步，这样诱发了产生共优势卵泡（≥10mm）的机率。由于卵泡的刺吸太专业，故在生产中不便使用。另外，有研究（M.P.Palhao et al.,2010）在使用B超刺吸≥5mm的卵泡后，在预计卵泡优势化的后期注射小剂量的EB，没有引起共优势卵泡的发生。 [0004] 胚胎移植技术中，供体通过注射大剂量FSH可诱发牛多个卵泡的发育、产生超排。故有研究（G.Glick et al.,2013）使用小剂量的FSH来诱发牛的双排卵，虽然得到了90%的2-3个的排卵比例，但其程序是在实验的前13天使用了专门的同期发情处理，而且在实验的第7天使用了B超仪通过阴道壁刺吸了多于3个的大卵泡，以达到2-3个排卵数的目的，故在实践推广上，其操作对基层技术人员而言具有一定的难度。也有研究使用抑制素来调节体内FSH的分泌，虽然取得了一定的效果，但抑制素的制备较为复杂，商品化的药剂还未成形，故未能进行实践推广。 [0005] 近年来国外在牛的双排卵研究中，预先将试验牛经过同期发情处理，然后再采用B超仪经阴道壁刺吸≥5mm的卵泡，诱发牛体内FSH峰和卵泡波同时出现，以引起牛共优势卵泡的生长，达到双排卵的效果，显然这种方法需要较高的专业技能和昂贵的仪器设备，不能实现大批量的生产。发明内容 [0006] 本发明的目的在于，针对现有技术专业性强、成本高的不足，提供一种诱导牛生产双犊的方法。 [0007] 为实现上述目的，本发明诱导牛生产双犊的方法包括如下步骤： [0008] 1）在处理第0天，给牛放置孕激素阴道栓，并注射孕激素和雌激素，使卵泡闭锁，并开启新的卵泡波发育； [0009] 2）在第4.5-6天，间隔10～14小时分4次注射卵泡刺激素（FSH），注射剂量依次为：5.5～6.5U/头，5.5～6.5U/头，4.5～5.5U/头，4.5～5.5U/头，使卵泡波出现共优势卵泡； [0010] 3）在6.5-7.5天，注射雌激素反馈抑制FSH的分泌，使没达到优势化的小卵泡受抑制而不再发育； [0011] 4）在第8天，撤掉孕激素阴道栓，并注射雌激素，使大卵泡排卵； [0012] 5）在第9.5～10天，进行人工授精（AI）。 [0013] 上述步骤1）孕激素和雌激素注射剂量分别为45～55mg/头和3.5～4.5mg/头，优选注射剂量为50mg/头和4mg/头； [0014] 上述步骤2）优选在第4.5-6天，间隔12小时分4次注FSH，注射剂量依次为：6U/头，6U/头，5U/头，5U/头； [0015] 上述步骤3）在6.5-7.5天，间隔10～14小时分3次注射雌激素，每次注射剂量0.15～0.25mg/头，并在后两次分别加注前列腺素（PG），每次20～30mg/头，优选间隔12小时分3次注射雌激素，每次注射剂量0.2mg/头，并在后两次分别加PG，每次25mg/头； [0016] 上述步骤4）在第8天，撤掉孕激素阴道栓，并注射1～2mg/头雌激素，优选注射1.5mg/头雌激素； [0017] 上述步骤5）优选在第9.5天和第10天，进行两次AI，并在第一次AI时注射2mg促黄体生成素（LH）。 [0018] 上述雌激素包括但不限于苯甲酸雌二醇（EB）或戊酸雌二醇注射液（EV），优选为EB。 [0019] 上述孕激素包括但不限于孕酮（P4）或甲羟醋酸孕酮（MPA），优选为P4。 [0020] 本发明实例一种优选的方法是，在第0天，放入CIDR，并注射4mg EB和50mg P4；在4.5-6天，间隔12小时分4次注射FSH（6U/头，6U/头，5U/头，5U/头，Follicle Stimulating Hormone,SIOUX,USA）；在6.5-7.5天，间隔12小时分3次注射EB（0.2mg，0.2mg，0.2mg/头），并在后两次分别各加注1次律胎素（Lutalys:25mg，25mg/头）；在第8天，撤掉CIDR，并注射1.5mg EB；在第9.5天和第10天，进行两次AI，在第一次AI时注射2mg LH。 [0021] 本发明结合经典的牛同期发情程序和常用的超数排卵技术，根据几种激素对牛卵泡的作用特点，发现在精准的处理时间点，注射恰当的激素剂量，可达到诱发牛双排卵、生产双犊的目的。 [0022] 本发明步骤1），给青年牛放置孕激素阴道栓，并注射孕激素和雌激素，预计12小时后，牛体内FSH、LH的浓度将降到最低值，这使得卵巢上固有卵泡发育受到抑制而约在放栓后36小时发生闭锁，新的卵泡波在4天后开始出现。 [0023] 本发明步骤2），由于双排卵牛相比单排卵牛，新开启的卵泡波在大卵泡优势化（≥8.5mm）前、后，其FSH的浓度是前高后底。故本发明在卵泡优势化前注射小剂量的FSH，以卵泡波出现共优势卵泡；步骤3）在卵泡优势化后，通过注射雌激素反馈抑制FSH的分泌，使没达到优势化的小卵泡受抑制而不再发育，以保证大卵泡的数量不再过多增加。而雌激素的注射也符合双排卵牛在排卵前体内雌激素的浓度大于单排卵牛现象。 [0024] 本发明步骤4)和5)的处理就和常规的超排后期处理基本一致，都是刺激大卵泡排卵并进行AI。 [0025] 本发明方法对专业要求低，本领域技术人员或普通人工作人员按照常规的操作方法即可实现，在生产过程中不需要特殊的设备介入，从而节约了成本。 [0026] 牛属于单胎动物，且妊娠时间长，每年只能产一犊，其较低的繁殖率使得饲养成本很高，通过本发明的方法，可使肉牛排双卵并产双犊，有望极大的提高肉牛养殖的社会、经济效益。 [0027] 肉牛双犊的生产，可快速的增加了牛群的数量与产肉总量，直接增加肉牛养殖户的经济收入，并加快其资金周转，实现低成本、高收益的良好经济模式。另外，若肉牛每年都分娩双犊，则相当于节省了母牛整年的饲养、管理等成本，并成倍的减少了其粪便的等代谢物的处理费用。这不仅节约了有限的能源，还减少了环境的污染，同时也满足了市场对肉类的需求，此将为肉牛养殖业带来广阔的市场前景。附图说明 [0028] 图1是本发明方法的流程图。具体实施方式 [0029] 以下实施例用于进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制，在不背离本发明的精神和实质的前提下，对本发明所做的修改或等同替换均涵盖于权利要求的范围中。 [0030] 实施例1 [0031] 根据图1所示的流程，发明人对20头15-18月龄的青年牛（西门塔尔肉牛和荷斯坦奶牛各10头）进行了处理，在试验处理的第0天，放入CIDR（加拿大，AB公司），并注射4mg EB（宁波三生）和50mg P4（宁波三生）；在4.5-6天，间隔12小时分4次注射FSH（6， 6，5，5U/头，Follicle Stimulating Hormone,SIOUX,USA）；在6.5-7.5天，间隔12小时分3次注射EB（0.2mg，0.2mg，0.2mg/头），并在后两次各加注1次律胎素（Lutalys:25mg，25mg/头，美国辉瑞）；在第8天，撤掉CIDR，并注射1.5mg EB；在第9.5天和第10天，进行两次AI，在第一次AI时注射2mg LH。 [0032] 结果在诱发20只青年牛的研究中，产生双排卵牛数为16只，比例达到80%，产双犊肉牛9只，达45%，肉牛和奶牛之间没有显著性差异。