会员体验
专利管家（专利管理）
工作空间（专利管理）
风险监控（情报监控）
数据分析（专利分析）
侵权分析（诉讼无效）
联系我们
交流群
官方交流：
QQ群： 891211   
微信请扫码    >>>
现在联系顾问~
首页 / 专利分类库 / 人类生活必需 / 用于年龄疾病的TGF-β治疗剂

用于年龄疾病的TGF-β治疗剂
申请号 CN202280051787.7 申请日 2022-05-23 公开(公告)号 CN117813092A 公开(公告)日 2024-04-02
申请人 GMP生物技术有限公司; 赵王玉; 发明人 赵王玉;
摘要 本 发明 涉及用于 治疗 或改善人类或动物的年龄 疾病 的症状、或用于治疗或改善病毒性疾病的症状、或用于抑制或阻抑病毒进入细胞或在细胞中复制、或用于阻抑 炎症 反应或细胞因子 风 暴的方法、组合物、 试剂 盒 和药物用途。这些目的可以通过抑制或阻抑TGF‑β表达的药物制剂来实现。更具体地，本发明公开了抗TGF‑β剂例如针对TGF‑β的反义寡核苷酸、青蒿素或其组合在年龄疾病 治疗方案 中的组合物、方法和用途。
权利要求

1.一种治疗或改善有需要的人类受试者或动物的年龄疾病的症状的方法，所述方法包括：
制备包含用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂的药物组合物；以及
向受试者施用治疗足够量的组合物。
2.包含用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂的组合物用于治疗或改善人类受试者或动物的年龄疾病的症状的用途。
3.包含用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂的组合物在制备用于治疗或改善人类受试者或动物的年龄疾病的症状的药物中的用途。
4.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述年龄疾病是由病毒性疾病引起的。
5.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述年龄疾病是由于SARS、MERS、冠状病毒、HIV、埃博拉、巨细胞病毒、人类疱疹病毒6型、单纯疱疹病毒HSV‑1、单纯疱疹病毒HSV‑2、Epstein‑Barr病毒、乙型肝炎病毒、肠道病毒D68或甲型流感引起的。
6.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述年龄疾病是长期冠状病毒疾病、高炎症免疫疾病、病毒感染引起的严重呼吸系统疾病、年龄相关性纤维化疾病或年龄相关性癌症。
7.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述受试者根据以下之一住院：
WHO COVID‑19临床改善顺序量表标准3，其中所述受试者住院，未接受氧气疗法；
WHO COVID‑19临床改善顺序量表标准4，其中受试者住院，并通过面罩或鼻翼管吸氧；
WHO COVID‑19临床改善顺序量表标准5，其中受试者住院，并接受无创机械通气或高流量吸氧；和
WHO COVID‑19临床改善顺序量表标准6，其中受试者住院，并接受插管和机械通气。
8.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述受试者年龄大于60岁并且住院且呈现选自以下的至少一种医学风险因素：
3
绝对淋巴细胞计数≤1000个细胞/mm；
高血压；
糖尿病；
心力衰竭；和
COPD。
9.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述受试者的年龄大于35岁并且住院且表现出小于77mmHg的低PaO2。
10.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述疾病是由于衰老引起的多器官纤维化，包括肺衰竭、心力衰竭、肾衰竭和脑认知功能障碍中的任一种。
11.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述受试者具有由于任何COVID变种引起的长期COVID疾病症状。
12.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中施用或使用所述组合物与所述疾病的标准治疗相组合。
13.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其包含任何一种或多种另外的药物，所述另外的药物包括抗炎药、抗炎类固醇、哌喹、咯萘啶、姜黄素、乳香、瑞德西韦、Sompraz D、Zifi CV/Zac D、CCM、Broclear、布地福莫、Rapitus、Montek LC、低分子量肝素、泼尼松龙、对乙酰氨基酚、复合维生素B、维生素C、泮托拉唑、多西环素、伊维菌素、锌、Foracort Rotacaps吸入剂、注射用头孢曲松、对乙酰氨基苯酚片、注射用法安明、瑞德西韦片、阿奇霉素、注射用地塞米松、注射用昂丹司琼、复合维生素片、抗坏血酸片、碳酸钙片和硫酸锌片。
14.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述受试者在施用或使用后第
14天基于八分制WHO COVID‑19临床改善顺序量表具有改善的临床评分。
15.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述受试者在施用或使用后具有改善的炎症生物标志物。
16.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中施用或使用所述组合物降低了第7天、或第14天、或第28天的死亡率。
17.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中施用或使用所述组合物改善了第7天的病毒载量敲降。
18.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中施用或使用所述组合物后第14天或第28天增加了生存率。
19.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述药剂是对TGF‑β1、TGF‑β2或TGF‑β3具有特异性的反义寡核苷酸或抑制剂。
20.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂选自如下所示的TGF‑β2特异性反义寡核苷酸SEQ ID NO：1‑9：
SEQ ID NO:1，gtaggtaaaa acctaatat
SEQ ID NO:2，gttcgtttag agaacagatc
SEQ ID NO:3，taaagttcgt ttagagaaca g
SEQ ID NO:4，agccctgtat acgac
SEQ ID NO:5，gtaggtaaaa acctaatat
SEQ ID NO:6，cgtttagaga acagatctac
SEQ ID NO:7，cattgtagat gtcaaaagcc
SEQ ID NO:8，ctccctcatg gtggcagttg a
SEQ ID NO:9，cggcatgtct attttgta，
及其化学修饰变体，青蒿素提取物，其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体，青蒿素制剂，及其任何组合。
21.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是青蒿素制剂，其包含90‑95％纯度的青蒿素提取物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。
22.根据权利要求21所述的方法或用途，其中所述赋形剂包含选自稀释剂、稳定剂、崩解剂和抗结块剂的任何一种或多种药学上可接受的赋形剂。
23.根据权利要求21所述的方法或用途，其中所述赋形剂包含微晶纤维素、聚山梨醇酯
80、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁中的任何一种或多种。
24.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是青蒿素化合物或其衍生物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
25.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是与包含Trp30的TGF‑β的位点I和/或包含Arg15、Gln19和Phe8的TGF‑β的位点II相互作用的化合物或包含小分子或多肽的配体，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
26.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是包含残基Phe24‑Lys37的TGF‑β的位点I和/或包含残基Cys7‑Gln19的TGF‑β的位点II的多肽或肽模拟物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
27.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是对包含残基Phe24‑Lys37的TGF‑β的位点I和/或包含残基Cys7‑Gln19的TGF‑β的位点II具有亲和力的抗体或抗体片段。
28.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是包含倍半萜内酯的化合物或其衍生物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
29.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是包含三个异戊二烯基和一个内酯环的化合物或其衍生物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或其异构体。
30.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述组合物由所述药剂的冻干粉末制备。
31.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述药剂是选自SEQ ID NO：1‑
2
9的TGF‑β2特异性反义寡核苷酸及其化学修饰变体，并且在第1天至第7天以140mg/m的剂量通过连续静脉内输注施用或使用。
32.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述药剂是选自SEQ ID NO：1‑
9的TGF‑β2特异性反义寡核苷酸及其化学修饰变体，并且通过连续静脉内输注施用或使用，Cmax值为2‑3μg/mL。
33.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，其中所述药剂是选自SEQ ID NO：1‑
2
9的TGF‑β2特异性反义寡核苷酸及其化学修饰变体，并且在第1天至第7天以140mg/m的剂量通过连续静脉内输注单独地或与任何形式的青蒿素组合施用或使用，所述任何形式的青蒿素在第1天至第5天以每天500mg的剂量施用或使用。
34.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，包括在施用或使用所述组合物后阻抑由于TGF‑β诱导的蛋白引起的症状。
35.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，包括在施用或使用所述组合物后阻抑由于长期冠状病毒疾病、高炎症免疫疾病、病毒感染引起的严重呼吸系统疾病、年龄相关性纤维化疾病或年龄相关性癌症中的任一种引起的症状。
36.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，包括在施用或使用所述组合物后阻抑由于多器官炎症综合征、细胞因子风暴、血管炎或川崎综合征引起的症状。
37.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，包括在施用或使用所述组合物后阻抑由于细胞因子风暴引起的症状。
38.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，包括在施用或使用所述组合物后减少重症监护病房持续时间。
39.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，包括在施用或使用所述组合物后减少住院时间。
40.根据权利要求1‑3中任一项所述的方法或用途，包括在施用或使用所述组合物后增加不使用呼吸机的天数。
41.一种药物组合物，其用于抑制或阻抑TGF‑β的表达，或用于抑制或阻抑病毒进入细胞或在细胞中的复制，或用于抑制或阻抑炎症反应或细胞因子风暴，或用于治疗或改善人类受试者或动物的年龄相关性疾病的症状，所述组合物包含：
TGF‑β抑制剂，青蒿素，其药学上可接受的盐形式、酯、多晶型物或立体异构体，以及它们的任何组合；和
载体。
42.根据权利要求41所述的组合物，其中所述TGF‑β抑制剂选自TGF‑β2特异性反义寡核苷酸SEQ ID NO：1‑9及其化学修饰变体。
43.根据权利要求41‑42中任一项所述的组合物，其中所述载体为无菌注射用水、盐水、等渗盐水，或其组合。
44.根据权利要求41‑42中任一项所述的组合物，其中所述组合物基本上不含赋形剂。
45.根据权利要求41‑42中任一项所述的组合物，其中所述组合物在37℃下在载体中稳定至少14天。
46.根据权利要求41‑42中任一项所述的组合物，其中所述组合物与用于所述疾病的标准治疗药物组合。
47.根据权利要求41‑42中任一项所述的组合物，其包含任何一种或多种另外的药物，所述另外的药物包括抗炎药、抗炎类固醇、哌喹、咯萘啶、姜黄素、乳香、瑞德西韦、Sompraz D、Zifi CV/Zac D、CCM、Broclear、布地福莫、Rapitus、Montek LC、低分子量肝素、泼尼松龙、对乙酰氨基酚、复合维生素B、维生素C、泮托拉唑、多西环素、伊维菌素、锌、Foracort Rotacaps吸入剂、注射用头孢曲松、对乙酰氨基苯酚片、注射用法安明、瑞德西韦片、阿奇霉素、注射用地塞米松、注射用昂丹司琼、复合维生素片、抗坏血酸片、碳酸钙片和硫酸锌片。
48.根据权利要求41‑42中任一项所述的组合物，其中所述年龄疾病是由于病毒性疾病引起的。
49.根据权利要求41‑42中任一项所述的组合物，其中所述年龄疾病是由于SARS、MERS、冠状病毒、HIV、埃博拉、巨细胞病毒、人类疱疹病毒6型、单纯疱疹病毒HSV‑1、单纯疱疹病毒HSV‑2、Epstein‑Barr病毒、乙型肝炎病毒、肠道病毒D68或甲型流感引起的。
50.根据权利要求41‑42中任一项所述的组合物，其中所述年龄疾病是长期冠状病毒疾病、高炎症免疫疾病、病毒感染引起的严重呼吸系统疾病、年龄相关性纤维化疾病或年龄相关性癌症。
51.根据权利要求41‑42中任一项所述的组合物，其中所述疾病是由于衰老引起的多器官纤维化，包括肺衰竭、心力衰竭、肾衰竭或脑认知功能障碍。
52.一种试剂盒，其包含在小瓶中的选自SEQ ID NO：1‑9的一种或多种TGF‑β2特异性反义寡核苷酸及其化学修饰变体的冻干粉末，每种含量为250mg。
53.一种试剂盒，其包含在小瓶中的含量为500mg的以下物质的冻干粉末：青蒿素或其衍生物，或与包含Arg15、Gln19和Phe8的TGF‑β的位点II相互作用的化合物或包含小分子或多肽的配体，倍半萜内酯或其衍生物，或包含三个异戊二烯基和一个内酯环的化合物及其衍生物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体，或任何上述物质的任何组合。
说明书全文

