[0001] 本发明涉及使用2-desoxoparaherquamide和阿巴克丁的联合用药治疗寄生虫感染，特别是蠕虫感染的方法，和包含这些药物作为活性组分的新的驱虫组合物。

[0002] 发明背景

[0003] 控制人体和动物群体中的寄生虫感染仍然是全世界重要的努力方向。可以将致病性生物体分类为线虫纲(Nematoda)，绦虫纲(Cestoidea)和吸虫纲(Trematoda)或原生动物门(phylum Protozoa)类别的体内寄生虫的成员或节肢动物门(phylum Arthropoda)的体外寄生虫的成员。前者包括胃，肠道，淋巴系统，组织，肝，肺，心脏和脑的感染。实例包括旋毛虫病，淋巴丝虫病，盘尾丝虫病，血吸虫病，利什曼病，锥虫病，贾第虫病，球虫病和疟疾。

[0004] 后者，即外寄生虫包括虱，蜱，螨，biting flies，蚤和蚊子。它们通常作为将体内寄生虫传播到人或动物宿主的载体和中间宿主。

[0005] 尽管可以使用已知药物治疗某些蠕虫病，但是逐步发生耐药性要求在下一代驱虫药中对改善的功效进行进一步研究。

[0006] 控制体内和体外寄生虫长期以来被视为人和动保健方案中的重要方面。传统的治疗通过口服或局部给药进行，且实际上这类治疗仍然在广泛应用。然而，现代强力推荐的研究已经倾向于开发可以通过口服或非肠道对动物给药并且在各寄生虫摄入治疗动物血液时杀灭各寄生虫来控制体内和体外寄生虫群体的化合物。

[0007] 尽管大量杀外寄生虫药和杀内寄生虫药在应用中，但是它们存在各种问题，包括有限的活性谱，需要反复治疗和在许多情况中寄生虫产生耐药性。研发新的杀外寄生虫药和杀内寄生虫药治疗方法由此必需要确保安全性和对广泛寄生虫的有效控制。

[0008] 公布的国际专利申请WO2001/076370中披露了驱虫组合物，其包含螺二噁庚因丙基并吲哚(spirodioxepinoindole)，特别是paraherquamide或marcfortine衍生物或类似物和大环内酯，特别是除虫菌素或米尔倍霉素衍生物或类似物。

[0009] 较不易于产生耐药性的或对广泛寄生虫具有活性的活性剂的联合用药尤其需要。

[0010] 发明概述

[0011] 本发明的目的在于提供预防或治疗哺乳动物寄生虫疾病的方法，它广泛应用于一般对大环内酯类和其它类型的驱虫药产生耐药性的寄生虫。本发明的另一个目的在于提供新的驱虫组合物。本发明的另一个目的在于提供使用本发明的新组合物生产药物的方法。

[0012] 本发明在第一个实施方案中提供了治疗哺乳动物寄生虫感染的方法，包括同时或依次对该哺乳动物给予有效量的(a)2-desoxoparaherquamide和(b)阿巴克丁的步骤。

[0013] 本 发 明 在 另 一 个 实 施 方 案 中 提 供 了 驱 虫 组 合 物，其 包 括(a)2-desoxoparaherquamide和(b)阿巴克丁。该组合物可以任选进一步包含药学上可接受的载体。

[0014] 本发明在另一个实施方案中提供了上述组合物作为药物的应用。

[0015] 本发明在另一个实施方案中提供了上述组合物在制备用于治疗或预防哺乳动物寄生虫疾病的药物中的应用。

[0016] 本发明在另一个实施方案中提供了试剂盒，包括：(a)组合物：包含2-desoxoparaherquamide和任选药学上可接受的载体；和(b)阿巴克丁和任选的药学上可接受的载体，它们依次对哺乳动物给药。

[0017] 本发明在另一个实施方案中提供了在毛圆线虫(trichostrongyloid nematodes)群体减少大环内酯耐受性个体的频率的方法，包括使用有效量的(a)2-desoxoparaherquamide和(b)阿巴克丁治疗这类群体的步骤。

