一种筛选刺参催产信息素的方法及该催产信息素的应用

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一种筛选刺参催产信息素的方法及该催产信息素的应用
申请号	CN202311450052.4	申请日	2023-11-02	公开(公告)号	CN117502321A	公开(公告)日	2024-02-06
申请人	滨州市海洋发展研究院;			发明人	高兆明; 茹小尚; 徐丛; 邓贝妮; 梁文可; 王嘉泽;
摘要	本发明提供一种筛选刺参催产信息素的方法及该催产信息素的应用，通过筛选获得具有诱导和催产作用的组合物，包括β‑谷甾醇、异亮氨酸‑异亮氨酸‑亮氨酸‑色氨酸、β‑丙氨酸‑L‑精氨酸、1,7‑二甲基鸟苷、葡萄糖醛酸乙酯、2‑羟基氯丙烷、3‑氧代溴莫尼定、5'‑羧基色胺醇、麦角甾‑二烯‑三醇、β‑谷甾醇乙酸酯中的一种或几种，可以引导刺参的繁殖行为，促进刺参的繁殖和增殖，从而实现刺参资源的可持续利用和保护，填补了目前刺参研究中有关信息素的空白。
权利要求	1.刺参催产信息素组合物，其特征在于：包括β‑谷甾醇、异亮氨酸‑异亮氨酸‑亮氨酸‑色氨酸、β‑丙氨酸‑L‑精氨酸、1,7‑二甲基鸟苷、葡萄糖醛酸乙酯、2‑羟基氯丙烷、3‑氧代溴莫尼定、5'‑羧基色胺醇、麦角甾‑二烯‑三醇、β‑谷甾醇乙酸酯中的一种或几种。 2.根据权利要求1所述的刺参催产信息素组合物，其特征在于：所述的催产信息素来源于雄性刺参的排精水体、体腔液或养殖水体。 3.β‑谷甾醇作为刺参信息素的应用，其特征在于：可以促进刺参聚集和催产。 4.一种权利要求1或2所述的刺参催产信息素的筛选方法，其特征在于：包括如下步骤，步骤一、联合液相色谱‑串联质谱LC‑MS/MS检测待测雄性刺参的排精水体、养殖水体、体腔液的代谢物；步骤二、对联合液相色谱‑串联质谱LC‑MS/MS数据进行定量校准；步骤三、基于步骤二中联合液相色谱‑串联质谱LC‑MS/MS数据的差异鉴定待测雄性刺参产生的目标催产信息素；步骤四、获取步骤三中的目标催产信息素类似物；步骤五、用目标催产信息素类似物进行行为验证；步骤六、确定目标催产信息素类似物的浓度；步骤七、确定类似物与目标催产信息素效果相同，即刺参催产素。 5.根据权利要求4所述的筛选方法，其特征在于：步骤一中，样本水体使用体积比为1：1的乙腈和甲醇混合液作为提取液，在低温超声下进行提取，提取液中添加内标L‑2‑氯苯丙氨酸。 6.根据权利要求4所述的筛选方法，其特征在于：提取后离心，再用体积比为1：1的乙腈和水混合液作为复溶液复溶，并在低温超声下进行萃取。 7.根据权利要求4所述的筛选方法，其特征在于：步骤三中，鉴定的色谱条件为，HSS T3色谱柱，流动相A为95％水+5％乙腈，流动相B为47.5％乙腈+47.5％异丙醇+5％水，流速为 0.40mL/min，柱温为40℃。 8.根据权利要求4所述的筛选方法，其特征在于：步骤三中，鉴定的质谱条件为，采用正负离子扫描模式，质量扫描范围m/z：70‑1050，离子喷雾电压，正离子电压3500V，负离子电压2800V，鞘气40psi，辅助加热气10psi，离子源加热温度400℃，20‑40‑60V循环碰撞能，MS1分辨率70000，MS2分辨率17500。 9.一种刺参聚集引诱剂，其特征在于：包括海泥和β‑谷甾醇，其中β‑谷甾醇的含量大于 10ug/L。