用于年龄疾病的TGF‑β治疗剂

[0001] 序列表
[0002] 本申请包括以ASCII文件电子提交的序列表，该序列表于2022年5月19日创建，命名为018988‑001WO1_SL.TXT，大小为1876字节。

技术领域

[0003] 本发明涉及用于治疗或改善在早期病症(condition)后归因于年龄而发生的疾病的症状的治疗剂。更具体地，本发明公开了用于抑制或阻抑TGF‑β的组合物和药剂，其为此类疾病提供改善的临床结果。本发明提供了抗TGF‑β药剂的稳定制剂，包括反义寡核苷酸组合物和其他药剂，以及用于治疗在早期病症后归因于年龄而发生的疾病的症状的方法。

背景技术

[0004] 常规的药物方法通常不足以改善长期疾病的症状，例如由COVID类型变种和其他疾病引起的。在某些情况下，早期病症的幸存者患年龄疾病的风险增加，导致生存率较低。此外，早期病症可能会影响多个器官，并且需要针对晚期年龄疾病采取多种治疗方式。
[0005] 早期疾病的病理学可能是复杂且不可预测的。例如，SAR‑CoV‑2感染上调TGF‑β和弗林蛋白酶(Furin)。TGF‑β锁定细胞周期，允许病毒复制。此外，TGF‑β驱动弗林蛋白酶‑a蛋白酶的表达，该蛋白酶是SARS‑CoV‑2进入细胞所需的。在原代人支气管上皮细胞中，TGF‑β1和TGF‑β2诱导弗林蛋白酶表达。该途径构成一个正循环，其不断释放TGF‑β，导致TGF‑β激增。
[0006] TGF‑β激增推动COVID‑19的病理学进入危险的、失控的正反馈循环。因此，TGF‑β从感染前几乎检测不到的水平上升到感染期间的50,000‑100,000pg/ml。TGF‑β推动进展至肺部感染阶段，最后进入高炎症阶段。因此，TGF‑β在包括肺、肝、肾和脑在内的多个器官中引起瘢痕形成，这是导致COVID后长期、晚期症状的原因。
[0007] 由于长期持续疾病的病理学的不可预测性，新疗法需要针对不同的患者群体进行临床研究。理想情况下，需要最可靠的测试，例如对年龄疾病患者进行双盲、随机、安慰剂对照研究。此外，此类研究通常需要高度稳定的制剂才能获得准确的结果。
[0008] 需要用于抑制或阻抑长期持续的疾病或年龄疾病的不可预测的病理学中的因素的方法和组合物。例如，需要用于抑制TGF‑β活性和/或阻抑TGF‑β相关病理的方法和组合物，其可以提高治疗或改善长期持续的COVID样疾病和随着年龄而出现的其他疾病的症状的有效性。
[0009] 迫切需要用于抑制和/或阻抑TGF‑β的方法和组合物，其为治疗长期持续的疾病以及随年龄发生的其他疾病提供积极的临床结果。需要用于阻抑TGF‑β的药剂的稳定制剂来减少对各种器官的损害、减轻疾病作用并减少长期感染后症状。
[0010] 发明概述
[0011] 本发明提供了治疗或改善年龄疾病(age disease)的症状的疗法。
[0012] 如本文所用，年龄疾病是指在早期疾病或病症之后、或在具有长期持续症状或影响的疾病期间或之后在时间上较晚出现的疾病或病症，或者在早期病症的长期持续症状已经停止之后出现的疾病或病症。在时间上较晚可以相对较短，例如几天，或相对较长，例如几年或几十年。
[0013] 在一些实施方案中，本发明包括用于抑制或阻抑TGF‑β以针对年龄疾病提供改善的临床结果的药剂和组合物。
[0014] 在进一步的实施方案中，本发明提供了用于针对年龄疾病的各种疗法的抗TGF‑β剂的稳定制剂。抗TGF‑β剂的实例包括TGF‑β抑制剂，例如反义寡核苷酸、青蒿素，其药学上可接受的盐形式、酯、多晶型物或立体异构体，以及它们的组合。
[0015] 一般来说，严重和/或长期持续的疾病的病理学是不可预测的，因此新疗法需要针对不同的患者群体进行临床研究。本公开提供了针对患有长期持续的年龄疾病或呼吸系统疾病的患者的高度可靠、双盲、随机、安慰剂对照研究的结果。
[0016] 在另一方面，本公开提供了用于针对年龄疾病的疗法的抗TGF‑β剂的高度稳定的制剂。本发明的稳定制剂提供了令人惊讶的改善的临床结果。用于阻抑TGF‑β的药剂的稳定制剂可用于减少对各种器官的损害、缓解疾病作用、并减少年龄疾病的长期感染后症状。
[0017] 本发明的方法和组合物可用于抑制或阻抑年龄相关性疾病的不可预测的病理学中的因素。在某些实施方案中，本公开提供了用于抑制TGF‑β活性和/或阻抑TGF‑β相关病理的方法和组合物，其可以提高治疗或改善COVID样疾病和其他疾病的症状的有效性。
[0018] 本公开的组合物和制剂可用于抑制和/或阻抑TGF‑β以提供治疗年龄疾病以及其他疾病的积极临床结果。
[0019] 本发明的实施方案包括以下内容：
[0020] 一种治疗或改善有需要的人类受试者或动物的年龄疾病的症状的方法，该方法包括：
[0021] 制备包含用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂的药物组合物；以及
[0022] 向受试者施用治疗足够量的组合物。包含用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂的组合物用于治疗或改善人类受试者或动物的年龄疾病的症状的用途。包含用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂的组合物在制备用于治疗或改善人类受试者或动物的年龄疾病的症状的药物中的用途。年龄疾病可能是由病毒性疾病引起的。
[0023] 上述方法或用途，其中所述年龄疾病是由于SARS、MERS、冠状病毒、HIV、埃博拉、巨细胞病毒、人类疱疹病毒6型、单纯疱疹病毒HSV‑1、单纯疱疹病毒HSV‑2、Epstein‑Barr病毒、乙型肝炎病毒、肠道病毒D68或甲型流感引起的。
[0024] 上述方法或用途，其中所述年龄疾病是长期冠状病毒疾病、高炎症性免疫疾病、病毒感染引起的严重呼吸系统疾病、年龄相关性纤维化疾病或年龄相关性癌症。
[0025] 上述方法或用途，其中所述受试者根据以下之一住院：
[0026] WHO COVID‑19临床改善顺序量表标准(WHO COVID‑19Clinical Improvement Ordinal Scale Criteria)3，其中所述受试者住院，无需氧气疗法；
[0027] WHO COVID‑19临床改善顺序量表标准4，其中受试者住院，并通过面罩或鼻翼管吸氧；
[0028] WHO COVID‑19临床改善顺序量表标准5，其中受试者住院，并接受无创机械通气或高流量吸氧；和
[0029] WHO COVID‑19临床改善顺序量表标准6，其中受试者住院，并接受插管和机械通气。
[0030] 上述方法或用途，其中受试者年龄大于60岁并且住院且呈现出选自以下的至少一种医学风险因素：
[0031] 绝对淋巴细胞计数≤1000个细胞/mm3；
[0032] 高血压；
[0033] 糖尿病；
[0034] 心力衰竭；和
[0035] COPD。
[0036] 上述方法或用途，其中受试者年龄大于35岁并且住院且表现出低于77mmHg的低PaO2。
[0037] 上述方法或用途，其中所述疾病是由于衰老引起的多器官纤维化，包括肺衰竭、心力衰竭、肾衰竭和脑认知功能障碍中的任一种。
[0038] 上述方法或用途，其中受试者具有由于任何COVID变种而导致的长期COVID疾病症状。
[0039] 上述方法或用途，其中施用或使用组合物与该疾病的标准治疗相结合。
[0040] 上述方法或用途，包括任何一种或多种另外的药物，所述另外的药物包括抗炎药、抗炎类固醇、哌喹(piperiquine)、咯萘啶(pyronaridine)、姜黄素(curcumin)、乳香(frankincense)、瑞德西韦(Remdesivir)、Sompraz D、Zifi CV/Zac D、CCM、Broclear、布地福莫(Budamate)、Rapitus、MontekLC、低分子量肝素(low molecular weight heparine)、泼尼松龙(prednisolone)、对乙酰氨基酚(Paracetamol)、复合维生素B(Vitamin B complex)、维生素C(Vitamin C)、泮托拉唑(Pantoprozol)、多西环素(Doxycycline)、伊维菌素(Ivermectin)、锌(Zinc)、Foracort Rotacaps吸入剂、注射用头孢曲松(Injection Ceftriaxone)、对乙酰氨基苯酚片(Tab Paracetamol)、注射用法安明(Injection Fragmin)、瑞德西韦片(Tablet Covifor)、阿奇霉素(Azithromycin)、注射用地塞米松(Injection Dexamethasone)、注射用昂丹司琼(Injection Odndansetron)、复合维生素片(Tablet Multivitamin)、抗坏血酸片(Tablet Ascorbic Acid)、碳酸钙片(Tablet Calcium Carbonate)和硫酸锌片(Tablet Zinc Sulfate)。
[0041] 上述方法或用途，其中受试者在施用或使用后第14天基于八分制WHO COVID‑19临床改善顺序量表具有改善的临床评分。
[0042] 上述方法或用途，其中受试者在施用或使用后具有改善的炎症生物标志物。
[0043] 上述方法或用途，其中施用或使用组合物后第7天、或第14天、或第28天降低了死亡率。
[0044] 上述方法或用途，其中施用或使用组合物后第7天改善了病毒载量敲降。
[0045] 上述方法或用途，其中施用或使用组合物后第14天或第28天增加了生存率。
[0046] 上述方法或用途，其中所述药剂是对TGF‑β1、TGF‑β2或TGF‑β3具有特异性的反义寡核苷酸或抑制剂。
[0047] 上述方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂选自TGF‑β2特异性反义寡核苷酸SEQ ID NO：1‑9及其化学修饰变体，青蒿素提取物、其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体、青蒿素制剂，以及它们的任何组合。
[0048] 上述方法或用途，其中所述抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是青蒿素制剂，其包含90‑95％纯度的青蒿素提取物或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。
