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序号 专利名 申请号 申请日 公开(公告)号 公开(公告)日 发明人
1 一种同时检测致病性大肠杆菌、沙菌及耐药基因的微流体芯片及其应用 CN202410399477.5 2024-04-03 CN117987578A 2024-05-07 傅彩霞; 张启龙; 刘海莹; 栗云鹏; 周德刚; 张玮
发明属于生物技术领域,尤其涉及一种同时检测致病性大肠杆菌、沙菌及耐药基因的微流体芯片及其应用。利用本发明的微流体芯片可达到同时检测肠产毒性大肠杆菌、肠致病性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鸡白痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌及喹诺类、基糖苷类、四环素类和氯霉素类4类抗生素耐药基因的目的,具有操作简单、快速、高通量、试剂消耗少、准确性高、灵敏度高、重复性好的优点,对于临床动物疫病快速准确诊断、流行病学调查都具有重要意义。
2 基于点击反应信号放大可视化检测多目标物的均相分析方法及其配套设备 CN202111313977.5 2021-11-08 CN114231598B 2024-05-03 陈翊平; 周阳; 赵维琦; 赵永坤; 王知龙; 冯牛
一种基于点击反应信号放大可视化检测多目标物的均相分析方法及其配套设备。所述方法的包括均相反应部分、可视化成像部分、机器视觉识别部分,其中均相反应部分根据待测物对灵敏度的不同要求,选择不同的放大方案,将点击反应多步信号放大免疫反应,配套仪器设备,微流控芯片和机器视觉软件四大部分有机结合,引入了微流控芯片,缩小了反应体系,这个点击反应的形式+微流控芯片与之前的离心管内反应相比,提高了方法的灵敏度及准确性。
3 用于检测沙氏菌的一步法CRISPR/Cas12b检测试剂盒及方法 CN202410188690.1 2024-02-20 CN117947195A 2024-04-30 龚建森; 张笛; 盛中伟; 许明; 董永毅; 张萍; 李婷婷; 窦新红; 吴坤; 陈莉
发明涉及生物检测领域,具体涉及一种用于检测沙氏菌的一步法CRISPR/Cas12b检测试剂盒及方法,所述试剂盒包括F引物、R引物、向导RNA、Cas12b蛋白、单链核酸报告分子;所述F引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;所述R引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;所述向导RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示;所述单链核酸报告分子为5’‑/6‑FAM/TTTTTTTT/BHQ1/‑3’。本发明成功开发了一种沙门氏菌检测试剂盒,采用本发明的试剂盒进行检测,核酸扩增和检测同步进行,无需开盖检测。实验结果表明,本发明沙门氏菌检测系统具有较好的特异性和灵敏度。
4 一种上转换荧光识别探针的制备方法及其产品和应用 CN202111371889.0 2021-11-18 CN114058721B 2024-04-16 刘蕊; 陈全胜; 许婧; 许艺; 张运莲; 李欢欢