[0018] 发明详述

[0019] 本发明涉及预防和治疗寄生虫攻击宿主哺乳动物的方法并且提供了用于控制寄生虫生物体的新的工具。特别地，本发明提供了这类治疗方法，包括使用：

[0020] 2-desoxoparaherquamide；和

[0021] 阿巴克丁。

[0022] 所述哺乳动物可以为人或非人的哺乳动物。非人的哺乳动物包括可食用动物，农场动物和陪伴动物，例如牛，绵羊，山羊，猪，马，鹿，狗和猫。该治疗方法特别应用于绵羊和山羊，尤其是绵羊。

[0023] 该治疗方法可以用于治疗广泛的寄生虫生物体。此外，应注意该治疗方法通过消除存在的寄生虫治疗具有存在寄生虫感染的动物。

[0024] 有代表性的寄生虫生物体包括如下：

[0025] 线形动物门(Nemathelminthes)，包括，例如，线形动物门(Ancylostoma)，管圆线虫属(Angiostrongylus)，异尖属(Anisakis)，蛔虫属(Ascaris)，布鲁丝虫属(Brugia)，仰口线虫(Bunostomum)，古柏线虫属(Cooperia)，夏柏特线虫(Chabertia)，杯口属(Cyathostomum)，杯环属(Cylicocyclus)，网尾线虫属(Dictyocaulus)(肺蠕虫)，棘唇属(Dipetalonema)，恶丝虫属(Dirofilaria)(恶丝虫)，龙线虫属(Dracunculus)，丝绒虫属(Elaeophora)，盖格线虫属(Gaigeria)，锥尾球头线虫(Globocephalus urosubulatus)，血矛线虫属(Haemonchus)，后圆线虫属(Metastrongylus)(肺蠕虫)，缪勒线虫(Muellerius)(肺蠕虫)，美洲板口线虫(Necator americanus)，细颈线虫属(Nematodirus)，结节线虫属(Oesophagostomum)，盘尾丝虫属(Onchocerca)，胃线虫属(Ostertagia)，副蛔虫属(Parascaris)，原圆线虫属(Protostrongylus)(肺蠕虫)，腹腔丝虫属(Setaria)，冠丝虫属(Stephanofilaria)，鸡张口丝虫属(Syngamus)，背带线虫属(Teladorsagia)，弓蛔线虫属(Toxascaris)，弓蛔虫属(Toxocara)，毛线虫属(Trichinella)，毛圆线虫属(Trichostrongylus)，鞭虫属(Trichuris)，狭头钩虫(Uncinariastenocephala)和班氏吴策线虫(Wuchereria bancrofti)；