[0049] 上述方法或用途，其中赋形剂包含选自稀释剂、稳定剂、崩解剂和抗结块剂的任何一种或多种的药学上可接受的赋形剂。
[0050] 上述方法或用途，其中所述赋形剂包含选自微晶纤维素、聚山梨醇酯80、交聚维酮、交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁中的任何一种或多种。
[0051] 上述方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是青蒿素化合物或其衍生物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
[0052] 上述方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是与包含Trp30的TGF‑β位点I和/或包含Arg15、Gln19和Phe8的TGF‑β位点II相互作用的化合物或包含小分子或多肽的配体，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
[0053] 上述方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是包含残基Phe24‑Lys37的TGF‑β位点I和/或包含残基Cys7‑Gln19的TGF‑β位点II的多肽或肽模拟物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
[0054] 上述方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是对包含残基Phe24‑Lys37的TGF‑β位点I和/或包含残基Cys7‑Gln19的TGF‑β位点II具有亲和力的抗体或抗体片段。
[0055] 上述方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是包含倍半萜内酯(sesquiterprene lactone)的化合物或其衍生物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
[0056] 上述方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是包含3个异戊二烯基(isoprenyl)和1个内酯环的化合物或其衍生物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
[0057] 上述方法或用途，其中所述组合物由所述药剂的冻干粉末制备。
[0058] 上述方法或用途，其中所述药剂是选自SEQ ID NO：1‑9的TGF‑β2特异性反义寡核2
苷酸及其化学修饰变体，并且在第1天至第7天以140mg/m的剂量通过连续静脉输注施用或使用。
[0059] 上述方法或用途，其中所述药剂是选自SEQ ID NO：1‑9的TGF‑β2特异性反义寡核苷酸及其化学修饰变体，并且通过连续静脉内输注施用或使用，Cmax值为2‑3μg/mL。
[0060] 上述方法或用途，其中所述药剂是选自SEQ ID NO：1‑9的TGF‑β2特异性反义寡核2
苷酸及其化学修饰变体，并且在第1至7天以140mg/m的剂量通过连续静脉输注单独地或与任何形式的青蒿素组合施用或使用，任何形式的青蒿素在第1至5天以每天500mg的剂量施用或使用。
[0061] 上述方法或用途，包括在施用或使用所述组合物后阻抑由TGF‑β诱导的蛋白引起的症状。
[0062] 上述方法或用途，包括在施用或使用所述组合物后阻抑由于长期冠状病毒疾病、高炎症免疫疾病、由于病毒感染导致的严重呼吸系统疾病、年龄相关性纤维化疾病或年龄相关性癌症中的任一种引起的症状。
[0063] 上述方法或用途，包括在施用或使用所述组合物后阻抑由于多器官炎症综合征(inflammatory syndrome)、细胞因子风暴(cytokine storm)、血管炎(vasculitis)或川崎综合征(Kawasaki syndrome)引起的症状。
[0064] 上述方法或用途，包括在施用或使用所述组合物后阻抑由于细胞因子风暴引起的症状。
[0065] 上述方法或用途，包括施用或使用所述组合物后减少重症监护病房持续时间。重症监护病房持续时间可减少至少1天，或1‑10天。
[0066] 上述方法或用途，包括施用或使用所述组合物后减少住院时间。住院时间可减少至少1天，或1‑10天。
[0067] 上述方法或用途，包括在施用或使用所述组合物后增加不使用呼吸机的天数。不使用呼吸机的天数可以增加至少1天，或增加1‑10天。
[0068] 一种药物组合物，其用于抑制或阻抑TGF‑β的表达，或用于抑制或阻抑病毒进入细胞或在细胞中的复制，或用于抑制或阻抑炎症反应或细胞因子风暴，或用于治疗或改善人类受试者或动物的年龄相关性疾病的症状，所述组合物包含：
[0069] TGF‑β抑制剂、青蒿素、其药学上可接受的盐形式、酯、多晶型物或立体异构体，以及它们的任何组合；和
[0070] 载体。
[0071] 一种用于体外抑制或阻抑TGF‑β表达的药物组合物，其包含：
[0072] TGF‑β抑制剂、青蒿素、其药学上可接受的盐形式、酯、多晶型物或立体异构体，以及它们的任何组合；和
[0073] 载体。
[0074] 一种用于体外抑制或阻抑TGF‑β的表达、或用于体外抑制或阻抑病毒进入细胞或在细胞中复制的药物组合物，所述组合物包含：
[0075] TGF‑β抑制剂、青蒿素、其药学上可接受的盐形式、酯、多晶型物或立体异构体，以及它们的任何组合；和
[0076] 载体。
[0077] 一种药物组合物，其包含：
[0078] TGF‑β抑制剂、青蒿素、其药学上可接受的盐形式、酯、多晶型物或立体异构体，以及它们的任何组合；和
[0079] 载体。
[0080] 一种制备药物的方法，所述药物用于抑制或阻抑TGF‑β的表达、或用于抑制或阻抑病毒进入细胞或在细胞中复制，或用于抑制或阻抑炎症反应或细胞因子风暴，或用于治疗或改善人类受试者或动物的年龄相关性疾病的症状，该方法包括：
[0081] 制备TGF‑β抑制剂、青蒿素、其药学上可接受的盐形式、酯、多晶型物或立体异构体，以及它们的任何组合；和
[0082] 与载体组合。
[0083] 一种制备用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药物的方法，所述方法包括：
[0084] 制备TGF‑β抑制剂、青蒿素、其药学上可接受的盐形式、酯、多晶型物或立体异构体，以及它们的任何组合；和
[0085] 与载体组合。
[0086] 上述组合物，其中所述TGF‑β抑制剂选自TGF‑β2特异性反义寡核苷酸SEQ ID NO：1‑9及其化学修饰变体。
[0087] 上述组合物，其中所述载体为无菌注射用水、盐水、等渗盐水或其组合。
[0088] 上述组合物，其中该组合物基本上不含赋形剂。
[0089] 上述组合物，其中所述组合物在37℃下在载体中稳定至少14天。
[0090] 上述组合物，其中所述组合物与该疾病的标准治疗药物组合。
[0091] 上述组合物，其包含任何一种或多种另外的药物，所述另外的药物包括抗炎药、抗炎类固醇、哌喹、咯萘啶、姜黄素、乳香、瑞德西韦、Sompraz D、Zifi CV/Zac D、CCM、Broclear、布地福莫、Rapitus、MontekLC、低分子量肝素、泼尼松龙、对乙酰氨基酚、复合维生素B、维生素C、泮托拉唑、多西环素、伊维菌素、锌、Foracort Rotacaps吸入剂、注射用头孢曲松、对乙酰氨基苯酚片、注射用法安明、瑞德西韦片、阿奇霉素、注射用地塞米松、注射用昂丹司琼、复合维生素片、抗坏血酸片、碳酸钙片和硫酸锌片。
[0092] 上述组合物，其中所述年龄疾病是由病毒性疾病引起的。
[0093] 上述组合物，其中所述年龄疾病是由于SARS、MERS、冠状病毒、HIV、埃博拉、巨细胞病毒、人类疱疹病毒6型、单纯疱疹病毒HSV‑1、单纯疱疹病毒HSV‑2、Epstein‑Barr病毒、乙型肝炎病毒、肠道病毒D68或甲型流感引起的。
[0094] 上述组合物，其中所述年龄疾病是长期冠状病毒疾病、高炎症免疫疾病、由病毒感染引起的严重呼吸系统疾病、年龄相关性纤维化疾病或年龄相关性癌症。
[0095] 上述组合物，其中所述疾病是由于衰老引起的多器官纤维化，包括肺衰竭、心力衰竭、肾衰竭或脑认知功能障碍。
[0096] 一种试剂盒，其包含在小瓶中的选自SEQ ID NO：1‑9的一种或多种TGF‑β2特异性反义寡核苷酸及其化学修饰变体的冻干粉末，每种含量为250mg。
[0097] 一种试剂盒，其包含在小瓶中含量为500mg的以下物质的冻干粉末：青蒿素或其衍生物；或与包含Arg15、Gln19和Phe8的TGF‑β位点II相互作用的化合物或包含小分子或多肽的配体；倍半萜内酯或其衍生物；或包含三个异戊二烯基和一个内酯环的化合物及其衍生物；或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体，或任何上述物质的任何组合。
[0098] 附图简要说明
[0099] 图1显示了使用基于生物信息学结构的配体设计来鉴定和测量TGF‑β1的主要和替代结合位点对已发现用于抑制TGF‑β的新组合物的分析。结果确定了两个结合活性位点：位点1包括残基Phe24‑Lys37，位点2包括残基Cys7‑Gln19。
[0100] 图2显示了针对住院的COVID‑19患者的反义寡核苷酸OT‑101的双盲、随机、安慰剂对照、多中心研究的设计方案。
[0101] 图3显示了在住院的COVID‑19患者中反义寡核苷酸OT‑101的研究实现了生存率的提高。
[0102] 图4显示了使用青蒿素对抗COVID的临床试验结果。青蒿素恢复了确诊SARS‑CoV‑2感染的患者因病毒感染而丧失的长期肺功能。这些结果显示了青蒿素对对抗COVID是有效的。
[0103] 发明详述
[0104] 本发明提供了治疗或改善年龄疾病的症状的疗法。如本文所用，年龄疾病是指在早期病症之后发生的疾病，或具有长期持续症状的疾病，或在早期病症的长期持续症状之后发生的疾病。
