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21. 发明授权

CN104845930B 用于分离原代肝细胞的联合用试剂有权
公开(公告)号：CN104845930B
公开(公告)日：2018-08-31
申请号：CN201510283984.3
申请日：2015-05-28
申请人：四川大学华西医院
发明人：包骥 , 步宏
IPC分类号： C12N5/071
摘要：本发明提供了用于原代肝细胞分离的联合用试剂，它包括灌流液I、灌流液II、灌流液III，所述灌流液I每升含有如下成分：8.1‑8.5克氯化钠，0.5克氯化钾，2.2‑2.6克HEPES，3.5‑4.5克NAC,0.9‑1.1克EGTA,其余为去离子水；所述灌流液II每升含有如下成分：8.1‑8.5克氯化钠，0.5克氯化钾，2.2‑2.6克HEPES，其余为去离子水；所述灌流液III每升含有如下成分：3.8‑4克氯化钠，0.5克氯化钾，23‑25克HEPES，0.07克二水氯化钙，3.5‑4.5克白蛋白，162‑260Wünsch单位胶原酶，其余为去离子水。本发明还提供了这种联合用试剂的制备方法。本发明的联合用试剂配方简单、配制方便，能够应用到原代肝细胞分离中，有效防止肝细胞损伤。

22. 发明公开

CN108088998A 一种肺癌筛查试剂盒有权
公开(公告)号：CN108088998A
公开(公告)日：2018-05-29
申请号：CN201611037108.3
申请日：2016-11-23
申请人：四川大学华西医院
发明人：陈菲 , 李丽 , 陈红英 , 步宏 , 张立
IPC分类号： G01N33/574 , G01N33/573
摘要：本发明公开了一种肺癌筛查试剂盒，它包括任选的用于检测p-ZAP70表达水平的试剂。本发明还公开了检测p-ZAP70表达水平的试剂在制备肺癌筛查用试剂中的用途。本发明试剂盒通过检测p-ZAP70的表达水平，可以判断待检者患肺癌的风险，可用于临床肺癌的辅助诊断，为患者采取相关的治疗措施或者决策提供有效的依据，临床应用前景良好。

23. 发明授权

CN105548548B 一种肺癌筛查试剂盒有权
公开(公告)号：CN105548548B
公开(公告)日：2017-08-25
申请号：CN201610108030.3
申请日：2016-02-26
申请人：四川大学华西医院
发明人：张立 , 杨永凤 , 步宏 , 宋琛 , 李丽 , 陈菲 , 王彦文 , 朱苡晗
IPC分类号： G01N33/574 , G01N33/573
摘要：本发明公开了一种肺癌筛查试剂盒，它包括任选的用于检测FRK表达水平的试剂。本发明还公开了检测FRK表达水平的试剂在制备肺癌筛查用试剂中的用途。本发明试剂盒通过检测FRK的表达水平，可以判断待检者患肺癌的风险，可用于临床肺癌的辅助诊断，为患者采取相关的治疗措施或者决策提供有效的依据，临床应用前景良好。

24. 发明授权

CN104958795B 全血灌流生物人工肝系统有权
公开(公告)号：CN104958795B
公开(公告)日：2017-03-29
申请号：CN201510349758.0
申请日：2015-06-23
申请人：四川大学华西医院
发明人：包骥 , 步宏
IPC分类号： A61M1/16
摘要：本发明涉及一种全血灌流生物人工肝系统，包括血液循环部分、生物肝循环部分，血液循环部分包括：依次连接的血液输入口、血液泵、中空纤维柱和血液回输口；生物肝循环部分包括：依次连接的循环泵、恒温加热器、氧合器、生物反应器，所述循环泵的入口与中空纤维柱的外腔出口相连；所述生物反应器的液体出口与中空纤维柱的外腔入口相连；生物肝循环部分还设有两处旁路管道；本发明还包括液体输入部分和透析液排出部分，提供一种安全、可靠、高效的全血灌流生物人工肝系统，实现无间断治疗；同时综合了静脉输液与部分肾脏透析的功能，提供了一套综合性的生物人工肝系统，对肝衰竭病人提供更有效的支持。

