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1. 发明公开

CN117304309A 一种鸡细小病毒VP2单克隆抗体及其应用审中-实审
公开(公告)号：CN117304309A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311272433.8
申请日：2023-09-28
申请人：广西壮族自治区兽医研究所
发明人：谢芝勋 , 廖健淇 , 张民秀 , 张艳芳 , 邓显文 , 谢丽基 , 罗思思 , 李孟 , 曾婷婷
IPC分类号： C07K16/08 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58
摘要：本发明提供了一种鸡细小病毒VP2单克隆抗体及其应用，涉及到生物技术和病毒学领域，本发明筛选得到的1株鸡细小病毒VP2蛋白单抗，能够特异性结合鸡细小病毒和体外表达的VP2蛋白，且1株单抗的轻链为kappa链，重链为IgG2a。由单抗3F8为包被抗体建立了ChPV VP2蛋白的双抗体夹心ELISA检测平台，对鸡细小病毒的最低检测线达15.6ng/mL，特异性强、灵敏度高、稳定性好，并与巢式PCR共同对192份临床样品的平行检测显示总符合率达到81.3％。本发明提供的鸡细小病毒的单抗不仅可以用于制备鸡细小病毒相关的检测试剂，还可以为鸡细小病毒VP2蛋白的功能等基础研究提供了原料，有助于养鸡业中对鸡细小病毒的防控工作，也有助于对鸡细小病毒相关蛋白的基础研究。

2. 发明公开

CN117285619A 一种鸡细小病毒的单克隆抗体及其应用审中-实审
公开(公告)号：CN117285619A
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202311271713.7
申请日：2023-09-28
申请人：广西壮族自治区兽医研究所
发明人：谢芝勋 , 廖健淇 , 张民秀 , 张艳芳 , 邓显文 , 谢丽基 , 罗思思 , 李孟 , 曾婷婷
IPC分类号： C07K16/08 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58
摘要：本发明提供了一种鸡细小病毒的单克隆抗体及其应用，涉及到生物技术和病毒学领域，本发明筛选得到的2株鸡细小病毒NS1蛋白单抗，能够特异性结合鸡细小病毒和体外表达的NS1蛋白，且2株单抗的轻链均为kappa链，重链均为IgG1。由单抗1B12为包被抗体建立了ChPVNS1蛋白的双抗体夹心ELISA检测平台，对鸡细小病毒的最低检测线达31.2ng/mL，特异性强、灵敏度高、稳定性好，并与巢式PCR共同对192份临床样品的平行检测显示总符合率达到89.1％。本发明提供的鸡细小病毒的单抗不仅可以用于制备鸡细小病毒相关的检测试剂，还可以为鸡细小病毒NS1蛋白的功能等基础研究提供了原料，有助于养鸡业中对鸡细小病毒的防控工作，也有助于对鸡细小病毒相关蛋白的基础研究。

3. 发明授权

CN110157836B 一种检测IBRV和BVDV的引物、探针及方法有权
公开(公告)号：CN110157836B
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN201810301912.0
申请日：2018-04-04
申请人：广西壮族自治区兽医研究所
发明人：谢芝勋 , 谢志勤 , 范晴 , 张民秀 , 黄娇玲 , 张艳芳 , 曾婷婷 , 谢丽基
IPC分类号： C12Q1/70 , C12N15/11
摘要： BVDV感染牛提供了一种更好的方法。本发明提供了一种检测IBRV和BVDV的引物、探针及方法。本发明提供的引物和/或探针组合物包括序列表中SEQ ID№：1‐SEQ ID№：6所示至少一种核苷酸序列。本发明利用本发明提供的引物和/或探针组合物，通过包括Taqman二重荧光定量PCR反应的PCR反应，实现了牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的同时检测。本发明提供的引物和/或探针组合物及检测方法，灵敏度高，每个反应最低能检测到100个混合模板拷贝，特异性高、重复性好、干扰性(56)对比文件范晴等.牛病毒性腹泻病毒和牛轮状病毒TaqMan二重实时荧光RT-PCR检测方法的建立.《中国兽医学报》.2011,第31卷(第10期),摘要，表1，第1.1、1.3节.范晴等.牛病毒性腹泻病毒和牛轮状病毒TaqMan二重实时荧光RT-PCR检测方法的建立.《中国兽医学报》.2011,(第10期),摘要，参见第1.1、1.3节，表1.宋爽等.牛病毒性腹泻病毒、牛传染性支气管炎病毒和口蹄疫病毒多重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立《.中国预防兽医学报》.2017,第39卷(第02期),摘要，第1-3节，表1.Hou P等.Detection of bovine viraldiarrhea virus genotype 1 in aerosol by areal time RT-PCR assay《. BMC Vet Res》.2020,第16卷(第1期),张贵刚等.牛病毒性腹泻病毒和牛传染性鼻气管炎病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立.《中国预防兽医学报》.2018,(第10期),54-57+71.季新成.牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒分子生物学检测技术研究《.中国博士学位论文全文数据库农业科技辑》.2010,(第10期),曲光刚等.IBRV gB基因TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立《.中国兽医学报》.2012,(第12期),43-47.谢志勤等.牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立.《动物医学进展》.2019,第40卷(第3期),季新成等.牛传染性鼻气管炎病毒内标荧光定量PCR检测方法的建立与应用《.中国兽医学报》.2010,(第06期),32-37+41.Fan Q等.Development of a GeXP-multiplex PCR assay for the simultaneousdetection and differentiation of sixcattle viruses《.PLoS One》.2017,第12卷(第2期),