[0105] 在一些实施方案中，本发明包括用于抑制或阻抑TGF‑β以提供针对严重和/或长期持续的年龄或呼吸系统疾病的改善的临床结果的药剂及其组合物。
[0106] 在进一步的实施方案中，本发明提供了用于各种疗法(包括长期持续呼吸系统疾病)的抗TGF‑β剂的稳定制剂。抗TGF‑β剂的实例包括TGF‑β抑制剂，例如反义寡核苷酸、青蒿素、其药学上可接受的盐形式、酯、多晶型物或立体异构体，以及它们的组合。
[0107] 一般来说，严重或长期持续呼吸系统疾病的病理学是不可预测的，因此新疗法需要针对不同的患者群体进行临床研究。本公开提供了对患有严重呼吸系统疾病的患者进行的高度可靠、双盲、随机、安慰剂对照研究的结果。
[0108] 在另一方面，本公开提供了用于针对年龄疾病的疗法的抗TGF‑β剂的高度稳定的制剂。本发明的稳定制剂提供了令人惊讶的改善的临床结果。用于阻抑TGF‑β的药剂的稳定制剂可用于减少对各种器官的损害、缓解疾病作用并减少长期持续疾病的长期感染后症状。
[0109] 本发明的方法和组合物可用于抑制或阻抑年龄疾病的不可预测的病理学中的因素。在某些实施方案中，本公开提供了用于抑制TGF‑β活性和/或阻抑TGF‑β相关病理的方法和组合物，其可以提高治疗或改善长期持续的COVID样疾病和其他呼吸系统疾病的症状的有效性。
[0110] 本公开的组合物和制剂可用于抑制和/或阻抑TGF‑β以提供用于治疗严重和/或长期持续的感染性病毒性疾病以及其他呼吸系统疾病的积极临床结果。
[0111] 用于年龄疾病的方法和组合物
[0112] 本发明的方法包括治疗或改善有需要的人类受试者或动物的年龄疾病的症状的方法。此类方法可以通过制备包含用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂的药物组合物，并向受试者施用治疗足够量的该组合物来进行。
[0113] 在一些实施方案中，本公开提供了用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂的组合物用于治疗或改善人类受试者或动物的年龄疾病的症状的用途。
[0114] 在进一步的实施方案中，本公开提供了用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂的组合物在制备用于治疗或改善人类受试者或动物的年龄疾病的症状的药物中的用途。
[0115] 在本发明的方法或用途中，年龄疾病可以是由病毒性疾病引起的。例如，病毒性疾病可以由SARS、MERS、冠状病毒、HIV、埃博拉、巨细胞病毒、人类疱疹病毒6型、单纯疱疹病毒HSV‑1、单纯疱疹病毒HSV‑2、Epstein‑Barr病毒、乙型肝炎病毒、肠道病毒D68或甲型流感引起。在一些实施方案中，年龄疾病可以是由COVID‑19、长期冠状病毒疾病、高炎症免疫疾病、病毒感染引起的严重呼吸系统疾病、年龄相关性纤维化疾病或年龄相关性癌症引起的。
[0116] 本发明提供了用于可能住院的患有年龄疾病的受试者的方法和制剂。受试者住院可能是由于以下任何一种原因造成的：
[0117] WHO COVID‑19临床改善顺序量表标准3，其中受试者住院，无需氧气疗法；
[0118] WHO COVID‑19临床改善顺序量表标准4，其中受试者住院，并通过面罩或鼻翼管吸氧；
[0119] WHO COVID‑19临床改善顺序量表标准5，其中受试者住院，并接受无创机械通气或高流量吸氧；和
[0120] WHO COVID‑19临床改善顺序量表标准6，其中受试者住院，并接受插管和机械通气。
[0121] 本公开的住院的受试者可以具有大于60岁的年龄并且可以住院且呈现出选自以下的至少一种医学风险因素：
[0122] 绝对淋巴细胞计数≤1000个细胞/mm3；
[0123] 年龄≥60岁；
[0124] 高血压；
[0125] 糖尿病；
[0126] 心力衰竭；和
[0127] COPD。
[0128] 在进一步的实施方案中，本发明的方法或用途可以应用于年龄大于35岁并且住院且表现出小于76或77mmHg的低PaO2的受试者。
[0129] 在另外的实施方案中，疾病可以是由于衰老引起的多器官纤维化，包括肺衰竭、心力衰竭、肾衰竭和脑认知功能障碍中的任何一种。
[0130] 在某些实施方案中，受试者可能因任何COVID变种而具有长期的COVID疾病症状。
[0131] 在另外的方面，本发明的方法和/或用途可以与针对该疾病公认的标准治疗组合或一起应用。可以使用的另外的药物的实例包括抗炎药、抗炎类固醇、哌喹、咯萘啶、姜黄素、乳香、瑞德西韦、Sompraz D、Zifi CV/Zac D、CCM、Broclear、布地福莫、Rapitus、Montek LC、低分子量肝素、泼尼松龙、对乙酰氨基酚、复合维生素B、维生素C、泮托拉唑、多西环素、伊维菌素、锌、Foracort Rotacaps吸入剂、注射用头孢曲松、对乙酰氨基苯酚片、注射用法安明、瑞德西韦片、阿奇霉素、注射用地塞米松、注射用昂丹司琼、复合维生素片、抗坏血酸片、碳酸钙片和硫酸锌片。
[0132] 在另外的方面，本发明的方法和/或用途可以与抗炎药物组合或一起应用。在某些实施方案中，本发明的方法和/或用途可以与抗炎类固醇药物组合或一起应用。
[0133] 在另外的实施方案中，本发明的方法或用途可以实现令人惊讶的改善的结果。受试者在施用或使用本公开的组合物后第14天或第28天基于八分WHO COVID‑19临床改善顺序量表可以具有改善的临床评分。
[0134] 在进一步的实施方案中，本发明的方法或用途可以实现令人惊讶的改善的受试者症状。受试者在施用或使用本公开的组合物后可以具有改善的炎症生物标志物水平。炎症标志物的实例包括C反应蛋白、红细胞沉降率、降钙素原水平、血浆粘度和纤维蛋白原水平。
[0135] 在另外的实施方案中，本发明的方法或用途可以实现令人惊讶的改善的结果。受试者在施用或使用本公开的组合物后第7天、或第14天、或第28天可以具有降低的死亡率。
[0136] 在某些实施方案中，本发明的方法或用途可以实现令人惊讶的改善的临床结果。受试者在施用或使用本公开的组合物后第7天、或第14天、或第28天可以具有增加的病毒载量敲降。
[0137] 在另外的实施方案中，本发明的方法或用途可以实现令人惊讶的改善的结果。在施用或使用本公开的组合物后，受试者在第14天或第28天可以具有增加的生存率。
[0138] 本公开的用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂的实例包括对TGF‑β1、TGF‑β2或TGF‑β3特异的反义寡核苷酸。
[0139] 本公开的用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂的实例包括本文SEQ ID NO：1‑9中给出的TGF‑β2特异性反义寡核苷酸。
[0140] SEQ ID NO:1，gtaggtaaaa acctaatat。
[0141] SEQ ID NO:2，gttcgtttag agaacagatc。
[0142] SEQ ID NO:3，taaagttcgt ttagagaaca g。
[0143] SEQ ID NO:4，agccctgtat acgac。
[0144] SEQ ID NO:5，gtaggtaaaa acctaatat。
[0145] SEQ ID NO:6，cgtttagaga acagatctac。
[0146] SEQ ID NO:7，cattgtagat gtcaaaagcc。
[0147] SEQ ID NO:8，ctccctcatg gtggcagttg a。
[0148] SEQ ID NO:9，cggcatgtct attttgta。
[0149] 如本领域已知的，本文SEQ ID NO：1‑9中给出的反义寡核苷酸可以被化学修饰。
[0150] 本公开的用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂的实例包括青蒿素提取物、其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体，以及它们的任何组合。在一些实施方案中，本公开包括纯度为至少60％、或70％、或80％、或90％、或95％的基本上纯的青蒿素。
[0151] 在某些实施方案中，本公开的用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂可以由该药剂的冻干粉末制备。
[0152] 更具体地，药剂可以是选自SEQ ID NO：1‑9的TGF‑β2特异性反义寡核苷酸，并且在2 2
第1天至第7天以140mg/m的剂量，或在第1天至第7天以1000mg/m的剂量，或在第1天至第7
2 2
天以180mg/m的剂量，或在第1天至第7天以200mg/m的剂量，通过连续静脉内输注施用或使用。
[0153] 在一些实施方案中，药剂可以是选自SEQ ID NO：1‑9的TGF‑β2特异性反义寡核苷酸及其化学修饰变体，并且通过连续静脉内输注施用或使用，Cmax值为2至3μg/mL。
[0154] 在进一步的实施方案中，药剂可以是选自SEQ ID NO：1‑9的TGF‑β2特异性反义寡2
核苷酸及其化学修饰变体，并且在第1至7天以140mg/m的剂量通过连续静脉内输注单独地或与任何形式的青蒿素组合施用或使用，所述任何形式的青蒿素在第1天至第5天以每天
500mg的剂量施用或使用。
[0155] 本公开的用于抑制TGF‑β的药剂的实例包括用于特异性抑制TGF‑β1、TGF‑β2或TGF‑β3的药剂。
[0156] 本发明的实施方案涉及施用或使用药剂组合物可以改善或阻抑由TGF‑β诱导的蛋白引起的症状。
[0157] 本发明的实施方案涉及施用或使用药剂组合物可以改善或阻抑由于长期持续的呼吸系统冠状病毒感染而引起的症状。
[0158] 用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂可以是青蒿素制剂，其包含90‑95％纯度的青蒿素提取物或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。赋形剂可包含选自稀释剂、稳定剂、崩解剂和抗结块剂的任何一种或多种药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，赋形剂可包含微晶纤维素、聚山梨醇酯80、交聚维酮、交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁中的任何一种或多种。