发明公开了一种上转换荧光识别探针的制备方法及其产品和应用,涉及食品安全检测技术领域;该制备方法包括以下步骤:使用合稀土氯化物、1‑十八烯、油酸、NaOH和氟化铵等制备UCNPs‑OA,再对UCNPs‑OA进行改性,得到水溶性UCNPs‑COOH;根据致病菌种类选择特异性基因,设计纳米探针ssDNA,并对其进行基修饰,获得氨基功能化的DNA纳米探针;将水溶性UCNPs‑COOH与氨基化的DNA纳米探针通过缩合反应连接,获得所述上转换荧光识别探针。本发明结合了UCNPs稳定的发光特性、DNA纳米探针的特异性精准识别功能以及GOQDs优异的荧光猝灭性能,提高了检测的灵敏度和特异性。
5 用于半固体样品致病菌的双富集采样装置及快速检测方法 CN202311600621.9 2023-11-28 CN117844616A 2024-04-09 周春红; 车团结; 邹明强; 郑晓玲; 唐璎; 黄佳; 马婷婷; 罗春华; 辛倩; 牛禄禄
发明公开了一种用于半固体样品中致病菌双富集方式采样的装置及检测方法,涉及食品检测技术领域,检测方法主要包括:1)采用膜富集方法进行膜过滤富集,完成第一重半固体(发酵乳)样品中食源性致病菌富集;2)再采用磁珠对致病菌进行快速菌体富集、微波破壁和提取纯化DNA,建立第二重磁珠DNA富集,双富集装置包括可分体的第一盖体、过滤瓶身、弹性腔、第二盖体和第三盖体,第三盖体的内部贯穿安装有破碎装置;3)通过SEA技术对致病菌进行快速鉴别检测,以实现对半固体(发酵乳)样品中致病菌菌株平的快速鉴别;利用双重富集模式替代食源性致病菌快检和现行国标中必不可少的菌株富集培养步骤,可进行半固体样品中致病菌的快速精准检测。
6 稳定表达变异型O抗原的鸡白痢沙菌菌株及其构建方法和应用 CN202311872596.X 2023-12-29 CN117821354A 2024-04-05 张腾飞; 程伊洛; 卢琴; 罗青平; 张文婷; 胡巧; 温国元; 郭云清; 商雨; 汪宏才; 张蓉蓉; 曾哲; 姚伦; 邵华斌
发明公开了稳定表达变异型O抗原的鸡白痢沙菌菌株及其构建方法和应用,通过构建含J23119启动子与SPUL_2404基因的表达质粒,将所述的表达质粒转入鸡白痢沙门菌中,构建的SPUL_2404基因过表达的鸡白痢沙门菌菌株稳定表达变异型O抗原,凝集试验显示,该菌株仅与鸡白痢变异型血清发生典型凝集反应,而不与鸡白痢标准型血清发生典型凝集反应,且传代后所有亚克隆菌落O抗原稳定,只与变异型血清发生典型凝集反应,因此该菌株可用于制备鸡白痢变异型凝集抗原。
7 一种同时检测六十种生物的引物及探针组合及检测方法 CN202311839064.6 2023-12-28 CN117778603A 2024-03-29 陈松林; 郑贤杰; 邹衡; 王旭; 邵文军
发明公开了一种同时检测六十种生物的引物及探针组合及检测方法,本发明的引物为RPA引物,探针为RPA探针,方法为两轮RPA扩增方法;RPA引物序列具体为序列表中所示的上游或下游RPA引物所组成的引物对;RPA探针序列具体为序列表中所示的探针序列。本发明结合RPA等温扩增、多重PCR及巢式PCR扩增技术,根据微生物保守序列设计了大量特异的RPA引物、探针,通过对引物探针的筛选优化,并利用两轮RPA扩增方法,一次反应便可检测六十种微生物;本发明检测灵敏度为10拷贝/反应,可对微生物cfDNA进行有效检测,且具有一定抗gDNA、cfDNA背景干扰和酒精干扰性能。
8 一种检测致病性沙氏菌的LAMP试剂盒及其专用引物 CN202211156082.X 2022-09-22 CN117737264A 2024-03-22 王鹏; 辛俊利; 黄海碧; 赵丽霞; 刘玉梅; 张贵刚; 杜宇荣; 刘建奇; 刘东霞; 张彦婷; 范文霞; 李雪峰; 刘浩; 乔煜婷