说明书全文	一种筛选刺参催产信息素的方法及该催产信息素的应用技术领域 [0001] 本发明涉及水产养殖、刺参催产信息素领域，具体涉及一种筛选刺参催产信息素的方法及该催产信息素的应用。背景技术 [0002] 刺参(Apostichopus japonicus)又称仿刺参，隶属棘皮动物门海参纲楯手目刺参科，是一种营养和经济价值很高的海洋无脊椎动物。近年来，随着人们对刺参高营养价值的认可，刺参的人工养殖规模不断扩大，已成为重要的海水养殖生物，对于刺参苗种的需要也逐渐增大。当前，刺参排放精卵多采用人工阴干流水刺激的方法，但当雌雄刺参性腺发育不同步时，多出现流产或不产等现象，严重影响了刺参苗种的繁育。 [0003] 刺参属于雌雄异体，达到性成熟后，雌雄刺参分别将精子、卵子排放到体外，精卵经体外受精、体外发育形成子代，但精卵在海水中存活的时间极短，在自然界中，一般是雄性排放精子的时间早于雌性半小时左右。已有研究证明海参纲物种在达到性成熟时雄性个体可通过释放信息素诱集同类聚集并排放配子，以提高精卵受精的成功率，但目前，学对刺参的繁殖信息素的研究内容较少，还未鉴定出一种物质使刺参聚集和诱导产卵，并且现有的刺参催产素存在的问题：注射Kcl时因注射量要求量大，很容易引起亲参排出包括性腺在内的内脏；注射NGLWY时刺参的产卵量少，如平均体重为210克的成熟亲参，平均产卵量只有43万粒，浮游幼体期间成活率只有20～50％，稚参变态率只有15～30％。发明内容 [0004] 为了克服现有技术中存在的不足，本发明提供一种筛选刺参催产信息素的方法及该催产信息素的应用。 [0005] 为实现上述目的，本发明提供一种刺参催产信息素组合物，其包括β‑谷甾醇、异亮氨酸‑异亮氨酸‑亮氨酸‑色氨酸、β‑丙氨酸‑L‑精氨酸、1,7‑二甲基鸟苷、葡萄糖醛酸乙酯、2‑羟基氯丙烷、3‑氧代溴莫尼定、5'‑羧基色胺醇、麦角甾‑二烯‑三醇、β‑谷甾醇乙酸酯中的一种或几种。 [0006] 优选的，所述的催产信息素β‑谷甾醇乙酸酯为Beta‑Sitosterol acetate，化学式为C31H52O2，所述催产信息素类似物为β‑谷甾醇，化学式为C29H50O。 [0007] 优选的，所述的催产信息素来源于雄性刺参的排精水体、体腔液或养殖水体。 [0008] 作为本发明的另一方面，本发明提供β‑谷甾醇作为刺参信息素的应用，可以促进刺参聚集和催产。 [0009] 作为本发明的另一方面，本发明提供一种刺参催产信息素的筛选方法，其包括如下步骤， [0010] 步骤一、联合液相色谱‑串联质谱LC‑MS/MS检测待测雄性刺参的排精水体、养殖水体、体腔液的代谢物； [0011] 步骤二、对联合液相色谱‑串联质谱LC‑MS/MS数据进行定量校准； [0012] 步骤三、基于步骤二中联合液相色谱‑串联质谱LC‑MS/MS数据的差异鉴定待测雄性刺参产生的目标催产信息素； [0013] 步骤四、获取步骤三中的目标催产信息素类似物； [0014] 步骤五、用目标催产信息素类似物进行行为验证； [0015] 步骤六、确定目标催产信息素类似物的浓度； [0016] 步骤七、确定类似物与目标催产信息素效果相同，即刺参催产素。 [0017] 优选的，步骤一中，样本水体使用体积比为1：1的乙腈和甲醇混合液作为提取液，在低温超声下进行提取，提取液中添加内标L‑2‑氯苯丙氨酸。 [0018] 优选的，提取后离心，再用体积比为1：1的乙腈和水混合液作为复溶液复溶，并在低温超声下进行萃取。 [0019] 优选的，步骤三中，鉴定的色谱条件为，HSS T3色谱柱，流动相A为95％水+5％乙腈，流动相B为47.5％乙腈+47.5％异丙醇+5％水，流速为0.40mL/min，柱温为40℃。 [0020] 优选的，步骤三中，鉴定的质谱条件为，采用正负离子扫描模式，质量扫描范围m/z：70‑1050，离子喷雾电压，正离子电压3500V，负离子电压2800V，鞘气40psi，辅助加热气10psi，离子源加热温度400℃，20‑40‑60V循环碰撞能，MS1分辨率70000，MS2分辨率17500。 [0021] 优选的，刺参的排精水体为雄性刺参单独放置于小桶中两小时后收集到的充满精液的水体10mL，养殖水体为刺参单独放置于小桶中两小时后未排放精子的养殖水体10mL，体腔液为未排放精子的雄性刺参体腔液；所述步骤二中定量校准指原始数据包含质控样本和检测样本同时对原始数据进行一系列的预处理，主要包括对原始数据缺失值进行模拟和数据归一化。 [0022] 作为本发明的另一方面，本发明提供一种刺参聚集引诱剂，其包括海泥和β‑谷甾醇，其中β‑谷甾醇的含量大于10ug/L。 [0023] 优选的，步骤五中所述行为验证为使用催产信息素对刺参进行诱集实验和诱导产卵实验，确定刺参催产素效果。 [0024] 本发明的有益效果如下： [0025] 本发明通过LC‑MS鉴定出刺参的一种催产信息素，可运用到刺参实际养殖生产中，为刺参生物学、刺参生态学等领域的研究提供新的视角和理论基础，通过类比得到刺参催产信息素并人工合成，可以引导刺参的繁殖行为，促进刺参的繁殖和增殖，从而实现刺参资源的可持续利用和保护，填补了目前刺参研究中有关信息素的空白。附图说明 [0026] 附图1为阳离子模式和阴离子模式下雄性仿刺参体腔液、排精水及对照养殖水体代谢物的PCA得分图； [0027] 附图2为阳离子模式(a)和阴离子模式(b)下雄性仿刺参体腔液、排精水及对照养殖水体中共有代谢物分析图 [0028] 附图3为实验水池图示意图，黑点为引诱剂放置位置，中心蓝色部位为刺参投放位置，其余水池为实验水泥池； [0029] 附图4为各浓度目标催产信息素对刺参集群行为的诱集效果图，(a)浓度为0.01μg/L,(b)浓度为1μg/L,(c)浓度为10μg/L。 [0030] 附图5为各浓度圣草酚‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸乙酯和β‑谷甾醇对刺参诱导配子排放效果图，(a)β‑谷甾醇,(b)圣草酚‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸乙酯。具体实施方式 [0031] 为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本申请作进一步说明。 [0032] 因为刺参属于雌雄异体，同时刺参也没有眼睛，在非繁殖的时候，雌雄刺参是分散分布的，但刺参的精子与卵子在海水中存活的时间极短，这会导致受精率较低。所以为了提高繁殖成功的概率，雄性刺参必须通过性腺排放催产信息素。基于此，本发明实验构思如下： [0033] 1、潜在的信息素鉴定 [0034] 因为信息素是通过性腺释放的，同时刺参的体腔液作为转运器官体腔液类似于人的血液、淋巴液和体腔液的集合体。刺参在释放精子的时候，会同时释放体腔液、精液(排精水)，针对体腔液、排精水、空白的水进行扫描分析，通过体腔液和排精水共有的物质，确定潜在的信息素。 [0035] 2、聚集行为验证 [0036] 信息素起到两个作用：把雌性刺参吸引到自己身边(聚集作用)，同时还能刺激诱导雌性刺参排放卵子(排卵)，这样才能受精成功。根据确定的确定潜在的信息素，采用商业纯品化合物，没有纯品的选择结构类似的物质，进行了聚集行为验证。发现了仅β‑谷甾醇和葡萄糖醛酸乙酯具有聚集效果。 [0037] 3、产卵行为验证 [0038] 继续用β‑谷甾醇和葡萄糖醛酸乙酯诱导雌性刺参产卵，发现仅β‑谷甾醇起到诱导产卵的作用。 [0039] 本发明通过一系列验证只有β‑谷甾醇是有效的，即能引起雌性聚集，也能引起雌性产卵，所以确立了β‑谷甾醇是最终的催产信息素。 [0040] 实施例1：确定目标信息素 [0041] 本发明的目的在于针对现有刺参人工繁育的问题，公开了一种刺参催产信息素的鉴定方法和应用，具体的，本发明的鉴定方法能够对刺参信息素进行鉴定并且使用信息素类似物能够提高人工繁育的催产效率，具体的鉴定方法包括如下步骤： [0042] 第一步：对仿刺参进行阴干流水刺激，刺激仿刺参释放配子。