[0159] 在进一步的实施方案中，用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂可以是青蒿素化合物或其衍生物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
[0160] 如本文所用，衍生物涵盖提供化合物的结构类似物的化学修饰。例如，烷基的取代基或取代可以提供结构类似物。
[0161] 本发明的实施方案包括方法或用途，其中用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂是与包含Trp30的TGF‑β的位点I和/或包含Arg15、Gln19和Phe8的TGF‑β的位点II相互作用的化合物或包含小分子或多肽的配体，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
[0162] 在一些实施方案中，用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂可以是包含残基Phe24‑Lys37的TGF‑β的位点I和/或包含残基Cys7‑Gln19的TGF‑β的位点II的多肽或肽模拟物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
[0163] 在进一步的实施方案中，用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂可以是人源化或非人源化的抗体或抗体片段，其对包含残基Phe24‑Lys37的TGF‑β的位点I和/或包含残基Cys7‑Gln19的TGF‑β的位点II具有亲和力。
[0164] 在另外的实施方案中，用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂可以是包含倍半萜内酯的化合物或其衍生物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
[0165] 在某些实施方案中，用于抑制或阻抑TGF‑β表达的药剂可以是包含三个异戊二烯基和一个内酯环的化合物或其衍生物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
[0166] 在进一步的实施方案中，在施用或使用该组合物后，该方法或用途可以抑制由于长期冠状病毒疾病、高炎性免疫疾病、病毒感染引起的严重呼吸系统疾病、年龄相关性纤维化疾病或年龄相关性癌症中的任何一种引起的症状。
[0167] 在另外的实施方案中，施用或使用药剂的组合物可以改善或阻抑由于多器官炎症综合征、细胞因子风暴、血管炎或川崎综合征引起的症状。
[0168] 在各种实施方案中，本发明的方法或用途可以实现令人惊讶的改善的结果。在施用或使用本公开的组合物后，受试者可以减轻或阻抑由于细胞因子风暴引起的症状。
[0169] 在某些实施方案中，本发明的方法或用途可以实现令人惊讶的改善的结果。在施用或使用本公开的组合物后，受试者可以缩短重症监护病房的持续时间。
[0170] 在进一步的实施方案中，本发明的方法或用途可以实现令人惊讶的改善的结果。在施用或使用本公开的组合物后，受试者可以缩短住院时间。
[0171] 在另外的实施方案中，本发明的方法或用途可以实现令人惊讶的改善的结果。在施用或使用本公开的组合物后，受试者可以增加不使用呼吸机的天数。
[0172] 本发明的实施方案进一步包括用于抑制或阻抑TGF‑β表达、或用于抑制或阻抑病毒进入细胞或在细胞中复制、或用于抑制或阻抑炎症反应或细胞因子风暴、或用于治疗或改善人类或动物的年龄疾病的症状的药物组合物。药物组合物可含有TGF‑β抑制剂、青蒿素、其药学上可接受的盐形式、酯、多晶型物或立体异构体，以及它们的任何组合，以及载体。TGF‑β抑制剂可以选自TGF‑β2特异性反义寡核苷酸SEQ ID NO：1‑9及其化学修饰变体。载体可以是无菌注射用水、盐水、等渗盐水或其组合。
[0173] 重要的是，本公开的组合物可以基本上不含赋形剂。已发现基本上不含赋形剂的本发明组合物在载体中令人惊讶地稳定。在一些实施方案中，组合物可以在37℃下在载体中稳定至少14天、或至少21天、或至少28天。在另外的实施方案中，用于输注的药物组合物可以含有按重量计小于1％的赋形剂、或按重量计小于0.5％的赋形剂、或按重量计小于0.1％的赋形剂。
[0174] 本发明的实施方案还考虑了其中本发明的组合物与疾病的标准治疗疗法组合施用或使用的治疗方式。可以与本发明的组合物组合施用或使用的另外的药物的实例包括抗炎药、抗炎类固醇、哌喹、咯萘啶、姜黄素、乳香、瑞德西韦、Sompraz D、Zifi CV/Zac D、CCM、Broclear、布地福莫、Rapitus、Montek LC、低分子量肝素、泼尼松龙、对乙酰氨基酚、复合维生素B、维生素C、泮托拉唑、多西环素、伊维菌素、锌、Foracort Rotacaps吸入剂、注射用头孢曲松、对乙酰氨基苯酚片、注射用法安明、瑞德西韦片、阿奇霉素、注射用地塞米松、注射用昂丹司琼、复合维生素片、抗坏血酸片、碳酸钙片和硫酸锌片。
[0175] 早期病症的实例包括病毒性疾病。年龄疾病可以是由于SARS、MERS、冠状病毒、HIV、埃博拉、巨细胞病毒、人类疱疹病毒6型、单纯疱疹病毒HSV‑1、单纯疱疹病毒HSV‑2、Epstein‑Barr病毒、乙型肝炎病毒、肠道病毒D68、流感或甲型流感引起的。
[0176] 本发明还提供了试剂盒，其包含在小瓶中的选自SEQ ID NO：1‑9的一种或多种TGF‑β2特异性反义寡核苷酸的冻干粉末，每种含量为250mg。
[0177] 本发明还提供了试剂盒，其包含在小瓶中的含量为500mg的以下物质的冻干粉末：青蒿素或其衍生物，或与包含Arg15、Gln19和Phe8的TGF‑β的位点II相互作用的化合物或包含小分子或多肽的配体，倍半萜内酯或其衍生物，或包含三个异戊二烯基和一个内酯环的化合物及其衍生物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体，或前述的任何组合。
[0178] 治疗策略
[0179] 本发明描述了用于治疗或改善年龄疾病和年龄相关性疾病(包括癌症、纤维化和高炎症反应)的症状的组合物和方法。
[0180] 不希望受到理论的束缚，COVID‑19幸存者在从COVID‑19恢复数月后，出现呼吸系统病症的风险增加了3倍以上，包括呼吸衰竭、功能不全、呼吸骤停和下呼吸道疾病。因此，长期持续的冠状病毒感染和常规治疗对COVID‑19无效表明治疗策略和靶标并不完全准确。
[0181] 例如，激增可能是COVID‑19病理的根本原因。COVID‑19疾病导致TGF‑β大量释放，最终导致与长期COVID‑19疾病中观察到的恢复后症状相关的纤维化和器官瘢痕形成。
[0182] TGF‑β还可能参与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)后肺组织重塑和肺纤维化的发病机制。具体来说，TGF‑β通过刺激肺成纤维细胞的增殖/分化、肺间质和肺泡腔内胶原蛋白和其他细胞外基质蛋白的积累，导致肺纤维化的发生和发展，从而促进肺纤维化的发展。SARS‑CoV‑2感染患者的肺TGF‑β1mRNA表达高于对照组。类似地，COVID‑19患者肺中的TGF‑β蛋白较高。在COVID‑19中，TGF‑β1蛋白的血清水平可显著升高。出现肺纤维化样症状的COVID‑19后患者可具有较高水平的IL‑1α和TGF‑β，但较低水平的IFN‑β，这与未接种疫苗的受试者和未表现出肺纤维化样症状的COVID‑19后患者不同。
[0183] 由于TGF‑β/Smad3信号传导增加导致肾小管上皮细胞死亡，严重的COVID‑19病例可能会增加不良心脏重塑和肾脏重塑的发生率。TGF‑β信号传导的激活和氧化超载可能导致tau蛋白过度磷酸化，其通常与认知功能障碍或损伤(例如阿尔茨海默病/痴呆症)相关。
[0184] 本发明提供了由TGF‑β和长期疾病引起的年龄疾病的治疗剂。这种治疗策略是有效的，因为如果没有TGF‑β，病毒复制就不会发生。已表明反义寡核苷酸(如OT‑101)的方法和用途抑制Vero细胞上的SARS‑CoV‑1和SARS‑CoV‑2复制，其EC50与瑞德西韦相当(EC50为330nM vs.770nM)，并且选择性(SI)高于瑞德西韦的SI(>500vs.>130)。此外，从草药青蒿(Artemisia annua)中纯化的青蒿素在体外抑制TGF‑β活性并中和SARS‑CoV‑2(COVID‑19)，EC50为0.45ug/ml，安全指数为140，优于瑞德西韦和氯喹(chloroquine)。
[0185] 这种治疗策略是有效的，因为它可以阻止病毒感染并防止瘢痕形成以及长期症状和影响。
[0186] 这种治疗策略也是有效的，因为如果没有TGF‑β，TGF‑β激增和细胞因子风暴就不会发生。因此，通过靶向TGF‑β和/或OT‑101可以抑制由于TGF‑β激增引起的严重且长期持续的症状，包括ARDS和细胞因子风暴。例如，TGF‑β基因缺陷的TGF‑β敲除小鼠由于不存在TGF‑β激增而对流感病毒具有抵抗力。
[0187] 这种治疗策略进一步有效，因为它靶向在ARDS病理生理学中发挥关键作用的宿主蛋白TGF‑β，而不是靶向病毒固有的靶点。因此，OT‑101和/或青蒿素的方法和用途不会促进耐药病毒突变。
[0188] OT‑101是一种针对TGF‑β2的反义寡核苷酸，青蒿素是TGF‑β的一种小分子抑制剂，它们已被证明对抵抗COVID是临床有效的。
[0189] 例如，OT‑101用于静脉内ClinicalTrials.gov标识符：NCT00844064，特此通过引用并入。
[0190] 在本发明中，证明了这些药剂抵抗TGF‑β介导的瘢痕形成和/或纤维化、长期症状和年龄疾病的临床有效性。
[0191] 用于COVID‑19的反义寡核苷酸
[0192] 本发明描述了使用TGF‑β作为治疗COVID‑19的有效靶标的组合物和方法，以及用TGF‑β抑制来治疗COVID‑19的方法。