[0026] 节肢动物门(Arthropoda)，包括，例如，甲壳纲(Crustacea)，诸如波斯壁虱(Argulus)和鱼虱(Caligus)，蜘蛛纲(Arachnida)，诸如美洲钝眼蜱(Amblyomma americanum)(美洲花蜱)，斑点钝眼蜱(Amblyomma maculatum)(Gulf Coast tick)，波斯锐缘蜱(Argaspersicus)(家禽蜱)，微小牛蜱(Boophilus microplus)(牛蜱)，牛蠕螨(Demodex bovis)(cattle follicle mite)，犬脂螨(Demodexcanis)(狗毛囊螨)，安氏落矶山壁虱(Dermacentor andersoni)(洛矶山斑疹热蜱)，变异革蜱(Dermacentor variabilis)(美洲犬蜱)，鸡皮刺螨(Dermanyssus gallinae)(鸡螨)，蓖子硬蜱(lxodesricinus)(常见的羊蜱蝇)，鸡疥螨(Knemidokoptes gallinae)(deplumming mite)，鳞足螨(Knemidokoptes mutans)(鳞痂腿螨)，有刺耳朵壁虱(Otobius megnini)(耳残喙蜱)，马痒螨(Psoroptesequi)(痒螨)，羊痒螨(Psoroptes ovis)(痒螨)，血红扇头蜱(Rhipicephalus sanguineus)(褐色犬蜱)和疥螨(Sarcoptesscabiei)(兽疥螨)，昆虫纲(Insecta)，诸如伊蚊属(Aedes)(蚊子)，按蚊属(Anopheles)(蚊子)，库蚊属(Culex)(蚊子)，脉毛蚊属(Culiseta)(蚊子)，Bovicola bovis(牛虱)，雄旋皮蝇(Callitroga hominivorax)(绿头苍蝇)，斑虻属的种类(Chrysopsspp.)(斑虻)，温带臭虫(Cimex lectularius)(臭虫)，库蠓属的种类(Culicoides spp.)(蚋，白蛉，蠓或no-see-ums)，绵羊体虱(Damalinia ovis)(绵羊啮毛虱)，Dermaobia的种类(肤蝇)，红尾胃蝇(Gasterophilus haemorrhoidalis)(鼻热蝇)，肠胃蝇(Gasterophilus intestinalis)(常见的马热蝇)，鼻胃蝇(Gasterophilus nasalis)(chin fly)，舌蝇属的种类(Glossinaspp.)(采采蝇)，扰血蝇(Haematobia irritans)(角蝇，水牛蝇)，驴血虱(Haematopinus asini)(马吸吮虱)，牛血虱(Haematopinuseurysternus)(短鼻牛虱)，Haematopinus ovilius(体虱)，猪血虱(Haematopinus suis)(猪虱)，Hydrotaea irritans(head fly)，牛 皮 蝇(Hypoderma bovis)(bomb fly)，纹 皮 蝇(Hypoderma lineatum)(皮下蝇)，绵羊颚虱(Linognathus ovillus)(body louse)，足颚虱(Linognathus pedalis)(足虱)，狐颚虱(Linognathus vituli)(长鼻牛虱)，绿蝇属的种类(Lucilia spp.)(蛆蝇)，羊蜱(Melophagusovinus)(绵羊蜱蝇)，羊狂蝇(Oestrus ovis)(鼻热蝇)，黑花蝇(Phormia regina)(绿头苍蝇)，水牛盲虱(Solenopotes capillatus)(小蓝牛虱)。

[0027] 该治疗方法特别用于控制蠕虫(helmith)寄生虫，包括线形动物门(Nemathelminthes)。

[0028] 2-Desoxoparaherquamide(或称作2-deoxyparaherquamide)披露在美国专利US5,750,695中，并且其合成描述在该专利的实施例37中。2-desoxoparaherquamide的结构式如式(I)中所示。

[0029]

[0030] 阿巴克丁(或称作除虫菌素B1)披露在美国专利US 4,310,519中。其为除虫菌素B1a(式(IIa))和除虫菌素B1b(式(IIb))的混合物，其中该混合物中的至少80％为B1a成分。

[0031]

[0032] 可以同时或依次给予所述两种成分。

[0033] 本文所用的同时给药意旨在单次行为中对宿主动物给予两种成分，它需要将两种成分并入单一剂型，诸如单一口服溶液或混悬液，片剂或倾倒性溶液。

[0034] 依次给药意旨每种成分的给药为单独的行为，但两次行为相连。例如，将给予包含一种成分的片剂和包含第二种成分的第二种片剂视为依次给药，即使将两种片剂同时对宿主动物给药也是如此。例如，将给予包含一种成分的液体制剂和包含第二种成分的第二种液体制剂视为依次给药，只要对宿主动物同时给予所述制剂或只要在给予一种制剂后即刻或短暂后对宿主动物给予另一种制剂。

[0035] 为方便起见，可以优选同时给药。

[0036] 两种药剂的确切给药剂量和频率取决于许多因素，包括(但不限于)所治疗具体病情的严重性，具体患者(人或动物)的年龄、体重和一般身体状况和患者可以服用的其它药物。这些因素为本领域技术人员众所周知的并且可以通过测定本发明组合物在患者血液中的浓度和/或患者对所治疗具体病情的反应来更确切地确定确切的剂量和频率。

[0037] 一般而言，2-desoxoparaherquamide(2-DOPH)的给药量在约0.05-20mg/kg动物体重，将这类总剂量在一次或分次剂量中在诸如1-5天这类相对短的时间期限内给予。通过给予约0.1-10.0mg/kg体重单剂量获得对寄生虫的极佳控制。更具体地说，该剂量约为0.25-2mg/kg体重的单剂量。最具体地，该剂量约为2mg/kg体重的单剂量。