阴干流水升温刺激法，是将前两种方法结合进行，效果更佳，宜在傍晚进行，即先使亲参阴干1小时，然后流水刺激半小时，最后将亲参放人升高3～5℃的过滤海水中，约1小时后，亲参即可排精放卵。 [0043] 在释放配子期间随机选出7只雄性个体置于30L的水桶内，桶内水含量为28L，让这些雄性个体继续排放精子，2小时后收集充满精液的养殖水体10mL(设立7个重复)，精子密3 度达到500个/m。选取7只没有排放过精子的雄性仿刺参，使用冷冻麻醉后收集其体腔液，每个个体收集10mL体腔液(设立7个重复)。另外取没有释放配子的养殖水体7管，各10mL作为对照组水样(设立7个重复)。 [0044] 第二步:吸取100μL三组样本于1.5mL离心管中,加入400μL提取液(体积比例为乙腈：甲醇＝1：1)含0.02mg/mL的内标(L‑2‑氯苯丙氨酸)，涡旋混匀30s后，低温超声提取30min(5℃，40KHz)，将样品静置于‑20℃，30min。4℃，13000g离心15min，移取上清液，氮气吹干，100μL复溶液(乙腈：水＝1：1)复溶，低温超声萃取5min(5℃，40KHz)，4℃，13000g离心 10min，移取上清液至带内插管的进样小瓶中上机分析,LC‑MS分析的仪器平台为赛默飞公司的超高效液相色谱串联傅里叶变换质谱UHPLC‑Q Exactive系统。色谱条件：3μL样本经HSS T3色谱柱(100mm×2.1mm i.d.,1.8μm)分离后进入质谱检测。流动相A为95％水+5％乙腈(含0.1％甲酸)，流动相B为47.5％乙腈+47.5％异丙醇+5％水(含0.1％甲酸)。流速为 0.40mL/min，柱温为40℃。质谱条件：样品质谱信号采集采用正负离子扫描模式，质量扫描范围m/z：70‑1050。离子喷雾电压，正离子电压3500V，负离子电压2800V，鞘气40psi，辅助加热气10psi，离子源加热温度400℃，20‑40‑60V循环碰撞能，MS1分辨率70000，MS2分辨率 17500。 [0045] 第三步：上机完成之后，LC‑MS原始数据导入代谢组学处理软件Progenesis QI(Waters Corporation，Milford,USA)进行基线过滤、峰识别、积分、保留时间校正、峰对齐，最终得到一个保留时间、质荷比和峰强度的数据矩阵，同时将MS和MSMS质谱信息与代谢公共数据库HMDB(http://www.hmdb.ca/)和Metlin(https://metlin.scripps.edu/)以及美吉自建库进行匹配，得到代谢物信息。 [0046] 第四步：将搜库后的数据矩阵上传到美吉云平台(cloud.majorbio.com)进行分析。首先对数据矩阵进行预处理，具体如下：数据矩阵用80％规则来去除缺失值，即保留至少一组样品中非零值80％以上的变量，再进行填补空缺值(原始矩阵中最小值填补空缺值)，为减小样品制备及仪器不稳定带来的误差，用总和归一化法对样本质谱峰的响应强度进行归一化，得到归一化后的数据矩阵。同时删除QC样本相对标准偏差(RSD)>30％的变量，并进行log10对数化处理，得到最终用于后续分析的数据矩阵。 [0047] 第五步：筛其次采用R语言中的ropls包(Version1.6.2)对预处理后的数据矩阵进行主成分分析(PCA)和正交最小偏二乘判别分析分析(OPLS‑DA)，并使用7次循环交互验证来评估模型的稳定性。显著差异代谢物的选择基于OPLS‑DA模型得到的变量权重值(VIP)和student’s t检验p值来确定(图1)，VIP>1,p<0.05的代谢物为显著差异代谢物。 [0048] 第六步：对显著差异代谢物进行分析，以正负离子扫描模式下体腔液和排精水共有的物质为筛选方法(图2)，筛选出10种代谢物(异亮氨酸‑异亮氨酸‑亮氨酸‑色氨酸、β‑丙氨酸‑L‑精氨酸、1,7‑二甲基鸟苷、葡萄糖醛酸乙酯、磷脂(18:3(6Z,9Z,12Z)/0:0)、2‑羟基氯丙烷、3‑氧代溴莫尼定、5'‑羧基色胺醇、麦角甾‑二烯‑三醇、β‑谷甾醇乙酸酯)设为目标刺参催产信息素(表1)。 [0049] 表1雄性刺参潜在催产信息素信息表 [0050] [0051] 第七步：查询并获取目标刺参催产信息素，用上述化合物的商业纯品进行验证，由于检测出的物质很多无法买到纯的物质，部分信息素用的结构类似物替代。代替物品情况如下：N2,N2‑二甲基鸟苷(代替1,7‑二甲基鸟苷)、圣草酚‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸乙酯(代替葡萄糖醛酸乙酯)、溴莫尼定酒石酸盐(代替3‑氧代溴莫尼定)、L‑5‑羟基色氨酸(代替5'‑羧基色胺醇)、麦角甾醇(代替麦角甾‑二烯‑三醇)、β‑谷甾醇(代替β‑谷甾醇乙酸酯)、FA‑丙氨酰精氨酸‑OH(代替β‑丙氨酸‑L‑精氨酸)。 [0052] 第八步：使用目标刺参催产信息素类似物进行聚集行为和诱导产卵行为实验验证聚集和催产结果，确定β‑谷甾醇为刺参催产信息素并且阈值为10μg/L。 [0053] 实施例2：目标信息素诱导刺参聚集实验与验证筛选 [0054] 步骤一：查询并购买到纯度均为95％以上目标刺参催产信息素(L‑5‑羟基色氨酸)、或目标刺参催产信息素类似物(麦角甾醇、β‑谷甾醇、溴莫尼定酒石酸盐、2‑羟基氯丙烷、圣草酚‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸乙酯、N2,N2‑二甲基鸟苷、FA‑丙氨酰精氨酸‑OH)。根据已有的鱼类性信息素浓度相关的报道，将实验药品的质量百分浓度设置成3个，分别为0.1ug/L，1ug/L，10ug/L。先使用1mL无水乙醇将药品粉末溶解，后按照梯度稀释的方法将每种药品稀释成3种相应工作浓度的溶液。将β‑谷甾醇的工作溶液和海泥粉末(质量比例为1:5)混合均匀后置于通风处6h以上，以挥发混合物中的乙醇，防止乙醇的干扰。随后使用海水将海泥混合物制成球形固体(湿重50g)。引诱剂的对照组为不添加药物工作溶液，直接由海泥和海水组成的球形固体(湿重为50g)。 [0055] 步骤二：实验水池为水泥池，规格为长1.8m，宽1.2m，深0.8m，该种水泥池的保温效果较好。为方便观察记录仿刺参的活动情况，在水泥池外围用黑色胶带每隔0.3m横竖交替将水泥池分割成网状。为减少外界对仿刺参的干扰，实验期间关闭所有灯光，仅在观察的时候使用手电快速进行聚集行为的记录,并保证实验环境安静无震动，完成记录后关闭所有光源。实验期间海水深度为0.4m。4个水泥池为4个平行实验组，1个水泥池为对照组，其中对照组也进行四次重复。实验开始前将50g引诱剂放置于水泥池的一端0.60.3m范围内，实验分区如图3所示。并将20只仿刺参放入水泥池中央的起始位置中，使仿刺参从中央位置移动到放置海泥区域的直线距离在45cm以上。本试验中使用静水水体避免流水交换以减少动物朝向信息源的影响。在每次试验中，试验组和对照组的引诱剂质量相同。试验结束后，应将每个水泥池冲洗干净，消毒，换水，避免药物残留。 [0056] 步骤三：试验对象为湿重在200g以上的仿刺参160头进行实验，实验开始前将仿刺参转移到养殖水池中暂养7d。暂养期间每天上午8时投喂人工饲料，溶解氧保持在8.0mg/L以上且24h连续充气，每天换水1/2，并每天使用虹吸的方法进行残饵和粪便的清理。暂养周期结束后挑选生命特征健康和规格相近的仿刺参进行试验。为使实验结果更有效，所有仿刺参进行试验前需要饥饿24h。每种药品的3个浓度都以20只仿刺参为试验对象，并进行4次重复试验，每次试验时间为8h。每隔两小时进行一次仿刺参聚集情况的观察和记录，参考崔勇和姜玉山进行的仿刺参诱集试将放置引诱剂的0.60.3m范围定为仿刺参聚集的有效范围，当仿刺参进入放置海泥的区域时视为仿刺参聚集到引诱剂的有效范围内，记录在有效区域内仿刺参的数量。