[0193] 反义寡核苷酸(ASO)可以是单链脱氧核糖核苷酸，其可以与mRNA靶标互补。反义疗法可以下调分子靶标，这可以通过诱导RNase H核酸内切酶活性来实现，该RNase H核酸内切酶活性切割RNA‑DNA异源双链体，并显著减少靶基因翻译。其他ASO机制可包括抑制5'帽形成、剪接过程例如剪接转换的改变以及核糖体活性的空间位阻。
[0194] 反义疗法策略可以利用单链DNA寡核苷酸，其通过介导靶mRNA的催化降解或通过与翻译所需的mRNA位点结合来抑制蛋白产生。反义寡核苷酸可设计用于靶向病毒RNA基因组或病毒转录本。反义寡核苷酸可以提供一种识别潜在靶标的方法，并因此代表了潜在的治疗剂。
[0195] 反义寡核苷酸可以是单链DNA的小合成片段，长度可以为15‑30个核苷酸。ASO可以通过Watson‑Crick杂交特异性结合互补的DNA/RNA序列，一旦结合到靶RNA，就会通过诱导切割机制或抑制mRNA成熟来抑制翻译过程。ASO可以选择性地特异性抑制基因表达。DNA或RNA的化学修饰可用于提高稳定性。
[0196] 例如，可以在磷酸二酯键、糖环和主链中引入修饰。ASO抗病毒剂可以通过(i)核糖核酸酶H(RNAse H)或RNase P介导的mRNA切割或(ii)通过参与靶基因翻译的空间(非键合)阻断酶来阻断翻译过程。
[0197] 不希望受到理论的束缚，SARS‑CoV PLpro可以在体外和体内经由ROS/p38 MAPK/STAT3/Egr‑1途径显著诱导TGF‑β介导的促纤维化反应。PLpro还可能触发TSP‑1的Egr‑1依赖性转录，在潜在的TGF‑β1激活中发挥重要作用。阻断TGF‑β可以抑制或减少病毒传播和纤维化的并发症，并为细胞免疫发挥其作用提供机会，从而减少受感染细胞中的病毒产量。TGF‑β基因表达的敲降可以抑制PRRSV的复制，并改善病毒感染后的免疫反应性。上皮细胞在协调肺稳态和防御病原体方面有作用。TGF‑β可以调节一系列免疫反应，包括炎症反应和调节反应，然而，其功能高度依赖于位置和环境。上皮来源的TGF‑β可以作为促病毒因子阻抑甲型流感感染期间的早期免疫反应。特别缺乏支气管上皮TGF‑b1(epTGFbKO)的小鼠可以表现出明显的保护作用，免受流感诱导的体重减轻、气道炎症和病理的影响。然而，对流感诱导的病理的保护可能与增强的淋巴细胞免疫反应不相关。与对照小鼠相比，epTGFbKO小鼠中干扰素β(IFNb)释放到气道中的动力学可能显著增强，与对照小鼠相比，epTGFbKO小鼠中第1天的IFNb升高。这可能诱导高度抗病毒状态，导致epTGFbKO小鼠的病毒复制受损。
TGF‑β阻抑可能针对病毒感染起作用。病毒感染上皮细胞并增殖驱动的TGF‑β风暴可能是TGF‑β的来源。可能在一些促炎细胞因子(如TNFα、IL‑6和IL‑1β)的帮助下的活性TGF‑β的突然且不受控制的增加可能不可避免地导致快速且大规模的水肿和纤维化，其重塑并最终阻塞气道。这可能导致肺部功能衰竭和患者发病。
[0198] 风暴疾病的病理学
[0199] 不希望受理论束缚，冠状病毒进入细胞后可以阻抑细胞复制并将细胞机器重定向至病毒的复制。VeroE6细胞的SARS‑CoV‑1感染可通过磷脂酰肌醇3'‑激酶/Akt信号传导通路和细胞凋亡这两者来抑制细胞增殖。SARS‑CoV‑1的核衣壳蛋白可以抑制细胞周期蛋白依赖性激酶复合物并阻断包括VeroE6在内的哺乳动物细胞的S期进展。此外，SARS‑CoV‑1 7a蛋白可经由HEK293、COS‑7和Vero细胞的细胞周期蛋白D3/pRB途径阻断G0/G1期的细胞周期进程。鼠冠状病毒复制可通过降低Cdk活性和pRb磷酸化，诱导受感染的17Cl‑1细胞的细胞周期停滞在G0/G1期。用禽冠状病毒传染性支气管炎病毒(IBV)感染异步复制和同步复制细胞可以使受感染的细胞停滞在细胞周期的G1/M期。细胞周期停滞也可能是通过TGF‑β上调来中心介导的。SARS冠状病毒可以经由其核衣壳蛋白和木瓜蛋白酶样蛋白酶(PLpro)上调TGF‑β。SARS冠状病毒PLpro可以在基于细胞的测定中以及在小鼠模型中通过直接肺部注射来激活TGF‑β1转录。SARS患者肺部样品中可能出现TGF‑β过度表达。在病毒复制测定中，OT‑101阻抑TGF‑β表达可能阻抑了SARS‑CoV1和SARS‑CoV2的复制。青蒿素是一种TGF‑β抑制剂，也可能抑制SARS‑CoV2的复制。感染后诱导TGF‑β可能导致细胞周期停滞，从而使细胞机器转向病毒生产。病毒载量可能会随着TGF‑β的成比例增加而增加，这反过来又会推动COVID‑
19疾病的进展。病毒载量可能与危重COVID‑19患者的IL‑6水平急剧升高密切相关。通过靶向TGF‑β，OT‑101可以关闭COVID‑19背后的引擎，让患者康复，而不陷入呼吸危象。
[0200] 本说明书中提及的所有出版物，包括专利、专利申请出版物和非专利出版物以及序列表，各自出于其所有目的通过引用明确并入本文。
[0201] 尽管为了清楚理解的目的已经通过示例详细描述了前述公开内容，但是对于技术人员来说显而易见的是，某些改变和修改被本公开所包含并且可以在所附权利要求的范围内无需过度实验而被实践，所述权利要求以说明性而非限制性的方式呈现。本发明包括所有此类额外的实施方案、等同方案和修改。本发明包括各种说明性组件、示例和要求保护的实施方案的特征、材料、元素或限制的任何组合或混合物。
[0202] 描述本发明和权利要求书中的术语“一个”、“一种”、“该”和类似术语应被解释为包括单数和复数。实施例
[0203] 实施例1.用于阻抑TGF‑β的不含赋形剂的稳定药剂溶液的制备。本实施例展示了用于阻抑和抑制TGF‑β的反义剂的稳定且相容的溶液的制备，所述溶液基本上不含赋形剂。
[0204] 下面所述的实验表明，10μM(61.43μg/mL)的OT‑101氯化钠溶液在5℃和37℃下令人惊讶地稳定至少两周。此外，7.35mg/mL和25mg/mL的OT‑101等渗盐水溶液在5℃和37℃下令人惊讶地稳定至少两周。
[0205] 模拟临床研究的在用条件和研究结果如表1和表2所示。表1显示了通过IV输注施用于患者的针对TGF‑β的反义寡核苷酸的结果。
[0206] 表1：针对TGF‑β的反义寡核苷酸的在用稳定性研究
[0207]
[0208]
[0209] 表1的实验表明，10μM反义寡核苷酸OT‑101的NaCl溶液在5℃和37℃下令人惊讶地稳定至少两周。表1的实验表明反义寡核苷酸OT‑101在WFI中于5℃下稳定至少两周。
[0210] 表2显示了抗TGF‑β的反义寡核苷酸通过IV输注施用于患者的结果。
[0211] 表2：TGF‑β抑制剂曲贝德生(trabedersen)的在用稳定性研究
[0212]
[0213] 表2的实验表明，在5℃和37℃下，7.35mg/mL和25mg/mL的TGF‑β反义寡核苷酸曲贝德生NaCl溶液令人惊讶地稳定至少两周。
[0214] 对10μM(61.43μg/mL)的OT‑101进行了进一步的在用稳定性研究。使用浓度为1.0mg/mL和10μM(61.43μg/mL)的分析储备液。检查10μM(61.43μg/mL)OT‑101在0.9％NaCl中的临床相关浓度在5℃和37℃下储存后的稳定性以及检查1mg/mL OT‑101在注射用水中的分析储备液在5℃下储存两周后的稳定性。实验所用材料如表3所示。
[0215] 表3：材料和药物溶液
[0216]
[0217]
[0218] 样品的杂质谱通过RP‑HPLC测定，浓度通过紫外光谱法测定。RP‑HPLC测定的样品杂质谱如表4所示。
[0219] 表4：10μM(61.43μg/mL)溶液的反相HPLC样品
[0220]
[0221] *PO＝一个硫代磷酸酯部分被磷酸酯部分替换的杂质(与5'N‑1共洗脱)
[0222] CNET＝一个胸苷核苷酸添加有氰乙基部分的杂质
[0223] 3'N‑2＝缺少两个3'末端核苷酸的杂质
[0224] 3'N‑1＝缺少3'‑末端核苷酸的杂质
[0225] 5'N‑1＝缺少5'‑末端核苷酸的杂质(与PO共洗脱)
[0226] n.d.＝未检测到
[0227] 将样品的浓度与参考样品的浓度(t＝0d)进行比较。数据总结于表5中。当浓度在相应参考样品浓度的95％至105％之间时，结果被认为是达到要求的。
[0228] 表5：10μM(61.43μg/mL)OT‑101的0.9％NaCl溶液的紫外分析
[0229] 样品ID A260nm 浓度(％)10μM盐水溶液，t＝0d ‑20℃ 0.5291 100.0
10μM盐水溶液，t＝7d 5℃ 0.5321 100.6
10μM盐水溶液，t＝14d 5℃ 0.5282 99.8
10μM盐水溶液，t＝7d 37℃ 0.5326 100.7
10μM盐水溶液，t＝14d 37℃ 0.5288 99.9
[0230] 所有紫外光谱均对应于OT‑101的特征紫外光谱，并且所有溶液的浓度均在参考浓度(t＝0d)的±0.8％范围内。本实验证明10μM(61.43μg/mL)OT‑101等渗盐水溶液的浓度在5℃和37℃下储存两周后基本上没有变化。
[0231] 这些实验表明，基于上述RP‑HPLC杂质水平、UV光谱和浓度分布，10μM OT‑101反义寡核苷酸的NaCl溶液在5℃和37℃下令人惊讶地稳定至少两周。
[0232] 对7.35mg/mL和25mg/mL的OT‑101进行了进一步的在用稳定性研究。检查浓度为7.35mg/mL和25mg/mL的OT‑101的0.9％NaCl溶液在5℃和37℃储存两周后的稳定性。实验所用材料如表6所示。
[0233] 表6：材料和药物溶液
[0234]
[0235]
[0236] 样品的杂质谱通过RP‑HPLC测定，浓度通过紫外光谱法测定。通过RP‑HPLC测定的样品的杂质谱如表7所示。
[0237] 表7：7.35mg/mL和25mg/mL溶液的反相HPLC样品
[0238]
[0239]
[0240] *PO＝一个硫代磷酸酯部分被磷酸酯部分替换的杂质(与5'N‑1共洗脱)
[0241] CNET＝一个胸苷核苷酸添加有氰乙基部分的杂质
[0242] 3'N‑2＝缺少两个3'末端核苷酸的杂质
[0243] 3'N‑1＝缺少3'‑末端核苷酸的杂质
[0244] 5'N‑1＝缺少5'‑末端核苷酸的杂质(与PO共洗脱)
[0245] n.d.＝未检测到
[0246] 杂质谱对于预期的施用是达到要求的。
[0247] 将样品的浓度与参考样品的浓度(t＝0d)进行比较。数据总结于表8和表9中。当浓度在相应参考样品浓度的95％至105％之间时，结果是达到要求的。
