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21. 发明公开

CN101880325A 一种应用于吡虫啉农药残留检测的单克隆抗体无效
公开(公告)号：CN101880325A
公开(公告)日：2010-11-10
申请号：CN201010204933.4
申请日：2010-06-22
申请人：南京农业大学
发明人：刘凤权 , 李刚 , 钱国良 , 华修德 , 秦娜
IPC分类号： C07K16/44 , C07K14/765 , C12N5/20 , G01N33/577 , C12R1/91
摘要：本发明涉及抗吡虫啉农药单克隆抗体及其制备方法，属于生物技术领域。用免疫半抗原1-[6-(2-羧乙硫基-3-吡啶)甲基]-N-硝基-2-咪唑啉亚胺与牛血清白蛋白的偶联物免疫BALB/c鼠，将免疫后的小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞Sp2/0通过杂交瘤技术制备杂交瘤细胞，获得了能稳定分泌抗吡虫啉农药单克隆抗体的杂交瘤株2F11/A9。此抗体经过有效性验证证明可用于农业生产环境和农产品中吡虫啉残留的灵敏快速检测。本发明涉及的抗吡虫啉农药单克隆抗体制备技术简便可行，抗体的整个制备过程无需要特别的仪器设备，容易工厂化规模生产。

22. 发明公开

CN101608236A 梨火疫病菌和亚洲梨火疫病菌的padlock探针及多重检测方法无效
公开(公告)号：CN101608236A
公开(公告)日：2009-12-23
申请号：CN200910030129.6
申请日：2009-03-27
申请人：南京农业大学
发明人：胡白石 , 田艳丽 , 刘凤权 , 王源超 , 郑小波
IPC分类号： C12Q1/68 , C12N15/11 , G01N21/64 , C12R1/18
摘要：本发明用于检测梨火疫病菌和亚州梨火疫病菌的padlock探针及其多重检测方法属于农作物防病治病及植物检疫范畴。用于检测梨火疫病菌的padlock探针序列：P－e.amy：GACTTCGCAGGCGCCTTGCTCATTACTTPIP2ATCGGCCTGTAATCGGATCGACACGGTGTGTCGC用于检测亚洲梨火疫病菌的padlock探针序列P－e.pyr：TATGGCGTCCCCAAGGGGATTCGAACCCPIP2CCGACTCTAGGATCGTGGATCACTTCGTTACCGG.以此探针为基础结合Macroaary技术能够同时检测梨火疫病菌和亚州梨火疫病菌，这种多重检测方法具较强的特异性、灵敏性及稳定性，为梨火疫病菌和亚州梨火疫病菌的检测提供了快速、灵敏、特异的技术方法。图为padlock探针结合Macroaary技术同时检测梨火疫病菌和亚州梨火疫病菌结果。

23. 发明公开

CN101608235A 水稻白叶枯病菌和水稻细条病菌的padlock探针及多重检测方法失效
公开(公告)号：CN101608235A
公开(公告)日：2009-12-23
申请号：CN200910030127.7
申请日：2009-03-27
申请人：南京农业大学
发明人：胡白石 , 田艳丽 , 刘凤权 , 王源超 , 郑小波
IPC分类号： C12Q1/68 , C12N15/11 , C12R1/64
摘要：本发明用于检测水稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌的padlock探针及其多重检测方法属于农作物防病治病及植物检疫范畴。水稻白叶枯病菌的padlock探针序列：P－x.o.o：GGAGCTATATGCCGTGCTGTGTGGAGTACTCGACCGTTAGCAGCATGACCGAGATGTACCGCTATCGTGAATCGCCTACAATTCTGTCCCCCAAGTTGCCTC。水稻细菌性条斑病菌的padlock探针序列：P－x.o.oc：CCACACAACACGGCATATCGCTCCAAGGCTCGACCGTTAGCAGCATGACCGAGATGTACCGCTATCGTGCGGCATACGTTCGTCAAATGGTGGCTTTGTACC。以此探针为基础结合Macroaary技术能够同时检测水稻白叶枯病菌和细菌性条斑病菌，这种多重检测方法具较强的特异性、灵敏性及稳定性，为水稻白叶枯病菌和细菌性条斑病菌的检测提供了快速、灵敏、特异的技术方法。图为Padlock探针结合Macroaary技术同时检测水稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌结果。