[0038] 阿巴克丁给药量在约0.001-10mg/kg动物体重，将这类总剂量在一次或分次剂量中在诸如1-5天这类相对短的时间期限内给予。通过给予约0.025-0.5mg/kg体重的单剂量获得对寄生虫的极佳控制。更具体地说，该剂量约为0.025-0.2mg/kg体重的单剂量；最具体地，该剂量约为2mg/kg体重的单剂量。可以根据需要给予反复治疗以便抗击再感染并且取决于寄生虫的种类和使用的畜牧技术。用于对动物给予这些物质的技术对本领域技术人员而言为公知的。

[0039] 可以通过任意合适的途径，包括口服，非肠道或局部给药给予所述药剂。当依次给予两种活性剂时，可以通过不同途径给予它们。一般可以将药剂并入进一步包含合适的赋形剂的制剂，其中所述制剂适合于提及的给药途径。当同时给予两种药剂时，将它们并入单一制剂。

[0040] 为了进行口服给药，可以以诸如溶液，混悬液，胶囊，大丸剂，片剂或含药的饲料添加剂作为实例的剂型给予所述药剂。固体剂型(即非液体的)包含混合了功能性赋形剂的活性组分。这些赋形剂为生产胶囊，片剂，大丸剂或固体含药饲料添加剂领域普通技术人员众所周知的。视生产的剂型而定，通过不同方法制备这些固体剂型。制备制剂的普通技术人员熟知操作。

[0041] 一般通过将活性成分与填充剂/增容粉末(例如乳糖，微晶纤维素)和可能的其它赋形剂、诸如有助于粉末流动的助流剂/润滑剂(例如硬脂酸镁，硬脂酸)和/或胶囊崩解剂(例如羟基乙酸淀粉钠，淀粉)混合制备胶囊。然后将这种包含活性成分的可流动粉末填充入硬壳胶囊。另一种类型的胶囊称作软胶囊(即软胶囊)。通过将活性成分与液体载体，诸如油(例如玉米油，芝麻油，分级分离的椰子油)混合且然后填充入软胶囊制备它们。

[0042] 片剂为可以使用的第二种类的固体剂型。片剂使用赋形剂，所述赋形剂为稀释剂/填充剂(乳糖，磷酸二钙，微晶纤维素)，崩解剂(淀粉，羧甲基纤维素钠)，粘合剂(聚乙烯吡咯烷酮，甲基纤维素)和润滑剂/助流剂(硬脂酸，硬脂酸镁)。使用生产片剂的三种主要方法，包括直接压制，干法制粒和湿法制粒。在直接压制中，将所有赋形剂和活性成分一起混合而产生均匀混合物。然后将这种混合过的粉末进料入压片机，它通过将确定量的粉末压制成各单位片剂生产片剂。干法制粒包括将赋形剂与活性成分混合且然后使这种均匀混合物通过滚筒压制机。该滚筒压制机产生大的压紧物或条状物，然后可以用研磨机使其尺寸减小。这些较小的颗粒随即流动性良好并且可以放入压片机生产片剂。湿法制粒包括将活性成分与赋形剂混合且然后通过喷雾或混合加入液体(水，醇)。这种液体通常还包括粘合剂。将这种固体和液体混合物压过筛而产生颗粒并且干燥，只要使用传统的制粒法即可。或者，如果使用流化床干燥器，则在流化床干燥器中干燥颗粒。如果需要，可以用研磨机使这些颗粒尺寸减小且然后将它们与润滑剂混合并且进料入压片机生产片剂。

[0043] 大丸剂为另一种可能的剂型。在本专利中的大丸剂意旨指定对较大动物给药的大片剂，通过上述方法或某些类似方式生产。或对动物口服给予的大固体剂型可以不同于常规片剂。

[0044] 固体饲料添加剂为另一种可能的剂型。通过将活性成分与合适的饲料载体(稻米外壳，大豆外壳，磷酸二钙)混合生产这些产品而产生含药的A型制品，有时称作预混合物。还多次包括矿物油以便将粉尘减少到最低限度。将这些含药的A型制品或饲料添加剂进一步通过放入动物消耗的饲料稀释它们。这些饲料添加剂的另一种形式是形成含药的进料块，然后通过动物舔所述饲料块消耗活性剂。