[0248] 表8：7.35mg/mL OT‑101的0.9％NaCl溶液的紫外分析
[0249]样品ID A260nm 浓度(％)
7.35mg/mL,t＝0d@‑20℃ 0.4441 100.00
7.35mg/mL,t＝7d@5℃ 0.4516 101.69
7.35mg/mL,t＝14d@5℃ 0.4534 102.09
7.35mg/mL,t＝7d@37℃ 0.4525 101.89
7.35mg/mL,t＝14d@37℃ 0.4519 101.76
[0250] 表9：25mg/mL OT‑101的0.9％NaCl溶液的紫外分析
[0251]
[0252]
[0253] 所有紫外光谱均对应于OT‑101的特征紫外光谱，并且所有溶液的浓度均在参考浓度(t＝0d)的±3.58％范围内。本实验证明7.35mg/mL和25mg/mL OT‑101等渗盐水溶液的浓度在5℃和37℃下储存两周后令人惊讶地稳定且没有变化。根据上述RP‑HPLC杂质水平、UV光谱和浓度分布，7.35mg/mL和25mg/mL的OT‑101在等渗盐水溶液中的溶液在5℃和37℃下令人惊讶地稳定至少2周。
[0254] 上述实验进一步表明，15mg/mL OT‑101的等渗盐水药物溶液以1mL/h的流速在四天的时间内对于用于IV输注的预期药物递送系统令人惊讶地稳定。
[0255] 上述实验进一步表明，10μM(61.43μg/mL)OT‑101的等渗盐水药物溶液以0.24mL/h的流速在7天的时间内对于用于IV输注的预期药物递送系统令人惊讶地稳定。
[0256] 实施例2.发现了使用主要和替代结合位点抑制TGF‑β的新药物组合物、制剂和方法。本实施例展示了已发现用于抑制TGF‑β的新药物组合物、制剂和方法的鉴定和使用。使用基于生物信息结构的配体设计来鉴定和测量TGF‑β1的主要和替代结合位点，发现了新的组合物、制剂和方法。
[0257] 从蛋白数据库(https://www.rcsb.org/)检索到TGFβ1的蛋白晶体结构，登记号为3KFD。通过添加氢原子、除去盐和离子来制备该蛋白。添加了缺失的侧链和环。最后，对蛋白进行能量最小化以使坐标驰豫。所有其他参数均保持默认值。使用PocketFinder生物信息平台来检测蛋白靶标的主要和替代结合位点。对结果进行分析以鉴定结合位点的结构和与结合的配体相邻的残基的方向。
[0258] 使用基于青蒿素的配体结构与TGFβ1结构进行对接计算。对接前，对测试结构进行优化，以使坐标驰豫。在对接之前选择口袋残基来生成网格，并为每个识别的位点生成网格。在为每个目标生成的网格中单独地进行青蒿素配体结构的对接。对接前所有参数均保持默认值。在每个位点为对接配体生成十个姿势，并最终获得一个最终姿势。对每个对接输出进行评分并确定配体构象。确定了配体结合相互作用的性质和种类。
[0259] 该蛋白的三维结构主要由β折叠和长的柔性环组成。该结构并不紧密堆积，因此小分子靶向需要大量计算。形成小的疏水性子袋，其中小分子如青蒿素可以被暴露于溶剂的极性侧占据。检测到溶剂暴露位点或口袋，其中蛋白的溶剂可及表面积非常高。
[0260] 结果确定了两个结合活性位点。如图1所示，位点1包含残基Phe24‑Lys37，对接分数为‑1.230。位点2包含残基Cys7‑Gln19，对接分数为‑6.01。位点1和位点2可用于筛选将结合到这些口袋中以阻断TGF‑β活性的分子。
[0261] 位点II表明口袋内的改进的用于改善的结合的配体取样。配体的结合相互作用在氢键距离内，这证实了酶抑制活性。此外，青蒿素的极性基团占据深袋方向并证实了酶抑制活性。特别地，结果表明青蒿素配体的酮基与ARG15的侧链形成氢键。此外，配体的醚基与GLN19主链NH形成氢键。观察到配体和PHE8之间存在弱的疏水相互作用。口袋的核心暴露在溶剂中。这些结构特征证实了酶抑制结合和活性。
[0262] 已鉴定出与位点1或位点2结合的新药剂分子或配体。在一些实施方案中，青蒿素及其衍生物是结合位点1或位点2并抑制TGF‑β靶标的药剂分子或配体，可包括其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体。
[0263] 在进一步的实施方案中，与包含Trp30的TGF‑β的位点I和/或包含Arg15、Gln19和Phe8的TGF‑β的位点II相互作用的化合物或包含小分子或多肽的配体，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体是结合位点1或位点2并抑制TGF‑β靶标的药剂分子或配体。
[0264] 在另外的实施方案中，包含残基Phe24‑Lys37的TGF‑β的位点I和/或包含残基Cys7‑Gln19的TGF‑β的位点II的多肽或肽模拟物，或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体是结合位点1或位点2并抑制TGF‑β靶标的药剂分子或配体。
[0265] 在某些实施方案中，对包含残基Phe24‑Lys37的TGF‑β的位点I和/或包含残基Cys7‑Gln19的TGF‑β的位点II具有亲和力的抗体或抗体片段是结合位点1或位点2并抑制TGF‑β靶标的药剂分子或配体。
[0266] 在替代实施方案中，包含倍半萜内酯的化合物或其衍生物、或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体是结合位点1或位点2并抑制TGF‑β靶标的药剂分子或配体。
[0267] 在进一步的实施方案中，包含三个异戊二烯基和一个内酯环的化合物或其衍生物或其药学上可接受的盐、盐多晶型物、酯或异构体是结合位点1或位点2并抑制TGF‑β靶标的药剂分子或配体。
[0268] 实施例3.在住院的COVID‑19患者中进行的OT‑101的双盲、随机、安慰剂对照、多中心研究。本实施例描述了一项在住院的COVID‑19患者中进行的反义寡核苷酸OT‑101的双盲、随机、安慰剂对照、多中心研究。
[0269] 主要目标是评估OT‑101在与SoC结合使用时的安全性和有效性：
[0270] 有效性：第14天获得临床改善评分(通过8分WHO COVID19临床改善顺序量表测量的)的受试者比例；和
[0271] 安全性：不良事件、临床实验室、ECG、生命体征、身体检查、放射学检查。
[0272] 次要目标是进一步评价OT‑101与安慰剂相比的有效性：优势比、呼吸机需求、临床改善或恶化、死亡率、住院(持续时间/ICU)。
[0273] 如图2所示，研究设计为双盲、随机和安慰剂对照的。安全性结果表明：
[0274] 未观察到与该药物相关的特别关注的SAE、死亡和治疗中出现的AE。
[0275] 除了因继发感染、缺乏标准治疗、合并症或高病毒载量导致的死亡外，患者均已康复，并解决了COVID症状。
[0276] 未观察到生命体征、ECG、身体检查、放射学检查以及与药物相关的临床实验室检查的不良变化。OT‑101在COVID‑19患者中被良好地耐受，没有观察到细胞因子风暴的恶化，例如IL‑6或CRP的增加。
[0277] 不良事件(AE)和治疗中出现的AE(TEAE)的发生率与安慰剂相当。
[0278] 导致研究治疗提前中止的不良事件与安慰剂相当。
[0279] 未观察到治疗中出现的特别关注的AE(AESI)(细胞因子释放综合征和血小板减少症)。
[0280] 临床实验室检查(血液学、临床化学、尿液分析)与基线相比没有变化。
[0281] 与基线相比，生命体征测量值的变化与安慰剂相当。
[0282] 12导联心电图(ECG)相对于基线的变化与安慰剂相当。
[0283] 与基线相比，完全的身体检查的变化与安慰剂的变化相当。
[0284] 有效性结果如下：
[0285] OT‑101治疗可有效降低所有接受治疗的患者、甚至是那些最终死亡的患者的病毒载量，表明死亡是由于其他原因例如继发感染造成的。
[0286] 尽管事实上OT‑101受试者受到严重感染，在D1时中位病毒载量比安慰剂受试者高2.5倍，情况依然如此。
[0287] OT‑101治疗7天后，病毒载量降至低于可检测水平。
[0288] OT‑101组19名患者中有17名患者(89％)在第7天病毒载量减少超过96％，而安慰剂组9名患者中有6名患者(67％)。
[0289] 如图3所示，本研究显示出令人惊讶的改善的生存率，如下所示：
[0290] 20名第1部分患者和12名第2部分患者，2:1随机分组
[0291] 第7天试验中整个人群的死亡率为4.5％，安慰剂组为20％。
[0292] 对高危患者(PaO2等于或小于76mmHg，年龄超过35岁)进行生存期分析
[0293] 安慰剂组的总死亡率为66％(3人中有2人)，而OT‑101组的总死亡率为50％(10人中有5人)。
[0294] OT‑101组中一名在治疗期间死亡的患者病毒载量极高(PCR检测为7300万拷贝/mL)。
[0295] 这项临床研究(C001)是在住院的COVID‑19受试者中进行的OT‑101的双盲、随机、安慰剂对照、多中心研究。本研究采用最高标准(随机、双盲、安慰剂对照)来评价OT‑101与标准治疗(SoC)结合使用时，对患有轻度或重度COVID‑19的住院受试者的有效性、安全性和耐受性。
[0296] 研究的第1部分包括在筛选时患有轻度COVID‑19的受试者，其世界卫生组织(WHO)COVID‑19临床改善顺序量表为3‑住院，无需氧气疗法，或4‑住院，通过面罩或鼻翼管吸氧，并且具有至少一个医学风险因素，例如绝对淋巴细胞计数、60岁、高血压、糖尿病、心力衰竭或慢性阻塞性肺病(COPD)。
[0297] 研究的第2部分包括筛选时患有严重COVID‑19的受试者，其WHO COVID‑19临床改善顺序量表为5‑无创通气或高流量吸氧，或6‑插管和机械通气。
[0298] 主要目标是评价OT‑101与住院的COVID‑19受试者的标准治疗(SoC)结合使用时的安全性和有效性。次要目标是进一步评价OT‑101与安慰剂相比在住院的COVID‑19受试者中的有效性。其他探索性目标是使用C反应蛋白(CRP)、铁蛋白、D二聚体(基线与第7天、第14天、第28天的比较)、炎症细胞因子(干扰素γ(IFN‑γ)、白细胞介素6(IL‑6)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素1(IL‑1)、白细胞介素2(IL‑2)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM‑CSF)和补体因子(C3a、C5a、CH50)评估炎症生物标志物和评估病毒动力学，以及细胞因子释放综合征的生物标志物(TGF‑β1、2和3血浆)相对于基线的变化。