发明公开了一种检测致病性沙氏菌的LAMP试剂盒及其专用引物,属于生物检测技术领域。其中提供的检测沙门氏菌的LAMP专用引物包括基于沙门氏菌invA基因设计的六条特异性引物,能够在15‑45min内实现对沙门氏菌的高灵敏度(检测最低限可达0.98pg/μl)和高特异性检测。本发明还提供用于检测沙门氏菌的LAMP试剂盒和检测方法。
9 一种诺氟沙星胶囊的生物限度检测方法 CN202311681975.0 2023-12-08 CN117737183A 2024-03-22 郝高彦; 吴俊芳; 董晓波; 孙慧; 马虹
发明涉及医药技术领域,具体涉及一种诺氟沙星胶囊的生物限度检测方法,包括需菌限度检测,将待测样品按照1g:25‑35mL比例分散于稀释液A中,得到供试液A,再将供试液A和稀释液A按照1:8‑12的体积比混合,得到供试液B;再将供试液B和稀释液B按照1:13‑17的体积比混合,得到待测样品溶液A;待测样品溶液A进行薄膜过滤,用冲洗液冲洗后转移到培养基中进行培养,计数;所述稀释液A为0.04‑0.06mol/L硫酸镁溶液,所述稀释液B为0.18‑0.22mol/L硫酸镁溶液。不仅使试验组回收率、中和剂对照组回收率均满足检测要求(0.5~2),而且能够明显缩短检测时间,提高检测效率。
10 三联检测食品中食源性生物试剂试剂盒及应用 CN202311650383.2 2023-12-05 CN117701743A 2024-03-15 孔继烈; 江玲丽; 徐加利; 俞佳; 刘萌
发明公开了一种三联检测食品中食源性生物试剂试剂盒与方法,属于食源性致病菌基因检测领域,本发明提供一种高效三联检测食品中重要食源性微生物的试剂,以体积比计,所述试剂含有25~35份引物混合液、100~120份超纯、35~40份无镁离子10X Standard Taq Reaction Buffer、5~15份50mM氯化镁、5~15份10mM dNTP预混液、5~15份Taq DNA聚合酶、5~15份20X SYBR Green I。本发明同时提供使用所述试剂盒检测食品中食源性微生物的方法。使用本发明提供的试剂、试剂盒与方法在检测食品中重要食源性微生物时,具有操作简便、快速、灵敏度高且特异性强的特点,可以有效预防和控制食源性疾病
11 鸡白痢、鸡伤寒沙氏菌分子鉴别试剂盒及其非诊断性检测方法 CN202310816309.7 2023-07-05 CN116622871B 2024-03-01 龚建森; 张笛; 盛中伟; 许明; 刘向萍; 朱静; 韩先干; 窦新红
发明公开了一种用于鸡白痢、鸡伤寒沙氏菌分子鉴别试剂盒及其非诊断性检测方法。所述试剂盒包括PCR检测引物、阳性对照、阴性对照和空白对照,所述阳性对照为鸡伤寒沙门氏菌ATCC9184基因组DNA,阴性对照为鸡白痢沙门氏菌ATCC10398基因组DNA,空白对照为灭菌双蒸 ,所 述 引 物 包 括 :F o r :5 ’‑CGTGGAGCGGCATTTATATATACAG‑3’;Rev:5’‑ACTACCGTTGTGGTGATACTCTGCG‑3’。本发明还公开了一种应用所述试剂盒鉴别鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌的PCR方法。本发明方法具有快速、简单、特异性强、灵敏度高的优点,相比传统的鸡白痢、鸡(56)对比文件涂玉蓉 等.基于等位基因特异性PCR原理建立鸡白痢沙门氏菌PCR方法.中国畜牧兽医.2011,第38卷(第5卷),摘要、第93页左栏第1段-第96页左栏第2段.杨玮枫 等.沙门氏菌PEG菌毛研究进展.中国预防兽医学报.2017,第39卷(第4期),第329-332页.