4. 发明授权

CN111663008B 禽肾炎病毒和H9亚型禽流感病毒二重LAMP检测试剂盒及其引物组有权
公开(公告)号：CN111663008B
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202010707588.X
申请日：2020-07-21
申请人：广西壮族自治区兽医研究所
发明人：谢芝勋 , 方庆 , 张艳芳 , 邓显文 , 谢志勤 , 谢丽基 , 刘加波 , 曾婷婷 , 范晴 , 罗思思 , 张民秀 , 黄娇玲 , 王盛
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要：本发明公开了禽肾炎病毒和H9亚型禽流感病毒二重LAMP检测引物组，包括用于检测禽肾炎病毒的引物1至引物5以及探针1和用于H9亚型禽流感病毒的引物6至引物10以及探针2。据此，发明人还建立了的LAMP检测方法。优化反应条件后，本发明所建立的LAMP检测方法只需要在63℃恒温反应55min即可完成，能特异地检测禽肾炎病毒和H9亚型禽流感病毒，并且检测的灵敏度非常高，最低能检测到3.83fg/μL的禽肾炎病毒和H9亚型禽流感病毒核酸混合样品。总之，本发明具有比常规检测方法更特异、更敏感的特点，且通过荧光基团的颜色检测阳性结果，有效的抑制了假阳性结果，并且减少了气溶胶污染，具有较好的应用前景。

5. 发明授权

CN111518956B 一种检测禽呼肠孤病毒的纳米PCR方法、试剂盒及应用有权
公开(公告)号：CN111518956B
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202010430865.7
申请日：2020-05-20
申请人：广西壮族自治区兽医研究所
发明人：谢芝勋 , 黄娇玲 , 谢丽基 , 谢志勤 , 邓显文 , 罗思思 , 范晴 , 曾婷婷 , 张艳芳 , 王盛 , 张民秀 , 李孟 , 李小凤 , 万丽军 , 李丹 , 韦悠 , 阮志华
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12R1/93
摘要：本发明公开了一种检测禽呼肠孤病毒的纳米PCR方法和试剂盒，纳米PCR的反应体系中添加SiO2/Au/Fe3O4纳米粒子和SEQ ID No.1‑2所示引物，并对反应体系和反应条件进行了优化。本发明采用SiO2/Au/Fe3O4纳米复合材料可以集合几种材料的优势，配合使用本发明筛选的特异性引物，能够进一步提高PCR的灵敏性、特异性和PCR扩增效率。

6. 发明授权

CN113527463B IFITM3蛋白相关物质在制备禽呼肠孤病毒所致疾病药物中的应用有权
公开(公告)号：CN113527463B
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202110959237.2
申请日：2021-08-20
申请人：广西壮族自治区兽医研究所
发明人：谢芝勋 , 任红玉 , 万丽军 , 王盛 , 谢丽基 , 谢志勤 , 邓显文 , 范晴 , 罗思思 , 张艳芳 , 黄娇玲 , 曾婷婷 , 张民秀
IPC分类号： C07K14/705 , C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , A61K45/00 , A61K48/00 , A61P31/14
摘要：本发明提高增强IFITM3蛋白的活性和/或提高IFITM3蛋白的基因的表达量和/或提高IFITM3蛋白的含量的物质的应用，所述应用为下述任一种：Y1在制备预防和/或治疗禽呼肠孤病毒所致疾病或禽呼肠孤病毒感染的药物中的应用；Y2在制备禽呼肠孤病毒抑制剂中的应用；Y3在抑制禽呼肠孤病毒复制中的应用；Y4在抑制ARVσC表达中的应用。本发明通过将编码IFITM3蛋白的基因转入鸡胚成纤维细胞(DF1)，发现了DF1细胞中过表达IFITM3后ARVσC的相对表达量极显著降低，抑制禽呼肠孤病毒病毒复制。本发明对感染禽呼肠孤病毒及类似病毒的治疗具有应用价值。