24. 发明公开

CN101177671A 一株防治植物病害的生防细菌菌株失效
公开(公告)号：CN101177671A
公开(公告)日：2008-05-14
申请号：CN200710190998.6
申请日：2007-12-05
申请人：南京农业大学
发明人：刘凤权 , 钱国良 , 姜英华 , 韩冰 , 胡白石
IPC分类号： C12N1/20 , A01N63/02
摘要：本发明提供一株防治植物病害的生防菌株及其菌剂，属于生物防治领域。所用菌株为革兰氏染色阴性细菌，经鉴定为产酶溶杆菌(Lysobacter enzymogenes)，菌株代号为OH11。菌株OH11无鞭毛但有滑移性，能产生包括几丁质酶、β－1，3－葡聚糖酶和蛋白酶等多种胞外水解酶，能有效抑制真菌、细菌的生长。菌株OH11对油菜菌核病菌和辣椒疫霉病菌的抑菌圈直径都大于22.0mm；对马铃薯环腐病菌的拮抗作用较强，抑菌圈直径达到50mm。将OH11菌种接种入种子罐，培养至对数生长期，将种子液接入生产罐培养，生产罐所用培养基与种子罐培养基相同。液体发酵采用通氧深层发酵和分批补料工艺，溶氧量为15％－20％，发酵温度为30℃，发酵时间72h，初始pH值7.5。发酵完成后培养液出罐直接用塑料包装桶或包装瓶分装成液体剂型或采用泥炭吸附用包装袋分装成固体剂型。生防菌株OH11可有效地防治植物病原真菌、细菌、线虫等病害，总体防治效果在50％－70％。温室盆栽试验中，OH11对辣椒疫病和番茄青枯病的防治效果分别达到83.6％和86.4％。菌株OH11具有抗菌谱广、活性高、对环境安全等特性，在农药污染严重的今天，产酶溶杆菌及其菌剂将是一种很好的替代品。

25. 发明公开

CN1616481A 速灭威人工抗原合成方法无效
公开(公告)号：CN1616481A
公开(公告)日：2005-05-18
申请号：CN200310106274.0
申请日：2003-11-13
申请人：南京农业大学
发明人：刘凤权 , 张奇
IPC分类号： C07K1/02 , C07K14/00 , G01N33/53 , G01N33/531
摘要：本发明速灭威人工抗原合成技术属于有机化学及免疫学技术范畴。根据有机化学反应的一般原理，合成速灭威半抗原及抗原(包括包被抗原与免疫原)，包括：间－甲基苯甲酰氯的合成，β－(间－甲基苯甲酰)氨基丙酸(H速)的合成，速灭威人工抗原的合成，速灭威人工抗原白色乳状液装于若干1ml离心管中，于－20℃冰箱中存放备用。此抗原具有稳定性好、免疫原性较强等特点。此抗原可制备出高效价、高亲和力的速灭威抗体。抗原制备技术简便可行：抗原的整个制备过程无需要特别的仪器设备，成本低廉，容易工厂化规模生产。

26. 发明授权

CN1186458C 一种提高PCR技术检测植物病原细菌灵敏度的方法失效
公开(公告)号：CN1186458C
公开(公告)日：2005-01-26
申请号：CN03137645.2
申请日：2003-06-19
申请人：南京农业大学
发明人：胡白石 , 许志刚 , 卢玲 , 刘凤权
IPC分类号： C12Q1/68 , C12Q1/04
摘要：本发明“一种提高PCR技术检测植物病原细菌灵敏度的方法”，属于生物技术领域。专用于对病原细菌进行检测。以梨火疫病菌为靶标细菌，包括病植物原细菌特异性抗血清的制备；PCR反应管的包被；PCR反应管的洗涤；样品中目标细菌的吸附；PCR扩增程序。该技术可以稳定地从纯菌、混合菌液和发病样品中扩增出病原细菌的目标片段，排除了样品中PCR抑制物质的干扰，使检测灵敏度(直接检测样品)提高了1000倍。为提高PCR技术检测病原细菌的灵敏度提供了简便、廉价和高效的技术方法。

