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1. 发明公开

CN117925834A CRISPR光电流极性翻转生物传感器及其在联合检测lncRNAs中的应用审中-实审
公开(公告)号：CN117925834A
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202311871077.1
申请日：2023-12-29
申请人：郑州大学
发明人：杨瑞英 , 李玉玲 , 季江颖 , 丁丽华 , 原鑫鑫 , 严志怡 , 薛林生 , 吴拥军
IPC分类号： C12Q1/6886 , C12Q1/6825 , C12Q1/682 , G01N27/327 , G01N27/48 , C12N15/113
摘要：本发明属于医学检测技术领域，涉及CRISPR光电流极性翻转生物传感器及其在联合检测lncRNAs中的应用。传感器包括：(1)表面固定有硫化镉量子点的电极，硫化镉量子点表面修饰有标记巯基的单链DNA S3；(2)氨基化的壳层二氧化硅磁珠、标记有生物素和羧基的发夹探针HP2、crRNA、Cas13a、带有RNA序列的发夹HP1、Mg2+；目标lncRNA与crRNA的部分序列互补配对；HP1被CRISPR/Cas13a非特异性切割，产生两条DNAzyme步行足S1和S1’，S1和S1’在Mg2+辅助下形成双向DNAzyme步行器，切割HP2产生单链DNA S2；S2与S3的碱基互补配对；(3)链霉亲和素修饰的氮掺杂碳‑铜/氧化亚铜。

2. 发明公开

CN114487042A 检测癌症标志物的信号翻转型光电化学生物传感器及其制备方法和应用审中-实审
公开(公告)号：CN114487042A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210010986.5
申请日：2022-01-06
申请人：郑州大学
发明人：杨瑞英 , 蒋桂花 , 刘慧敏 , 刘利娥 , 阿有梅 , 吴拥军
IPC分类号： G01N27/26 , G01N27/30
摘要：本发明提供了一种检测癌症标志物的信号翻转型光电化学生物传感器的制备方法，包括步骤制备氧化铟锡/二氧化钛电极、制备氧化铟锡/二氧化钛/单链辅助探针电极、制备共轭物Ab1‑Fe3O4@Au‑DNA、制备共轭物Ab2‑AuNPs‑DNA、构建中间探针和制备传感器。本发明还提供一种利用上述方法制备的生物传感器及其应用。上述检测癌症标志物的生物传感器基于直接接触式光电流方向翻转策略、靶向诱导三维双支持DNA步行器循环信号放大技术和金属有机框架材料吸附特性的有机结合起来，进行光电流信号翻转设计，所以，利用上述生物传感器能够实现环保型检测癌症标志物，并具有灵敏度高、选择性高、重现性好、稳定性高等优点。