7. 发明公开

CN115558707A 可视化口蹄疫、水泡性口炎和蓝舌病多重RT-LAMP检测方法及引物审中-实审
公开(公告)号：CN115558707A
公开(公告)日：2023-01-03
申请号：CN202210025580.4
申请日：2022-01-11
申请人：广西壮族自治区兽医研究所
发明人：谢芝勋 , 范晴 , 李小凤 , 谢志勤 , 谢丽基 , 张艳芳 , 黄娇玲 , 曾婷婷 , 王盛 , 罗思思 , 李孟 , 李丹
IPC分类号： C12Q1/6844 , C12Q1/70 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要：本发明公开了一种可视化口蹄疫、水泡性口炎和蓝舌病多重RT‑LAMP检测方法及引物。本发明设计了多套引物，优化筛选特异性引物组合，首次在LAMP方法中加入了荧光‑淬灭复合探针，探针3’端标记不同的荧光基团，最终成功建立了在同一反应管里鉴别诊断FMDV，VSV和BTV的多重RT‑LAMP检测方法，该法特异性好，敏感性高，最低能检测到1copies/反应病毒RNA，反应时间快，全程只需要65分钟就能完成检测，反应后可通过反应产物观察颜色直接读取结果，可用于临床鉴别诊断和流行病学调查，可在条件较差的基层地区开展现场检疫。

8. 发明公开

CN115128270A 一种禽呼肠孤病毒检测传感器中抗体固定的方法审中-实审
公开(公告)号：CN115128270A
公开(公告)日：2022-09-30
申请号：CN202210907256.5
申请日：2022-07-29
申请人：广西壮族自治区兽医研究所
发明人：谢芝勋 , 黄娇玲 , 谢丽基 , 罗思思 , 曾婷婷 , 张艳芳 , 张民秀 , 王盛 , 李孟 , 韦悠 , 范晴 , 谢志勤 , 邓显文 , 李丹
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/577 , G01N33/531 , B22F1/054 , B82Y30/00 , B82Y40/00
摘要：本发明公开了一种增强禽呼肠孤病毒检测传感器中抗体固定的方法。本发明提供了用于检测呼肠孤病毒电化学免疫传感器的制备方法，包括如下步骤：(1)处理电极；(2)纳米复合物修饰电极；(3)抗体固定前的预处理；(4)抗体固定；(5)工作电极与检测，所述纳米复合物为金铂纳米复合物，所述预处理为用半胱胺盐酸盐溶液进行孵育。本发明的经实验证明该传感器检测线性范围为0～105.82EID50/mL、最低检测限为100.46EID50/mL，相对于抗体直接固定方法，检测线性范围提高了10倍，且敏感度高，特异性良好。

9. 发明公开

CN115109127A 用于检测血清4型禽腺病毒的重组蛋白、试剂盒及ELISA检测方法审中-实审
公开(公告)号：CN115109127A
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210724692.9
申请日：2022-06-24
申请人：广西壮族自治区兽医研究所
发明人：谢芝勋 , 武晓倩 , 罗思思 , 韦悠 , 邓显文 , 李小凤 , 万丽军 , 曾婷婷 , 谢丽基 , 任红玉
IPC分类号： C07K14/075 , C12N15/34 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/569 , G01N33/58 , C12N15/11 , C12R1/19
摘要：本发明公开了用于检测血清4型禽腺病毒的重组蛋白、试剂盒及ELISA检测方法。具体地公开了氨基酸序列是SEQ ID No.1的重组蛋白100K(672‑1053)、及其作为检测抗原在制备用于检测血清4型禽腺病毒的产品中的应用。本发明还公开了FAdV‑4抗体检测试剂盒及ELISA检测方法。本发明的重组蛋白与FAdV‑4阳性血清特异性结合，具有良好的反应原性，利用该重组蛋白建立的检测试剂盒与方法特异性强，无交叉反应，灵敏度高，重复性好，同时可区分灭活苗免疫和自然感染产生抗体的动物，能够鉴别FAdV‑4感染，为FAdV‑4的净化提供技术支持，为HHS疫病的防控提供可靠、有效的手段。

10. 发明公开

CN114703327A 检测鸡传染性喉气管炎病毒的组合物及其应用审中-实审
公开(公告)号：CN114703327A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210318148.4
申请日：2022-03-29
申请人：广西壮族自治区兽医研究所
发明人：谢芝勋 , 谢志勤 , 张艳芳 , 范晴 , 谢丽基 , 万丽军 , 罗思思 , 李孟
IPC分类号： C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/686
摘要：本发明检测鸡传染性喉气管炎病毒的组合物及其应用，属于微生物的测定或检验方法其所用的组合物技术领域。本发明公开了试剂或试剂盒在检测或辅助检测鸡传染性喉气管炎病毒中的应用，所述试剂或试剂盒包括鸡传染性喉气管炎病毒引物探针，所述鸡传染性喉气管炎病毒引物探针由特异扩增含有核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA片段在内的鸡传染性喉气管炎病毒基因组DNA片段的引物和与核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA片段特异结合的探针组成。通过比较不同引物浓度、探针浓度、最佳退火温度、灵敏度以及检测特异性等方面进行研究，建立了微滴式数字PCR检测ILTV的绝对定量方法，为定量检测ILTV提供了技术支撑。

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