基本信息:
- 专利标题： 一种海洋微藻高效基因编辑体系及其构建方法和应用
- 申请号：CN202510312993.4 申请日：2025-03-17
- 公开(公告)号：CN120137975A 公开(公告)日：2025-06-13
- 发明人： 王松 , 胡章立 , 李欣怡
- 申请人： 东南大学
- 申请人地址： 江苏省南京市江宁区东南大学路2号
- 专利权人： 东南大学
- 当前专利权人： 东南大学
- 当前专利权人地址： 江苏省南京市江宁区东南大学路2号
- 代理机构： 南京苏高专利商标事务所(普通合伙)
- 代理人： 王艳
- 主分类号： C12N15/113
- IPC分类号： C12N15/113 ; C12N15/82 ; C12N15/65 ; C12N1/13 ; C12R1/89
摘要：
本发明公开了一种海洋微藻高效基因编辑体系及其构建方法和应用。本发明在pKS_diaCas9_sgRNA质粒中插入博来霉素抗性基因ble的表达盒构建了一种高效的“全合一”CRISPR/Cas9表达载体pKS_diaCas9‑sgRNA_ble，同时，分别设计了含有靶向同一基因不同位点的4条gRNA得到4个CRISPR/CAS9“全合一”质粒，将其共转化藻类细胞，大大提高了编辑总概率和纯合子突变的概率。本发明通过对基因编辑工具的优化、基因枪转化方法的改进以及基因组水平的鉴定策略，实现了高效且稳定的海洋微藻基因编辑，为微藻基因功能研究和应用提供了重要的技术支撑。