[0045] 更优选关注口服给药的液体制剂。因此，可以将所述药剂配制成在适合的水或非水液体介质中的混悬液，溶液或乳剂。非水介质可以包括，但不限于聚乙二醇，甘油甲醛，三醋精，丙二醇，n-甲基吡咯烷酮和各种油(例如花生油，矿物油，橄榄油，分级分分离的椰子油，葵花子油，大豆油，玉米油)。有时选择的油称作中链甘油三酯类，具有的商品名诸如810/820或 355。选择的另一种液体为丙二醇酯类，如丙二醇二-辛
酸酯( 840)。这些非水介质可以包含微生物防腐剂(例如醇)和化学稳定
剂(例如丁羟甲苯，维生素E)。水介质可以为含某些试剂的水，所述试剂诸如矫味强化剂(水果香料，蔗糖，葡萄糖)，微生物防腐剂(苄醇，苯甲酸，苯扎氯铵，缓冲剂(柠檬酸盐，磷酸盐)或pH调节剂(盐酸，氢氧化钠)。通过将活性剂分散于或溶于载体液体介质制备这些液体剂型，通过混合产生混悬液或溶液。易于溶混的液体也可以合并成共溶剂并且作为载体介质其作用。在某些情况中，如果需要可以将不易于溶混的液体与适当的乳化剂(例如卵磷脂)合并成微乳或乳剂。

[0046] 非肠道给药的实例包括肌内，腹膜内，静脉内或皮下注射，其中将活性组分溶于或分散于液体载体介质和植入物和注入体内。就使用液体的非肠道给药而言，将活性物质与水或非水的可接受的介质适当混合。就使用植入物的非肠道给药而言，将活性成分配制成非肠道给药的固体或液体植入物。非肠道含水剂型可以由水与(如果需要)缓冲剂(例如柠檬酸盐，磷酸盐)，pH调节剂(盐酸，氢氧化钠)，微生物防腐剂(例如苄醇，苯甲酸，苯扎氯铵和化学稳定防腐剂(例如抗氧化剂，诸如棓酸丙酯，抗坏血酸)组成。非肠道非水剂型可以使用，但不限于聚乙二醇，甘油甲醛，三醋精，n-甲基吡咯烷酮，2-吡咯烷酮和各种油(例如花生油，矿物油，橄榄油，分级分分离的椰子油，葵花子油，大豆油，玉米油)。这些非水非肠道剂型还可以包括微生物防腐剂和化学稳定剂。还可以使用共溶剂(即两种或多种溶剂)。此外，不易混溶的溶剂组合形成乳剂可以为另一种非肠道给药剂型。通过将活性剂与相应的液体和任意的其它赋形剂混合生产非肠道剂型。这种混合在无菌条件下使用最终通过0.22微米滤膜过滤进行，以便产生无菌产品或使最终产物进行最终灭菌(例如加热，γ射线照射)而生成无菌注射用产品。

[0047] 就局部给药而言，例如可以将药剂配制成倾倒性(pour-on)或点滴(spot-on)剂型。可以使用上述相同的水和非水介质。还可以使用粘度提高添加剂(例如羧甲纤维素，蜡)以便辅助保留在动物上或可以包括渗透促进剂(例如醇类)以便辅助增加全身吸收。使用本领域技术人员众所周知的方法生产局部剂型。在一种简单的方法中，将活性剂与溶剂和任意的添加剂混合而生成溶液或混悬液，然后可以将其倾倒或点在动物上。

[0048] 用于动物的杀寄生虫药剂型有时称作灌服产品(drenchproducts)。可以通过局部或口服给予“灌服”剂型。使用术语“灌服”，因为突然将液体剂型给药入动物口腔/咽喉或倾倒(例如湿透)在动物皮肤/皮毛上。本专利意味着包括灌服制剂。

[0049] 上述这类剂型(例如混悬液，溶液，胶囊，片剂，乳剂，大丸剂和固体饲料添加剂)可以根据其总重和抗寄生虫药的含量的不同在大范围内改变，这取决于诸如所治疗宿主动物的类型，感染类型的严重性和类型和宿主体重这类因素。