3. 发明授权

CN113640266B 一种用于细胞中铁蛋白储存和释放铁的检测方法有权
公开(公告)号：CN113640266B
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202110918246.7
申请日：2021-08-11
申请人：郑州大学
发明人：何磊良 , 熊亚敏 , 万珍珍 , 于斐 , 黄姗 , 刘俊坤 , 吴拥军 , 杨瑞英 , 玉崧成
IPC分类号： G01N21/64
摘要：本发明公开了一种用于细胞中铁蛋白储存和释放铁的检测方法，包括以下操作步骤：S1：对细胞毒性进行考察的步骤；S2：功能铁蛋白的表征测试步骤；S3：功能铁蛋白的性能考察步骤；S4：溶液中铁离子进、出铁蛋白的检测步骤；S5：细胞内铁蛋白储存和释放铁的可视化原位检测。通过上述方式，本发明通过简单的混合构建功能铁蛋白的方式，在对溶液中铁离子进/出铁蛋白检测的基础上，进一步将其用于细胞内铁蛋白储存和释放铁的可视化原位检测，从而为铁蛋白储存和释放铁的研究以及铁相关疾病的诊断和治(56)对比文件Cuiping Han et al..Highly fluorescent carbon dots as selective andsensitive “ on-off-on” probes for iron(III) ion and apoferritin detection andimaging in living cells.Biosensors andBioelectronics.2016,第83卷全文.Gunther Jutz et al..Ferritin: AVersatile Building Block forBionanotechnology.Chem.Rev..2015,第115卷全文.Stephan Tetter and DonaldHilvert.Enzyme Encapsulation by aFerritin Cage.Angew.Chem.Int.Ed..2017,第56卷全文.Cuiping Han et al..Highly fluorescent carbon dots as selective andsensitive “ on-off-on” probes for iron(III) ion and apoferritin detection andimaging in living cells.Biosensors andBioelectronics.2016,第83卷全文.Leiliang He et al. .Apoferritin-basedtunable nano-indicator for intracellularpH sensing: Regulating responseperformances and minimizing effects ofsystem flctuations.Sensors & Actuators:B. Chemical .2020,第323卷全文.林庆梅,乔玉欢,黄河清.铁蛋白反应器储存有毒金属离子的初步研究.厦门大学学报(自然科学版).1999,(第06期),全文.杨彩云等.铁蛋白表面修饰及其应用.化学进展.2016,(第01期),全文.王琪;王蓓蓓;马美湖;蔡朝霞.荧光纳米材料应用于蛋白质分析的研究进展.食品科学.2015,(第05期),全文.刘文营;张建;童军茂;赵广华.铁蛋白脱铁机制的建立及脱铁前后光谱变化的研究.光谱学与光谱分析.2011,(第09期),全文.

4. 发明公开

CN113640266A 一种用于细胞中铁蛋白储存和释放铁的检测方法有权
公开(公告)号：CN113640266A
公开(公告)日：2021-11-12
申请号：CN202110918246.7
申请日：2021-08-11
申请人：郑州大学
发明人：何磊良 , 熊亚敏 , 万珍珍 , 于斐 , 黄姗 , 刘俊坤 , 吴拥军 , 杨瑞英 , 玉崧成
IPC分类号： G01N21/64
摘要：本发明公开了一种用于细胞中铁蛋白储存和释放铁的检测方法，包括以下操作步骤：S1：对细胞毒性进行考察的步骤；S2：功能铁蛋白的表征测试步骤；S3：功能铁蛋白的性能考察步骤；S4：溶液中铁离子进、出铁蛋白的检测步骤；S5：细胞内铁蛋白储存和释放铁的可视化原位检测。通过上述方式，本发明通过简单的混合构建功能铁蛋白的方式，在对溶液中铁离子进/出铁蛋白检测的基础上，进一步将其用于细胞内铁蛋白储存和释放铁的可视化原位检测，从而为铁蛋白储存和释放铁的研究以及铁相关疾病的诊断和治疗提供新的方法和技术手段。

5. 发明公开

CN115219569A 人工酶检测肿瘤细胞的传感器及其制备方法和应用有权
公开(公告)号：CN115219569A
公开(公告)日：2022-10-21
申请号：CN202210711574.4
申请日：2022-06-22
申请人：郑州大学
发明人：阿有梅 , 杨瑞英 , 苏纾瑶 , 薛林生 , 李玉玲 , 刘慧敏 , 刘利娥 , 吴拥军
IPC分类号： G01N27/26 , G01N27/27 , G01N27/30 , G01N27/327
摘要：本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种人工酶检测肿瘤细胞的传感器及其制备方法和应用。该传感器包括捕获电极、循环肿瘤细胞、信号放大器和底物；捕获电极为负载有捕获抗体的电极；信号放大器为人工酶‑检测抗体共轭物，人工酶催化底物得到沉淀物，沉淀物为电子受体且沉积在电极表面，检测抗体和捕获抗体均为循环肿瘤细胞表面抗原的特异性抗体。上述传感器是基于人工酶的高纳米酶活性催化沉淀、竞争吸收光能和消耗电子供体以及免疫夹心反应，进行光电流信号放大设计，利用上述传感器能够实现检测循环肿瘤细胞，并具有灵敏度高、选择性高、重现性好、稳定性高等优点。