12 一种Bst DNA聚合酶突变体制备方法及其应用 CN202311589165.2 2023-11-27 CN117603940A 2024-02-27 赵力超; 彭铭倩; 魏韬
发明属于酶工程技术领域,具体涉及一种Bst DNA聚合酶突变体制备方法及其应用。本发明对野生型Geobacillus stearothermophilus GIM1.543的Bst DNA聚合酶进行了随机突变,并进行LAMP检测活性筛选,成功筛选得到一种LAMP检测活性高的Bst DNA聚合酶突变体,该突变体是以野生型嗜热脂肪地芽孢杆菌的Bst DNA聚合酶大片段基础进行单点突变所得,即将野生型第313位的基由T突变为A,突变后的Bst DNA聚合酶基因应用于食源性致病菌沙氏菌的LAMP检测,与野生型作比较,其酶活提高了32.92%,与商品酶相比酶活提高了40.93%,大大提高了检测效率,满足快速检测要求。
13 携带幽螺杆菌毒因子的B细胞表位靶标抗原及其表达载体和应用 CN202211587776.9 2022-12-09 CN116375823B 2024-02-23 朱国强; 李雅倩; 刘家奇; 朱晓芳; 朱丛睿; 段强德; 武琥琮; 羊扬; 夏芃芃; 孟霞; 王建业
发明公开了携带幽螺杆菌Hp毒因子CagA和VacA的B细胞表位靶标抗原(TBEA)及其分别在鸡伤寒沙门氏菌SadA类型和YaiU类型的T5SS展呈表达及其检测Hp凝集抗体中的应用。本发明的特异性TBEA分别来自CagA和VacA,分别利用两种类型的T5SS展呈表达。通过间接凝集试验,验证菌体表面能展呈两种TBEAs,两种TBEAs精准识别和结合针对Hp抗体,形成TBEA‑抗体复合物聚合体,肉眼清晰可见,从而实现特异、敏感、快速的Hp凝集抗体检测。本发明能够特异性检测特异性凝集抗体,且该敏感性显著高于基于蛋白质抗原的传统血清学检测技术,且能定量检测特异性凝集抗体效价。
14 一种致病菌多重分子的检测方法 CN202311724440.7 2023-12-15 CN117568498A 2024-02-20 琚存祥; 蔡利东; 田苗苗; 李乃馨; 王馨宇; 杨慧欣
发明公开了一种致病菌多重分子的检测方法,包括S1、实验试剂与材料准备:(1)菌株和样品,金黄色葡萄球菌ATCC6538、炎克雷伯杆菌CMCC46117、绿脓杆菌ATCC27853、肺炎链球菌ATCC49619、鼠伤寒氏沙菌ATCC14028、假结核耶尔森菌CMCC53504、小肠结肠炎耶尔森菌CMCC52204、嗜肺巴斯德菌ATCC35149。该致病菌多重分子的检测方法,成功建立了的金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌的三重荧光定量PCR方法,具有快速、简便、实用等优点,为实验动物条件致病菌的快速检测及群体健康监测提供了一种有效的手段。
15 一种沙氏菌新型核酸检测试剂盒及其非诊断性检测方法 CN202211144851.4 2022-09-20 CN116334255B 2024-01-30 龚建森; 张笛; 盛中伟; 董永毅; 沈海玉; 韩先干; 吴坤; 苗晋锋; 徐步; 窦新红
发明公开了一种沙氏菌新型核酸检测试剂盒及其非诊断性检测方法,所述试剂盒包括反应缓冲液、Bst DNA聚合酶、dNTPs、甜菜石墨纳米管、聚乙二醇甲醚、SYBR Green I、检测引物,所述检测引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。与传统检测试剂盒和方法相比,本发明方法具有简便快捷、特异性强、灵敏度高、重复性好的优点,在检测效率与检测成本方面均明显优于现行国标检测方法,适合于批量检测。
16 氏菌疫苗 CN202280040436.6 2022-04-05 CN117460416A 2024-01-26 德巴布拉塔·比斯瓦斯; 朱正洙; 彭梦飞
提供了经修饰细菌以及使用该经修饰细菌来预防治疗细菌感染的方法。经修饰细菌包含一种或多种基因组修饰,使得细菌的基因组被改变以编码和产生穴蛋白并编码和产生溶菌酶。使用自溶性SE鼠伤寒血清变型(鼠伤寒沙氏菌)形式的肠道沙门氏菌(SE)类型来说明经修饰细菌。