[0050] 所述药剂可以与一种或多种额外的活性剂联用，并且可以将这些药剂并入作为给药制剂的组成部分。合适的额外的活性剂包括苯并咪唑类(诸如阿苯达唑，坎苯达唑，芬苯达唑，氟苯达唑，甲苯达唑，奥芬达唑，奥苯达唑和帕苯达唑)，咪唑并噻唑类(诸如四咪唑，左旋咪唑)和四氢嘧啶类(诸如双羟萘酸噻嘧啶，奥克太尔或莫仑太尔)，硝硫氰酯，抗寄生虫药噁唑啉类(诸如披露在US-5478855，US-4639771和DE-19520936中的那些)，如WO-9615121中所述的二氧代吗啉抗寄生虫药的一般类型的衍生物和类似物，环状缩酚肽类(诸如描述在WO-9611945，WO-9319053，WO-9325543，EP-626375，EP-382173，WO-9419334，EP-382173和EP-503538中的那些且特别是emodepside)，氟虫腈；除虫菊素类；有机磷酸盐(organophosphates)；昆虫生长调节剂(诸如氯芬奴隆)；蜕皮激素激动剂(诸如虫酰肼等)；多杀菌素(诸如Spinosad)，酰氨基乙腈类(诸如披露在WO-2005044784中的那些)；新烟碱类杀虫剂(诸如盖达落立等)；有机磷酸盐(诸如敌百虫，napthalophos，pyraclophos)；水杨酰苯胺类(诸如氯生太尔，氯硝柳胺)；Benzoenedisulphonmaide(诸如氯舒隆)；和pyrazinaisoquinoline(诸如吡喹酮)。

[0051] 为了进行依次给药，可以将包含活性剂的组合物便利地制成试剂盒形式。这类试剂盒包含：两种或多种单独的药物组合物，其中至少一种包含2-desoxoparaherquamide，并且一种包含阿巴克丁；和分别保留所述组合物的装置，诸如容器，分开的瓶或分开的箔袋。

[0052] 本发明的试剂盒特别适合于给予不同的剂型，例如口服和非肠道，适合于在不同剂量间隔给予单独的组合物或适合于交替着逐步增加各组合物的剂量。

[0053] 尽管不希望受到任何具体科学理论的限制，但是认为2-desoxoparaherquamide与阿巴克丁的联合用药能够特异地减少trichostrongyloid群体中编码抗性蛋白的等位基因的频率，由此维持和恢复用于trichostrongyloid控制的蛋白质。

[0054] 实施例1

[0055] 在下列试验中证实联合用药的功效。

[0056] 随机将五十四(54)只绵羊(Merino，无论是否为一岁以上的羊)指定为9组之一。在本试验的-41天，用驱虫磷和左旋咪唑治疗绵羊以便除去任何预先存在的寄生虫负担。
在本试验的-27天时收集粪便样品并且分析以便证实根除寄生虫。在-24天，通过瘤胃内注射下列寄生虫从而使绵羊感染：

[0057] ·约3000 3rd阶段(L3)Kirby易感性菌株捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)[0058] ·约6000 3rd阶段(L3)McMaster易感性菌株Teladorsagiacircumcincta[0059] ·约6000 3rd阶段(L3)McMaster易感性菌株蛇形毛圆线虫(Trichostrongylus colubriformis)

[0060] 在本试验的-1天收集粪便样品并且测定卵计数。

[0061] 在本试验的0天，按照下列方案治疗绵羊。

[0062]组 动物数 制剂 2-DOPH的剂量* ABA的剂量*
G1 6 无治疗(阴性对照) 0 0
G2 6 F1 2mg/kg 0.2mg/kg
G3 6 F1 1mg/kg 0.1mg/kg
G4 6 F1 0.5mg/kg 0.05mg/kg
G5 6 F1 0.25mg/kg 0.025mg/kg
G6 6 F2 2mg/kg 0.2mg/kg
G7 6 F2 1mg/kg 0.1mg/kg
G8 6 F2 0.5mg/kg 0.05mg/kg
G9 6 F2 0.25mg/kg 0.025mg/kg