25. 发明公开

CN104962559A 一种检测人类PDGFRα基因D583_W586DEL突变的诊断试剂盒和方法无效
公开(公告)号：CN104962559A
公开(公告)日：2015-10-07
申请号：CN201510393904.X
申请日：2015-07-07
申请人：四川大学华西医院
发明人：叶丰 , 陈卉娇 , 张红英 , 步宏
IPC分类号： C12N15/11 , C12Q1/68
摘要：本发明公开了检测人类PDGFRα基因D583_W586DEL突变的诊断试剂盒，它包括SEQ ID NO.1～2和SEQ ID NO.3所示的探针。本发明还公开了SEQ ID NO.1～2所示引物对以及SEQ ID NO.3所示的探针。本发明试剂盒可以准确检测人类PDGFRα基因D583_W586DEL突变，检测快速、简便，成本低廉，可以大量推广使用，临床应用前景良好。

26. 发明公开

CN104818242A 原代肝细胞的分离制备方法有权
公开(公告)号：CN104818242A
公开(公告)日：2015-08-05
申请号：CN201510284714.4
申请日：2015-05-28
申请人：四川大学华西医院
发明人：包骥 , 步宏 , 石毓君
IPC分类号： C12N5/071
摘要：本发明公开了一种原代肝细胞的分离制备方法，它包括如下步骤：a、肝脏的体外灌流：取离体的动物肝脏，先用灌流液Ⅰ灌流，灌流速度为300-1000mL/min，灌流时间为10-12分钟；再用灌流液Ⅱ灌流，灌流速度为300-1000mL/min，灌流时间为2-3分钟；最后用灌流液Ⅲ灌流，灌流速度为400-1200mL/min，灌流时间为25-40分钟；b、分离肝细胞：洗涤步骤a处理后的肝脏，收集肝细胞悬液，过滤、离心，收集沉淀即可。本发明原代肝细胞的分离制备方法，可以分离得到的肝细胞数量、活率与纯度均较高的肝细胞，应用前景良好。

27. 发明授权

CN101850136B 一种植入式生物人工肝脏失效
公开(公告)号：CN101850136B
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201010198279.0
申请日：2010-06-11
申请人：四川大学华西医院
发明人：包骥 , 石毓君 , 步宏
IPC分类号： A61L33/10 , A61L27/36
摘要：本发明提供了一种制备生物人工肝脏支架的联合用试剂，包括：灌注液1：弱碱性低渗溶液或纯水；灌注液2：一组浓度呈梯度变化的离子型去垢剂水溶液；灌注液3：电解质水溶液；灌注液4：抗凝血因子水溶液；洗脱液1：蒸馏水；洗脱液2：非离子型去垢剂水溶液。本发明还提供了一种用前述联合用试剂制备植入式生物人工肝脏的方法；以及一种用上述方法制备的植入式生物人工肝脏。利用联合用试剂制备的生物人工肝脏支架完全去细胞化，且细胞外基质结构保持完整。该生物人工肝脏可容纳大量肝细胞并提供充足血供，使急性肝衰竭大鼠的生存时间明显延长，肝功能明显改善，具有极好的临床应用前景。

28. 发明公开

CN1900117A 人源化CTLA－4单链抗体与人穿孔素通道形成肽P34的重组免疫毒素失效
公开(公告)号：CN1900117A
公开(公告)日：2007-01-24
申请号：CN200510084311.1
申请日：2005-07-18
申请人：四川大学华西医院
发明人：卢晓风 , 程惊秋 , 曾令宇 , 万琳 , 丘小庆 , 陆燕蓉 , 李胜富 , 陈利弘 , 李幼平 , 步宏
IPC分类号： C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/63 , A61K39/395 , A61P37/06 , A61P35/00
摘要：本发明涉及新型的重组人源化免疫毒素hS83－P34，该免疫毒素含有由人源化细胞毒性T细胞抗原4的抗原结合分子与人穿孔素的通道形成活性分子组成的融合蛋白。本发明的免疫毒素具有严格的靶向性，能避免对正常细胞的伤害，毒副作用小；不需经过内化及细胞内转运过程，作用效率高；不易产生相应抗体，免疫原性弱；不易产生耐药性。可用于治疗某些肿瘤和自身免疫性疾病，以及用于抑制器官移植时的免疫排斥反应。