17 一种双重修饰的工程化细菌及其应用 CN202111175321.1 2021-10-09 CN114196604B 2024-01-23 刘尽尧; 王露
和持久地将抗肿瘤药物分散到整个肿瘤。本发明属于生物医药领域,涉及一种双重修饰的工程化细菌及其应用,具体地,该工程化细是外部偶联免疫检查点抑制剂、内部编码酪酸酶基因的工程化细菌,包含该双重修饰的工程化细菌的的药物组合物及其应用。其中,该工程化细菌优选大肠杆菌。利用该工程化细菌,获得在空间和时间上可控的黑色素表达、分布,而且黑色素与抑制剂分布相似,两者结合增强双免疫激活作用,协同重编程肿瘤免疫微环境。该工程化细菌,单独地或组合常规肿瘤治疗方式或药物,能够显著抑制肿瘤生长和延长生存期。包含该细(56)对比文件Chen W.Bacteria-Driven HypoxiaTargeting for Combined Biotherapy andPhotothermal Therapy.ACS Nano.2018,全文.Li Mengmeng.Polydopamine-basednanoplatform for photothermal ablationwith long-term immune activation againstmelanoma and its recurrence.ActaBiomater.2021,全文.程豪.细胞膜包裹槲皮素-聚多巴胺(PDA)的制备及抗菌和抗肿瘤的活性研究.中国优秀硕士学位论文全文数据库.2021,全文.
18 一种混合菌 CN202210791233.2 2022-07-07 CN117402765A 2024-01-16 郑明赞; 郑景伟
发明涉及餐厨垃圾处理技术领域,且公开了一种混合菌,包括以下步骤:步骤一、收集培养物并将其存储在无菌环境;步骤二、将降解菌种放入培养皿并进行混合培养;步骤三、提取的混合菌分成两部分;步骤四、将两份菌种分别加入独立的培养物;步骤五、提取各自环境下繁殖最快菌种进行混配;步骤六、将新菌种重复试验直至形成抗温差性。本发明通过将一号培养皿内培养的降解菌落,提取出一部分,进一步的将降解菌放入餐厨垃圾培养皿内进行观察,另一部分降解菌落,放入餐厨垃圾培养皿内进行观察,查看低温环境下降解菌分解餐厨垃圾的效率,选取出抗性强的实验体,达到了适应高低温环境的有益效果。
19 一种快速检测蛋及蛋制品沙氏菌的方法 CN202311439691.0 2023-11-01 CN117363687A 2024-01-09 张丽平; 吕梦婷; 崔海月
发明公开了一种快速检测蛋及蛋制品沙氏菌的方法,包括以下步骤:S1、无菌操作称取样品置于容器内均质制得混合液,滴加NaOH或HCL使混合液的pH值为6.6~7.0;S2、轻摇并移取S1中所述样品混合物,转种于TTB内培养制得增菌液;S3、取S2中制得的增菌液,划线接种于琼脂平板,培养,观察琼脂平板上生长的菌落,做确证实验。本发明缩短检测时间,检测结果精确;采用XLD琼脂平板和沙门氏菌属显色培养基平板,培养基上典型菌落形态较为单一,菌落特征更加明显,更易于判断。
20 一种减毒沙氏菌分泌表达S2结构域蛋白的新型冠状病毒疫苗递呈系统及其应用 CN202011155286.2 2020-10-26 CN114478715B 2023-12-22 华子春; 吴乐阳; 李霖
发明公开了一种减毒沙氏菌分泌表达S2结构域蛋白的新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)疫苗递呈系统及其应用,用于预防新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)。本发明通过构建可控的、稳定的、分泌表达S2结构域蛋白的表达质粒和对减毒沙门氏菌的工程化改造,可以通过口服途径、在给药后可借助其特有的分泌系统,向抗原呈递细胞高效递送抗原性蛋白。递送的抗原性蛋白可被抗原呈递细胞有效地处理并呈递,最终实现激活/调节免疫系统,产生抗体,发挥疫苗的作用。