[0063] *2-DOPH＝2-desoxoparaherquamide；ABA＝阿巴克丁

[0064] 制剂F1包含2-DOPH(10mg/mL)，ABA(1.0mg/mL)，甘油甲醛(50mg/mL)，丁羟甲苯(0.5mg/mL)和三醋精(1096.8mg/mL)。

[0065] 制剂F2包含2-DOPH(10mg/mL)，ABA(1.0mg/mL)，甘油甲醛(50mg/mL)，丁羟甲苯(0.5mg/mL)，三醋精(400mg/mL)和丙二醇二-辛酸酯(550.8mg/mL)。

[0066] 在本试验的13，14和15天时处死每种的2只动物。分析胃肠器官和粪便样品作为剩余寄生虫感染的证据。

[0067] 粪便卵计数

[0068]组 卵计数的组几何平 ％功效
均值
G1 11921.4
G2 0.9 99.99
G3 0.0 ＞99.99
G4 1.1 99.99
G5 37.6 99.68
G6 0.0 ＞99.99
G7 0.9 99.99
G8 0.0 ＞99.99
G9 11.3 99.90

[0069] 总虫计数

[0070]

[0071] 实施例2

[0072] 绵羊肠胃道寄生虫的抗性菌株的治疗

[0073] 用Teladorsagia(Ostertagia)普通奥斯特他线虫(circumcincta)和蛇形毛圆线虫的L3幼虫人工感绵羊并且根据给予治疗后治疗组中的总虫计数与对照组比较确定功效。如下所述使用商购的包括的对照产品治疗动物以便证实上述寄生虫的耐药性特性。

[0074]治疗组 测试/对照产品 剂量比例 剂量体积 途径 频率 治疗天 动物数
安慰剂
T01 N/A 0.20mL/kg 口服 一次 第0天 10
(自来水)
2-DOPH 2mg/kg
T02 0.20mL/kg 口服 一次 第0天 10
+阿巴克丁 0.2mg/kg
T03 阿苯达唑 3.8mg/kg 0.15mL/kg 口服 一次 第0天 10
T04 左旋咪唑 8mg/kg 0.20mL/kg 口服 一次 第0天 10
T05 伊维菌素 0.2mg/kg 0.25mL/kg 口服 一次 第0天 10[0075] 在治疗后第15天时对全部研究动物进行尸检。采集皱胃和小肠以获得虫和用于总虫计数估计。

[0076] 2-DOPH/阿巴克丁，阿苯达唑，左旋咪唑和伊维菌素对绵羊中三种胃肠道线虫的耐药株的虫计数组算术平均值，p-值和治疗功效(治疗后15天)。

[0077] 总虫计数

[0078]

[0079] ^NEG＝无功效；因平均计数的在治疗组中高于对照组(T01)未计算功效[0080] 本研究表明伊维菌素(与阿巴克丁相同类型的化合物)对Teladorsagia circumcincta的功效为0％；且2-DOPH/阿巴克丁的联合用药对Teladorsagia circumcincta的功效为100％；因此，这一发现令人意外和未预料到。

[0081] 实施例3

[0082] 绵羊肠胃道寄生虫的抗性菌株的治疗

[0083] 用含有捻转血矛线虫，背带线虫属的种类和毛圆线虫属的种类的混合培养基中的L3幼虫人工感绵羊，并且根据给予治疗后治疗组中的总虫计数与对照组比较确定功效。如下所述使用商购的包括的对照产品治疗动物以便证实上述寄生虫的耐药性特性。

[0084]治疗组 测试/对照产品 剂量比例 剂量体积 途径 频率 治疗天 动物数
T01 安慰剂(自来水) N/A 0.2mL/kg 口服 一次 第0天 10
2-DOPH 2mg/kg
T02 0.2mL/kg 口服 一次 第0天 10
+阿巴克丁 0.2mg/kg
T03 阿苯达唑 3.8mg/kg 0.15mL/kg 口服 一次 第0天 10
T04 左旋咪唑 8mg/kg 0.20mL/kg 口服 一次 第0天 10
T05 伊维菌素 0.2mg/kg 0.25mL/kg 口服 一次 第0天 10[0085] 在治疗后第15天时对全部研究动物进行尸检。采集皱胃和小肠以获得虫和用于总虫计数估计。

[0086] 总虫计数

[0087]