27. 发明公开

CN106525824A 一种基于MarR蛋白调控的Cu2+比色检测方法失效
公开(公告)号：CN106525824A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201610373103.1
申请日：2016-05-30
申请人：南京农业大学
发明人：刘凤权 , 王利民 , 钱国良 , 王玉龙 , 苏振贺 , 王鸣华 , 华修德 , 张存政
IPC分类号： G01N21/78 , G01N21/33
CPC分类号： G01N21/78 , G01N21/33
摘要：本发明涉及一种基于MarR蛋白调控的Cu2+比色检测方法，包括(1)新型Cu2+高特异性识别元件(MarR蛋白)的制备；(2)MarR蛋白标记纳米金制备比色探针，通过Cu2+诱导MarR蛋白四聚体的形成，导致胶体金探针的沉聚，观察Cu2+添加前后溶液的颜色变化，实现对于Cu2+的半定量比色检测。同时扫描Cu2+添加前后溶液的紫外-可见光谱，以600nm和520nm波长处吸光度比值(A600/A520)为纵坐标，Cu2+标准溶液的浓度为横坐标建立曲线方程，通过测定样品中Cu2+的A600/A520，代入曲线方程，得出待测样品中Cu2+的浓度。本发明涉及的一种基于MarR蛋白调控的Cu2+比色检测方法，不仅快速，简便，同时还兼具低成本，能用于现场检测等特点，可应用于家庭，医院，机场口岸等需要实行快速检测的机构。

28. 发明授权

CN103589688B 抗三种有机磷农药的单克隆抗体及其应用失效
公开(公告)号：CN103589688B
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201310365944.4
申请日：2013-08-21
申请人：南京农业大学
发明人：刘凤权 , 王利民 , 秦娜 , 方庆奎 , 华修德
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/44 , G01N33/577 , C07F9/24 , C12Q1/02 , C12R1/91
摘要：本发明属于生物技术领域，涉及抗三种有机磷农药的单克隆抗体及其应用。本发明通过化学合成针对上述农药公共结构的人工半抗原，进而制备完全抗原，免疫Balb/C鼠，通过杂交瘤技术制备特异性强的单克隆抗体，并用于农产品和农业生产环境中上述三种农药残留的高灵敏快速检测。本发明抗体的制备技术可行，抗原的整个制备过程不需要特别的仪器设备，易于规模化生产。

29. 发明公开

CN105137081A 一种基于单克隆抗体的吡虫啉检测试纸条无效
公开(公告)号：CN105137081A
公开(公告)日：2015-12-09
申请号：CN201510220708.2
申请日：2015-04-28
申请人：南京农业大学
发明人：刘凤权 , 王利民 , 方庆奎
IPC分类号： G01N33/577
CPC分类号： G01N33/577
摘要：本发明提供一种基于单克隆抗体的吡虫啉检测金放大试纸条，它包括衬板，衬板的一面自上而下依次黏贴吸水纸、检测垫、金标垫1(放大)、金标垫2(检测)和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接。所述检测垫为硝酸纤维素膜，该膜自上而下设计1条质控线和3条检测线；所述质控线包被有兔抗鼠IgG；所述检测线包被有吡虫啉包被半抗原-鸡卵清白蛋白偶联物；所述金标垫1(放大)为玻璃纤维素膜，喷涂有亲和素标记的纳米金颗粒；所述金标垫2(检测)为玻璃纤维素膜，喷涂有纳米金标记的抗吡虫啉单克隆抗体，该单克隆抗体为由保藏编号为CCTCC NO：C201509的杂交瘤细胞株CH3分泌产生的单克隆抗体。该试纸条对吡虫啉的检测区间为0-5ng/mL(阴性)，5-25ng/mL，25-250ng/mL，250-1000ng/mL以及大于1000ng/mL，可用于叶菜类蔬菜中吡虫啉残留量的半定量快速测定。

30. 发明公开

CN104792782A 一种基于银纳米颗粒的乙酰胆碱酯酶活性检测试纸条无效
公开(公告)号：CN104792782A
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201510219755.5
申请日：2015-04-28
申请人：南京农业大学
发明人：刘凤权 , 王利民 , 王苏妍
IPC分类号： G01N21/78
摘要：本发明涉及一种基于银纳米颗粒的胆碱酯酶活性检测试纸条。该试纸条包括纸板，纸板的一面自上到下依次黏贴吸水纸、检测垫、还原垫和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接。其中检测垫为硝酸纤维素膜，该膜自上而下设置了三条检测线，分别包被了浓度由高到低的硝酸银水溶液；还原垫为玻璃纤维，喷涂有一定浓度的维生素C的HEPES溶液。该试纸条可用于胆碱酯酶活性的快速检测，具有使用简便，灵敏度高，检测结果无需依靠仪器分析等优势。所建立的检测试纸条，对活性胆碱酯酶检测灵敏度可达到0.01nM，可为胆碱酯酶活性检测提供新的方法。

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