6. 发明授权

CN115219569B 人工酶检测肿瘤细胞的传感器及其制备方法和应用有权
公开(公告)号：CN115219569B
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202210711574.4
申请日：2022-06-22
申请人：郑州大学
发明人：阿有梅 , 杨瑞英 , 苏纾瑶 , 薛林生 , 李玉玲 , 刘慧敏 , 刘利娥 , 吴拥军
IPC分类号： G01N27/26 , G01N27/27 , G01N27/30 , G01N27/327
摘要：本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种人工酶检测肿瘤细胞的传感器及其制备方法和应用。该传感器包括捕获电极、循环肿瘤细胞、信号放大器和底物；捕获电极为负载有捕获抗体的电极；信号放大器为人工酶‑检测抗体共轭物，人工酶催化底物得到沉淀物，沉淀物为电子受体且沉积在电极表面，检测抗体和捕获抗体均为循环肿瘤细胞表面抗原的特异性抗体。上述传感器是基于人工酶的高纳米酶活性催化沉淀、竞争吸收光能和消耗电子供体以及免疫夹心反应，进行光电流信号放大设计，利用上述传感器能够实现检测循环肿瘤细胞，并具有灵敏度高、选择性高、重现性好、稳定性高等优点。

7. 发明公开

CN116789163A 双金属氧化物及其制备方法和信号翻转检测抗生素的应用审中-实审
公开(公告)号：CN116789163A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310795134.6
申请日：2023-06-30
申请人：郑州大学
发明人：杨瑞英 , 刘慧敏 , 薛林生 , 李玉玲 , 原鑫鑫 , 季江颖 , 刘利娥 , 丁丽华 , 吴拥军
IPC分类号： C01G3/02 , C01F17/212 , C01F17/10 , G01N27/30 , G01N27/36
摘要：本发明提供了一种双金属氧化物及其制备方法和信号翻转检测抗生素的应用。所述双金属氧化物为由Sc2O3和CuO组成的八面体晶体结构Sc2O3@CuO。本发明还提供一种双金属氧化物复合材料，主要由Sc2O3@CuO和吸附在Sc2O3@CuO八面体表面的纳米金颗粒组成的复合材料Sc2O3@CuO@AuNPs。本发明还提供一种光电流信号翻转型光电化学传感器，包括TiO2/ITO电极以及修饰在TiO2/ITO电极表面的发夹探针HP2、标记有生物素的辅助探针S2和信号探针，该信号探针为包裹有链霉亲和素的Sc2O3@CuO@AuNPs，探针S2打开探针HP2，使信号探针修饰至TiO2/ITO电极表面，形成光电信号与TiO2/ITO电极相反的Sc2O3@CuO@AuNPs/TiO2/ITO电极。如此，该传感器通过结合光电流方向翻转策略和酶切信号放大技术构建，能消除背景信号的干扰，增加信号输出，从而提高了检测抗生素的选择性和灵敏度。

8. 发明公开

CN115290883A 多种外泌体蛋白的同步检测方法审中-实审
公开(公告)号：CN115290883A
公开(公告)日：2022-11-04
申请号：CN202210729128.6
申请日：2022-06-24
申请人：郑州大学
发明人：吴拥军 , 丁丽华 , 屈凌波 , 何磊良 , 玉崧成 , 于斐 , 王艺琳 , 菅宁歌 , 杨瑞英 , 王佳
IPC分类号： G01N33/533 , G01N33/68
摘要：本发明提供了一种多种外泌体蛋白的同步检测方法，包括步骤：形成免疫磁珠MBs2@Ab1、形成多种Ab2‑W、形成MBs3 Track、形成双抗夹心复合物、形成多种核酸短链P、形成待测荧光液和荧光检测等七个步骤。该同步检测方法主要是先利用DNAzyme将外泌体蛋白转换为核酸，再利用CRISPR/Cas系统检测核酸，两者结合实现双重信号放大，然后通过荧光进行信号区分，最终实现多种外泌体蛋白浓度的同步定量检测，该同步检测方法灵敏度高、特异性强、成本低、操作简单，而且有利于临床上实现同步定量检测多种外泌体蛋白。

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