29. 发明授权

CN114214283B 一种培养肝肿瘤类器官的方法有权
公开(公告)号：CN114214283B
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202111678849.0
申请日：2021-12-31
申请人：四川大学华西医院 , 成都华西精准医学产业技术研究院有限公司
发明人：包骥 , 步宏 , 朱星龙 , 吴琼
IPC分类号： C12N5/09 , C12N5/071 , C12M3/04 , C12M1/22 , C12M1/24 , C12Q1/02
摘要：本发明提供了一种培养肝肿瘤类器官的方法，属于类器官培养领域。本发明首先提供了一种肝肿瘤类器官培养容器，它是内部底表面带有肝脏细胞外基质印迹块阵列的细胞培养容器；所述底表面未覆盖肝脏细胞外基质的区域被封闭剂封闭；所述肝脏细胞外基质印迹块阵列由直径为50～300μm的圆形阵点组成，每个圆形阵点间的间距为25‑500μm。本发明还提供了一种肝肿瘤类器官的培养方法，该培养方法缩短了培养时间，简化了培养方式，有效控制了肝肿瘤类器官的粒径大小与排列，提高了药物筛选的重复性与稳定性。使用培养的肝肿瘤类器官进行药物筛(56)对比文件陈晓旭等.脱细胞支架制备及其在组织工程和再生医学中的应用《.中国组织工程研究》.2021,第26卷全文.Shin Woojung等.Robust Formation of anEpithelial Layer of Human IntestinalOrganoids in a Polydimethylsiloxane-BasedGut-on-a-Chip Microdevice《.Frontiers inmedical technology》.2021,第2卷全文.Hosic S等.Rapid Prototyping ofMultilayer Microphysiological Systems.《ACS BIOMATERIALS SCIENCE & ENGINEERING》.2021,第7卷2949-2963.Hyun Jung Kim等.Human gut-on-a-chipinhabited by microbial flora thatexperiences intestinal peristalsis-likemotions and flow《.Lab on a Chip》.2012,(第12期),全文.刘卓健;周博;段芳龄.食管鳞状细胞癌类器官的应用.胃肠病学和肝病学杂志.2020,(第03期),全文.杨焕松;李斌.肿瘤类器官技术研究进展.中国肿瘤临床与康复.2020,(第09期),全文.冯杰,高长有,沈家骢.微接触印刷技术在表面图案化中的应用.高分子材料科学与工程.2004,(第05期),全文.步宏.组织工程肝脏研究现状及应用前景.中国组织工程研究与临床康复.2009,(第50期),全文.

30. 发明授权

CN114214284B 一种培养肾肿瘤类器官的方法有权
公开(公告)号：CN114214284B
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202111678865.X
申请日：2021-12-31
申请人：四川大学华西医院 , 成都华西精准医学产业技术研究院有限公司
发明人：包骥 , 步宏 , 王坤杰 , 朱星龙 , 金熙
IPC分类号： C12N5/09 , C12N5/071 , C12M3/04 , C12M1/22 , C12M1/24 , C12Q1/02
摘要：本发明提供了一种培养肾肿瘤类器官的方法，属于类器官培养领域。本发明首先提供了一种肾肿瘤类器官培养容器，它是内部底表面带有肾脏细胞外基质印迹块阵列的细胞培养容器；所述底表面未覆盖肾脏细胞外基质的区域被封闭剂封闭；所述肾脏细胞外基质印迹块阵列由直径为50～200μm的圆形阵点组成，每个圆形阵点间的间距为25～300μm。本发明还提供了一种肾肿瘤类器官的培养方法，该培养方法缩短了培养时间，简化了培养方式，有效控制了肾肿瘤类器官的粒径大小与排列，提高了药物筛选的重复性与稳定性。使用培养的肾肿瘤类器官进行药物筛选，具有更高效与安全性，同时可进行个性化治(56)对比文件许洁.大鼠子宫去细胞支架及其细胞外基质凝胶的制备.生物医学工程学杂志.2018,第35卷(第2期),第238页左栏第1段.Yi Li等.Decellularization of porcinewhole lung to obtaina clinical-scalebioengineered scaffold.J Biomed Mater ResA.第109卷(第9期),第1624段左栏第3段.刘春晓等.灌注法制备大鼠全肾脏脱细胞基质的研究.南方医科大学学报.2021,第29卷(第5期),979-982.Adam D. McInnes等.Preparation and Useof Decellularized Extracellular Matrixfor Tissue Engineering.Journal ofFunctional Biomaterials.2022,第13卷(第4期),1-54.

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