统计平均聚集率来计算药品的效果。 [0057] 平均聚集率(Mean attractive rate，MAR)指实验中某固定时间点内仿刺参聚集到含引诱剂的有效区域内的数量之和与实验中仿刺参总数量的比值，计算公式为： [0058] MAR(％)＝Ni/N×100％ (1) [0059] 式中，Ni为各固定时间段内i(i＝1，2…n)聚集仿刺参的数量，N为该实验组中使用仿刺参的总数。 [0060] 诱集效果评价根据单位时间内仿刺参对引诱剂的选择数量进行评估。获得的数据通过Graphpad Prism 9.00软件进行统计分析。使用双因素方差分析方法统计各时间段内各浓度平均聚集率的显著差异性，并把统计学显著性阈值设置成P<0.05，表示P<0.05，***表示P<0.0001。同时使用Graphpad prism 9.0软件绘制柱形图。 [0061] 实验结果：通过附图4可以看出5μg/L圣草酚‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸乙酯和10μg/Lβ‑谷甾醇在实验四小时内可显著吸引仿刺参聚集(P<0.05)，可以认定圣草酚‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸乙酯和β‑谷甾醇对性成熟刺参起到繁殖聚集作用，进一步缩小了刺参催产信息素的范围区间。 [0062] 实施例3：圣草酚‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸乙酯和β‑谷甾醇诱导刺参排放配子实验[0063] 步骤一：购买圣草酚‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸乙酯和β‑谷甾醇作为实验药品，纯度均为95％以上。根据已有的鱼类性信息素浓度相关的报道，将实验药品的质量百分浓度设置成3个，分别为0.1ug/L，1ug/L，10ug/L。购买100头实验所用性成熟的仿刺参(体重为265‑300g)。从池塘中捕捞后置于体积为6m3的水泥池中暂养7d，每天早上8时与傍晚18时投喂海藻与海泥混合颗粒饲料，每天换水1/3，每3d进行一次清底，24h连续充气，保证溶解氧为 8.0mg/L以上，另外暂养期间海水盐度为30.6，pH为8.36，水温为18℃。 [0064] 步骤二：试验在15个容量为10L的水桶中进行，每个水桶内放置一只刺参，此为一次重复，每个药品的每个浓度进行3次重复。实验开始时将实验药品分别按照对照(0μg/L)，0.1ug/L，1ug/L，10ug/L的浓度投放到水桶中，观察刺参在两小时内排放配子的情况并记录排放配子的只数。本试验中使用静水水体。试验结束后，应将每个水桶冲洗干净，换水，避免药物残留。 [0065] 实验结果10ug/Lβ‑谷甾醇组中成功诱导58％的刺参排放配子，其他三组中刺参无排放配子。如附图5所示，根据卡方检验对四组结果进行统计学分析，差异显著(P＜0.0001)，具有统计学意义,可以认定为β‑谷甾醇为一种刺参催产信息素且效益浓度区间为大于10μg/L。 [0066] 本发明公开了一种刺参催产信息素的鉴定方法及催产素，属于水产养殖领域，包括：取雄性刺参个体的排精水及其排精后个体体腔液；通过联合液相色谱‑串联质谱LC‑MS/MS对雄性刺参个体排精水、体腔液、环境水体检测代谢物；对联合液相色谱‑串联质谱LC‑MS/MS数据进行分析；对联合液相色谱‑串联质谱LC‑MS/MS数据鉴定出刺参信息素；对信息素进行验证，所述信息素为刺参催产信息素，可使性成熟刺参聚集、可诱导性成熟刺参排放配子、提高刺参人工繁育效率。 [0067] 最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。