[0299] 该试验纳入了第1部分的20名患者和第2部分的12名患者。未观察到与药物相关的SAE、死亡和治疗中出现的特别关注的AE。未观察到与药物相关的生命体征、ECG、身体检查、放射学检查以及临床实验室检查的不良变化。反义OT‑101在COVID‑19患者中被良好地耐受，没有观察到细胞因子风暴恶化，例如IL‑6或CRP升高。
[0300] 在该研究中，对于整个人群来说，观察到OT‑101的第7天死亡率为4.5％，而安慰剂的第7天死亡率为20％。在高危患者(PaO2低于77mmHg，年龄超过35岁)中，OT‑101组的总死亡率为50％(10人中有5人)，而安慰剂组的总死亡率为66％(3人中有2人)，中位总生存期从安慰剂(N＝3)组的4天增加至OT‑101组的30天以上(N＝10，p＝0.003)。
[0301] 反义OT‑101治疗有效降低所有治疗患者的病毒载量。OT‑101组19名患者中有17名(89％)的病毒载量在第7天减少超过96％，而安慰剂组9名患者中有6名(67％)。
[0302] 实施例4.TGF‑β关闭细胞复制并促进病毒复制。该实验表明，在Vero76细胞的病毒复制测定中，OT‑101和青蒿素对TGF‑β表达的阻抑抑制了SARS‑CoV1和SARS‑CoV2的复制。
[0303] OT‑101的活性优于专门针对SAR‑CoV‑2基因组设计的反义药物和所选择的5'‑TERM、FS和LTR。非特异性反义药物(RSV)没有表现出任何阻抑。数据如表10所示。
[0304] 表10：25mg/mL OT‑101的0.9％NaCl溶液的紫外分析
[0305]
[0306]
[0307] 实施例5.青蒿素临床试验青蒿素对COVID‑19的安全性和有效性。这项临床试验表明青蒿素针对COVID有效。
[0308] ARTI‑19试验已获得印度监管机构的批准，并在印度临床试验注册中心(Clinical Trials Registry India，CTRI)注册。ARTI‑19试验注册信息可参见：CTRI/2020/09/028044。IV期研究评价青蒿素作为介入疗法对COVID‑19受试者的安全性和有效性。http://ctri.nic.in/Clinicaltrials/advsearch.php。站点具体信息是：1)政府医学院和政府总医院，Srikakulam,ANDHRA PRADESH。2)Rajarshi Chhatrapati Shahu Maharaj政府医学院和Chhatrapati Pramila Raje医院，MAHARASHTRA。和3)七星医院，MAHARASHTRA。该研究由Abiogenesis India作为CRO进行。共有120名患者被随机分配到该试验中。
[0309] 该研究观察了青蒿素对COVID‑19患者的作用。这些患者通过RT‑PCR确诊为SARS‑CoV‑2感染，并具有轻度和中度(住院，未接受氧气疗法)COVID‑19症状。这些是WHO临床进展量表得分为2‑4分的患者。患者按2:1随机分配到治疗组和对照组。第1组‑治疗组：青蒿素+SOC的(医生的选择)。第2组‑对照组：SOC(医生的选择)。
[0310] 120名患者中有80名接受青蒿素的ARTI‑19试验显示出非常良好的安全性特性，唯一与青蒿素相关的不良事件是短暂的轻度皮疹和轻度高血压。类似地，在伊朗试验中，没有报告不良事件。事实上，从1992年到1997年，估计安全分发了近400万剂青蒿素来治疗疟疾。标准剂量为每天500mg，持续5天(qdx5)。
[0311] 研究结果表明，青蒿素显示出非常良好的安全性特性，唯一与青蒿素相关的不良事件是短暂的轻度皮疹和轻度高血压。当青蒿素添加到SOC中后，加速了轻度至中度COVID‑19患者在包括发烧、喉咙痛、干咳和疼痛在内的所有检查的COVID‑19症状方面的康复。几乎所有WHO‑4患者在前几剂青蒿素中实现了WHO‑3降低，p＝0.0043(n＝56，PulmoHeal+SOC vs n＝25/SOC)。SOC＝标准治疗，包括瑞德西韦/dex/肝素。与SOC队伍相比，青蒿素+SOC组到第
2天体温下降更快且更高。与SOC队伍相比，青蒿素+SOC组到第5天呼吸频率的改善更快且更高。到28天监测期结束时，所有生命体征均恢复正常。最重要的是，到使用青蒿素+SOC的第
28天时，O2饱和度完全恢复(p<0.0001)，但单独使用SOC则没有恢复(p＝ns)。类似地，青蒿素+SOC组的呼吸频率到第28天时完全恢复(p<0.0001)，但单独使用SOC组则没有恢复(ns)。
[0312] 图4显示了针对COVID使用青蒿素的此类临床试验的结果。青蒿素使确诊SARS‑CoV‑2感染的患者因病毒感染而造成的长期肺功能得到恢复。这些结果表明，青蒿素针对COVID有效，并为青蒿素恢复病毒感染引起的长期肺功能提供了临床概念证据。这种令人惊讶的优异结果与其TGF‑β活性一致，并且估计是由于抑制多器官瘢痕形成导致的。
[0313] 这项临床研究表明，根据ARTI‑19临床试验NCT05004753(一项评价青蒿素500mg胶囊用于治疗患有COVID‑19的成人受试者的安全性和有效性的前瞻性、随机、多中心、开放标签、干预性研究)的预先计划的前瞻性分析，青蒿素针对轻度和中度COVID‑19有活性。这项临床研究表明，针对TGF‑β的植物药物药剂可有效用于COVID‑19和COVID变种。
[0314] 这项临床研究表明：
[0315] 青蒿素有效治疗轻度和中度COVID‑19受试者。
[0316] 青蒿素+SOC在第4天和第5天在WHO严重程度量表方面显示出相对于SOC显著的改善，分别为p＝0.0045和p＝0.0370。
[0317] 青蒿素实现了与SOC队伍相比，青蒿素+SOC组到第2天时体温下降速度令人惊讶地更快且更高。
[0318] 青蒿素显示出与SOC组相比，青蒿素+SOC组到第5天时呼吸频率改善得更快且更高。
[0319] 青蒿素显示出与SOC组相比，青蒿素+SOC组到第28天(研究结束)时平均SpO2水平显著更高(p＝0.029)。
[0320] 青蒿素在生物化学或血液学参数方面没有显示出临床上显著的变化，并且是安全的且被研究受试者良好耐受。
[0321] NCT05004753是一项前瞻性、随机、多中心、开放标签、干预性研究，旨在评价青蒿素500mg胶囊治疗COVID‑19成人受试者的安全性和有效性。这是一项开放标签、前瞻性、多中心研究。临床诊断为轻度至中度COVID‑19的受试者，满足其他纳入和排除标准，每个周期随机接受SOC或测试药物青蒿素500mg胶囊/天，持续5天+标准治疗(SOC)，根据需要可选择重复，直到疾病症状得到解决，最多总共3个周期(“5天治疗，5天休息”构成一个周期)或标准治疗(SOC)。
[0322] 受试者被随机分配并接受测试加SOC(n＝80)或SOC(n＝41)的治疗。在获得签署的书面知情同意书后，这些受试者接受了筛选检查。如果满足所有纳入/排除标准，受试者将被纳入并在第一天通过分组随机化随机分配到两个治疗组之一。所有受试者都根据ICMR(印度医学研究委员会，Indian Council of Medical Research)和其他印度部门的医疗保健指南接受了常规治疗。
[0323] 根据研究方案进行安全性和有效性变量的评估。最后一次访视研究结束(EOS)是在第28天。对严重的AE进行随访，直到它们得到解决或稳定下来，或者直到受试者参与研究结束后30天，以先发生者为准，并根据ICH‑GCP和印度GCP指南记录在案。
[0324] 共有122名患者接受了筛选。受试者按2:1的比例被随机分配到两组中的一组：青蒿素500mg(BD)+SOC或SOC。在两个治疗组中受试者最初都住院接受5天的研究治疗。必要时，允许受试者在医院多留几天，进行第二个周期或第三个周期的治疗。
[0325] 目标：开发针对COVID‑19的长期症状的TGF‑β治疗剂(TGF‑β反义/OT‑101；和TGF‑β抑制剂/青蒿素)。工作描述：1)青蒿素(ART)完成了ARTI‑19试验，目前在印度可以作为呼吸系统健康的草药补充剂进行部署，并且正在使用具有单一事实来源的上市后调查(post marketing survey，PMS)平台收集数据，作为AI‑咳嗽分析。OT‑101已在拉丁美洲完成针对轻度至重度COVID‑19的2期试验，并进行数据分析以支持其适应性2/3期全球注册试验。
[0326] 所提出的技术的优点：目前针对COVID‑19的治疗并未考虑由于活跃的COVID‑19期间器官损伤和TGF‑β过度产生而导致的器官瘢痕形成和纤维化所引起的长期症状。TGF‑β抑制剂作为SOC的辅助药物将填补这一空白。口服ART用于治疗轻度/中度COVID‑19，静脉注射OT‑101用于治疗重度COVID‑19。通过靶向宿主蛋白，我们不太可能产生对该药物的突变耐药性。它可以适用于利用相同途径的其他病毒，例如未来的其他人畜共患病。
[0327] 青蒿素(PULMOHEAL)是从黄花蒿中获得的倍半萜内酯。它是TGF‑β的小分子抑制剂。给药方案＝500mg明胶胶囊服用5天/休息5天，最多3个周期。
[0328] OT‑101(曲贝德生)OT‑101是一种针对TGF‑β2的反义药物，直接抑制TGF‑β2并间接抑制TGF‑β1。已完成六项肿瘤学临床试验，具有良好的临床有效性数据，并显示出对IL‑6的阻抑作用。COVID‑19患者在其病理学方面与癌症患者相似，正如预期的那样，OT‑101并未在COVID‑19患者中表现出任何意外的不良事件。

IPRDB

最新中国发明专利 最新美国发明专利 技术领域 专利库 专利分类库 国际专利分类库

热门服务

会员版试用 API 数据接口 找代理 知嘟嘟专利交易 排行榜 大学排行榜 专利百科

关于我们

平台介绍 战略合作 网站地图

友情链接

知嘟嘟专利交易 国家知识产权局 中国商标网

联系方式


©2019-2023 上海吉码数字技术有限公司 版权所有，并保留所有权利 沪ICP备20016256号-6 沪公网安备31011702005475号