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    • 1. 发明授权
    • 一种儿童纤毛不动综合征气管类器官的培养液和培养方法
    • CN114717177B
    • 2024-01-26
    • CN202210108196.0
    • 2022-01-28
    • 四川大学华西第二医院
    • 陈莉娜杨文豪石芳刘瀚旻谢亮陈婷李艳张瑞卢丹莉
    • C12N5/071
    • 的PCD诊疗手段,极大地降低了有创操作次数,减本发明提供了一种儿童气管类器官的培养 少了疾病负担。液和培养方法,培养液是含有如下各终浓度的组分的Advanced DMEM/F12培养基:GlutaMax‑I添加剂1×、B27添加剂1×、HEPES缓冲液1×、青霉素‑链霉素双抗溶液1×、烟酰胺3~5mM、N‑乙酰基‑L‑半胱氨酸1~1.5mM、Y‑27632 4~6μm、SB202190 400~600nm、A83‑01 400~600nm、R‑Spondin1 400~600ng/ml、FGF7 20~30ng/ml、FGF10 90~110ng/ml、Noggin 90~110ng/ml、EGF 1~10ng/ml。本发明方法使用少量的气管上皮组织,即可培养出成形率高、体积大的气管类器官,成功率高,培养周期短,基于培养得到的类器官从基因、蛋白以及结构功能方面系统评估儿(56)对比文件Daniel Cozens等.Development andoptimization of a differentiated airwayepithelial cell model of the bovinerespiratory tract.ScientificReports.2018,第08卷第1-14页.T E Gray等.Mucociliarydifferentiation of serially passagednormal human tracheobronchial epithelialcells.Am J Respir Cell Mol Biol.1996,第14卷第104-112页.Weiguo Shu.Wnt/beta-catenin signalingacts upstream of N-myc, BMP4, and FGFsignaling to regulate proximal-distalpatterning in the lung.Dev Biol.2005,第283卷第226-239页.Jelte van der Vaart等.Modelling ofprimary ciliary dyskinesia using patient-derived airway organoids.EMBOreports.2021,第22卷第2页左栏第4段、第11页右栏第2-5段.Anas Rabata等.3D Cell Culture ModelsDemonstrate a Role for FGF and WNTSignaling in Regulation of LungEpithelial Cell Fate andMorphogenesis.Front Cell Dev Biol.2020,第08卷第3页右栏第5段、第4页左栏第2段、第7页左栏第3段及图2C~2E.陈友红等.利用食管类器官研究c-Myc在食管癌发生中的作用.遗传.2021,第43卷第601-614页.Tatsuya Suzuki等.Generation of humanbronchial organoids for SARS-CoV-2research.bioRxiv.2020,第1-35页.Rui Zheng等.Dnah9 mutant mice andorganoid models recapitulate the clinicalfeatures of patients with PCD and providean excellent platform for drugscreening.Cell Death and Disease.2022,第13卷第1-14页.Wenhao Yang等.Multiomics analysis ofa DNAH5-Mutated PCD organoid modelrevealed the key role of the TGF-β/BMPand notch pathways in epithelialdifferentiation and the immune responsein DNAH5-mutated patients.Cells.2022,第11卷第1-17页.